响应面法优化盐地碱蓬草总黄酮提取工艺研究_钟尉方
盐地碱蓬总黄酮的提取工艺条件研究
关键词 ： 盐地碱 蓬 ； 总黄 酮 ； 提取 工 艺 中图分 类号 ： ２ ４ ２ Ｒ ８ ． 文 献标 识码 ： Ａ 文 章编号 ：６ １ ５ ２ （ ０ ７ ０ 一 ０ ７— ３ １７ — ３ ２ ２０ ） ｌ ０ ５ ０
盐 地 碱 蓬 （ ｕｅａｓｌ 又 名 翅 碱 蓬 、 须 Ｓａｄ ａｓ ａ） 黄 菜 。为 藜科一 年 生 草本 植 物 ， 生 于 海涂 或 盐 场 野 的盐滩 之上 ， 无污染 ， 称 为标 准 的 “ 色食 品”， 被 绿 富含不饱 和 脂 肪酸 、 维生 素 和微 量 元 素 。具 有 清 凉解毒 、 降压 降脂 ， 有助 于消化 等功 能 ¨ Ｊ 。 近 年来研究 表 明盐地 碱蓬 中富 含抗 氧化 活性
乙醇提取 法 的工 艺参 数 。 ２ ２ 总 黄酮含 量测定 ．
２ ２ １ 标准 品溶液 的制 定及标 准 曲线绘制 ． ．
１ 材 料 与 仪 器
盐地 碱蓬采 集 于盐城 射 阳新 洋 港滩涂 ， 洗净 、 阴干后 ， 置于干 燥箱 中 ６ ５℃烘 干 ， 成碎段 ， 后 剪 然
粉碎 成粉 末 ， 用 。 对 照 品 芦 丁 （ 国 药 品 生 物 备 中
富的黄 酮类化合 物 ， 这些 黄 酮 类 化合 物 有 很 强 且 的抗氧 化 活 性 和 清 除 体 外 超 氧 阴 离 子 能 力 。 在 此基础 上 ， 文 采用 了 四 因素 三水 平 的正 交 实 本 验 设计 ， 对盐地 碱蓬 总黄 酮提取 工 艺进行研 究 ， 旨 在 获得盐 地碱蓬 中 总黄 酮 提 取 的最 佳 方 案 ， 以期 为开发 、 生产盐 地 碱 蓬 中黄 酮 类 物 质提 供 理 论 依
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第２ ０卷 第 １ 期
响应面法优化紫斑牡丹籽粕总黄酮提取工艺
响应面法优化紫斑牡丹籽粕总黄酮提取工艺陶 波，马玉勤（临夏现代职业学院 生物工程系，甘肃临夏 731100）摘 要：以乙醇浓度、提取温度、提取时间及料液比为考察因素，以总黄酮提取率为指标，通过单因素试验和响应面法对紫斑牡丹籽粕总黄酮提取工艺进行了优化。
结果表明，紫斑牡丹籽粕总黄酮的最佳提取工艺为乙醇浓度67%、提取温度74 ℃、提取时间133 min、料液比1∶36（g∶mL）。
在该工艺条件下，紫斑牡丹籽粕中总黄酮提取率达到8.63%，工艺可行性较高，可为紫斑牡丹籽粕中总黄酮提取提供有效参考依据。
关键词：紫斑牡丹籽粕；总黄酮；提取工艺；响应面分析Optimization of Extraction Process of Flavonoids from Paeonia rockii Seed Meal by Response Surface MethodologyTAO Bo, MA Yuqin(Department of Biotechnology, Linxia Modern V ocational College, Linxia 731100, China) Abstract: Ethanol concentration, extraction temperature, extraction time and solid-liquid ratio were selected as factors to be examined, and the total flavonoids extraction rate was used as an indicator to optimize the extraction process of total flavonoids from Paeonia rockii seed meal through single factor experiments and response surface methodology. The results showed that the optimal extraction process of total flavonoids from Paeonia rockii seed meal was ethanol concentration 67%, extraction temperature 74 ℃, extraction