抑郁模型大鼠海马内环境的研究
海马齿状回神经再生对WKY大鼠抑郁样行为的影响
海马齿状回神经再生对ＷＫＹ大鼠抑郁样行为的影响陈 玲，马近腾，常鑫蕊，冯 俐，杨小荣△（山西医科大学生理学系，细胞生理学教育部重点实验室，细胞生理学山西省重点实验室，太原０３０００１）【摘要】 目的：观察海马齿状回（ＤＧ）神经再生对成年ＷｉｓｔａｒＫｙｏｔｏ（ＷＫＹ）大鼠抑郁样行为的影响。
方法：实验共分三个组（ｎ＝１０）：①正常对照（Ｗｉｓｔａｒ）组：选取９周龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠，给予生理盐水３周（１０ｍｇ／ｋｇ，灌胃）；②抑郁模型（ＷＫＹ）组：选取同龄ＷＫＹ大鼠并经行为学测定后筛选出抑郁大鼠作为抑郁模型组，给予生理盐水３周（１０ｍｇ／ｋｇ，灌胃）；③阳性对照（ＡＭＩ＋ＷＫＹ）组：选取同龄ＷＫＹ抑郁大鼠，给予阿米替林（ＡＭＩ）３周（１０ｍｇ／ｋｇ，灌胃）。
选用免疫荧光染色细胞增殖标记物Ｋｉ６７、未成熟神经元标志物ＤＣＸ检测大鼠的海马神经再生水平；应用糖水偏好实验（ＳＰＴ）、旷场实验（ＯＦＴ）和强迫游泳实验（ＦＳＴ）检测各组大鼠的抑郁样行为学变化。
结果：①ＷＫＹ抑郁大鼠海马ＤＧ区细胞增殖标志物Ｋｉ６７＋细胞数和未成熟神经元标志物ＤＣＸ＋细胞数较Ｗｉｓｔａｒ大鼠分别降低了３３．０％（Ｐ＜０．０１）和３９．２％（Ｐ＜０．０１）；阿米替林给药后使抑郁大鼠海马ＤＧ区Ｋｉ６７＋细胞数和ＤＣＸ＋细胞数分别增加了４３．８％（Ｐ＜０．０１）和４６．７％（Ｐ＜０．０１）。
②与Ｗｉｓｔａｒ大鼠相比，ＷＫＹ抑郁大鼠糖水偏好程度明显降低（Ｐ＜０．０１），旷场实验中运动总距离显著缩短（Ｐ＜０．０１）和中心停留时间显著减少（Ｐ＜０．０１），强迫游泳实验中不动时间明显延长（Ｐ＜０．０１）；阿米替林治疗可显著改善ＷＫＹ大鼠的上述抑郁样行为。
结论：①成年ＷＫＹ抑郁大鼠的海马神经干细胞的增殖和分化能力较正常对照组显著降低，提示成年ＷＫＹ抑郁大鼠的神经再生受损；②改善海马受损的神经再生可以部分逆转成年ＷＫＹ大鼠的抑郁样行为。
【关键词】 抑郁症；神经再生；海马；大鼠【中图分类号】Ｒ７４９．４ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１０００ ６８３４（２０１９）０６ ４９１ ００５【ＤＯＩ】１０．１２０４７／ｊ．ｃｊａｐ．５８５３．２０１９．１０７Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｔｈｅｄｅｎｔａｔｅｇｙｒｕｓ（ＤＧ）ｏｆｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｏｎｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎＷＫＹｒａｔｓＣＨＥＮＬｉｎｇ，ＭＡＪｉｎ ｔｅｎｇ，ＣＨＡＮＧＸｉｎ ｒｕｉ，ＦＥＮＧＬｉ，ＹＡＮＧＸｉａｏ ｒｏｎｇ△（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ＳｈａｎｘｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｅｌｌｕｌａｒＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｔＳｈａｎｘｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｔａｉｙｕａｎ０３０００１，Ｃｈｉｎａ）【ＡＢＳＴＲＡＣＴ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｔｈｅｄｅｎｔａｔｅｇｙｒｕｓ（ＤＧ）ｏｆｔｈｅｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｏｎｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎａｄｕｌｔＷｉｓｔａｒＫｙｏｔｏ（ＷＫＹ）ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓｉｎｔｏｔａｌ（ｎ＝１０）：①ｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌ（Ｗｉｓｔａｒ）ｇｒｏｕｐ：９ ｗｅｅｋ ｏｌｄＷｉｓｔａｒｒａｔｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｓａｌｉｎｅｆｏｒ３ｗｅｅｋｓ（１０ｍｇ／ｋｇ，ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）；②ｔｈｅｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｍｏｄｅｌ（ＷＫＹ）ｇｒｏｕｐ：ＷＫＹｒａｔｓｏｆｔｈｅｓａｍｅａｇｅ，ｔｅｓｔｅｄｆｏｒｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓ，ｗｅｒｅａｓａｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｓａｌｉｎｅｆｏｒ３ｗｅｅｋｓ（１０ｍｇ／ｋｇ，ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）；③ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ（ＡＭＩ＋ＷＫＹ）ｇｒｏｕｐ：ＷＫＹｒａｔｓｏｆｔｈｅｓａｍｅａｇｅｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈａｍｉｔｒｉｐｔｙｌｉｎｅｆｏｒ３ｗｅｅｋｓ（１０ｍｇ／ｋｇ，ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）．Ｔｈｅｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｗａｓｄｅｔｅｃ ｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｔａｉｎｉｎｇｆｏｒＫｉ６７（ａｎｅｕｒｏｎａｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｍａｒｋｅｒ）ａｎｄＤＣＸ（ａｎｉｍｍａｔｕｒｅｎｅｕｒｏｎａｌｍａｒｋｅｒ）．Ｔｈｅｄｅｐｒｅｓ ｓｉｏｎ ｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｗｅｒｅａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｓｕｃｒｏｓｅｐｒｅｆｅｒｅｎｃｅｔｅｓｔ（ＳＰＴ），ｏｐｅｎｆｉｅｌｄｔｅｓｔ（ＯＦＴ）ａｎｄｆｏｒｃｅｄｓｗｉｍｍｉｎｇｔｅｓｔ（ＦＳＴ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ：①ＷｈｅｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＷｉｓｔａｒｒａｔｓ，ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＫｉ６７＋ｃｅｌｌｓａｎｄＤＣＸ＋ｃｅｌｌｓｏｆｔｈｅＤＧｉｎＷＫＹｒａｔｓｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｙ３３．０％（Ｐ＜０．０１）ａｎｄ３９．２％（Ｐ＜０．０１），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ａｍｉｔｒｉｐｔｙｌｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＫｉ６７＋ｃｅｌｌｓａｎｄＤＣＸ＋ｃｅｌｌｓｉｎｔｈｅＤＧｂｙ４３．８％（Ｐ＜０．０１）ａｎｄ４６．７％（Ｐ＜０．０１），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＷＫＹｒａｔｓ．②Ｗｈｅｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ＷＫＹｒａｔｓｓｈｏｗｅｄａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｉｎｓｕｃｒｏｓｅｐｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０１），ｌｅｓｓｔｏｔａｌｈｏｒｉｚｏｎｔａｌｄｉｓｔａｎｃｅ（Ｐ＜０．