DL-96细菌测定系统SOP文件
细菌测定系统DL-96Ⅱ技术参数

细菌测定系统(D1∙96∏)技术参数1适用范围:用于进行临床病原菌(细菌、真菌)的鉴定和体外抗菌药物MIC半定量分析。
2 .检测方法:鉴定:采用双岐矩阵及生化酶反应结合显色法;药敏:试验采用比浊法。
3 .★鉴定种类:提供临床常见11大类,超过500种病原菌,包含肠杆菌、非发酵菌、链球菌(肠球菌)、葡萄球菌(微球菌)、真菌、棒状杆菌、奈瑟氏球菌/嗜血杆菌等。
4,药敏种类:提供临床常见2200种抗生素,根据C1S1标准、EUCAST标准及相关指导性文件分析MIC能够报告M1C和S、I、R敏感度。
5.★准确率:对常见致病菌的鉴定准确率295%(投标中提供发表的文献作为佐证材料)6.仪器基础功能:6.1 ★仪器开机自检,采用高精度图像识别技术,通过图象处理器检测测试卡反应情况,上传数据库分析,得出试验结果。
6.2 仪器具备自动检测与手工录入功能,用户可查询和修改报告,并可以自定义报告单尺寸。
7.统计分析:软件可实现综合数据统计分析,预置220余项临床检测针对细菌抗菌药物的常用统计分析,可根据医院需求增加统计项目。
8.管理系统:具备院感系统,有院内微生物感染管理功能及STD性病分析管理系统,实现标本信息录入、查询和统计。
9.高级专家管理系统:9.1可提示超过20种特殊耐药表型,如MRSA>MRCNS>ESB1>β-1AC›ICR、H1ΛR.CRECRKPN>CRAB、CRPAE、VRE等。
9.2专家注释可提示药敏报告中不合理现象以及检验者如何正确操作、临床医师用药时要注意的问题等。
9.3抗生素优化组合,根据C1S1制定的临床用药标准,将抗菌药物分A、B、C、U、0.Inv组报告药敏结果。
10,共享数据:鉴定药敏数据可直接导出dbf格式,直接上传WHoNET,无需格式转换。
I1网络功能:仪器可与医院11S系统和/或H1S系统联网。
12.运行环境:WirIdoWS系统,全中文操作界面。
DL-96试剂SOP文件

DL-96试剂SOP文件第 1页,共4页【目的】规范DL-96细菌测定系统随机体外诊断试剂操作规程,保证检验质量。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。
【原理】试剂板由生化反应孔和抗菌药物MIC测定孔组成。
在生化反应孔中加入细菌悬液,经35-37℃孵育,在细菌代谢作用下生化反应直接颜色变化或经加入显色剂后产生颜色变化;抗菌药物MIC采用微量肉汤稀释法,加入还有细菌的MH肉汤培养基,经35-37℃孵育,根据试验孔是否出现浑浊(沉淀)确定细菌是否生长。
测定系统采用比色法对各项生化反应进行结果判定,根据细菌生化反应的概率来完成细菌的鉴定;测定系统通过比浊法对抗生素进行MIC半定量测定分析MIC值。
【操作程序】1 使用本试剂板的基本要求:1.1无特殊营养要求的革兰氏阳性菌、革兰阴性菌和真菌等病原菌1.2 18-24小时分离培养的单个纯菌落(或纯培养物)。
2 随机试剂板的选择:2.1根据待测菌的培养特性、菌落特征、氧化酶实验、触酶试验结果以及革兰染色情况,选择好相应的试剂板。
2.2试剂板的选择DL-96E 、DL-96NE、DL-96STAPH、DL-96STREP、DL-96FUNGUS3试剂板的接种3.1 菌悬液与药敏液的配置菌悬液制备:挑取纯培养单个菌落于稀释液瓶内壁研磨呈细菌悬液,要求如下:DL-96E 、DL-96NE、DL-96STAPH的菌悬液都制备0.5麦氏单位;DL-96STREP菌悬液制备2麦氏单位;DL-96FUNGUS菌悬液都制备1麦氏单位;药敏液的配置:具体请见细菌测定系统随机体外诊断试剂板使用说明书3.2 试剂板的接种3.2.1 DL-96E试剂板:适用于氧化酶试验阴性的革兰氏阴性杆菌的鉴定和抗菌药物MIC测定。
