人参总皂甙对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构和功能影响的实验研究

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人参总皂苷对大鼠骨关节炎的作用

• 4•浙江临床医学202丨年1月第23卷第1期.i仑•人参总皂苷对大鼠骨关节炎的作用包黎莎王华芳杨锦荧王春雷单乐天*【摘要】目的探讨人参总皂苷（T S P G)对骨关节炎大鼠关节疼痛和软骨修复的作用。

方法将50只SD雌性大鼠随机分为5组，人参总皂苷低浓度组（TSPG-L 125 j x g/m l)、人参总皂苷中浓度组（TSPG-M250 p g/m l)、人参总皂苷高农度组（TSPG-H500 p g/m l)、模型组和空白对照组。

采用双侧膝关节注射碘乙酸法建立骨关节炎大鼠模型，人参总皂苷给药采用关节腔注射法。

检测各组大鼠压痛阈值和热痛阈值。

干预完成后，取每组双侧膝关节进行组织病理观察。

结果OA造模成功，造模4周后，压热痛结果显示：高中低浓度人参总皂苷组的压热痛阈值相较于模型组，均有显著提升（P<0.01);病理结果显示：人参总皂苷组软骨细胞和软骨基质接近正常水平，有肥大软骨细胞少量，与模型组相比O A RSI评分显著下降（P<0.01);软骨细胞C C K实验结果显示：与模型组相比，人参总皂苷组软骨细胞活力显著提高(P<0.01)。

结论人参总皂苷对改善关节疼痛、修复受损软骨疗效显著，其机制可能与抑制炎症因子，减少软骨细胞凋亡和基质损伤，促进软骨细胞修复有关。

【关键词】人参总皂苷骨关节炎碘乙酸软骨细胞大鼠细胞增殖【A b stract 】Objective To observe the effect of ginseng total saponins on cartilage repair in rats with osteoarthritis. Methods Eighty SD female rats were randomly divided into 5 groups, including high concentration group of total ginsenoside ( TSPG—H 500 |X g/m l)，medium concentration group of total ginsenoside ( TSPG—M 250 |x g/m l)，low concentration group of total ginsenoside ( TSPG—L 125 (Xg/nil )，model group and blank control group. The osteoarthritis of rat was induced by injecting iodoacetic acid into both knee joints, and the total saponins of ginseng were also administered by joint cavity injection. The tenderness threshold and thermal pain threshold of each group were detected. After the intervention, the bilateral knee joints of each group were taken for histopathological observation. Results The reaction of OA model was successful. 4 weeks after mold—building, the tenderness pain results showed that the high-medium—low-concentradon ginseng total saponins group had a significant increase in the tenderness threshold compared with the model group ( P<0.01 ) ; pathological results showed ：ginseng total saponins group chondrocytes The cartilage matrix was close to the nonnal level, and there were a small amount of h ypertrophic chondrocytes. Compared with the model group, the OARSI score was significantly reduced ( P<0.01 ) ; the chondrocyte CCK test results showed that：compared with the model group, the activity of chondrocytes in the ginseng total saponins group was significandy improved (P<0.01 ) . Conclusion Ginsenosides have a significant effect on improving j oint pain and repairing damaged cartilage. The mechanism is related to its ability to inhibit inflammatory factors, reduce chondrocyte apoptosis and matrix daniageand, and promote the repair of c hondrocytes.【K ey w o rd s 】Total ginsenosides Osteoarthritis Iodoacetic acid Chondrocytes Rats Cell proliferation骨关节炎（〇A)是一类软骨丢失、破坏、关节四周骨质增生为特征的与年龄相关的慢性疾病，可同时累及滑膜、软骨下骨和关节周围软组织，常见临床表现为膝骨关节肿胀感，僵硬不适，进展性膝关节疼痛，最终关节活动受限，甚至失用[|]。

