A蛋白亲和层析法纯化单克隆抗体
单克隆抗体项目商业投资计划书(范文参考)
单克隆抗体项目商业投资计划书目录一、行业上下游产品分析 (2)二、行业影响因素 (5)三、单克隆抗体行业面临的机遇与挑战 (8)四、智能制造 (12)五、创新驱动 (14)六、法人治理结构 (17)七、数字化转型升级 (19)八、股权激励 (22)声明：本文内容信息来源于公开渠道，所涉及项目数据根据行业模型获得，非真实项目指标。
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一、行业上下游产品分析（一）上游产品分析1、原材料单克隆抗体的生产涉及多种关键原材料，其中最重要的是细胞培养基、抗体制备用的抗原、以及生物反应器等。
细胞培养基提供了单克隆抗体生产所需的营养和生长因子。
常用的培养基包括DMEM、RPMI-1640等。
这些培养基中包含氨基酸、维生素、矿物质、葡萄糖等成分，为细胞生长和抗体生产提供支持。
抗原的选择直接影响抗体的特异性和效能，因此在选择时需要充分考虑目标抗原的性质和需求。
生物反应器则用于大规模培养细胞，以提高抗体产量。
2、设备与技术单克隆抗体的生产还依赖于先进的设备和技术。
这些包括高效的细胞培养系统、生物反应器、分离纯化设备和检测分析仪器。
例如，现代化的生物反应器可以进行控制的环境调节，以优化细胞生长和抗体生产过程。
分离纯化技术如蛋白A亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤等，用于从复杂的细胞培养液中提取和纯化单克隆抗体。
3、制剂与包装上游产品的最后一环是抗体制剂的制备与包装。
制剂过程包括抗体的浓缩、配方优化、稳定剂添加等，以确保最终产品的稳定性和有效性。
包装过程则涉及将抗体产品以合适的形式封装，以便于存储和运输。
良好的制剂和包装可以显著提升产品的市场竞争力。
（二）下游产品分析1、药品生产单克隆抗体作为一种生物药物，其主要下游产品是药品。
经过临床试验验证后，单克隆抗体可以用于治疗各种疾病，如癌症、自身免疫性疾病、感染性疾病等。
重组单克隆抗体相关物质和相关杂质的研究与评价_韦薇
906［作者简介］韦薇，女，审评员，主要从事药品审评工作。
联系电话：（010）68585566，E-mail ：weiw@cde．org．cn 。
重组单克隆抗体相关物质和相关杂质的研究与评价韦薇，罗建辉，尹红章，项金忠（国家食品药品监督管理总局药品审评中心，北京100038）［摘要］重组生物技术制备的单克隆抗体（以下简称重组单抗）是生物制品中一类重要的药物类别。
近年来，由于其精确的靶向杀伤和中和等生物学效应，重组单抗在肿瘤、自身免疫性疾病等方面受到了广泛的研究和应用，并且在神经学、眼科学等其他疾病领域的研究也开始逐步发展起来。
目前，国内生产的重组单抗主要采用真核细胞培养表达的方法，在工艺研发和质量研究方面，药品企业对主要有效成分的结构研究和质量控制关注较多；但是对产品组成中的杂质和相关物质研究较少或关注度不够。
考虑到这些杂质或相关物质是重组单抗产品中的重要组成部分，将会影响到产品的质量、临床应用的安全性和有效性，应在研究中予以重视。
本文对重组单克隆抗体产品中相关杂质和相关物质的研究和评价进行了探讨。
［关键词］重组单抗；产品相关物质；产品相关杂质；工艺相关杂质［中图分类号］Ｒ95［文献标志码］C［文章编号］1003－3734（2014）08－0906－06Comments on the development and assessment of the drug impuritiesand substances related to recombinant monoclonal antibodiesWEI Wei ，LUO Jian-hui ，YIN Hong-zhang ，XIANG Jin-zhong（Center for Drug Evaluation ，China Food and Drug Administration ，Beijing 100038，China ）［Abstract ］Ｒecombinant monoclonal antibodies have been established as a major product class of biotech-nology-derived medicinal products and widely applied in the clinical fields of oncology ，autoimmune disease as well as neurology ，ophthalmology and so on ，due to their precisely targeted biological activates of cytotoxic and neutrali-zing effect in recent years．