仙人掌多糖提取过程中三种脱蛋白方法的比较研究
水溶解后稀释至刻度制成贮备液。 分别吸取贮 备液 ０２０３０ ０５ ０６０８ ｌ加 水稀 释 至 ｌ ， ．，．，． ．，．，．ｍ ， ４， ｍｌ向各 管
中加 入５ ｌ 马 斯 亮 兰 Ｇ ２０ 液 ，混 合 均 匀 后 ， ｍ考 一５溶 ３ ℃水 浴加 热５ ｉ， Ｏ ｍｎ 以蒸馏 水 为空 白 ， ５５ｍ波长 在 ９ｎ 处 测 定 吸 光 度 ，得 吸 光 度 一 白含 量 方 程 为 ： 蛋 Ｙ＝
１ ． 糖标 准 曲线 的 制备 ．１ ２
其复合物具有重要的生物活性 ， 已发现多种中药 中 含 有 的多 糖具 有 如抗 肿 瘤 、 免疫 调节 、 降血 糖 、 病 抗
毒 、 血 脂 、 凝 血等 生 物活 性 ， 降 抗 这类 多糖 没有 细 胞 毒性 ， 已经成为 当今新 药的发展方 向之一 。 仙人 掌具 有行气 活血 、 热解 毒功 能 ， 清 在我 国作 为药 用 已有 悠 久历史 。 仙人 掌粗 多糖系从仙人 掌 （ ｐｎｉ ｉｅ ｉ Ｏ ｕｔ ｄｌｎｉ ａ ｌ Ｈ ｗ）的新鲜 植物茎 中提取 的多糖用水 提取 的多糖 ， ａ
振 荡 器 ， 恒 温 水 浴 锅 ，２ ７ １分 光 光 度 计 ，
取 １０ 仙 人 掌 干 粉 于７ ℃用 水 提 取 ３ 过 滤 ， ０ｇ ５ 次 合 并 滤 液 ， 滤 液 中 加 入９ ％乙 醇 ， 置 过 夜 得 沉 在 ５ 静
７５０ １ 冷冻 １ Ｌ
称 取 干 燥 至 恒 重 的无 水 葡 萄 糖 ２０ ｇ 置 ０ｍ ，
１０ｍｌ 量 瓶 中 ， 水 溶解 后 稀释 至刻 度制 成贮 备 ００ 容 加 液 ，分 别 吸 取 贮 备 液 ０ ０４ ０８ １ ，， １ １ ， ． ．，．，， １ ． ． ２， ０ ２，４， ６
１ ，． ｌ加水稀 释至４ ｌ向各管 中加 入５ ． ２ ｍ， ８ ０ ｍ， ％苯酚
试 剂２ ｌ混 匀 。 管 壁加入 浓硫 酸 １ｍ ， 置５ ｉ， ｍ， 沿 ０ ｌ静 ｍｎ 振摇 ， 置沸 水 浴 中加 热 １ｍｎ 立 即 转入 冷 水浴 中冷 ５ ｉ， 却 至室 温 。 以蒸馏 水为 空 白 ， ９ｎ 在４ ０ｍ波长处 测定 吸
Ｙ＝ 常含有一定量的蛋 白质 ， 因此 ， 如何尽量多的去除蛋 光 度 ，以糖 浓度 和 吸光 度为 坐标 ，回归方 程 为 ： 白质 而保 留多 糖 的有 效 成 分 成 为 了 一个 突 出 的 问 ００ ６ ００ ２ 相 关 系数 ： ０９５ ． ＋ ． Ｘ， ０ ７ ｒ ． 。 ＝ ９
题， 用传统 的Ｓｖｇ法和三氯 乙酸法 除蛋 白 ， ｅａ 复杂 、 费
时 ， 常需 要重 复 数 十次 ， 品损 失很 大 ， 存 在废 通 样 并
１２２ 蛋 白质标 准 曲线 的制备 ．． 称 取牛 血 清 白蛋 白２ｍ ，置 １ｍｌ 量瓶 中 ， ５ｇ ０ 容 加
液处理 等 问题 ，本 文 以脱蛋 白率 和多糖 损失 率为指 标 。 用酶法 除蛋 白纯化 仙人掌多糖 。 尝试
率分别为８ ． ５ ． ９６ ６２ ％、 ％和４ ． 多糖损失率分别为７２ ９５ ５ ％， ５ ． ％、． ％和１．％。经 比较认为 ： ３ ６ 酶提取法是替代常规方 法的一
种有效方法。 关键 词 仙 人 掌 多糖 脱 蛋 白 酶
随 着分 子生 物 学 的发 展 ， 们逐 渐 认识 到糖 及 人
山 东食 品发 酵
１ ． 浓缩 液 中总糖 、 ．４ ２ 多糖 和 蛋 白质含 量 的测定
２ 结果与 讨论
１ ．． 总糖 及 多糖含 量 的测 定 ； 硫酸一 酚法 ．４１ ２ 用 苯 测 得浓 缩 液 中 总糖 含 量 为３４０ ／ ｌ多 糖含 ．０ｍｇｍ ， 量 为 ３１１ ／ ｌ ． ｍｇｍ ，多 糖 占总 糖 百 分 率 为 ７ ．％。 ０ ９５
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山 东食 品 发 酵
２０・（ 第１１ ０６ 总 ４期） ２
仙人掌多糖提取过程中 三种脱蛋 白方法的比较研究
史德 芳 杨 洋 任 红 孙 晓 雪 韩淑 琴
（． １ 广西大学轻工与食 品工程学院 广西 ５００） ３０４
（ 广西大学生命科学学院 ２ ．
摘
广西
５０ ０ ） ３０ ４
要 用水提取 的仙人 掌多糖常舍有蛋 白质 ， 实验 以多糖损 失率和 脱蛋 白率为衡 量指标 。 选用 了３ 方法 ：Ｓｖｇ 种 ｅａ
法 、 氯 乙酸 法和 酶 法 对仙 人 掌 多糖 提 取 物 进 行 脱蛋 白 处理 。 实验 结 果 表 明 ： 法 、 氯 乙酸 法 和ｓｖｇ 法 的脱 蛋 白 三 酶 三 ｅａ
０１７ ２３ ４ 相关 系数 ： ０９ ６ ．２ ＋ ． Ｘ， ５ ｒ ．７ 。 ＝ １ ＿ 多糖 提 取工 艺 ．３ ２
１ 实验材料 、 ． １ 试剂与仪器 仙 人掌 （ 广西 农业 高新 技术 展 示 园 ） ；
胰 蛋 白酶 ， 清 蛋 白 ， 马斯 亮 蓝 Ｇ ２０ 葡 萄 血 考 一５ ， 糖 ， ）， 浓Ｈ ４苯酚 ， 水 乙醇均 为分 析纯 。 无
脱蛋 白液 中总糖 、 多糖 和蛋 白质 含量 的测定 分别 测定 脱 蛋 白液 的总 糖 、 多糖 和蛋 白质含 量
（ ／ ）方 法 同上 ， 果如 表 １ ｍｇｍ１， 结 。
裹 ｌ 捷 取 液 脱 蛋 白结 果
１ 实验方法 ． ２
一
淀， 将沉淀加适量的水使之溶解 ， 减压浓缩后 ， 为仙 人 掌 多糖浓 缩 液 。
４ ２一 Ｓｈ １ ｏ ｇ 《 ） ｌ １ ｅ ｔｌ ｎ ａ ｌ ｎ ＦＪ Ｉ ’ １ｌ ｎａ ｉ ｄ 《ｊ ’ ７ ｆＩ ｏ
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２０ ・（ ０ ６ ２ 总第 １ １ ） ４ 期
多糖脱蛋白质方法的比较
少， 沉淀正如此 相反 。分析原 因 ， 海蜇 中蛋白质的等 电
