赖氨酸 论文

赖氨酸 论文
赖氨酸 论文

南京科技职业学院

毕业设计(论文)

题目赖氨酸的生产工艺概况姓名顾宇天

学号220228

所在系部化工系

专业班级精细1322

指导教师陈腊梅

2016年4月

摘要

赖氨酸是构成蛋白质的基本单位,是组成人体蛋白质的20种氨基酸之一,组成蛋白质分子的氨基酸都是L-氨基酸,但近年内证实了它们可以异构为D-氨基酸,该文章介绍了赖氨酸的发展历史和应用前景,系统介绍了赖氨酸的发展起步,国内外市场的概况。介绍了赖氨酸的生产工艺,并详细介绍了赖氨酸发酵法的工艺

关键词:发酵工艺,发展历史,市场概况

目录

1赖氨酸的概况 (1)

1.1赖氨酸的简介 (1)

1.2赖氨酸的性质 (1)

1.3赖氨酸的营养功能 (2)

1.4赖氨酸的分类 (2)

1.5赖氨酸的国外市场发展概况 (3)

1.5赖氨酸的国内市场发展概况 (4)

1.6未来几年中国需求量预测 (5)

2赖氨酸的生产工艺 (6)

2.1赖氨酸的生产原料及菌种 (6)

2.2赖氨酸发酵工艺控制 (6)

2.3发酵法 (7)

2.4赖氨酸合成途径的调节机制 (8)

2.5赖氨酸生产菌的育种 (8)

2.6培养基 (9)

2.7菌种培养 (9)

2.8发酵工艺条件以及影响因素 (10)

3微生物发酵工艺原理概述 (11)

3.1微生物工业发酵的历史 (11)

3.2微生物发酵工业用菌种 (11)

3.3发酵机制与代谢机制 (12)

参考文献 (13)

致谢 (14)

1赖氨酸的概况

1.1赖氨酸的简介

赖氨酸是构成蛋白质的基本单位,是组成人体蛋白质的20种氨基酸之一。L—赖氨酸是人体必需氨基酸,能促进人体生长发育、增强免疫力和免疫功能,并有显著提高中枢神经组织功能的作用。而且还是是人体内不能合成的八种氨基酸(色氨酸、苯、丙氨酸、赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸等。这八种氨基酸称营养必需氨基酸)之一缺少时会产生蛋白质代谢障碍和机能障碍。而且在人们的主食大米和面粉蛋白质中赖氨酸含量极少。如缺乏则引起蛋白质代谢障碍及功能障碍,导致生长障碍。由于谷物食品中的赖氨酸含量甚低,且在加工过程中易被破坏而缺乏,故称为第一限制性氨基酸。如在小麦面粉中添加0.2肠的赖氨酸,则可使其蛋白质的营养价值从原来的47帕提高到71.1帕。作为食品强化剂赖氨酸的营养强化作用已受人们的极大重视。目前,国内外氨基酸的工业生产中,除谷氨酸外,产量最大的就数L—赖氨酸。

1.2赖氨酸的性质

(1)物理性质

白色或近白色自由流动的结晶性粉末。几乎无臭,263~264℃熔化并分解。通常较稳定,高温度下易结块,稍着色。相对湿度60%以下时稳定,60%以上则生成二水合物。与维生素C和维生素K3共存则着色。碱性条件及直接与还原糖存在下加热则分解。易溶于水(40g/100ml,35℃),水溶液呈中性至微酸性,与磷酸、盐酸、氢氧化钠、离子交换树脂等一起加热,起外消旋作用。

(2)化学性质

赖氨酸相关修饰:其ε-氨基的甲基化是一种通常的翻译后修饰,形成一甲基,二甲基和三甲基赖氨酸。三甲基赖氨酸会发生在钙调蛋白中。另外,赖氨酸残基还能进行乙酰化和泛素化等修饰。胶原蛋白中含有的羟基赖氨酸是由赖氨酸经赖氨酸羟化酶羟基化而来。内质网或高尔基体中,羟基赖氨酸残基的O-糖基化可用来标记特定蛋白从细胞中的分泌。

赖氨酸,也称为L-赖氨酸盐酸盐,是一种必需氨基酸。它是人体所必需的

营养物质,但是身体不能自己产生它。它必须通过日常饮食和营养补品获得。作为一种氨基酸,它是蛋白质必不可少的组成部分。这种营养对于身体适当的成长和发展起到了重要作用。它是肉碱生产的一个重要组成部分。肉碱负责将一些不饱和脂肪酸转化为能量,还有助于降低胆固醇水平。

在身体中赖氨酸还有其他功效。它和其他营养一起形成胶原蛋白。胶原蛋白在结缔组织,骨骼,肌肉,肌腱和关节软骨中扮演了重要角色。此外,赖氨酸也有助于身体吸收钙。

饮食中缺乏赖氨酸的情况是比较常见的。通常情况下吃素的人发生率较高,一些运动员如果没有采取适当的饮食也会出现赖氨酸缺乏的问题。蛋白质摄入量低(如豆类植物,豌豆,小扁豆等)也可能导致赖氨酸摄入量低。

1.3赖氨酸的营养功能

其最重要的生理功能是参与体蛋白的合成,因此与动物生长密切相关。赖氨酸在体内的功能有:参与体蛋白如骨骼肌、酶和多肽激素的合成;是生酮氨基酸之一,当缺乏可利用的碳水化合物时,可参与生成酮体和葡萄糖的代谢(在禁食情

况下,是重要的能量来源之一);维持体内酸碱平衡;作为合成肉毒碱的前体物,参与脂肪代谢;另外,赖氨酸还可以提高机体抵抗应激的能力。

赖氨酸在体内发挥着重要的生理功能,其缺乏将直接或间接影响动物的生长、繁殖和发育。赖氨酸是合成体蛋白不可缺少的成分,在酶蛋白、生殖细胞、骨骼肌及血红蛋白等的形成中具有非常重要的作用,同时也是某些多肽激素的组分之一;赖氨酸参与体内能量代谢过程,是生酮氨基酸之一,当体内缺乏碳水化合物时,可被分解为葡萄糖或酮体来提供能量;赖氨酸也是酯代谢中肉毒碱的前体物质,在脂肪代谢中发挥着重要的生理作用。

1.4赖氨酸的分类

按光学活性分,赖氨酸有L型、左旋、D型、右旋和DL型,(消旋)3种构型。只有L型才能为生物所利用。通常所说的赖氨酸均指L型赖氨酸。L型赖氨酸呈针状晶体,在210℃变暗,在224.5℃下分解,易溶于水,微溶于醇不溶于醚。

1.5赖氨酸的国外市场发展概况

随着人们生活质量的不断提高和食物结构的改变。即儿童要求增智,成年人要求增力,老年人要求增寿,妇女要求增美,加快扩大了赖氨酸应用领域和消耗需求总量。现已成为医药、食品、饲料工业和化妆品等行业的重要原料。国际赖氨酸产业也得到了快速发展。之前,世界赖氨酸市场主要由日本味之素公司、美国ADM公司、德国巴斯夫公司、日本协和发酵公司和韩国希杰公司等控制。近年来,我国的赖氨酸生产企业迅速崛起,在世界竞争中占据了一席之地。国际赖氨酸的消费主要集中在欧美和东南亚等地区。从国际市场来看,目前,欧美地区经济有一定复苏的迹象。其需求的适当好转前期已经带动了赖氨酸销量上升,而且欧洲需求旺盛的基本格局不变,因此欧洲市场价格仍然支持国内赖氨酸强势。据不完全统计,2009年,全球赖氨酸(折合成98.5%、65%含量计)产量见表1、表2

生产厂家国家月产量(吨)

味之素法国6300

ADM美国3900

希杰中国13000

Miscellaneous 全球生化

SA

世元中国

中国

南非

韩国

3000

1000

2500

3000

(1)美国是世界上赖氨酸的消费大国,美国ADM公司是赖氨酸生产最大的厂家。由于赖氨酸需求的持续增长,美国赖氨酸的消费始终保持较高的增长速度。其年平均增长速度常年保持在15%左右。从美国赖氨酸的消费发展历史看,养殖业是推动赖氨酸消费增长的主要推动力。根据赖氨酸的特殊性和大豆种植面积增加的情况。今后养殖业仍将成为推动美国赖氨酸发展的主要因素,特别是随着苏氨酸、色氨酸生产技术水平的不断提高,将使这两种氨基酸在饲料中的应用成为可能性。根据氨基酸的协同效赖氨酸的添加标准将会有一定幅度的提高,因此将推动赖氨酸消费量的增加。

(2)西欧赖氨酸的消费也呈现快速增长的势头,年消费增长速度在5%以上。养猪业始终是赖氨酸的最大消费市场,这与该地区的居民饮食习惯有关。预计今后随着饲养业技术水平的提高、大豆种植面积的增长有限以及动物性蛋白饲料的禁用,赖氨酸的消费将保持5%-8%的年平均增长速度。

(3)日本虽是世界主要赖氨酸生产国,拥有赖氨酸的生产技术,但由于日本的粮食产量有限,饲养业的规模较小,大多数动物蛋白食品是来自国外,因此赖氨酸的消费量有限,年销量不到1万吨,大部分日本产赖氨酸都用于出口。不过日本已在世界其他各地建有多家赖氨酸的合资生产企业。在全球赖氨酸市场上占有很重要的位置。目前由于赖氨酸的生产成本逐年增加。因此日本本土赖氨酸的产量呈下降趋势,但海外工厂却在不断扩大。据悉,可比本土降低生产成本30%-40%

(4)东南亚地区是近些年来经济发展比较快的地区,蛋白质的消费水平也有了大幅度的增长,大大促进了该地区养殖业的发展。在养殖业发展的带动下,饲料及饲料添加剂的消费水平都有较大幅度的提高,目前该地区赖氨酸的年消费量6万吨。该地区将是重要的赖氨酸市场。

