孕妇牙周病中牙龈卟啉单胞菌和血清炎性因子与早产低体重儿的关系

１．３．４ ＰＣＲ反应参ｉｎ，９４℃变性１ ｍｉｎ，５６℃退
ｍｉｎ。阳性对照采用Ｐ触以ｓ 火１ ｍｉｎ，７２℃复性１ ｍｉｎ，３５个循环，循环结束后
７２℃延伸７
Ｗ５０标准
菌株（武汉大学口腔陕学院教育部重点实验室提供），
阴性对照不加模板，以同体积三蒸水代替。用１．８％
万方数据
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华两ｔ１腔医学杂志第２７卷第６期２００９年１２月 Ｗｅ８ｔ ＣｈｉＩｌａ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｌ；ｙ ＶｏＩ．２７ Ｎｏ．６ Ｄｅｃ．２００９
明，牙周病可能是导致ＰＬＢＷ的危险因素。本研究 对分娩出ＰＬＢＷ儿的产妇进行临床牙周检查，通过 １６Ｓ ｒＲＮＡ ＰＣＲ法检测产妇龈下菌斑中牙龈卟啉单胞
ＳｔＩｌｄｙ伽ｍａｔｅ瑚ｌ ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ ｍ辩ａｓ髑０ｆ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏ璐ｈｉｐｓ ｂｅｔｗｅ蚰ＰＤ，ｐ缈ｒＤｍ彻船曲谚阳班，辩ｒ哪ｐｍ—
ｉＩＩｌｍｎａ啪ｔｏｒｙ ｍｅｍａｔｏ璐ａｎｄ ｐｒｅｔｅ咖Ｉｏｗ ｂｉｒ嘲ｗｅｉ出 ￡肼ｌ，∞１’２’ｍⅣ历增—ｍｆｌ，Ｃ舾Ⅳ舶ｎｇ一６０２，孤，
１．４．２采集血清产妇静脉血于入院分娩之前抽取 肘静脉血３ ｍＬ，脐带血于分娩当时抽取５ ｍＬ，立即
置于普通无抗凝采血管之中，室温静置３０ ｍｉｎ后，
２ ５００ ｒ·ｍｉｎ。离心１０ ｍｉｎ，取卜清液，每管２５０“Ｌ分 装保存于ｌ ｍＬ ＥＰ管中，置于一２０℃冰箱备用。
１．４－３检测ＩＬ一６、ＩＬ一１Ｂ和ＰＧＥ：水平 按说明书采 用双抗体夹心法检测ＩＬ一６、ＩＬ—ｌＢ，抗原竞争法检 测ＰＧＥ２，５ ｍｉｎ内分别于酶标仪为４５０ ｎｍ和４０５ ｎｍ波 长测定光密度值，记录卜．所测光密度值。每样本均
ａｓｓａｙ（ＥＵＳＡ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ＰＬＢＷ ｃａｓｅｓ ｈａｄ ａ ｐ∞ｒｅｒ ｏｍｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ明ｄ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ Ｐ∥蟛秽以如ｗ船ｆｏｕｎｄ
ｉｎ ａ ｈｉｇｈｅｒ ｐｍｐｏｒｔｉｏｎ ｉｎ ｔｌｌｅ ＰＬＢＷ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｈｅａｌｔｌｌｙ ｐｒｅ印觚ｔ（５６．７％Ｖｓ．３０．（场，Ｐ＜Ｏ．０５）．Ｂｏｔｈ ０ｆ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ
华西ｕ腔医学杂志第２７卷第６期２００９年１２月 Ｗｅｓｔ Ｃｈｊｎａ Ｊｏ岫１ａｌ ｏｆ Ｓｔｏｍｔｏｌｏｇｙ Ｖ０１．２７ Ｎｏ．６ Ｄｅｃ．２００９
【文章编号】ｌ∞Ｏ—１１８２（２００９）胍—惦９５埘
孕妇牙周病中牙龈卟啉单胞菌和 血清炎性因子与早产低体重儿的关系
·５９５·
林壶Ｌ２田宗蕊１陈宏柏２台保军１江汉１杜民权１ （１．武汉大学口腔医院 预防科，湖北 武汉４３００７９；２．厦门市口腔医院 口腔内科，福建 厦门３６１００３）
ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｉｔｉｓ ａＩｌｄ Ｐ∥，画秽耐括ｌｌａｖｅ ｂｅｅｎ ｆｏｕｎｄ ｔｏ ｂｅ鹊ｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｅａｋｌｙ诵ｔｈ ａ ｓｈｏｒｔｅｒ ｇｅｓｔａｔｉｏｎａｌ ａｇｅ锄ｄ ａ ｌｏｗｅｒ
