随机贴块法培养大鼠主动脉内皮细胞及其鉴定
糖尿病大鼠骨髓内皮祖细胞的培养与鉴定
长 。培 养 第 ７天细 胞 Ｃ ３ Ｄ ４和 Ｃ １３均呈 阳性 ， 光共 聚焦 显 微 镜 观 察 显 示 Ｅ Ｃ可 以 同 时 吞 噬 ａ —Ｌ Ｌ并 结 合 Ｕ Ａ一１ Ｄ３ 激 Ｐ ｃ Ｄ Ｅ 。 论 糖 尿 病 大 鼠 骨髓 可 以分 离 培 养 出 内皮 祖 细 胞 ， 能 体 外 扩 增 ， 糖 尿 病 内皮 祖 细 胞 的 移植 研 究 奠 定 了基 础 。 并 为
关键词 糖尿病 骨髓 内皮 祖 细 胞
Ｃ ｌ ｒ ａ ｄＩｅ ｔ ｃｔ ｎｏ ｎ ｏ ｅａ Ｐ ｏｅ ｉ ｒ ｅｓ ｒｍ Ｂ ｎ ｒｏ ｆ ｉ ｅ ｃ ａ Ｈ ａ ｇ Ｑ ｒｎ ，Ｙ ｈＸ ｎ ｊｎ Ｌｕ ｙ 昭 ， ｕ ｕｅ ｎ ｎ ｆ ａ ｏ ｆ ｄ ｔ ｌ ｌ ｒ ｇｎ ｏ ｌ ｏ ｏ ｅ ｔ ｄ ｉ ｉ ｉ Ｅ ｈ ｉ ｔ Ｃ ｌｆ Ｍａ ｒｗ ｏ ａ ｔ ｔ Ｄ ｂ ｉＲ ． ｕ ｎ ｉ ｇ ａ ｉ ｕ ， ｉ ０ ｏ ｇ
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大鼠心脏血内皮祖细胞的分离培养、鉴定与分化
ａ ｄｅｉｅ ｉｌ ｙ ｈｒｘ２０ ， （） ５ ｎ ｐｄ ｍｏｏ ． ｏａ，０ ２５ ５： ２ ｇＴ ７ ４
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４参考 文献
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江 西 医药 ２０ ０ ８年 第 ４ ３卷 第 １ Ｏ期
Ｉ一 、Ｌ １ Ｌ ６ Ｉ一 ０的浓 度显 著 升 高 ， 明 内毒素 入血 后 刺 表 激机 体产 生多种 炎性 介质 ．这些 介质通 过直 接或 间 接 的相 互 作用 ．产 生 炎 症 级 联 反 应 ．引起 Ａ ｌ Ｌ 或
大鼠骨髓来源内皮祖细胞的分离培养及鉴定
细胞 ， 然后用添加有多种细胞因子的内皮细胞基础培养基（ ｅ ｎ ｄ ｏ ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ａ ｌ ｂ ａ ｓ ａ ｌ ｍｅ ｄ ｉ ｕ ｍ， Ｅ Ｂ Ｍ一 ２ ） 诱 导培养获 取 Ｅ Ｐ Ｃ ｓ 。
通过形态学观 察 、 Ｃ Ｄ １ ３ ３和 Ｖ Ｅ ＧＦ Ｒ 一 ２抗 体 免 疫 荧 光 染 色 并 结 合 Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ － ＵＥ Ａ － １和 Ｄ ｉ ｌ — ａ ｃ — Ｌ ＤＬ 的 摄 取 功 能 来 对 Ｅ Ｐ Ｃ ｓ 进行鉴定分析 ， 同时通过体外管样结构形成能力对 Ｅ Ｐ Ｃ ｓ 进 行功能性 评价。结果 在 Ｅ Ｂ Ｍ一 ２培 养 基 中 诱 导
12实验方法121epcs的分离培养选用约150g的雄性清洁级sd大鼠采用颈椎脱臼法处死浸泡在70的酒精中消毒510min然后将股骨胫骨迅速从大鼠中剥离下来置于已消毒并盛有含双抗的磷酸缓冲液pbs平皿中将股骨胫骨上残留的肌肉剔除干净用手术剪分别剪去股骨胫骨的两端打开骨髓腔用5ml注射器吸取4ml含10胎牛血清fbs的dmem培养基从骨髓腔的一端将骨髓冲出到培养皿中用吸管将平皿中的细胞悬液轻轻吹打混匀然后将悬液贴壁轻轻加入到预置等体积percoll大鼠淋巴细胞分离液1083gml的离心管中悬于上层2500rmin离心30min用吸管小心地将中间云雾状白膜层的单个核细胞吸取到另一离心管中用dmem培养基洗涤两次1000rmin5min弃上清液用含10fbs和多种细胞因子的ebm2培养基重悬细胞以1105个cm2接种于培养板中1d后将未贴壁细胞悬液接种到fn预先包被好的6孔细胞培养板中置于饱和湿度375co2恒温培养箱
