农残快速检测专用酶试剂的稳定性研究
酶试剂法快速检测常用农药残留的比较研究
酶试剂法快速检测常用农药残留的比较研究摘要：根据果蔬中农药残留检出的实际情况，采用市场上的3个商品化农残酶速测试剂盒对常见农药（水胺硫磷、敌敌畏、呋喃丹、毒死蜱、三唑磷、灭多威、氯氟氰菊酯、甲氰菊酯、百菌清、腐霉利和三唑酮）进行了灵敏度试验。
结果表明，酶试剂对腐霉利、氯氟氰菊酯、甲氰菊酯、百菌清、三唑酮5种农药无抑制反应或灵敏度较差，而对其余6种农药的反应较为灵敏，其灵敏度依次为敌敌畏、呋喃丹、三唑磷、毒死蜱、水胺硫磷和灭多威。
关键词：酶抑制法；快速检测；农药；灵敏度Comparative Study on Enzyme Reagent Method for Rapid Detection of CommonAbstract：The common residue of pesticides in fruits and vegetables，including isocarbophos，dichlorvos，carbofuran，chlorpyrifos，triazophos，methomyl，cyhalothrin，fenpropathrin，chlorothalonil，procymidone and triazolone，were analyzed by the 3 commercial enzyme inhibition kits with the pesticide residue rapid analyzer. The results showed that any enzyme reagent inhibition kit was not sensitive to procymidone，cyhalothrin，fenpropathrin，chlorothalonil and triazolone，it was only sensitive to six pesticides，the sensitivity to the six pesticides in order was dichlorvos，carbofuran，triazophos，chlorpyrifos，isocarbophos and methomyl.Key words：enzyme inhibition method；rapid detection；pesticide；sensitivity近年来我国农产品的农药残留状况得到了较好的控制。
酶抑制法快速检测农产品农药残留的研究与应用
曲， 吸光 度 为 ２ ． ７ ； 试 剂 Ｃ和试 剂 Ｄ的酶动力 在 ６ １ ０ 、 ７ １ ２ Ｓ
时 发生 弯 曲 ， 吸光 度一 直呈 上升趋 势 。通过 对 ５ 个 厂家
的试剂 进行 检测 可 以看 出 ， 试剂 Ｂ的酶动力 反应 时间最
长， 而时 间最 短 的是试 剂 Ａ， 结合酶抑 制率 的计算公 式可
以得 出 ， 当试 剂 的酶抑制 反应结 束之 后进行 对照分 析试 验时 ， 吸光值减小 ， 结果呈假 阴性 。而如果 当吸光反应数
值趋近 于 ０ 时， 则结果 为假 阳性 。
在酶抑制法快速检测过程 中， 不同酶的活 ｆ 生 并不一致 ， 直接影 响检测的抑制率 。而且试验试剂 的吸光值也会对试 验结果产生影响。因此 ， 建议先进行试验 ， 确定检测的一级 反应时间， 再进行检测。此外 ， 不同厂家生产的试剂的抑制
率不同， 建议制定统一的抑制率标准 ， 保障检测的可靠性 。
参 考 文 献 ［ １ ］ 程景 ． 酶抑 制 率 法 在 ４ 种 蔬 菜农 药 残 留快 速 检 测 中的 应 用［ Ｊ ］ ． 农 业 与技 术 ， ２ ０ １ ５ （ ４ ） ： ３ ．
