葡萄球菌属检验
1．概述
葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35 个种，17 个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。
2. 标本类型
血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。
3. 鉴定
3.1 形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。
3.2 培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，多数不溶血。
3.3 生化反应金黄色葡萄球菌触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇，不分解棉子糖和水杨苷，明胶、血浆凝固酶和DNA酶试验阳性，七叶苷试验阴性。
3.4 鉴别要点
3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触酶试验阳性。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色，DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵苷露醇。
3.4.2 与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F 试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。
3.4.3 与链球菌属的鉴别葡萄球菌属O/F试验为发酵型，触酶试验阳性，链球菌属葡
萄糖O/F 试验为氧化型，触酶试验阴性。
3.4.4 凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别见下表1。
表1 凝固酶阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验
菌名凝固
溶血
硝酸
盐
海藻
糖
半乳糖
苷酶酶
触酶
金黄色葡萄球菌金黄色亚
种
+++++-
金黄色葡萄球菌厌氧亚种+-+---
施氏葡萄球菌聚集亚种++++-ND
中间葡萄球菌
++d+++
海豚葡萄球菌++++ND
S.lutrae++++++
猪葡萄球菌d+-++-
注：“+”为90%以上菌株为阳性，“- ”为90%以上菌株为阴性，“d”为11%-89%阳性，“ND” 为无资料。
3.5 操作步骤
3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。
3.5.2 触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。
3.5.3 凝固酶试验参见《凝固酶试验标准操作规程》。
3.5.4 鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。
4. 药敏
参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20 最新版本文件。
5. 质量控制
参见《质量管理程序》。
6. 检验结果解释与分析
6.1 由于葡萄球菌分布广泛，从临床标本中分离到金黄色葡萄球菌时，将其定为致病菌时应慎重。应根据凝固酶试验进一步确认。对可疑菌株的鉴定，最好利用商品化的鉴定系统根据生化图谱进行确定。表皮葡萄球菌分离自导管相关血流感染时，通常视为致病菌。溶血性葡萄球菌从泌尿感染病人分离得到时，尤其是细菌量较大或作为优势菌时，通常被视为致病菌。
6.2 甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRS）A 对多种广谱强效抗菌药物呈多重耐药性。如果检测出耐甲氧西林的葡萄球菌菌株则报告耐所有青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类和?- 内酰胺药/?- 内酰胺酶抑制剂类抗生素，对氨基糖苷类和大环内酯类抗生素常协同耐药。若葡萄球菌属对四环素敏感，则对多西环素和米诺环素敏感。某些菌对四环素中介或耐药，而对多西环素和米诺环素敏感。临床感染葡萄球菌的病人用喹诺酮类治疗3-4 日后，原来敏感的葡萄球菌易产生耐药。所以对这类葡萄球菌需多次反复进行药敏试验。大环内酯类