Nowadays ，pharmaceutical enterprises of China usually pay more attention towards the structure and quality control of the main substance produced from eukaryotic cells ，rather than the related impurities and substances．However ，these impurities and substances are parts of the product components ，and may impact on product quality 、clinical safety and effectiveness．Therefore ，they should be recognized as equally important as the main substance and be investigated．This article will present comments on the research and evaluation of the related impurities and substances in recombinant monoclonal antibody products．［Key words ］recombinant monoclonal antibody ；product-related substances ；product-related impurities ；process-related impurities重组单抗在表达、制备或是储存过程中，由于各种微环境的影响，如机械剪切、氧化作用、酶的作用等物理、化学或生物因素，导致抗体的降解或发生翻译后修饰，从而获得异质性（heterogeneity ），产生变异体（variants ），如片段化、氧化、脱氨基等。
三种方法纯化相思子毒素单抗的比较
随着人类对生命 科学研究的深入 ， 克隆抗体 ２— 核酸蛋 白检测仪 ， 单 １１ 上海青浦沪西仪器厂； Ｍ１ Ｌ ７
现 已广泛应 用 于生 命 科 学 、 疫 学 、 物 化 学 、 子 型记 录仪 ， 青示 波 器 厂 ； Ｔｒｐ Ｍ ｒｔｉ 免 生 分 永 Ｈｉ ａ Ｔ １ｍＬｐｏｅ ｎ
（ 吉林大学畜牧兽医学院 ， 吉林长春 １ ０ ６ ） ３ ０ ２
采 用硫酸铵沉淀法 、 酸一 酸铵 法和硫 酸铵一 辛 硫
１ １ 材料 ．
相思子毒索单抗腹水 由本实验室制
蛋 白 Ａ 亲和 层 析 法 三 种 方 法分 离 纯化 相 思 子 １１１ 试剂 ＿．
毒素单抗 ， 并采 用十 二 烷基 硫 酸 钠 聚 丙烯 酰 备， 蛋白检测试剂盒（ ｃ ｒｔｎＡ ｓ ｉ 自 Ｂ Ａ Ｐｏｅ ｓ ｙ ｔ ｉ ａＫ ）
维普资讯
罗胜军等 ： 三种方法纯化相思 子毒 索单抗 的比较
７ ３
淀用适 量 Ｐ Ｓ溶解 后 吸出并 装 入 透 析袋 内 ， ４＿ Ｂ 于 Ｃ 条件 下 ， １ ０倍 体积 的 Ｐ Ｓ透 析 ２ ， 对 ０ Ｂ ４ ｈ 中途 换 液
３次～４次 。取 出透 析袋 ， 出蛋 白溶 液 ， ４℃条 吸 在 产物， 分装后 于 一２ ０℃保存 ［ １ ］
酸铵 沉 淀 法较 差 ； 同 方 法 纯 化 后 的 单 抗 活 统有限公司； －４５ 不 ＷＤ ９０Ｂ型水平摇床 ， 沃德生物医学 性 未见 降低 仪器公司； 量 可调 移液 器 ， 微 芬兰 Ｅ Ｐ ＭＤ Ｆ公 ＰＥ Ｏ
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关键词 ： 思子毒 素 ； 相 单克 隆抗体 ； 纯化
司；Ｈ ３０ Ｔ 一０ 梯度混合器， 上海青浦沪西仪器厂； Ｄ Ｈ
－ 一
单克隆抗体制备的基本原理
单克隆抗体制备的基本原理It was last revised on January 2, 2021单克隆抗体制备的基本原理一、单克隆抗体的概念抗体（antibody）是机体在抗原刺激下产生的能与该抗原特异性结合的免疫球蛋白。