在 日常 的检测 工作 中 ， 需 要通 过酶 抑制法 进行 大量
检测试 剂对灭多威 、 敌 百虫等农药较 为灵敏 ， 对氧化乐果 等农药反应较慢。经测试发现 ， 当试剂中的酶动力不断上
升之后 ， 农药对试剂 的抑制能力开始不断下 降 ， 最终 进人 平缓阶段 。在试验 中 ， 当酶 的活性值达 到 ０ ． ３ ～ ０ ． ６ 时， 农
同厂家试剂 的抑 制率 ， 并进 行对 比分析 。
浅谈农残快速检测技术及常见问题的解决方法
Z h o n g f e i n o n g y a o当前，安徽阜阳农业生产过程主要使用氨基甲酸酯、有机磷等农药，部分农药可残留在蔬果外表。
此类农产品和生物体内Ache（全称为“乙酰胆碱酯酶”）结合，导致酶活性受到抑制，致使人出现中毒症状。
将蔬菜和Ache之间进行萃取反应，可检测出农产品中农药残留情况。
但是，应用此检测技术，可能存在干扰因素，影响检测结果准确性，因此，探索出检测技术的问题的处理方式十分重要。
1、农残快速检测技术应用流程（1）准备阶段准备阶段，需要结合检测要求，合理选择检测仪器，对仪器进行自检，保证其功能良好。
同时检测过程需要利用信息技术，运用检测系统，保证信息获取的真实性。
选择智云达ZYD-NP6D 检测仪，该仪器光源稳定，有多个通道，带液晶显示屏，能够对蔬果中的氨基甲酸酯类农药快速检测。
自检过程先预热10~ 15min，保证光源的稳定性，同时登陆农残快检系统，设置端口和检测仪相连，并将之前检测的参数值、检测信息等清除。
（2）制备对照液并测试对照液的制备过程，选择缓冲液2.5mL，酶100uL，将二者加入到比色皿当中，待其均匀混合之后，将100uL的显色剂添加其中，并添加底物20uL。
将所有物质摇匀之后，放置于比色皿当中展开对照测试，合理的结果区间为0.3~0.8，一旦超出此范围，即代表操作环节存在问题，或者显色的时间较长，此时，需要重复上述准备流程，重新制备，直到结果合格。
（3）录入信息在检验环节，需要将待检验产品的名称以及检测标准等重点信息全面地录入到检测系统当中，保证整个检测过程具备专业信息支持，提高结果的准确性，保证农残快检过程可顺利得到预期效果，为检测过程技术的顺利应用提供信息保障。
（4）制备检测液选择2g待检样品，若为蔬菜，可剪成边长为1cm的方片，若为瓜果可切成1cm正方体，将其置于三角瓶当中，向其中添加10mL的缓冲液，之后振荡2min，过滤出清液作为待测试液。
农产品农药残留检测可靠性保证研究
农产品农药残留检测可靠性保证研究农产品农药残留检测是保证农产品质量安全的重要环节，其可靠性保证对于保障消费者的权益，维护农产品市场秩序和促进农业健康发展具有重要意义。
本文将围绕农产品农药残留检测的可靠性保证进行研究，探讨其现状、问题与对策。
要保证农产品农药残留检测的可靠性，关键是确保检测方法的准确性和可信度。
现阶段，农产品农药残留检测方法主要包括色谱法、质谱法、光谱法等。
虽然这些方法已经具备了较高的灵敏度和精确性，但仍然存在一些问题，例如不同农药的检测方法没有统一标准、检测结果的可重复性不足等。
需要进一步完善和标准化农产品农药残留检测的方法与技术，提高其准确性和稳定性。
要保证农产品农药残留检测的可靠性，需要建立健全的监管体系和标准体系。
目前我国已经建立了相关的农产品质量安全监管机构和规章制度，但还存在监管力度不够、标准制定不统一等问题。
需要进一步加强对农产品农药残留检测的监管，加大监管力度，建立健全的标准体系，制定统一的检测标准和方法，确保检测结果的可靠性和公正性。
还需要加强对从事农产品农药残留检测的人员的培训和监督。
农药残留检测是一项专业技术活动，对检测人员的要求较高。
目前，我国已经建立了相关的检测机构和实验室，但检测人员的专业水平和操作技能还有待提高。
