可溶性丝素蛋白溶液脱盐技术

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丝素蛋白提取工艺

丝素蛋白提取工艺

丝素蛋白提取工艺
丝素蛋白是一种从蚕丝中提取的天然高分子纤维蛋白,具有优异的功能和生物相容性。

工艺如下:
准备原料:将蚕茧或下脚茧丝在沸水中脱胶,得到丝素纤维。

将丝素纤维溶入乙醇溶液中,两者固液比为1:20,调节pH值为8.2-8.7,静置60-150min,然后过滤得到滤液。

将滤液调节pH值为5.8-6.4,静置70-120min后,以转速3500-5000r/min离心15-25min,得到丝素蛋白粗提取物。

取蛋白粗提取物加入去离子水,调节pH为8.2-8.7,加入24份碱性蛋白酶,在温度45-55℃酶解24h。

随后在温度85-95℃下灭酶10-20min得到酶解液。

将酶解液继续减压浓缩至原溶液的8-15%,在温度25℃冷冻干燥,粉碎后即可得到所述丝素蛋白粉。

这种提取工艺简单、安全、有效,所得丝素蛋白具有较高的纯度和生物活性,可用于制备人工器官、生物材料、药物载体等。

需要注意的是,该工艺仅为其中一种方法,具体实施时可能需要根据实际情况进行调整和优化。

蛋白质脱盐

蛋白质脱盐

蛋白质脱盐——凝胶过滤法【实验目的】了解凝胶过滤层析技术的工作原理,掌握凝胶过滤层析技术,获得脱盐后的目的蛋白质溶液【实验原理】目的蛋白质用盐析法从细胞裂解中沉淀分离后,其中尚有大量的硫酸铵,需要脱盐才能获得较纯的样品。

常用的脱盐方法有透析法、电透析法和凝胶过滤法。

透析法及电透析法耗时长,样品稀释度大,不易放大进行大规模生产,所以工业生产中应用较少。

凝胶过滤层析脱盐过程中盐分子和蛋白质分子大小差异巨大,蛋白质溶液中小分子的盐分子随着层析流动相进入孔径较小的固定相致辞使其在层析中的迁移速率小,而蛋白质因分子尺寸较大,不能随流动相进入固定相中,因此在层析柱中的迁移速率大,首先从层析术中流出,实现脱盐。

用凝胶过滤法脱盐时,为了使盐同蛋白质充分地分离,除了应选用足够长的层析柱之外,还应对样品的体积加以限制。

样品的体积如果过大就导致蛋白质带同盐带不能分开。

一般来就,样品体积不超过床体积的30%。

这一数据的确定是根据盐和蛋白质的分离体积(Vsep)决定的。

两种物质分离体积的定义为,当两种物质的混合物在凝胶过滤层析柱上能够完全分离时的最小体积(参看图一)。

它在数值上等于:Vsep=V eB-V eAC1/2 V由于种种原因(例如样品在柱中的微小振动、固定相和流动相之间的不平衡,样品在柱中发生的纵向扩散等),产生的洗脱峰总是比理论值要宽得多。

如果上柱用的样品体积等于Vsep时,由于上述原因,两种物质的洗脱曲线会重叠造成分离失败(如图二所示),因此,上样体积应Vsep,但是上样体积过小会造成样品过度稀释。

为了提高脱盐样品的得率,上样体积一般15-20%床体积。

一般脱盐层析柱,应为粗短型柱,以提高脱的工作效率。

用凝胶过滤层析技术对白质溶液进行脱盐处理时,样品的浓度对分离效果,没有影响,但是,如果样品浓度过大,就会造成样品粘度增大,引起层析带和洗脱速率不稳定,造成洗脱曲线变宽和扭曲。

在选用洗脱液时,应考虑蛋白质的稳定性和蛋白质同层析介质之间的非特异性吸附作用,所以一般选用离子强度大于0.02的磷酸缓冲液或Tris-HCl缓冲液,如果脱盐后的蛋白质溶液要进行冷冻干燥处理时,应选用可以挥发的缓冲物质制备洗脱液,例如,乙酸铵、碳酸氢铵、乙酸乙烯二胺盐等。