人参皂甙Rb1和人参总皂甙对运动性疲劳大鼠骨骼肌生化指标的影响

Ｆａｉｕｅ／ＦＥＮＧｔｇ／Ｙｉ— ｃｎ，ｈｏｇＰＡＮａ— ｓａ，ＨｕｈｎＺＨＡＯＺｉ—ｍｉｇｎ，
ＷＥＮＸｉＡｂｔａｔ：ＴｈｓｓｕｉｏｆｎｕｈｆｅｔｆＧｉｓｎｏｉｅＲｂｓｒｃｉｔｄｙａｍｓｔｄｏｔｔｅｅｆｃｓｏｎｅｓｄｌｉ
醛（Ａ）量、氧化物歧化酶（Ｏ活性和葡萄糖（Ｌ含ＭＤ含超ＳＤ）ＧＵ）量的变化，探讨疲劳发生时的骨骼肌表现以及人参皂甙Ｒｌ和ｂ人参总皂甙抗疲劳的效应。
文章编号
１７５５（００００２０６１— ９０２１）１— ０４— ２
人参皂甙Ｒｌ和人参总皂甙都能抑制骨骼肌细胞内钙稳态失ｂ
衡和线粒体膜电位降低、低骨骼肌细胞ＭＤ降Ａ含量、强ＳＤ增Ｏ活性、加从血液摄取的葡萄糖含量（有Ｐ＜．５，而抑制增均００）从
运动所致骨骼肌细胞损伤、挥抗运动性疲劳作用。但在恢复发
摘
要：探讨人参皂甙Ｒｌｂ和人参总皂甙对运动性疲劳大鼠骨
ｄｉｅｒｎｏｅｉｌａｄｄｅｒａｉＤＡ，ＧｉｓｎｏｉｅｓＳｒａｍｍｂａｅｐｔｎｔａｎｃｅｓｎｇＭｎｅｓｄｓ分为空白纽、型组、参皂甙将模人
Ｒｌ和人参总皂甙组。采用中等强度的跑台运动建立动物模ｂ组
型，药后运动连续实验两周后，测骨骼肌线粒体膜电位、给检胞内钙离子含量、Ａ含量、Ｏ活性和葡萄糖含量。结果发现ＭＤＳＤ

人参皂甙Rd对高原大鼠运动疲劳后学习记忆及海马CA1区超微结构的影响

构改变的影响。方法：康成年ｗｉａ大鼠２健ｓｒｔ４只，由兰州用汽车直接引入青海省可可西里高原，随机分为对照（组、理盐水重度疲劳（）及人参皂甙重度疲劳（）各８只；Ａ）生Ｂ组Ｃ组Ａ组正常饲养，
＊
曲传勇，金升＃，向群，杨石司江华，明磊，张范磊，彦平王
兰州军区兰州总医院神经内科，兰州７０５３００
【要】目的：摘观察人参皂甙Ｒｄ对高原运动疲劳后大鼠学习记忆能力及海马ＣＡ１区超微结
【中图分类号】Ｒ７１Ｒ３．５Ｒ４．０【献标识码】Ａ【章编号】１０～１Ｘ４；３９；０９０２０）Ｏ７ — ４
ＥｆｅｔｆＧｉｅｓｄｎＣｏｎｉｉｎａｄｔｔａｔｕｔｅｉｆｃｓｏｎｓｎｏｉｅＲｄｏｇｔｏｎｈｅＵｌｒｓｒｃｕｒｎＣＡ１ＲｅｏｆｔｐｐｃｍｐｕｎｇｉｎｏｈｅＨｉｏａｓｉ
ｃｎｔｏｌｇｒｕｐ。ｓｖｅｅｆｔｇｕｒｐｗｉｈｓｌｎｅｔｅｔｎｔｎｄｓｖｒａｉｅｇｏｕｒａｅｔｏｒｏｅｒａｉｅｇｏｕｔａｉｒａｍｅ，ａｅｅｅｆｔｇｕｒｐｔｅｔｄｗｉｈｇｎｓｎｏｉｉｅｓｄｅＲｄ．ＲａｓｗｅｅｔｋｎｆｏＬａｚｔｒａｅｒｍｎｈｏｕｔｋｘｉｉｐｌｔａ４７７ｍ）Ｒａｓｉａｉｏｎｏｋｅｅｌａｅｕ（６．ｔｎｓｌｎｅｃ —