3.2.1.1菌悬液制备:挑取纯培养单个菌落于稀释液瓶内壁研磨呈细菌悬液(0.5麦氏单位)。
细菌测定系统随机体外试剂板示意图与附表

细菌测定系统随机体外试剂板示意图与附表【产品名称】细菌测定系统随机体外试剂板 【包装规格】DL-96NE 【示意图】DL-96NE 示意图VP IND PHE MLT GEL ONPG MDG SAL 4IPM81CTXC1/4SXT42C +8ATM1632FD640.061CIP4161632PIP64D L -96ECIT C LYS ARG ORN URE H 2S GLU ESC RAF INO RHA 816CTX328CFZ16MEL SUC LAC ARA 1816CAZ32MAL ADO SOR CAZC1/44MRP8832PTZ6481616AMP324NOR8FEP1616CPS32AMS32816AMC328CRO32CEC1688GEN16AMK32416TET8LEV442CEL 2CT48CXM162PB484MI8【生化反应表】附表A 生化反应结果判读标准【抗菌药物表】注:A组:为一级试验的首选药物,必须常规报告其敏感度,若敏感,治疗时应优先选用。
B组:也为一级试验的首选药物,但可以有选择地报告,当细菌对A组同类药物耐药或其他原因不能使用及无效时,可以选用于治疗。
C组:替代性或补充性药物,有选择地报告,在细菌对A、B组药物耐药或不适用时,可选用本组替代。
U组:仅用于治疗泌尿道感染的药物,其他感染部位分离的病菌不必报O组:对该组细菌有临床适应症但一般不允许常规试验与报告的药物。
细菌测定系统随机体外试剂板示意图与附表【产品名称】细菌测定系统随机体外试剂板 【包装规格】DL-96STREP 【示意图】DL-96STREP 示意图PGT TRE RAF SUC PGR ARA RIB VP ARG PYR 816PEN1684C +16.5NC 2TET16LEV82FD64SXT28HLS10000.06AMP168442HIP BE ESC INULAC 0.1210.5CHL32ERY80.254VA1628410.5FEP4210.5CTX40.50.25CLI140.50.25HLG500MAN SOR GLY 320.5168TEC32MDGCRO20.51AMC422OFL40.5AZI11CIP20.250.120.060.030.0150.0070.0030.250.120.060.030.0150.007D L -96S T RE P【生化反应表】附表A 生化反应结果判读标准【抗菌药物表】附表B 药敏试验抗菌药物注:NCCLS分组说明:A组:为一级试验的首选药物,必须常规报告其敏感度,若敏感,治疗时应优先选用。
DL-96全自动细菌测定系统技术参数(新 )

5、重复性:100%。
*
6、符合率:》98%。
*
7、培养时间:18-24小时。
8、自动读卡:光电比色及比浊法,快速准确。
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9、具备院内感染管理系统
(1)院内感染卫生学检测管理和统计功能
①物体表面菌量监测;
②医护人员手菌量监测;
③房内空气细菌监测;
④消毒液菌量监测;
⑤一次性医疗用品细菌监测;
⑥血液透析细菌量监测;
⑦自动生成各类院感监测结果;
⑧提供规范化院内感染监测报告;
⑨定期将各科室的监测结果统计分析,向上级主管部门报告或供院内感染委员会研究;
⑩医院院内感染统计。
(2)具有院内感染病例管理系统
①具有患者出入院登记与统计功能
②具有院内感染病例登记与统计功能
⑪细菌编码鉴定同型生化反应谱统计
13、测试卡组合多元化:有生化鉴定/药敏复合卡、单一生化鉴定卡、药敏测试卡
及定量的MIC卡,ESBLs确认测试卡,支原体鉴定药敏测试卡。