1.5赖氨酸的国内市场发展概况

中国的赖氨酸产业起步较晚。1990年,广西赖氨酸厂,现更名为“广西桂元赖氨酸有限公司”赖氨酸盐酸盐生产线投产,这是我国第一家利用国产技术生产千吨级赖氨酸的企业。为了满足国内的市场需求,该企业随后进行了第一次扩产改造。

中国赖氨酸行业最早应用于医药领域,此后随着国内饲料工业的发展而经历了两次飞速发展,尤其是2003年以后的几年间,产品种类得到扩充。赖氨酸产品由单一的赖氨酸盐酸盐(98.5%)占领销售市场,转变为赖氨酸盐酸盐、赖酸硫酸盐、液体赖氨酸产品在市场上均有使用。且65%赖氨酸硫酸盐产品市场份额不断扩大,成为赖氨酸生产企业竞争的热点。

伴随着赖氨酸行业的发展,诞生了一批优质的生产企业,既有成功在港交所上市、现全球最大的赖氨酸生产企业吉林大成集团。也有韩国希杰(CJ)在中国设立的希杰(聊城)生物科技有限公司,而宁夏伊品生物工程有限公司等民营企业也计划在行业内有更大的发展。

2009年来虽然四川川化味之素的彻底停产让本土赖氨酸市场少了一个年产能3.2万吨的生产商,但是随着伊品98.5%及65%赖氨酸的纷纷扩产,国内赖氨酸产能继续膨胀的势头并未明显遏止,截止目前,国内赖氨酸折合成98.5%产能已经接近70万吨,其中大成生化98.5%赖氨酸产能14万吨,65%赖氨酸产能32万吨,按照这样的产能,包括出口在内,只要国内赖氨酸的平均开工率达到60%以上,国内赖氨酸就要面临供应超压、库存增加的尴尬局面,这也是上半年国内赖氨酸企业库存压力很大、价格持续低迷的直接原因。其结果便是到2009年国内实际生产赖氨酸的企业减少到了主要的四家(大成、希杰、丰原、伊品),味之素、正大菱花2009年完全退出竞争。

赖氨酸供大于求的局面短期难以改变。20l0年,大成、希杰等企业仍有扩产计划。希杰集团表示,今后将继续加大赖氨酸事业投资。2013年希杰将具备55万t的产能,达到30%的全球占有率。预计2010年赖氨酸的竞争仍将持续激烈。市场压力进一步增加。

综上所述,2010年上半年赖氨酸的需求疲弱,价格持续低迷,下半年随着养猪业存栏量的不断增加,赖氨酸的需求将稳步上升。但受供应的压力和企业间的激烈竞争影响,上涨幅度有限。

1.6未来几年中国需求量预测

1996年全国混配饲料年产量达5523万t即使按队1%的比例添加,也需赖氨酸5.5万t。到2000年,国内混配饲料产量将达到8000万t若按助60%的饲料添加赖氨酸计届时赖氨酸的需求量约为5.0万t。为加强饲料添加剂的管理,农业部在20世纪90年代后期公布了《允许使用的饲料添加剂品种目录》。其中饲料级氨基酸分类,首推L—赖氨酸及其盐类。中国庞大和不断增长的饲养业将使赖氨酸的市场需求不断扩大。

未来几年,中国食品工业平均年增长速度将在10%左右。同时人们对食品消费的需求越来越高,而作为人体必需的第一限制性氨基酸的赖氨酸,必将更多地应用于食品工业中。据专家预测,赖氨酸在食品工业中的消费量将呈大幅增长的趋势。

医药工业中新用途的不断发现,再加上赖氨酸生产的各种药物的需求量也将越来越多,其消费量也将迅速增加。国内赖氨酸目前需求量估计在8万t年左右。

2赖氨酸的生产工艺

2.1赖氨酸的生产原料及菌种

赖氨酸生产培养基的碳源种类丰富,一般是玉米、山芋等淀粉原料水解后制得,另外也可以以糖蜜作为碳源,碳源浓度不宜过高,否则对菌体生长不利,氨基酸的转化率降低。赖氨酸是二氨基碱性氨基酸,所以在它发酵时,添加的氮源相对于其他氨基酸要多。赖氨酸发酵中常用的氮源是硫酸铵和氯化铵。

赖氨酸生产菌有两大类:一类是细菌,他们多以谷氨酸生产菌为出发菌通过诱变制得,比如谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌和乳糖发酵短杆菌的各种突变株;另一类是酵母菌,如假丝酵母、隐球酵母等。由于酵母菌体内的赖氨酸的生物合成产率要低于细菌类的,因此,目前的赖氨酸发酵生产都是采用细菌为生产菌种。这些赖氨酸生产菌主要为谷氨酸棒杆菌、北京棒杆菌、黄色短杆菌或乳糖发酵短杆菌等谷氨酸生产菌的高丝氨酸营养缺陷型兼AEC抗性突变株。

赖氨酸合成途径与其他氨基酸不同,且依微生物的种类而异。细菌的赖氨酸生物合成途径需天冬氨酸经过反应合成二氨基庚二酸,进而合成赖氨酸;酵母的赖氨酸合成途径需天冬氨酸经过反应合成。—氨基己二酸,再合成赖氨酸。而且不同的细菌中,生物合成调节机制不同。

2.2赖氨酸发酵工艺控制

(1)赖氨酸发酵工艺条件;

控制溶解氧浓度对赖氨酸发酵很重要,供氧不足,将导致乳酸积累,并可能导致赖氨酸生产受到不可逆抑制,该抑制作用和细胞膜透性有关,因为供氧不足使细胞体内的赖氨酸和磷脂含量增加,而发酵液中,赖氨酸含量很低。发酵时,前期温度为32℃,中后期为34℃。pH控制在6.5—7.:,其中最适pH为7.0,可以通过补加尿素或氨水来控制其pH值。

(2)培养基中苏氨酸、蛋氨酸的控制

赖氨酸生产菌都是高丝氨酸缺陷型,苏氨酸和蛋氨酸是赖氨酸生产菌的生长因子,在发酵过程中,如果培养基中两者含量丰富,就会只长菌,而不产或少产赖氨酸,所以在发酵时,将苏氨酸和蛋氨酸控制在亚适量,以提高赖氨酸产量。

(3)发酵中生物素控制

赖氨酸生产菌多由谷氨酸生产菌诱变而来,都是生物素缺陷型,若培养基中限量添加生物素,会导致发酵转向谷氨酸方向,大量积累谷氨酸。如果培养基中添加过量生物素,会使细胞内合成的谷氨酸对谷氨酸脱氢酶发生抑制作用,则抑制谷氨合成,从而积累大量赖氨酸。

2.3发酵法

发酵法是工业生产赖氨酸最重要的方法。其原理是利用微生物的某些营养缺陷型菌株,通过代谢控制发酵,人为地改变和控制微生物的代谢途径来实现L-赖氨酸的生产。目前用于工业发酵生产的菌株主要是棒状杆菌和短杆菌等细菌的各种变异株,其诱变方法是以紫外线、x射线、氮芥和亚硝基酯等为主的处理方法,也有用细胞融合和基因工程等生物工程技术来育种的。主要原料为淀粉、糖蜜。玉米等淀粉类原料需经糖化转化为葡萄糖后才可用,且发酵液配方中需再补充生物素。赖氨酸的生产工艺流程图如下:

代理商科技的来看撒娇的了肯德基几点开始了解到垃圾的大流口水的哈桑来考核圣诞节阿拉山口就对啦跨世纪的卢卡斯深刻的骄傲是理科的骄傲了啥空间的深蓝的时刻都快来是的撒快乐大脚是考虑到就卡死了还撒谎发立刻恢复萨克拉深刻的进口量撒谎的卡拉是困死了打开立方萨克雷锋考虑到挥洒了开放萨克雷锋可杀死了咖啡红树林咖啡壶你傻了弗利萨解放路口就烦死了开了房撒谎发来看萨菲隆开始刷卡缴费哈就分开刷饭卡机挥洒蓝山咖啡回来看是否来看是恢复快来撒会分开萨拉流口水法兰克福和萨拉快发货了声卡舒服了卡萨发货来扩散法看来是弗利萨授课老师分两块三法师来看房哈伦裤是否会恢复了开始发了啥看法哈桑来看房哈萨克了发生了看法时空裂缝哈萨克浪费会拉开发和凯撒浪费和凯撒发货快拉上斯洛伐克楼回复了卡萨恢复了卡萨发货了卡萨很快乐撒发货了卡萨发货快来撒发货撒立刻发货舒服哈萨克雷锋号来看是恢复快来撒会飞洒可浪费和凯撒浪费和萨拉发货撒立刻恢复萨洛克和法律是卡号发来撒客户烦死了啥看法了哈萨克浪费撒谎发来撒开发和萨拉克服和酸辣粉和萨芬罚款了发货快萨拉话费卡萨来恢复快来撒发货快睡啦发货是否会看看了首付款拉萨凤凰山卡拉恢复了声卡首付款律师费和斯科拉法哈萨克浪费哈萨克六氟化硫撒可富哈萨克来恢复萨克雷锋哈萨克浪费哈萨克了发货快撒浪嘿付款了首付款了首付款拉萨付款了萨芬和克里斯发号施令开发和开发商看来是来看撒谎快来撒收款方卡萨后付款了是否快来撒会饭卡里是否好卡斯洛伐克三分花费少发货快拉上发来看是否卢卡斯发货撒开立方会大会的考拉速度快了撒娇的考拉三季度克里斯几点开始圣诞节考四六级的考拉姐打开了三季度倒计时啦空间都开啦时间到了萨克的骄傲了速度快解散的教科书里绝对是考虑到就撒了肯德基单机哈市的拉萨快到家了卡上就对啦跨世纪的拉伸机抵抗力撒娇的理科三圣诞节快拉四季度卡拉斯建档立卡涉及到了深刻的健康了坚实的拉克丝到家了卡三季度拉克是件大事大街上可垃圾的卢卡斯加都开啦涉及到萨洛克几点开始来得及拉斯科技大楼上空间都洒了肯德基圣诞节案例看时间段里萨科技大萨洛克