耐药葡萄球菌包括固有耐药和诱导耐药。所以临床试验室须进行“
D ”试验以检测克林霉素
诱导性耐药，根据“ D ”试验结果来报告克林霉素的耐药性。 7. 临床意义
葡萄球菌属在自然界分布很广。存在于空气、水、尘埃及皮肤上的葡萄球菌大多数无致 病性。金黄色葡萄球菌主要引起局部组织的化脓性感染（疖、痈和创伤感染） 、菌血症、心 内膜炎等全身感染等，也可引起骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎和深部脓肿等。腐生葡萄球 菌引起尿道感染、前列腺炎、外伤和菌血症等。溶血葡萄球菌引起心内膜炎、菌血症、腹 膜炎、尿道感染、外伤、骨折和关节炎等。
MRSA 的治疗：轻度感染可选用 SMZ-TMP 和喹诺酮类，严重全身感染选用万古霉素或其 他糖肽类药物。
8. 鉴定流程
菌落观察：金黄色、黄色或白色，溶
[1] 中国合格评定国家认可委触员酶会试验.C 阳NAS-GL23:2008 医学实验室质量和能力认可准则在临
2006 [4] Murray PR. Manual of Cinical Microbilogy. 9th ed.Washington:ASM Press,2007
：2007医学实验室 -质量和能力认可准则 . 2007 参考文献
涂片染色： G+球菌，单个、成双，以葡
床微
生物学检验领域的指南 .2+0凝08固酶试 +葡萄糖
[2] 周庭银编着 . 临床微生物学诊断与图解 .第二版. 上海：上海科学技术出版社， 凝固 酶阴 性 葡 微球菌 金黄色葡萄球菌 2007
施氏葡萄球菌聚集亚
[3] 叶应妩，王毓三，申子瑜主
编 . 全国临床检验操作规程 . 第 3 版 . 南京：东南大学出版社，
[5] ISO 15189
葡萄菌属的微生物学检验方法与原理
葡萄菌属的微生物学检验方法与原理 1.标本采集：根据葡萄球菌感染所致的疾病不同，可采集脓汁、渗出液、伤口分泌物、血液、尿液、粪便、痰液以及脊髓液等。 2.检验方法及鉴定（1）直接镜检：无菌取脓汁、痰、渗出物和脑脊液（离心后取沉渣）涂片，经革兰染色后镜检，如为革兰阳性球菌呈葡萄状排列可初步报告为："找到革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌".（2）分离培养：血液标本（静脉血约5ml）注入50ml 葡萄糖肉汤或含硫酸镁肉汤增菌培养，迅速摇匀，以防凝固，置35℃，一般于24h后开始观察有无细菌生长，若均匀混浊，溶血及胶胨状生长，则接种于血琼脂，进一步鉴定，若无细菌生长，于48～72h后自行观察（一般以7天为限），并接种血琼脂，以确定有无细菌生长。血液标本也可注入商品血培养瓶培养。 脓汁、尿道分泌物、脑脊液离心沉淀物，通常可直接接种血琼脂。35℃18～24h培养，可见直径2～3mm，产生不同色素的菌落。金黄色葡萄球菌在菌落周围有透明的溶血环。 尿液标本，必要时作细菌菌落计数。 粪便、呕吐物应接种高盐卵黄或高盐甘露醇琼脂平板，经35℃18～24h培养，可形成细小菌落，48h后形成典型菌落。 （3）鉴定试验1）触酶试验：细菌产生的过氧化氢酶催化双氧水生成水和氧气，产生气泡。方法：取营养琼脂上的菌落置于洁净试管内或洁净玻片上，滴加3％H202溶液数滴，观察结果，如立即（1min内）有大量气泡产生为阳性，不产生或气泡量少为阴性。葡萄球菌属为触酶阳性。 2）血浆凝固酶试验：血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的一种与其致病力有关的侵袭性酶，分游离型和结合型两种。其作用是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。可分别用试管法和玻片法检测。玻片法用于粗筛，若玻片法为可疑或阴性结果，还需用试管法确证。使用的血浆为EDTA抗凝兔血浆。有商品化乳胶凝集试验。 3）甘露醇发酵试验。 4）新生霉素敏感试验：凝固酶阴性的葡萄球菌的鉴别，采用新生霉素敏感试验。一般新生霉素耐药者多为腐生葡萄球菌，敏感者为表皮葡萄球菌。 5）同时进行体外药物敏感试验：对苯唑西林的敏感性测试是必须的，由此可将葡萄球菌分为苯唑西林敏感的葡萄球菌（MSS）和苯唑西林耐药的葡萄球菌（MRS）。同时还有必要测试β-内酰胺酶以及对万古霉素的敏感性。 金黄色葡萄球菌：触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阳性、甘露醇发酵试验阳性、对新生霉素敏感。 表皮葡萄球菌：触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阴性、对新生霉素敏感。 腐生葡萄球菌：触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阴性、对新生霉素耐药。
