2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
专题2 2.2 动物细胞融合和单克隆抗体(练习作业)参考答案【学习后使用】

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体【作业】一、选择题1.关于动物细胞融合的说法,不正确的是()A.动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞C.常用的诱导动物细胞融合的因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射D.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能解题分析A项为动物细胞融合的含义;B项是融合后细胞的特点;C项中紫外线照射常用于人工诱变,可诱发基因突变,而不是诱导细胞融合的因素,常用的诱导动物细胞融合的物理因素是离心、振动和电激;D项为动物细胞融合的意义。
答案 C2.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是()A.诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段完全相同C.所采用的原理完全相同D.都能形成杂种细胞解题分析两种细胞工程所用的技术手段不完全相同,植物体细胞杂交时要先去除细胞壁后诱导原生质体融合,而动物细胞融合时,要先使细胞分散后再诱导细胞融合,B错误;诱导的方法,除动物细胞的融合常用灭活的病毒作诱导剂外,其他的二者基本相同,A错误;二者采用的原理不同,动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性,最终形成的是杂交细胞,植物体细胞杂交还用到细胞的全能性,最终形成杂种植株,C错误。
答案 D3.动物细胞融合属于动物细胞工程的技术手段之一,下列有关动物细胞融合的叙述正确的是()A.动物细胞融合产生的细胞称为重组细胞B.融合后形成的细胞为单核或多核细胞C.常用的诱导融合的生物诱导剂是聚乙二醇、灭活的病毒等D.也称细胞杂交,可由两个或多个动物细胞结合成一个细胞答案 D解析动物细胞融合产生的细胞称为杂交细胞,核移植产生的细胞称为重组细胞,A错误;融合后形成具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,B错误;诱导动物细胞融合的生物诱导剂是灭活的病毒,聚乙二醇属于化学诱导剂,C错误;动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,D正确。
人教版教学课件2.2.2 动物细胞融合

二、单克隆抗体的制备
自主阅读P52:传统的抗体的生产方法 及缺陷是什么? 传统的抗体生产方法是向动物体内反 复注射某种抗原,使动物产生抗体,然 后从动物血清中分离所需要的抗体。这 种生产抗体的方法产量和纯度都很低, 而且制备的抗体特异性差
二、单克隆抗体的制备 B淋巴细胞的特点:
1.B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗 体。 2.动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种 以上的抗体,每种抗体对特定的抗原具有特异 性免疫作用。 3.每一个B淋巴细胞只能产生一种特异性 抗体。
点击此处添加标题文字
2.哺乳动物感染抗原后,其体内会形成相应的B淋巴细 胞,B淋巴细胞能分泌相应的抗体以凝聚或杀死这些抗 原,动物在免疫反应的过程中,每一种B淋巴细胞能分 泌一种特异性抗体,要想获得大量的特异性抗体,必须 使能分泌单一抗体的B淋巴细胞大量增殖。B淋巴细胞具 有产生单一抗体的能力,但不能在体外增殖;骨髓瘤细 胞是一种癌细胞,它能在体外培养条件下无限增殖,但 不能产生抗体。因此,把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞 进行细胞融合,产生杂交瘤细胞,它会兼有两个亲本细 胞的特性----在体外条件下能不断增殖,同时能产生出 某种特异性抗体
专题 专题一:
2
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
2.2.2
动物细胞融合与单克隆抗体
学习目标: 1、说出动物细胞融合原理、过程 和方法 2、单克隆抗体的原理和应用 重点和难点: 1.动物细胞融合的过程 2.单克隆抗体的制备和应用
2.2.2
动物细胞融合与单克隆抗体
• 复习回顾: 1、植物体细胞杂交的过程是怎样的? 2、动物细胞和植物细胞有何不同 ?
