D-半乳糖所致衰老模型鼠的免疫功能变化

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还少丹对D-半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响

湖南中医药大学生物化学教研室，南长沙４００湖１２８
摘要：目的
观察还少丹对Ｄ半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响，一并探讨其延缓衰老的机制。方法
将小
鼠随机分成对照组、模型纽和还少丹低、高剂量组。采用皮下注射Ｄ半乳糖溶液制备亚急性衰老模型，一还少丹低、
ａｍｉｉｔｒｄｔｈｒａｍｅｔｇｏｐ，ｏｔｏｏｐａｄｍｏｅｏｐｗｅｅｇｖｎＮ．ｆｅｅｓｔｅｄｎｓｅｅｏｔｅｔｅｔｎｕｓｃｎｒｌｕｎｄｌｕｒｅＳＡｔｒ６ｗｅｋ，ｈｒｒｇｒｇｉｉｄｘｏｌｅｄｔｙｓｔｅｓｌｅｖｌｆｎｅｌｕｉ一Ｉ－）ｎｐｏｙｅｐｏｉｒｔｎａｔｉｎｅｆｐｅｎａｈｍｕ，ｈｐｅｎｌｅｔｒｋｎ２（２ａｄＴｌｓｎｅｏｉｅＬｍｙｈｃｔｒｌｅａｏｃｖｔｆｉｉｙ
・
３・６
ＣｈｉｓＪｕｒｎｅｅｏｎａｌｏｆｎｆｒａｔｉｎｎＣＩｏｍｏｏＴＭ
Ｍａ２１Ｖｏ１９ｏ５ｙ０２．１Ｎ
．
还少丹对Ｄ半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响一
胡梅，刘群良，张波，谭峰，程莉娟
高剂量组给予相应剂量的还少丹水煎液灌胃，照组和模型组给予等量的蒸馏水灌胃，对连续６周。测定各组小鼠胸腺
指数和脾脏指数、脾组织Ｉ一水平及Ｔ巴细胞的增殖活性。结果Ｌ２淋与对照组比较，模型组小鼠胸腺和脾脏指教、

D-半乳糖致衰老模型大鼠体征和骨髓DNA含量的改变与中药干预作用

【关键词】Ｄ半乳糖；一衰老大鼠；骨髓细胞ＤＡ含量；Ｎ中药【中图分类号】Ｒ３；２５５３２Ｒ８．【文献标识码】Ａ【文章编号】１７ —８６２１）５０３ — ６１７５（０００－０７０４
ＣｈａｇｓｏｅｒｌＰｈｓｃｌＳｇｎｎｅＭａｒｗｎｅｆＧｎｅａｙｉａｉｎｓａｄＢｏｒｏＤＮＡｎｅｔｏＣｏｔｎｆＡｇｉｏｌＲａｎｄｕｅｙＤ－ａａｔｓｎｎｅｖｎｔｏａｆｃｅｎｇＭｄｅｔＩｃｄｂｇｌｃｏｅａｄＩｔｒｅｉｎｌＥｆｅｔｏａｉｉｎａｆＴｒｄｔｏｌＣｈｉｅｅＭｅｉｉｎｓｄｃｎｅ
（ｈｊｎｉｅｅＭｅｉａｎｖｒｉａｏａｏｙＡｎｍａＲｅｅｒｈＣｎｅ，Ｈａｇｈｕ３０５ＣｉａＺｅｉｇＣｈｎｓｄｃｌＵｉｅｓｔＬｂｒｔｒｉｌｓａｃｅｔｒａｙｎｚｏ１０３，ｈｎ）
【ｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｂｅｖｈｈｎｅｆｅｅａｓｍｐｏＡｓｃ】ｒｊｃｖｏｏｓｒｅｔｅｃａｇｓｎｒｌｙｔｉｏｇｍ，ｓｉｓｔｓｉｄｉｉｎｏｅｍｒｗｋｎｔｕ，ｄｔｄｃｏａｄｂｎａｒａｅａｔｎｏ
ＤＮＡｏｔｎｔｏｈｅｇｉｍｏｅｌａｉｕｅｂＤ— ｌｃｏｅ，ｎｔｓｕｄｈａｎｉａｅｎｅｆｃｏｒｄｔｎａＣｈｎｅｅｃｎｅｆｔａｅｎｇｄｒｔｎｄｃｄｙｇａａｔｓａｄｏｔｙｔｅｔ— ｇｉｇｆｅｔｆｔａｉｉｌｏｉｓ