常规的抗体制备是通过动物免疫并采集抗血清的方法产生的，因而抗血清通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中其他蛋白质成分。
一般的抗原分子大多含有多个不同的抗原决定簇，所以常规抗体也是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。
即使是针对同一抗原决定簇的常规血清抗体，仍是由不同B细胞克隆产生的异质的抗体组成。
因而，常规血清抗体又称多克隆抗体（polyclonal antibody），简称多抗。
由于常规抗体的多克隆性质，加之不同批次的抗体制剂质量差异很大，使它在免疫化学试验等使用中带来许多麻烦。
因此，制备针对预定抗原的特异性均质的且能保证无限量供应的抗体是免疫化学家长期梦寐以求的目标。
随着杂交瘤技术的诞生，这一目标得以实现。
1975年，Kohler和Milstein建立了淋巴细胞杂交瘤技术，他们把用预定抗原免疫的小鼠脾细胞与能在体外培养中无限制生长的骨髓瘤细胞融合，形成B 细胞杂交瘤。
这种杂交瘤细胞具有双亲细胞的特征，既像骨髓瘤细胞一样在体外培养中能无限地快速增殖且永生不死，又能像脾淋巴细胞那样合成和分泌特异性抗体。
通过克隆化可得到来自单个杂交瘤细胞的单克隆系，即杂交瘤细胞系，它所产生的抗体是针对同一抗原决定簇的高度同质的抗体，即所谓单克隆抗体（monoclonal antibody，McAb），简称单抗。
与多抗相比，单抗纯度高，专一性强、重复性好、且能持续地无限量供应。
单抗技术的问世，不仅带来了免疫学领域里的一次**，而且它在生物医学科学的各个领域获得极广泛的应用，促进了众多学科的发展。
德国科学家柯勒（Georges Ko1er）和英国科学家米尔斯坦（Cesar Milstein）两人由此杰出贡献而荣获1984年度诺贝尔生理学和医学奖。
单克隆抗体纯化方法
单克隆抗体纯化方法
以下是几种常见的单克隆抗体纯化方法：
1. 亲和层析：利用抗体与特定配体的亲和力进行纯化，例如使用Protein A 或 Protein G 亲和层析来捕获抗体。
2. 凝胶过滤层析：根据抗体分子大小进行分离，可以去除较小的杂质。
3. 离子交换层析：基于抗体的电荷性质进行分离，适用于去除带电荷的杂质。
4. 疏水相互作用层析：利用抗体的疏水性进行纯化，可有效去除亲水性杂质。
5. 亲和洗脱层析：通过改变洗脱条件，如离子强度或 pH 值，从亲和层析柱上洗脱目标抗体。
6. 盐析和透析：通过在高盐浓度下沉淀杂质，然后通过透析去除盐分，实现抗体的纯化。
7. 超速离心：利用离心力将抗体与其他杂质分离开来，适用于大规模制备。
这些方法可以单独或联合使用，以获得高纯度的单克隆抗体。
选择合适的纯化方法取决于抗体的特性和所需的纯度水平。
需要注意的是，在进行单克隆抗体纯化时，应严格遵循实验操作规程，并在适当的条件下进行质量控制和检测，以确保获得高质量的抗体产品。
牛血清白蛋白单克隆抗体的筛选与双抗体夹心ELISA检测方法的建立
中国图书分类号R392-33文献标识码A文章编号1004-5503（2008）11-0999-03【诊断制品】牛血清白蛋白单克隆抗体的筛选与双抗体夹心ELISA检测方法的建立张加利1蔡芳2高强2宋莉莉2于丹2桑建利1【摘要】目的筛选高效抗牛血清白蛋白（BSA）单克隆抗体细胞株，并建立BSA抗原检测的双抗体夹心ELISA法。
方法分别采用辛酸-硫酸铵法和葡萄球菌A蛋白亲和层析法纯化单抗，并进行抗体类型、腹水效价、特异性和相对亲和力测定；应用纯化的单抗建立BSA双抗体夹心ELISA检测法，并进行初步应用。
结果筛选出4株可稳定分泌抗BSA单抗的杂交瘤细胞株，抗体类型为IgG，抗体滴度均可达10-6，特异性良好，相对亲和力较高。
建立的双抗体夹心ELISA法线性范围为1.25～20ng／ml，R2>0.98，灵敏度为1.25ng／ml。
结论已筛选出高效抗BSA的单抗，并建立了BSA双抗体夹心ELISA检测方法。