０１）ａｎｄｌｅｓｓｔｉｍｅｅｎｔｅｒｅｄｔｈｅｃｅｎｔｅｒｆｉｅｌｄ（Ｐ＜０．０１）ｉｎｔｈｅＯＦＴ，ｔｈｅｉｍｍｏｂｉｌｉｔｙｔｉｍｅｉｎｔｈｅＦＳＴｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０１）．Ａｍｉｔｒｉｐｔｙ ｌｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｍｐｒｏｖｅｄｔｈｅｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎＷＫＹｒａｔｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：①ＴｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌｎｅｕｒａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎａｄｕｌｔＷＫＹｒａｔｓａｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆＷｉｓｔａｒｒａｔｓ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇｔｈａｔｔｈｅｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎａ ｄｕｌｔＷＫＹｒａｔｓｉｓｉｍｐａｉｒｅｄ．②Ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｏｎｏｆｉｍｐａｉｒｅｄｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓｃａｎｐａｒｔｉａｌｌｙｒｅｖｅｒｓｅｔｈｅｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎａｄｕｌｔＷＫＹｒａｔｓ．【ＫＥＹＷＯＲＤＳ】 ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ； ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓ； ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ； ｒａｔｓ１９４中国应用生理学杂志，２０１９，３５（６） 【基金项目】山西省面上自然基金项目（２０１８０１Ｄ１２１３１６）；山西省“１３３１工程”重点学科建设计划经费；山西省回国留学人员科研教研资助项目；２０１８年度山西省高等学校大学生创新创业训练项目（２０１８１７３）【收稿日期】２０１９ ０３ ２７【修回日期】２０１９ １０ １８ △【通讯作者】Ｔｅｌ：１３５０３５１７４５３；Ｅ ｍａｉｌ：ｒｏｎｇ＿５２２５２２＠１６３．ｃｏｍ 抑郁症是指持续超过两周，不能自控的以情绪低落、快感缺失、意志活动和认知功能减退以及思维迟缓为主要特征的情感性精神障碍。
MECT_治疗重度抑郁症相关研究进展
Advances in Clinical Medicine 临床医学进展, 2023, 13(3), 4448-4453 Published Online March 2023 in Hans. https:///journal/acm https:///10.12677/acm.2023.133638MECT 治疗重度抑郁症相关研究进展张晓燕，黄永清*内蒙古医科大学精神卫生学院，内蒙古 呼和浩特收稿日期：2023年2月21日；录用日期：2023年3月16日；发布日期：2023年3月24日摘要 重度抑郁症(Major Depressive Disorder, MDD)是世界上最常见、高致残性的精神疾病之一，目前临床上的治疗手段包括药物治疗、心理治疗、物理治疗等。
随着精神医学治疗手段的不断发展，无抽搐电休克治疗(Modified Electric Convulsive Therapy, MECT)在精神障碍的治疗中占有越来越重要的位置。
MECT 治疗重度抑郁症在临床上得到广泛认可，本文就MECT 治疗重度抑郁症相关研究进展进行讨论。