time 133 min, and solid-liquid ratio 1∶36 (g∶mL). Under this condition, the extraction rate of total flavonoids from the seed meal of Paeonia rockii reached 8.63%, and the feasibility of the process was high, which can provide an effective reference basis for the extraction of total flavonoids from the seed meal of Paeonia rockii.Keywords: Paeonia rockii seed meal; total flavonoids; extraction process; response surface methodology紫斑牡丹除作为观赏性花卉植物外，其花、皮具有一定的活血化瘀、抗病毒、抗菌等药用价值，相关研究表明其中黄酮类化合物是重要的活性物质[1]，紫斑牡丹籽油中含量较高的α-亚油酸具有抗氧化、免疫调节、美容防辐射等功效[2]，目前也作为保健食品原料正在逐渐被开发利用[3]，但紫斑牡丹籽粕却成为工业废料而未能有效利用。
响应面法优化夏至草总黄酮的提取工艺
减轻大鼠重症失血性休克后器官损伤［３］；可改善血 瘀大鼠的血液流变性异常，提高器官血液灌流，具 有良好的活血化瘀作用［４］；能明显降低 Ｄｅｘｔｒａｎ５００ 致 ＡＭＤ大鼠的全血粘度和血浆粘度，提高红细胞变 形能力［５］；能明显减轻 官功能障碍与组织学损伤［６］。有文献报 道夏至草中含有多种黄酮类物质［７］，但未见有对夏 至草总黄酮含量测定的研究。本文采用响应面法对 夏至草总黄酮的提取工艺进行研究，为进一步研究 开发夏至草提供实验基础。
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｌａｇｏｐｓｉｓｓｕｐｉｎａ；ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ＵｌｔｒａｓｏｎｉｃａｓｓｉｓｔｅｄＥｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒ ｆａｃｅｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
ｄｏｉ：１０．１３３１３／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３４８９０．２０１７１１１２００１
夏至草为唇形科夏至草属植物夏至草的全草， 又名小益母草、白花益母草、白花夏枯草等，广泛 分布于华北、东北、西南、西北等地区。 《本草纲 目》 中记载的茺蔚白花者应是夏至草，可活血去瘀、 调经、降气逆、平肝潜阳，用于月经不调、半身不 遂、血滞经闭、贫血性头昏等疾病。现代研究表明， 夏至草醇提物能明显减轻 Ｄｅｘｔｒａｎ５００所致 ＡＭＤ大 鼠肠系 膜 血 液 及 淋 巴 微 循 环 障 碍［１］；能 明 显 降 低 ｄｅｘｔｒａｎ５００致 ＡＭＤ大鼠的血小板聚集与粘附功能、 减少血 栓 形 成［２］；能 通 过 降 低 ＮＯ的 生 成 和 释 放，
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｏｆＬａｇｏｐｓｉｓｓｕｐｉｎａａｎｄｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅ ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｃｏｎｔｅｎｔＭｅｔｈｏｄｓ：Ｕｓｉｎｇｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｙｉｅｌｄｏｆｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓａｓｉｎｄｅｘ，ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎＬｓｕｐｉｎａＯｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，ＢｏｘＢｅ ｈｎｋｅｎｄｅｓｉｇｎａｎｄｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓＡｎｄｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｙｉｅｌｄｏｆｔｈｅｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｕｓｉｎｇｑｕａｄｒａｔｉｃｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｍｏｄｅｌｂｙｔｈｅｓｏｆｔｗａｒｅｏｆＤｅｓｉｇｎＥｘｐｅｒｔｖ８０６Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘ ｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅｅｔｈａｎｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ６０％，ｌｉｑｕｉｄｔｏｍａｔｅｒｉａｌｒａｔｉｏ４０∶１，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ６５℃Ｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ， ｔｈｅｙｉｅｌｄｏｆｅｘｔｒａｃｔｅｄｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｃｏｕｌｄｒｅａｃｈｅｄｔｏ１５９２４％ （ＲＳＤ＝１００７７％，ｎ＝６）Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ａｎｄｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍ Ｌｓｕｐｉｎａ
响应面法优化土茯苓总黄酮的提取工艺
液， 定容 ， ４ ℃避 光保 存 ， 待测 。
１ ． ３ 总黄 酮 的含 量测 定
ｖ ） ， 摇均 ， 放置于一定温度 （ ２ ５—７ ５ ＇ ： Ｃ） 的恒 温 水 浴
计
， 其 注重 如何 科 学 合 理地 安 排 实 验 ， 可 同 时考
虑 几 种 因素 ， 寻找最 佳 因素水 平组 合 ， 但它 不能 在给 出的 整个 区域 上找 到 因素和 响应 值之 间 的一个 明确
间、 因素与 因素 之 间的 函数关 系 ， 找 出各 因素 的最 佳
中， 提取 一段 时 间 （ １ ０～ ６ ０ ｍｉ ｎ ） ， ４ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ离心 ２ ０ ｍ ｉ ｎ ， 取出上清液 ， 按 上 述 步 骤 重 复 ２次 ， 合 并 上 清
组合和响应值 的最优值 ， 有效地 解决多变量 问题 。
０ ． ０ ７ ５ ｍＬ硝 酸 铝 溶 液 （ １ ０ ％） ， 摇匀 ， 放置 ６ ａ ｒ ｉ ｎ ； 再 分别 加 入 １ ｍ Ｌ氢 氧化 钠 溶 液 （ ４ ％） ， 摇均 ， 放置 １ ０
ｍ ｉ ｎ后 ， ４ ９ ０ Ｒ ］ Ｔ Ｉ 波长 处测 定 吸光度 值 ， 每组 反应 液平
苓总黄酮提取 工艺研 究 方 面， 多 采 用 正 交 实 验 设
１ 材料 与方 法
１ ． １ 材料
土茯 苓 药 材 购 自康 美 中 药饮 片 （ 批号 ：
１ ２ １ ２ ０ ５ ２ ７ ） ， 经广 东省 中医院药 学部 陈燕 芬 主任 中药
响应面试验优化盐地碱蓬总黄酮乙醇萃取工艺及其抗氧化、降糖、降脂活性
响应面试验优化盐地碱蓬总黄酮乙醇萃取工艺及其抗氧化、降糖、降脂活性公衍玲;刘菲;金宏【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2016(037)008【摘要】盐地碱蓬系藜科碱蓬属1a生草本植物,既可作药物也可作为食物被人们广泛接受.本研究优化了从碱蓬中提取总黄酮的工艺及条件,并研究了其体外抗氧化、降血糖、降血脂活性.通过乙醇回流提取法进行总黄酮提取,使用单因素试验结合中心组合设计-响应面法确定了最优的工艺参数.并且将提取的总黄酮进行体外清除羟自由基和氧自由基、抑制α-淀粉酶和脂肪酶实验.