点在碱性 范围内。在溶 液中逐渐滴加 Ｉ ｌ ｍｏ Ｌ的 Ｎ Ｏ ／ ａ Ｈ， 待无 沉淀生 成后 ， 加入 Ｈｃ调 整 ｐ 根据 文献 ， 海蜇 ｌ Ｈ， 在 多糖 的提取 中， 加入 Ｔ Ａ未见沉淀 ， Ｃ 但在用 Ｎ Ｏ ａ Ｈ调整 ， ｐ Ｈ值时 发现在碱性 范围 内溶 液产 生浑浊 ， 再用盐 酸调 至中性 ， 液又变澄清 ， 滤ｐ 溶 过 Ｈ至 １ 时出现沉淀 ， ２ 试验
大 ， 法 通 过 滤 纸孔 ， 常 采 取 离心 ） 无 通 。
１ ． １糖标 准曲线 的制备 （ 张惟杰 ，９ ４ １９ ）
称 取干燥 至 恒重 的无 水葡 萄糖 ２ ０ ， １０ ｍ ０ ｍｇ 置 ０ ０ ｌ
容量瓶 中 ， 加水溶解后 稀释至刻度制成贮备液 ， 分别吸
取 贮 备 液 ０２０４ ０８ １ ，．，．，．，．，． ｌ 水 稀 ．，．，．，． １ １ １ １ ２ ｍ 加 ０ ２ ４ ６ ８ ０
同时观 察溶液 中是否有沉 淀生成 ； 若有 ， 过滤沉淀 。 则
０
实际过程 ： 采用 了４ ｍ ％的鞣酸 （ ０ ｌ３ 浅黄色 ） 样品 由原 ， 来 的深褐色变为较深 的棕 红色 ， 器底部有沉淀生 成 ， 容 较少 。
蛋 白含 量 ， 现滤 液 中糖 含量 极高 ， 发 而且 蛋 白含 量极
尤其 是增强 免疫力 的功能被 广泛认 同 ， 并被广泛应 用
２ 材料 与方 法
２１材 料 与试 剂 ．
经 过粗 提纯 的樟芝 多糖粉末 、 氯仿 、 正丁醇 、 Ｃ ＴＡ
（％ ）Ｎ Ｏ （ ｍ ｌ ）盐 酸 、 酸 、 ３ 、ａ Ｈ １ ｏ Ｌ 、 ／ 硫 苯酚 、 醇 （５ 、 乙 ９ ％）食 油 醚 、 氧 水 （０ 双 １％）
裙带菜多糖3种脱蛋白质方法的比较研究
ＧＥ ｎ — ａ ， Ａ ＮＧ Ｂｉｇ ｙ ｎ Ｙ Ｂｏ
（ｎ ｉｅｒ ｇ ｅｅｒｈＣ ｎ ｒ ｎ ａｕａ Ａ ｔａ ｃｒ ｕｓ ｆ ｎｓｙｏ Ｅ ｕａｉ ， ｅｅ ｒｈＣ ｎｅ ｉ Ｅ ｇｎｅｉ Ｒ ｓａｃ ｅ ｔ ｔｒｌ ｎｉ ｎ ｅ Ｄｒｇ Ｍｉ ｔ ｄ ｃ ｔ ｎ Ｒ ｓａｃ ｅｔ ｏ Ｌ ｅ ｎ ｅｏ Ｎ ｃ ｏ ｉｒ ｆ ｏ＂ ｒｎ ｆ Ｓ ｉ ｃｓ ｎ Ｅ ｖ ｏ ｍ ｎ ｌ ｃ ｎ ｅ Ｈａｂ ｎｖｒｉ ｆＣ ｍ ｒｅ Ｐ ｓ ｏｔｒｌ ｅｅ ｒｈ ｆ ｎ ｔｕ ｏ Ｍａｅｉ ｃｅ ｅ ａ ｄ ｎ ｉ ｎ ｅ ｔ Ｓ ｉ ｃｓ ｒｉ Ｕ ｉ ｓｙｏ ｏ ｍｅｃ， ｏｔ ｃ ａＲ ｓａｃ ｏ Ｉｓ ｔｔ ｆ ｔ ａ ｎ ｒ ａ ｅ ， ｎ ｅ ｔ ＂ ｄ ｏ ｉｅ ｒ
摘 要 ：目的 筛选裙带菜多糖 脱除蛋 白质 的最佳方法 。方法 采用Ｓ ｖｇ ｅａ 法、三氯乙酸法和 酶法对裙带菜多糖进行脱蛋 白
质 处理 ，比较不 同方法处理后多糖 的脱蛋 白质率及 多糖 损失率 ，确定 最佳的除蛋 白质 方法 。结果 酶法的 多糖损 失率最 低 ，为 １． ０２ ２％，脱蛋 白质率最高，为６ ． １ ０％；三氯 乙酸法多糖损失率１ ． １ ２１ ３％，脱 蛋 白质率５ ．７％；Ｓ ｖｇ ７３ ｅ ａ法多糖损失率 １．１ ４２ ％，脱蛋 白质 率５ ． ４１ ２％。结论 酶法是裙带菜多糖脱蛋 白质 的最佳方法 。 关键词 ：裙带菜多糖 ；脱蛋白质 ；酶法 中图分类号：Ｑ９ ６３ ４． 文献标识码：Ａ 文章编号 ：１ ７ ．７ Ｘ （ ０ ０ ３０ ９ ．３ ６ ２９ ９ ２ １ ）０ ．０ ６０
几种玉米秸秆发酵产物多糖脱蛋白方法的比较
几种玉米秸秆发酵产物多糖脱蛋白方法的比较冯炘;石灵燕;肖欢欢;解玉红【摘要】对玉米秸秆发酵中间产物多糖进行脱蛋白处理,以达到纯化秸秆发酵多糖产物的目的.实验选用脱蛋白的方法有三种,分别是Sevage法、HCl法、TCA法;实验结果的衡量指标分别为蛋白质去除率和多糖损失率.Sevage法蛋白质去除率在重复第6次时,蛋白质去除率为80.11％,多糖的损失率为17.9％;HCl法在pH=3时,蛋白质去除率为89.67％,多糖的损失率为34.43％;pH=6时,TCA法蛋白质去除率最大值为29.68％,多糖的损失率为14.45％.为了达到蛋白去除率高,多糖损失率低的目的,选用Sevage法对秸秆发酵产物多糖进行纯化.【期刊名称】《天津理工大学学报》【年(卷),期】2015(031)004【总页数】4页(P57-60)【关键词】秸秆发酵;多糖纯化;蛋白去除率;多糖损失率【作者】冯炘;石灵燕;肖欢欢;解玉红【作者单位】天津理工大学环境科学与安全工程学院,天津300384;天津理工大学环境科学与安全工程学院,天津300384;天津理工大学环境科学与安全工程学院,天津300384;天津理工大学环境科学与安全工程学院,天津300384【正文语种】中文【中图分类】X712我国是粮食生产大国，小麦、玉米、水稻等农作物的栽种遍及全国，粮食产量增加，同时也产生了大量的农作物秸秆固体废弃物，早前废弃物秸秆的处理方法比较单一，主要方法通常是焚烧，产生的热能部分用于生活所需，灰分用来还田以增加土壤的肥力.随着科技的发展，秸秆资源化技术呈现多元化发展，如秸秆粉碎还田、制有机肥料、秸秆发酵气化及压块燃料等[1-3]，但是人们对秸秆发酵中间产物多糖的研究却极少，由于多糖具有重要的实用价值，在医疗保健、畜牧业、污水处理、农业等方面都有重要作用[4-7]，因此对中间产物多糖的研究是很有必要的.本实验组研究微生物降解玉米秸秆产生的中间产物多糖，要想对多糖进行深入的了解，首先必须要去除中间产物多糖的“伴生物”蛋白质.蛋白质的去除方法[8-9]在国内外研究中都已经相当成熟.主要包括HCl法、NaOH 法、TCA法、Sevage法、酶法以及几种方法的结合，其中以Sevage法较为温和，对多糖的影响较小[8].但是这些方法在不同的多糖脱蛋白过程中效果各异，为了寻找一种适合于玉米秸秆发酵产物多糖的脱蛋白方法，本实验对几种方法进行了对比研究，以找出最佳的玉米秸秆发酵产物多糖脱蛋白方法.1.1 实验材料1.1.1 玉米秸秆1）秸秆的粉碎.选取天津市西青区玉米秸秆，用铡刀将玉米秸秆截成5 cm左右，放在烘箱内，60℃下烘干，将烘干的玉米秸杆放入碾磨机中研磨，过60目筛，得到粗处理的秸秆粉末.2）秸秆的预处理.