关键词抑郁症，重度抑郁症，MECT ，进展Progress in MECT Treatment for Major DepressionXiaoyan Zhang, Yongqing Huang *College of Mental Health, Inner Mongolia Medical University, Hohhot Inner Mongolia Received: Feb. 21st , 2023; accepted: Mar. 16th , 2023; published: Mar. 24th , 2023AbstractMajor depressive disorder, (Major Depressive Disorder, MDD) is one of the most common and highly disabling mental diseases in the world. At present, the clinical treatment methods include drug therapy, psychological therapy, physical therapy, etc. With the continuous development of psychia-tric treatment methods, modified electric convulsive therapy (Modified Electric Convulsive Thera-py, MECT) plays an increasingly important role in the treatment of mental disorders. MECT for MDD is widely recognized clinically, and this paper discusses the progress of research related to MECT for MDD.*通讯作者。
海马Warburg效应介导硫化氢对帕金森病大鼠海马小胶质细胞极化及其抑郁样行为的调控作用
海马Warburg效应介导硫化氢对帕金森病大鼠海马小胶质细胞极化及其抑郁样行为的调控作用摘要【研究背景与目的】抑郁症是帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者最常见的并发症。
目前，对于PD抑郁仍缺乏有效的药物治疗。
硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)是一种具有神经调节作用的新型气体信号分子。
我们以往发现H2S具有改善抑郁的作用、且能上调PD大鼠海马Warburg效应。
有研究表明，Warburg效应具有调控小胶质细胞极化的作用，而小胶质细胞极化与抑郁症的发生密切相关。
为此，本课题将探讨H2S对PD大鼠抑郁样行为的拮抗作用，并从调控海马Warburg效应-小胶质细胞极化的角度探讨H2S抗PD大鼠抑郁样行为的机制。
【方法】1.采用鱼藤酮(rotenone,ROT)颈背部皮下注射建立PD大鼠模型；2.新环境进食抑制实验、强迫游泳实验和悬尾实验用于评估大鼠的抑郁样行为；高架十字迷宫实验用于评估大鼠的焦虑样行为；旷场实验评估大鼠自发活动量；3.免疫荧光(Immunofluore sce nce,IF)技术检测Iba1的平均荧光强度；4.蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测小胶质细胞诱导型一氧化氮合酶(Induction nitric oxide synthase,iNOS)以及精氨酸酶-1I(Arginase-1,Arg-1)、几丁质酶3样分子3(Chitinase3-like3,Ym-1)的表达；5.Griess试剂检测NO含量；6.ELISA kits检测IL-1β、TGF-β1、IL-4含量。
【结果】1.H2S改善ROT诱导的PD大鼠抑郁样行为在新环境进食抑制试验中，NaHS(30,100μmol/kg,i.p.,4w)能显著缩短ROT诱导的PD大鼠的进食潜伏期，30min内食物总消耗量无显著差异；在强迫游泳试验中，NaHS(30,100μmol/kg,i.p.,4w)能有效缩短ROT诱导的PD大鼠强迫游泳不动时间；在悬尾实验中NaHS(100μmol/kg,i.p.,4w)能明显降低ROT诱导的PD大鼠的不动时间。
硫苯酰胺对抑郁症大鼠海马区突触素Ⅰ基因表达的影响