培养 ７ ｄ后 ， 出现 类 似 于 血 岛样 的 细 胞 集 落 ， 集 落 中 央 的细 胞 呈 圆 形 ， 周 边 的细 胞 呈 放 射 状 ； ８ ０ 以上 的 细 胞 都 是 Ｃ Ｄ１ ３ ３ ／ Ｖ Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ 一 ２ 细 胞 ， 并 且 这 些 细 胞 同 时能 够 摄 取 Ｄｉ ｌ — ａ ｃ — Ｌ Ｄ Ｌ和 结 合 Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ － ＵＥ Ａ － １ ； Ｅ Ｐ Ｃ ｓ 在 基 质 胶 表 面 形 成 管 腔 样 结 构 。 结论 密 度 梯 度 离 心法 结 合 差 时 贴 壁 法 从 骨 髓 中 分 离 获 得 的 单 个 核 细 胞 ， 然后经 Ｅ Ｂ Ｍ一 ２条 件 培 养
大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的培养与鉴定
大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的培养与鉴定徐索文肖平喜陈健文乐康沈晓燕黄河清刘培庆【摘要】目的建立大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的培养模型，为体外研究动脉粥样硬化的发病机制提供重要的实验手段。
方法采用改良的植块贴壁法，成功建立大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的培养模型;分别用倒置显微镜和SABC试剂盒对培养细胞进行形态学观察、免疫组织化学和免疫荧光鉴定(平滑肌细胞特异性的α- SM - actin)。
结果原代培养的血管平滑肌细胞在接种后3天开始从组织块周围游出，光镜下培养细胞呈梭形，放射状生长和典型的“峰谷”状生长;免疫组化和荧光染色显示胞浆内α平滑肌肌动蛋白阳性表达，证实培养的细胞为血管平滑肌细胞。
结论本法简便、可靠、经济、短期内可获大量高纯度、功能良好的血管平滑肌细胞，可作为研究动脉粥样硬化和移植血管再狭窄机制的有效模型。
【关键词】大鼠;胸主动脉;植块法;血管平滑肌细胞[Abstract]ObjectiveTo establish the culture model of rat aorta vascular smooth muscle cells (VSMCs) to provide important experimental method for the pathogenesis research of atherosclerosis in vitro. MethodsEmploying the explants technique, the primary and sub-culture were completed bymodified tissue-piece inoculation and trypsin digestion respectively. The cultured cells were identified by phase contrast microscopy and immunohistochemical and immunofluorescent staining.ResultsAfter 3 days of inoculation of tissue-pieces, VSMCs migrated from the vessel pieces. The cultured cells showed the typical “hills and valleys”morphological features under the microscope. Immunohistochemical and immunofluorescent staining with monoclonal antibody against mouse α-SM- actin demonstrated these cells were positive. ConculsionIt is a simple and reliable method for obtaining highly purified and satisfactory VSMCs in short term, providing a favorable experimental platform for research into the mechanism of vascular proliferous diseases such as atherosclerosis and restenosis.