2.4赖氨酸合成途径的调节机制

(1)谷氨酸优先合成,谷氨酸合成过剩就会抑制谷氨酸脱氢酶(GD)的活性,使得生物合成的代谢流转向天门冬氨酸。天门冬氨酸的过剩也会抑制磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的活性,使得天门冬氨酸不致大量积累。

(2)赖氨酸的前体物质天门冬氨酸与乙酰辅酶A的生成形成平衡合成,乙酰辅酶A的增加能逆转天门冬氨酸对其自身合成的反馈抑制。

(3)天门冬氨酸激酶(AK)受赖氨酸与苏氨酸的协同反馈。AK是一个变构酶,催化天门冬氨酸和ATP形成α-天门冬氨酸磷酸,有两个变构位置可以接受末端产物。AK受赖氨酸与苏氨酸的协同抑制,当只有赖氨酸或苏氨酸与变构位置结合时,酶活影响不大,当赖氨酸与苏氨酸同时结合到两个变构位置时,酶活受到强烈的抑制。此外,AK是赖氨酸合成途径中唯一的反馈调节点。

(4)赖氨酸亮氨酸的生物合成之间存在着代谢互锁,赖氨酸分支途径的初始酶二氢吡啶二羧酸合成酶为亮氨酸所阻遏。

(5)蛋氨酸比苏氨酸优先合成,蛋氨酸合成的过剩就会阻遏高丝氨酸-O-转乙酰酶,使得生物合成的代谢流转向苏氨酸。苏氨酸比赖氨酸优先合成,苏氨酸的过剩会反馈抑制高丝氨酸脱羧酶的活性,使得生物合成转向赖氨酸。

2.5赖氨酸生产菌的育种

出发菌株:黄色短杆菌、谷氨酸棒杆菌、乳糖发酵短杆菌、嗜醋酸棒杆菌育种思路:

(1)优先合成的转换——渗漏缺陷型的选育;

(2)切断支路代谢——营养缺陷型的选育:高丝氨酸缺陷型;

(3)选育温度敏感突变株;

(4)解除代谢互锁:选育亮氨酸缺陷(Leu-)突变株、选育抗亮氨酸结构类似物(AECr)突变株、选育苯醌或喹啉衍生物敏感突变株,此外还可以选择萘乙酸(NAA)缺陷突变株;

(5)增加前体物的合成和阻塞副产物的生成:选育Ala-突变株、选育抗天冬氨酸结果类似物突变株、选育适宜的CO2固定酶/TCA循环酶活性比突变株

(6)改善细胞膜通透性。

(7)选育脲酶(Urase)回复突变株;

(8)利用基因工程技术构建赖氨酸工程菌株。

2.6培养基

(1)碳源:淀粉、麦芽糖、蔗糖和葡萄糖。赖氨酸产生菌均不能利用淀粉,只能利用葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。

(2)氮源:氮源可分为无机氮源和有机氮源。赖氨酸发酵中,二者均有使用。

(3)无机盐磷盐(磷酸氢二钾)、硫酸镁、钾盐(氯化钾或氢氧化钾)、钙盐(碳酸钙或氯化钙)

(4)生长因子:生物素含量在30μg/L以上较好、维生素B1即硫胺素盐酸盐能增加赖氨酸产量,L-苏氨酸在培养基中含量高能够产生反馈抑制,使代

谢流向赖氨酸的合成。

2.7菌种培养

(1)斜面菌种,一般用肉汤培养基或蛋白胨培养基;肉汤培养基:牛肉膏1%,蛋白胨1%,酵母膏0.5%,氯化钠0.5%,琼脂2%,pH7.0。蛋白胨培养基:蛋白胨1%,酵母膏1%,氯化钠0.5%,pH7.2。

⑵一级种子培养基(摇瓶种子培养基):牛肉膏1%,蛋白胨1%,酵

母膏0.5%,氯化钠0.5%,pH7.0。b含葡萄糖的肉汤培养基葡萄糖2%,蛋白胨1%,牛肉膏0.5%,氯化钠0.25%,pH7.0。

(3)二级种子培养基、三级种子培养基以及发酵培养基:糖蜜2.0%、豆粉水解液0.5%、硫酸铵0.4%、碳酸钙0.5%、磷酸氢二钾0.1%、硫酸镁0.04%、pH7.2

2.8发酵工艺条件以及影响因素

(1)温度:前期32℃,后期30℃

(2)ph值:pH的变化对赖氨酸的发酵影响很大,当pH7.0时产酸最高,pH偏高或偏低,产酸均降低。最适ph值6.5-7.0,控制范围在ph值 6.5-7.5之间

(3)供氧:过高、过低的溶氧对发酵均不利,表现为菌体浓度下降、产酸降低,发酵时间延长。供氧需充足,否则生成乳酸。

(4)生物素:过量可以促进赖氨酸的生成、促进天冬氨酸生成、抑制谷氨酸生成

(5)硫酸铵:含量大时菌体迅速生长,但赖氨酸的产量低,硫酸铵用

量4.0%-4.5%

(6)初糖浓度11%~15%,转化率最高

(7)提取工艺

发酵液→调节pH,加入絮凝剂→上清液→菌体→水洗→上清液→菌体→离子交换→真空浓缩→冷却、调等电点→结晶→离心分离→粗结晶→母液→重结晶→离心分离→二次母液→结晶→干燥→成品

从发酵液中提取赖氨酸通常有四种方法:①沉淀法,使赖氨酸生成难溶性盐(如苦味酸盐)而沉淀,或使赖氨酸结晶析出;②有机溶剂抽提法;③离子交换树脂吸附法;④电渗折法。

3微生物发酵工艺原理概述

3.1微生物工业发酵的历史

微生物发酵有着悠久的历史,几千年前的酿造实质上就是一个典型的微生物发酵过程,近几十年的来微生物发酵不但在应用领域上更加广泛,更重要的是建立了许多新的微生物发酵理论体系,诸如:代谢控制发酵、基因工程菌发酵等……微生物发酵的发展可以分为以下几个阶段:

(1)自然发酵阶段

传统的酿造业,目前在国民经济和人民生活中仍然占有重要的地位。

(2)纯培养阶段

这一阶段是微生物发酵工业从自然发酵发展到今天的代谢控制发酵的转折点,由于微生物纯培养技术的建立和发展,大大推动了发酵过程的控制,提高了发酵生产效率,更重要的是推动了微生物学科的发展,使人们从简单的发酵现象中发现了微生物的存在,进而对微生物有了进一步的认识和了解;在此基础上发展起来的菌种的分离、无菌技术、纯培养技术、菌种诱变等为后来的微生物发展奠定了基础。

3.2微生物发酵工业用菌种

微生物发酵工业用菌种因不同的发酵对其要求各异,就是同一种产品的发酵生产,其菌种的特点和要求因不同的原料和生产设备的不同也有很大差异,例如:GA的发酵:

作为工业微生物发酵使用的菌种,通常有下列特点:

(1)具有稳定的遗传学特性

(2)对于工业化生产是很重要的,通常工业化生产整个周期很长,在一个发周期中,菌体至少应该增殖一次,在增殖过程中,菌体应该保证原菌的遗传学特征,(尽管菌体生长的环境改变了,压力、基质、溶氧等)

(3)微生物生长和产物的合成对于基质没有严格的要求换言之,可以广泛的使用各种原料作为生产用的底物,某些微生物对于底物有着严格的要求,对于碳源要求单一,这对于微生物的发酵工业提出了严格的要求,增加了生产成本。

(4)生长条件易于满足在微生物的工业化生产过程中,某些环境条件很难实现。氧的传递和供给就是一个很难完全满足的条件,特别是对于高粘度、高浓度的发酵体系。对于微生物的生长往往存在一个“临界溶氧浓度”,低于这个溶氧浓度,氧就成了微生物生长的限制性因子,这个溶氧浓度越高,说明菌体生长条件越易满足,从另一种意义上讲,工业化的生产成本就越低。pH值:中性偏酸性,偏碱性,强烈的pH值易改变产物和底物的状态。

(5)对于细菌,希望具有抗Phage的能力。

(6)具有较高的各种酶活力,可以在一定的范围内提高生长速率和反应速度,进而可以缩短发酵周期,降低生产成本。

(7)对于胞外产品,细胞膜具有良好的渗透性,或者细胞膜的渗透性可以调节,细胞不易发生菌体自溶。对于胞内产品,要求菌体易分离和收集,菌体易破碎;对于基因工程菌,通常目的产物存在于包含体内,对于包含体,要求在细胞破碎是不易破碎,而在目的产物的分离提出时,则易破碎。

3.3发酵机制与代谢机制

微生物的代谢产物很多,主要有乙醇、丙酮、乳酸、氨基酸、酶制剂、抗生素等,在这些产物中,乙醇、丙酮、乳酸等,微生物可以在特定的外部环境下生成,这类发酵我们称之为:自然发酵。

氨基酸、酶制剂等,正常的微生物是不能在培养基中大量的合成与积累,是需要通过:化学的、物理的、生物的等方法人为的改变其原来的代谢途径,使之能够分泌并积累特定的产物,这类发酵称之为:代谢控制发酵。

参考文献

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2012,10(02):73-78.