运动氧化应激机制与人参皂甙Rb1抗运动性疲劳的实验研究

神益智、补气生血的作用，是传统补虚要药。本文在运动性疲劳模型大鼠复制的基础上，选用人参提取物人参皂甙Ｒｌｂ，对运动性疲劳模型大鼠进行灌胃治疗，从丙二醛
（Ａ）含量、超氧化物歧化酶（ＯＤ活性两个生化指标ＭＤＳ）
潘华山，赖秋媛，冯毅种，赵奕，赵自明
（．广州中医药大学，广州１５００；２广东省中医研究所，广州１０６．５０６）１００
摘
（
要：检测运动性疲劳模型大鼠红细胞、肝和骨骼肌超氧化物歧化酶（ＯＳＤ）的活性，以及血清、肝和骨骼肌丙二醛
第２４卷
第２期
河
北
体
育
学院
学
报
ＶｏＩ４Ｎｏ２ｌ２．
Ｍａ．００ｒ２１
２１００年３月
Ｊｕｎ１ｆＨｅｅｎｔｕｅｏｈｓｃｌｕａｉｎｏｒａｏｂｉｓｉｔｆＰｙｉａＩｔＥｄｃｔｏ
运动氧化应激机制与人参皂甙Ｒ抗运动性疲劳的实验研究ｂｌ
实验药品人参皂甙Ｒｌ由上海同田生物技术有限公司ｂ提供。主要试剂包括ＭＤＡ含量测定试剂盒、ＳＤ活性测定Ｏ
试剂盒，均由南京建成生物工程研究所提供。主要仪器有
ＴＬ５Ａ型低速离心机和ＺＰＤ－一Ｈ－Ｔ动物实验跑台。
１３运动疲劳模型的复制与分组方法．

人参总皂甙对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构和功能影响的实验研究

ＰＡＮａ—ｓｎＺＨＡＮＧｉ—ｈｎ，Ｈｕｈａ，ＺｈｏｇＺＨＡＯｈｉ—ｍｉ，ＥＮＧＺｎｇＦＹｉ—ｃｏｈｎｇ
（．ＧａｇｈｕＵｉｒｔｏＣｉｅｅＭｅｉｎ，ｕｎｚｏ０６，ｈｎ；１ｕｎｚｏｎｖｓｙｆｈｎｓｄｉｅＧａｇｈｕ５０Ｃｉａｅｉｃ１０２ＧａｇｏｇＩｓｔｔｏｈｎｓｄｃｎ，ｕｎｚｏ０５Ｃｉａ．ｕｎｄｎｔｕｆｉｅｅＭｅｉｉｅＧａｇｈｕ５９，ｈｎ）ｎｉｅＣ１０
ＥｆｅｔｆＧｉｅｓｄｓｏｈｅＳｔｕｃｕｒｎｎｃｉｎｓｏｔｆｃｓｏｎｓｎｏｉｅｎｔｒｔｅａｄＦｕｔｏｆＲａ
ＳｅｅａｕｓｌｔｅｃｓｋｌｔｌＭｃｅｗｉｈＥｘｒｉｅ—ｉｄｕｅｔｇｅｎｃｄＦａｉｕ
第３Ｏ卷
第１期
２１００年１月
广州体育学院学报ＪｕｎｌｆｕｎｚｏｐｒＵｉｒｉｏｒａｏａｇｈｕｓ０ｔｎｖｓｙＧｅｔ
Ｖｏ．０Ｎｏ１３．１
Ｊｎ２１ａ．００
人参总皂甙对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构和功能影响的实验研究
木
潘华山张志鸿赵自明，，，冯毅种
（．广州中医药大学，１广东广州摘５００；．广东省中医研究所，１０６２广东广州５０９）１０５
要：探讨运动性疲劳模型大鼠骨骼肌结构和功能的变化和人参总皂甙抗疲劳的效应。采用中等强度的跑台运动