一、动物细胞融合
5、过程:
动物细胞A
有丝分裂 诱导, 多核体 融合 (膜融合、质融合) (核融合)
2020-2021学年高二生物人教版选修三:2

2.2.2《动物细胞融合与单克隆抗体》编写人:审核人:高二生物组班级:组号:姓名:【学习目标】:1.掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。
2.简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。
【学习重难点】:1. 动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系2. 动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。
【学习过程】:一、动物细胞融合:1.概念:或动物细胞结合形成的过程,也称细胞杂交。
2.原理:。
3.诱导融合的方法(1)物理、化学方法:与植物体细胞杂交相同,如聚乙二醇、电激法等。
(2)生物方法:。
细胞。
4.过程:不同的两个或多个细胞――――――――――――――→PEG,电激等在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的。
5.结果:形成 细胞。
6.意义:突破了 方法的局限,使 成为可能。
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和 等的重要手段。
如:利用 ,为制造单克隆抗体开辟了新途径。
【合作探究一】:动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较二、单克隆抗体的制备:1.传统抗体的制备(1)方法⎩⎪⎨⎪⎧ 向动物体内注射 ,使之产生抗体 ⇓从动物 中分离抗体(2)缺点:产量低、 低、 差。
2.单克隆抗体的制备过程(1)①浆细胞特点:一种浆细胞产生一种单一抗体,B淋巴细胞在体外 (能/不能)无限增殖。
②骨髓瘤细胞特点:能,但不能产生。
③杂交瘤细胞特点:浆细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞,既能无限增殖,又能产生特异性抗体。
(2)解决思路:将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合为细胞。
(3)制备过程:(4)单克隆抗体的特点:强、高,并可大量制备。
(5)单克隆抗体的应用:①作为,具有准确、高效、简易、快速的优点。
②用于和。
【合作探究二】:1.为什么要对小鼠注射抗原?2.根据单克隆抗体制备过程思考下列问题:(1)制备单克隆抗体时,为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞?(2)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经聚乙二醇处理后,培养液中存在哪几种细胞?(3)选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么?【当堂检测】:1.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,下列叙述正确的是()。
动物细胞融合与单克隆抗体教案

目标
通过向学生介绍动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展动态及一些新的研究成果,使学生明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入,知识不断更新并向前发展,认识到学无止境,形成终生学习的意识。
课时安排
1课时
教学过程
教学内容
教师的组织和引导
个人札记
复习导入新课
一、动物细胞的融合
1、概念
2、原理
3、过程
4、意义
师:动植物细胞在结构上有何区别
生:动物细胞无细胞壁、无明显的液泡、无叶绿体。
师:既然动物细胞与植物细胞不同,那么动物细胞是否可以融合或杂交出示必修1人—鼠细胞融合图片,此实验说明动物细胞也是可以融合的。那么,如何实现动物细胞的融合,以及动物细胞融合后有何用途呢这就是今天这节课我们要学习的内容。——出题[引入学生思考,激发兴趣]
师:指导学生设计过程,并利用多媒体让学生根据动画内容来更改自己的设计思路。看完动画具体的讲解过程,然后让学生们根据理解再来观看动画,突破难点。最后总结优点。
【板书】3、优点
请大家阅读课本P54-55的内容,阅读后,请一位同学归纳一下单克隆抗体有哪些主要的用途。最好能结合其中的一个用途,如“生物导弹”问题,谈一谈你对其应用前景的认识。
长期以来,为了获得抗体,采用的是把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体,不仅产量低,而且抗体的特异性差,纯度低,反应不够灵敏。人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行无性繁殖,即克隆。