和４ ％多聚 甲醛 （℃ ）经 心脏 进行 血 管 冲洗 ４ 和灌流 固定 ， 含海 马脑段 人 ４ 取 ％中性福 尔 马 林 固定 液 中 固定 过 夜 ， 片 ， 切 所有 动 物均 依 次 间断性 地 选取 切 片 ， 个动 物共 取 ５ ， 于 每 张 用 免疫组 织 化学染 色 实验 。 引物设 计 根据 突触 素 Ｉ ｃ区和 Ｂ ａｆ —ｃｎ ｉ 的编码 序 列 ， 利用 Ｐｉ ｅ ５ ｒ ｒ． ｍ ０软件 设计 引 物 ， 引物序 列如 下 ： 突 触 素 Ｉ：上 游 引物 ５ Ａ Ｔ Ｔ Ｃ Ｔ — Ｔ ＣＣ Ｇ Ｇ
２ 不 同实 验组 Ｐ Ｒ产 物 的相 对 丰 度 ． ２ Ｃ
分 析
１材料 和方法 １ ． 料 １材 动 物 成 年雄 性 Ｗｉ ａ ｓ ｒ大 鼠 ，由哈 医 大 ＣＧＴＧＡＡＡＡＧＡＴＧＡ ３ ｔ
利 用 Ｂ ｎＳａ 件 对 Ｐ Ｒ产 物 进 行 扫 ａｄｅｎ软 Ｃ 描 分析 ， 算 突触 素 Ｉ Ｂ ａｔ 计 与 —ｃｎ的相 对丰 度 ｉ 之 比，来 说 明不 同 实验组 突触 素 Ｉ Ｒ Ａ的 Ｎ ｍ 相对 丰 度 。所 得 数 据应用 Ｓ Ｓ Ｉ． ｆ ｎ Ｐ Ｓ ０ ｏ Ｗｉ— １ ｒ ｄｗ 软 件进 行 统 计 学 分 析 ，利 用 Ｏ ｅ Ｗａ ｏｓ ｎ— ｙ Ａ Ｖ Ａ进行 不 同实验 组 的组 间对 比（ 算结 Ｎ Ｏ 计 果见 表 １ｏ从表 １ 可见 ， 郁 症模 型 组 突触 抑 ＧＡＣＡＴＧＧＡＡＧＴＴ Ｃ ３ 素 Ｉ Ｒ Ａ 的 相 对 丰 度 要 显 著 低 于 对 照 组 Ｎ ｍ 下 游 弓 物 ５ Ｇ Ａ Ａ Ｇ Ａ Ａ ｃ Ｔ Ｔ — （ ＜ ． ） 经硫 苯 酰胺 治疗 ２ 天后 ， 丰度 Ｉ Ｇ ｃ ｃ Ｃ Ｃ Ｔ Ｇ Ａ Ｔ ｐ０ ５ ， ０ １ 其 Ｔ Ｇ Ａ ３共计 ４ ９ ｐ Ａ Ｃ ６ｂ 回升 ， 与对 照组 的差异 已不显 著 （＞ ． ） ｐＯ ５。 ０ Ｂ— ｃ ｎ 上 游 弓 物 ５ Ａ Ｇ Ｃ Ａ — ａｔ ： ｉ Ｉ Ｇ Ｃ Ａ Ｃ 表 １Ｐ Ｒ产物 的相 对丰 度分析 Ｃ
雌激素受体α在抑郁症模型大鼠海马中的分布
性应激结合孤养方式构建抑郁症模型， ｐｎ ｉｄ法观察动物的抑郁行为 ， Ｏ ｅ—ｅ ｆｌ 免疫组织化 学方法观察 海马神 经元 中 Ｅ 的分布 ． 果表 明 ： 对 照组 相 比 ， 郁 组 大 鼠水 平运 动 、 直 活动 和 理毛 次数 Ｒ 结 与 抑 垂 显著减 少（ Ｐ＜０ ０ ）体重增幅和糖水消耗量显著性下降（ ．１ ， Ｐ＜００ ）在对照组和抑郁组 ，Ｒ 免 ．１ ； Ｅａ
号通路 发挥神 经保 护作 用的 能 力减弱 ． 关键词 ： 郁症 ； 激 素受体 ａ 海 马神 经元 抑 雌 ； 中 图分 类号 ： ４ ５ Ｑ １ 文 献标识 码 ： Ａ 文章 编号 ：０ １ ４ ３ ２ １ ） １ ０ ２—０ １ ０ —２ ４ （ ０ ０ ０ —０ ６ ５
抑 郁症 （ｅｒｓｉ ）是 以显 著而 持久 的情感 或心 境改变 为 主要特 征 的精 神疾 病 Ｈ 。 ｄｐｅｓ ｎ ｏ 随着 人们 工作 和生活 Ｊ 节奏加 快 ， 种应 激 因素 增加 ， 各 抑郁 症 已成 为常见病 和 多发 病 ＿ ． ２ 流行病 学 调查 表 明女 性抑 郁 症 的发 病 率大 ｊ 约是 男性 的 ２倍 ， 已证 明女 性在 经前期 、 现 妊娠期 、 产后 和 围绝经期 等雌 激素剧 烈减 少 的时期更 易患 抑郁症 ． 经前 综合征 、 抑郁 、 产后 绝经期 抑郁 经雌 激 素替代 治疗 可明显 改善 相应症 状 ． 物实 验和 临床研 究均显 示 ， 动 应 激和抑 郁 可导致 海马等 边缘 系统 的细 胞 丢失 和体 积减 小 ｊ提 示雌 激 素 与 抑郁 症 的发 病关 系密 切 ， 马是 ． 海 抑郁 症受 累 的重 要 区域 之一 ． 本研 究采 用慢 性不 可预见性 刺 激结合 孤养 方式建 立大 鼠抑郁模 型 ， 免疫组 织化 学观 察雌 激素受 体 ａ 在海 马 中的表达 及其 改 变 ， 以进 一步探 讨 抑郁症 发病机 理 ．
慢性应激肝郁证大鼠模型的复制及相关基因表达的研究
捏脊对抑郁模型大鼠海马全基因组表达谱的影响——捏脊治疗抑郁症实验研究之二
ｆ 脊 治 疗 抑 郁 症 实验研 究 之 一 已刊 登 于本 刊 ２ １ 捏 ０ ０年 第
６期
海 马 ． 液 氮 中保 存 每组 取 １ 标 本 送 交 上 海 康 成 生 物 工 程 置 个 有 限公 司 进 行 全 基 因组 表 达谱 芯 片 测 试 ．芯 片 名 称 为 Ｒ ｔ ｓ ａ ｕ ｔ