需要加大对检测人员的培训力度，提高其专业水平与技能，同时加强对检测人员的监督与考核，确保他们按照规范操作，并保证检测结果的可靠性和有效性。
要加强农产品农药残留检测的信息公开与社会监督。
农产品农药残留检测涉及的范围广泛，消费者和社会公众对其质量安全问题高度关注。
需要加强对农产品农药残留检测结果的信息公开，及时发布检测结果，并加强社会监督，确保检测结果真实可信，避免信息不对称和虚假宣传行为，保证消费者的知情权和选择权。
要保证农产品农药残留检测的可靠性，需要从完善检测方法与技术、建立健全监管体系与标准体系、加强人员培训与监督和加强信息公开与社会监督等多方面入手，共同努力，确保农产品质量安全和农业健康发展。
农药残留快速检测技术研究
农药残留快速检测技术研究一、引言近年来，随着农业现代化的推进，农药的使用量逐年增加，但农药残留超标问题也不断引起人们的关注。
农药残留对食品安全不利，为了保障公众健康和安全，迫切需要快速而准确地检测农药残留。
因此，农药残留快速检测技术的研究成为当前重要的研究领域之一。
二、国内外现状目前，农药残留检测方法主要包括理化检测和生物检测两大类。
前者包括色谱法、质谱法、光谱法等，后者包括酶法、微生物法等。
这些方法在农药残留检测中已经得到广泛应用，但由于检测流程繁琐、时间长、操作复杂、费用高等问题，已经不能满足现代农业快速发展和消费者对农产品质量安全的要求。
为了解决上述问题，近年来，国内外学者纷纷研制出不同的农药残留快速检测技术。
其中，磁珠免疫分析技术、电化学微感器技术、质谱成像技术等已经得到广泛应用。
三、磁珠免疫分析技术磁珠免疫分析技术是一种简便、有效、高灵敏度、高特异性的检测方法。
它的原理是利用特异性抗体将磁珠与目标物质结合，然后通过磁场的作用将磁珠分离出来，进而进行检测。
该方法操作简便、无需特殊条件，检测时间短，检测结果准确可靠，已经成为了农药残留快速检测的主要技术之一。
四、电化学微感器技术电化学微感器技术是一种新兴的检测技术，它具有快速、实时、灵敏度高等优点。
该技术的原理是利用电化学信号来检测目标物，因此其检测灵敏度高，可靠性强。
电化学微感器技术不仅可以用于单一目标物质的检测，还可以用于多种目标物质的同时检测，可以大幅缩短检测时间，提高检测效率。
五、质谱成像技术质谱成像技术是一种高灵敏度、高分辨率的检测技术，其原理是通过质谱仪快速扫描样品表面的分子，识别出样品中的目标物质，并可以在样品表面绘制出目标物质的空间分布图。
质谱成像技术具有检测精度高、检测速度快、检测成本低等优点。
六、未来展望随着生物技术、纳米技术、光学技术等新技术的不断发展，农药残留快速检测技术将会不断创新和优化。
例如，基于纳米材料的免疫检测技术、表面增强拉曼光谱技术、近红外成像技术等将会成为未来的重要研究方向。
酶抑制法快速检测农产品农药残留研究
酶抑制法快速检测农产品农药残留研究
酶抑制法是一种常用的快速检测农产品农药残留的方法。
它利用酶抑制剂抑制酶的活性，通过测定样品中酶活性的变化来确定农药残留的含量。
以下将对酶抑制法快速检测农
产品农药残留的研究进行论述。
酶抑制法的原理是基于农药对酶的抑制作用。
农药是一种特定的化学物质，能够干扰
生物体的正常代谢过程，从而具有杀虫、除草、防霉等作用。
而酶是生物体内的催化剂，
参与调控各种代谢过程。
通过测定样品中的酶活性，可以间接反映出农药残留的含量。
在实验过程中，首先需要选择适当的酶抑制剂。
酶抑制剂是一种能够特异性抑制某种
酶活性的化合物。
通常，选择对应于待检测农药抑制的酶抑制剂，并通过实验确定其最佳
浓度。
然后，将待测样品与酶抑制剂混合，观察酶活性的变化。
在确定酶抑制预处理条件后，接下来需要设计合适的实验方案来测定酶活性。
常见的