*
●14、检测报告:客户可自行根据需要编缉报告,可根据纸张尺寸缩放报告,可设置字体大小,可打印彩色报告单。
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15、药敏报告:
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①抗生素优化组合,选择性报告药敏结果,有效防止滥用抗生素;
③提供规范化院内感染病例管理各种报表与报告
●10、鉴定支原体:解脲脲原体和人型支原体2种,共计12种抗菌素,可测定支原体浓度。
●11、性病STD分析管理系统:可分析包括各种性病的检测及统计分析报告,有利于对各种性病的监测。
●11、细菌鉴定与药敏数据可与世界卫生组织药敏分析系统WHONET连接。
12、综合数据统计分析
细菌测定系统SOP文件

安顺市平坝区人民医院检验科编写:蒋可乾、黄维华制定日期:2016、06、05平坝区平黎大道审核:蒋可乾修订日期:2016、06、200851- 核准:谭桂林执行日期:20016、06、20DL-96细菌测定系统标准操作程序1.目的规范DL-96细菌测定系统的操作程序,保证检验质量。
2.授权操作人经培训并通过考核的微生物实验室工作人员。
3.原理DL-96细菌测定系统,就是对已分离培养出来的细菌、真菌等微生物进行种、属鉴定,并同时测定该菌对各种抗菌药物MIC的专用设备。
细菌测定系统由检测装置、嵌入式控制装置组成,测定系统采用比色、比浊法判定随机体外诊断试剂板微量反应孔阴阳性结果进行检测与分析,并自动生成细菌种类与抗菌药物MIC半定量分析结果。
试剂板由生化反应孔与抗菌药物MIC测定孔组成。
在生化反应孔中加入细菌悬液,经35-37℃孵育,在细菌代谢作用下生化反应直接产生颜色变化或经加入显色剂后产生颜色变化;抗菌药物MIC半定量测定采用微量肉汤稀释法,加入含有细菌的M-H肉汤培养基,经35-37℃孵育,试验孔就是否出现浑浊(沉淀)确定细菌就是否生长、测定系统采用比色法对各项生化反应进行结果(阴性或阳性)判定,按照细菌生化反应的概率来完成细菌的鉴定;测定系统通过比浊法对抗生素进行MIC半定量测定分析MIC值。
4、工作条件环境温度: 5℃~40℃; 相对湿度: ≤80%;大气压力: 76 kPa~106 kPa; 电源电压: AC220V+22V, 50Hz+1Hz; 光照度: 应避免阳光直射。
5.操作程序5、1 使用试剂板的基本要求5、1、1无特殊营养要求的革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌与真菌等病原菌;5、1、2 经18-24小时分离培养的单个纯菌落(或纯培养物);5、2随机试剂板的选择5、2、1根据待测菌的培养特性、菌落特征、氧化酶试验、触酶试验结果及革兰染色情况,选择好相应试剂板。
5、2、2试剂板的选择:DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPH、DL-96STREP、DL-96FUGNUS。
DL96细菌测定系统SOP文件

DL-96细菌测定系统标准操作规程文件编号:XXJYCZXJXXX版本:生效日期:共4页1.目的规范DL-96细菌测定系统的操作程序,保证检验质量。
2.授权操作人经培训并通过考核的微生物实验室工作人员。
3.原理DL-96细菌测定系统,是对已分离培养出来的细菌、真菌等微生物进行种、属鉴定,并同时测定该菌对各种抗菌药物MIC的专用设备。
细菌测定系统由检测装置、嵌入式控制装置组成,测定系统采用比色、比浊法判定随机体外诊断试剂板微量反应孔阴阳性结果进行检测和分析,并自动生成细菌种类和抗菌药物MIC半定量分析结果。