论 ． 脊 治 疗抑 郁 症 的机 理 与 调 控 多条 基 因表 达 有 关 。 捏 关 键 词 抑 郁 症 捏 脊 疗 法 基 因 芯 片 测试 中 图分 类 号 １２ ４１ ＜ ４． 文 献标 识 码 Ａ
文 章 编 号 １ ７ — ９ Ｘ（ ０ ０ ０ －０ ７ —０ ６ ２ ３ ７ ２ １ ）８ ０ ５ ３
ｒｄ ｃｉｎ ｆ ｅ ｕ ｔ ｏ ｗａ ｅ ｐ ｒ ａ ｉ ｔ ｉ ｉ ｎ ｒ ｏ ｔ ｒ ｅ ｍｅ ｂ ｌ ｙ ｎ ｎ ｅ ｍｅ ｕ ｌ ｒ ｃ ｌ ｃ ｉ ｇ ｉ ｄ ｌａｙ ｏ ｌ ｔｎ ｅ
综上 ， 方剂组用药后模型小 鼠的肺指数有降低趋势 ， 对流
感 病 毒 性 肺 炎 湿 热 证 模 型 小 鼠 的肺 指 数 具 有 一 定 的 抑 制 作
治 疗后 表 达 趋 于 正 常 的基 因有 ８ ３条 ， 中 多条 基 因 与 能 量 和 物 质 代 谢 有 关 ， 涉及 蛋 白质 生 物 合 成 和 嗅 觉 感 受 器 等 ； 其 还 抑
郁 模 型 大 鼠 上调 表 达 的 ． 捏 脊 治 疗后 表 达 趋 于 ａ 常 的 基 因有 １９条 ， 中 多条 基 因 与 凝 血 、 疫 、 症 和 凋 亡相 关 。 结 经 Ｙ － － ７ 其 免 炎
型组 、 脊 组 大 鼠治 疗 １ 后 处 死 ， 颅 取 脑 ， 冰 盒 上 分 离 捏 周 开 在
抑郁模型大鼠海马内环境的研究
抑郁模型大鼠海马内环境的研究摘要抑郁症是一种常见的心理障碍，其发病机制至今尚未完全阐明。
本文以大鼠海马内环境为研究对象，探究抑郁模型对海马内环境的影响。
实验结果表明，抑郁模型大鼠海马内环境中神经递质的含量明显降低，且神经元数量减少、运动反应受损等表现均加重。
简介抑郁症是一种常见的心理障碍。
目前已知，斯特里彭受体、5-羟色胺、去甲肾上腺素等相关物质与发生抑郁症密切相关。
然而，这些机制都在细胞和分子水平上。
因此，本文旨在探究抑郁模型对大鼠海马内环境的影响，从而进一步了解抑郁症的发病机制。
材料和方法实验动物：实验使用SD大鼠24只，雄性和雌性各半，体重均值300克。
实验设计：在生成抑郁模型的大鼠中，分别将其放入含毒性物质氯碘（CUMS）水中30分钟（2mA/L），两次间隔1小时。
连续进行10天。
实验组和对照组动物数量均为12只。
海马内环境分析：实验结束后，采用高压液相色谱法和免疫荧光法分析大鼠海马内环境中神经递质含量和神经元数量。
结果显微镜下观察在显微镜下观察实验组和对照组大鼠海马内环境。
发现实验组大鼠海马神经元数量减少，直径和长度均小于对照组大鼠。
此外，实验组大鼠出现明显运动反应受损，缺乏摆尾现象。
神经递质分析实验组与对照组大鼠海马分别采用高压液相色谱法、免疫荧光法进行分析。
实验结果表明，实验组大鼠海马中的多巴胺、5-羟色胺、去甲肾上腺素等神经递质含量均明显低于对照组大鼠（各项数据p<0.01）。
此外，实验组大鼠海马中的谷氨酸等神经递质含量也有所下降。
讨论本研究得出的结果显示，抑郁模型大鼠海马内环境中神经递质含量明显降低，神经元数量减少、运动反应受损等表现均加重。
这说明抑郁症可能与海马内环境的削弱有关，同时也支持了抑郁症和神经环路的不平衡之间存在的联系。
由于本实验中所用大鼠的性别、体重和年龄等因素对实验结果可能会有干扰，因此，后续还需要进一步探究各因素之间的联系，以获得更加准确的数据。
结论本实验结果表明，抑郁模型大鼠海马内环境中的神经递质含量和神经元数量均处于下降状态，这为抑郁症发生机制的研究提供了新的线索和方向。
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抑郁模型大鼠海马内环境的研究
发表时间：2011-07-13T16:28:59.267Z 来源：《中外健康文摘》2011年第16期供稿作者：郑晓霓1 单德红2 [导读] 海马神经元所处的细胞外液属于机体内环境，其成分和理化特性相对稳定是神经元发挥功能的前提。
郑晓霓1 单德红2
（1辽宁省沈阳市沈和区第二中医院110015；2辽宁省沈阳市中医药大学基础医学院110032）【中图分类号】R74【文献标识码】A【文章编号】1672-5085 (2011)16-0144-02 【摘要】目的研究海马内环境稳态在抑郁症中的作用。
方法20只雌性Wistar大鼠分为对照组、模型组。