人参总皂甙和人参皂甙Rg1对运动性疲劳大鼠中枢神经递质的影响

ｆｔｅｏｘｒｉ．ａｉｅｅｃｓｕｇｆｅＫｅｒｓ：ｉｓｎｓｄｓ；ｌｓｎｓｄ；ｘｌｉｙｗｏｄｇｎｅｏｉｅＲｌｇｎｅｏｉ￣ｅｅｃｓｎｄｃａｇｅｃｎｒｌｎｕｏｒｎｍｉｅ－ｅ—ｉｕｅｆｔｕ；ｅｔａｅｒｔｓｔｒｄｉａｔ
疲劳大鼠中枢神经递质的影响
潘华山赵奕冯毅种
５００）１６０
（．中医药大学体育健康学院，１广州广东广州５００；．１６２广东省中医研究所，０广东广州
摘
要：对运动性疲劳模型大鼠中枢神经递质ＧＢ、Ａ、一ＨＡＡＤ５Ｔ和Ａｈｃ含量进行检测，结果显示：人参皂甙ｎｌｇ和人参总
舀ｓ８ｅＰｉｃｕｍｒｅｔｉｒｅｏｎｒｌｅｒｔｎｍｉｅｔｘｒｉｎ∞０．ｓｏｌｐｏｈｄｓｄｒｃｔｕｏａｓｔｒｆｒｅｃｅ—ｉｕ．ｌａｇｅｎｄｅｅｔｅｅａｄｄｅｎｔｇｔ，ｎｄｃｔｅｄｄｉｖｅｏｆｅａｎｒｔａｅｅｓｎｃｆｔｕｉｉｒｌｖｌｉｒｔａｅａｄｒｕｈｄ￣ｉｆｎｎｆｅｒｓｅｅ
递质紊乱的情况，到抗运动性疲劳的效果。达关键词：人参皂甙Ｒｌ人参总皂甙；ｇ；运动性疲劳；中枢神经递质
中图分类号：８４５Ｇ０．文献标识码：Ａ文章编号：６２３５２０）３０７３１７ —１６（０９０ —０５ —０
ＥｆｅｔｆＧｉｓｎｓｄｓａｆｃｓｏｎｅｏｉｅｎｄｎｓｎｓｄｅＲｇｌｏＣｅｒｌＧｉｅｏｉｎｎｔａＮｅｏｒｎｍｉｔｒｉｔｅｃｓ－ｉｄｃｄｔｇｅＲａｓｕｒｔａｓｔｅｎｈｅＥｘｒｉｅ— ｎｕｅＦａｉｕｔ

人参皂甙Rb1对抗运动性骨骼肌疲劳的实验研究

３ｕｈｕＭｅｉｏｅｅＸｚｏ２０４Ｃｉａ．ＸｚｏｄｃＣｌｇ，ｕｈｕ２１０ｈ）ｌａｌｎ
ＡｓａｔＯｂｅｔｅＩｉｐｐｒｉｒｅｏｒｄｃｈｔｎｘｄｉｇｆｅｒｄｃｌｃｕｅｙｅｅｃｅｉｄｃｄｓｅｔｂｔｃｔｊｃｉｎｔｓａｅ，ｎｏｄｒｔｅｕｅｔｅｓｏｇｏｉｉｎｅａｉａａｓｄｂｘｒｉ－ｎｕｅｋｌａｒｖｈｒｚｒｓｓｅｌ
ａｉｍｓｒａｈｎｎｉｅｅｃｓ－ｎｕｅａｉｅｏｅｉｉｃｌａｔｉａｅｉｏ－ｒｅｒｄｃｃｖｎｉｇａｉｔｆｔｅｂｄｎｓｅｃｉｇａｔ－ｘｒｉｅｉｄｃｄｆｔｕｇ－ｎｓｔｄｒｔｐｒｃｐｔｎｉｎｆａｉａｓａｅｇｎｂｌｙｏｏｙ，ａｄｔｅｏｅｙｉｅｌｉｈｎｈ
肌疲劳的作用。
人参皂甙Ｒｌ有对抗大强度运动时所产生的自由基，减缓运动性骨骼ｂ具
关键词：人参皂甙Ｒ１ｂ；运动性疲劳；氧化应激；实验研究中图分类号：Ｒ３３６文献标志码：Ａ文章编号：６４０２（００Ｏ一１ｌｏ１７－４４２１）２Ｏ１ — ３
（．Ｎｔｎｌｏｍｌｎｖｒｔｉａｓ，Ｈｚｏ７７０ｈｎ；．ＷｕａｎｔｕｅｏｈｓａＥｕａｏ，ｈｎ４０７ｈｎ；１ａｏａＮｒａＵｉｓｙｎＧｎｕｅｕ４００Ｃｉａ２ｉｅｉｈｎＩｓｔｔｆｙｉｄｃｔｎＷｕａ３０９ＣｉａｉＰｃｌｉ