致谢

三年前,作为一个刚刚步入大学这个小社会的学生,我和我的同学们相聚南化。三年后,我们整理行装,奔赴远方。从初识到离别,不变的是一张张那熟悉的笑脸,变化的是从一路走来的心情。此刻心情会怎样?得意?满足?惋惜?遗憾?不舍?摸着自己的胸口,我想每个人都应该有自己的答案。大学三年,是我们人生中一段闪亮的日子,它也是生命中最真实的三年。因为这是我们第一次独自生活,独立选择。三年中,我们有过喜悦,感动,挫折,迷惘,因为我们在慢慢的长大,我们的知识也更加的渊博,思想更深刻,心灵愈加的丰厚。三年的学习生活,我们感谢南化。在学校的路上三两步便可遇见一个熟悉脸庞让我有了种大家庭般的浓浓暖意。从学生工作到社团活动,只要用心去观察都能够深刻体会到学校的领导和老师们竭尽所能的为我们努力创造一个更加舒适学习和生活环境。大学三年,我们感谢同学。我们来自五湖四海,又要走向四面八方去。来到南京,我们远离亲人,走进南化,我们多了更多的姐妹兄弟。是你母校,与我在自习室里切磋问题;是你母校,与我在绿茵场上击掌高歌、相拥而泣;是老师的鼓励让我克服胆怯,是老师的批评让我学会自省。是同学在孤独迷惘时给了我最真实的信心和力量。是同学与我共同经历了求职的痛苦后挺一挺腰杆还保持自信。毕业之际,如果还有误会让我们忘却,时间早已酿好了一杯浓郁的酒,我们一同饮下,酒中只留下惜别之情。相聚聚是一团火,离散作满天星。背上背囊,让我们一起笑对分离。校园只是我们生命中的一个驿站,承载的只是大学时候的求知路。我相信,改变的只是路边的风景,不变的是一颗真诚的心和努力拼搏的热情。“朝气蓬勃,实事求是”,无论是继续深造,还是走向社会,这句校训我们将铭刻在心,它告诉我们永远不要丧失年轻人的蓬勃力量,一颗追求梦想的心,但同时又要保持务实的态度,谦虚的精神和聪明的头脑,向社会学习,向生活学习。青春作证,我相信我们的未来会更加精彩,我们要用自己的实际行动为母校增光,让母校以我们为傲。

感谢这一路来指导老师幸苦的教导,感谢学校给我的学习机会,感谢老师和学校的栽培。

最后真诚祝愿我们的母校日新月异,我们的师长工作顺利,我们的同学一路顺风,明天更好!

pH值对赖氨酸保护作用影响的研究

pH值对赖氨酸保护作用影响的研究1 贺洪1、2,刘慧敏2,朱泽瑞2,印大中2 1 湖南师范大学体育学院,湖南长沙(410012) 2 湖南师范大学生命科学学院,湖南长沙(410081) 摘要:用紫外吸收研究力竭运动后大鼠血清中赖氨酸(lysine)对丙二醛(MDA)的清除。通过试管反应发现,在适宜的浓度和pH值下,赖氨酸能与MDA结合形成类似尿液的成分;乳酸升高所营造的微酸性环境能促使这一反应的进行。提示:剧烈运动前后适时适量饮用赖氨酸能抵抗氧应激代谢产物的生物毒性作用,保护机体免受伤害。 关键词:赖氨酸,丙二醛,运动保护 脂质过氧化中间产物MDA、HNE(4-羟基壬烯醛)等不饱和醛酮具有生物活性,能与含氮生物分子发生交联,使动物组织硬化,造成伤害[1-6]。所以MDA的代谢途径早就成为科学家们研究的热点。在小鼠和人类的尿液中寻找MDA的分泌物,发现MDA在尿液中主要是以与赖氨酸结合的两种物质的形式—N-ε-2-丙烯醛赖氨酸和N-α-乙酰酯存在[7]。这就表明在体内MDA主要是作用于蛋白质中的赖氨酸残基。本文采用体外试管实验考察赖氨酸和MDA的反应产物以及pH值对反应速率的影响。 1. 材料和方法 1.1 试剂 ≧;盐酸赖超纯水,由Milli-Q系统纯化(Millipore China Limited), 电导率18.2M?.cm 氨酸购于长沙瑞晶生物经营部;TMP购于sigma公司;其他均为常规试剂。 1.2 试剂的配制 1.2.1 磷酸缓冲液(PBS)取0.2 mol/L Na2HPO4.12H2O和0.2 mol/L NaH2PO4.2H2O1配制pH7.4、7.2、7.0、6.8的PBS缓冲液。 1.2.2 16 mmol/L赖氨酸称取四份赖氨酸0.2952 g,于少量超纯水中溶解,用6 mol/L NaOH 调节pH值至7.4、7.2、7.0、6.8。以相应pH值的PBS溶液定容至100 ml。 1.2.3 1 mmol/L MDA[8]用四个50 mL容量瓶分别加1 mol /L HCl 2 mL,再加0.00845 mL TMP,于40℃水浴溶解,精确计时2.5 min后取出,分别用6 mol/L的NaOH调pH至7.4、7.2、7.0、6.8。最后用相应pH值的PBS溶液定容至50 mL。 1.3 仪器设备 PT电动跑台(浙江省杭州立泰科技有限公司);Lambda Bio45紫外分光光度仪(美国Perkin Elmer公司);D-37520型高速冷冻离心机(德国Heraeus Biofuge公司);Molli-Q Academic A 10超纯水系统(Millipore China Limited);Mettler Toledo A E200分析天平(上海梅特勒—托利多有限公司)。 1.4 MDA和赖氨酸的试管反应 1.4.1测定赖氨酸、MDA、力竭大鼠尿液和赖氨酸与MDA反应产物的紫外吸收光谱图将1 mmol/L的赖氨酸、0.01 mmol/L的MDA、即刻取得的力竭大鼠的尿液、16 mmol/L的赖氨1本课题得到湖南师范大学体育学院课题经费资助(课题号:JS0603)

氨基酸含量测定

茚三酮比色测定氨基酸含量 一、实验原理 氨基酸在碱性溶液中能与茚三酮作用,生成蓝紫色或黄色化合物(除脯氨酸外均有此反应),可用吸光光度法测定。生成的蓝紫色或黄色化合物颜色深浅与氨基酸含量成正比,其最大吸收波长分别为570nm或350nm,故据此可以测定样品中氨基酸含量。 二、实验试剂 (1)1.2%茚三酮溶液:称取茚三酮1g于盛有35mL热水的烧杯中使其溶解,加入40mg氯化亚锡(SnCl2?H2O),搅拌过滤(作防腐剂)。滤液置冷暗处过夜,加水至50mL,摇匀备用。 (2)pH 8.04磷酸缓冲液: Ⅰ、准确称取磷酸二氢钾(KH2PO4)4.5350g于烧杯中,用少量蒸馏水溶解后,定量转入500mL容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀备用。 Ⅱ、准确称取磷酸氢二钠(Na2HPO4)11.9380g于烧杯中,用少量蒸馏水溶解后,定量转入500mL容量瓶中,用水稀释到标线,摇匀备用。 Ⅲ、取上述配好的磷酸二氢钾溶液10.0mL与190mL磷酸氢二钠溶液混合均匀即为pH8.04的磷酸缓冲溶液。 (3)氨基酸标准溶液:准确称取干燥的氨基酸(如异亮氨酸)0.2000g于烧杯中,先用少量水溶解后,定量转入100mL容量瓶中,用水稀释到标线,摇匀,准确吸取此液10.0mL于100mL容量瓶中,加水到标线,摇匀,此为200μg/mL 氨基酸标准溶液。 三、实验方法及步骤 (1)标准曲线绘制 准确吸取200μg/mL的氨基酸标准溶液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL (相当于0、100、200、300、400、500、600μg 氨基酸),分别置于25mL 容量瓶或比色管中,各加水补充至容积为 4.0mL,然后加入茚三酮溶液(20g/L)和磷酸盐缓冲溶液(pH为8.04)各1mL,混合均匀,于90℃水浴上加热至显色恒定为止(该加热过程至少需要25分钟),取出迅速冷至室温,加水至标线,摇匀。静置15min后,若生成蓝紫色化合物,在570nm波长下,以试剂空白为

浅析非病毒载体基因转移技术的现状和展望

浅析非病毒载体基因转移技术的现状和展望 摘要:目前基因治疗已经成为科学家治疗多种难治性疾病的一种新手段,基因导入技术是基因治疗的核心也是最基本的技术。目前研究较多的基因导入技术共分为两大类:一,病毒载体基因导入法;二,非病毒载体基因导入法。前者转染效率高,但存在安全性和免疫原性等问题。因此,近年来人们对非病毒类载体系统给予了更多的关注。 关键词:非病毒载体基因转移技术现状和展望 非病毒载体基因转移方法又分为物理方法和化学方法。物理方法如:注射法、基因枪法、电穿孔法、超声波法等都是借助物理力量穿透细胞膜达到基因转移的目的;化学方法则是借助天然的或者人工合成的化合物辅助完成基因转移。尽管近年来在非病毒基因转移领域中取得了显著成效,但总体而言,非病毒载体相对于病毒载体来说转移基因的效率要低,在体内的基因转移尤其如此。现在把目前较常用的非病毒载体基因转移方法的优势和局限综述如下。 1 物理方法 就是基于物理力量造成细胞膜的瞬间缺损,从而使质粒DNA进入细胞内的方法。如基因枪法、电穿孔法、超声波法等,还有近年来发现的激光相关辅助方法。 注射法 直接将质粒DNA注射入组织细胞中达到基因转移的目的。有学者成功地将裸露的质粒DNA注射入肌肉、肝脏、皮肤等组织,但基因表达水平较低。注射法中,细胞表面的某些受体起了一定的作用,它们能够特异或者非特异性地结合DNA并且介导DNA的内吞,但这些受体的详细作用机制不甚清楚。由于注射法有其独特优点如:方法简单,不需特殊试剂且毒性低而受到欢迎。此外,借助显微操作系统进行的显微注射法是目前国际上公认的制备转基因和基因剔除动物模 型的首选。 基因枪法 基因枪法是一种全新的基因导入技术,它以压缩气体(氦或氮)转换成的气体冲击波为动力,把附着于高速微弹上的DNA直接射入细胞、组织和细胞器,基因枪导入的基因被证明可在广泛类型的细胞中得到瞬时的、高效率的表达。基因枪法是皮肤、黏膜以及手术局部暴露组织较理想的基因转移方法,因而基因枪被认为是将来DNA疫苗的良好免疫工具。但是基因枪法用于基因治疗还需要进一步改进,如通过对微弹颗粒表面结构的改良使其可以结合更多的DNA或者使结合