ELISA法检测血清皮质醇、雌二醇，光镜和电镜观察海马CA3区形态学变化，免疫组化法检测海马脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达。
结果与对照组比较，模型组皮质醇水平显著升高，雌二醇水平明显下降，海马CA3区神经元损伤严重，脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达明显降低。
结论抑郁状态下，海马内环境稳态被破坏。
【关键词】抑郁症海马内环境稳态脑源性神经生长因子血管内皮生长因子【Abstract】 Objective: To study the action of hippocampal internal enviroment in deprssion. Methods: 20 femal wistar rats were divided into the control, model group. Serum cortisol and estradiol were measured with ELISA. Hippocampal CA3 morphology were observed by light and electron miroscope. BDNF and VEGF expressions were detected by immunohistochemistry. Results: compared with those in the control, in the model group, the serum cortisol level increased obviously, serum estradiol level decreased significantly, and the CA3 neurons had severious structure damage, and the expressions of BDNF and VEGF decreased markedly. Conclusion: The homeostasis of hippocampal internal enviroment is disrupted in depression. 【Key words】 depression hippocampal internal enviroment homeostasis brain-derived neurotrophtic factor vascular endothelial growth factor
海马内环境指海马神经元的细胞外液，其理化性质和各种成分应保持相对稳定的状态，即稳态。
海马内环境的理化特性包括温度、渗透压、酸碱度等，成分有各种离子、激素、递质、细胞因子等。
海马内环境稳太破坏均会损伤海马功能和结构，进而影响行为、情绪和内脏功能。
现代医学认为海马损伤在抑郁症发病中起重要作用[1-2]，但抑郁状态下，海马内环境出现何种变化目前尚没有系统研究，这就是本课题的研究目标，而本文主要对海马内环境中相关成分进行初步观察。
1 材料和方法
1.1实验动物的选取和分组健康Wistar雌性大鼠，清洁级，体重226±20g,中国医科大学动物实验中心提供，合格证号：医大动物合格证SCXK(辽)2008-0005。
适应性饲养1周后，选择行为学得分相近的20只大鼠，随机分为对照组、抑郁症模型组（模型组），每组10只。
室温20℃～25℃，湿度40%～50%。
1.2抑郁症模型的建立模型组大鼠建立慢性不可预见性应激模型，即在21d内随机施加电击足底（36V交流电，5min）、冰水游泳（4℃,5min）、摇晃（1min）、夹尾（1min）、禁水（24h）、禁食(24h)等刺激，每种刺激4次。
1.3血清雌二醇和皮质醇检测在实验的d22，2组大鼠均腹腔注射20%氨基甲酸乙酯（0.4mL/100g）麻醉后，腹主动脉取血，离心后取血清，低温冻存。
采用ELISA方法检测皮质醇和雌二醇(Estradiol，E2)，此项工作由沈阳军区总医院内分泌实验室完成。
1.4海马组织学观察首先是HE染色：取完成1.3后2只大鼠，立即断头取双侧海马，置于10%甲醛中固定，石蜡切片，HE染色，观察海马CA3区神经元的形态学变化。
其次电镜观察：取完成1.3后的2只大鼠，升主动脉插管，150ml生理盐水快速冲去血液，快速灌入4℃