4.工作条件环境温度: 5℃~40℃;相对湿度: ≤80%;大气压力: 76 kPa~106 kPa;电源电压: AC220V+22V, 50Hz+1Hz;光照度: 应避免阳光直射。
5.操作程序5.1使用试剂板的基本要求5.1.1无特殊营养要求的革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和真菌等病原菌;5.1.2经18-24小时分离培养的单个纯菌落(或纯培养物);5.2试剂板的选择5.2.1试剂板的种类:DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPH、DL-96STREP、DL-96FUGNUS。
5.2.2根据待测菌的培养特性、菌落特征、氧化酶试验、触酶试验结果及革兰染色情况,按照说明书的要求选择相应试剂板。
5.3试剂板的接种5.3.1菌悬液与药敏接种培养液的配制5.3.1.1菌悬液的配制:挑取纯培养单个菌落于稀释液瓶内壁研磨并制备细菌悬液要求如下,DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPH的菌悬液为0.5麦氏单位;DL-96STREP菌悬液制备为2麦氏单位;DL-96FUGNUS的菌悬液制备为1个麦氏单位。
上述菌悬液可使用DL-ZD浊度计进行测定。
5.3.1.2药敏接种培养液的配制:DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPHDL-96、DL-96STREP吸菌悬液50μl,加至肉汤培养基内,充分混匀。
DL-96微生物检测系统的临床应用价值
目前,随着科学技术及社会经济的快速发展,以自动化系统取代传统手工操作已成为当代临床微生物检验进步的标志之一。
目前国外产品占据了国内微生物自动化检测系统的主要市场。
其优良的性能毋庸置疑,但昂贵的价格让许多基层医院望而却步。
该院自2011年引进珠海迪尔半自动微生物鉴定药敏系统,应用一年多来受到微生物检测人员及临床医生的广泛好评,现报道如下。
1材料与方法1.1材料法国梅里埃公司生产的API 系列鉴定条及相应ATB 板条,珠海迪尔公司生产的系列微生物鉴定药敏板条。
1.2质控菌株及检测菌株选用ATCC25922、ATCC25923和ATCC27853。
检测菌株选用2010—2012年南京军区室间质评菌株20株,该院2012年1—5月门诊和住院患者临床分离常见致病菌株20株。
1.3准确率和符合率试验M 采用比浊仪制备所需麦氏单位菌悬液,与法国梅里埃API、ATB 板条平行试验。
1.4分析系统及统计方法上海科华齐效检验信息系统,DL-96细菌测定系统,采用SPSS11.5统计软件进行分析,相关性使用χ2检验。
2结果使用DL -96微生物检测系统鉴定细菌结果准确率为100%,API 鉴定系统检测一株葡萄球菌错误,DL-96微生物检测系统对常见致病菌鉴定准确率为100%;与梅里埃API 鉴定系统相比符合率为95%,经比较,差异无统计学意义(P >0.05),但因无链球菌和真菌API 鉴定系统产品而缺乏此类细菌的比对数据,见表1。
表1不同鉴定系统细菌鉴定准确率3讨论3.1DL-96微生物检测系统工作原理DL-96微生物检测系统根据各类细菌的不同理化性质设计相应的检测板,每快板含约28种生化反应孔和不同抗菌药物MIC 测定孔,在各鉴定孔中加入菌悬液,药敏孔中加入含菌培养基,经35~37℃孵育过夜。
采用比色法检测经细菌代谢作用下产生的直接生化反应颜色变化或加入显色剂后的颜色变化,抗菌药物MIC 测定试验以比浊法判定是否出现浑浊确定细菌是否生长,将细菌快速、准确地鉴定到种属,同时分析抗菌药物MIC 值,经权威专家系统自动生成细菌鉴定和抗菌药物MIC 半定量分析结果[1]。
107-室内质量控制程序---检验科作业指导书