ｂｉｎＩｌ ｗｅｉｇ｝ｌｔ（Ｐ＜ｏ．０５）．１１１ｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＩＬ一１ ｐ，ＩＬ＿６明ｄ ｐｍｓｔａｇｌａｎｄｉｎ—Ｅ２ Ｏ）Ｇ盼ｉｎ ｂｏｔｈ ｏｆ ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ ｓ咖ｐｌｅｓ ｓｈｏｗｅｄ ｋ鼯ｒ ｌｅｖｅｌｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ＰＬＢＷ彻ｄ ｎｏ珊ａｌ ｇｒｏｕｐｓ ０）＜０．０１）．Ｔｈｅ ＩＬ一１ ｐ卸ｄ ＰＧＥ２ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ哟ｔｅｍａｌ∞ｍｍ ｗｅｒｅ ｌｌｉｇ｝ｌｅｒ ｗｉｔｈ ａ∞ｖｅｒｅ ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ ｄｉｓｅ鹪ｅ ｉｎ ｔｈｅ ＰＬＢＷ ｇｒｏｕｐ Ｕ）＜Ｏ．０１）．ｃｏ毗ｌ吲蚰 ｎｅｒｅ咖ｙ ｂｅ ａ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｌｉｎｋ
水平均较对照组高：ＰＬＢｗ组内患有牙周病者静脉血中ＩＬ．１Ｂ、ＰＧＥ：含量高于牙周健康者（Ｐ＜０．０１）。结论孕妇牙 周感染可能是导致早产低体重儿的原因之一。
【关键词】 牙周病； 牙龈卟啉单胞菌； 早产低体重 【中图分类号】 Ｒ ７８１．４ 【文献标志码】 Ａ 【ｄｏｉ】 １０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００—１１８２．２００９．０６．００４
由同一名口腔专业研究生检查，检查前经标准 一致性检验，Ｋａｐｐａ值为０．７９。采用床边检杏，每个 被检查者口腔中４个象限均作检查。牙周检查指标 包括：菌斑指数（ｐｌａｑｕｅ ｉｎｄｅｘ，ＰＩ），探诊出血指数 （ｂｌｅｅｄｉｎｇ ｉｎｄｅｘ，ＢＩ），牙周探诊深度（ｐｒｏｂｉｎｇ ｐｏｃｋｅｔ ｄｅｐｔｈ，ＰＤ），临床附着丧失（ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ ｌｏｓｓ， ＣＡＬ）。其中，Ｐ１分别检查每颗牙的颊面远中、中 央、近中和舌面４个区，分别记分；ＢＩ、ＰＤ、ＣＡＬ 则检查６个位点，分别为颊、舌侧的近中、中央和 远中位点，取各位点均值。第三磨牙不列入检查范 围。牙周炎以“全口至少４颗牙有一个或多个位点 ＰＤ≥４ ｍｍ，ＣＡＬ≥ｌ ｍｍ，并有探诊出血”作为诊断 标准ｆ７＿嗣。 １．３龈下菌斑中Ｐ毋，ｕ珈以西的检测 １．３．１ 采集龈Ｆ菌斑产后第３天上午同一时段采 集龈下菌斑：产妇漱口后，龈上刮治器去除龈上牙
纳入标准：２００７年４月一２００８年１月在湖北省妇 幼保健院分娩，已作婚姻登记，年龄１８。４０岁，单 胎，定期行常规产检，能够耐受口腔检查的产妇。
排除标准：１）有系统性疾病及伞身感染史，如 糖尿病、高血压、尿路感染、细菌性阴道病、绒毛 膜羊膜炎等；２）子宫瘢痕；３）畸胎；４）流产、早产 史；５）近６个月内使用抗生素或有牙周治疗史； ６）抽烟喝酒史；７）全口牙数少于１８颗。 １．２临床口腔检查及指标
【作者简介】林矗（１９８卜），女，福建人，硕士
【通讯作者】杜民权，１１ｅｌ：０２７—８７６４６３加
是指新生儿出生时胎龄小于３７周，和或体重低于 ２ ５００ ｇ。据统计…，有６０％以上新生儿死亡与ＰＬＢＷ 有关，患有ＰＬＢＷ的新生儿死亡风险是正常出生体 重儿的４０倍。牙周疾病是口腔最常见的慢性感染性 疾病之一，在世界范围内，发病率为１０％～６０％１２－３】。 近年来，流行病学、微生物学和免疫学的研究Ｉ蝴表
ｌ材料和方法
１．１研究对象 收集２００７年４月—２００８年１月在湖北省妇幼保健
院分娩出早产或低体重儿的产妇３０例，早产低体重 的诊断标准，即早产是指妊娠满２８周不满３７足周 （１９６—２５８ ｄ）间分娩，低体重即新生儿出生时体重为 １ ０００～２ ４９９ ｇ【ｑ。同期来院作定期检查并正常分娩， 即分娩出的胎儿孕周大于等于３７周，体重大于等于 ２ ５００ ｇ的产妇３０例作为对照组。２组产妇均获得知情 同意，并取得家人的配合。