将粗处理的秸秆粉末按1∶30的质量比加入蒸馏水中，首先在超声仪中超声0.5 h，再在80℃下水浴2 h，负压抽滤，取滤渣于60℃烘箱中烘干备用.1.1.2 菌种选用本实验室分离提取的7号菌群，其包括9号、72号、93号三株菌，实验中三株菌的含量按体积比1∶1∶1的比例接入发酵培养基中.1.1.3 培养基活化培养基：玉米秸秆粉末15.0 g，酵母膏1.0 g，NH4NO31.0 g，Fe2SO4·7H2O 0.5 g，KH2PO41.0 g，MgSO40.5 g，蒸馏水1 000 mL，pH7.2～7.4.发酵培养基：玉米秸秆粉末50.0 g，NaNO32.5 g，NaCl 0.1 g，CaCO32.0 g，K2HPO41.0 g，MgSO4·7H2O 0.3 g，FeCl30.01 g，CaCl20.1 g，蒸馏水 1000 mL，pH7.2～7.4.1.1.4 实验试剂葡萄糖，牛血清蛋白，DNS试剂，考马斯亮蓝G-250，95%酒精，85%H3PO4，0.15 mol/L NaCl，无水乙醇，6 mol/L浓盐酸，10 mol/LNaOH，10%酚酞试剂.1.1.5 实验仪器铡刀，碾磨机，XMTD-204数显式电热恒温水浴锅，AS10200BT超声波清洗机，电热鼓风干燥箱，DELTA 320 pH计，EL-104电子天平，WE-1水浴恒温振荡器，洁净工作台，Biotech-5B发酵罐，立式压力蒸汽灭菌器，RE-52C旋转蒸发器，Anke TGL-16G离心机，91-8-B型电子调温电热套，T6新世纪紫外-可见分光光度计.1.2 实验方法1.2.1 标准曲线的制备1）蛋白质标准曲线的制备.取0.100 0 g牛血清蛋白溶于0.15 mol/L NaCl溶液中，定容至1 L，得到蛋白质标准溶液.分别取蛋白质标准溶液0.0 mL，0.2 mL，0.4 mL，0.6 mL，0.8 mL，1.0 mL于10 mL的比色管中，按以上顺序依次加入0.15 mol/L NaCl溶液1.0 mL，0.8 mL，0.6 mL，0.4 mL，0.2 mL，0.0 mL，上述比色管中各加入5.0mL考马斯亮蓝试剂，摇匀，静止3min，以0.15 mol/L NaCl溶液为空白对照，在波长595 nm处测定吸光度.2）葡萄糖标准曲线的制备.将葡萄糖置于105℃烘箱2 h，烘干后取出置于干燥器中降温，取1.000 0 g该葡萄糖，用蒸馏水溶解，定容至1L，制备出葡萄糖标准溶液.分别取葡萄糖标准溶液0.0 mL，0.2 mL，0.4 mL，0.6 mL，0.8 mL于10 mL的比色管中，加蒸馏水稀释至2.0 mL，向各管中加入1.0 mL的DNS试剂，混合均匀后，于沸水浴中加热5 min，以蒸馏水为空白对照，在波长510 nm处测定吸光度.1.2.2 多糖制备、提取及浓缩配制发酵培养基3L于发酵罐中，121℃灭菌25 min，调节温度至30℃，向该发酵培养基中接入活化种子液.设定在120 r/min、30℃、pH7.2～7.4条件下发酵48 h，取样，将样品在6 000 r/min下离心10 min，取部分上清液于250 mL的磨口锥形瓶中，进行旋转蒸发，得到多糖浓缩液.1.2.3 浓缩液脱色取一定体积的多糖浓缩液，调节pH=7，加入浓缩液体积1/10的10%H2O2，55℃下水浴搅拌、加热30 min.1.2.4 脱蛋白的方法1）Sevage法.取一定体积脱色的多糖浓缩液，加入该浓缩液体积1/5的氯仿，再加入氯仿体积1/5的正丁醇，室温下于摇床中120 r/min振摇30 min，使其充分接触，取出锥形瓶，静止10 min，离心去除沉淀，取上清液备用.同样的方法重复次数分别设定为1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次，分别取上清液以备用.2）HCl法.向脱色的多糖浓缩液中加入1 mol/L的HCl，调节浓缩液的pH依次为2、3、4、5、6、7、8，120 r/min振摇30 min后取出，放于4℃冰箱，12 h后取出离心，取上清液备用.3）TCA法.向脱色的多糖浓缩液中加入10%三氯乙酸，调节浓缩液的pH依次为2、3、4、5、6、7、8，剧烈振摇30 min，放于4℃冰箱，12 h后取出离心，取上清液备用.1.2.5 总糖待测液的制备取脱色处理的多糖浓缩液1 mL，加入6 mol/LHCl溶液2 mL，沸水浴30 min，流水冷却，向浓缩液中滴加1滴10%酚酞试剂，摇匀后，滴加10 mol/LNaOH，直至溶液变为粉红色，得到总糖制备液.1.3 测定方法1.3.1 考马斯亮蓝法测蛋白质去除率Q为蛋白质去除率；P为粗提取液中蛋白质的百分含量；Pi为第i次脱蛋白处理后提取液蛋白质的百分含量；Ci为第i次脱蛋白处理后提取液中蛋白质的浓度（μg/mL）；Vi为第i次脱蛋白处理后蛋白质提取液体积（mL）；Mi为第i次脱蛋白处理后所取提取液的质量（g）.1.3.2 DNS法[10]测多糖损失率L为多糖损失率；S为粗提取液中多糖含量/总糖含量（S=D/T）；Si为第i次脱蛋白处理后提取液中多糖含量/总糖含量.T为提取液中总糖含量（mg/mL）；D为提取液中多糖含量（mg/mL）；G为提取液中单糖含量（mg/mL）；0.9 为实验的校正系数.2.1 蛋白质测定的标准曲线蛋白质标准曲线拟合方程为y=0.00757x+0.03433，R2=0.996 84，如图1所示，在0～100 μg/mL范围内，蛋白质标准样品呈现很好的线性关系.2.2 葡萄糖测定的标准曲线葡萄糖标准曲线拟合方程为y=0.00162x-0.0178， R2=0.999 6，如图2所示，在0～800 μg/mL范围内，葡萄糖标准样品呈现很好的线性关系.2.3 Sevage法测定蛋白质去除率与多糖损失率结果Sevage法纯化多糖结果如图3所示，蛋白质的去除率随着脱蛋白次数的增加而增加，在第6次重复操作后Sevage法蛋白质去除率为80.11%，多糖的损失率为17.9%，蛋白质去除率在重复第7次时达到最大值80.14%，此时多糖的损失率也达到最大值26.80%.2.4 