人参皂甙抗疲劳作用的研究进展

１人参皂甙根据甙元的结构不同，人参皂甙可分为齐墩果
烷型五环三萜皂甙，其皂甙元为齐墩果酸，在自然界中普遍存在，人参皂甙Ｒｏ、Ｒｈ３等即属此类；另一类为达玛烷型四环三萜皂甙，绝大多数人参皂甙属于此类，该类皂甙又可分为２０（Ｓ）一人参二醇组皂甙（ＰＤＳ）（如人参皂甙Ｒｂｌ、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｈ２等）和
支链氨基酸（ＢＣＡＡ）是长时间持续运动时参与供能的氨基酸，是体内骨骼肌功能的主要氨基酸，在运动功能过程中有着重要意义。脑组织中ＢＣＡＡ含量与血中ＢＣＡＡ含量有很高的相关性，研究发现，长时间运动后肌肉摄取ＢＣＡＡ增多，因而进入脑中的ＢＣＡＡ减少而导致与其竞争通过血脑屏障的芳香族氨基酸（ＡＡＡ）尤其是游离色氨酸（ｆ—Ｔｉｐ）大量进入
决于人参的种类、参龄、培育方法、保存方法、收获季
节、提取部位以及提取方法等。亚洲参含有更多的
ＰＴＳ，而美洲参含有更多的ＰＤＳ，此外人参皂甙ＲＳ２
和Ｒｆ仅存在于亚洲参中。一般来说，人参皂甙在酸
性环境中化学性质不稳定，会发生水解同时伴有侧链的成环，糖基消元等。对人参皂甙的干燥方法包
括冷冻干燥、自然干燥和真空微波干燥，其中自然干
一般认为在长时间运动中，肌肉不仅消耗肌糖原，而且大量摄取血糖，当其摄取速度大于肝糖原分解人血的速度时，则引起血糖降低，工作能力下降，诱发疲劳产生ｕ纠。体内的肌糖原是运动时能量的来源，肌糖原储备充足，供应的能量就越多，耐力就越好。肝糖原可以维持运动时血糖水平，肝糖原的储备增多可以为机体提供更多的能量从而达到抗疲劳的目的。张雪香¨引等的西洋参人参皂甙（ｃｓ）抗疲劳作用的研究表明，食用ＧＳ１５ｄ后，小鼠的肌糖原、肝糖原含量显著增加。此外有研究显示ｎ引，人参制剂组的大鼠在游泳１ｈ和３ｈ后，肌糖原下降率明显低于对照组（两组下降率分别为３９％和１１５％）；对照组肝糖原随游泳时间增加呈明显下降趋势，而人参组肝糖原一直保持较高水平。由此可见，人参皂甙能保证充足的肌、肝糖原储备，促进组织对糖原的利用，这对增强耐力及抗疲劳十分有利。３．４对乳酸代谢的调节作用

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人参总皂甙对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构和功能影响的实验研究*潘华山1,张志鸿1,赵自明2,冯毅翀1(1.广州中医药大学,广东广州 510006;2 广东省中医研究所,广东广州 510095)摘要:探讨运动性疲劳模型大鼠骨骼肌结构和功能的变化和人参总皂甙抗疲劳的效应。

采用中等强度的跑台运动建立动物模型,将大鼠分为空白组、模型组和人参总皂甙组。

模型组和人参总皂甙组给药后连续运动两周后,检测大鼠骨骼肌线粒体膜电位和游离钙含量、骨骼肌丙二醛(M DA )含量、超氧化物歧化酶活性(SOD ),并在电镜下观察大鼠骨骼肌纤维、肌细胞线粒体和细胞核等超微结构。

结果发现人参总皂甙能显著降低骨骼肌细胞M DA 含量、增强SOD 活性、抑制骨骼肌细胞内钙稳态失衡和线粒体膜电位降低(均有P <0.05),减轻骨骼肌肌纤维、骨骼肌细胞线粒体和细胞核等超微结构的损伤,发挥抗运动性疲劳的效应。

