芦丁对肥胖诱发的雄性小鼠生殖损伤的保护作用

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中药芦丁的功能主治是什么

中药芦丁的功能主治是什么

中药芦丁的功能主治是什么简介芦丁是一种常见的中药材,其主要成分是黄酮类化合物。

它在中医药学中被广泛应用于治疗许多疾病,并被认为具有多种功能和主治。

本文将介绍芦丁的功能主治以及其在各种疾病中的应用。

功能主治芦丁具有以下的功能主治:1.抗氧化作用:芦丁具有较强的抗氧化作用,可以清除自由基,降低氧化应激,保护细胞免受损害。

这对于预防和治疗许多慢性疾病具有重要意义,如心血管疾病、癌症和老年痴呆症等。

2.抗炎作用:芦丁具有抑制炎症反应的作用,可以减轻炎症引起的疼痛和不适。

它对于关节炎、肠道炎症和皮肤过敏等疾病的治疗具有一定的效果。

3.抗血小板聚集作用:芦丁可以抑制血小板的聚集,减少血栓的形成,预防心脑血管疾病的发生和发展。

4.促进微循环:芦丁可以扩张血管、降低血液粘度,改善微循环,增强组织的供血供氧能力,对于末梢循环障碍、冠心病和脑血管疾病等有一定疗效。

5.抗肿瘤作用:芦丁具有抑制肿瘤细胞的生长和分裂的作用,可以发挥一定的抗肿瘤效果。

6.保护肝脏:芦丁可以保护肝脏细胞,促进肝细胞的再生,对于肝病的治疗和预防具有一定的作用。

7.抗过敏作用:芦丁可以抑制过敏反应,减轻过敏症状,对过敏性鼻炎、皮肤过敏和哮喘等疾病有一定的疗效。

应用领域芦丁在中医药学中广泛应用于许多疾病的治疗,并被制成药物、保健品等形式使用。

下面是芦丁在一些常见疾病中的应用领域:•心血管疾病:芦丁有助于降低血压、血脂,预防心血管疾病的发生和发展。

•关节炎:芦丁具有抗炎和抗氧化作用,可以减轻关节炎引起的疼痛和炎症。

•肠道炎症:芦丁可以减轻肠道炎症的症状,缓解腹痛、腹泻等不适。

•冠心病:芦丁可以扩张冠状动脉,改善心肌供血,对冠心病患者有一定的疗效。

•脑血管疾病:芦丁可以改善脑部的微循环,预防脑血栓的形成,对脑血管疾病的治疗有一定的作用。

•肝病:芦丁可以保护肝脏细胞,促进肝细胞的再生,对肝病的治疗和预防有一定的效果。

•过敏性疾病:芦丁可以抑制过敏反应,减轻过敏症状,对过敏性鼻炎、皮肤过敏和哮喘等疾病有一定的疗效。

芦丁对内毒素诱导急性肺损伤模型小鼠的保护作用

芦丁对内毒素诱导急性肺损伤模型小鼠的保护作用

芦丁对内毒素诱导急性肺损伤模型小鼠的保护作用陈志则;夏中元;孟庆涛【期刊名称】《中医学报》【年(卷),期】2018(33)2【摘要】目的:探讨芦丁对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤模型小鼠的保护作用及其机制。

方法:30只雄性C57小鼠随机分为3组(n=10),分别为对照组、急性肺损伤组和芦丁组。

芦丁组在LPS腹腔注射前3周起连续给予芦丁[100 mg·(kg·d)^(-1)]灌胃,急性肺损伤组和芦丁组腹腔注射LPS(10 mg·kg-1),对照组腹腔注射生理盐水。

6 h后测定PaO_2、PaCO_2、呼吸频率(respiratory rate,RR)、pH值,肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和IL-1β水平,测定肺组织中细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK),p-ERK,p-核因子-κB和核因子-κB表达,观察肺组织病理变化和干湿比。