实验方法包括：酶活性测定、酶活性动力学分析、酶抑制纳米传感器等。
这些方法的选择
需要考虑到待检测农药以及样品的特点。
在实验过程中，还需要考虑到测试的灵敏度和准确度。
灵敏度是指方法能够检测到的
最小农药残留量，而准确度则是指与标准方法或实际样品测定结果的接近程度。
提高酶抑
制法的灵敏度和准确度可以通过优化实验条件、改进检测装置和选择高效的酶抑制剂等方
法来实现。
酶抑制法还可以与其他检测方法相结合，提高检测效果。
可以将酶抑制法与光谱分析、电化学分析等技术相结合，以实现更精确的农药残留测定。
酶抑制法快速检测农产品农药残留研究
酶抑制法快速检测农产品农药残留研究摘要：农药残留对人体健康造成潜在的威胁，因此快速、准确地检测农产品中的农药残留十分重要。
本研究旨在探讨利用酶抑制法来进行快速检测农产品中的农药残留的可行性和有效性。
通过对不同农作物中的农药残留进行酶抑制实验，测定其抑制程度，并与传统的色谱检测方法进行对比。
1. 引言农药在农作物的生长过程中被广泛使用，以保护作物免受病虫害的侵害。
滥用和不当使用农药可能导致农产品中农药残留的问题，对人体健康带来潜在威胁。
准确检测农产品中的农药残留成为保障食品安全的重要手段。
2. 研究方法2.1 农药样品的制备选取不同农作物中的农药样品，使用传统色谱检测法对样品进行农药残留分析，获得每种农药在样品中的浓度。
2.2 酶抑制实验选择适当的酶作为指标，例如氧化酶、酯酶等，加入农药样品中，观察酶的活性表现。
将农药样品与不同浓度的酶混合，测定酶的抑制程度。
2.3 结果分析将酶抑制的结果与传统的色谱检测法进行对比，计算两者之间的相关系数。
通过对不同农药样品的酶抑制实验结果进行统计分析，评估酶抑制法在农产品农药残留检测中的可行性和有效性。
3. 讨论与结论通过本研究的实验结果表明，酶抑制法可以快速检测农产品中的农药残留。
与传统的色谱检测方法相比，酶抑制法具有操作简单、结果快速等优点，可以为农产品农药残留的快速检测提供一种新的方法。
酶抑制法也存在一些不足之处，例如对不同酶的选择有一定的局限性，需要进一步优化。
酶抑制法作为快速检测农产品农药残留的新方法，具有一定的优势和发展潜力。
未来的研究可以进一步探索适合不同农产品和农药的酶抑制指标，并优化实验流程，提高检测的准确性和灵敏性，以满足食品安全监测的需求。
酶抑制法快速检测农产品农药残留研究
酶抑制法快速检测农产品农药残留研究酶是生命活动中一类重要的蛋白质，具有催化生物化学反应的作用。
而农药残留检测中的酶抑制法，是通过检测农产品中的残留农药对酶的抑制作用，来判断样品中农药残留量的一种方法。
这种方法具有操作简单、快速、灵敏度高等优点，因此得到了广泛研究和应用。
本文将针对酶抑制法在农产品农药残留检测中的应用进行深入探讨，并就其在未来的发展趋势进行展望。
2. 灵敏度高：由于酶抑制法用的酶通常是一种具有较高灵敏度的酶，因此在检测过程中对于农药残留的检测具有较高的灵敏度，可以检测到非常低浓度的农药残留。
3. 操作简单：酶抑制法的操作流程相对比较简单，通常只需要一些基本的实验设备和试剂就可以完成检测过程，不需要复杂的仪器设备。
4. 成本低：相对于传统的农药残留检测方法，酶抑制法的成本要低很多，因为不需要耗费大量的仪器设备和昂贵的试剂。
5. 适用范围广：酶抑制法可以适用于多种不同类型的农产品，因为农药残留对酶的抑制作用是普遍存在的。
二、酶抑制法在农产品农药残留检测中的应用1. 氨基甲酸酯类农药残留检测氨基甲酸酯类农药是目前广泛应用于农业生产中的一类高效、低毒的农药，但其残留对人体健康造成了一定的威胁。
酶抑制法可以通过检测样品中氨基甲酸酯类农药对酶的抑制作用，快速准确地检测出残留在农产品中的氨基甲酸酯类农药的含量。