物培养基的质量检验规程》。
3.2 生化反应试验与鉴定试剂的质量控制标准 购于杭州天的 OF 管、半固体培养基、克氏双糖铁
培养基、胆汁七叶苷、高盐培养基的质控标准参照《全国临床检验操作规程》,鉴定纸片(OP 纸片、
杆菌肽纸片、X、V、X+V 因子纸片)、Slidex Stap Plus 乳胶凝集试剂、各种诊断血清试剂、染液、触酶和
4.2 CO2 恒温孵箱 每天工作开始前与下班前观察 CO2 的浓度和温度,并记录,其温度校准同 4.1.2 步骤,而 CO2 的浓度是每半年校准一次,由厂家进行校准并出具相应报告。
4.3 光电比浊仪与生物安全柜应按计量局规定进行定期校准,校准周期为一年一次。 4.4 Bact/Alert120 微生物培养仪的质控监测, 每天执行 QC,并每月检查 CELL STATUS,保证系统 的敏感性和可行性。 4.5 BACTEC 9240 全自动血培养仪的质控监测, 每天执行 QC,并每月检查 CELL STATUS,保证系统 的敏感性和可行性。 4.6 MicroscanW/A40 微生物鉴定药敏分析仪的质控监测 每日进行仪器自检 QC 及维护,使用 CLSI 相应 QC 建议的质控菌株进行检测板的鉴定、药敏的质控监测,质控频率为每月一次。 4.7 DL-96 细菌测定系统的质控监测 每日进行仪器维护,使用 CLSI 相应 QC 建议的质控菌株进行 检测板的鉴定、药敏的质控监测,质控频率为每月一次。 4.8 培养基 每批新购置的商品培养基附带有厂家的质控报告,实验室可无需进行质控检测,如 使用过程中发现需要进一步进行质控监测,则可按商品培养基的质量检验规程中的标准来执行并形成 记录,具体可见《常见培养基质控程序》。 4.8 试剂 正常情况下,在试剂投入市场之前,厂家已经完成了对试剂的完整调查评估,每一种试 剂都被厂家调试、核对并验证过,监测试剂的有效性是我实验室的室内质控方法,并不是重复厂家做 过的事情。所有新批号试剂在使用前均应进行一次质控监测,各种试剂使用相应的阳性、阴性质控菌 株进行质控监测并形成记录,质控频率视不同的试剂要求不同(见下表 11-11-3),质控操作详见相应 的质控程序。 4.9 药敏试验 我科现行的药敏试验方法有肉汤微量释稀法(Microscan 、DL-96 仪器),纸片扩 散法和 E-test 法,各种方法所使用的质控菌株、质控方法及频率(见下页表 11-11-3)具体见相应的 药敏试验质控程序,质控结果以表格的形式完整记录。 4.10 室内质量控制坚持做到有记录有失控情况处理措施分析,并有室内质控每月总结分析。按 《 检验科室内质评月总结分析记录表》填写。
天隆核酸纯化仪___ 96 SOP
天隆核酸纯化仪___ 96 SOP简介本文档旨在提供天隆核酸纯化仪GeneRotex 96的操作规程(SOP)。
该仪器是一种高效且可靠的核酸纯化系统,适用于实验室中的DNA和RNA纯化。
安全注意事项在操作天隆核酸纯化仪___ 96之前,请务必遵守以下安全注意事项:1.戴上个人防护装备,如实验手套和眼镜。
2.确保仪器周围的工作区域清洁、整洁,并遵守实验室安全规定。
3.在操作仪器时,避免接触热表面以防烫伤。
4.在打开或关闭仪器盖子时,小心防止手指夹到。
实验准备在进行天隆核酸纯化仪___ 96的操作前,请按照以下步骤进行实验准备:1.检查核酸纯化仪是否处于正常工作状态,并连接电源线。
2.准备所需的试剂盒和实验材料。
3.根据试剂盒说明书准备工作缓冲液和样本。
操作步骤1.开启天隆核酸纯化仪,确保设备处于待机状态。
2.打开仪器盖子,将待纯化的样本载入96孔板中,注意避免交叉污染。
3.关闭仪器盖子,确保盖子完全闭合。
4.在操作仪器面板上选择所需的核酸纯化程序和相关参数。
5.开始核酸纯化程序,等待程序运行完成。