[Key words]rat;thoracic aorta;explants method;vascular smooth muscle cells血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)的异常增殖、迁移、泡沫化及凋亡与冠状动脉旁路移植术(CABG)和经皮冠脉腔内血管成形术(PTCA)术后血管再狭窄、颈动脉球囊损伤术致新生内膜形成(neointima formation)及动脉粥样硬化(atherosclerosis)密切相关[1~4]。
不同来源内皮细胞生物学性状的比较
不同来源内皮细胞生物学性状的比较许慧芳;王俊力;邱昕;万小林;陈国华【摘要】目的:比较大鼠胸主动脉来源的成熟内皮细胞和骨髓间充质干细胞(MSCs)来源的内皮细胞生物学性状及各自Akt表达的情况.方法:分离培养大鼠胸主动脉来源内皮细胞,诱导MSCs分化为内皮细胞,对2组细胞的细胞形态、增殖能力、成管能力进行比较,通过Western blotting比较其表面标记表达情况及Akt表达情况.结果:MSCs来源的内皮细胞形态学与成熟内皮细胞不尽相同,增殖能力和成管能力均强于后者.2组细胞均可表达内皮细胞的表面标记,但成熟内皮细胞表达强于分化而来的内皮细胞(P＜0.05).Akt表达在分化而来的内皮细胞明显高于成熟内皮细胞(P＜0.05).结论:MSCs分化而来的内皮细胞和成熟内皮细胞存在生物学性状和Akt 表达差异.【期刊名称】《神经损伤与功能重建》【年(卷),期】2016(011)001【总页数】4页(P1-4)【关键词】内皮细胞;骨髓间充质干细胞;Akt【作者】许慧芳;王俊力;邱昕;万小林;陈国华【作者单位】华中科技大学附属武汉市中西医结合医院神经内科武汉430022;华中科技大学附属武汉市中西医结合医院神经内科武汉430022;华中科技大学附属武汉市中西医结合医院神经内科武汉430022;华中科技大学附属武汉市中西医结合医院神经内科武汉430022;华中科技大学附属武汉市中西医结合医院神经内科武汉430022【正文语种】中文【中图分类】R741;R321内皮损伤所致的内皮功能失调是动脉粥样硬化的始动因素，血管受损部位内皮化推迟及炎症细胞浸润、平滑肌细胞迁移和过度增殖可促进血栓形成及新内膜增生，导致靶血管狭窄发生[1]，快速再内皮化对于恢复正常血管功能和调节新生血管内膜增生有至关重要的作用。
成熟内皮细胞在损伤区域的再生缓慢，大多数情况下，新生的内皮细胞增殖、迁移、再排序是一个不完整的过程[2]。
近年来有很多研究聚焦于内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）[3]和干细胞来源内皮细胞，证实两者对于血管再生和再内皮化的作用，这提示干细胞来源的前体细胞或内皮细胞可能是移植修复内皮损伤的突破口。
大鼠血管内皮祖细胞培养及鉴定
中西 医 结 合 心 脑 血 管 病 杂 志 ２ １ ０ ０年 ５月 第 ８ 第 ５期 卷
・５ ３ ６ ・
大 鼠血 管 内皮 祖 细 胞 培 养 及 鉴 定 Ｄ
朱
摘要 ： 的 目
江 ， 煜 敏 ， 朝红 ， 文 欣 刘 孔 道
探 索 骨 髓 来 源 的 血 管 内 皮祖 细 胞 的 分 离培 养 方 法 ， 缺 血 性 疾病 治 疗 找 到 新 的 移 植 细 胞 来 源 。 方 法 采 集 Ｓ 雄 为 Ｄ
组 经过 ＣＤ３ ４免 疫 荧 光 、 ＣＤ１ ３、 ３ ＦＬＫ一１免 疫 组 化 鉴 定 呈 阳 性 ， 能特 异 性 吸ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ附 Ｆ ＴＣ—ＵＥ 一 内吞 ＤＩ 并 Ｉ Ａ 和 Ｉ 一Ａｃ —ＬＤＬ。 结 论 自体
骨髓 细胞 通 过 贴壁 换 液后 可 以分 离培 养 出 内皮祖 细 胞 ， 贴 壁 细 胞 经 过 体 外 诱 导后 大 量 扩 增 ， 通 过 表 面 标 记 物 鉴 定 可 以确 认 为 内 取 并 皮 祖 细 胞 ， 非 贴 壁 细 胞 不 能 大 量增 殖 ， 将 贴 壁 分 离方 法 来 筛选 内皮 祖 细胞 ， 方 法 简 易 ， 能 满 足 细 胞 移 植 的 需要 ， 而 故 此 并 因而 ， 移 植 在 治 疗 脑 缺 血 引起 的 内皮损 伤 应 该 有 较 好 的 临床 应 用 前 景 。