D_半乳糖对小鼠免疫功能的影响_宋格格

项目 SOD 活力 /（ U·mL － 1） MDA /（ nmol·mL － 1） GSH － Px /（ U·mL － 1） IL － 2 /（ pg·mL － 1） IL － 6 /（ pg·mL － 1） IgG /（ mg·mL － 1） IgA / （ mg·mL － 1） IgM /（ mg·mL － 1）
D － gal 属于己醛糖的一种，它与葡萄糖是同分异构体。在机体的代谢过程中转变为葡萄糖供机体使用，但若供给过多，则会使体内糖代谢紊乱，细胞渗透压发生改变，导致细胞肿胀。同时 D － gal 在代谢过程中还会生成大量的自由基，自由基在体内堆积，进而损伤机体，加速机体衰老［8 － 10］。本试验结果表明，一定剂量的 D － gal 能成功制造免疫衰老模型，为衰老和抗衰老研究提供理论依据。
2 月龄健康昆明小鼠随机分为 2 组，每组 10 只，雌雄各半，分别为青年对照组和衰老模型组。2 岁龄健康小鼠为自然衰老组。购进后先饲喂 1 周减少应激，适应环境后开始试验。青年对照组和自然衰老组在颈背部注射生理盐水；模型衰老组在颈背部注射 D － gal（ 125 mg / kg）制造衰老模型。持续 45 d。 2． 2 小鼠行为学检测（跳台检测）
由表 2 可知：衰老模型组与青年对照组比较，胸腺、脾脏脏器指数降低，差异极显著（ P ＜ 0． 01）；衰老模型组与自然衰老组比较，脾脏脏器指数差异不显著（ P ＞ 0． 05），胸腺脏器指数差异显著（ P ＜ 0． 05）。 3． 3 生化指标检测结果
生化指标检测结果见表 3。
表 3 生化指标检测结果（ nห้องสมุดไป่ตู้= 10）
由表 3 可知：衰老模型组与青年对照组比较，血清 SOD、GSH － Px 活力、IL － 2 和免疫蛋白含量降低，血清 MDA、IL － 6 含量升高，差异极显著（ P ＜ 0． 01）；与自然衰老组比较差异不显著（ P ＞ 0． 05）。自然衰老组与衰老模型组比较，血清 SOD、GSH － Px 酶活力差异显著（ P ＜ 0． 05 ），其余项目差异不显著（ P ＞ 0． 05）。 4 分析与讨论

党参香附口服液对D-半乳糖致衰模型大鼠免疫功能的影响

李净，建鹏，昕，．络欣通对脑缺血再灌注模型鼠神经细胞胡刘等脑
凋亡及Ｐ３５蛋白表达的影响［］安徽中医学院学报，０４２（）Ｊ．２０，３６：
２２０２．
Ｅ３ｉＳｅＱ，ｈｎＺｅ１Ｎｅｒｐｏｅｔｅｅｆｃｓｉｅｂｌｏ２ＬｈｎｚＣｅＨ，ｔａＬ，．ｕｏｒｔｃｉｆｔｇｒｉｆｖｅｎｓ
湖北中医学院学报
・
２１年２第１卷第１００月２期
Ｆｂｕｒｅｒａｙ，２１００，Ｖｏ．１，．１２Ｎｏ１
１・８
ＪｕｎｌｆＨｕｅｉｅｓｔｆＣｉｅｅＭｅｉｉｅｏｒａｂｉｏＵｎｖｒｉｏｈｎｓｄｃｎｙ
老模型大鼠，察大鼠行为变化，测其血清中白细胞介素２Ｉ－）白细胞介素６Ｉ－）观检（Ｌ２及（Ｌ６的含量。结果
参、党参香附口服液后精神状态、动度等情况得到明显改善，活党参组及党参香附复方组血清中Ｉ－量明显高于模型Ｌ２含
基金项目：北中医学院级课题。湖作者简介：俐（９６）女，北中医学院海外学院助理研究员。宋１７一，湖
具有剂量依赖型。
综上所述，宝灵膏可以下调沙鼠ＣＲＩ脑组织皮层和纹状Ｉ后
王宝凤．丹参治疗新生儿缺氧缺血性脑病疗效观察［］中国误诊学Ｊ．