结果:与对照组比较,急性肺损伤组PaCO_2、RR、IL-6、IL-1β和TNF-α水平,p-ERK和p-核因子-κB蛋白表达量,肺组织病理改变和干湿比均明显降低(P<0.05),而ERK和核因子-κB表达量无明显变化(P>0.05)。

与急性肺损伤组比较,芦丁组PaCO_2、RR、IL-6、IL-1β和TNF-α表达,pERK和p-核因子-κB蛋白表达量和肺组织病理改变均明显降低(P<0.05),但氧分压,pH和干湿比值增高(P<0.05),而ERK和核因子-κB表达无明显变化(P>0.05)。

结论:芦丁可通过抑制ERK/核因子-κB信号通路激活而抑制炎性介质的释放,从而减轻内毒素诱导的急性肺损伤。

芦丁对肥胖诱发的雄性小鼠生殖损伤的保护作用

芦丁对肥胖诱发的雄性小鼠生殖损伤的保护作用

芦丁对肥胖诱发的雄性小鼠生殖损伤的保护作用王力;闻赵燕;阚梦颖;周勇兵;余丽丽【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2017(0)11【摘要】目的探讨芦丁在肥胖雄性小鼠体质量抑制以及对肥胖诱发的生殖损伤的保护效果及其机制.方法将24只雄性ICR小鼠随机分成3组,每组8只:正常对照组(ND组,正常饮食),高脂饮食组(HFD组,高脂饮食),芦丁保护组(HRU组,高脂饮食+芦丁).28 d后,按后续实验需要进行取材处理.试剂盒检测生化指标;睾丸与附睾进行石蜡切片,HE染色进行形态学观察;统计精子数、活动度和畸形率.荧光定量PCR检测相关基因的表达水平;Western blot检测Ucp1蛋白表达水平.结果 HRU组比HFD组的平均体质量轻.HFD组睾丸和附睾组织中的甘油三酯的含量以及附睾组织中的甘油三酯的含量,明显高于ND组和HRU组.相较于HFD组的睾丸和附睾均出现结构松散,细胞结构异常,管腔内成熟的精子数量较少的现象,精子数量下降,活动度差等问题,HRU组均有明显改善.解偶联蛋白Ucp1基因和蛋白的表达量在芦丁处理后显著上升(P<0.05),Mcp1和Tnfα的表达则显著下降(P<0.05).结论芦丁可以有效抑制高脂诱导的肥胖小鼠体质量的快速增长,对肥胖诱发的生殖损伤有一定的保护效果.%Objective To study the effect of rutin on body weight and obesity-induced reproductive impairment in male mice. Methods Twenty-four male mice were randomized equally into normal control group, high-fat diet group (HFD group), and HFD+rutin intervention group (HRU group). After 28 days of treatments, the testes and epididymis of the mice were collected for detection of total cholesterol (TC) and triglycerides (TG) levelsand for pathological examinations with HE staining. The expressions of related genes was detected with real-time PCR, and Western blotting was used to detect the expression of Ucp1 protein in the samples. Results After 28 days of treatments, the mean body weight was lower in mice with rutin intervention than in those in HFD group. The mice in HFD group showed significantly higher TG levels in the testis and epididymis and higher TC levels in the epididymis than those in the control and HRU groups. In HFD group, the testis and the epididymis displayed loosened structures with abnormalcell structure, and the number ofmature spermatozoa in the lumen was decreased and the mobility of the sperms was reduced; all these changes were significantly alleviated in HRU group. The expression levels of Ucp1 mRNA and protein increased (P<0.05) and the expressions of Mcp1 and TNF-α decreased significantly in the mice after rutin treatment (P<0.05). Conclusion Rutin can effectively inhibit rapid increase of body weight and protect against obesity-induced reproductive impairment in obese mice.【总页数】6页(P1529-1534)【作者】王力;闻赵燕;阚梦颖;周勇兵;余丽丽【作者单位】蚌埠医学院公共卫生学院,安徽蚌埠 233000;蚌埠医学院公共卫生学院,安徽蚌埠 233000;蚌埠医学院公共卫生学院,安徽蚌埠 233000;蚌埠医学院公共卫生学院,安徽蚌埠 233000;蚌埠医学院公共卫生学院,安徽蚌埠 233000【正文语种】中文【相关文献】1.辐射诱发雄性小鼠各阶段生殖细胞染色体... [J], 孙淑清;李永安2.小剂量X射线诱发雄性小鼠生殖细胞染色体畸变与显性致死间关系 [J], 王明东;杨宝辰3.化积健脾汤对肥胖导致雄性小鼠生殖功能损伤的治疗效果 [J], 陈兰玉;吴银玲;谷钇蔚;陈彬;李孟鑫;陶美慧;朱梦梦;葛少钦4.X射线诱发雄性小鼠生殖细胞多价体的遗传危险度评价 [J], 王明东;蔡露;王献理5.秋水仙胺(colcemid)诱发雄性小鼠生殖细胞减数分裂延迟和非整倍体的研究 [J], 史庆华;I.-D.Adler;张锡然;张坚宣;陈宜峰因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