6.程序运行完成后,将纯化好的核酸样品保存或进一步处理。
维护和清洁在使用天隆核酸纯化仪___ 96之后,请进行维护和清洁以确保设备的正常运行:1.关闭电源并拔出电源线。
2.用适当的清洁剂和干净的纸巾擦拭仪器的表面和内部。
3.定期检查仪器的滤网和排水管道,清除任何堵塞或杂质。
请按照本操作规程的步骤进行天隆核酸纯化仪GeneRotex 96的操作,确保安全和准确性。
如有任何疑问或故障,请及时与维修人员联系。
珠海迪尔细菌测定系统随机体外诊断试剂板使用说明书
珠海迪尔细菌测定系统随机体外诊断试剂板使用说明书细菌测定系统随机体外诊断试剂板使用说明书【产品名称】细菌测定系统随机体外诊断试剂板【包装规格】DL-96FUNGUS【预期用途】用于真菌的鉴定和抗菌药物MIC测定。
【适用仪器】DL-96细菌测定系统。
【原理】试剂板由生化反应孔和抗菌药物MIC测定试验孔组成,在生化反应孔中加入细菌悬液,抗菌药物MIC测定试验孔中加入培养基,经35-37?孵育.生化反应在细菌代谢作用下直接产生颜色变化或经加入显色剂后产生颜色变化,抗菌药物MIC测定试验根据试验孔是否出现浑浊(沉淀)确定细菌是否生长,通过细菌测定系统分析从而将细菌快速、准确的鉴定到种属同时分析抗菌药物MIC值。
【主要组成成份】1.DL-96FUNGUS试剂板 10块2.稀释液、同化稀释液、药敏稀释液 10人份3.说明书 1份【样本要求】使用本试剂板的被测菌应符合以下要求:?新鲜分离的单个纯菌落(或纯培养物);?培养物经显微镜检查为酵母样真菌;【检验方法】1.菌悬液制备:挑取纯培养单个菌落于稀释液瓶内壁研磨呈菌悬液(为1个麦氏单位)。
2.用连续移液器(配无菌吸头)吸取菌悬液100μl加到同化稀释液中,充分混匀,加到试剂板C1-C11孔和D1-D12孔,每孔100μl。
3.从药敏稀释液中取100μl加入E12。
4.再从菌悬液中吸取菌悬液20μl加入药敏稀释液中,充分混匀后,分配到E1-E11及F2-F12,每孔100μl。
5.撕开不干胶的纸对齐贴于试剂板,30?湿盒内孵育。
6.从菌悬液2滴置小试管内,加入0.5ml羊血清(小牛血清也可),35?孵育3小时,立即用显微镜检查芽管形成。
7.试剂板孵育24—72小时,每日观察,当F12阳性对照孔明显变浊时,立即判读结果。
【结果判读】将试剂板放进细菌测定系统分析,分析完毕后,自动判定细菌种属和抗菌药物MIC半定量结果,并打印报告单(细菌测定系统的详细操作另介绍)。
表A 抗菌药物MIC测定试验抗菌药物表缩写代号药物名称FLU 氟胞嘧啶 FlucytocineFLZ 氟康唑 FluconCzoleITR 伊曲康唑 ItrCconCzoleVRC 伏力康唑 VoriconazoleAMB 两性霉素 Amphoterricin B【主要性能指标】1、准确率试剂板对质控菌株鉴定的准确率为100%;试剂板对质控菌株抗菌药物MIC测定的准确率为100%。
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DL-96细菌测定系统标准操作规程
文件编号:XXJYCZXJXXX
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1.目的
规范DL-96细菌测定系统的操作程序,保证检验质量。
2.授权操作人
经培训并通过考核的微生物实验室工作人员。
3.原理
DL-96细菌测定系统,是对已分离培养出来的细菌、真菌等微生物进行种、属鉴定,并同时测定该菌对各种抗菌药物MIC的专用设备。
细菌测定系统由检测装置、嵌入式控制装置组成,测定系统采用比色、比浊法判定随机体外诊断试剂板微量反应孔阴阳性结果进行检测和分析,并自动生成细菌种类和抗菌药物MIC半定量分析结果。
4.工作条件