D半乳糖诱导生物体衰老与细胞衰老模型的实验研究

ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｍｅｔｈｏｄｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
１．ａｎｉｍａｌａｇｉｎｇ：Ｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｈａｄｍａｎｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｆｒｏｍ
ｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｉｎｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌａｎｄａｃｔｉｏｎ．ｅｇ：Ｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ
Ｄ—ｇａｌｇｒｏｕｐ．ｇｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓＤ－－ｇａｌａｔｏｓｅｃａｎｉｎｄｕｃｔｅｄｍｉｃｅａｎｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ
６
婴型奎兰塑主兰竺堡苎
ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ，ａｎｄ８９ｎｗａｓｔｈｅｂｅｓｔ．Ｔｈｕｓｔｈｉｓｓｔｕｄｙｐｒｏｖｉｄｅｓａｇｏｏｄｍｏｄｅｌｏｆｒａｔ
Ｍａｙｏｒ．Ｃｅｉｌ－ｂｉｏｌｏｇｙ
Ｃｎ＂ａｄｔｌａｔｅＳｔｕｄｅｎｔ：ＸｉｎｇＹｕ—ｚｈｉ
Ｓｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：．Ｐｒｏｆ．ＨｕＨｕｏ－ｚｈｅｎ
Ａｂｓｔｒａｃｔ
ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＯｕｒｓｔｕｄｙｆｏｃｕｓｅｄｏｎｒｅｓｅａｒｃｈｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｍｏｎｇｔｈｅｏｘｉｄａｔｉｖｅｄａｍａｇｅ．ｓｔｅｍｃｅｌｌｓｅｎｅｓｃｅｎｅａｎｄａｎｉｍａｌａｇｉｎｇ．ｂｙｍｅ越ｕ砖ｔｈｅｑｕａｎｔｉｔｙｏｆｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌ，ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆａｎｉｍａｌａｎｄｃｅｉｌｍｏｄｅｌ．ＷｅｗａｎｔｔＯｅｘｐｌａｉｎｓｔｈａｔＤ－ｇａｌａｅｔｏｓｅｉｎｄｕｃｉｎｇｓｕｂａｃｕｗａｇｉｎｇ
４．ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｓｅｎｅｓｃｅｎｃｉｖｅｓｉｇｎｓ：Ｏｐｔｉｃａｌａｎｄｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，

西归对D_半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用_董寿堂

西归为伞形科凹乳芹属植物西藏凹乳芹Vicatia thibetica de Boiss.的根，又名独脚当归、野当归等，主要分布于云南、四川、西藏等地。

其性温，味甘、微苦，具有补气、补血、调经等功效。

在云南大理的鹤庆、剑川及永平县有人工栽培，并常将其与猪脚、鸡肉等炖煮作为滋补菜肴食用[1-3]。

目前研究发现，西归具有抗痛经、抗疲劳、抗氧化、增强免疫、促智等药理作用，但未见其抗衰老作用的研究报道[4]。

笔者等通过探究其对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用及免疫器官指数的影响，初步评价抗衰老作用，为下一步开发研究提供参考。

1 材料与方法1.1 仪器IKA RV 10 数显型旋转蒸发仪（德国IKA 集团）；SQP 型电子天平（赛多利斯科学仪器股份有限公司）；1730 台式高速冷冻离心机（丹麦Labogene 公司）；Agilent cary 60 紫外可见分光光度计（安捷伦科技（中国）有限公司）。