芦丁对植物病原菌抑制作用及稳定性研究

芦丁对植物病原菌抑制作用及稳定性研究

芦丁对植物病原菌抑制作用及稳定性研究作者:盛任王应玲陈永山等来源:《农业开发与装备》 2018年第4期摘要:为研究芦丁成为生物制剂的可能,本试验研究芦丁对植物病原菌进行抑菌试验。

试验表明芦丁对人参立枯病原菌、紫菀根腐病原菌、玉米大斑病原菌抑制效果最好的浓度为100倍稀释倍数,对白鲜皮大斑病原菌抑制效果最好的浓度为200倍稀释倍数。

使用时不宜高温和含淀粉的药品同时使用,应避光保存。

关键词:芦丁;抑制作用;稳定性0 引言据统计,我国目前发现的大田作物病害约有70%是由作物病原真菌引起的。

目前,防治植物病害主要依靠化学药品,长期使用化学农药,抗药性强,残毒大,污染严重。

生物农药具有来源广泛,毒副作用少,无污染,残留物质量低等优点。

对环保和生态平衡具有十分重要意义。

资料显示,使用中药的芦丁提取物有一定的抑菌效果,芦丁属黄酮类化合物,为天然产物的有效成分,有抗氧化和抗菌作用等。

故本实验就是采取天然产物来源的中药标品——芦丁。

研究芦丁生物制剂在不同浓度下对病原菌是否有抑制作用及抑制作用大小,找出最适生物制剂及浓度,为芦丁生物防治应用的进行进一步实验。

1 材料与方法1.1 材料1)供实验的病原菌:人参立枯,白鲜皮大斑,紫菀根腐,玉米大斑(植物科学学院植物病理实验室提供各种植物病原菌)。

2)芦丁标品1g(本草天工科技有限公司,中国固体制剂制造技术国家工程研究中心。

纯度≥98%)。

3)PDA培养基。

1.2 方法1.2.1 抑菌实验1)试验菌的培养:用接种环分别挑取人参立枯,白鲜皮大斑,玉米大斑,紫菀根腐斜面培养物一枚,转移到PDA培养基中,是菌种活化。

2)分别配置不同浓度药剂。

每种药剂设置五个浓度,三次重复。

浓度为50倍,100倍,200倍,400倍,800倍稀释液。

3)带药培养基的配置。

4)将已经培养好的菌落用打孔器沿菌落边缘打菌饼,使用接种针挑取菌饼至单药培养基中,于25℃下无光照恒温培养。

5)3天后取出平板,用十字交叉法测量菌落生长直径,共测2次。

211026739_芦丁的生物学功能及在动物生产中的应用

211026739_芦丁的生物学功能及在动物生产中的应用

动物生产 742023.2芦丁的生物学功能及在动物生产中的应用张宏亮1,李宗侠1,杨艳芹2(1.内蒙古自治区赤峰市元宝山区农牧局,内蒙古 赤峰 024076;2.内蒙古自治区赤峰市元宝山区农牧技术推广中心,内蒙古 赤峰 024076)芦丁也称芸香甙,是广泛存在于水果、蔬菜、荞麦与药用植物的黄酮类化合物,其外观为浅黄色或浅绿色结晶粉末或针状结晶,可以溶于热水、碱液或甲醇中,微溶于丙酮、乙醇。