ａＩｌｄ ａｎａｌｙｓｅｄ ｂｙ ｐｏｌｙｍｅｒａ∞ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ １ ６Ｓ ｒＲＮＡ ｇｅｎｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｏ Ｐ荫谚秽甜括，
ｉ舢ｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｖｅｎｏｕｓ卸ｄ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅ珊ｉｎｅｄ ｂｙ ｅｒｌｚｙｍｅ—ｌｉｎｋｅｄ
【摘要】 目的探讨孕妇牙周病中牙龈卟啉单胞菌∽∥，咖以蠡）检出情况、血清炎性因子与早产低体重（ＰＬＢｗ）
的关系。方法通过严格筛查分别选取分娩出早产低体重儿的产妇（ＰＬＢＷ组）和正常分娩的产妇各３０例（对照组），
对其牙周状况进行检查，记录菌斑指数（ＰＩ）、出血指数（ＢＩ）、探诊深度（ＰＤ）及临床附着丧失水平（ｃＡＬ），并采集
菌㈣，ｐ幻彻Ｍ麟垂画秽以如，Ｐ百，泓以蠡）并通过酶联
免疫吸附试验（ｅｎｚｙｍｅ—ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｖ， ＥＬＩＳＡ）法对产妇和新生儿血样中的炎性冈子前列腺素 Ｅ２（ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ－Ｅ２，ＰＧＥ≯、白细胞介素一１Ｂ（ｉｎｔｅ卜 ｌｅｕｋｉｎ一１Ｂ，ＩＬ一１Ｂ）、白细胞介素一６（ｉｎｔｅｒｊｅｕｋｊｎ一６， ＩＬ一６）等进行检测，分析其与ＰＬＢｗ的关系，以期对 ＰＬＢＷ的病因学研究提供一定参考依据。
鼬ｊ∽１，朋肥Ⅳ觎１，Ｄｕ胍ｎ－ｑ啪１．（１．Ｄ哦矿肌口俐觇眈眦括％ｓｃ加ＤＺ ０厂跏ｍ砌魄ｙ，形Ⅱ‰‰西ｅ瑙饥 形ｕ妇４３００７９，吼ｉ嗍２．脚ｆ．驴Ｅ砌ｄＤｍ如５，ｘ如胱ｎ跏删。如驴ｎｆⅣ邯Ｐｉ础ｘ如舭凡３６煳３，劬ｉ加）
【Ａｂｓｔ船ｎ】
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产妇龈下菌斑、静脉血和脐带血，采用１６Ｓ ｒＲＮＡ ＰｃＲ法检测菌斑中Ｐ巧，咖以蠡，酶联免疫吸附试验（ＥｕｓＡ）检测
血清中自细胞介素一１Ｂ（１Ｌ一１Ｂ）、白细胞介素一６（Ｉ卜６）和前列腺素Ｅ：（ＰＧＥ２）水平。结果ＰＬＢｗ组牙周状况较差，
只巧，咖Ⅱｆ括在ＰＬＢＷ组和对照组中检出率分别为５６．７％和３０．Ｏ％，两者差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。牙周病变程度、 只昏，劫Ⅱｆ厶检出率与胎儿孕周和出生体重均呈弱负相关（Ｐ＜０．０５）。ＰＬＢｗ组静脉血和脐带血中ＩＬ—ｌｐ、ＩＬ一６、ＰＧＥ：
石，选取口腔４个区中牙周探诊深度最大的３个位
点，棉球隔湿，吸干采样区，碘酊消毒后，无菌龈 下刮匙探入牙周袋底，刮取龈下菌斑，置于装有
２００斗Ｌ ＴＥ缓冲液的无菌ＥＰ管中，一２０℃冰箱备用。 １．３．２ ＤＮＡ提取样品复融至室温后，用革兰阴性
菌ＤＮＡ基因组抽提试剂盒（上海申能博彩生物公
司），按说明书提取基因组ＤＮＡ，一２０℃冰箱备用。
琼脂糖凝胶电泳检测ＰＣＲ扩增产物，采用ＤＬ一２０００ 相对分子质量标准确定产物相对分子质量大小。
１．４检测血清细胞因子
１．４．１ 主要试剂和仪器 人ＩＬ一６、ＩＬ一１Ｂ ＥＬＩＳＡ试 剂盒（深圳晶美生物工程有限公司）；ＰＧＥ：试剂盒
（Ａｓｓａｙ Ｄｅｓｉｇｎｓ公司，美国）；ＥＬｘ８０８型酶标仪 （Ｂｉｏ—ｔｅｋ仪器公司，美国）。
ｂｅｔｗｅｅｎ ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ ｄｉｓｅａ∞ｓ锄ｄ ＰＬＢＷ．
［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓＪ ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａＪ ｄｉ眈ａｓｅｓ； Ｐｏ伊７妒．Ｄ，加，弛ｓ舒，画口越括； ｐｒｅｔｅ哪ｌｏｗ ｂｉｒｔｈ ｗｅｉｇｈｔ