传统脱盐方法及新型DSSMB脱盐技术

传统脱盐方法及新型DSSMB脱盐技术

28精细石油化工进展ADVANCES IN FINE PETROCHEMICALS第21卷第6期图1膜分离的基本原理与分类收稿日期:2020 - 09 - 07。

作者简介:曹媛,硕士,研发和设计工程师,主要从事精制分 离提纯领域的研究工作。

碱对离子交换树脂再生处理,会产生大量废酸废 碱污水。

在处理高盐溶液时,这点尤为突出;需要 对设备做防腐处理,运行费用高;且离子交换法阀 门繁多,对操作人员的要求较高,一旦操作不当, 会加大废酸废碱排放量。

以木糖生产中水解液的离子交换脱盐为例,每生产1 t 固体木糖需要使 用约2 ~3 t 酸和碱;通常情况下,一个10 000 t/a 的木糖生产线,高浓度的废水量约8 000 ~ 10 000 m3/d [3]。

随着环保力度的加大,废水处理成本的 增高,离交法脱盐技术的发展和应用面临挑战。

1.2膜分离法膜分离是指混合物在通过有孔的半透膜时,因 各组分粒径大小不同,部分较小粒径分子透过,较 大粒径分子被截留,从而实现选择性分离技术。

显 而易见,膜分离法更适用于分子量差距较大的物质 分离。

膜的功能和种类繁多,难用一种方法来明确 分类[121。

根据膜孔径大小一般可以分为:微滤膜 (1^)、超滤膜(1^)、纳滤膜(邮)、正/反渗透膜 (F0/R 0),膜分离的基本原理与分类见图1。

在工业生产中,为降低或消除溶液所含各种 盐类、游离酸和碱的处理方法一般都统称为脱 盐[1]。

在精细化工、食品与制药[2]、糖与糖醇生 产[3]、生物发酵与植物提取[4_5]、净化水制备[1’6] 等行业中,脱盐都是必不可少的生产过程。

脱盐 不仅要对产品精制提纯,以符合其产品标准和品质 要求;还可减少工业废水的排放,降低环境污染。

现有常用的脱盐方法包括:离子交换树脂法,膜分 离法(主要包括反渗透法和纳滤膜分离法)、电渗 析法、热分离法[7](如蒸馏法、蒸发脱盐[8]和冷却 冷冻法等)、沉淀离心法[8]、色谱脱盐[9]、微生物脱 盐法[W ]等。

蛋白质脱盐方法的介绍

蛋白质脱盐方法的介绍

蛋白质脱盐方法的介绍
蛋白大分子脱盐要求在样品制备中经常遇到,选择合适的脱盐方法显得非常重要。

在蛋白回收率、脱盐效率、蛋白生物活性、操作难易程度、耗时等方面需要综合考虑,找到合适的脱盐方式。

蛋白质用盐析法从细胞裂解中沉淀分离后,其中尚有大量的硫酸铵,需要脱盐才能获得较纯的样品。

常用的脱盐方法有透析法、电透析法和凝胶过滤法。

透析法及电透析法耗时长,样品稀释度大,不易放大进行大规模生产,所以工业生产中应用较少。

凝胶过滤层析脱盐过程中盐分子和蛋白质分子大小差异巨大,蛋白质溶液中小分子的盐分子随着层析流动相进入孔径较小的固定相致辞使其在层析中的迁移速率小,而蛋白质因分子尺寸较大,不能随流动相进入固定相中,因此在层析柱中的迁移速率大,首先从层析术中流出,实现脱盐。

一般脱盐层析柱,应为粗短型柱,以提高脱的工作效率。

用凝胶过滤层析技术对白质溶液进行脱盐处理时,样品的浓度对分离效果,没有影响,但是,如果样品浓度过大,就会造成样品粘度增大,引起层析带和洗脱速率不稳定,造成洗脱曲线变宽和扭曲。