谷物种子蛋白质中赖氨酸含量的测定

谷物种子蛋白质中赖氨酸含量的测定 一、实验目的 掌握茚三酮比色法测定氨基酸含量的原理和方法,测定谷物种子蛋白质中赖氨酸含量。 二、实验原理 蛋白质中的赖氨酸具有一个游离的ε-NH2,它与茚三酮试剂反应生成蓝紫色物质,其颜色的深浅在一定范围内与赖氨酸的含量成线性关系。因此,用已知浓度的游离氨基酸制作标准曲线,通过比色分析(530nm)即可测定出样品中的赖氨酸含量。 亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目相同,而且仅有—个游离氨基(ε-NH2),所以通常用亮氨酸配制标准液。但由于这两种氨基酸分子质量不同,以亮氨酸为标准计算赖氨酸含量时,应乘以校正系数1.1515,最后再减去样品中游离氨基酸含量。 三、实验仪器 1.电子分析天平(1/1000)、可见分光光度计、恒温水浴箱、干燥器、移液器。 2.试管架(塑及铝)、具塞试管、具塞三角瓶、细口瓶、漏斗(或0.45um滤膜)、吸管等。 四、实验试剂 1.0.4mol/L柠檬酸缓冲液:称取4.202g柠檬酸和5.88g柠檬酸三钠,溶于100ml蒸馏水中。 2.茚三酮试剂:称40mg二氯化锡(防腐)溶于25ml柠檬酸缓冲液中;称lg 茚三酮溶于25ml 95%乙醇中;将上述两液混合摇匀,滤去沉淀,上清液置冰箱中保存备用。 3.0.02mol/L盐酸:取12mol/L盐酸0.17ml,用蒸馏水稀释定容至100ml。4.亮氨酸标准液:准确称取20mg亮氨酸,加数滴0.02mol/L盐酸使之溶解,然后用蒸馏水稀释定容到100ml,则得浓度为200μg/ml的标准液。5.60%乙醇。 6.4%碳酸钠:称取4g无水碳酸钠,溶于100 ml蒸馏水。 7.2%碳酸钠。

盐酸赖氨酸精制工艺规程(08)

某制药有限公司 类别:技术标准编号:SP-MF-002-501-01 盐酸赖氨酸精制生产工艺规程版次:?新订?替代: 起草部门:年月日 生产部审核:年月日 技术部审核:年月日 质量部审核:年月日授权:现授权下列部门拥有并执行本标准(复印份) 部门: 批准人: 年月日 生效日期:年月日

目录 1.产品概述 2. 生产操作要求 3.生产处方、处方依据及操作要点 4.原辅料质量标准、技术参数、贮存注意事项 5.生产操作过程 6. 盐酸赖氨酸质量控制要点及成品、中间体质量标准及贮存注意事项 7.设备一览表及主要设备生产能力 8.技术经济指标的计算、消耗定额和经济指标 9.技术安全、劳动保护及防火 10.工艺卫生 11.劳动组织与岗位定员 12.培训

1.产品概述 通用名称:盐酸赖氨酸 英文名称:Lysine Hydrochloride 汉语拼音: Yansuan Laiansuan 化学名称:L-2,6-二氨基己酸盐酸盐。 结构式: H2 , HCl 分子式:C6H14 N2O2·HCl 分子量:182.65

2.生产操作要求 2.1 盐酸赖氨酸生产工艺流程图及工艺监控点 盐酸赖氨酸精制生产工艺规程

2.2生产区域洁净级别划分 图例: 非无菌万级区 无菌万级区 ※ 局部百级区

2.3操作间的位置、洁净度洁别、温湿度要求 3.生产处方 盐酸赖氨酸50Kg 注射用水62.5 Kg 乙醇250 Kg 药用炭0.156 Kg 4、盐酸赖氨酸精制生产工艺过程 4.1盐酸赖氨酸的配滤 4.1.1根据生产指令领盐酸赖氨酸(非无菌粉)、乙醇、活性炭。 4.1.2检查反应罐是否洁净,搅拌、温度计工作是否正常,罐底阀门是否关闭严密,加热供应系统是否正常。 4.1.3按配滤指令打开反应罐加料口,将盐酸赖氨酸、注射用水按重量比为1:1.25加入反应罐,预留5-10kg注射用水。 4.1.4开启反应罐搅拌器,搅拌速度控制为40-50转/min。 4.1.5打开反应罐蒸汽阀,开始加热,溶解控温70±2℃,搅拌60分钟。 4.1.6用预留的5-10kg注射用水,将活性炭润湿,再加入反应罐,搅拌脱色30min。 4.1.7待结晶岗位通知准备好,配滤岗位再关闭反应罐蒸汽阀、搅拌器,趁热

年产10万吨赖氨酸项目

目录 一、项目名称及提出背景 二、市场初步预测分析 三、产品方案和生产规模 四、工艺技术初步方案 五、原材料、燃料和动力供应 六、建厂条件和厂址初步方案 七、公用工程和辅助设施初步方案 八、环境保护 九、工厂组织机构及定员 十、总估算投资与资金筹措 十一、财务评价 十二、结论

一、项目名称及提出背景 1.1 项目概况、 1.1.1 项目名称:年产10万吨赖氨酸项目 1.1.2 项目建设地点:省新民经济开发区 省新民经济开发区始建于1992年7月,2006年5月被国务院批准为省级开发区,享有省级开发区政策。位于新民母城东侧,规划面积为23平方公里。地处中部城市群,距省城50公里,被国道102线、304线、阜高速公路、环高速公路、山铁路所环抱,交通便捷。 开发区基础设施配套齐全,达到“五通一平”。到目前为止,进区企业24家,占地1.65KM2,建筑面积31.9万平方米,年产值3亿元,年利税2080万元。 目前开发区以金新林浆纸城、医药工业园、农副产品深加工园、塑胶产业园和物流中心为主要框架,蓄势而发,形成开发区工业体系。项目进区的承载能力不断提高,并对项目实行全程服务。 1.1.3项目建设年限:3年 1.1.4项目投资: 项目总投资73,500万元,其中固定资产投资63,000万

元,流动资金10,500万元。 资金来源:本项目资金全部由招商引资解决。 1.1.5经济效益: 项目建成后,年销售收入:190,000万元。 税后利润:17.273万元。税金:9.286万元。 1.2项目提出背景和依据 新民市位于的中部,地势平坦,土地肥沃,气候干湿交替,是种玉米的理想地区。亩产都在500公斤以上,是我国重点玉米产区之一。全市玉米种植面积110万亩,以梁山镇为中心周边十几个乡镇,产量每年都在5亿多公斤,新民市及周边县市区玉米常年产量225万吨。 为了把优势资源发展成优势产业,带动农业和农村经济发展,新民市政府经周密研究,反复论证,提出发展玉米深加工产业和总体构想,并提出从玉米初加工到深加工的一系列产业化项目,项目瞄准国际国市场,高起点,高技术含量,大规模,全方位切入玉米深加工领域,以优势资源、良好政策和投资环境吸引资金、人才、技术在玉米深加工领域发展。本项目是玉米深加工项目,该项目实施后,使淀粉项目成为中

浅谈细菌

1、XLD培养基的中文名称是什么?有何作用? XLD是木糖-赖氨酸-去氧胆酸盐。根据木糖发酵,赖氨酸脱羧作用及产生硫化氢,由非致病性细菌中初步鉴别沙门志贺菌。 2、本细菌室中常用的细菌培养基各有何作用? BA(血板):普通细菌培养基,营养高,一般细菌均可生长。 CA(麦康凯平板):含有V因子和X因子,含有万古霉素,属于选择性培养基,只生长革兰阴性菌、奈瑟菌。 MAC(巧克力平板):用于筛选革兰阴性杆菌,含有胆盐,能抑制革兰阳性菌的生长。 SA(真菌平板):含氯霉素抑制细菌生长,用于筛选念珠菌及其他酵母菌。 XLD(木糖-赖氨酸-去氧胆酸盐培养基):用于鉴别粪便中的沙门菌和志贺菌。 淋球菌板:用于淋球菌生长,含万古霉素抑制其它菌生长。 M-H琼脂平板:含水解酪蛋白,用于药敏试验。 营养琼脂平板:用于院内检测。 3、厌氧瓶培养的都是厌氧菌吗? 不是。厌氧瓶可以增加杨杆菌科细菌和葡萄球菌等兼性厌氧菌的检出率,以辅助需氧菌,以提高阳性率。 4、在做血液培养时,为什么需氧和厌氧要同时进行? 因为这样 5、常见有a溶血的细菌有哪些?β溶血的有哪些?