1.2 药品与试剂西归（购于云南省大理州鹤庆县马厂乡，经保山中医药高等专科学校中药教研室杨发建老师鉴定为伞形科凹乳芹属植物西藏凹乳芹的根）；维生素E 注射液（上海通用药业股份有限公司，批号20150419）；D-半乳糖（上海国药集团化学试剂有限公司，批号20150814）；羧甲基纤维素钠（CMC -Na，上海国药集团化学试剂有限公司，批号20150513）；超氧化物歧化酶（SOD，批号20160905）、丙二醛（MDA，批号20160926）试剂盒均购于南京建成生物技术研究所。

1.3 动物昆明种小鼠，雄性，体质量18～22 g，由昆明医科大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK（滇）2011-0004。

1.4 方法1.4.1 西归浸膏的提取取干燥西归粗粉996.42 g，用95%乙醇回流提取3 次，合并滤液，经减压浓缩，得浸膏160.03 g，其提取效率为16.06%，即1 g 浸膏相当于6.23 g 的生药。

2024年注射D―半乳糖致大鼠衰老效应的评价

2024年注射D―半乳糖致大鼠衰老效应的评价D-半乳糖是一种广泛应用于动物衰老研究的试剂，通过注射D-半乳糖可以诱导实验动物产生类似自然衰老的生理和生化变化。

在本研究中，我们采用了连续注射D-半乳糖的方法，以制造大鼠衰老模型。

具体方法如下：首先，选择健康成年大鼠作为实验对象，并将其随机分为实验组和对照组。

实验组大鼠每天接受一定量的D-半乳糖溶液注射，而对照组则注射等量的生理盐水。

注射时间持续数周至数月不等，以便充分诱导衰老效应。

在注射过程中，我们严格控制了注射剂量和频率，以确保实验结果的可靠性和可重复性。

同时，我们还密切观察了大鼠的生长状况、体重变化以及行为表现，以便及时发现并处理可能出现的异常情况。

二、大鼠衰老指标评估为了评估D-半乳糖注射对大鼠衰老的影响，我们选取了一系列衰老指标进行测定。

这些指标包括体重、毛发状况、皮肤弹性、肌肉力量、运动能力、记忆力和学习能力等。

通过定期测量大鼠的体重，我们发现实验组大鼠的体重增长速度明显减缓，甚至出现了体重下降的情况。

此外，实验组大鼠的毛发变得稀疏、干燥且失去光泽，皮肤弹性也显著下降。

这些外观上的变化表明D-半乳糖注射对大鼠的衰老产生了明显的影响。

在评估肌肉力量和运动能力方面，我们采用了抓握力测试和跑步机测试等方法。

结果显示，实验组大鼠的抓握力和运动能力均较对照组明显降低，表明其肌肉力量和运动能力受到了损害。

在记忆力和学习能力方面，我们使用了迷宫测试和条件性反射等方法进行测定。

实验组大鼠在迷宫测试中的表现较差，需要更长的时间才能完成任务；而在条件性反射测试中，实验组大鼠的反应速度和准确性也低于对照组。

这些结果表明D-半乳糖注射对大鼠的神经系统功能产生了负面影响。

三、组织病理学检查为了更深入地了解D-半乳糖注射对大鼠衰老的影响，我们进行了组织病理学检查。

通过采集大鼠的肝脏、肾脏、心脏和脑组织等样本，我们观察了这些器官的组织结构和细胞形态变化。

结果显示，实验组大鼠的肝脏和肾脏出现了明显的病理变化，如肝细胞脂肪变性、肾小球硬化等。

D-半乳糖致衰老小鼠模型的实验研究

D-半乳糖致衰老小鼠模型的实验研究鞠文博1，于春艳1，陈建光2【摘要】摘要：目的探讨应用D-半乳糖制作小鼠衰老模型，并进行指标检测.方法D-半乳糖连续皮下注射42 d制作小鼠衰老模型，同时进行体质量变化测量、行为学测试和形态学衰老指标的测定.结果与正常对照组相比，造模4周后，D-半乳糖致衰老小鼠体质量显著降低(P<0.01)；D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力减弱，水迷宫探索路径长度、搜台潜伏期均显著延长(P<0.01)；形态学观察显示各器官组织结构出现衰老改变.