通过本节课的学习,大家应不仅能说出动物细胞融合的过程、单克隆抗体的生产过程,而且应能充分体验科学是一个过程及科学、技术、社会三者之间的关系。
动物细胞融合与单克隆抗体(教案)

动物细胞融合与单克隆抗体(教案)第一章:动物细胞融合概述1.1 动物细胞融合的定义与意义1.2 动物细胞融合的方法1.3 动物细胞融合的应用第二章:细胞融合的诱导方法2.1 物理方法2.1.1 电融合法2.1.2 超声波融合法2.2 化学方法2.2.1 聚乙二醇(PEG)融合法2.2.2 灭活病毒融合法2.3 生物方法2.3.1 细胞表面分子的诱导2.3.2 细胞内信号传导途径的诱导第三章:单克隆抗体的制备与鉴定3.1 杂交瘤技术的原理及流程3.1.1 杂交瘤技术的原理3.1.2 杂交瘤细胞的筛选与克隆化3.1.3 单克隆抗体的生产与纯化3.2 单克隆抗体的性质鉴定3.2.1 抗体特异性鉴定3.2.2 抗体亲和力鉴定3.2.3 抗体效价测定第四章:单克隆抗体的应用4.1 诊断方面4.1.1 酶联免疫吸附试验(ELISA)4.1.2 免疫荧光技术4.1.3 免疫组化技术4.2 治疗方面4.2.1 抗体药物4.2.2 抗体介导的免疫治疗4.2.3 抗体工程第五章:动物细胞融合与单克隆抗体的研究进展5.1 重组抗体技术5.1.1 重组抗体的制备方法5.1.2 重组抗体的应用5.2 抗体的人源化5.2.1 人源化抗体的制备方法5.2.2 人源化抗体的优势及应用5.3 抗体生物制药的发展趋势5.3.1 抗体药物的联合应用5.3.2 纳米抗体技术5.3.3 抗体药物的个性化治疗第六章:细胞融合的效率与优化6.1 影响细胞融合效率的因素6.1.1 细胞类型与状态6.1.2 诱导方法的选择与优化6.1.3 融合条件与时间的控制6.2 提高细胞融合效率的策略6.2.1 细胞预处理技术6.2.2 融合诱导剂的浓度与处理时间6.2.3 融合过程中的物理和化学条件控制第七章:杂交瘤细胞的筛选与克隆化7.1 筛选杂交瘤细胞的方法7.1.1 选择性培养基的筛选7.1.2 HAT选择性培养基的原理与应用7.1.3 筛选过程中的计数与纯度评估7.2 克隆化培养技术7.2.1 有限稀释法7.2.2 显微镜手工分离法7.2.3 自动化克隆化技术第八章:单克隆抗体的生产与纯化8.1 单克隆抗体的生产8.1.1 体外培养体系的设计8.1.2 培养条件的优化8.1.3 细胞株的生产能力评估8.2 单克隆抗体的纯化8.2.1 纯化方法的选择8.2.2 蛋白质A/G纯化法8.2.3 离子交换色谱和凝胶过滤色谱第九章:单克隆抗体的特性分析与质量控制9.1 抗体特异性分析9.1.1 抗原结合实验9.1.2 交叉反应分析9.1.3 抗体竞争实验9.2 抗体亲和力测定9.2.1 生物素-亲和力实验9.2.2 酶联免疫吸附实验(ELISA)9.2.3 表面等离子共振(SPR)技术9.3 抗体质量控制9.3.1 抗体产量与纯度的控制9.3.2 抗体稳定性的评估9.3.3 抗体生物安全性检测第十章:实验操作指南与常见问题解析10.1 实验操作指南10.1.1 实验材料与设备准备10.1.2 实验步骤与操作流程10.1.3 实验结果记录与分析10.2 常见问题解析10.2.1 细胞融合失败的原因10.2.2 杂交瘤细胞筛选困难的原因10.2.3 单克隆抗体产量低的原因10.2.4 抗体质量问题的排查与解决第十一章:动物细胞融合与单克隆抗体的实验设计11.1 实验目的与意义的确定11.2 实验步骤的设计与优化11.3 实验条件的控制与调整11.4 实验数据的采集与分析第十二章:动物细胞融合与单克隆抗体的研究案例分析12.1 案例一:治疗性抗体的研发与应用12.1.1 案例背景与问题陈述12.1.2 实验设计与方法12.1.3 结果分析与讨论12.2 案例二:诊断用单克隆抗体的开发12.2.1 案例背景与问题陈述12.2.2 实验设计与方法12.2.3 结果分析与讨论第十三章:动物细胞融合与单克隆抗体技术的拓展应用13.1 抗体偶联药物(ADCs)13.1.1 ADCs的制备与性质13.1.2 ADCs的应用与挑战13.2 免疫调节剂的研究13.2.1 免疫调节剂的类型与作用机制13.2.2 免疫调节剂的应用前景13.3 疫苗研发与免疫预防13.3.1 疫苗设计与制备13.3.2 疫苗的临床试验与评价第十四章:动物细胞融合与单克隆抗体技术的未来趋势14.1 基因编辑技术在抗体研究中的应用14.1.1 CRISPR/Cas9技术在抗体基因克隆中的应用14.1.2 基因编辑技术在抗体亲和力增强中的应用14.2 与高通量技术在抗体发现中的应用14.2.1 在抗体设计中的应用14.2.2 高通量筛选技术在抗体筛选中的应用14.3 细胞治疗与组织工程中的应用14.3.1 利用抗体技术促进细胞治疗的发展14.3.2 抗体技术在组织工程中的应用第十五章:教学总结与评价15.1 教学目标的回顾与评估15.2 学生反馈与教学改进15.3 教学资源的整合与优化15.4 课程考核与评价标准重点和难点解析本文主要介绍了动物细胞融合与单克隆抗体的相关知识,重点包括细胞融合的方法、诱导手段、单克隆抗体的制备与鉴定、应用以及研究进展。