芦丁具备抗炎、抗氧化、清除自由基与增强抗病能力等多种功能。

本文针对芦丁的生物学功能和在动物生产中的应用进行简述,为芦丁在饲粮中的应用提供参考。

1 芦丁的生物学功能1.1 抗炎作用炎症反应是一个较为复杂的过程,当机体组织遭遇有害刺激,如损伤或病原体感染时,就会发生防御反应,以抵御体内损伤或感染带来的危害。

伴随炎症的产生,生成很多炎症因子,如活性氧、细胞因子等。

芦丁能够有效抑制炎症反应中酶的活性,干扰关键酶的合成或降低机体内炎症因子,达到有效抗炎的功效。

芦丁与抗坏血酸的组合物可以下调炎症因子白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α的表达,保护因紫外线诱导受损的皮肤。

炎症发生时,会产生如髓过氧化物酶、一氧化氮等重要信号分子。

研究者发现,芦丁能够降低髓过氧化物酶的活性、一氧化氮的水平,发挥大鼠体内抗炎作用。

由此可见,芦丁具备抗炎保护的特性,添加至动物饲料中,降低炎症反应给动物带来的危害。

1.2 抗氧化作用氧化应激是动物应激反应中较常见的一种,氧化应激发生时,产生的主要物质为活性氧。

细胞代谢产生过氧自由基、羟自由基和超氧阴离子等活性氧自由基,其极强的氧化性,能够攻击和破坏细胞结构,从而导致细胞受损,发生凋亡。

芦丁对四氯化碳处理过的肝损伤大鼠有一定抗氧化作用,芦丁通过提升大鼠肝脏内源性抗氧化酶的活性,从而抑制脂质过氧化的产生。

1.3 抗病毒作用芦丁抗病毒活性较好,能够有效抑制病毒的复制和传播,从而抑制病毒的致病性。

芦丁可以阻断病毒进入细胞的过程,阻止RNA转录和蛋白合成过程,使病毒无法复制和传播。

芦丁的生物活性功能及其在反刍动物生产中的应用

芦丁的生物活性功能及其在反刍动物生产中的应用

收 稿 日 期 :2018 - 12 - 24 基金项目:草畜一体化关键技术研究与示范( JXXTCX201702⁃04) ;江西省牛羊产业技术体系( JXARS⁃13-肉羊岗位) 作者简介:占今舜( 1985—) ,男,江西玉山人,助理研究员,博士,主要从事反刍动物营养研究。 E⁃mail: zhanjinshun1985@ 163.com ∗通信作者:霍俊宏,副研究员,E⁃mail: hjh_0222@ 126.com
7期
占今舜等:芦丁的生物活性功能及其在反刍动物生产中的应用
2953
芦丁会因长时间强烈研磨发生氧化和形成团聚体 而降低提取率[7] 。 3) 超声波辅助提取法。 超声波 能够诱导植物中纤维素表面张力的变化,促使植 物更容易破碎和破裂。 利用此法提取芦丁,应选 择甲醇、 乙 醇 等 溶 剂 来 提 取, 其 效 果 优 于 用 水 提 取,是因为芦丁在冷水中微溶,且水中声波会导致 羟基自由基的形成,促使芦丁降解,而在甲醇、乙 醇中易溶[8-9] 。 该法具有操作简单,缩短提取时间 和提取效率高的优点,且为物理方法,提取过程中 不会 破 坏 有 效 成 分[10] 。 4) 微 波 辅 助 提 取 法。 利 用微波穿透植物细胞,使细胞内部温度迅速上升, 水汽化将细胞涨破,芦丁进入溶剂并溶解得到分 离的一种提取方法。 离子液体具有很强的极性, 溶解有机物和无机物的能力强,吸收微波能量的 效果好, 可 作 为 一 种 良 好 的 微 波 吸 收 介 质 和 溶 剂[11] 。 因此,利用离子液体微波相结合会大大提 高芦丁的提取率。 该方法的优点是耗能低、操作 简单、能缩 短 提 取 时 间、 减 少 提 取 溶 剂 用 量、 提 取 速度快、产 率 高[12] 。 5) 其 他。 近 年 来, 已 证 实 可 以利用红外辅助提取药用植物活性成分[13] 。 该方 法是利用红外能量加热提取试剂,促使芦丁溶于 溶剂中而被解析出来。 利用此方法需要了解芦丁 的吸收特性,只有将红外加热器的波长与芦丁的 吸收特性 相 匹 配, 才 能 达 到 较 高 的 加 热 效 率[14] 。 用此方法提取芦丁,在提取率方面可能不如微波 辅助提取,但该法更简单、更经济、无辐射。 除此 之外,还可以利用加压液体来提取芦丁[15] 。 离子 液体的独特性质扩大了加压液体提取法的使用, 也提高了提取效率。 此方法的优点是利用高压加 快芦丁与惰性物质在色谱柱中的提取速度,而且 还能够通过增加提取循环数、流动相梯度和溶剂 类型来增加提取效率[16] 。