总黄酮的乙醇提取工艺优化条件为液固比31.40∶1、乙醇体积分数83.12％、回流温度90℃、回流时间128.40min.预测和实际的总黄酮产量分别为0.896％和0.932％.体外实验表明,总黄酮可以清除羟自由基和氧自由基,并且可以抑制α-淀粉酶和脂肪酶的活性.本实验中最优提取条件容易实现并且有良好的重复性.结果表明,总黄酮作为一种潜在的抗氧化、降糖、降血脂的自然资源的成分,可为碱蓬的发展提供新的药理学依据.【总页数】7页(P1-7)【作者】公衍玲;刘菲;金宏【作者单位】青岛科技大学化工学院药学系,山东青岛 266042;青岛科技大学化工学院药学系,山东青岛 266042;青岛科技大学化工学院药学系,山东青岛 266042【正文语种】中文【中图分类】R932【相关文献】1.响应面试验优化[Bmim]Cl-Na2SO4双水相萃取分离琉璃苣种子总黄酮工艺 [J], 张喜峰;罗光宏;张芬琴;崔玮2.响应面试验优化双水相萃取大吴风草总黄酮工艺及抑菌活性测定 [J], 陈建中;葛水莲;昝立峰;邢浩春;付静;王更先3.响应面试验优化莲蓬壳总黄酮超声提取条件及其抗氧化活性 [J], 胡卫成;王新风;沈婷;王毓宁;陈铭;尤龙;纪丽莲;李鹏霞4.辣木叶总黄酮响应面法微波萃取工艺优化及其体外降糖效果观察 [J], 吉莉莉;汪开毓;罗晓波;赵玲;黄小丽;周燕5.响应面试验优化栀子乙醇提取工艺及其抗氧化活性的研究 [J], 付小梅; 王芳; 吴志瑰; 刘婧; 裴建国; 彭水梅; 李惠芳; 李慧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
盐地碱蓬有效成分提取方法及工艺研究进展
盐地碱蓬有效成分提取方法及工艺研究进展郭琳琳;范小振;李煦;董翠芳【摘要】综述了盐地碱蓬中碱蓬籽油、黄酮、色素等有效成分的提取方法及工艺进展.盐地碱蓬提取方法主要包括溶剂浸提法、超声波或微波辅助提取法、超临界CO2萃取法.溶剂浸提法是提取碱蓬中碱蓬籽油、黄酮、色素的传统方法,超声波辅助和微波辅助提取将超声或微波技术引入碱蓬提取中,提高了提取效率.超临界CO2萃取技术应用于碱蓬提取,避免了溶剂回收和有机溶剂残留的问题,并且可实现原料的充分利用.碱蓬有效成分提取应向工艺整合以实现多种成分综合提取利用的方向发展.%Extraction methods and technology of Suaeda salsa seedoil,flavonoids and pigment,et al from halophyte Suaeda salsa were reviewed.The extraction methods include solvent extractionmethod,ultrasonic-assisted extraction,microwaveassisted extraction and supercritical CO2 extraction.Solvent extraction methods were traditional method often used to extract Suaeda salsa seed oil,flavonoids and pigment from halophyte Suaeda salsa.Ultrasonic-assisted extraction and microwaveassisted extraction were used to increase theefficiency.Supercritical CO2 extraction was applied in extraction of Suaeda salsa without recovery and residual of organic solvents and the raw material could be fully used.Saaeda salsa should be integrated utilized in the direction of integrated extraction process and utilization of various components.【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷),期】2018(039)004【总页数】6页(P324-328,336)【关键词】盐地碱蓬;溶剂浸提;超声波辅助;微波辅助;超临界CO2萃取【作者】郭琳琳;范小振;李煦;董翠芳【作者单位】沧州师范学院化学与化工学院,河北沧州061001;沧州师范学院化学与化工学院,河北沧州061001;沧州师范学院化学与化工学院,河北沧州061001;沧州师范学院化学与化工学院,河北沧州061001【正文语种】中文【中图分类】TS255.36藜科碱蓬属植物碱蓬(Suaeda salsa)是一年生草本盐生植物,可食用且营养价值较高,一般生于盐碱荒地上,是盐碱地的典型指示植物[1]。