HCl法测定蛋白质去除率与多糖损失率结果HCl法纯化多糖结果如图4所示，随着pH增加蛋白质的去除率逐渐降低，多糖的损失率呈现逐渐降低的趋势，但是在pH=3时，多糖的损失率出现一个较大的波动，比pH=2时的损失率低35.44%，比pH=4时的损失率低18.57%.pH=2时HCl法蛋白质去除率最大，可达到91.90%，同时多糖的损失率也达到最大值69.87%，pH=3时蛋白质去除率为89.67%，多糖的损失率为34.43%.2.5 TCA法测定蛋白质去除率与多糖损失率的结果TCA法纯化多糖效果如图5所示，pH在2到5之间，多糖的损失率远大于蛋白质的去除率，且pH=2时多糖的损失率达到最大值，为96.65%，显然不符合本次实验目的，只有在pH=6时TCA法蛋白质去除率最大值，但仅为29.68%，多糖的损失率为14.45%.2.6 几种脱蛋白方法效果比较为了达到蛋白去除率高，多糖损失率低的目的，综合Sevage法、HCL法、TCA法的测定结果，选用Sevage法重复6次，HCl法调节pH=3，TCA法调节pH=6，作图6进行对比分析.由图6对比分析可知：Sevage法、HCl法、TCA法三种方法中蛋白质去除效率由高到低依次是HCl法＞Sevage法＞TCA法，多糖损失率变化由小到大依次是TCA法＜Sevage法＜HCl法，显然HCl法蛋白质去除率最高，但是多糖损失率最大，而TCA法蛋白质去除率最低，只有Sevage法测定的蛋白质去除率仅比HCl法低9.56%，并且多糖损失率比HCl法多糖损失率降低了50%.本研究采用Sevage法、HCL法、TCA法对玉米秸秆发酵产物多糖脱蛋白效果进行对比，结果表明：TCA法多糖损失率大，蛋白质去除率不高，显然与本试验的目的不符，HCl法蛋白质的去除率比较高，但是相应的多糖损失率在三种方法中是最大的，同样不符合试验目的，而Sevage法多糖损失率相对较低，蛋白质的去除率略低于HCl法蛋白质的去除率，因此，Sevage法更适合用于秸秆发酵产物多糖纯化.【相关文献】［1］王艳棉，王博儒，张全国，等.秸秆资源化利用途径及建议［J］.河南农业科学，2009（7）：23-26.［2］王革华.实现秸秆资源化利用的主要途径［J］.上海环境科学，2002，21（11）：651-661. ［3］Zhang X，Tu M B，Paice M G，et 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植物多糖提取液的几种脱蛋白方法的比较分析
2004年8月第27卷第8期重庆大学学报Journal of Chongqing UniversityAug.2004V ol.27 N o.8 文章编号:1000-582X(2004)08-0057-03植物多糖提取液的几种脱蛋白方法的比较分析Ξ李知敏,王伯初,周 菁,彭 亮(重庆大学生物工程学院生物力学与组织工程教育部重点实验室,重庆 400030)摘 要:多糖对肿瘤、病毒、心血管等方面具有独特的生物活性,且细胞毒性很低,因此多糖的分离及纯化一直是一个很有意义的研究课题。
实验以多糖损失率和脱蛋白率(r)为衡量指标,通过对几种脱蛋白方法的比较,优化出植物多糖提取液的脱蛋白方法,为多糖的纯化提供了一定的参考。
选用了3种较为常见的方法:三氯乙酸法、盐酸法及沙维积法(Sevag法)对植物多糖提取液进行脱蛋白处理。
三氯乙酸法、盐酸法及Sevag法的脱蛋白率分别为46.1%、72.5%和42.3%,多糖损失率分别为6.1%、15.1%和14.3%。
盐酸法脱蛋白率高,但它的多糖损失率较高;三氯乙酸法较温和,但除蛋白效率不高;Sevag法的脱蛋白效果不及前两种方法。
关键词:多糖;提取液;脱蛋白;比较 中图分类号:Q-331文献标识码:A 糖类又称为碳水化合物,是植物光合作用的初生产物,是一类最丰富的天然产物,除了作为植物的贮藏养料和骨架之外,还通过它们进行合成了植物中的绝大部分成分[1]。
多糖在植物体内广泛存在,并且含量较高[2]。
20世纪50年代末对真菌多糖的抗癌效果的发现使人们开始了多糖系列的化学研究。
日本从20世纪60年代开始研究担子菌多糖的药物活性,并开发了一些有名的药物;中国对多糖的研究始于20世纪70年代,且发展很快。
到目前为止,人们发现多糖对肿瘤、病毒、心血管、抗衰老等方面有独特的生物活性[3-15],并且已有300多种多糖类化合物从天然产物中被提取出来,其中从中药中获得的水溶性多糖最为重要[3]。
多糖成分分析综述
多糖成分分析摘要：对多糖的提取、分离纯化、含量分析以及组分结构分析的研究进展进行了综述，并对其应用前景进行了展望。
多糖的组分分析是多糖质量控制和提供多糖基本信息的重要环节。
关键词：多糖；提取；分离纯化；表征鉴定多糖(polysaccharides,PS)又称多聚糖，由10个以上的单糖分子通过苷键聚合而成，其分子量较大，一般由几百甚至几万个单糖分子组成，是除了蛋白质和核酸以外的一类重要的生物大分子。
虽然糖类的研究并不比蛋白质和核酸晚，但其研究层次与水平还远远落后于蛋白质和核酸。
多糖在自然界高等植物、动物、藻类及细菌类内均有存在，分布极广。
有些多糖无生物活性，如淀粉、树胶和粘液质等，通常被当做杂质除去。
而具有药效作用的多糖大多是活性多糖。
1969年，日本学者千原率先证实了香菇热水提出物的抗肿瘤活性，羽田、佐木进一步研究证实有效成分是香菇多糖。
自此，全世界掀起了从真菌中提取抗肿瘤活性成分的热潮[1]。
尤其近年来，随着生物学、化学等相关学科的飞速发展，多糖化合物也得到了日益深入的研究。
国际科学界视多糖的研究为生命科学的前沿领域，甚至提出21世纪是多糖的世纪。
鉴于多糖研究所具有的学术价值和广阔的应用前景，使得多糖研究成为人们关注的研究热点之一；又目前研究比较多的是植物多糖和微生物多糖，因此本文将就植物多糖和微生物多糖的成分分析研究进行概括、总结，并就存在的问题加以展望。
1 多糖的提取多糖的提取通常要根据多糖的存在形式及提取部位不同决定其提取方法。
一般从植物中提取多糖，先用石油醚、乙醚、丙酮等有机溶剂进行预处理，除去脂溶性杂质[1]。
然后根据不同的溶解度选择一种溶剂进行萃取，常用的为水、稀盐、稀酸、稀碱等溶剂。