葡萄球菌属检验
1．概述 葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 2. 标本类型 血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3. 鉴定 3.1 形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 3.2 培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的?溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，多数不溶血。 3.3 生化反应金黄色葡萄球菌触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇，不分解棉子糖和水杨苷，明胶、血浆凝固酶和DNA酶试验阳性，七叶苷试验阴性。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触酶试验阳性。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色，DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵苷露醇。 3.4.2 与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。 链球菌属葡触酶试验阳性，试验为发酵型，O/F葡萄球菌属与链球菌属的鉴别3.4.3 萄糖O/F试验为氧化型，触酶试验阴性。 3.4.4 凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别见下表1。 表1 凝固酶阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验 半乳糖海藻凝固硝酸溶血菌名触酶 苷酶糖酶盐 金黄色葡萄球菌金黄色亚-+++++ 种 金黄色葡萄球菌厌氧亚种+-+--- 施氏葡萄球菌聚集亚种++++-ND 中间葡萄球菌++d+++ 海豚葡萄球菌++++-ND S.lutrae++++++ 猪葡萄球菌d+-++- 注：“+”为90%以上菌株为阳性，“-”为90%以上菌株为阴性，“d”为11%-89%阳性，“ND”为无资料。 3.5 操作步骤 3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。 3.5.2 触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。 3.5.3 凝固酶试验参见《凝固酶试验标准操作规程》。 3.5.4 鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进
病原性球菌及检验
病原性球菌及检验 球菌种类很多，根据革兰氏染色的不同，分为G-、 G+两类球菌。G+有：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌和微球菌。G-有：脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌、卡他布兰汉氏菌等。 对人体致病的球菌称病原性球菌，因能引起机体化脓性炎症，故又称为化脓性球菌。常见的有葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌。 一、葡萄球菌属 (一)形态与染色葡萄球菌呈不规则堆集排列，形似葡萄串状，也可见单个、成对或短链排列。为G+性球菌，直径0.5-1.5um，（致病性葡萄球菌菌体较非致病性葡萄球菌菌体小）无芽胞，无鞭毛、无荚膜；无动力。 (二)分类 1965年按血浆凝固酶分为：血浆凝固酶阴性葡萄球菌，血浆凝固酶阳性葡萄球菌。 1.血浆凝固酶阴性葡萄球菌包括：表皮、腐生葡萄球菌。 2.血浆凝固酶阳性葡萄球菌包括：金黄色、中间型、家畜葡萄球菌。 (三)抗原 本菌水解后，用沉淀法可获两种抗原即蛋白抗原和多糖抗原。 1.蛋白抗原：是一种表面抗原，为完全抗原；有种特异性，无型特异性。