2020-2021学年生物人教版选修3学案:2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体知识点一 动物细胞融合1.概念:两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,也称细胞杂交。
2.结果:形成单核杂交细胞。
3.原理:细胞膜的流动性。
4.过程:不同动物的两个或多个细胞――→灭活的病毒或PEG杂交细胞5.诱导方法物理法——离心、振动、电激;化学法——聚乙二醇(PEG);生物方法——灭活的病毒。
注意:灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但是并不破坏这些病原体的抗原结构。
6.灭活病毒诱导细胞融合的原理病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞相互凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
这一过程既能反映出糖蛋白在细胞识别中的重要作用,又能反映出细胞膜结构的流动性特点。
7.动物细胞融合的优点与应用(1)优点:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。
目前,已有种间、属间、科间,甚至动物与植物之间的细胞融合获得了成功。
(2)应用:是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。
植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性和植物细胞的全能性细胞膜的流动性步骤酶解法去掉细胞壁后,诱导原生质体融合,形成杂种体细胞,再经过植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合诱导方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、灭活病毒结果形成杂种植株形成杂种细胞【典题精练1】下列有关植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较,正确的是()A.两者应用的原理都是高度分化的细胞具有全能性B.两者都可用聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合C.两者细胞融合成功的标志都是形成融合细胞核D.两者的目的都是用于大量生产分泌蛋白【解析】植物体细胞杂交的原理是细胞膜具有流动性和植物细胞具有全能性,动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性,A错误;聚乙二醇(PEG)既可诱导动物细胞融合,又可诱导植物原生质体融合,B正确;植物体细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁,动物细胞融合成功的标志是形成融合细胞核,C错误;植物体细胞杂交的目的是产生杂种植株,动物细胞融合可用于大量生产分泌蛋白,D错误。
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体理一理判一判1.常用于诱导动物细胞融合的手段有:聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射。
(×)2.杂交瘤细胞进行体内培养,是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎。
(×)3.在动物细胞融合过程中,使用胰蛋白酶处理有利于杂交瘤细胞的形成。
(×)4.将抗原注入小鼠体内,以获得相应的B淋巴细胞。
(√) 5.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,创造出了许多动物、植物的新物种。
(×)6.筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞时,需要运用到抗原—抗体杂交的方法。
(√)7.经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产。
(×)8.生物导弹是指将单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合。
(√)悟一悟1.动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。