2.5%戊二醛固定液，取双侧海马，修块，再于戊二醛中固定2h，PBS反复清洗后，再经1%锇酸固定2h，双蒸水冲洗，梯度乙醇脱水，临界点干燥，离子溅射真空渡膜，扫描电镜下观察超微结构。
1.5脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达取完成1.3的6只大鼠开胸，升主动脉插管，生理盐水快速冲去血液，取双侧海马，4%多聚甲醛固定4～6h，30%蔗糖溶液沉底。
做海马石蜡冠状切片，片厚25μm，隔4片取1片，采用免疫组化SABC法检测脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophtic factor，BDNF)和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor ,VEGF)表达，相关抗体和试剂盒均购于武汉博±德试剂公司，阴性对照选用PBS。
利用BI-2000医学图像分析系统，测定海马CA3区BDNF和VEGF表达的平均灰度值。
1.6数据处理数据以x-±s表示，采用SPSS13.0中ANOVA检验进行统计学处理。
2 实验结果
实验过程中没有实验动物死亡及脱失现象。
2.1海马形态学变化
光镜下，对照组CA3区有大量致密锥体细胞，排列整齐，细胞完整，边缘清晰；模型组细胞层次减少、稀疏、排列紊乱，大量细胞坏死。
电镜下，对照组细胞器丰富，轮廓清晰，细胞核呈圆形，核膜清晰光滑完整，核染色质分布均匀；模型组细胞器减少，线粒体空泡化，细胞核变小，不规则，且核膜增厚，核周电子密度降低。
2.2海马内环境相关成分变化
与对照组比较，模型组皮质醇显著升高，E2明显下降。
BDNF和VEGF免疫阳性反应产物呈棕黄色，前者分布神经元胞浆内，后者主要分布于血管内皮细胞内。
对照组BDNF和VEGF表达较多，模型组较少，二者灰度值均升高。
具体数据见表1。
表1 各组海马内环境相关成分的变化
注：与对照组比较：a P<0.05, b P<0.01
3 讨论
海马作为边缘系统的重要结构，具有形成学习记忆和协调行为、情绪和内脏活动等的重要功能。
近年来，海马在抑郁症的作用备受关注。
影像学研究观察到抑郁症患者的海马结构出现萎缩，且与病程有关［3］。
众多动物实验也证实，海马损伤是抑郁模型动物的共同表现，这在本实验中也得到了验证，如海马CA3区出现细胞层次减少、细胞损伤、细胞器破坏等。
海马神经元所处的细胞外液属于机体内环境，其成分和理化特性相对稳定是神经元发挥功能的前提。
在海马内环境成分中，有些能够保护神经元，有些则起破坏作用。
生理水平的皮质醇不会损伤海马，但高浓度皮质醇则有明显损伤作用。
雌激素与皮质醇相反，具有神经元保护作用。
本实验没有通过微透析技术检测脑灌流液中的皮质醇和E2水平，其原因是二者均为类固醇激素，能够自由通过血脑屏障，血清水平与脑内浓度基本一致。
实验观察到，模型组血清中皮质醇水平显著升高、E2则明显下降，这些变化表明抑郁状态下，皮质醇过度分泌，E2则分泌减少，提示在激素方面海马神经元失去了保护。
BDNF和VEGF均为保护海马的细胞因子，对神经元具有营养和支持作用。
本实验采用免疫组化技术检测到，模型组二者表达均下降，提示抑郁状态下，海马神经元失去了营养性细胞因子的营养和支持作用。
上述实验结果提示，抑郁状态下，海马神经元的保护成分减少，破坏因素增加，即海马内环境稳态被破坏，从而导致海马损伤，因此恢复海马内环境稳态是防治抑郁症的重要环节。
参考文献
[1]Anja Urbach, Christoph Redecker, and Otto W. Witte. Induction of Neurogenesis in the Adult Dentate Gyrus by Cortical Spreading Depression [J]. Stroke,2008,39:3064-3072.
[2] Tarique D. Perera, Sungshic Park, Yelena Nemirovskaya. Cognitive Role of Neurogenesis in Depression and Antidepressant Treatment[J]. Neuroscientist,2008,14(8):326-338.
[3]汤艳清,谢光荣.抑郁症的脑结构影像学改变及其机制的研究进展[J].中国临床心理学杂志,2005,13（3）:366-369.。