结论D-半乳糖可以成功制作小鼠衰老模型.【期刊名称】北华大学学报（自然科学版）【年(卷),期】2015(000)002【总页数】4【关键词】D-半乳糖；衰老；行为学检测；形态学检测老龄人口的增多促使人们更加关注衰老的研究，脑衰老是人衰老的最明显表现.脑衰老是一个非常复杂的过程，导致脑结构与功能的改变，是由多种因素引起的，学习和记忆能力的减退是其最重要的表现之一[1].D-半乳糖是一种机体内正常的营养成分，能够在正常机体代谢中转变为葡萄糖，从而参与葡萄糖代谢，如果摄入过量则会导致代谢紊乱.在半乳糖氧化酶作用下，D-半乳糖转化成醛糖和过氧化氢，从而产生大量的超氧化阴离子自由基，使多种生物大分子氧化损伤，对基因的表达和调节系统产生影响，导致细胞转录水平降低而引起衰老改变[2].研究显示：连续在大鼠和小鼠等哺乳动物身上注射D-半乳糖(D-gal)1个月即可造成动物体内糖代谢发生紊乱，导致多种组织细胞出现类似衰老的变化[3-4].因此，应用D-半乳糖建立动物的衰老模型可广泛地应用在衰老机制的研究和抗衰老药物的筛选中.本课题组应用D-半乳糖连续给药6周，造成小鼠衰老模型，通过小鼠体质量的变化、行为学的观测以及组织形态学改变等方面来系统地研究D-半乳糖衰老模型，从而为科学、合理地使用动物衰老模型进行药物抗衰老实验提供依据.1 材料与方法昆明小鼠购自吉林大学实验动物中心，许可证号：SCXK-(吉)2008-005.小鼠适应性饲养1周，按体质量随机分为两组：D-半乳糖模型组和正常对照组，每组12只，雌雄各半，按6只/笼饲养，自由饮食.D-半乳糖模型组小鼠应用5%的D-半乳糖100 mg/(kg·d)从小鼠颈背部皮下注射；正常对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水，给药1次/d，共给药6周.2 观察指标2.1 体质量变化测量实验开始、实验中和实验结束前分别称量每只小鼠的体质量，观察实验小鼠体质量的变化及小鼠外观的变化.2.2 行为学测试第6周造模结束后对各组小鼠进行行为学测试[6-8]，包括Morris水迷宫法记忆能力测试和穿梭箱法学习记忆能力测试.2.2.1 水迷宫法测试小鼠的学习记忆能力实验第6周进行记忆能力测试[9-10]，水迷宫水池高60 cm，直径110 cm，站台直径8.0 cm，将水迷宫等分成4个分区，每个分区壁上标有东、南、西、北四个入水点.迷宫上方有一摄像机，与计算机相连接，可利用计算机软件对实验小鼠活动进行全程跟踪摄录，能够显示整个活动轨迹，记录小鼠找到站台所需的时间表示小鼠的学习记忆能力.每日将动物头朝池壁按东、南、西、北4个入水点分别放入水池，将站台置于某一分区的中央，实验过程站台位置保持不变.电脑系统自动记录小鼠从入水点到达站台所需时间和摄录在这段时间内的游泳路程，以小鼠找到平台所需时间作为学习和记忆成绩.若在设定时间内小鼠未找到站台，计算机停止跟踪，每次实验以120 s为限.训练中如果小鼠在极限时间120 s内找到站台，允许小鼠在站台上停留20 s，若小鼠未找到站台，实验人员将小鼠放在站台上停留20 s.20 s后将其从平台上拿下，休息1 min后再次开始训练.一般正常动物经5～6个训练日可学会以最快、最佳的轨迹找到平台的正确位置.实验在隔音安静的房间内进行，水温控制在(22±0.5)℃.2.2.2 穿梭箱法测试小鼠的学习记忆能力BA-200避暗仪是利用鼠类的嗜暗习性而设计的，以光、电击的联合刺激使实验动物产生由被动回避转为主动回避的条件反射[11].记录此条件反射建立过程中的主动回避反应指标，从而反映实验小鼠的学习能力、记忆时间的变化.实验第42天开始，每天练习1次，共连续练习3 d，在第4天进行正式测试，记录数据包括小鼠遭受电击次数，遭受电击的总时间和逃避潜伏时间.