芦丁的功能主治与作用

芦丁的功能主治与作用

芦丁的功能主治与作用1. 芦丁是什么?芦丁是一种天然植物化合物,属于黄酮类物质,常见于柑橘类水果的果皮、茶叶等植物中。

它具有多种生理活性,被广泛应用于药物、保健品和化妆品等领域。

2. 芦丁的功能与作用芦丁具有多种功能与作用,包括但不限于以下几个方面:2.1 抗氧化作用芦丁具有较强的抗氧化活性,可以中和自由基,减少氧化应激对细胞的损伤。

长期摄入芦丁可以提高身体的抗氧化能力,减缓衰老过程,预防疾病的发生。

2.2 抗炎作用芦丁具有抑制炎症反应的作用,可以减轻组织炎症的程度,缓解相关疾病的症状。

它通过调节炎症介质的释放,影响炎性信号通路的传导,从而发挥抗炎效果。

2.3 保护血管功能芦丁可以促进血管的收缩和松弛,提高血管弹性,增加血管内皮细胞的抗氧化能力,改善血管功能。

这对于预防心血管疾病、降低血压和改善微循环等方面具有积极意义。

2.4 改善视力芦丁对视力保护和改善具有一定的作用。

它可以抑制眼部组织的氧化应激和炎症反应,减少视网膜细胞的损伤,防止视力下降。

此外,芦丁还可以缓解眼疲劳、减少眼睛干涩的现象。

2.5 抗过敏作用芦丁可以抑制过敏反应,减轻过敏症状。

它通过抑制炎性介质的释放、调节免疫系统的功能,降低过敏反应的强度和频率。

因此,芦丁被广泛应用于过敏性疾病的防治。

2.6 抗肿瘤作用一些研究表明,芦丁具有一定的抗肿瘤活性。

它可以抑制肿瘤细胞的增殖和转移,诱导肿瘤细胞的凋亡,增强化疗和放疗的疗效。

尽管还需要进一步的研究,但芦丁在肿瘤治疗领域具有潜在应用价值。

3. 如何摄入芦丁?芦丁存在于柑橘类水果的果皮中,茶叶中,也可以通过膳食补充剂获得。

摄入芦丁的方式多种多样,可以根据个人喜好和需求进行选择。

以下是一些常见的摄取芦丁的途径:•多吃柑橘类水果,如橙子、柠檬、葡萄柚等,并保留果皮;•饮用茶叶,如绿茶、乌龙茶等;•选用富含芦丁的膳食补充剂,根据产品说明进行合理使用。