运用响应面分析法优化鬼针草总黄酮的提取工艺
运用响应面分析法优化鬼针草总黄酮的提取工艺
柯翠敏;李丝红;胡建萍;谢志新
【期刊名称】《继续医学教育》
【年(卷),期】2022(36)3
【摘要】目的运运用响应面分析方法来优化鬼针草总黄酮的提取工艺。
方法运用响应面分析法软件,以液料比、乙醇浓度和提取时间作为影响因素,用Box-Benhnken中心组合设计实验方案,以芦丁作为对照品,以亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法系统为显色方式,采用紫外-可见光光度法测定、计算总黄酮含量,并对实验结果进行二次响应面分析,得出鬼针草总黄酮提取的二次回归方程,求算出最佳提取条件。
结果根据鬼针草总黄酮得率的二次多项数学模型,得到最佳提取工艺为:液料比为14,乙醇浓度为60%,提取时间为1 h;通过3次鬼针草总黄酮提取实验对上述最佳提取条件进行验证,实际测得鬼针草总黄酮提取率与理论预测值相近。
结论通过响应面分析方法来优化得到的鬼针草总黄酮提取工艺稳定可行,可用于鬼针草总黄酮的提取。
【总页数】4页(P109-112)
【作者】柯翠敏;李丝红;胡建萍;谢志新
【作者单位】泉州医学高等专科学校药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R943
【相关文献】
1.响应面分析法优化四药门花叶总黄酮提取工艺
2.响应面分析法优化金槐总黄酮的提取工艺
3.星点设计-响应面分析法优化西芹叶中总黄酮的提取工艺
4.响应面法优化鬼针草茎中总黄酮的提取工艺
5.基于响应面分析法优化蚕蛹总黄酮的提取工艺研究
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响应面法优化淫羊藿总黄酮的提取工艺
响应面法优化淫羊藿总黄酮的提取工艺
孙国艳;李华;杨长花;甘军委;陶桂松;王启明;杨丹
【期刊名称】《化学与生物工程》
【年(卷),期】2022(39)11
【摘要】先采用溶剂法除去淫羊藿中的叶绿素,再以淫羊藿总黄酮提取率为评价指标,在单因素实验的基础上,采用响应面法优化淫羊藿总黄酮的提取工艺。
确定最优
提取工艺为:乙醇体积分数50%、料液比1∶15(g∶mL)、提取温度82℃、提取时
间32 min、水浴回流提取、提取2次,在此条件下,淫羊藿总黄酮提取率为1.961%。
该研究为淫羊藿的开发利用及质量控制提供了科学依据。
【总页数】6页(P37-41)
【作者】孙国艳;李华;杨长花;甘军委;陶桂松;王启明;杨丹
【作者单位】咸阳市食品药品检验检测中心;陕西国际商贸学院
【正文语种】中文
【中图分类】O629;R284.2
【相关文献】
1.响应面分析法优化淫羊藿总黄酮提取工艺
2.Box-Behnken设计-响应面法优化番石榴叶总黄酮提取工艺及总黄酮对糖尿病小鼠糖耐量的影响研究
3.响应面法优化
栀子中总多酚、总黄酮的提取工艺4.响应面法优化东北茶藨子叶片中总酚、总黄
酮提取工艺5.响应面法优化提取黄精茎秆中总多糖、总皂苷、总黄酮的工艺研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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盐地碱蓬（ Suaeda salsa） 为一年生草本植物，主要 分布于欧洲及亚洲［1 － 3］。在我国河北、辽宁、山东、东 北、内蒙古、山西、陕西北部、宁夏、甘肃北部、青海、新 疆等沿海滩涂、盐碱土地都广泛生长，盐地碱蓬作为一 种能够生存于沿海滩涂、盐碱土壤的植物逐渐引起专 家学者注意。盐地碱篷草中含有非常丰富的营养物 质，蛋白质、多糖、生物碱、黄酮、酚醌类等化合物［4 － 6］， 其中黄酮类等有效成分对治疗冠心病、清除自由基、抑 菌、抗癌、保肝活性等方面有显著效果［7 － 8］。研究表明 盐地碱蓬的化学成分、营养成分、生物活性、胁迫环境 生存机制、富集重金属能力等［9 － 14］，在多领域具有较 高开发利用价值，极具种植栽培潜力。因此可以预测 未来盐地碱蓬的产量必将不断扩大，可持续地、综合性 地利用盐地碱蓬必将成为新的研究热点。