2. 有机磷农药残留检测1. 多元化：未来酶抑制法在农产品农药残留检测中的发展趋势将更加多元化，不仅仅局限于对单一类型农药的检测，还可以进行多种农药的同时检测。
2. 自动化：随着科技的发展，未来酶抑制法在农产品农药残留检测中将趋向自动化，可以在更短的时间内完成大量样品的检测，提高检测的效率。
4. 数据化：未来酶抑制法在农产品农药残留检测中可能会趋向数据化，通过大数据的分析和比对，可以更全面地了解不同农产品中农药残留的情况。
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福建分析测试 Fujian Analysis&Testing2007,16(2)农残快速检测专用酶试剂的稳定性研究蔡 琪 黄 敏 黄文风(福建省测试技术研究所,福建 福州 350003)摘 要:本文报导通过添加2%正丁醇、5%蔗糖、1%动物血清白蛋白及自制高效保护剂,在保持所研制的农残检测胆碱酯酶高检测灵敏度的前提下,使该液态酶试剂的保存性得到很大提高,冷藏条件下可长期保存,室温保存15天酶活性无明显下降,37℃高温条件下放置二周仍能保持60%以上的酶活性。
关键词:胆碱酯酶;稳定性保存性;农残检测中图分类号;0652.3 文献标识码:A 文章编号:1009-8143(2007)02-0052-03Study on St ab ility of L i qu i d Enzym e Spec i a llyPrepared for Rap i d D etecti on of Pesti c i de Resi duesCa i Q i Huang M i n Huang W en feng(Fujian lnstitute Of Testing Technol ogy,Fuzhou350003,China)Abstract:The paper reports a study on stability of a1iquid enzy me which s pecially p reparedf or rap id detecti on of pesticide residues in fruits and vegetables.By adding of2%n-butylalcohol,5%sucr ose,1%ani m al seru m albu m in and laborat ory-made highf perf or mance p r otecti onreagent int o the liquid enzy me s oluti on,W e achieved a stable liquid enzy me without reduc2 ingits high pesticide detecti on sensitivity,the enzy me can be st ored f or a l ong ti m e at0-5℃,Significant change in the en2 zy me activity was not observed after15days of st orage at r oom te mperature.More than60%of the original enzy me activity was re mained after t w o weeks st orageeven at the temperature as high as37℃.Keyword:enzy me,cholinesterase,st orage,pesticide detecti on 应用胆碱酯酶检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒是当前各类果蔬产销质管部门和工商等监管部门中应用最为广泛的快速检测方法。