环境温度: 5℃~40℃;相对湿度: ≤80%;大气压力: 76 kPa~106 kPa;
电源电压: AC220V+22V, 50Hz+1Hz;光照度: 应避免阳光直射。
5.操作程序
5.1使用试剂板的基本要求
5.1.1无特殊营养要求的革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和真菌等病原菌;
5.1.2经18-24小时分离培养的单个纯菌落(或纯培养物);
5.2试剂板的选择
5.2.1试剂板的种类:DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPH、DL-96STREP、DL-96FUGNUS。
5.2.2根据待测菌的培养特性、菌落特征、氧化酶试验、触酶试验结果及革兰染色情况,按照说明书的要求选择相应试剂板。
5.3试剂板的接种
5.3.1菌悬液与药敏接种培养液的配制
5.3.1.1菌悬液的配制:挑取纯培养单个菌落于稀释液瓶内壁研磨并制备细菌悬液要求如下,
DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPH的菌悬液为0.5麦氏单位;
DL-96STREP菌悬液制备为2麦氏单位;
DL-96FUGNUS的菌悬液制备为1个麦氏单位。
上述菌悬液可使用DL-ZD浊度计进行测定。
5.3.1.2药敏接种培养液的配制:DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPHDL-96、DL-96STREP吸菌悬液50μl,加至肉汤培养基内,充分混匀。
DL-96FUGNUS吸取菌悬液20μl加入药敏培养液中,充分混匀。
5.3.2试剂板的接种与孵育
5.3.2.1生化反应孔和抗菌药物MIC测定孔按照试剂板使用说明书的要求,用连续移液器(配无菌吸头)吸取菌悬液与药敏液加入各孔,每孔100μl,试剂板的接种也可以采用SCAN-10自动加样仪自动接种.
5.3.2.2撕开不干胶的纸对齐贴于鉴定板,35-37℃孵育(DL-96FUGNUS试剂板放置30℃湿盒内孵育)。
5.4 试剂板的检测
5.4.1试剂板孵育培养18-24h后(个别生长缓慢者可延长至36—48小时)检测试剂板,按照使用说明的要求向DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPHDL-96、DL-96STREP测试板加入辅助试剂;
5.4.2打开细菌测定系统电源开关,待系统启动完毕;
5.4.3打开细菌测定系统检测软件,选择用户名和密码,点击确认并登录;
5.4.4录入标本编号及患者信息资料。
选择菌落种类及测试板类型后,按“判别”键,系统会自动伸出试剂板托盘,将试剂板置入托盘中,按“是”,系统自动判读试剂板,读板完毕取出试剂板,点击“确定”,系统自动弹出判读结果;
5.4.5肉眼核对试剂板及判读结果无误后,如遇到必做项,则填入结果后,点击“判定”,系统自动弹出鉴定细菌的种属,对鉴定结果无异议,则点击“确认”;
5.4.6点击“结束”,系统弹出选择打印药物框,如需对打印的药物种类进行调整,则调整后点击“确认”,系统自动生成报告单。
5.5报告的查询与统计
5.5.1按“查询”键进入查询界面:输入查询条件,按“查询”键,观察结果。
5.5.2按“统计”键进入统计界面:输入统计条件,按“统计”键,在微生物专家系统中统计,观察结果。
6.质量控制
6.1 质控方法:
6.1.1DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPH、DL-96STREP、DL-96FUGNUS为鉴定与药敏复合试剂板,因此对其鉴定与药敏一起进行质控。
6.1.2鉴定与药敏的质控:每新进一批试剂板做一次质控:每一新生产批号试剂板需用相应质控菌株做质控以检测生化鉴定和抗菌药物MIC测定的可靠性。