存在葡萄球菌细胞壁的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白。 2.多糖抗原：是半抗原，存在于细胞壁上，是金黄色葡萄球菌的重要抗原。有型特异性，分A、B、C三型。 (四)标本接种 1.脓汁、尿道分泌物、脑脊液沉淀物，通常直接接种在血琼脂上，经37℃24-48h培养，可见直径2-3mm，产生不同色素的菌落。 2.粪便、呕吐物应接种卵黄高盐、高盐甘露醇琼脂平板上，经37℃24-48h培养可形成细小菌落，48h后形成典型菌落。 3.疑为败血症者，抽取静脉血5ml，注入50ml葡萄糖肉汤培养基中。 (五)培养特性需氧或兼性厌氧，对营养要求不高。在20%CO2环境中，有利于毒力产生。最适温度37℃，最适PH7.4。DNA中G+C含量：30-39%。
食品中金黄葡萄球菌及其检验
食品中金黄葡萄球菌及其检验 第七章食品中致病球菌的检验第一节金黄葡萄球菌及其检验金黄色葡萄球菌及其检验金黄色葡萄球菌属于微球菌科葡萄球菌属,金黄色葡萄球菌是该属中的一个种引起人类疾病的葡萄球菌主要是金黄色葡萄球菌,除可引起皮肤组织炎症外,还可产生肠毒素如果该菌在食品中大量生长繁殖,产生毒素,人误食了含有毒素的食品,就会发生食物中毒,因此,由该菌引起的中毒为毒素型食物中毒食品中存在金黄色葡萄球菌对人的健康是一种潜在威胁,所以检验食品中的金黄葡萄球菌及数量具有实际意义主要内容一、金黄色葡萄球菌的生物学特性二、金黄色葡萄球菌的检验一、金黄色葡萄球菌的生物学特性、形态与染色分型简介、培养特性生化特性毒素与酶抵抗力致病性、形态与染色：(staphylococcusaureus)典型的金黄色葡萄球菌为球型直径μm 左右显微镜下排列成葡萄串状。 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛大多数无荚膜。 革兰氏染色阳性。 典型的金黄色葡萄球菌为球型直径mm左右显微镜下排列成葡萄串状。 葡萄球菌革兰染色镜下图金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片金黄色葡萄球菌的透射电镜照片分型简介血清学分型：金黄色葡萄球菌水解获得两种抗原成分：蛋白抗原和多糖抗原蛋白抗原主要为葡萄球菌A 蛋白（SPA)是一种表面抗原以上金黄色葡萄球菌有此抗原无特异性。 多糖抗原为半抗原有型特异性。
噬菌体分型根据肠毒素分型根据血浆凝固酶分型、培养特性金黄色葡萄球菌营养要求不高在普通培养基上生长良好需氧或兼性厌氧最适生长温度°C,最适生长pH。 金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性可在NaCl肉汤中生长。 在肉汤培养基中生长迅速℃,培养后h,呈均匀浑浊生长,延长培养时间,管底出现少量沉淀,轻轻振摇,沉淀物上升,旋即消散,培养d后可形成很薄的菌环,在管底则形成多量粘稠沉淀。 、培养特性葡萄球菌在普通营养琼脂平板上培养h后,可形成圆形凸起、边沿整齐、表面光滑、湿润、有光泽、不透明的菌落直径mm。 可产生不同的色素。 如金黄、柠檬色素为脂溶性不溶于水故色素只限于培养物而不外渗至培养基中。 金黄色葡萄球菌在血平板上形成的菌落较大多数致病菌株可产生溶血毒素菌落周围形成透明的溶血圈(β溶血圈)非致病性球菌则无此现象。 金黄色葡萄球菌的平板菌落照片（普通培养基）生化特性葡萄球菌大多数菌株可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖产酸不产气。 致病菌株多能分解甘露醇产酸。 甲基红反应阳性VP反应弱阳性。 许多菌株可分解精氨酸水解尿素产氨还原硝酸盐液化明胶。 金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力对磺胺类药物敏感性低但对青霉素、红霉素等高度敏感。
葡萄球菌属纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程