传统的提取方法有水提醇沉法、稀碱浸提法、稀酸浸提法和酶法等，随着对多糖研究的不断深入，又出现超滤法、微波辅助浸提法以及超声波法等等。
1.1 溶剂提取法溶剂提取法是提取多糖的常用方法，利用多糖不溶于乙醇的性质在提取液中加入乙醇使多糖沉淀出来。
仙人掌果多糖抗肿瘤药效和机制的研究的开题报告
仙人掌果多糖抗肿瘤药效和机制的研究的开题报告一、研究背景及意义仙人掌果多糖是一种天然产物，具有多种生物活性，如抗氧化、降血糖、降血脂等作用。
近年来，研究发现仙人掌果多糖还具有抗肿瘤作用，并且其毒副作用较小，具有较高的应用价值。
因此，进一步明确仙人掌果多糖抗肿瘤药效和机制具有重要的科学意义和应用前景。
二、研究目的及内容本研究旨在探讨仙人掌果多糖的抗肿瘤药效和机制，具体研究内容如下：1. 初步评估仙人掌果多糖的抗肿瘤作用，包括对不同类型的肿瘤细胞的抑制作用、体内抑制肿瘤生长的效果等。
2. 探讨仙人掌果多糖的抗肿瘤机制，包括对肿瘤细胞生长周期的影响、对肿瘤细胞凋亡的诱导作用、对肿瘤细胞的免疫调节作用等。
3. 评估仙人掌果多糖的毒副作用及其安全性。
三、研究方法及技术路线本研究将采用体外细胞实验和体内动物实验相结合的方法，具体技术路线如下：1. 体外实验：使用MTT法、流式细胞术等方法评估仙人掌果多糖对人肿瘤细胞的作用，并探讨其对细胞周期和凋亡的影响。
2. 体内实验：建立裸鼠移植瘤模型，观察仙人掌果多糖对瘤体大小及体内肿瘤分子表达的影响，评估其体内抗肿瘤作用及毒副作用。
3. 分子生物学：运用Western blot、RT-PCR等技术，深入研究仙人掌果多糖对多种肿瘤相关蛋白的调节作用，探讨其抗肿瘤机制。
四、预期成果及意义本研究旨在明确仙人掌果多糖的抗肿瘤药效和机制，为其临床应用提供科学依据，预期成果及意义如下：1. 确定仙人掌果多糖具有抗肿瘤作用的证据，为其开发成为新型肿瘤治疗药物提供科学基础。
2. 探索仙人掌果多糖的抗肿瘤机制，丰富肿瘤治疗领域的理论基础。
3. 提高人们对天然药物的认识和重视，推进人们对天然药物的研究和利用，为构建健康中国做出贡献。
仙人掌多糖提取过程中三种脱蛋白方法的比较研究
Ｃｏ ｐａ ｉｏ ｆｔ ｅ ｅ ｈｏ ｆＲｅ ｏ ｉ ｏ ｅｎ ｆ ｏ ｌ ｓ ｃ ｈａ ｉ ｍ ｒｓ ｎ ｏ ｈｒ ｅＭ ｔ ｄｓｏ ｍ ｖ ｎｇ Ｐｒ ｔ ｉ ｒ ｍ Ｐ０ ｙ ａ ｃ ｒｄｅ Ｅｘ ｒ ｃ ｈｅＣａ ｔ ｔ ａ ｔｉ ｔ ｃ ｕｓ ｎ
仙人掌多糖提取过程 中三种脱蛋 白方法 的 比较研 究
史德芳 ，杨 洋 ，孙晓 雪 ，任红 ，韩淑琴
（ ． 西大学轻工与食 品工程 学院，２广 西大学生命 科学学 院，广西 南宁 ５ ００ １广 ． ０４） ３
摘要：用水提取的仙人掌多糖常含有蛋 白质 ，实验 以多糖损失率和脱蛋 白率为衡量指标，选用 了３ 种方法： Ｓｖｇ 、三氯乙酸 ｅａ ＇ ￣ 法和酶法对仙人掌多糖提取物进行脱蛋白处理。 实验结果表明： 酶法、 三氯 乙酸法和Ｓｖｇ 法的脱蛋 白率分别为８ ． ５ ． ｅａ ９ ％、６ ％和４ ． ６ ２ ５ ％， ５ 多糖损 失率分别 为７ ％、９５ １． ． ２ ． ％和 ３ ％。经比较认 为：酶提取法是替代常规 方法的一种有 效方法。 ６
随着分 子生物学 的发展 ，人们逐 渐认 识到糖及 其
仙人 掌 ：广西农业 高新技术展 示园； 胰 蛋 白酶，血清蛋 白，考 马斯亮 蓝 Ｇ ２ ０ ．５ ，葡萄 糖 ，浓 Ｈ Ｓ ４ ２０，苯酚 ，无 水 乙醇均 为分析纯； 振荡器 ， 恒温水浴锅 ， ２ 分光光度计 ， ７ ３０ Ｇ ７１ ７ ５０ １ 冷冻干燥 机 ，Ｅ Ｓ ５ １ Ｌ电泳仪 。 Ｐ ３０ Ｘ １ 实验方法 ． ２
Ｓ ．ａ Ｙａ ｎｇ ， ｈｉ Ｄｅ ｆ ｎｇ ， ｎｇＹａ Ｓｕｎ Ｘｉ ｏ ｘ Ｒｅ ｏ Ｈａ ａ ． ｕｅ， ｎ Ｈ ｎｇ ， ｎ Ｓｈｕ ｑ ｎ ． ｉ
仙人掌多糖的提取及其对自由基的清除作用
Ｅｘ ｒ ｃ ｉ ｎ ｏ ｌｓ ｃ ｈ ｒｄ ｒ ｍ ｃ ｕ ｎ ｈ ｆ ｃ ｆＳ ａ ｅ ｇ ｎ ｅ ｔ ａ ｔｏ ｆ Ｐ０ ｙ ａ ｃ ａ ｉ ｅｆ ｏ Ｃａ ｔ ｓａ ｄ ｔ ｅＥｆｅ ｔ ｃ ｖ ｎ ｉ ｇ Ｆｒ ｅ ｏ
Ｒａ ｉａ ｓ ｄ ｃ ｌ
Ｓ Ｄｅ ｆｎ ’ ＨＩ ・ａ ｇ ， ＹＡＮＧ Ｙａ ｇ ， Ｅ ｎ ￣Ｒ Ｎ Ｈｏ ｇ ， Ｕ ｎ ’Ｓ Ｎ Ｘｉ － ｕ ｌ ａ ｘ ｅ， ｏ ＨＡＮ Ｓ ｕ ｑｎ ｈ －ｉ’
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四 ， 仓 品 与 崖 磅 － １
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仙人掌多糖的提取及其对自由基的清除作用
史德 芳 ， 洋 任 红 ， 晓雪 ， 淑琴 杨 ， 孙 韩
（ ． 西大学轻 工与 食品工程学 院；２ 广 西大学生命科 学 学院 ，广 西南宁 ５ ０ ０ ） １广 。 ３ ０ ４
摘要 ：对仙人掌多糖提取工艺条件厦其体外抗氧化性进行 了研究。结果表明，仙人掌多糖最佳提取工艺为：提取
温度 ８ ５℃， 取时 间 ２ｈ 提 ，固液 比 ｌ ２ ， 取 次数 ４次，经过酶 法脱 蛋 白， 多糖得 率 可达 ５９ ％。 白质脱除 率达 ： Ｏ提 ．５ 蛋 到 ９ ．％。蛋白质仙 人掌 多糖提取 液 的清除 自由基 的作 用较 明显 。 ２５ 关键 词 ： 匀设 计 ； 人 掌 ； 均 仙 多糖 ；自由基 中田 分 类 号 ： Ｓ ０ ． Ｔ２１ ２ 文 献标 识码 ： Ａ 文 章 编号 ｚ ６ １ ６ ９ （０ ６０ ０ ４ ０ ０ ７ － ８ ２２ ０ ）２－ ０ ２－ ０ ５ １