丝素蛋白水解方法

丝素蛋白水解方法

丝素蛋白的水解方法可以使用多种方法,以下是其中两种常见的方法:
1.酸性水解法:
a. 将丝素蛋白加入酸性溶液中,常用的酸包括盐酸(HCl)或硫酸(H2SO4)。

b. 在适当的温度下搅拌反应混合物,通常在酸性条件下进行几小时到一天。

c. 将反应混合物中的无溶解物通过过滤或离心分离。

d. 获得的水解产物可以进一步纯化、干燥和使用。

2.酶解法:
a. 将丝素蛋白与适当的水解酶(如胰蛋白酶、粗木质素酶等)反应。

b. 在适宜的温度和pH条件下进行酶解反应,时间根据需要可长达数小时到数天。

c. 停止酶解反应,通常通过加入酶抑制剂或改变反应条件。

d. 滤除未水解的残渣,并进一步处理和提取所需的水解产物。

这些方法都可根据具体的实验目的和要求进行优化和调整,以获得所需的丝素蛋白水解产物。

再生丝素蛋白溶液脱盐新工艺及其应用

再生丝素蛋白溶液脱盐新工艺及其应用

再生丝素蛋白溶液脱盐新工艺及其应用李鹏飞;邓桦;马军;刘红斌;刘珍珠【摘要】为提高丝素蛋白溶液的脱盐效率,降低脱盐能耗,采用扩散渗析电渗析集成膜分离技术对丝素蛋白溶液进行脱盐,并初步探索所得溶液的应用.研究了丝素蛋白溶液质量分数和扩散渗析预脱盐率对脱盐效率和能耗的影响,同时将所得丝素蛋白溶液加入无水乙醇制备不溶性丝素蛋白粉,测定了产品氨基酸的组成并利用扫描电子显微镜对丝素蛋白粉进行表征.结果表明:最佳的脱盐技术参数为丝素蛋白溶液质量分数为5%、扩散渗析预脱盐率为40%,在此工艺条件下脱盐时间缩短至9 h,能耗(动力能耗除外)为3.81×10 -2kW·h/L;产品中丝氨酸和甘氨酸含量接近50%,丝素蛋白粉末粒径较小且分布均匀.%In order to improve the efficiency and reduce the energy consumption in the desalination of fibroin solution,the diffusion dialysis and electrodialysis membrane separation technique were applied to the desalination process, and the application properties of the silk fibroin solution were preliminarily explored. Factors affecting the desalting efficiency and energy, such as the concentration of silk fibroin and the pre-desalination rate were investigated. Moreover the insoluble silk fibroin powder was prepared by adding anhydrous ethanol to the silk fibroin solution, the amino acid composition of the product was determined and the silk fibroin powder was characterized by scanning electron microscopy. The results show that the optimal parameters for desalting is 5% of the concentration of silk fibroin and 40% of the pre-desalination rate. Under this condition, the desalination time is shortened to 9 h and the energy consumption(except dynamic power consumption)is3.81×10 -2kW·h/L; the total content of serine and gl ycine in the product is close to 50%, and scanning electron microscopic results show that the particle size of the powder is smaller and the distribution is uniform.【期刊名称】《纺织学报》【年(卷),期】2018(039)005【总页数】5页(P20-24)【关键词】丝素蛋白;脱盐工艺;扩散渗析;电渗析;丝素蛋白粉【作者】李鹏飞;邓桦;马军;刘红斌;刘珍珠【作者单位】天津工业大学纺织学院,天津 300387;天津工业大学纺织学院,天津300387;军事医学科学院卫生装备研究所,天津 300161;军事医学科学院卫生装备研究所,天津 300161;天津工业大学纺织学院,天津 300387【正文语种】中文【中图分类】TQ028.8蚕丝主要由丝素蛋白和丝胶蛋白组成,其中丝素蛋白作为核心纤维占总质量的75%左右,是提供蚕丝力学性能并且使蚕丝表现出多种优点的主要成分[1],正逐步应用于化妆品、医学[2]和生物等多个领域。