其基本原理是有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的催化活性有抑制作用,通过测量胆碱酯酶与样品接触前后催化活性的改变来判别样品中农药残留的毒性大小。
因此,研制具有高检测灵敏度和具有高保存性商稳定性的胆碱酯酶是开展此项工作的技术基础。
目前,国内市场上农残检测酶试剂主要有冻干工艺生产的固态酶和传统工艺生产的液态酶二种。
通常情况下,固态酶更稳定,保存性更好。
许多厂家为了提高酶试剂的稳定性,采用了设备成本较高、生产周期较长的冻干工艺生产固态酶。
固态酶需冷冻保存,使用前以缓冲液溶解,为避免反复冻融引起酶活性迅速下降,酶液在0～5’C的冷藏条件保存。
即便如此,在此条件下保存1周后液态酶试剂的活性仍然降低了50%[1〗之多。
我所长期致力于高灵敏度的农残检测专用胆碱酯酶试剂的研究开发[2〗。
通过选择使用2%正丁醇、5%蔗糖、1%动物血清白蛋白并添加自制高效保护剂,我们研制的农残检测专用液态酶试剂在高低温贮存稳定性上取得较好效果,冷藏条件下可长期保存,室温保存15天酶活性无明显下降,37℃高温条件下放置二周仍能保持60%以上的酶活性。
该试剂无需深冷冻存,可直接使用。
该酶生产工艺无需冻干操作,不仅降低了酶试剂与酶活性的损失,还节约了较昂贵的冻干设备投资并缩短了工艺流程和生产周期。
本文报告了研制高灵敏度农残检测专用酶试剂时,在提高酶试剂保存性上所作的收稿日期:2006-11-13基金项目:福建省重大科技招标项目(编号:2001Z146)作者简介:蔡琪(1960-),男,助理研究员,主要从事色谱和农药残留快速检测技术研究。
E mail:Caiqi@ 25 2007,16(2)蔡琪等:农残快速检测专用酶试剂的稳定性研究工作。
1 试验部分;1.1 仪器设备;V I S一7220分光光度计,北京瑞利分析仪器公司,LRH-250A生化培养箱,广东省医疗器械厂。
1.2 试剂:酶试剂原液:按文献[2],[3]方法制备酶试剂的提取液。
保护剂:正丁醇[AR];蔗糖[照];动物血清白蛋白(AS A)[LR];高效保护剂(HPR);本实验室制备。
防腐剂:苯甲酸钠[AR]。
pH=8.0磷酸盐缓冲液:13.5g无水磷酸氢二钠(AR)与0.68g磷酸二氢钾(朋)溶于500mL蒸馏水备用。
显色剂:80mg二硫代二硝基苯甲酸(朋)溶于25mL pH=8.0缓冲液备用。
底物:40mg硫代乙酰胆碱(BR)溶于2.5m l蒸馏水,摇均后0.5℃环境下保存备用。
胆碱酯酶活性测试方法:按G B/T5009.199-2003第12.2条操作测得的△A值即为胆碱酯酶的相对活性。
1.3 稳定性试验;取一定量的酶试剂原液,依试验项目的不同分别加入蔗糖或丁醇或动物血清白蛋白(AS A)或高效保护剂(HPR)制得添加有保护剂的试验样品若干;另取等量同一酶试剂原液添加pH:8.0磷酸盐缓冲液至与试验样品同等体积制得酶活性测试的对照样品若干;将试验样品与对照样品封入安瓿,按试验项目的要求同时置于某一指定温度的恒温箱中,并按试验项目指定的时间间隔取出部份试验样品与对照样品,按G B/T5009.199-2003中第12. 2条[4〗中的操作方法对活性测试样品中胆碱酯酶的残存酶活性,酶在贮存后的残存活性与贮存前的活性之比即为酶活性的保存率。
2 结果与讨论:2.1 蔗糖与丁醇的作用:多羟基化合物能与蛋白质形成氢键结合,在蛋白质周围形成“溶剂层”使其有效脱水,多羟基化合物还能与水分子产生水合作用减小溶液水分子的活度并增加溶液的粘度,从而减弱了蛋白质的水解。
因而糖类是酶蛋白的较好保护剂[5～6]。