葡萄球菌属纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 1．目的 规范葡萄球菌属纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程，确保药敏结果的准确。 2．适用范围 本操作规程适用于葡萄球菌属的细菌。 3．选药原则 在本规程所列受试抗菌药物主要根据以下因素选择。 3.1现行版本的CLSI M02和M100对葡萄球菌属纸片扩散法药物敏感试验的要求。 3.2本单位处方手册中的抗菌药物名册。 3.3本单位上一年度葡萄球菌属细菌耐药监控数据。 4．质控 纸片药敏试验应使用金黄色葡萄球菌ATCC25923和大肠埃希菌ATCC35218（用于β-内酰胺/β-内酰胺抑制剂合剂）进行质量控制，质控菌株可接受的抑菌圈范围参见现行版本的CLSI M100-A19。 5．材料和仪器 M-H培养基，无菌生理盐水，药敏纸片，无菌棉签，35℃孵育箱，测量尺。 6．操作步骤 根据CLSI M2-A10和M100-S19制定本操作步骤。 6.1菌液制备从孵育了18~24小时的非选择性培养基（如血琼脂）平板上，挑取单个菌落，直接用无菌生理盐水制成悬液作为接种物，将浊度调整至0.5麦氏标准。
应在接种物制备后15分钟内接种M-H琼脂平板。用无菌棉拭蘸取菌液， 在管内壁液面上方旋转紧压，将多余菌液挤去，然后在琼脂表面均匀涂布接种3 次，每次旋转平板60°以确保接种菌的均匀分布，最后沿平板内缘涂抹一周。 6.2接种好的平板可敞开盖子在室温下干燥3~5分钟（不要超过15分钟）， 然后用纸片分配器将纸片放入琼脂表面并轻压，使纸片与琼脂表面完全接触。各 纸片中心相距应大于24mm，通常150mm平板至多放置12个纸片，90~100mm 平板至多放置6个纸片。由于某些药物在纸片放入琼脂平板后几乎立即扩散，所 以一旦纸片放入后就不能再移动，若要重新放置，可用一个新的纸片放在平板的 另一个位置。 6.3应在纸片贴好后15分钟内将平板倒置放入35℃孵箱，若超过15分钟 将使纸片中的抗菌药物提早扩散。非苛养菌的药敏解释性标准是建立在这些菌株 在空气中孵育的基础上，一些药物（如氨基糖苷类、大环内酯类和四环素）的抑 菌圈直径受CO2的影响有较大的改变，所以本菌属细菌不能孵育在CO2孵箱。 7．判断标准 见表5-50. 表5-50 葡萄球菌属细菌纸片扩散试验判断标准 判断标准（mm） 药敏纸片备注 敏感中介耐药
葡萄球菌属的常规鉴定标准操作程序
葡萄球菌属的常规鉴定标准操作程序 1 概述 葡萄球菌属是一类触媒试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌，表面葡萄球菌、腐生葡萄球菌等32个种。是临床最常见的化脓性球菌，广泛分布于自然界中，在人体表面鼻、咽、肠道也经常存在。 2 形态与染色 革兰阳性球菌，直径0.4~1.2µm成单、双、短链或不规则状排列。在液体培养基浓汁标本中，往往排列成双或短链状多数有鞭毛。 3 培养特性 金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上典型菌落为金黄色，周围有明显的透明（β）溶血环，部分菌落呈橙色，在高盐甘露醇平板上呈橙色菌落。表皮葡萄球菌等其他葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，不溶血。 4 生化反应 触酶试验阳性，多数能分解葡萄糖、麦蚜糖、蔗糖和甘露醇。不分解棉籽糖和水杨苷，液化明胶，血浆凝固酶和DNA酶实验分阳性。 5 鉴别要点 5.1 本菌属特征：触酶实验阳性，革兰阳性球菌，葡萄状排列，菌落中等大小，中等干燥。 5.2 与微球菌属的鉴别：触酶实验都为阳性，但O∕F试验葡萄球菌属为发酵型，而微球菌为氧化型或无反应，而且菌体较葡萄菌属更大，排列呈四联状为主。 5.3 与链球菌属的鉴别：葡萄球菌属触酶试验都为阳性，而链球菌为阴性，O∕F试验葡萄球菌属为发酵型而链球菌为氧化型。 5.4 凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别见下表。
结合型凝游离型凝鸟氨酸脱 菌名PYP试验DNA试验VP 试验 固酶试验固酶试验 羧酶实验 金黄色葡萄球菌+ + - + + - 中间型葡萄球菌- + + + - - 施氏葡萄球菌+ - + + + - 路邓葡萄球菌+ - + - + + 注：“+”为90%以上菌株为阳性，“--”为90%以上菌株为阳性。 5.5 凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别见下表 + 腐生葡萄球菌——+ V + + — 溶血葡萄球菌+ ——V + — —
病原性球菌的检验