大鼠心肌细胞的分离鉴定以及培养
大鼠心肌细胞的分离鉴定以及培养心肌细胞是构成心脏组织的重要细胞之一，对于心脏疾病的研究和治疗具有重要意义。
在进行心脏细胞的研究和培养过程中，对大鼠心肌细胞的分离、鉴定以及培养是非常关键的步骤。
本文将介绍大鼠心肌细胞的分离、鉴定以及培养的方法和步骤，希望能够帮助读者更好地理解和掌握这一关键技术。
一、大鼠心肌细胞的分离大鼠心肌细胞的分离是进行心肌细胞培养的第一步，其关键在于有效地分离心肌细胞，保证细胞的纯度和活力。
以下是常用的大鼠心肌细胞分离的方法：1. 心脏采集：首先需要从大鼠体内取出心脏组织，最好选择小鼠、大鼠等小型动物，以便于获取足够数量和较为纯净的心肌细胞。
2. 心室组织的分离：将心脏组织置于含有氧气的离心纯化液中，迅速剪下心脏，并去除心包膜、心尖等结缔组织，然后将心室组织切成小段。
3. 细胞的分离和纯化：将切成小段的心室组织放入含有0.1%胰蛋白酶和0.1%重组胰岛素的胰酶溶液中进行消化，去除结缔组织和细胞外基质，然后用离心分离出心肌细胞。
4. 心肌细胞的过筛和纯化：经过离心后，得到的上清液中含有大量的心肌细胞和其他细胞。
通过过筛的方法，可以进一步提取纯净的心肌细胞，并将其进行鉴定和培养。
1. 形态鉴定：观察分离得到的心肌细胞在显微镜下的形态特征，包括细胞形状、大小、结构等。
正常的心肌细胞应该呈长条形、有交叉条纹，并具有丰富的胞浆。
2. 免疫细胞化学鉴定：通过染色技术，使用与心肌细胞特异蛋白相关的抗体标记心肌细胞，如肌动蛋白、肌钙蛋白等，观察其在心肌细胞中的表达情况，以确定其纯度和特异性。
3. 功能鉴定：通过检测心肌细胞的功能特性，如心肌收缩力、电生理特性等，来判断心肌细胞的活性和健康程度。
可以通过贴壁法、钙离子荧光示踪等技术手段来进行功能鉴定。
通过以上的鉴定方法，可以全面地评估分离得到的心肌细胞的纯度和活性，为后续的心肌细胞培养和实验奠定基础。
在分离和鉴定得到的心肌细胞可以进行培养，为心脏疾病的研究和治疗提供重要的实验材料。
三种分离大鼠主动脉内皮细胞方法的比较研究
砸疆环学 杂 志
２ ０ 年第 １ 卷第 ４ ０７ ７ 期
基础与实验
维普资讯
１ ６
张迎红 ， 胡
豫， 梅
恒． 等
微 镜下 见细 胞 收 缩 变 圆 ， 胞 间 隙 增 宽 后 ， 消 化 细 弃 液 ， １ ２比例 传代 。 按 ：
１６ ＲＡ Ｃ特性鉴 定 ． Ｅ
用 眼科 剪将 主动脉 剪成 １ｍｍ×１ｍｍ 的小块 ， 眼 用
雄性 Ｓ Ｄ大 鼠 ， 体重 １ ０ ０ ， ５ ～２ ０ｇ 由华 中科 技 大 学 医 学 院 实 验 动 物 中心 提 供 。Ｄ Ｈａ ｋ － ｎ ｓ干 粉 、 ． ０ １ ５ 胰 蛋 白酶 、 ２ 明胶 、 Ⅱ型 胶 原 酶 、 血清 培 养 基 无
１４ Ｒ Ｃ 纯 化 ． ＡＥ
脉 至髂 总动脉 分支处 ， 出放 人 Ｄ Ｈａ ｋ 液 中 。无 取 — ｎｓ 菌剥 除血管 外膜 的脂 肪 和 纤 维组 织 ， － ｎ ｓ液 冲 Ｄ Ｈａ ｋ 洗 血管腔 。将 血 管 移人 另 一 有 培 养液 的培 养皿 中 ，
采用 机 械 刮 除法 ， 菌条 件 下用 玻 璃针 反 复 刮 无
张迎红 胡 豫 梅 恒 王华芳 郭 涛 魏文宁
［ 图 分 类 号］ Ｒ ２ ． — 中 ３９２ ８ ［ 献标 识码 ］ Ａ 文 ［ 章 编 号 ］ １０ — １４ （０ ７ ０ —０ １ —０ 文 ０ ５ ７０ ２ ０ ）４ ０ ５ ２
●脐 皮易得养 固 内胞获培 妊 一静 细于和 脉
脉 至髂 总动 脉 分 支 处 ， 出 放 人 Ｄ Ｈａ ｋ 取 — ｎ ｓ液 中 ， 结
扎 两端 ， 放人 ６ ０Ｃ无 菌水 中停 留 ２Ｓ后立 即取 出 ， 放 人 盛有 ４ Ｄ－ ｎ ｓ液 的小 瓶 中 。无 菌 剥 除 血 管 ℃ Ｈａ ｋ
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２１ ７ ７
・
论
著 ・
随机 贴 块 法培 养 大 鼠主动 脉 内皮细 胞 及 其鉴 定