α溶:草绿色链球菌、肺炎链球菌、肠球菌 Β溶:金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、部分大肠杆菌、A群链球菌、B群链球菌 6、呼吸道标本有致病菌的处理方法。 (1)量多大于三种以上细菌,不予处理,报“正常菌群生长” (2)三种以内的细菌,处理优势菌 (3)标本合格,量少,只一区生长,可报正常菌群生长 7、留取菌种时菌种管里的主要成分有哪些?有何作用? 甘油和胰蛋白。甘油防冻,胰蛋白提供细菌的营养。 8、麦康凯上为什么不长G+菌? 因为平板中含有胆盐,G+菌没有G-菌耐胆盐的能力强而受抑制。 9、抗酸染色为什么要加热? 抗酸杆菌胞壁中含有大量脂质,加热后脂肪溶解,细菌更易着色。 10、细菌室,对于接种的标本为什么要放在含7%CO2的培养箱中?细菌一般在pH值为7.2-7.6的培养基中,放在含有CO2的培养箱中,是利用CO2形成一个酸碱缓冲环境,使细菌的pH保持稳定,有利于细菌的生长。 11、为什么链球菌的手工药敏要用血平板而且放在二氧化碳温箱中培养? 因为链球菌是苛养菌,对生长环境条件要求高,只有在血平板上才长,而且放在二氧化碳温箱中能给链球菌提供更适合它们生长的环境。

L-赖氨酸的生产工艺研究

L-赖氨酸的发酵生产工艺研究 摘要: L-赖氨酸是人体和动物所不能合成的八种必需氨基酸中最重要的一种。L-赖氨酸是国际市场上发展前景良好的产品,消费需求每年以7-10%的速度递增,国内年产量则以每年20-30%以上的速度递增。其广泛应用于医药、食品和饲料等领域。目前生产赖氨酸最主要的方法是微生物发酵法。本文从赖氨酸的生产现状、生产方法,发酵过程中的代谢调控以及赖氨酸生产菌种的选育和生产赖氨酸的前景展望这几个方面综述了赖氨酸生产工艺。 关键词: 赖氨酸;发酵;菌种;展望 前言 赖氨酸(Lysine) 的化学名称为2,6-二氨基己酸,有L-型(左旋)、D-型(右旋)和DL 型(消旋)三种旋学异构体。赖氨酸是人和动物营养的必需氨基酸之一,不能参加转氨作用[1]。人类和动物可吸收利用的只有L型。它对调节体内代谢平衡、提高体内对谷类蛋白质的吸收、改善人类膳食营养和动物营养、促进生长发育均有重要作用。L-赖氨酸主要用于医药、食品和饲料工业。全球约9 0%的赖氨酸用作饲料添加剂,约5%用作食品添加剂,其余5%用作医药中间体[2]。目前,全球赖氨酸年总需求量约为85万t/a,年增长率为7%一8%。现全球赖氨酸总产能约为80万t/a,产量较大的是日本味之素公司(26万t/a)、美国ADM公司、BASF韩国公司和协和发酵工业公司等。国内赖氨酸需求量估计在13万t/a左右。赖氨酸应用范围较广,2003年以后,我国已成为全球最大的赖氨酸生产大国。目前已建成和正在建设的赖氨酸厂主要有广西赖氨酸公司、福建大泉赖氨酸有限公司、四川川化味之素有限公司、大成赖氨酸厂、肇东赖氨酸厂等。文章从赖氨酸的生产现状、生产方法,发酵过程中的代谢调控以及赖氨酸生产菌种的选育和生产赖氨酸的前景展望等方面论述了赖氨酸生产工艺的研究进展。 1赖氨酸生产现状 L-赖氨酸最初是从蛋白质水解物中分离得到的,蛋白质水解法一般以动物血粉为原料,此法最多的特点是工艺流程简单,但是原料来源很有限,仅适合小规模生产。此后又出现了化学合成法、水解法,酶法。直到1960年,日本首先采用微生物发酵法生产赖氨酸。微生物发酵生产氨基酸是人为地解除氨基酸生物合成的代谢控制机制,使其积累大量所需氨基酸。氨基酸的L-型立体专一性决定了发

《氨基酸测定》

《氨基酸测定》 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用氨基酸自动分析仪测定食物中氨基酸的方法。 本标准适用于食物中的天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸等十六种氨基酸的测定。其最低检出限为10pmol。 本标准不适用于蛋白质含量低的水果、蔬菜、饮料和淀粉类食物的氨基酸测定。 2 原理 食物蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸,经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后,与茚三酮溶液产生颜色反应,再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。 3 试剂 全部试剂除注明外均为分析纯,实验用水为去离子水。 3.1 浓盐酸:优级纯。 3.2 6mol/L盐酸∶浓盐酸(3.1)与水1∶1混合而成。 3.3 苯酚:须重蒸馏。 3.4 混合氨基酸标准液(仪器制造公司出售):0.00250mol/L。 3.5 缓冲液 3.5.1 pH2.2的柠檬酸钠缓冲液:称取19.6g柠檬酸钠(Na 3C 6 H 5 O 7 ·2H 2 O)和 16.5mL浓盐酸加水稀释到1000mL,用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至2.2。 3.5.2 pH3.3的柠檬酸钠缓冲液:称取19.6g柠檬酸钠和12mL浓盐酸加水稀释到1000mL,用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至3.3。 3.5.3 pH 4.0的柠檬酸钠缓冲液:称取19.6g柠檬酸钠和9mL浓盐酸加水 稀释到1000mL,用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至4.0。 3.5.4 pH6.4的柠檬酸钠缓冲液:称取19.6g柠檬酸钠和46.8g氯化钠(优级纯)加水稀释到1000mL,用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至6.4。 3.6 茚三酮溶液 3.6.1 pH5.2的乙酸锂溶液:称取氢氧化锂(LiOH·H 2 O)168g,加入冰乙酸(优级纯)279mL,加水稀释到1000mL,用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH 至5.2。 3.6.2 茚三酮溶液:取150mL二甲基亚砜(C 2H 6 OS)和乙酸锂溶液 (3.6.1)50mL加入4g水合茚三酮(C 9H 4 O 3 ·H 2 O)和0.12g还原茚三酮(C 18 H 10 O 6 ·2H 2 O) 搅拌至完全溶解。 3.7 高纯氮气:纯度99.99%。 3.8 冷冻剂:市售食盐与冰按1∶3混合。 4 仪器和设备 4.1 真空泵。 4.2 恒温干燥箱。 4.3 水解管:耐压螺盖玻璃管或硬质玻璃管,体积20~30mL。用去离子水冲洗干净并烘干。 4.4 真空干燥器(温度可调节)。 4.5 氨基酸自动分析仪。

最新各类赖氨酸实际有效含量

各类赖氨酸产品分子式如下: 赖氨酸分子式:C6H14N2O2 赖氨酸硫酸盐分子式:[C6H14N2O2]2·H2SO4 赖氨酸盐酸盐分子式:C6H14N2O2·HCL 既然有了分子式,那么很容易算出,赖氨酸分子量是146.1886, 赖氨酸硫酸盐分子量是390.4490,赖氨酸盐酸盐分子量是182.6495。 分子量算出来了,那么很明显,针对赖氨酸硫酸盐([C6H14N2O2]2·H2SO4),其赖氨酸百分含量就是Lys%=(146.1886*2)/390.4490*100%=74.88%;针对赖氨酸盐酸盐(C6H14N2O2·HCL),其赖氨酸百分含量就是Lys%=146.1886/182.6495*100%=80.38%。 接下来再举发帖的楼主这个例子,拿70%的赖氨酸盐酸盐产品说事吧,------70%赖氨酸盐酸盐,就是指你所买的赖氨酸产品,是赖氨酸盐酸盐形式的,其中赖氨酸盐酸盐的纯度是70%(其余30%基本上是载体),那么折合下来其赖氨酸的实际含量就是Lys%=1*70%*80.38%=56.03%。 其它的算法都类似,不管它纯度是65%、70%、98.5%,也不管它是赖氨酸盐酸盐还是赖氨酸硫酸盐,折合出的赖氨酸实际当量,归根结底最后都是一个简单的数学换算,就不用一一列举了吧? 相关产品赖氨酸含量换算关系一览表 品名 赖氨酸盐酸盐赖氨酸硫酸盐 分子式C6H14N2O2·HCL [C6H14N2O2]2·H2SO4 纯品赖氨酸盐之赖氨酸含量80.04% 74.88% 65%纯度赖氨酸含量52.02% 48.67% 70%纯度赖氨酸含量56.03% 52.42% 98.5%纯度赖氨酸含量78.84% 73.76% 欣赏全国名师优秀课例心得体会 王健 这几天,我非常认真的观看了几位美术老师的优秀课例,通过学习名师的优秀课堂,让我受益匪浅。我被他们精彩的课堂设计、学生与老师之间的默契互动所吸引;被她们自然大方的教态所感染。让我从中学到了不少优秀的教学经验,为我今后在课堂教学中为创建高效课堂提供了很大的帮助。 这些课堂中都有一个共同点——“实在”,授课教师在讲课中,与学生打成一片,与学生的距离可谓是近之又近,没有花架子,他们

STP-QY-122盐酸赖氨酸质量标准及检验规程

目的:明确盐酸赖氨酸的质量标准和规范盐酸赖氨酸的检验规程。 适用范围:盐酸赖氨酸的检验。 责任人:化验员。 引用标准:CP2000版二部。 本品为L-2,6-二氨基已酸盐酸盐。按干燥品计算,含C6H14N2O2不得少于98.5%。 [性状] 本品为白色结晶或结晶性粉末;无臭。 本品在水中易溶,在乙醇中极微溶解,在乙醚中几乎不溶。 比旋度取本品,精密称定,加6mol/L盐酸溶液溶解并稀释成每1ml中含80mg的溶液,依法测定,比旋度为+20.0°至+21.5°。 [鉴别] (1)本品的红外光吸收图谱与对照的图谱(光谱集165图一致)。 (2)本品的水溶液显氯化物的鉴别反应。 [检查] 酸度取本品0.10g,加水10ml溶解后,依法测定,PH值应为5.0—6.0。 溶液的透光度取本品0.5g,加水10ml溶解后,照分光光度法,在430nm 的波长处测定透光率,不得低于98.0%。 硫酸盐取本品1.0g,依法检查,与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.02%)。 铵盐取本品0.10g,依法检查,与标准氯化铵溶液2.0ml制成的对照液比较,不得更深(0.02%)。 其他氨基酸取本品,加水制成每1ml中含16mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取上述溶液适量,加水稀释成每1ml中含80μg的溶液,作为对照溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶解各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丙醇-氨溶液(2:1)为展开剂,展开后,晾干,在100℃干燥10分钟,喷以茚三酮的丙酮溶液(1→50),在80℃干燥5分钟,立即检视,供试品溶液所显杂质斑点的颜色,与对照溶液的主斑点比较,不得更深(0.5%)。 干燥失重取本品,在105℃干燥3小时,减失重量不得过0.4%。