【关键词】牛血清白蛋白；单克隆抗体；双抗体夹心ELISA法Screening of Monoclonal Antibody against Bovine Serum Albumin and Devel－opment of Double Antibody Sandwich ELISA for BSAZHANG Jia-li△,CAI Fang,GAO Qiang,et al（△College of Life Science,Beijing Normal University,Beijing 100875,China）【Abstract】Objective To screen the monoclonal antibody（McAb）against bovine serum albumin（BSA）and develop a dou－ble antibody sandwich ELISA for BSA.Methods The McAb was purified by caprylic acid-ammonium sulphate precipitation and staphylococcal protein A affinity chromatography and analyzed for type,titer in ascites,specificity and relative affinity.A double anti－body sandwich ELISA was developed with the purified McAb and applied primarily.Results Four hybridoma cell strains stably se－creting McAb against BSA was screened.The secreted McAb with a titer of10-6was IgG which showed good specificity and high rel－ative affinity.The sensitivity of developed double antibody ELISA was1.25ng／ml,and the linear range and R2value of detection result by the method were1.25-20ng／ml and more than0.98respectively.Conclusion The McAb against BSA was successfully screened,and a double antibody sandwich ELISA for BSA was developed.【Key words】Bovine serum albumin;Monoclonal antibody;Double antibody sandwich ELISA《中国药典》三部（2005版）规定制品中牛血清白蛋白（Bovine serum albumin，BSA）残留量应不高于50ng／剂。
纳微科技NMabTM Pro Protein A 亲和层析介质使用说明书
NMab TM Pro Protein A亲和层析介质产品使用说明书文件编号：NM-W-DF-0603版本号：A2NMab TMPro 层析介质使用说明产品简介Protein A 亲和层析是利用Protein A 配基与目标抗体具有专一结合力作用从而达到分离纯化抗体的目的。
Protein A 亲和层析大大简化抗体下游分离纯化工艺，成为抗体分离纯化的标准。
目前市场上的Protein A 亲和层析介质主要分为以多糖（琼脂糖、葡聚糖、纤维素）为基质和以合成高分子（聚丙烯酸酯，丙烯酰胺）为基质两大类。
琼脂糖基质在溶胀状态下具有网状结构，比表面积大，因而亲和载量比较高，但机械强度不高、耐压低。
随着上游发酵技术的进步，抗体表达量越来越高，下游亲和捕获成为抗体生产瓶颈，因此对下游Protein A 亲和层析介质的载量要求越来越高。
为了因应这一需求，纳微科技以琼脂糖为基球，利用特有的微球改性技术以增强其机械强度，并结合自主产权的Protein A图1. NMab TM Pro Protein A 亲和层析介质电镜图配基技术，在NMab TM Protein A 的基础上成功开发出比其具有更高载量的NMab TM Pro Protein A 亲和层析介质。
除了高载量外，NMab TM Pro 延续了其优良的结合特异性、耐碱性以及压力-流速特性，是抗体客户降低单抗纯化成本的最佳选择。
下表1是NMab TM Pro Protein A 层析介质的基本性质参数。