宋 明宝 ， 黄 岚△， 于学 军 ， 朱光 旭 ， 张坡 ， 于世 勇， 赵 刚， 康华 利
Ｓ ＯＮＧ Ｍｉ ｎ ｇ— ｂ ａ ｏ， Ｈ ＵＡＮＧ Ｌ ａ ｎ， ｙＵ Ｘｕ ｅ ｊ ｕ ｎ， ｅ ｔ ａ １ ．
（ Ｔ ｈ ｅ Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｃ ａ ｒ ｄ ｉ ｏ ｖ ａ ｓ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ Ｄｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｓ ｏ ｆ ＰＬ Ａ， Ｘｉ ｎ ｑ ｉ ａ ｏ Ｈｏ ｓ ｐｉ ｔ ａ ｌ ，
ｄｏｔ ｈｅ ｌ ｉ ａ ｌ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕｒ ｅ ｄ ｂｙ ｒ ａ ｎｄｏ ｍ ｅ ｘ ｐｌ ａ ｎｔ ｅ ｄ ｒ ａ ｔ ａ ｏ ｒ ｔ ｉ ｃ ｗａ ｌ ｌ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕｅ ａ ｎｄ ｐｕ ｒ ｉ ｆ ｉ ｅ ｄ ａ ｃ ｃ ｏｒ ｄｉ ｎｇ ｔ ｏ ｄｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎｔ ｄ ｉ ｇ ｅ ｓ ｔ ｅ ｄ ｒ ａ ｔ ｅ ． Ｔｏ ｉ ｄｅ ｎｔ ｉ ｆ ｙ ｅ ｎｄ ｏｔ ｈｅ ｌ ｉ ａ ｌ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ 。 ｉ ｔ ｓ ｍｏ ｒ ｐ ｈｏｌ ｏ ｇｉ ｃ ａ ｌ ｃ ｈ ａ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｓ ｔ ｉ ｃ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｏｂｓ ｅ ｒ ｖｅ ｄ ａ ｎｄ ｉ ｍｍ ｕ ｎｏ ｆ ｌ ｕ ｏｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎｃ ｅ ｓ ｔ ａ ｉ ｎ ｉ ｎ ｇ ｆ ｏ ｒ ｖ ｗ Ｆ ａ ｎｔ ｉ ｇｅ ｎ ａ ｎｄ ｉ ｎ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ ｔ ｕｂ ｅ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｔ ｉ ｏｎ ａｎ ａｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｄ ｏｎｅ ． Ｒｅ ｓ ｕｌ ｔ ｓ Ｅｎｄ ｏｔ ｈｅ ｌ ｉ ａｌ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｇ ｒ ｅ ｗ ｏｕ ｔ ｆ ｒ ｏ ｍ ｅ ｘｐｌ ａ ｎｔ ｓ ａ ｔ ３ ｄ， ａ ｎｄ ｇｒ ｅ ｗ ｔ ｏ ｃ ｏ ｎｆ ｌ ｕ ｅ ｎｃ ｅ ａ ｔ １ ｗｅ ｅ ｋ． Ｉ ｍ ｍ ｕｎ ｏ — ｆ ｌ ｕ ｏｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎｃ ｅ ｓ ｔ ａ ｉ ｎ ｉ ｎ ｇ ｆ ｏｒ ｖ ｗ Ｆ ａ ｎｔ ｉ ｇｅ ｎ ａ ｎｄ ｉ ｎ ｖｉ ｔ ｒ ｏ ｔ ｕｂｅ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｔ ｉ ｏｎ ａ ｎａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｐｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ． Ｃｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ Ｔｈｉ ｓ ｉ ｓ ａ ｃ ｏ ｎｖ ｅ ｎｉ ｅ ｎｔ ａ ｎｄ ｗｉ ｄｅ — ｌ ｙ ａ ｐｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｂｌ ｅ ｍｅ ｔ ｈ ｏｄ ｔ ｏ ｃ ｕｌ ｔ ｕｒ ｅ ＲＡ ＥＣｓ ．