需要注意的是,摄入芦丁的途径不同,芦丁的含量也会有所差异。

芦丁的提取及其在小鼠试验中表现的生物活性综述

芦丁的提取及其在小鼠试验中表现的生物活性综述

芦丁的提取及其在小鼠试验中表现的生物活性综述
张杰; 张秀丽
【期刊名称】《《化工科技市场》》
【年(卷),期】2010(033)009
【摘要】芦丁作为黄酮类主要成分的代表,受到科研界的高度重视,目前芦丁的提取应用技术比较成熟。

将从芦丁的来源,提取技术以及芦丁在小鼠试验中表现出的生物活性,芦丁的研究前景几个方面进行综述。

重点研究芦丁的生物活性在小白鼠体内的表现。

为芦丁的工业生产和应用提供参考。

【总页数】5页(P23-26,32)
【作者】张杰; 张秀丽
【作者单位】滨州医学院山东烟台 256603; 青岛科技大学
【正文语种】中文
【中图分类】TQ461
【相关文献】
1.芦丁提取工艺的综述 [J], 胡杰;邓宇
2.芦丁提取工艺的综述 [J], 胡杰;邓宇
3.液相色谱-串联质谱法同时测定小鼠血浆中CTN986、芦丁和曲克芦丁的浓度及其在药动学研究中的应用 [J], 陈娟鹃;孟繁华;张杨;郭继芬;王迪敏;王松
4.芦丁对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠肾组织形态表现的影响 [J], 白静;冀晓茹;韩婷;安春娜;勾向博;苏鹏;王妍
5.芦丁的提取及其在小鼠试验中表现的生物活性综述 [J], 张杰; 张秀丽
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芦丁对肥胖诱发的雄性小鼠生殖损伤的保护作用芦丁对肥胖诱发的雄性小鼠生殖损伤的保护作用王力,闻赵燕,阚梦颖,周勇兵,余丽丽蚌埠医学院公共卫生学院,安徽蚌埠233000 摘要:目的探讨芦丁在肥胖雄性小鼠体质量抑制以及对肥胖诱发的生殖损伤的保护效果及其机制。

方法将24只雄性ICR小鼠随机分成3组,每组8只:正常对照组(ND组,正常饮食),高脂饮食组(HFD 组,高脂饮食),芦丁保护组(HRU组,高脂饮食+芦丁)。

28 d后,按后续实验需要进行取材处理。

试剂盒检测生化指标;睾丸与附睾进行石蜡切片,HE染色进行形态学观察;统计精子数、活动度和畸形率。

荧光定量PCR检测相关基因的表达水平;Western blot检测Ucp1蛋白表达水平。

结果HRU组比HFD组的平均体质量轻。

HFD组睾丸和附睾组织中的甘油三酯的含量以及附睾组织中的甘油三酯的含量,明显高于ND组和HRU组。

相较于HFD组的睾丸和附睾均出现结构松散,细胞结构异常,管腔内成熟的精子数量较少的现象,精子数量下降,活动度差等问题,HRU组均有明显改善。

解偶联蛋白Ucp1基因和蛋白的表达量在芦丁处理后显著上升(P<0.05),Mcp1和Tnfα的表达则显著下降(P<0.05)。

结论芦丁可以有效抑制高脂诱导的肥胖小鼠体质量的快速增长,对肥胖诱发的生殖损伤有一定的保护效果。

关键词:芦丁;肥胖;生殖损伤;小鼠随着肥胖症的发病率不断增高,肥胖症常并发或导致的代谢综合征以及一些常见的代谢性疾病如高血压、冠心病、2型糖尿病等的发病率也在不断增高[1-2]。

除心血管疾病等并发症外,最近,科学家开始意识到,肥胖或超重的人群表现出不孕不育的发生率正在上升,有一些表现为父系肥胖可能会对基本精子参数产生负面的影响,比如精子的数量和运动能力[3-4]。