系统参数设为20次为一个循环次数，间隔时间5 s，电击时间10 s，暗示时间5 s.2.3 病理切片观察在完成MT-200水迷宫和穿梭箱法学习记忆能力测试后，应用2%戊巴比妥钠溶液40 mg/kg腹腔注射麻醉小鼠后，取脑组织、肝脏等重要器官，10%甲醛固定，常规脱水包埋，制作石蜡切片，HE染色.3 结果3.1 体质量变化与正常对照组比，D-半乳糖致衰老小鼠体质量在造模4周后显著降低(P<0.01)，并随着造模时间的推移体质量进一步减少(P<0.01).小鼠外观特征为毛色枯黄、行动迟缓、精神萎靡等.见表1.表1 造模前后小鼠体质量的变化Tab.1 Changes in body weight of mice before and after model establishment*：和空白对照组比较，P<0.01.3.2 行为学测试与正常对照组比较，水迷宫实验和穿梭箱法学习记忆能力测试显示：模型组衰老小鼠水迷宫探索路径长度和搜台潜伏期时间均显著延长(P<0.01).见表2.表2 水迷宫实验和穿梭箱法小鼠学习记忆时间Tab.2 The time of learning and memory of mice in water maze and shuttle box experiment#：和空白对照组比较，P<0.01，##：和空白对照组比较，P<0.01.3.3 病理切片观察肝脏组织切片显示：衰老模型组小鼠肝小叶不规整，可见点状或灶性坏死，肝细胞排列紊乱，脂肪样变性较广泛，胞质可见明显疏松、肿胀，门管区紊乱，结缔组织增多，可见炎性细胞浸润.正常组肝小叶结构完整、规则，呈多边形肝细胞排列整齐，胞质丰富，清亮透明，核大，核仁明显，门管区无炎性细胞浸润[12].见图1，2.光镜下可见：模型组轮廓模糊，神经元细胞减少，颜色较浅，模型组可见大量肿胀变性的神经元细胞，分支明显减少，核仁浓缩变小，分叶不清，部分断离，细胞间排列松散，界限模糊[13].正常组小鼠脑组织轮廓清晰，神经元细胞密集，颜色深染，核仁分叶清晰，细胞间排列整齐，界限清楚.见图3，4.4 讨论衰老是一种正常的生理现象，机体发育成熟后，组织器官也逐步发生退行性改变，主要表现为机体功能的下降和紊乱、免疫功能下降、糖脂代谢紊乱和肝肾功能的异常，尤以记忆力减退为主[14].本课题组利用D-半乳糖诱导了亚急性衰老动物模型，模型组小鼠较正常对照组小鼠体质量减轻较多，毛色枯黄，行动迟缓，精神萎靡；光镜下显示多个器官结构均有不同程度的病理损伤变化.本实验研究的结果发现：D-半乳糖诱导衰老小鼠模型表现为小鼠活动次数明显减少，学习记忆力显著下降，体力和耐力等能力降低，并随着时间的推移衰老症状逐渐加重，与人类的自然衰老症状和衰老进程比较类似，这个实验结果可为人类衰老机制研究以及抗衰老药物的筛选提供参考[15-19].参考文献：[1] Finkel T，Holbrook N J.Oxidants，oxidative stress and the biology of ageing[J].Nature，2000，408：239-247.[2] Cui X，Zuo P，Zhang Q，et al.Chronic systemic D-galactose exposure induces memory loss，neurodegeneration，and oxidative damage in mice：protective effects of R-alpha-lipoic acid [J].J Neurosci Res，2006，83：1584-1590.[3] 张熙，李文彬，张炳烈.D-半乳糖亚急性中毒大鼠拟衰老生化改变[J].中国药理学与毒理学杂志，1990，4(4)：309-310.[4] 梁纪伟，田庆伟，王永明，等.大豆异黄酮对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗氧化系统作用的实验研究[J].