其中细胞膜融合是细胞融合的先导,细胞核融合是细胞融合的实质。
2.融合处理后的细胞不可以直接用于培养,还需要筛选。
因为诱导融合的手段只是促使细胞间的融合,不能保证所有的细胞都发生融合,形成的融合细胞也有多种,因此需要进行筛选。
3.细胞融合技术与有性杂交不同。
有性杂交有着十分严格的时空关系和物种界限;动物细胞融合则不同,它通过人工的方法克服了存在于物种之间的遗传屏障,从而能够按照人们的意愿,把不同物种的不同组织类型的细胞融合在一起。
4.对动物进行免疫的原因:B淋巴细胞要经过免疫过程,即接触抗原,增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞,才能产生相应的抗体,所以,与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。
5.融合过程中,有同种细胞间的融合和不同种细胞间的融合,还有未融合的细胞。
6.杂交瘤细胞的特点:既能无限增殖,又能产生专一性抗体。
7.能产生特定抗体的杂交瘤细胞在小鼠腹腔内培养与体外培养相比,优点是不需特定的培养基,不需严格的外界环境条件。
感悟体会:练一练1.[2019·江苏卷](多选)如图为细胞融合的示意图,下列叙述正确的是()A.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去(脱)分化再诱导融合B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C.c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因解析:若a细胞和b细胞是植物细胞,应先用酶解法去掉它们的细胞壁再诱导融合,A错误;无论是动物细胞还是植物细胞,两个细胞的融合都需要促融处理后才能实现,B正确;两个细胞融合成一个细胞,利用了细胞膜的流动性,C正确;c细胞同时具备了a细胞和b细胞中的所有基因,但是基因是选择性表达的,因此c细胞中基因不一定都能够表达,D错误。
动物细胞融合与单克隆抗体PPT
跟踪训练
(2011年滦县高二检测)能使动物细胞融 )
合的特有的诱导因素是( A.离心
B.灭活的病毒
C.电激
答案:B
D.振动
单克隆抗体的制备 1.关键思路及操作依据 (1)关键思路
①克隆单一的B淋巴细胞,形成细胞群。
②将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得杂交瘤细 胞。 (2)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因
)
动物细胞工程 动物细胞培养和融合,单 克隆抗体的制备 胰蛋白酶处理,制作细胞 悬液 物理方法、化学方法、生 物方法 单克隆抗体的制备 动物血清不可缺少
A.1 C.3
B.2 D. 4
【尝试解答】
【解析】
B
选B。植物细胞工程常采用的技术手段
有植物组织培养和植物体细胞杂交。动物细胞工程
常采用的技术手段有动物细胞培养、细胞融合、单 克隆抗体的制备,还有胚胎移植、核移植等。动、
细胞。
远缘 杂交的不亲合性,成为研 4.意义:克服了______ 遗传 、_________ 细胞免疫 、肿瘤和生物_______ 新品种 培 究细胞_____
育的重要手段。
二、单克隆抗体
1.传统抗体的获得
抗原 ,使动 (1)方法:①向动物体内反复注射某种_____ 抗体 ;②从动物_____ 血清 中分离所需抗体。 物产生_____ 产量低 、纯度低、_______ 特异性 差。 (2)特点:_______
动物细胞融合 1.原理:膜的流动性。 2.诱导方法:物理法——离心、振动、电激;化 学法——聚乙二醇;生物方法——灭活的病毒。
3.动物细胞融合的过程
4.优点:动物细胞融合技术突破了有性杂交方法
的局限性,使远缘杂交成为可能。 特别提醒 灭活是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感 染能力,但是并不破坏这些病原体的抗原结构。
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
学习目标二:单克隆抗体
B淋巴细胞
受抗原刺激 增殖分化
强调:效应B淋巴细胞是 效应B细胞 记忆B细胞 能够产生抗体的B淋巴细 (浆细胞) 胞,下文将其简称为B淋 巴细胞 抗体:能够与抗原发生特异
性结合的免疫球蛋白。
能产生抗体的细胞是浆 细胞(即效应B细胞)。
抗体的传统生产方法:
抗原 反复注射动物 该法制备抗体的缺点:
用途
获得杂种植株
小结:
动物细胞培养过程 三个重点过程 细胞核移植过程 单克隆抗体制备过程 一个诱导动物细胞融合的新方法 —— 灭活病毒 三个“一” 一个新细胞 —— 杂交瘤细胞 一个优势—— 单克隆抗体特异性强、 灵敏度高、可大量制备的优势
P55:1、植物体细胞杂交技术与动物细胞
融合技术有什么不同?