越来越多的研究表明,肥胖对男性的生殖系统有明显的负面效应[5-6]。

相对于控制食欲和抑制营养吸收等传统的抗肥胖疗法[7-9],通过天然活性成分物质刺激增加机体的能量消耗很可能是一个极具前景的治疗方法。

近年来已经有研究表明,一种新型的天然植物化学物-芦丁对糖尿病等相关代谢疾病具有有益效果,可以降低由高脂饮食所引起的肥胖而导致的高血脂和高血糖[10-12],并且可以通过清除细胞内的活性氧对肥胖诱导的肝脏和心肌的病变起到改善作用[13],但是这种保护作用的分子机制仍然不清楚。

因此,我们在假设通过芦丁给药治疗可以减缓由高脂饮食引起的肥胖而导致的雄性生殖损伤的基础上,通过芦丁对高脂饮食诱导的肥胖雄性小鼠进行处理,研究芦丁在肥胖雄性小鼠体质量抑制以及对肥胖诱发的生殖损伤的保护效果及其机制。

1 材料和方法 1.1 主要材料和仪器芦丁(纯度≥98%,C27H30O16,百灵威科技有限公司),多聚甲醛(Sigma-Aldrich,美国),甘油三酯等检测试剂盒(南京建成生物工程研究所),SYBP Green Premix Ex Taq试剂盒(TakaRa,日本),其它化学试剂均为分析纯;高速离心机(Beckman公司,德国),荧光定量PCR仪(ABI,美国),电泳仪(Bio-Rad,美国)。

1.2 实验动物处理成年ICR小鼠24只,雄性,购自安徽医科大学实验动物中心。

小鼠适应性喂养1周后随机分成3组,体质量20~23 g,每组8只,分为:正常对照组(ND)正常饮食,高脂饮食组(HFD)高脂饮食,芦丁保护组(HRU)高脂饮食+芦丁。

普通饲料(脂肪20%),高脂饲料(脂肪60%),购自南京青龙山饲料厂。

自由摄食、饮水,室温22±2℃,相对湿度为45%~65%,昼夜明暗交替时间为12 h/12 h,按照每笼3~5只饲养,每日观察、称质量、记录。

为尽量减少组内差异,HRU组以灌胃的方式按体质量添加10 mg/(kg·d)芦丁,芦丁以DMSO 为助溶剂用蒸馏水进行配制,每次灌胃前均采用超声处理;ND组和HFD组以灌胃的方式灌同等体积的含有DMSO的蒸馏水。

28 d后,禁食1晚,麻醉,迅速剥离褐色脂肪、睾丸和附睾,部分固定于4%多聚甲醛以及制备精子悬液,其余的组织在液氮中迅速冷冻后转入-80℃冰箱中保存。

1.3 HE染色睾丸和附睾经4%多聚甲醛固定后,梯度酒精脱水,石蜡包埋,切片厚6 μm。

常规脱蜡至水后,HE染色,中性树胶封片,置显微镜下观察。

1.4 相关指标检测制备睾丸、附睾的组织匀浆,按照试剂盒说明书检测睾丸和附睾中的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)。

制备精子悬液后,高倍镜观察,将精子活动度分为4级:Ⅰ级为精子活动良好;Ⅱ级为精子活动比较活泼;Ⅲ级为精子活动迟缓;Ⅳ为精子不活动。

活动率(activity rate)=(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ)/(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ)×100%。

按红细胞计数法计数精子浓度,计算精子畸形率。

1.5 荧光定量PCR 反应体系为20 μL,扩增产物长度和引物序列如表1所示,根据PCR扩增溶解曲线得到的阈值循环数值(Ct),用2-△△Ct方法计算相对基因表达量。