浅谈基因工程在食品领域内的应用

07食品科学与工程二班史养栋20070940079 浅谈基因工程在食品领域内的应用 摘要:21世纪是生物技术的世纪。转基因技术作为生物技术的核心,在解决当 今世界所面临的一系列重大的问题上发挥愈加显著的作用。这是一个新兴独立的技术领域,必将成为21世纪最具发展前景的高科技领域和国民经济的支柱产业之一。而基因工程在食品各个领域内的应用与研究更是被各国提上议程! The 21st century is the century of biotechnology. Transgenic technology as the core of biotechnology in addressing today's world faces a series of major issues increasingly play a significant role. This is a new stand-alone technology, will become the 21st century and the most promising high-tech sector and the national economy of the pillar industries. And genetic engineering in food applications within various fields and research has also been put on the agenda of the world. 关键词:转基因食品、基因工程、食品类型、食品的功能改良与贮存保鲜 前言 随着科学技术的日新月异,人民的物质文化需求越来越高。始终围绕着“提高人口素质”的主题来发展,这是当前社会和时代的必然趋势。而“民以食为天”这一条亘古不变的道理就像一根无形的指挥棒指导者科技工作者朝着这方面努力探求新知。在食品领域内涌现出了一个又一个的奇葩,其中基因工程功不可没!下面详细介绍一下基因工程在各个食品领域内的突破与应用。 1.基因工程在三大类食品领域内的应用 1.1基因工程在蛋白质类食品中的相关应用 蛋白质是人类赖以生存的营养素之一,植物是人类的主要蛋白供应源,蛋白原料中有65%来自植物。与动物蛋白相比,植物蛋白的生产成本低,而且便于运输和贮藏,然而其营养也较低。谷类蛋白质中赖氨酸(Lys)和色氨酸(Trp),豆类蛋白质中蛋氨酸(Met)和半光氨酸(Cys)等一些人类所必需的氨基酸含量较低。通过采用基因导入技术,即通过把人工合成基因、同源基因或异源基因导入植物细胞的途径,可获得高产蛋白质的作物或高产氨基酸的作物。 Yang等合成了一个292个by的能编码高含量必需氨基酸DNA (high essential amina acid ecoding DNA),再把HEAAC-DNA导入马铃薯细胞中去,该基因在马铃薯细胞中能表达,表达水平为HEAA蛋白占总蛋白的0.35%。1990年Clercq等用Met密码子序列取代了拟南芥菜2s白蛋白的可复区域,所获得的转基因拟南芥菜可生产富含Met的2s白蛋白。这些工作说明通过导入人工合成基因来修饰编码蛋白质的基因序列,来提高蛋白质中必需氨基酸含量是可行的。 植物体中有一些含量较低,但氨基酸组成却十分合理的蛋白质,如果能把编码这些蛋白质的基因分离出来,并重复导入同种植物中去使其过量表达,理论上就可以大大提高蛋白质中必需氨基酸含量及其营养价值。小麦中有一富含赖氨酸((Lys)的蛋白质,在其270位到370位区间有富含赖氨酸((Lys)的片断,Singh

浅谈赖氨酸行业现状和发展趋势

1赖氨酸发展简介 L—赖氨酸是人体必需氨基酸之一,是世界上仅次于味精的第二大氨基酸品种。目前世界赖氨酸产品约90%用作饲料添加剂,10%用于食品和药品中间体,我国饲用赖氨酸市场起步于20世纪90年代中期,其原因主要是当时的鱼粉价格昂贵,动物营养学家和饲料企业为降低饲料成本,致力于通过在饲料中添加赖氨酸和蛋氨酸开发无鱼粉日粮,并取得了巨大成功,而且在饲料中的应用越来越广泛。 2赖氨酸生产技术和方法 L—赖氨酸最初是从蛋白质水解物中分离而得,后又发明了化学合成法、酶法,1960年日本首先采用微生物发酵法生产。其生产原料以各种淀粉水解糖或糖蜜,采用短杆菌属和棒杆菌属的变异株发酵生产,通过分离、浓缩、蒸发、结晶、干燥获得饲料级赖氨酸、再精制可得到食品级、医药级产品。1965年我国全面推广了用发酵法生产谷氨酸的技术,自此以后也带动了发酵赖氨酸的科研和生产。目前,国内赖氨酸产酸率和转化率已经分别达到17g/d1和50%。 3赖氨酸主要品种 在过去赖氨酸发展历程中,比较成熟的产品有赖氨酸盐酸盐、蛋白赖氨酸、液体赖氨酸等。 赖氨酸盐酸盐特点是纯度高,颗粒均匀,抗潮性能优越,目前该产品在世界范围已经被广泛接受。该产品生产工艺复杂,能源与水的成本费用较高,成为制约其发展的重要缺点。 蛋白赖氨酸以及赖氨酸盐酸盐在数年前就已经研制,但真正用于大量生产是近年的事。此产品充分克服了赖氨酸盐酸盐能耗与水耗大的缺点,生产成本具有相当高的竞争优势。缺点是易吸潮,产品稳定性较差。 随着赖氨酸科技的发展,近年来又开发了液体赖氨酸,具有更低的生产成本,但是其本身为液体,运输困难而限制了该产品的流通。 2003年以前,中国市场主要赖氨酸产品为98.5%的赖氨酸盐酸盐,品种比较单一。大成生化公司于2003年自行研发生产65%赖氨酸硫酸盐,是继德国德固赛(Degussa)公司后,我国生产赖氨酸硫酸盐的制造商,具有相当大的竞争优势。据专业人士预计,未来赖氨酸添加剂从高纯度到低纯度的发展前景看好。 4赖氨酸的应用情况 4.1赖氨酸在医药上的应用 赖氨酸是构成蛋白质的基本单位,是合成人体激素、酶及抗体的原料,参与人体新成代谢和各种生理活动,赖氨酸是人体必需氨基酸,在各种氨基酸输液配方中基本上都有。赖氨酸还可作为利尿药的辅助治疗剂,治疗因血中氯化物减少所致的铝中毒;可与酸(如水杨酸)作用生成盐,以减轻不良反应;与蛋氨酸合用能抑制重高血压病;同时赖氨酸也是优良的血栓预防剂。 近年来研究发现,赖氨酸对营养不良,乙型肝炎、支气管炎病有一定疗效;赖氨酸与亚铁化合物 浅谈赖氨酸行业现状和发展趋势 周伟 (中国发酵工业协会北京10000) 摘要:本文概述了赖氨酸的发展、生产、品种以及应用情况,重点阐述国内外赖氨酸发展现状和发展趋势。 关键词;饲料;L-赖氨酸;赖氨酸盐酸盐;饲料添加剂 —31—

浅谈组蛋白修饰与基因调控研究进展

浅谈组蛋白修饰与基因调控研究进展 摘要:组蛋白是染色体基本结构—核小体的重要组成部分,其N—末端氨基酸残基可发生乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等多种共价修饰。组蛋白修饰对基因表达的调控有类似DNA遗传密码的调控作用。组蛋白修饰的相关研究,对认识相关基因的功能、进一步了解基因的调控机制具有重要意义。 关键词:组蛋白修饰;基因调控 The Research Progress of Histone modification and Gene regulation Abstract: Nucleosome constitutes chromation is a basic unit in eukaryote. Its N-terminal amino acid residues can occur acetylation, methylation, phosphorylation, ubiquitination and other covalent modification. Histone modification on the regulation of gene expression similar DNA genetic code of regulation. Histone modification of the study on the awareness of the relevant gene function, and further understanding of gene regulation mechanism is of great significance. Key words: Histone modification; Gene regulation 前言:展和多种生物基因序列尤其是人类基因序列的掌握,基因调控即遗传信息是如何精密调控和准确表达的成为新的研究热点。基因表达是一个受多因素调控的复杂过程。表观遗传学即DNA序列变化以外的可遗传的基因表达改变,这种影响基因转录活性而不涉及DNA 序列改变的基因表达调控方式可以使一些基因失活,导致病理的产生,其病因主要是一些抑制基因被沉默或一些沉默的基因被激活从而导致基因表达的变化[1,2]。 在细胞里,DNA是以染色质的形式存在,核小体是染色质的基本组成单位[3-6]。从进化的意义上说组蛋白是极端保守的,在各种真核生物中它们的氨基酸顺序,结构和功能都十分相似。虽然如此,组蛋白仍可被修饰,如甲基化、乙酰基化、磷酸化和泛素化,这些修饰都是可逆性修饰细胞对外在刺激做出的每一个反应几乎都会涉及到染色质活性的改变一通过修饰组蛋白,变换组蛋白密码实现。组蛋白基化修饰DNA碱基功能,进而调控基因转录和DNA修复,而且组蛋白基化作为一种记号,控制表观遗传水平。 1.组蛋白各种修饰作用与基因调控 1.1组蛋白甲基化、组蛋白去甲基化与基因调控 1.1.1组蛋白甲基化与基因调控的关系 组蛋白赖氨酸的甲基化已成为转录的重要调控机制,在异染色质的形成、X染色体的失活、基因组印迹、DNA修补及基因转录调控中有重要作用[1]。组蛋白的甲基化属于表型遗传学的研究范畴,由不同的特异性组蛋白甲基转移酶(Histonemeihyltransferases,HMT)催化形成。主要发生在赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)的残基上[1,3]。催化赖氨酸Lys、和精氨酸Arg 残基的甲基转移酶有3个主要的蛋白家族:PRMT家族、SET域家族和非SET域家族的蛋白质。识别组蛋白甲基化的3个蛋白基元:染色域(Chromodomain)、TUDOR域和WD40重复域(WD-repeat domain);它们能够与甲基化的赖氨酸残基作用,这些基元被特定的甲基化位点招募并日对不同生物发育起到一定的作用。组蛋白甲基化是一个动态的过程。它是通过组蛋白甲基转移酶和去甲基化酶的相互作用,动态地调节组蛋白的甲基化状态,及其与其他功能蛋白的相互作用,来调控基因转录的激活和抑制的生物学过程[7-12]。 有研究表明组蛋白H3的第4,36 ,79位赖氨酸的甲基化使常染色质区的转录激活,而