3、单克隆抗体的应用:
单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高、可大量制备
①作为诊断试剂(最广泛的用途) :
准ห้องสมุดไป่ตู้识别各种抗原物质,并特异性结合
优点:准确、高效、简易、快速
②应用于 治疗疾病:主要用于癌症治疗 运载药物:制成“生物导弹”
“生物导弹” =单克隆抗体+药物
既不损伤正常细胞,又减少了用药剂量。
2、结果: 形成单核的杂交细胞 3、原理: 细胞膜的流动性 物理法:离心、振动、电激 4、诱导方法 化学法:聚乙二醇(PEG)
生物法:灭活的病毒(最常用)
思考:为什么细胞融合过程中使用的病毒
需要灭活?不灭活行吗? 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋 白质分子和脂质分子重新排布,细胞 膜打开,细胞发生融合,不灭活的话 病毒会感染细胞,导致疾病。 灭活丧失感染性,但保留融合活性。
胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是:
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 (共20张PPT)
杂交细胞遗传物质特点: 含两种生物的遗传物质
物理方法:电融合法,离心 法等
诱导方法: 化学法: 聚乙二醇(PEG)
灭活的病毒 生物法:
(动物特有)
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合,形成杂交细胞
原理: 细胞膜具有一定的流动性
•为什么灭活的病毒能作为诱导剂?
因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分 子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细 胞发生融合。 •不灭活的病毒能作为诱导剂吗?
植物体细胞杂交过程示意图
(1)
(2)
(3)
(1)
(4)
(5)
2.2.2 动物细胞融合 与单克隆抗体
一、动物细胞融合
1.1动物细胞融合的概念
A细胞
动物细胞融合(也称细胞杂交):是 指两个或多个细胞融合形成一个单核细 B细胞 胞的过程。
人工诱导
两个核的融合是在杂种细胞第 一次有丝分裂时进行的
杂交细胞
不能,因为不灭活的病毒会感染细胞。
植物细胞杂交与动物细胞融合的比较
比较项目 原理
融合前处理 使用的酶 诱导方法
主要用途
植物体细胞杂交
动物细胞融合
细胞膜的流动性 细胞的全能性
去除细胞壁后诱 导原生质体融合
细胞膜的流动性
使细胞分散后 诱导细胞融合
纤维G)
物理、化学方法 灭活的病毒
A.经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞
B.没经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的B淋巴细胞
2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中,正确的是
(D )
A. 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同
C. 操作步骤基本相同
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专题二 细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
【学习目标】1. 列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同
2. 举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。
【学习重点】1.理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。
2.理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用
【学习难点】单克隆抗体的制备过程。
【学习过程】自主学习
一、动物细胞融合
1、概念:_______或_______动物细胞结合形一个细胞的过程,也称细胞杂交。
2、结果:形成___________。
3、过程:
4、 意义:克服了___________的不亲和性,成为研究___________、___________、
肿瘤和 _______________培育的重要手段。