相较市场同类产品有如下独特优势：(a) 载量高：一般单抗项目平均动态载量约60-80 mg/mL ；(b) 耐碱性强：0.5 M NaOH 浸泡下24小时载量只下降20%；(c) 配基脱落低：小于20 ppm ；(d) 宿主蛋白（HCP ）残留低：一般在1000 ppm 以内，表现不亚于Prism A ； (e) 回收率高：大于90%；(f) 纯度高：亲和洗脱液纯度99 %以上；(g) 压力流速好：明显强于传统4FF/6FF 系列介质；表1. 纳微科技NMab TM Pro Protein A 亲和层析介质技术参数压力流速曲线测试不同流速下压力变化如下，此压力-流速特性可满足工业生产上对填料流速要求，优于传统4FF/6FF 软胶系列填料。
单克隆抗体
单克隆抗体技术单克隆抗体的克隆化方法经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。
克隆的时间一般说来越早越好。
因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。
但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。
克隆化的阳性杂交瘤细胞，经过一段时期培养之后，也还会因为细胞突变或特定染色体的丢失，使部分细胞丧失产生抗体的能力，所以需要再次或多次克隆化培养。
克隆化次数的多少由分泌能力强弱和抗原的免疫性强弱而决定。
一般说，免疫性强的抗原克隆次数可少一些，但至少要3～5次克隆才能稳定。
克隆化的方法很多，包括有限稀释法、显微操作法、软琼脂平板法及荧光激活分离法等。
（一）有限稀释法1．材料（1）微量培养盘，盘内各孔于克隆化前一天培养小鼠腹腔细胞（即饲养细胞）每孔2万～4万。
（2）HT培养基2．操作方法（1）取出抗体阳性孔细胞，用HT培养液制成细胞悬液。
并取样进行台盼兰染色，计数。
（2）用HT培养液将细胞稀释成200个/ml、40个/ml、20个/ml和的悬液。
（3）用吸管将细胞悬液分别种入微量培养盘，每孔0.05ml，细胞含量分别为10个/孔、2个/孔、1个/孔和0.5个/孔。
（4）5％CO2饱和湿度，37℃培养。
（5）每天用倒置显微镜观察克隆生长情况，选择只有一个集落生长的孔，弃掉两个以上和没有细胞生长的孔。
（6）克隆大量繁殖后，布满孔底的1/3～1/2时，测培养液抗体。
（7）抗体阳性孔细胞，移到有饲养层的组织培养瓶中，并传2～4代就可以脱离饲养细胞，建成克隆株。
（二）软琼脂克隆化借助撒在软琼脂上单个细胞定位生长，而达到克隆化，具体操作如下：1．配2.5％的琼脂糖30ml，水浴溶化后，移入45℃水浴中。
2．将117ml完全DMEM液和3ml 10倍浓度的DMEM液混合，置45℃水浴预热。
3．将琼脂糖与DMEM液混合，即为含0.5％琼脂糖的完全DMEM液，并加75×108 脾细胞。
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摘要：世界首个单克隆抗体（monoclonal antibody，简称单抗）于1986 年，获得美国食品与药品监督管理局的上市批准，拉开了单抗药物发展的序幕，成为生物医药领域中最耀眼的明珠。
单克隆抗体纯化过程中a蛋白（protein a）层析介质的选择尤为重要，可以影响抗体的纯度。
本文主要阐述单抗纯化过程中a蛋白亲和层析的相关内容。
关键词：a蛋白；耐碱性；动态载量
全球医药行业走向趋势是精准医疗时代，单抗是其中较为成熟的领域，引领了生物制药产业发展最为重要的驱动力。
单抗药物主要是由中国仓鼠卵巢细胞（chinese hamster ovary cell，简称 cho 细胞）表达产生，由 cho 细胞分泌的外源蛋白分子，通过纯化过程实现由细胞培养液中回收。
随着单抗生产上游改造、培养参数的优化，其产量已达5-10g/l，同时也增加了下游蛋白回收中去除各种宿主杂质的负担。
宿主蛋白残留的组成随着培养条件的改变显现出显著的变化，单抗药物杂质主要包括与产品相关的污染物和工艺相关的污染物。
根据终产品纯度、杂质含量的严格要求，单抗目前采用三步纯化策略：粗纯（样品捕获）、中度纯化和精细纯化，该策略工艺复杂、对操作要求严格，导致纯化成本一般占总生产成本的 50%-80%。
用a蛋白亲和层析凝胶捕获抗体是大规模单抗纯化的首要步骤，一步纯化可使蛋白纯度达 95%以上。
但a蛋白树脂价格昂贵，在大规模生产中，a蛋白纯化步骤的成本占整个抗体纯化成本的 35%以上。
因此，蛋白 a 纯化效率的提高是进一步提高产品质量、降低生产成本的关键[1]。
1 a蛋白的性质金黄色葡萄球菌