细胞生长 ， １周 可 融 合 成 层 。抗 ｖ ｗＦ抗 体 免 疫 荧光 染 色及 内皮 细 胞 体 外成 管试 验 阳 性 。 结论 本 方 法 简便 易行 ， 适 于推 广 应 用 。 关键词 ： 大鼠； 细 胞培 养 ； 内皮 细 胞
中 图分 类 号 ： Ｒ ３ ６ ５ ． ４ ４ ６ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ １ － ８ ３ ４ ８ （ ２ ０ ０ ７ ） ２ １ — ２ １ ７ ７ — ０ ２
Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ： ｒ ａ ｔ ｓ；ｃ ｅ ｌ ｌ ｃ ｕｌ ｔ ｕｒ ｅ； ｅ ｎｄｏ ｔ ｈｅ ｌ ｉ ａｌ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ
机械 、 炎性 等 损 伤 因 素 损 伤 血 管 内 皮 可 诱 导 炎 性 细 胞 浸
入、 血 管平 滑肌 细胞 （ ｖ ａ ｓ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｓ ｍｏ ｏ ｔ ｈ ｍｕ ｓ ｃ ｌ ｅ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ， ＶＳ ＭＣ ｓ ） 增
Ｔｈｅ Ｔｈｉ ｒ ｄ Ｍｉ ｌ ｉ ｔ ａｒ ｙ Ｍｅ ｄｉ ｃ ａｌ Ｕｎ ｉ ｖｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ， Ｃｈｏ ｎ ｇｑ ｉ ｎｇ ４ ００ ０３ ７， Ｃｈｉ ｎａ）
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ａ ｃ ｏ ｎ ｖ ｅ ｎ ｉ ｅ ｎ ｔ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｔ ｏ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｎ ｄ ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｙ ｒ ａ ｔ ａ ｏ ｒ ｔ ｉ ｃ ｅ ｎ ｄ ｏ ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ａ ｌ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ （ ＲＡＥ Ｃ ｓ ） ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｅ ｎ
Ｃｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｎｄ ｉ ｄ ｅ ｎｔ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｅ ｎ ｄｏ ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ａ ｌ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｆ ｒ ｏ ｍ ｒ ａ ｎｄ ｏ ｍ ｅ ｘ ｐｌ ａ ｎｔ ｅ ｄ ｒ ａ ｔ ａ ｏｒ ｔ ｉ ｃ ｗａ ｌ ｌ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ
（ 第三 军 医大 学新桥 医 院全 军 心血 管病研 究所 ， 重庆 ４ ０ ０ ０ ３ ７ ）
摘 要： 目的 寻 找 一 种 培 养及 鉴 定 大 鼠 主动 脉 内皮 细 胞 的 简便 方 法 。方 法 采 用 随 机 贴 块 法 培 养 大 鼠 主 动 脉 内 皮 细 胞 并
用 差 速 消 化 法加 以纯 化 ， 观 察 细 胞 形 态 学特 性 ， 用抗 ｖ ｗＦ抗 体 免 疫 荧光 染 色及 内皮 细 胞体 外 成 管 试 验 鉴 定 。结 果 培 养 ３ ｄ即 有