一种丝素蛋白的制备方法

一种丝素蛋白的制备方法

一种丝素蛋白的制备方法引言丝素蛋白是一种具有广泛应用前景的生物材料,它具有出色的力学性能、生物相容性和生物可降解性。

丝素蛋白的制备方法对于其在医学、纺织品、食品等领域的应用具有重要意义。

本文将介绍一种基于生物法提取和纯化的丝素蛋白制备方法。

实验步骤1. 丝素蛋白原料的准备:选择新鲜的蚕茧作为丝素蛋白的原料。

将蚕茧洗净并晾干。

2. 蚕茧脱胶:将蚕茧浸泡在去离子水中,用微波加热或酶法处理蚕茧,将蚕丝蛋白分离出来。

采用酶法时,可以选择较为常用的硫酸盐酶法。

3. 过滤和沉淀:将分离得到的丝素蛋白溶液进行过滤,以去除杂质。

然后使用浓度适宜的醋酸沉淀蛋白质。

4. 洗涤和干燥:将沉淀物用去离子水进行洗涤,以去除残留的醋酸。

洗涤完成后,在通风干燥的条件下将丝素蛋白沉淀干燥。

5. 纯化:采用凝胶过滤、离子交换、透析等技术进行丝素蛋白的纯化。

通过这些步骤可以去除掉蛋白溶液中的杂质,提高丝素蛋白的纯度。

6. 蛋白定量:采用Lowry法、Bradford法或Biuret法等蛋白定量方法,确定丝素蛋白的浓度。

7. 可选择性修饰:根据需要,可以对丝素蛋白进行一定的化学修饰,如酯化、甲酰化等,以增强其特定性质。

8. 储存条件:将制备好的丝素蛋白储存在干燥、低温的环境中,以保持其稳定性和活性。

结果与讨论本制备方法采用了生物法提取丝素蛋白,相较于传统的化学提取方法,具有无毒性、低成本、环境友好等优点。

制备出的丝素蛋白纯度较高,且力学性能良好,能够满足不同领域的需求。

结论本实验成功地展示了一种基于生物法提取和纯化的丝素蛋白制备方法。

通过合理的实验操作步骤,蚕茧中的丝素蛋白可以被高效地提取和纯化,为丝素蛋白的应用研究提供了可行的方法。

参考文献1. Kundu, B. et al. Silk proteins for biomedical applications: Bioengineering perspectives. Progress in Polymer Science, 59, 153-193 (2016).2. Nurkeeva, Z. S. et al. Technology of silk fibroin powder production as obtained from silkworm cocoons. International Journal of Biological Macromolecules, 113, 50-56 (2018).3. Vijayavenkataraman, S. et al. Versatile applications of silk fibroin-based biomaterials for biomedical engineering. Biosensors and Bioelectronics, 141, 111478 (2019).。

蛋白质质谱如何脱盐?

蛋白质质谱如何脱盐?