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｔ ｅｏ ｔ ｌ ｏ ｄ ｔ ｎ ｒ ｘｒ ｃｉ ｎｏ ｌ ｓ ｃ ｈ ｒ ｅｆ ｍ ａ ｔ ｓ ｎ ｓ ｎ ｉ ｘｄ ｔ ｅａ ｔ ｉ ｒ ｓ ｒ ｃ ： ｈ ｐ ｉ ｎ ｉ ｏ ｓ ｏ ｔａ ｔ ｆ ｏ ｙ ａ ｃ ａ ｉ ｏ ｃ ｃ ｄ ｉ ｔ ｉ ａｉ ｃｉ ｔ ｗｅ ｅ ｍａ ｃ ｉ ｆ ｅ ｏ ｐ ｄ ｒ ｕ ａ ｔａ ｏ ｖ ｖｙ ｓｕ ｉｄｉ ｉ ｐ ｐ ｒ Ｔ ｅｒ ｓ ｌ ｓ ｏ ｄ ｔａ ｅｏ ｔ ｍ ｃ ｎ ｌｇ ｏ ｄｔ ｎ ｒ ｓｆ ｌ ｗｓｔ ｅｔｍｐ ｒ ｔｒ ｔ ｄ ｅ ｔ ｓ ａ ｅ ． ｈ ｅ ｕ ｔ ｈ ｗｅ ｔ ｈ ｐ ｉ ｎｈ ｈ ｔ ｍｕ ｔ ｈ ｏ ｏ ｙ ｃ ｎ ｉ ｏ ｓｗｅ ｅａ ｌ ｅ ｉ ｏ ｏ ： ｈ ｅ ｅ ａｕ ｅ
去除腐乳中蛋白质的方法研究
Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄ ｓ ｌ ｆ ｅ ｒ ｍｅ ｎｔ ｅ ｄ ｂｅ ａ ｎ ｃ ｕｒ ｄ；ｒ ｅ ｍｏ ｖｉ ｎｇ ｐ ｒ ｏｔ ｅ ｉ ｎ；ｈ ｙｄ ｒ ｏ ｃ ｈｌ ｏ ｒ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｍｅ ｔ ｈ ｏｄ
ｌ 概 述
用 大豆发 酵 制成豆 豉 、 豆酱 、 腐乳、 酱 油等食 品 ， 创
的蛋 白质 ， 所 以脱 蛋 白大 多数应 用于 多糖 溶液 脱蛋 白，
比如仙人 掌多糖 提 取过 程 中脱 蛋 白、 天麻 多糖 水 提 及 脱蛋 白 、 植物 多糖 提取 液 脱 蛋 白 、 螺旋 藻 多 糖 脱 蛋 白、 白花蛇 舌草 多糖 脱 蛋 白等［ １ ¨ ］ 。上 述 国 内外 研 究 方 法都可 用于腐 乳脱 蛋 白。考 马斯 亮 蓝 Ｇ － － ２ ５ ０ （ Ｃ ｏ ｏ ｍａ ｓ － ｓ ｉ ｃ ｂ ｒ ｉ ｌ ｌ ｉ ａ ｎ ｔ ｂ ｌ ｕ ｅ Ｇ － ２ ５ ０ ） 测 定蛋 白质 含量属 于染 ａ ｎ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ａ ｎ ｄ Ｂ ｕ ｓ ｉ ｎ ｅ ｓ ｓ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｄｕ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｙ ａ ｎ ６ １ １ ８ ０ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｉ ｎ ｏ ｒ ｄ ｅ ｒ ｔ ｏ ｒ ｅ ｍｏ ｖ ｅ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｆ ｒ ｏ ｍ ｆ ｅ ｒ ｍｅ ｎ ｔ ｅ ｄ ｂ ｅ ａ ｎ ｃ ｕ ｒ ｄ，ｓ ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ，ｔ ｒ ｉ －
Ｔｈ ｅ ｂ ｅ ｓ ｔ ｒ ｅ ｍｏ ｖ ａ ｌ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｏ ｆ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｉ ｓ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ，ｔ ｈ ｅ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍｕ ｍ ｐ Ｈ ｖ ａ ｌ ｕ ｅ ｉ ｓ ３ ． ５ ，ｔ ｈ ｅ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍａ ｌ ｄ ｉ ｓ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｉ ｍｅ ｉ ｓ ０ ． ５ ｈ。ｔ ｈ ｅ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍｕ ｍ ｄ ｉ ｓ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｅ ｍｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｕ ｒ ｅ ｉ ｓ ３ ５ ℃ ，ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｍｏ ｖ ｉ ｎ ｇ
仙人掌润肤霜的试制
第30卷第6期2005年12月 昆明理工大学学报(理工版)Journal of Kun m ing University of Science and Technol ogy (Science and Technol ogy )Vol .30 No 16 Dec .2005收稿日期:2004-11-22.作者简介:刘晓波(1969.2～),男,研究生,讲师1主要研究方向:轻化工程.E -ma il:liuxiaobo_k m@sina .com仙人掌润肤霜的试制刘晓波(昆明理工大学生物与化学工程学院,云南昆明650224)摘要:以仙人掌提取液为添加剂,选择硬脂酸、十六醇、15#白油、I .P .M 、单甘酯、TE A 、甘油、T ween -80、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、香精等化妆品原料,以不同配方制作润肤霜,检测其理化指标、感官指标,通过对比选择各成分的适宜含量.结果表明,可采用硬脂酸215%、十六醇210%、单甘酯610%、I 1P 1M 910%、尼泊金丙酯011%、15#白矿油910%、TEA 016%、甘油810%、T ween -80013%、尼泊金甲酯012%、仙人掌汁2510%、香精011%、蒸馏水(余量)的配比制备仙人掌润肤霜.