模型的 F = 19. 82，P ＜ 0. 0001，差异极显著，即对 黄酮提取率的影响显著。失拟项 p 值为 0. 3618，失拟 项不显著，通过对试验模型可信度进行分析，得到决定 系数 Ｒ2 = 0. 9852，响应值的变化有 98. 52% 来源于所 选因素，表明方程拟合度较好。说明该回归方程很好 的描述各试验因素与响应值之间关系，试验方法可靠。 对模型进行回归方程系数显著性检验可知： B、C、D、 BC、BD、A2 、B2 、C2 、D2 的 P 值小于 0. 01，说明提取温 度、乙醇浓度、料液比、提取温度和乙醇浓度、料液比的 交互项及 3 个因素的二项式都具有显著性影响，而其 他交互项、提取时间显著项较差，表明试验因素对响应 值是一种非线性关系。
图 5 提取温度对总黄酮含量的影响 Fig． 5 Effect of extraction temperature on
total flavonoids content
提取温度为 50℃ 时所得盐地碱篷总黄酮含量最 高，当温度高于 50℃ 时总黄酮含量基本保持持平或有 所下降，可能超声条件下高温使黄酮分解，故选择 40、 50、60℃ 的提取温度进行响应面分析。 2. 3 响应面设计试验结果及分析 2. 3. 1 Box-Behnken 设计实验方案及试验结果 采用 Design-Expert 8. 0. 7. 1 软件设计试验条件，选用 BoxBehnken 模型，对表 1 的结果进行多元线性回归拟合，
本文旨在研究响应面法优化提取盐地碱蓬中总黄 酮的提取工艺［15 － 16］，为盐地碱篷的进一步开发利用提 供理论依据和技术支持。目前黄酮提取方法有热水提 取法、乙酸乙酯提取法、乙醇提取法。乙醇提取方法可 以有效的避 免 多 糖、鞣 质、果 胶 等 杂 质 的 干 扰［17］。 本 文选择 超 声 波 辅 助 技 术，乙 醇 溶 剂 提 取 方 法，利 用 Design-Expert 软件设计试验条件对提取工艺及其影响 因素优化组合［18 － 20］，筛选最优的提取工艺条件为进一 步开发利用盐地碱蓬提供理论依据。
A（ 提取时间） 、B（ 提取温度） 、C（ 乙醇浓度） 、D（ 料液
比） 为自变量，以碱篷总黄酮含量为响应值（ Y） ，进行
响应面分析，每组平行 3 次，取平均值，优化盐地碱蓬
黄酮提取工艺［26］。
图 1 芦丁标准曲线 Fig． 1 Standard curves of rutin
图 2 乙醇浓度对提取总黄酮含量的影响 Fig． 2 Effect of ethanol concentration on total flavonoids content
随着料液比上升总黄酮含量逐渐升高。当料液比 为 1∶ 20（ w / v） 时达到最高，随后逐渐缓慢下降，故选择 料液比为 1∶ 15、1∶ 20、1∶ 25 做响应面分析。 2. 2. 4 提取温度 在料液比为 1∶ 20（ w / v） 、乙醇体积 分数为 60% 、提取时间为 60min 的条件下，不同提取 温度对盐地碱篷总黄酮提取率的影响，如图 5 所示。
1 材料与方法
1. 1 试验材料 盐地碱蓬（ 采摘于秦皇岛北戴河滩涂湿地） ，芦丁
标准品（ 上海硕光科技公司） ； 无水乙醇、浓盐酸、氢氧 化钠、三氯化铝、亚硝酸钠等均为分析纯。 1. 2 仪器与设备
TU － 1800 紫外可见分光光度计（ 北京普析通用 仪器有限责任公司） ； KQ － 400 GK DV 型高功率数控 超声波清洗器（ 昆山超声仪器有限公司） ； YS － 10 型 高速粉碎机（ 北京燕山正德机械设备有限公司） ； TGL － 18B 型离心机（ 上海安亭科学仪器厂） ； FA2014A 型 电子分析天平（ 上海精天电子仪器有限公司） ； DGG － 9076A 型电热恒温鼓风干燥箱（ 上海一恒科技有限公 司） ； ＲE － 52B 旋转蒸发器（ 上海亚荣公司） ； 冷冻干燥 机（ 北京松源华兴科技发展有限公司） 。 1. 3 试验方法 1. 3. 1 黄酮含量测定方法［21 － 22］ 精密称取芦丁标准 品 10mg，超 声 波 辅 助 60% 乙 醇 溶 解，室 温 定 容 至 100mL 容量瓶中，配成 100μg·mL － 1 的芦丁标准溶液。 精确吸取芦丁标准溶液 0、1、2、3、4、5、6mL，分别置于 25mL 容量瓶中，各加 5% 亚硝酸钠溶液 0. 30mL，振摇