中国老年学杂志，2004，24(1)：42-43.[5] Song X，Bao M，Li D，et al.Advanced glycation in D-galactose induced mouse aging model [J].Mech Ageing Dev，1999，108：239-251.[6] Li Y，Qin H Q，Chen Q S，et al.Neurochemical and behavioral effects of the intrahippocampal coinjection of betaamyloid protein 1-40 and ibotenic acid in rats[J].Life Sci，2005，76：1189-1197.[7] Hua X，Lei M，Zhang Y，et al.Long-term D-galactose injection combined with ovariectomy serves as a new rodent model for Alzheimer’s disease [J].Life Sci，2007，80：1897-1905.[8] Lei H，Wang B，Li W P，et al.Anti-aging effect of astragalosides and its mechanism of action[J].Acta Pharmacol Sin，2003，24：230-234. 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［１］
这就提示了Ｄ半乳糖可以显著抑制Ｔ淋巴细胞的增殖活性，诱导细胞免疫功能的衰退，诱导细胞水平的免疫衰老。亦有实验研究报道，Ｄ半乳糖慢性中Ｋ细胞杀伤活性较对照组有毒所致衰老模型鼠的Ｎ
４］所降低，而Ｔ淋巴细胞增值率显著低于对照组［。
Ｄ半乳糖模型组与自然衰老组小鼠相比，迟发型变态反应（足趾增厚法）攻击前后足趾厚度差值与其对照组相比均有所降低，但差异无统计学意义（Ｐ＞
１］。细胞及脾脏淋巴细胞增殖的抑制作用成正相关［
Ｄ半乳糖诱导免衰老机制的相关研究却相对较少；疫衰老的作用机制尚未完全明确。本文综述了Ｄ半乳糖模型鼠免疫衰老的发生机制和实验研究进展，旨在为Ｄ半乳糖所致衰老模型，作为一种实验性衰老模型在免疫衰老研究方面的应用，提供更加完善的理论依据。１器官免疫研究Ｄ半乳糖模型衰老鼠在机体免疫器官的相关研究中，主要涉及到的是胸腺、脾脏、淋巴结。张华华等在实验中亦对体外培养之胸腺器官进行切片观察，结果显示Ｄ半乳糖组较对照组胸腺发生组织退化
·３２２ ·
中国临床保健杂志２０１２年６月第１５卷第３期ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＨｅａｌｔｈｃ，Ｊｕｎｅ２０１２，Ｖｏｌ．１５，ＮＯ．３
·综述·
Ｄ半乳糖所致衰老模型鼠的免疫功能变化
梁华，孙燕佩，朱明雪，李慧，郭慧
（收稿日期：２０１１１１０６）
。吴志奎等研究Ｄ
半乳糖模型大鼠与空白对照组相比，Ｔ细胞分泌ＩＬ
１１］２、ＩＬ２Ｒ水平显著降低［。Ｄ半乳糖模型小鼠血清
ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ三种免疫球蛋白水平均显著低于对照
１２］组［。王昭等在研究中发现，Ｄ半乳糖所致衰老模
［１５］
。近年亦有报道显示实验中，Ｄ半乳糖模型鼠
免疫功能未见明显降低，行为学实验与健康对照组相比亦差异无统计学意义；而在氧化损伤方面作用显著。故认为Ｄ半乳糖模型鼠可用于氧化损伤方面的实验研究，而对于衰老和抗衰老研究则不能完
５］全真实反映机体情况［。
５展望Ｄ半乳糖在衰老相关实验研究中得到了广泛的认可和应用。但仍存在一些问题：研究模式过于单一的不足，研究思路有待进一步拓展等。杨丽等