关键词:仙人掌;HLB 值;润肤霜中图分类号:S682.33;T Q658.21文献标识码:A 文章编号:1007-855X (2005)06-0080-05Prepara ti on of Em olli en t Cream of CactusL I U Xi ao 2bo(Faculty of B i ol ogical and Che m ical Engineering,Kun m ing University of Science and Technol ogy,Kun m ing 650224,China )Abstract:W ith the cactus juice as p lant additive,the cos metics materials,such as stearic acid,cetyl alcohol,liquid paraffin 15#,is op r opyl myristate,glycer ol ester,triethanola m ine,glyeer ol,polyoxyethylene s orbitan mo 2nooleat,methyl benz oate,p r opyl benz oate,essence and s o on,are chosen t o p r oduce the e mollient crea m by dif 2ferent f or mulas s o as t o detect its physicoche m ical and sens ory index .Thr ough comparative analysis,the p r oper content of each ingredient is chosen .The results show that the for mula of 2.5%stearic acid,2.0%cetyl alco 2hol,9.0%liquid paraffin 15#,9.0%is op r opyl myristate,6.0%glycer ol ester,0.6%triethanola m ine,8.0%glyeer ol,0.3%polyoxyethylene s orbitan monooleat,0.2%methyl benz oate,0.1%p r opyl benz oate,25.0%cactus juice,0.1%essence,and distilled water (the rest p r oporti on )can be chosen t o p r oduce the e mollient crea m of cactus .Key words:cactus;HLB;e mollient crea m0引言化妆品是以涂擦、喷洒或者其他类似的方法,散布于人体表面部位,达到清洁、消除不良气味、护肤、美容和修饰目的的日用化学工业产品.上世纪七十年代以来的回归自然的潮流,使“天然化妆品热”已经形成,在化妆品原料中采用了越来越多的天然物质.据统计,含天然成分的化妆品欧美占60%以上,日本达40%以上,仅日本就已有200余种天然药物应用于化妆品中[1～3].仙人掌(cuctcs ),为仙人掌科仙人掌属植物(opuntis s pp ),主要分布于南美洲、非洲、东南亚、南亚、我国南方等热带和亚热带地区,云南省境内具有丰富的资源分布.云南仙人掌的成分大致为:水分9316%,碳水化合物2182%,蛋白质0187%,脂肪0107%,粗纤维1107%,灰分1147%,β-胡萝卜素、V A 、V C 含量分别为242μg/100g,4013μg/100g,2115mg/100g .对仙人掌中生物活性物质的检测发现,仙人掌中含有S OD 、多糖、生物碱、黄酮甙、强心甙、皂甙等成分.近年来,对仙人掌的活性成分、药理药效的研究取得了不少进展.研究表明,仙人掌含有的生物活性物质,具有抑菌、消炎、镇痛、增强免疫、降血糖、抗脂质过氧化等药理作用,并有多种临床用途[4～7].S OD 、多糖、生物碱、黄酮甙、强心甙、皂甙、维生素、果酸等植物活性成分,在化妆品中已有广泛应用,具有护肤、润肤、抗衰老的功效,深受消费者的青睐.以仙人掌成分作为洗面奶、面膜等洁肤用品的组成部分在化妆品中的应用已有一些报道[8～11],但在护肤用品中的使用仍缺乏探讨.在护肤膏霜中加入仙人掌成分后,由于护肤用品较洁肤用品与皮肤接触时间长,仙人掌中有效成分的润肤、护肤、抗衰老、消炎、祛除黄斑等作用更能得到发挥.本文对仙人掌护肤膏霜的基础配方与仙人掌提取物的含量对其体系稳定性的影响进行了探讨.1材料与方法1.1材料仙人掌采自昆明市西山区.硬脂酸、十六醇、15#白油、I .P .M 、甘油、单甘酯、TE A 、T ween -80、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、香精购于化妆品原料市场.1.2仪器设备电磁搅拌器、水浴锅、均质机、电冰箱、高速冷冻离心机、医用离心机、电热干燥箱、pH 仪.1.3润肤霜制作方法[1,11]1.3.1仙人掌汁制备将仙人掌刺小心去除,剃去表面角质层,称重后用不锈钢刀切碎,按1∶015加入蒸馏水,不断搅拌2m in,用3层洁净纱布过滤,稍用力挤干,将滤饼再加入同样重量的蒸馏水,重复以上操作,将两次滤液混匀,置于高速冷冻离心机中,3000r/m in 离心5m in,取上清液备用.1.3.2润肤霜试制配方1)单甘酯含量对润肤霜性状影响的试验配方油相:硬脂酸215%,十六醇210%,15#白油710%,I .P .M 910%,尼泊金丙酯011%;单甘酯含量:1#415%,2#610%,3#715%,4#1215%,5#2310%;水相:TEA 016%,甘油810%,T ween -80013%,尼泊金甲酯012%,仙人掌汁2010%,香精011%,蒸馏水(余量).2)白油含量对润肤霜性状影响的试验配方油相:硬脂酸215%,十六醇210%,单甘酯610%,I .P .M 910%,尼泊金丙酯011%;15#白油含量:1#510%,2#710%,3#910%,4#1110%,5#1310%;水相:TE A 016%,甘油810%,T ween -80013%,尼泊金甲酯012%,仙人掌汁2010%,香精011%,蒸馏水(余量).3)仙人掌汁含量对润肤霜性状影响的试验配方油相:硬脂酸215%,十六醇210%,单甘酯610%,I .P .M 910%;尼泊金丙酯011%,15#白油910%;水相:TE A 016%,15#白油810%,T ween -80013%,尼泊金甲酯012%;仙人掌汁含量:1#1010%,2#1510%,3#2010%,4#2510%,5#3010%,香精011%,蒸馏水(余量).1.3.3润肤霜制备方法按试验配方分别称取水相、油相成分置于容器中,升温至适宜温度,搅拌均匀,然后将水相缓慢加入,搅拌至充分乳化.