关键词:运动性疲劳;人参总皂甙;大鼠;骨骼肌;结构;功能中图分类号:G 804 22 文献标识码:A 文章编号:1007-323X (2010)01-0090-04E ffects of G i n senosides on t he Structure and Functions of RatSkeletalM uscle w ith Exerc ise -induced FatiguePAN H ua-shan 1,ZHANG Zh i-hong 1,Z HAO Zh i-m i n g 2,FENG Y i-chong 1(1.Guangzhou U niversity o f Ch i n ese M edic i n e ,Guangzhou 510006,Chi n a ;2.Guangdong I nstitute o f Ch i n ese M edic i n e ,Guangzhou 510095,Ch i n a)Abstract :T his study ai m s to observe t he change o f the structure and functi ons of rat skeleta lmusc le w ith exerc ise-i nduced fati gue and find out t he eff ec ts of G i nsenos i des on an ti-fati gue .W e establi shed t he an i m alm ode l o f tread m ill ex ercise w ith m e d i u m i n tensity :the rats w ere div i ded into 3groups random ly :contro l g roup ,m odel g roup and G i nsenosides g roup .A fter t w o-w eek experi m ent ,m itochondr i a m embrane potenti a l o f rat ske l e talm uscle ,free Ca ^2+content ,M DA content ,and S OD activ i ty have been m eas u red ;m eanwh ile ,ultra-struc t ures have been observed through the electron m icroscope ,such as ra t ske le ta lm uscle fiber ,m uscle cell m itochondr i a and nuc leus .T he resu lt show s that G insenosi des can help so lve the proble m s o f steady i m ba l ance o f Ca ^2+i n s ke letal muscle cells and reduc ti on o fm itochondr i a m e mbrane po ten ti a,l and decrease M DA o f skeleta lm uscle ce lls ,and acti va te SOD acti v ity .In conclus i on ,it can reduce i n j uries o f ske leta l muscle cell s i nduced by spo rts and play a ro l e o f anti-fati gue .K ey word s :Exercise-i nduced fati gue ,G i nsenos i des ,R a t ,Ske l e talM uscle ,Structure ,Functi on收稿日期:2009-12-17作者简介:潘华山(1968-),男,研究员,硕士生导师研究方向:运动医学*基金项目:广东省科技计划项目(编号:2006B35604006)随着竞技运动的发展,训练和比赛的负荷量和强度越来越大,探讨具有独特的、科学的训练方法和大第30卷第1期2010年1月广州体育学院学报Journa l of G uang zhou Spo rtU n i v ers it y V o l 30 N o 1Jan 2010负荷训练与恢复有机结合的措施与手段,是取得成功的关键。

因此,找可以快速消除疲劳,又不含违禁成分的药(食)物是国内外体育科技工作者的努力方向。

传统中医药诊治疾病所用皆为天然药物,安全有效,并且十分重视调节人体自身的抗疲劳能力,通过调补结合、促进机体达到新的平衡而达到消除疲劳、提高运动能力的目的,在抗运动性疲劳、提高运动能力方面中药有着其自身的优势。

本文拟通过观察人参总皂甙对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构和功能的影响,探讨其抗疲劳的效应。

1 材料与方法1 1 实验动物 SPF级雄性SD大鼠,180~220g,月龄1月,广州中医药大学实验动物中心提供,实验动物使用许可证号:SYXK(粤)2008-0085,使用动物质量合格证明编号:0031686。

于广州中医药大学实验动物中心SPF级实验室内进行实验,常规分笼喂养,自由饮水进食,动物室内温度21 ~24 ,相对湿度40% ~55%,室内空气流通,光照时间12h。

1 2 药品与试剂实验药品人参总皂甙由上海同田生物技术有限公司提供,临用时用生理盐水按0 1mL/ kg体重配成合适浓度后给药。

丙二醛(MDA)含量测定试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)活性测定试剂盒、钙离子浓度测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。

1 3 主要仪器 Z H-PT动物实验跑台,JJ-1型组织研磨机,TDL-5-A型低速离心机,722分光光度计,420型FACS流式细胞仪,LI BRA120透射电镜。