表1 荧光定量PCR扩增基因引物列表Tab.1 Primers for quantitativePCRamplificationUcp1:Uncoupling protein 1;Cpt1α:Carnitine palmitoyltransferase;Mcp1:Monocyte chemotacticfactor-1;Tnfα:Tumor necrosis factoralpha.β-ActinNM_031144.3134 Ucp1NM_009463.3135Cpt1αNM_013495.2213 Mcp1NM_011333.3155TnfαNM_001278601.1209FW:TCGTGCGTGACATTAAAGAGRW:ATTGCCGATAGTGATGACCTFW:GGATGGTGAACCCGACAACTRW:CTTGGATCTGAAGGCGGACTFW:GACTCCGCTCGCTCATTCCRW:ACCAGTGATGATGCCATTCTTGFW:AGCTGTAGTTTTTGTCACCAAGCRW:GTGCTGAAGACCTTAGGGCAFW:AAGAGGCACTCCCCCAAAAGRW:GTGGTTTGTGAGTGTGAGGGT 1.6 Western blotting检测蛋白表达蛋白裂解液RIPA提取蛋白,BCA法测定并调整蛋白浓度,SDS-PAGE电泳、转膜、封闭、抗体孵育。

条带用ECL发光液显色,使用化学发光成像仪(天能公司,上海)进行化学发光检测,并采集蛋白条带图像,图像灰度采用Quantity One(Bio-Rad,USA)软件进行分析。

1.7 统计学方法使用SPSS 17.0对数据进行统计分析。

资料采用均数±标准差表示,经正态检验后,多组间比较采用方差分析,两两比较采用SNK-q检验。

以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果2.1 芦丁对肥胖小鼠体质量、睾丸系数、精子数量和畸形率的影响各组小鼠初始体质量差异无统计学意义(P>0.05,表2)。

高脂饮食组(HFD组)与芦丁保护组(HRU 组)相较于正常对照组(ND组),一开始均表现出体质量增长较快的趋势,而后HFD组一直保持相对较高的体质量增长。

28 d后,HFD组与HRU组体质量均比ND组高,而HRU 组比HFD组的平均体质量轻(P<0.05)。

HFD组和HRU组睾丸质量与ND组相比没有有显著性变化(P>0.05),但是睾丸相对体质量系数差异显著(P<0.05)。

HFD组精子数量明显减少,畸形率明显上升(P<0.05)。

表2 芦丁对肥胖小鼠体质量、睾丸系数、精子数量和畸形率的影响Tab.2 Effect of rutin on body weight,testicular coefficient,and sperm count and deformity rate in obesemice(n=8,Mean±SD)ND:Normal control group;HFD:High fat diet group;HRU:Rutin intervention group.aP<0.05 vs ND group,bP<0.05 vs HFD group.Group ND HFD HRU F P Initial weight(g)20.88±0.67 21.43±0.76 21.72±0.92 2.287>0.05 Final weight(g)28.12±1.22 37.42±0.91a 33.12±0.94ab 161.002<0.05 Testis weight(g)0.22±0.03 0.22±0.04 0.21±0.03 0.360>0.05 Testicular index(%)0.82±0.11 0.59±0.12a 0.63±0.10a 8.695<0.05 Sperm count(×107/g epididymis)4.33±0.31 3.38±0.36a 3.98±0.36b 15.378<0.05 Sperm deformity rate(%)0.46±0.11 0.82±0.09a 0.49±0.12b 28.396<0.05 2.2 芦丁对肥胖小鼠精子活动度的影响从各级精子活动度看,HFD组与ND组、HRU组相比有明显区别,HFD 组总的精子活动率出现了明显的下降(P<0.05,表3)。

表3 芦丁对肥胖小鼠精子活动度的影响Tab.3 Effects of rutin on sperm motility in obesemice(n=8,Mean±SD)aP<0.05 vs ND group,bP<0.05 vs HFD group.Sperm activity level Group Activity rate(%)ⅢⅡⅣND HFD HRU F PⅠ21.12±3.18 15.75±1.83a 19.62±1.99b10.572<0.05 40.37±3.54 33.12±1.95a 37.75±3.69b 10.766<0.05 11.50±2.44 15.87±2.03a 11.87±1.72b 10.767<0.05 4.12±0.99 7.87±0.83a 4.62±1.18b 32.208<0.05 94.60±1.47 89.15±1.13a 93.72±1.63b 33.621<0.05 2.3 睾丸、附睾HE 染色如图1所示,3组雄性小鼠睾丸的基本结构完整,曲精小管分布较为规则、排列整齐,无明显损伤。

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