与其它糖相比,蔗糖是更稳定的非还原性糖,不会与蛋白发生反应。
据此,我们考查了室温下蔗糖对胆碱酯酶的保护效果。
图1的结果显示5%的蔗糖加入量对胆碱酯酶有较好的保护效果。
实验中还发现加入少量正丁醇对胆碱酯酶活性有激活作用,过量加入则显示出抑制作用。
如图2所示。
据此,我们在最终产品中选择的加入体积比分别为5%的蔗糖和2%的丁醇。
图1 蔗糖对胆碱酯酶活性的影响 图2 添加丁醇对胆碱酯酶活性的影响 离体酶蛋白由于失去天然共存环境易变构而产生变性失活。
在酶溶液中适当添加动物血清蛋白,可使其与酶蛋白产生非共价结合的复合物。
由于蛋白质分子体积较大,产生的复合物减少了酶蛋白疏水簇与水的直接接触,促使酶蛋白原先在水溶液中发生可逆变性而伸展松散开来的蛋白质分子骨架重新扭转、折叠恢复原来的活性。
因此添加适当的动物血清蛋白,有助于变性酶蛋白的重新天然35 福建分析测试 研究简报 2007,16(2)化,从而使酶蛋白变得更为稳定。
我们试验添加了特定动物血清白蛋白(AS A)对胆碱酯酶稳定性的影响,结果见表1。
需要说明的是样品保存到第二周时,已经呈现出程度不同的白色絮状沉淀,已无测试必要。
表1 37℃加速试验条件下,添加AS A对胆碱酯酶活性保存率的影响:保存1天84%84%93%93.3%保存3天60%68%80%81%保存一周44%47%64%68%保存二周N/A(※)N/A(※)N/A(※)N/A(※)※:出现絮状蛋白沉淀。
2.3 高效保护剂(HPR)的添加实验:本文研制的高效保护剂试图改善酶蛋白分子或酶蛋白与动物血清蛋白复合物分子的表面环境,增加酶蛋白分子或复合物分子的稳定性并使其均匀地分散于溶液之中,避免酶蛋白或蛋白复合物间相互聚合产生沉淀,从而起到保护作用。
表2为添加特定浓度高效保护剂后得到的试验数据,结果表明该保护剂作用明显,与未加保护剂的对照样品相比,不仅有效防止了酶蛋白的凝聚沉淀,还提高了保存后胆碱酯酶的残存活性。
表2 37℃加速试验条件下,添加HPR对胆碱酯酶活性保存率的影响:HPR添加情况未加添加保存一周43.6%64.1%保存二周11%(3)44.8%※:此时出现絮状蛋白沉淀。
2.4 复合保护效果试验,据以上试验结果,我们在酶试剂原液中同时添加5%蔗糖、2%正丁醇、I%AS A及自制HPR保护剂,进一步考查了这几种保护的协同复合保护效果,结果列于表3。
表3 不同贮藏条件下,复合保护剂的酶活性保存效果;保存条件常温密封常温敞开37℃密封保存一周94.8%94.4%68.5%保存二周101.3%87.3%60.3% 试验表明,常温下,无论是密封保存还是开封放置,二周内胆碱酯酶活性均无显著下降。
密封保存的样品,二周后酶活性基本不变;开封放置的样品,二周后仍能保持87.3%的酶活性,其农残快速检测的灵敏度与4℃密封保存的酶试剂一致。
即使在37℃高温密封保存二周后,酶活性下降到原来的60.3%时,农残检测结果仍然与4℃密封保存的酶试剂一致,显示终产品在检测性能上的优良稳定性。
实验中还测试了在0～5℃冷藏密封条件下保存半年的样品,其酶活性保存率为96%。
2.5 苯甲酸钠的使用:苯甲酸钠的作用是抑制酶试剂中蛋白质的腐败,未加苯甲酸钠的酶试剂原液保存一周即有腐败发臭现象,试验发现,酶试剂原液中添加0.8%的苯甲酸钠即有防腐效果,终产品中的添加量为2.5%时对酶活性无明显影响,超过3%显现出一定的影响。
故选取2%作为最终产品的加入量。
3 结论:胆碱酯酶活性极易受共存理化环境的影响。
通常情况下,固态酶试剂比较稳定。
本文通过合理选用多种保护剂及自制高效保护剂,在保持农残检测高敏度[2〗的前提下,使该液态酶试剂的保存性得到很大提高,冷藏条件下可长期保存,室温保存15天酶活性无明显下降,37℃高温条件下放置二周仍能保持60%以上的酶活性。