a蛋白（staphylococal protein a，spa）是一种从金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质。
能特异性地与人或哺乳动物抗体（主要是igg）的fc区域结合。
天然的a蛋白是十种氨基酸组成。
由于不含有胱氨酸及半胱氨酸，所以无二硫键。
紫外光谱和吸收系数为
a275nm %=1.65，等电点为ph5.1。
spa十分稳定，用4mol/l尿素、硫氰盐酸、6mol/l的盐酸胍和ph2.5的酸性条件，以及加热煮沸均不影响其活性。
分子量：全长的spa 54kd，去掉与细胞壁结合部分的spa 42kd。
spa与igg结合的亚类主要是igg1、igg2和igg4。
近几年来基因工程的spa出现，解决了天然a蛋白的耐碱性问题，mabselect sure是基因工程的spa，去掉了天然spa的dace 区域，对于b区域进行了修饰，将不耐受naoh的氨基酸去掉。
使修饰后的spa可以耐受0.1-0.5m的naoh；这就很好的解决了层析介质cip的问题，同时修饰后的spa也耐受蛋白酶。
减少在纯化过程中蛋白酶对spa的作用，使洗脱收集液中spa的脱落更低。
2 结合单抗的a蛋白层析介质的选择
在a蛋白捕获步骤中主要去除的杂质大部分是hcp和基因组dna；由于a蛋白层析介质对聚体没有去除作用，所以在此捕获步骤中应采取尽量减少聚体的形成策略，例如：提高洗脱ph，加入添加剂等；在此捕获步骤中会有a蛋白（配基）的脱落。
在a蛋白捕获过程中，培养上清中的蛋白酶会降解层析介质的配基a蛋白，以及a蛋白与介质骨架的偶联方式，这些都是protein a的脱落原因，所以选择a蛋白脱落较低的层析介质是非常必要的[2]。
2.1 a蛋白层析介质相关指标
耐碱性：药物gmp生产最基本的要求是无菌、无热源。
naoh 是最好的除菌、出热源的试剂。
同时naoh也是公认的cip试剂，使用naoh 可以很好的除去残留在层析介质上的杂质，以确保工艺的稳定性以及层析介质的寿命；?郧?naoh的成本低。
naoh是公认的cip试剂，实验表明，naoh的清洗效果高于其他试剂，适合琼脂糖基架的填料。
而对照的可控玻璃基架（cpg）填料的清洗结果表明，盐酸胍比磷酸更为有效。
cpg填料在高ph下不稳定，不适合用naoh 清洗。
传统的a蛋白的清洗试剂，如：尿素，盐酸胍等的清洗试剂效果不理想，?郧以谂渲檬
迸ǘ冉细撸?这对生产是一个瓶颈。
ge公司的mabselect sure 系列是通过基因工程修饰的a蛋白介质，去除了不耐受naoh 的氨基酸，提高了层析介质耐受naoh的能力。
同时 mabselect sure lx是最新的a蛋白层析介质，结合了耐碱和高载量的性质。
另外， mabselect sure和mabselect sure lx介质在naoh清洗后寿命可以在300次以上。
使用不同浓度的naoh 清洗mabselect sure 的使用次数。
随着抗体技术的发展，培养条件改善以及表达量的大幅度提高（生产规模已经到达3-5g/l），杂质的量（hcp）也随之提高[3]。
如果不能将介质清洗干净，这会影响工艺以及产品的质量。
在这种情况下使用高浓度的naoh （0.5m）的非常必要的。
载量及保留时间：一般protein a层析介质的理论载量为80g/l左右。
高载量可以减少层析柱的体积。
保留时间是指样品在层析柱内的停留时间或样品与层析介质的接触时间。
较低的保留时间可以使用较快的流速，从而提高生产效率。
在抗体纯化工艺开发时，对于动态载量以及保留时间是一个平衡的过程，单纯追求高动态载量，可能保留时间会较长，使得上样时间延长，这样培养基中的蛋白酶就有时间分解样品，以及上样时蛋白酶降解a蛋白，使a蛋白的脱落增加。
另外一些高载量的a蛋白层析介质，是通过提高配基密度增加动态载量的。
但是配基密度提高过程中，如果配基与的层析基质（骨架）的偶联不稳定，就会增加a蛋白的脱落。
此类a蛋白介质在初期动态载量较高，经过一段时间的使用，随着配基的脱落，载量很快降低。
单纯追求高流速，可能会使层析介质的柱压升高，提高了纯化过程中对生产设备（层析柱以及层析系统）的要求，从而增加层析柱以及层析系统的采购成本。
随着上样次数的增多（生产循环次数的增加）层析介质的反压增加，从而减少层析介质的寿命。
另外，有文献报道，以硅胶基质或cpg的在重复装柱的过程中易破碎，从而增加运行的压力以及影响介质的寿命。
现代的a蛋白的动态载量一般在35-60g/l之间，保留时间一般在3-5min左右（20cm 柱床高度，线性流速在250-400cm/h ）。