病原性球菌的检验 一、葡萄球菌属Staphylococcus ⏹广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。 ⏹致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中 毒等。 分类与分型 1）金黄色葡萄球菌(S. aureus)：多数致病。 （2）表皮葡萄球菌(S. epidermidis)：偶可致病。 （3）腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)：不致病。 （4）致病性菌株能产生黄色或柠檬色素。 （5）多数金黄色葡萄球菌可被相应噬菌体裂解，表皮葡萄球菌不敏感。 金黄色葡萄球菌的致病性 ⏹用噬菌体可将金葡萄菌分为4群23个型。 ⏹肠毒素型食物中毒由Ⅲ和Ⅳ群金葡萄菌引起，Ⅱ群菌对
抗生素产生耐药性的速度比Ⅰ和Ⅳ群缓慢很多。 ⏹造成医院感染严重流行的是Ⅰ群中的52、52A、80和 81型菌株。 ⏹引起疱疹性和剥脱性皮炎的菌株经常是Ⅱ群71型。 金黄色葡萄球菌的流行病学 ⏹作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的 鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。金黄色葡萄球菌及其检验 ⏹革兰氏阳性球状，排列呈葡萄串状。无芽胞、鞭毛，大 多数无荚膜，个别形成荚膜。致病性葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）菌体较小、约0.5~1um., 普通0.4~1.2um。培养及生化特性 1.在普通培养基上生长良好（需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃、pH7.4 ，对营养要求不高，加少量葡萄糖或血液生长更旺盛。），在麦康凯琼脂平板不生长。 2. 血平板上生长更佳，致病菌株β溶血 3. 产生金黄色
色素 4. 高度耐盐: 可在7.5~15%NaCl肉汤中生长。 5. 分解葡、乳、麦、蔗糖，产酸不产气，触酶阳性，致病菌株能分解甘露醇。 6. 金黄色葡萄球菌能产生的毒素和酶（致病因素P149）1）溶血毒素2）杀白细胞素 3）血浆凝固酶：区分葡萄球菌是否具有致病性的重要标志。4）脱氧核糖核酸酶：5）肠毒素6）溶纤维蛋白酶7）透明质酸酶 抗原性 1. 多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁，借此可分群。 A群多糖抗原化学组成为磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺核糖醇残基（金黄色葡萄球菌）。 B群多糖抗原化学组成是磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺甘油残基。 2. 蛋白质抗原：细胞壁的一种表面蛋白，人源菌株含SPA （Staphylococcus protein A)，能与多种哺乳动物IgG Fc片
葡萄球菌属检验方法及临床意义
葡萄球菌属检验方法及临床意义 摘要】目的：探讨葡萄球菌属检验方法及临床意义。方法：选取2014年2月至2016年1月期间，我所检查的葡萄球菌属感染患者31例，对其检验方法及临床 意义进行回顾性的分析。结果：经过实验室检验后，所有患者的样本中均存在葡 萄球菌属，葡萄球菌属的实验室检验对病因的确定具有较高的指导意义。结论： 同人类疾病相关的葡萄球菌属主要有表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及头状葡萄 球菌，其会导致化脓性感染及病毒性休克等。 【关键词】葡萄球菌属；检验方法；临床意义 【中图分类号】R378.1 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）08-0088-02 葡萄球菌属细菌为一类革兰氏阳性球菌，因其常堆集排列呈葡萄串状而取名 葡萄球菌属[1]。葡萄球菌自然界与人体中广泛的存在，其大多数是非致病菌，少 数于人与动物皮肤黏膜内存在的菌株会致使多种化脓性的感染，例如菌血症、痈、疖、脓肿等，其还可导致烫伤样的皮肤综合征与毒性的休克综合征等[2]。葡萄球 菌为较为常见的化脓性球菌，同时也是医源性感染中较为常见的细菌。 1.资料与方法 1.1 一般资料 选取2014年2月至2016年1月期间，我所检查的葡萄球菌属感染患者31例，其中男性患者16例，女性患者15例，患者年龄15至75岁，平均 （43.9±15.1）岁。31例患者中皮肤软组织感染11例，内脏器官感染10例，全身感染8例，尿路感染2例。 