1 4 实验分组与运动疲劳模型的复制及造模立成功的标准1 4 1 实验分组将30只雄性SD大鼠,随机均分为人参总皂甙组(剂量为50m g/kg)、模型组(等容积生理盐水)和空白组(等容积生理盐水 )所有大鼠每2d称体重1次,按照新的重量确定给药量。

1 4 1 运动疲劳模型的复制及造模成功的标准每天早上灌胃1h后将空白组放回笼中常规喂养,人参总皂甙组和模型组大鼠则进行中等运动强度的水平跑台运动,速度为15m/m i n,坡度0,跑台20m i n,间歇40m i n,再跑台20m i n,每天1次,连续14d。

参考国内文献[[1]-[2]],并结合预实验的情况,制定造模成功的标准:!大鼠反应迟钝,大逃避反应较运动前有所减弱;∀运动结束前,尤其是最后10m i n,大鼠姿势变成半卧位跑,腹部与跑道时有接触,个别大鼠为卧位跑; #运动结束后大鼠运动能力下降,需要给予一定的刺激才能维持原来的运动能力。

1 5 检测方法1 5 1 骨骼肌线粒体细胞膜电位测定采用荧光流式仪检测法[3]:取冻存的50mg左右的同一部位腓肠肌1块,PBS液冲洗,制备成骨骼肌细胞单细胞悬液,300目尼龙网过滤,调样本细胞浓度为1∃106/mL,400目尼龙膜过滤以除去细胞团块。

取上述肌细胞悬液加入等体积的Rhoda m i n e123,使其最终浓度为25 m ol/L, 37 避光孵育30m i n,PBS洗2次,1000r/m i n离心10m in,用流式细胞仪(flo w cyto m etr y,FC M)对膜电位的检测在2h内完成,488nm激光激发,发射波长为534nm,每份样本获取106个细胞,Cell Quest软件分析。

1 52 骨骼肌线粒体游离钙离子含量测定取冻存骨骼肌0 5g左右,用眼科剪剪碎后,放入加有生理盐水的10m L玻璃匀浆器内,冰水浴中机器匀浆器研磨成100g/L组织匀浆液。

取上述组织匀浆液,离心机4 1000r/m i n离心10m i n,弃沉淀,取上清液,以4 10000r/m in离心15m i n,取沉淀物,于冰水浴中用匀浆机制备线粒体匀浆液备用。

采用甲基百里香酚蓝(MTB)比色法,按钙离子测定盒使用说明书进操作。

1 5 4 骨骼肌MDA含量和SOD活性测定于大鼠左后肢相同部位腓肠肌取2块骨骼肌,约6g左右,用4 生理盐水清洗,滤纸吸干,立即放入清洁干燥密闭小瓶中,-20 保存备用。

各称取上述冻存骨骼肌组织50m g,加适量生理盐水,于冰水中用电动匀浆机制备成10g/L骨骼肌细胞匀浆。

骨骼肌MDA采用硫代巴比妥酸法、SOD活性采用黄嘌呤氧化酶法,均严格按试剂盒使用说明书进行操作。

1 5 5 骨骼肌超微结构观察于大鼠左后肢相同部位腓肠肌取1块l m m∃l m m∃3mm同一部位的腓肠肌,立即投入25g/L的戊二醛磷酸缓冲液固定,常规10g/ L的锇酸4 后固定、梯度丙酮脱水、环氧树酯815包埋后,制成超薄切片,醋酸铀及硝酸铅染色。

在电镜下观察骨骼肌纵切面骨骼肌细胞肌节、肌纤维、肌细胞线粒体、肌细胞核等超微结构的变化。

1 6统计方法采用SPSS15 0软件进行统计学分析。

采用单因素方差分析,组间均值比较采用SNK法,方差不齐时组间均值两两比较采用DunnettT3法。

2 结果2 1 各组对运动性疲劳大鼠骨骼肌线粒体膜电位和线粒体游离钙含量的影响由表1可知,与空白组比较,模型组大鼠骨骼肌线粒体膜电位显著性降低(P<0 01);与模型组比较,人参总皂甙组骨骼肌线粒体膜电位显著性升高(P<0 01)。

与空白组比较,模型组大鼠骨骼肌线粒体游离钙含量有显著性降低(P<0 01);与模型组比较,人参总皂甙组骨骼肌线粒体游离钙含量显著性升高(P<0 01)。