蛋白质质谱如何脱盐?蛋白质质谱是一种常用的生物分析技术,可以帮助科学家研究蛋白质的结构和功能。

然而,在进行蛋白质质谱分析之前,通常需要将样品中的盐类去除,以避免干扰质谱信号。

本文将介绍蛋白质质谱脱盐的方法步骤,帮助读者更好地理解这一过程。

1. 胶束吸附法胶束吸附法是一种常见的蛋白质脱盐方法。

该方法利用胶束的特性,将盐类吸附在胶束表面,从而实现蛋白质的脱盐。

具体步骤如下:准备一种适当的胶束溶液,如十二烷基硫酸钠(SDS)溶液。

将待脱盐的蛋白质样品与胶束溶液混合,并充分搅拌。

离心样品,使胶束与蛋白质沉淀。

将上清液转移至新的离心管中,即可得到脱盐后的蛋白质样品。

胶束吸附法的优点是操作简单,适用于大多数蛋白质样品。

然而,该方法可能会引入胶束残留物,对后续实验产生干扰。

2. 水合剂沉淀法水合剂沉淀法是另一种常用的蛋白质脱盐方法。

该方法利用水合剂与盐类形成复合物,从而使蛋白质与盐类分离。

具体步骤如下:准备一种适当的水合剂,如聚乙二醇(PEG)溶液。

将待脱盐的蛋白质样品与水合剂溶液混合,并充分搅拌。

将混合物置于低温环境中,使水合剂与盐类结合形成沉淀。

离心样品,将上清液转移至新的离心管中,即可得到脱盐后的蛋白质样品。

水合剂沉淀法的优点是能够有效去除大部分盐类,适用于对盐敏感的蛋白质样品。

然而,该方法可能会引入水合剂残留物,需要进一步的处理步骤。

3. 水质谱法水质谱法是一种高效的蛋白质脱盐方法,利用质谱仪的特性将盐类与蛋白质分离。

具体步骤如下:将待脱盐的蛋白质样品溶解于适当的溶剂中,如水或有机溶剂。

将样品注入质谱仪中,利用质谱仪的分离功能将盐类与蛋白质分离。

收集质谱仪输出的蛋白质信号,即可得到脱盐后的蛋白质样品。

水质谱法的优点是操作简单、高效,并且不引入任何残留物。

然而,该方法需要使用质谱仪设备,成本较高,不适用于所有实验室。

4. 离子交换法离子交换法是一种常用的蛋白质脱盐方法,利用离子交换树脂将盐类与蛋白质分离。

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图 4 体积流量随时间变化曲线 Fig. 4 The change of f lux with time
2. 3 平衡渗析器脱盐 平衡渗析器由若干格子构成 的方框把膜夹 在
其间, 构成若干小的传质分离室, 其基本原理 见图 5. 物料与清水呈逆向流动, 这样可获得较大的平均 推动力, 有效提高渗析速率. 由于实验中始终 通入 清水, 而将渗透液排出, 因而能够尽可能避免 Don2 nan 平衡, 从而最大程度地脱除物料中的盐分.
原 料液质量浓度/ g/ dL 6
脱盐效率/ ( L/ ( m2# h) )
0. 0086
脱盐 率/ % Biblioteka 8. 2丝素蛋白 回收率/ %
85. 22
9
0. 018
98. 5
83. 13
12
0. 014
99. 1
80. 33
2. 3. 2 体积流量 的选择 当液体流过膜面时, 由 于其粘性的作用, 在膜面附近形成流动边界层, 该 边界层可能是滞流边界层, 也可能是湍流边界 层, 但即使是湍流边界层, 在靠近膜面处, 仍有一滞流 内层, 扩 散 传 质 阻 力 主 要 存 在 于 滞 流 内 层 和 膜 上[ 7] . 流速越快, 滞流内层越薄, 越有利于传质. 但 实验表明, 脱盐率并非随体积 流量增加而增加( 见 图 7) , 当体积流量小于 40 L/ h 时, 脱盐率随流量增 加而增加, 而当体积流量大于 40 L/ h 时, 脱盐率反
氮可溶解指数( NSI) 的测定: 根据 AACC 方法
46223. 称取 1 g 可溶性丝素粉末于 50 mL 烧杯中, 量
取 40 mL 去离子水, 于室温下搅拌 120 min, 然后定
容至 50 mL, 静置几分钟, 取上层液 1 500 r/ min 离 心 10 min, 取离心后的上清液 10 mL, 采用微 量凯 氏定氮法[4] 测定蛋白质的质量, 另用微量凯氏定氮 法测定脱盐前样品的总氮.