25mL 容量瓶中，按照标准曲线制作方法操作，测定吸
光度，根据芦丁标准曲线计算稀释后碱篷总黄酮浓度
（ c） 。每组平行 3 次，取平均值，计算样品中总黄酮的
提取率。
黄酮提取率
=
C
×N×V m
× 100%
式中： C － 稀释后样品溶液黄酮浓度（ mg·mL － 1定容体积（ 250mL） ； m － 样品质
收稿日期： 2013-10-08 接受日期： 2014-06-03 基金项目： 河北省科技厅计划项目（ 12222804） 作者简介： 钟尉方，女，讲师，主要从事天然活性物质提取研究。E-mail： zhongwei． 800@ 163． com 通讯作者： 刘红英，女，教授，主要从事食品安全研究。E-mail： liu066000@ sina． com
研究结果表明，随着乙醇浓度的升高总黄酮含量 先升高后逐渐降低，当乙醇体积分数为 60% 左右时黄 酮含量最高，因此选择 50% 、60% 、70% 的乙醇提取浓 度进行响应面分析。 2. 2. 2 超声时间 在料液比为 1∶ 20（ w / v） ，提取温度
图 3 提取时间对总黄酮含量的影响 Fig． 3 Effect of extraction time on total
核 农 学 报 2015，29（ 6） ： 1135 ～ 1141 Journal of Nuclear Agricultural Sciences
1135
文章编号： 1000-8551（ 2015） 06-1135-07
响应面法优化盐地碱蓬草总黄酮提取工艺研究
钟尉方 王岳鸿 刘红英
（ 河北农业大学海洋学院，河北 秦皇岛 066000）
1137
2. 2. 3 料液比 在乙醇体积分数为 60% 、提取时间 为 60min、提取温度为 60℃ 的条件下，考察不同料液比 对盐地碱蓬总黄酮含量的影响（ 图 4） 。
图 4 料液比对总黄酮含量的影响 Fig． 4 Effect of material liquid ratio on
total flavonoids content
摘 要： 以盐地碱蓬为原料，为优化盐地碱蓬中总黄酮的提取工艺，选择提取时间、提取温度、乙醇浓度、 液料比为自变量，总黄酮含量作为响应值，采用 Box-Behnken 设计方法，研究各自变量及其交互作用对 总黄酮提取量的影响。结果表明，响应面法优化所得的最佳工艺条件可靠，其最佳工艺条件为： 提取时 间 46min、提取温度 62℃ 、乙 醇 浓 度 64% 、料 液 比 1 ∶ 21。在 此 条 件 下 提 取 盐 地 碱 篷 总 黄 酮 含 量 为 6. 57mg·g － 1 。本结果与预测相近，可见响应面法优化盐地碱蓬草总黄酮提取工艺合理可行。 关键词： 盐地碱蓬； 响应面法； 黄酮； 提取工艺 DOI： 10. 11869 / j． issn． 100-8551. 2015. 06． 1135
得到总黄酮的提取量对提取时间（ A） 、提取温度（ B） 、 乙醇浓度（ C） 、料液比（ D） 的二次多项回归方程模型： Y = 6. 43 + 0. 005583A + 0. 094B + 0. 11C + 0. 079D + 0. 034AB － 0. 00675AC + 0. 046AD － 0. 042BC － 0. 086BD － 0. 011CD － 0. 12A2 － 0. 19B2 － 0. 13C2 － 0. 17D2 。 2. 3. 2 响应面回归模型的方差分析 为了检验回归 方程的有效性，进一步确定各因素对总黄酮提取率的 影响程度，对回归模型进行了方差分析，结果见表 2。
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提取时间为 45min 时盐地碱篷总黄酮含量最大， 而后逐渐趋于平衡略有下降，说明一定时间后，超声提 取不会提高盐地碱篷总黄酮的含量，可能会造成黄酮 的分解。故选择 30、45、60min 的提取时间进行响应面 分析。