聚赖氨酸盐酸盐检验方法

检验方法 A.1 安全警示 试验方法规定的一些试验过程可能导致危险情况。操作者应采取适当的安全 和防护措施。 A.2 一般规定 本标准所用试剂和水,在没有注明其他要求时,均指分析纯试剂和GB/T 6682 中规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品,在没有注明其他要求时,均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603 的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时,均指水溶液。 A.3 鉴别试验 A.3.1 试剂和材料 A.3.1.1 碱性硝酸铋溶液:碱性硝酸铋0.85 g 加乙酸10 mL 及水40 mL 溶解。A.3.1.2 碘化钾溶液:碘化钾8 g 加水20 mL 溶解。 A.3.1.3 Dragendorf 试液:碱性硝酸铋溶液5 mL、碘化钾溶液5 mL、乙酸20 mL 和水100 mL 混合而成。现用现配。 A.3.1.4 pH 6.8 的0.1 mol/L 磷酸缓冲溶液。 A.3.1.5 甲基橙试液:0.1 mmol/L。 A.3.1.6 正丁醇/水/冰乙酸溶液:(4:2:1)。 A.3.1.7 茚三酮的丙酮溶液:1→50。 A.3.2 分析方法 A.3.2.1 0.1%试样液1 mL 加Dragendorf 试液1 mL,应产生红褐色沉淀。 A.3.2.2 取试样0.1 g 溶于pH6.8 的0.1 mol/L 磷酸缓冲溶液100 mL 中,取试样溶 液1 mL,加甲基橙试液1 mL,应产生红褐色沉淀。 A.3.2.3 参照GB/T5009.124 方法将试样水解成单一氨基酸,制成含本品约1 mg/mL 的近中性水溶液,作为试样溶液;精密称取赖氨酸盐酸盐标准样品适量,加水稀释成1 mg/mL 的溶液,作为标准溶液;另取试样适量,制成含试样约1 mg/mL 的水溶液,作为对照液;另取赖氨酸盐酸盐标准样品与精氨酸标准样品各适量,置于同一量瓶中,用水溶解并稀释成0.4 mg/mL 的溶液,作为系统适用性试验溶液。按照薄层色谱法(《中国药典》附录V B)试验,吸取上述四种溶液各2 μL,分别点于同一硅胶G 薄层板上,以正丁醇/水/冰乙酸溶液为展开剂,展开液由原始线上升高于10 cm 处时,晾干,90 ℃干燥10 min,喷以茚三酮的丙酮溶液,90 ℃ 加热至斑点出现,立即检视。标准溶液应显示一个清晰斑点;系统适应性试验溶液应显示两个完全分离的斑点,且其中一个斑点与标准溶液斑点色泽相似,Rf 值相等;试样溶液所得斑点与标准溶液所示斑点,色泽相似,Rf 值相等。对照液应 在原点处显示一个清晰斑点,没有其它斑点出现。 A.4 ε-聚赖氨酸盐酸盐含量的测定 A.4.1 方法提要 利用高效液相色谱测定ε-聚赖氨酸盐酸盐的含量。 A.4.2 试剂和材料

荷移分光光度法测定赖氨酸含量的研究

C EREALS AN D OILS PROCESSING 荷移分光光度法测定赖氨酸含量的研究 南海娟刘本国高晗张磊贾蕾蕾 (河南科技学院食品学院 【摘要】本文利用四氯苯醌与赖氨酸之间的荷移反应测定食品中赖氨酸的含量。主要研究了吸收波长、反应时间、温度、硼砂用量、定容溶剂以及四氯苯醌用量等对测定结果的影响。试 验结果表明:荷移反应最优条件为:λmax=348nm,时间60min,温度60℃,硼砂用量2mL,四 氯苯醌用量2mL,水为溶剂。在0.3~1.5mol/L赖氨酸范围内测定,相对标准偏差在0.41%以内, 相对误差为0.53%~1.39%,结果令人满意。 【关键词】赖氨酸;四氯苯醌;荷移反应;分光光度法 中图分类号:TS201.2文献标识码:A文章编号:1673-7199(201005-0122-04 荷移反应是指由富电子和缺电子物质形成电荷转移络合物的反应,基于某些物质生成的荷移络合物具有特定的颜色、最大吸收波长等特性,可测定物质的含量。由于此法简便、快速,试剂稳定,重现性好,因此在食品及药物分析上有广泛的应用前景。 荷移分光光度法是在量子化学的基础上提出的荷移理论发展起来的一种定量分析方法。近年来,国内外用此方法对氨基酸和磺胺类药物含量进行分析的报道很多。

赖氨酸是人体中必不可少的八大必需氨基酸之一,在食品中的含量常常被作为衡量食品营养价值的主要指标。因此,快速、简便地分析食品中赖氨酸的含量受到了广泛的重视。目前测定赖氨酸含量的方法主要有电位滴定法、高效液相色谱法、荧光法、示波极谱法、脉冲伏安法、分光光度法等。但利用四氯苯醌与赖氨酸的荷移反应测定赖氨酸含量的方法未见报道。 1材料与方法 1.1材料 供试仪器:TU-1800紫外分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司;HH-4恒温水浴锅,金坛市杰瑞尔电器有限公司;79-1磁力搅拌器,江苏正基仪器有限公司。 供试药品:赖氨酸,生化试剂,层析纯,上海丽珠东风生物技术有限公司;四氯苯醌,国药集团化学试剂有限公司;四硼酸钠,北京化工厂;无水乙醇、甲醇、丙酮、乙腈、二甲亚砜,天津科密欧化学试剂有限公司;所用试剂除赖氨酸外均为分析纯,试验用水为蒸馏水。 1.2方法 1.2.1试剂配制方法 1.5×10-3mol/L赖氨酸标准溶液:称取0.0230g赖氨酸于烧杯中用水溶解后移入100mL容量瓶中以水定容。 3.0×10-3mol/L四氯苯醌-乙醇溶液:准确称取0.0735g四氯苯醌(简称TCBQ,下同粉末在干燥烧杯中用乙醇溶解后移入100mL容量瓶中,用无水乙醇定容。 0.1mol/L硼砂溶液:准确称取9.5357g四硼酸钠,用水溶解后移入250mL容量瓶中定容。 1.2.2研究方法

赖氨酸的品质判断.

赖氨酸的品质判断 1、理化特性 ▲.真赖氨酸为白色或淡褐色小颗粒或粉末。 ▲.真赖氨酸无味或微有异性酸味,假冒赖氨酸气味不正,有些带有芳香性。2、质量指标 表1.饲料级L-赖氨酸盐酸盐质量标准(NY39-1987) 3、主要检测指标及检测方法 ▲.感官检测法:纯品赖氨酸添加剂为白色或淡褐色小颗粒或粉末,无味 或微有特异气味,放入口中带有酸味,口无涩感;假赖氨酸气味不正,具有杂质样涩感,有些还有芳香气味。 ▲.简易检测法:市场流通中不断有伪劣赖氨酸出现,而且做假形式多种 多样,如用淀粉、石粉、石膏粉等冒充或在赖氨酸中掺入这类物质。所以,在没有氨基酸自动分析仪的条件下,如何快速识别赖氨酸的真假很有必 要,现介绍几种快速识别赖氨酸真假的方法: ▲.溶解性检验:赖氨酸易溶于水,难溶于乙醇、乙醚。称取1g赖氨酸样品放入烧杯中,加入50毫升左右的蒸馏水,轻轻搅拌,真赖氨酸溶解完 全,溶液澄清无沉淀物。若溶解不完全,溶液浑浊或有沉淀残渣,则是假冒或掺假赖氨酸。将烧杯再放在电炉上加热,若溶液变稠成糊状,说明样品为以淀粉类物质冒充或掺有淀粉类物质的伪劣赖氨酸。

▲.灼烧法:取1g左右赖氨酸样品放入瓷质坩埚中,在电炉上灼烧,真赖氨酸灼烧时会散发出有类似燃烧羽毛时产生的难闻气味;而假赖氨酸一般不具有这种气味,或气味较淡。当灼烧至无烟后,再移入高温炉中,550℃灼烧2-3小时左右,真赖氨酸的灼烧残渣应在0.3%以下,肉眼几乎看不见残渣。若残渣较多,则为伪劣蛋氨酸,可按根据有关方法进一步鉴别是什么掺假物。 4、判定关键点和注意事项 ▲.定性鉴别L-赖氨酸盐酸盐:L-赖氨酸盐酸盐样品水溶液中加入硝酸银溶液应产生不溶于稀硝酸,而溶于氨水的白色沉淀。 ▲.(1:9)的硝酸溶液配制:1份体积的浓硝酸与9份体积的蒸馏水混合。 ▲.(1:2)的氨水配制:1份体积的浓氨水加2份体积的蒸馏水。 ▲.鉴别方法:称取样品1g,溶于蒸馏水中,加入0.1M硝酸溶液即产生白色沉淀。取此沉淀加(1:9)的硝酸溶液,沉淀不溶解;另取此沉淀,加入过量(1:2)的氨水则溶解。 ▲.可以根据含氮量识别赖氨酸的真伪和估测赖氨酸的含量 赖氨酸分子结构中均含有氮,用饲料常规检验法中粗蛋白质的测定方法,测出其中的含氮量,根据含氮量的多少或有无可判断赖氨酸的真假,估测赖氨酸的含量。 具体方法与粗蛋白的测定方法一样。称取一定量的样品,经消化、蒸馏、接收、盐酸滴定后得出标准盐酸消耗的量,然后按以下公式计算该赖氨酸的含氮量。 N(%)=100×(V-V0)C×0.014×V1/(W×V2)

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