2. 2. 3 体积流量与时间关系 体积流量随时间变 化见图 4. 超滤开始 3 min, 体积流量急剧下降, 此 后, 虽然体积流量仍在下降, 但下降趋势趋于缓和, 最后基本趋于稳定. 在脱盐过程中, 由于膜边 界层 的出现, 因而最初体积流量急剧下降, 随着脱 盐时 间增加, 逐渐形成稳定的浓差极化边界层, 使 得体 积流量下降趋缓, 最后, 体积流量趋于 稳定. 同时, 在脱盐过程中, 由于浓差极化产生, 使膜面受 到污 染, 也导致膜体积流量降低.
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无锡轻工大学学报
孔, 有可能阻塞通道, 因而起始体积流量低于清水; 随着超滤进行, 膜受到大分子的污染, 即使增 加工 作压力, 体积流量也只是平缓增加. 为了防止 膜被 压密的现象, 同时也为控制压力降值, 工作压 力选 定为 0. 2 MPa.
第 23 卷
图 3 体积流量随压力变化曲线 F ig. 3 Ef fect of pr essure on flux
( 江南大学 食品学院, 江苏 无锡 214036)
摘 要: 利用超滤和平衡渗析两种技术脱除溶丝液中的 CaCl2, 结果表明, 溶丝液经中空纤维超滤
脱盐, 其脱盐率达 86. 57% , 回收率达 74. 20% , 氮溶解指数( NSI) 达 3. 40% ; 而经平衡渗析脱盐, 其
脱盐率达 98. 5% , 回收率达 83. 13% , 氮溶解指数( NSI) 达 97. 85% . 因此, 平衡渗析是适合制备可
1. 4 丝素蛋白相对分子质量测定
凝胶: Sephacryl S2200; 色 谱柱: 1. 6 cm @150
cm; 洗脱液: 0. 1 mol/ L 磷酸盐缓冲溶液; pH 7. 0; 体
积流量: 18 mL/ h; 检测波长: 220 nm. 蛋白质质量测定: 微量凯氏定氮法[ 4] . Ca2+ 质量测定: EDTA 滴定法[4] .
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采用超滤膜技术, 提高了产品的质量、收率和纯度. 在大豆蛋白和卵蛋白的浓缩精制以及牛乳浓 缩工 艺中应用, 产品品质也有较大程度的提高. 作 者采 用聚砜管式中空纤维膜处理溶丝液.
1 材料与方法
成的, 主要部分的相对分子质量约为 7 000. 因 此, 在进行膜分离除盐时宜选用截留相对 分子质量为 10 000 的膜.
图 5 平衡渗析基本原理图 Fig. 5 Theor y of dialysis
2. 3. 1 进料液质量浓 度的选择 从表 1 可看 出, 进料液质量浓度为 9 g/ dL 脱盐率达到 98. 5% . 因 为, 当质量浓度大于 9 g/ dL 时, 溶丝液的粘度急剧 上升( 见图 6) , 随着粘度升高, 抑制了传质速率, 从 而延长了脱盐时间. 若质量浓度小于 9 g/ dL, 粘度 小, 但单位时间处理量少, 因而效率偏 低. 因此, 脱 盐实验选择 9 g/ dL 的进料质量浓度.
超滤技术在蛋白质的分 离提纯领域已得 到广 泛的应用. 如酶制剂的浓缩提纯, 与传统技术相比,
收稿日期: 2003210220; 修回日期 : 2003211218. 作者简介: 苏锋( 19732 ) , 男 , 广西玉林人, 食品科学与工程硕士研究生.
第4期
苏 锋等: 可溶性丝素蛋白溶液脱盐技术
丝素蛋白回收率=
脱盐后料液中蛋白质的质量 脱盐前料液中蛋白质的质量
@10 0%
脱盐率=
脱盐后料液中盐质量 脱盐前料液中盐质量
@10
0%
氮可溶解指数(
NSI)
=
水溶性氮 总氮
2 结果与讨论
2. 1 溶丝液中丝素蛋白的相对分子质量分布
从凝胶过滤图谱( 见图 1) 中可以看出, 煮沸时 间为 2~ 5 min[5] 的样品中可溶性丝素蛋白相对分 子质量在较宽范围内呈连续分布, 它是由多组分构
第 23 卷第 4 期 2004 年 7 月
无锡轻工大学学报 Journal of Wuxi Universit y of Light Indust ry
文章编号: 10092038X( 2004) 0420056204
可溶性丝素蛋白溶液脱盐技术
Vol. 23 No. 4 Jul. 2004
苏 锋, 杨瑞金, 许时婴