例1、动物细胞融合的目的中最重要的是 ( )
A.克服远源杂交不亲和
B.制备单克隆抗体
C.培育新物种
D.生产杂种细胞
例2、能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 ( )
A.离心
B.灭活的病毒
C.电刺激
D.振动
二、单克隆抗体
1、抗体
⑴产生细胞:_________________。
⑵成分:__________。
⑶特点:从__________中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
2、单克隆抗体的制备
(1)过程
⑵杂交瘤细胞的特点:____________________、____________________。
⑶单克隆抗体的优点:____________、____________、____________。
三、单克隆抗体的应用
1、作为诊断试剂,具有__________、__________、__________、__________
给小鼠注射特 定的抗原蛋白 培养骨髓瘤细胞 → 从________中分 离B 淋巴细胞 →骨髓瘤细胞 −−−−→−灭活病毒融合未融合细胞 __________ __________ −−−→−选择培养基 _____________ −−
−→−克隆检测小鼠体内培养 体外培养 → __________ 抗体
的优点。
2、用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗_______、可制成___________。
例
3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是()
A.经过免疫的B淋巴细胞
B.不经过免疫的T淋巴细胞
C.经过免疫的T淋巴细胞
D.不经过免疫的B淋巴细胞
小结:动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同
【课堂反馈】
1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合,用灭活的仙台病毒处理后,
不可能获得下列哪种基因型的细胞( ) A.AAaa B.AaBb C.Aabb D.BBbb
2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是( )
①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞
A.①②
B.①③
C.②④
D.③④
3、“生物导弹”是指( )
A、单克隆抗体
B、带有特定药物的单克隆抗体
C、杂交细胞
D、B淋巴细胞
4、在克隆羊培育过程中,将雄羊的体细胞核移入雌羊的卵细胞中。
产生该克隆
羊的方式及该克隆羊发育成熟后所分泌的性激素依次是( ) A.无性生殖.雄性激素B.无性生殖.雌性激素
C.有性生殖.雄性激素D.有性生殖.雌性激素
5、单克隆抗体和血清抗体相比,其优越性在于( )
A、单克隆抗体能够制成“生物导弹”
B、单克隆抗体能够在体外制备
C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、免疫活性高
D、单克隆抗体制备过程简单
6、试管婴儿、试管苗、克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果,下面对其
生物学原理及技术的叙述正确的是( )
A.都属于无性生殖,能保持母本性状B.都是细胞工程的技术范围
C.都充分体现了体细胞的全能性 D.都不会发生基因重组和变异7、下列关于细胞工程的有关叙述,不正确的是( )
A.利用花药离体培养得到单倍体植株,从紫草的愈伤组织中提取紫草素,利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株,都利用了植物组织培养技术,而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株没有采用植物组织培养技术
B.在进行组织培养时,由根尖细胞形成愈伤组织的过程中,可能会发生细胞脱分化,染色体变异或基因突变,而不可能发生细胞分化和基因重组C.动物细胞融合与植物体细胞杂交相比,诱导融合的方法,所用的技术手段,所依据的原理均相同,都能形成杂种细胞和杂种个体
D.“试管婴儿”实质上就是“体外受精”和“胚胎移植”的“产物”,不能使不能产生精子或卵细胞的夫妇能得到自己的孩子;单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术