材料和试剂批号必须记录并保存。
6.2质控菌株
试剂板种类质控菌株
DL-96E ATCC25922 大肠埃希氏菌
DL-96NE ATCC27853 铜绿假单胞
DL-96STAPH ATCC25923 金黄色葡萄球菌
DL-96STREP ATCC29212 粪肠球菌
DL-96FUGNUS ATCC90029 白色念珠菌
6.3质控步骤
6.3.1使用6.2的质控菌株制备DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPH、DL-96STREP、DL-96FUGNUS试剂板;
6.3.2使用细菌测定系统检测制备好的试剂板,对比厂家提供的质控标准,观察质控是否失控。
6.4失控原因分析和处理
6.4.1如果失控应按以下步骤进行初步分析与处理:
1)错误使用质控菌株;
2)没有按照标准操作程序操作;
3)试剂板超出有效期;
4)测定系统严重误差。
6.4.2无上述因素失控应进一步分析与处理:
1)重覆实验以确认误差结果;
2)确认比浊仪校正在有效期内,功能正常;
3)确认所有试剂均在有效期内,并妥尚保存(注:试剂板2-8ºC 储存;开启封后立即使用,辅助试剂常温保存);
4) 确认培养箱温度是否正常;
5) 确认标准菌株是否污染;
6) 确认菌悬液浓度符合要求;
7) 确认标准菌株接种平板正确、孵育时间正确;
8) 确认无菌操作下打开试剂板,以防空气杂菌污染。
6.4.3 如误差无法解决,应联系厂家的技术支持人员。
7.维护与保养
7.1日常保养:检查测定系统开机和关机以及功能是否正常, 仪器表面如有污迹,沾少量纯净水擦拭或可用干净软布沾清洁膏清洁。
7.2 定期保养:
7.2.1应定期用干净软布沾少量纯净水或可用干净软布沾清洁膏清洁检测托盘。
7.2.2长时间不使用本系统,应用软布或仪器套覆盖仪器防止灰尘进入并定期保养。
7.2.3细菌测定系统为复杂精密仪器,在使用过程中出现严重误差需要校准的,其校准工作需由厂家专业工程师进行校准。
8.校正
8.1年度校正:细菌测定系统为复杂精密仪器,其校准工作一年一次需由厂家专业工程师进行校正。
8.2严重误差、故障、搬迁校正:细菌测定系统为复杂精密仪器当出现严重误差、故障、搬迁应由厂家专业工程师进行校正。
8.3校正后验证:校正后的测定系统,微生物室负责人对其进行质量控制的验证,达标后方可投入临床使用,并做好相关登记。
9.应急处理
9.1细菌测定系统出现开机异常的情况,关闭系统并切断电源半小时后,再观察。
9.2细菌测定系统出现故障无法解决时,应及时报告负责人并联系厂家技术人员处理。
9.3出现影响检验质量而又不能及时维修的故障,应立即停止仪器鉴定及药敏试验,采用其他仪器设备或方法替代试验。
10.注意事项
10.1仪器需放置在坚固台面上正常工作条件下运行,室内通风良好,避免强光直射。
10.2试剂板使用时应防止试剂液体以及其他液体溅到仪器上,避免污染和腐蚀。
10.3检测托盘未有放置随机试剂板,请勿检测使用。
10.4系统使用完毕需将仪器擦拭干净,测定系统表面严禁用腐蚀性清洁剂清洗。
10.5工作结束后应关闭电源,用软布或仪器套覆盖仪器防止灰尘进入。
10.6用户使用测定系统之前,请仔细阅读使用说明书。
参考文献
[1]细菌测定系统说明书
[2]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL42:2012医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明
[3]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2012医学实验室质量和能力认可准则。