［１４］
（ＴＧＦ所致亚急性衰老大鼠血清转化生长因子 β ），ＩＦＮ）的含量明显低于对照组 β γ干扰素（ γ ４其他。
也有少数文献报道Ｄ半乳糖模型鼠免疫功能未见明显改变。早在９０年代，就有学者报道，在免疫功能方面，致衰老动物与对照组相比，巨噬细胞吞噬功能、对胸腺和脾脏的增重影响、迟发型变态反应均差异无统计学意义。故认为半乳糖致衰老动物不能作为评价老年小鼠免疫生化指标变化的模型，而作为筛选抗衰老药物和食品的生化指标的研究尚可
１］的生理改变［。但有关此亚急性衰老模型的免疫
２细胞免疫研究Ｄ半乳糖模型衰老鼠在机体细胞免疫的相关研究中以Ｔ细胞，ＮＫ细胞及红细胞的免疫变化为最多报道。张华华等对胸腺及脾淋巴细胞进行体外培半乳糖作用体系，以不同养，并建立细胞水平的Ｄ浓度的Ｄ半乳糖处理体外培养的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞，结果显示，Ｄ半乳糖浓度与其对小鼠胸腺
８９］ＴＮＦ浓度与健康对照组相比，差异性显著［。李燕
察的实验中有报道，以Ｄ半乳糖模型鼠胸腺指数、
３］。曹湘博等研究报道，脾脏指数明显低于对照组［
Ｄ半乳糖慢性中毒所致衰老模型鼠胸腺指数明显低
４］于对照组，胸腺细胞凋亡高于对照组［。皮肤及黏
膜虽为机体免疫系统的第一道防线，但目前国内尚未见相关报道。
中毒所致衰老模型鼠较对照组，ＩＬ２、ＩＦＮ、ＴＮＦ三 γ 种ＴＨ１型细胞因子的活性均显著降低。Ｄ半乳糖
中国临床保健杂志２０１２年６月第１５卷第３期ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＨｅａｌｔｈｃ，Ｊｕｎｅ２０１２，Ｖｏｌ．１５，ＮＯ．３
型小鼠红细胞Ｃ受体花环率（ＲＢＣＣＲＲ）及免疫３ｂ３ｂ
１３］ＲＢＣＩＣＲ）明显低于健康对照组［。复合物花环率（
Ｄ半乳糖模型小鼠脾细胞ＣＤ４０、也有研究报道，ＣＤ４０Ｌ的表达明显低于健康对照组
［２］
。Ｄ半乳糖
［５］）。艳宏等有研究报道，Ｄ半乳糖能明显０．０５
。该研究，不仅证实了Ｄ半乳糖可以在胸腺内
抑制ＮＫ细胞活力，与健康对照组相比具有统计学
２］。成文利等对Ｄ半乳糖模型小鼠红细胞免差异［
诱导细胞凋亡并破坏胸腺微环境，在体外器官水平诱导免疫衰老，还成功建立了有效的体外诱导免疫衰老的模型。马艳宏等在硒酸精氨酸对Ｄ半乳糖衰老小鼠免疫功能的影响研究中，观察到Ｄ半乳糖模型组小鼠的脾指数、胸腺指数明显低于健康对照
［１６１７］
通过观察经典补益剂（四君子汤、四物汤、六
味地黄汤、金匮肾气汤）对老龄雌性大鼠ＨＰＧ轴的调节作用，来探讨补气、补血、补阴、补阳药物对于雌性动物抗衰老的差异性。笔者认为，如此立足于中医学整体观、辨证施治的思想和补法延缓衰老的理论，通过比较研究的方法，对衰老鼠不同虚证证型（气虚、血虚、阴虚、阳虚）所对应的免疫特征指标变化进行观察，进而探知中医补益方剂对免疫调节作用的不同特点的实验研究，无疑是一个创新性的研究思路。参考文献
（黑龙江中医药大学成人教育学院，哈尔滨１５００４０）
中图分类号：Ｒ３９２文献标识码：ＡＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２６７９０．２０１２．０３．０４３
自我国的科学家首次提出Ｄ半乳糖致衰老模型后，由于此方法造模时间短，成模容易，重复性好等特点，目前此法已得到了广泛的应用和大量的文献报道。该模型引起的机体多组织、多器官、多水平损伤符合自然衰老规律，表现出与自然衰老相类似
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慢性中毒所致衰老模型鼠免疫功能明显减退，并与自然衰老的动物模型相接近
［４］
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