1.2 标本采集 根据患者发生感染的疾病的不同，可采集其伤口分泌物、脓汁、渗出液、血液、痰液、粪便及脑脊液等[3]。因葡萄球菌广泛的分布在人体皮肤及黏膜上，因 此在采集时需注意避免患者病灶周围的正常菌群的污染。 2.检验 2.1 标本的直接检查 取患者的痰、渗出物、脓汁及脑脊液在进行离心后取其沉渣进行涂片，经过 革兰染色后进行镜检，若在检查后发现革兰阳性菌，即可初步报告为疑为葡萄球 菌[4]。因在正常情况下，关节穿刺液、脑脊液等为无菌的，当检查时发现细菌则 具有重要的价值，其他的体液标本中在检查时发现炎性细胞同样具有参考价值。 2.2 分离培养与鉴定 2.2.1分离培养取患者静脉血约5 mL制血液标本，并注入50mL的葡萄糖肉 汤进行增菌培养，若增菌液出现混浊，且内存在胶胨样的凝块，需进一步的转种 至血琼脂平板上进行分离培养；分泌物、脓液及尿液标本可直接在血平板上进行 培养，呕吐物、粪便标本可接种在高盐甘露醇的平板上，培养需将培养板置于35℃的培养箱中进行培养。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色及柠檬色，周 围存在明显β溶血环[5]。表皮的葡萄球菌落为无色素及白色，腐生的葡萄球菌落 呈白色及柠檬色。取上述的可疑菌落经过镜检证实其为革兰阳性的球菌，则可进 行进一步鉴定。尿道分泌物、脓汁及脑脊液的离心沉淀物可直接接种在血琼脂的 培养基内，在35℃环境中培养1天后，可见不同色菌落。 2.2.2鉴定对于葡萄球菌鉴定常使用的试验有如下五种：第一，触酶试验， 在进行触酶试验后，葡萄球菌为阳性，链球菌为阴性。第二，血浆凝固酶试验，
微生物检验病原性球菌及检验
第十八章病原性球菌及检验 本章考点：（掌握，熟练掌握） （1）概念 （2）生物学性状 （3）微生物学检查方法与原理 （4）临床意义（致病性、所致疾病） 普及共性，单记个性 生物学性状 形态与结构：革兰染色性，菌体形态，大小，排列状态，特殊结构。 培养特性：对气体需求，营养要求，最适pH值，最适温度，在培养基中的生长现象。 生化反应：特殊生化。 抗原： 分类： 致病性 致病物质 所致疾病 微生物学检查：针对生物学性状和致病性 一、葡萄球菌属 （一）概念 一群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。 （二）生物学特性 1.形态与结构：本属菌革兰染色阳性，呈圆球形，直径0.5～1.5／μm，不规则成堆排列，形似葡萄串状，在脓汁、肉浸液培养物中，可见单个，成对或短链排列。无鞭毛和芽胞，有些细菌能形成荚膜。 2.培养特性：需氧或兼性厌氧，营养要求不高，通常在肉浸液及肉浸液琼脂或加入血液的培养基上生长良好。最适pH为7.4，最适温度为35℃～37℃。 在普通琼脂平板上经35℃24～48h培养，可形成圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落，直径为2～3mm。可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。 在血琼脂平板上，几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素。对人致病的主要是α溶血素。
在液体培养基（普通肉浸液）中生长迅速呈均匀混浊状。 3.生化反应：触酶试验（+），对糖的发酵反应不规则，多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气。多数致病性葡萄球菌能分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶。 4.抗原：葡萄球菌水解后，用沉淀法可获得两种抗原，即蛋白抗原和多糖抗原。 （1）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性，无型特异性。存在于葡萄球菌的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白（SPA）。 （2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。 5.分类 6.抵抗力：对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。 （三）致病性及临床意义 葡萄球菌感染的特点是感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。 1）金黄葡萄球菌