8、右图是某种淋巴细胞,膜外颗粒状物质为抗
体。
据图回答:
(1)这是细胞,它是由
分化而来的。
(2)抗体从开始合成到分泌出细胞,经过的细
胞结构顺序是(填标号)。
抗
体的分泌说明细胞的各种生物膜在结构上具
有,并以〔〕的
形式转变。
(3)在分泌抗体时要消耗由〔〕提供的能量。
(4)抗体的化学本质是,它能与发生特异性结合,发挥免疫效应,该过程属于免疫。
(5)若该抗体是单克隆抗体,则该细胞名称为。
在制备单克隆抗体的过程中,要应用的动物细胞工程的技术手段是。
9、英国科学家米尔斯坦和科勒在前人工作的基础上,利用小鼠的骨髓瘤细胞与某种B淋巴细胞,产生杂交瘤细胞,通过杂交瘤细胞增殖产生了单克隆抗体。
现在我们能不能利用此题原理生产人的胰岛素呢?黑人妇女海拉的宫颈癌细胞
分离建立了“海拉细胞系”至今已有半个世纪,仍然在世界上许多实验室广泛地传代使用。
能否利用“海拉细胞系”提供的细胞和胰岛B细胞产生“杂交瘤细胞”,经“杂交瘤细胞”产生胰岛素呢?理论上应该是可行的,现在假如可行的话,请按照细胞工程的原理回答下列有关问题。
(1)首先是获取胰岛B细胞:从胰腺中取得了胰岛的部分细胞,要使分离,应当使用酶。
(2)要将胰岛A细胞和胰岛B细胞分开最好是利用培养基。
(3)获取了胰岛B细胞后,要使它与“海拉细胞系”融合最好用诱导。
(4)要确定“杂交瘤细胞”是否成功,首先应先看能否;其次是看其能否产生。
10、右图为细胞融合的简略过程,请据图回答:
(1)若A、B是植物细胞,在细胞融合之前已用____ ______
____________处理,除去了____________;由A、B到细
胞C的过程中,常用的物理方法是
_____________________________。
融合完成的标志是_______________。
(2)若A、B是植物细胞,则形成的D细胞还要应用_______
____________________技术把D培养成植株。
(3)若A、B是动物细胞,一般取自________________________________,
然后用使其分散开来;由A、B到C的过程中,常用的不同于植物细胞融合的手段是,所形成的D称为,A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有。
(4)若该过程是制备单克隆抗体,A为小鼠效应B细胞,那么,在获得此细胞之前,小鼠已经被注射了。
注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应,生成了_____________________________________,图中B为。
(5)若该过程仍是制备单克隆抗体,在A、B到C的过程中,所形成的C有_____种,用来培养的D细胞应该是_________________。
从中选择出它的方法是_________________培养,获得D后,常用的培养方法是培养液中培养和______________________________________。
(6)若A为人细胞,B为鼠细胞,并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质,在C细胞时,细胞一半发红色荧光,一半发绿色荧光。
到D细胞阶段,两种颜色的荧光均匀分布,请解释原因。
______________________________________。
高二年级生物导学提纲选修3(八)选修班的参考答案
A、自主学习
阅读教材,整合提炼
一、1、两个;多个2、杂交细胞3、结合形成一个细胞的过程4、远缘杂交;细胞
遗传;细胞免疫;生物新品种
二、1、(1)效应B细胞(2)蛋白质(3)血清2、(1)脾脏细胞;自身融合的细胞;杂种细胞;
杂种细胞;单克隆(2)迅速大量繁殖;产生专一的抗体(3)特异性强;灵敏度高;产量大
三、1、准确;高效;简易;快速2.癌症;生物导弹
课堂反馈
1 C
2 C
3 B
4 A
5 C
6 B
7 C
8、效应B细胞B淋巴细胞或记忆细胞④⑤③②①一定的连续性 2 囊泡 6 线粒体球蛋白抗原体液杂交瘤细胞动物细胞融合
9、胰蛋白选择性灭活的病毒大量增殖胰岛素
10、⑴纤维素酶和果胶酶细胞壁电激、离心、振动产生新的细胞壁⑵植物组织培养⑶动物胚胎或出生不久的幼龄动物的组织或器官胰蛋白酶灭活的病毒杂交细胞一定的流动性⑷抗原效应B细胞、记忆细胞、抗体骨髓瘤细胞⑸ 3 杂交瘤细胞用特定选择培养基小鼠腹腔内增殖(6)细胞膜上的蛋白质是可以移动的。