临床微生物SOP-室内质量控制管理程序1教学教材

临床微生物SOP-室内质量控制管理程序

1.目的：

规范微生物实验室管理程序，确保临床报告的质量。

2.适用范围：

微生物实验室的所有检验项目。

3.职责：

实验室检验人员均必须熟知并遵守本程序。

4.程序：

4.1 分析前质量管理

4.1.1 检验申请单临床医生应按照《微生物检测项目申请程序》申请临床微生物检测。口头申请追加样本检验项目，必须在样本有效期内申请，并补正式的检验申请单。

4.1.2 生成微生物检验标本标签护士应在核对医嘱、病人信息和检验申请信息后，按照《微生物标本检验标签程序》生成申请单和微生物检验项目标签，并将微生物检验项目标签正确贴于容器上。

4.1.3 标本的采集手册实验室应制定样本采集手册，指导正确采集和处理样本。

4.1.4 样本采集和运输样本采集人员应按照《采样前病人识别程序》确认病人，按照《标本采集、运输程序》采集样本，并在规定的时间和温度范围内，使用指定的运输培养基，安全运送到微生物室。

4.1.5 样本的接收样本接收人员应严格按照《标本接收、识别程序》《标本拒收程序》对标本接收或拒收，并记录。

4.1.6 微生物检验标本信息输入微生物实验室接种实验室岗位检验人员严格按照《微生物标本信息输入程序》录入、核对病人信息和标本信息等质料。

4.1.7 样本储存微生物实验室接种岗位检验人员按照《微生物标本检验前储存程序》正确储存未能及时处理的标本。已经检验的样本应在保证性质稳定的条件下，将样本以适当的方式保留到规定时间内，以便能在出具结果报告后可以复查，

或做补充检验。

4.2 分析中质量管理

4.2.1 试剂的质量控制

4.2.1.1 所有试剂用于检测标本前，必须做质控以评估质量并记录质控结果，只

有质控合格才可以使用。下列试剂每进一批新批号或货号要求用阴、阳性标准菌

株或质控菌株评估其质量（表2-1）。

触酶、氧化酶、凝固酶、β-内酰胺酶、Optochin、X、V 和XV 纸片；

细菌鉴定系统使用的每一种鉴定卡及相关试剂；

表2-1 常用实验试剂质量控制

试剂阳性对照阴性对照监测频率

氧化酶铜绿假单胞菌A TCC27853 大肠埃希菌A TCC25922 每次新配制时及使用中每个工作日

触酶金黄色葡萄球菌A TCC25923 A群链球菌A TCC19615 每次新配制时及使用中每个工作日

靛基质大肠埃希菌A TCC25922 肺炎克雷伯菌A TCC13883 1%蛋白胨水及靛基质试剂:每次新配制

时及使用中每个月1次直接用于检测病人标本有内标准的抗原试验如：金黄色葡萄球菌乳胶凝集试

剂（每天或每次做质控）；

抗血清（至少每半年用阴、阳性质控菌株做质控）；

革兰染液（每周一次用阴、阳性质控片做质控）；

抗酸染液（每次使用要求用阴、阳性质控片做质控）；

自制试剂（每配制一批新试剂做质控）。

4.2.1.2 平行试验新批号试剂使用前必须用老试剂或参考材料平行试验。

4.2.1.3 无厂家商特别说明时，不同批号的试剂不可混用。

4.2.1.4 缺陷或失控试剂只能用于培训员工业务能力，否则报废处理。培训试剂

应明显标记“仅培训使用”，并与检验试剂分开放置。

4.2.2 培养基的质量控制

4.2.2.1 购买的有质量保证标准的培养基实验室应保存制造商所遵循的质量保

证标准，以及每批号产品完成无菌试验、生长试验、生化试验及质量控制性能的

合格证明等文件；无质量保证标准的培养基，每批号和（或）每次购买的产品应

检测相应的性能，包括生长试验或与旧批号平行试验、生长抑制试验（适用时）、

生化反应（适用时）等。

4.2.2.2 外观检查合格培养基的标准：完整。琼脂附于平板底部，血平板应不透明、没有溶血情况，平板颜色好、湿润，无干裂、无污染、无浑浊或沉淀、无冻伤、无过热现象，琼脂厚度至少3mm，如发现与上情况不符的培养基，应不予使用。

4.2.2.3 无菌试验抽检培养基数量：100 块以内，随机抽检5；100 块以上可随机取10 块平板或10 支试管培养基进行无菌试验。35 度培养24 小时后观察是否有细菌生长，无细菌生长为合格。

4.2.2.4 生长试验及生化反应试验质控菌株（表2-2,2-3）35℃培养24 小时，用无菌生理盐水配制 1.5 麦氏单位的细菌悬液。无菌生理盐水1:100 稀释，每块平板接种10μl（浓度相当于10^3-10^4CFU/平板）。培养24-48 小时。符合生长，生化试验质控标准者方可使用。失控者必须记录失控情况并有相应的纠正措施。

表2-2 生化试验用培养基的质控

培养基质控菌株鉴定标准

克氏双糖铁培养基大肠埃希菌A TCC25922 +/–

奇异变形杆菌A TCC49005 –/H2S

福氏志贺菌质控菌株–/+

铜绿假单胞菌A TCC27853 –/+ 1蛋白胨水大肠埃希菌A TCC25922 +

肺炎克雷伯菌A TCC13883 –鸟氨酸阴沟肠杆菌A TCC45301 +

肺炎克雷伯菌A TCC13883 –

尿道定位显色培养基大肠埃希菌A TCC25922 紫红色

肺炎克雷伯菌A TCC13883 蓝色

表2-3 培养基的生长试验质控

培养基质控菌株鉴定标准

巧克力平板流感嗜血杆菌ATCC49247 生长情况好

血平板金黄色葡萄球菌A TCC25923 中度到大量生长

A群链球菌ATCC19615 生长，β溶血

肺炎链球菌ATCC49619 生长，α溶血中国蓝培养基大肠埃希菌A TCC25922 生长，蓝色菌落

奇异变形杆菌ATCC49005 部分抑制

粪肠球菌ATCC29212 不生长SS培养基大肠埃希菌A TCC25922 部分或全部抑制

福氏志贺菌质控菌株生长，无色菌落

4.2.3 自动化仪器试剂质控

4.2.3.1 鉴定卡的质控每新进一批鉴定卡做一次质控，每一新生产批号鉴定卡需用相应质控菌株做质控以检测生化反应的可靠性。材料和试剂批号必须记录并保存。

4.2.3.2 药敏卡的质控分为日质控、周质控和新进药敏卡质控。新用户在熟悉操作前，建议先进行日质控，直至结果满意可转为周质控。

日质控：按质控菌株表要求，没种药敏卡每日用相应质控菌株进行质控，连续检测20 日并记录结果。将某一种质控菌株及其对应的抗生素作为一个组合，连续检测20 日得出20 个结果，只要每个组合的20 个结果中，失控不超过 2 个，则可转为周质控。

周质控：每周用相应质控菌株进行质控并记录结果。如抗生素种类改变，必须重新做日质控直至结果满意再转为周质控。

新进药敏卡质控：没一新生产批号药敏卡需要用需要质控菌株做质控，以检测MIC 结果的可靠性。材料和试剂批号必须记录保存。

鉴定卡和药敏卡质控菌株应根据仪器品牌种类而定，表2-4 以Vitek 2Compact 为例介绍常用反应卡使用的质控菌株。