图 2 水体积流量随温度变化的曲线 Fig. 2 Effect of temper atur e on flux
2. 2. 2 压力对膜体积流量的影响 图 3 是膜体积 流量与压力关系变化曲线. 由图 3 可看出, 体积流 量随压力增加而增加, 但是料液的起始体积流量小 于清水, 且体积流量增长与清水比较而言, 也比较 平缓. 这是因为膜开始工作后, 大分子迅速进入膜
1. 3 脱盐
1. 3. 1 中空纤维膜超 滤脱盐工艺条件 膜材料: 聚砜; 截 留相对分 子质量: 6 000~ 10 000; 进口 压
力: 0. 2 MPa; 出口压力: 0. 15 MPa; 操作温度: 25~ 28 e ; 膜面积: 2 m2.
1. 3. 2 平衡 渗析 器脱 盐工 艺条 件 操作 温度: 17 e ; 操作压力: 常压; 膜面积: 0. 8 m2.
( School of F ood Science and Technology, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China)
Abst ract: In t his paper, effects of removing CaCl2 from silk fibroin solution wit h two kinds of membrane separat ion technologies ( ultrafilt rat ion、dialysis) were invest igated. T he results showed that the desalt ing rat io, recovery rat io and the NSI of dialysis technology were 98. 5% , 83. 13% and 97. 85% , respectively, which were higher t han t hose of ult rafiltrat ion. Key words: silk fibroin; ult rafilt rat ion dialysis; desalt
化钙溶解丝素, 氯化钙类似于普通盐, 价格便宜, 且 无毒无害.
由于采用高浓度盐溶液溶解丝素, 脱盐成为可 溶性丝素粉末生产工艺过程中的重要环节. 实验室 规模采用透析袋脱盐[2, 3] 处理量小, 耗时长且费用 高. 蛋白质是热敏物质, 采用常温无相变的膜分离 技术可以防止蛋白质变性, 达到较高的回收率. 作 者采用中空纤维超滤和平衡渗析两种 技术进行脱 盐比较, 以选择一种高效的脱盐方法.
2. 2 中空纤维膜超滤过程中膜体积流量的变化 2. 2. 1 温度对膜体积流量的影响 膜体积流量是 表征膜的分离性能的主要参数之一[6] . 超滤过程的 透水体积流量受到温度、压力、料液质量浓度等因 素的影响.
超滤器中加入 2 L 浓溶丝液, 加水稀释至 10 L 后进行超滤脱盐. 温度对膜水体积流量的影响见图 2. 从图 2 可以看出, 温度对组件水体积流量的影响是 比较明显. 随着温度的升高, 渗透体积流量增大. 由于 温度升高, 料液蛋白质分子和水分子的运动加快, 流 动阻力下降, 因而粘度下降, 水体积流量增加.
图 1 可溶性丝素蛋白的凝胶过滤洗脱色谱图 Fig. 1 Gel f iltration chr omatogr aphy of soluble silk f i2
broin pr otein 凝胶: Sephacryl S2200; 色谱柱: 1. 6 cm @150 cm; 洗脱液: 0. 1 mol/ L 磷酸盐缓冲溶液, pH 7. 0; 体积流量: 18 mL/ h; 检测波长: 220 nm; 相对分子质量标 准蛋白 质: A: 二 磷酸果 糖酶 ( Aldolase) 158 000; B: 牛血清蛋白( albumin) 68 000; C: 鸡蛋白 蛋白( albumin) 45 000; D: 胰 凝乳 蛋白 酶 原 ( Chymot rypsinogen A) 25 000; E: 细 胞 色 素 C ( Cy2 t ochrome) 12 500
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