乳化结束后,滴加香精,继续搅拌冷却至室温.1.4检测方法1)感官指标、理化指标检测按QB /T 1857-93进行.2)离心试验将样品装入玻璃离心管中,置电热恒温培养箱中,38℃条件下,保持1h 后移入医用离心机中,3500r/m in 离心30m in,观察有无油水分离现象.18第6期 刘晓波:仙人掌润肤霜的试制3)涂抹分散性、肤感试验取适量试样,在掌背小心涂抹,比较其铺展难易性,观察涂抹后皮肤的油性.2结果与讨论2.1润肤霜基质原料选择表1 润肤霜基质成分的功能Tab .1 The functi on of co m positi on of the e m olli en t cream成 分功 能硬脂酸滋润剂、增稠剂、部分与三乙醇胺反应形成乳化剂十六醇滋润剂,助乳化剂I .P .M 滋润剂、润滑剂、改善油腻感15#白油滋润剂、润滑剂甘油保湿剂单甘酯乳化剂T ween -80乳化剂TE A与硬脂酸反应形成乳化剂 润肤霜是保护皮肤免受外界的刺激,防止皮肤过分失去水分,或经皮肤表面补充适宜的水分和脂质,以保持皮肤的滋润、柔软和富有弹性的护肤化妆品.为了便于今后对仙人掌中有效成分的护肤效果进行深入研究,以选择较简单的配方为原则,选择在润肤霜中应用较为广泛的硬脂酸、十六醇、I .P .M 、15#白油、甘油、单甘酯、T ween -80、TE A 等原料进行润肤霜的试制.所选原料的功能如表1所示.2.2乳化剂的选择和单甘酯含量对润肤霜性状影响润肤霜是乳化型护肤膏霜,乳化体系的稳定性是其基本要求.润肤霜乳化体系有O /W 型、W /O型、W /O /W 等几种,其中W /O 型化妆品对皮肤的的滋润作用较好,尤其适合干性皮肤.影响乳化体系稳定性的因素包括乳化剂的种类和配比、乳化工艺、油相与水相的比例、体系中各成分的配伍性等等.其中,乳化剂的种类和配比是其中主要的决定因素.HLB 法选择乳化剂是乳化剂选择方法中最常用的方法.经验表明,HLB 值在3～6的乳化剂适宜作W /O 型乳化剂,HLB 值在8～18的乳化剂适宜作O /W 型乳化剂.在乳化体系中使用混合乳化剂,能使体系形成强度较大的界面膜,提高乳化效率高和乳化体系的稳定性[1].以制备W /O 型润肤霜为目的,选择单甘酯、T ween -80,硬脂酸三乙醇胺(由硬脂酸与TEA 反应而得)组成不同HLB 值的混合乳化剂,以单甘酯含量分别为415%,610%,715%,1215%,2310%进行润肤霜试制.试验结果如表2所示.表2 不同单甘酯含量、不同HL B 值对润肤霜性状影响Tab .2 The effect of glycerolester and HL B w ith var i ous con ten ts on the e m olli en t cream property1#2#3#4#5#单甘酯/%41561071512152310T ween -80/%013013013013013硬脂酸三乙醇胺/%117117117117117HLB 值615610515510415耐寒试验不稳定稳定稳定稳定稳定耐热试验不稳定稳定稳定稳定不稳定离心试验稳定稳定稳定稳定不稳定涂抹分散性好好好较差差涂抹肤感油性弱油性适中油性适中油性适中油性强 注:①硬脂酸三乙醇胺由硬脂酸与三乙醇胺反应而得[12].其反应式为:C 17H 35COOH +(C 2H 4OH )3N ϖC 17H 35COOH ・N (C 2H 4OH )3②HLB =∑(乳化剂HLB 值×乳化剂重量)/∑乳化剂重量[1].其中,单甘酯HLB 值318,T ween -80HLB 值1510,硬脂酸三乙醇胺HLB 值1210.表2试验结果表明,在所设计配方中,单甘酯含量较高和较低时,体系的稳定性都会出现下降,而且随着单甘酯含量上升,涂抹分散性变差,涂抹肤感油腻性增加.此外,在稳定乳化体系中,乳化剂用量增加,则乳化效率下降,成本增加.因此,选择HLB 值为610,单甘酯含量为610%的2#试验配方进行以后的试验.28昆明理工大学学报(理工版) 第30卷2.3白油含量对润肤霜性状的影响白油又称石蜡油、液体石蜡、矿油等,是一种无色、无臭、透明的液体,具有润滑性,在皮肤上可形成障碍性薄膜,对皮肤柔软效果较好,具有较高的化学稳定性和微生物稳定性,不易腐败,价格低廉,在化妆品中应用广泛.白油在润肤霜中使用,对体系稳定性、感官涂抹效果有一定影响.在以上确定了单甘酯用量的基础上,进一步以白油含量为5%,7%,9%,11%,13%的不同配比进行润肤霜试制.试验结果如表3所示.表3 不同白油含量对润肤霜性状影响Tab .3 The effect of li qu i d paraff i n w ith var i ous con ten ts on the e m olli en t cream property1#2#3#4#5#白油/%5791113耐寒试验不稳定稳定稳定稳定不稳定耐热试验不稳定稳定稳定稳定不稳定离心试验稳定稳定稳定稳定稳定涂抹分散性好好好好好涂抹肤感油性弱油性适中油性适中油性较强油性强 以上试验结果表明,在所设计配方中,白油含量较高和较低都不利于体系稳定,白油含量对涂抹分散性无明显影响,但随着其含量上升,涂抹肤感油腻性增强.由于白油对皮肤有较好的柔软效果,综合考虑体系稳定和油性适中、涂抹分散性好,在白油含量为7%、9%的2#、3#两个配方中,选择白油含量为910%的3#配方进行下一步的试验.214仙人掌汁含量对润肤霜性状的影响化妆品中活性成分的含量决定其使用效果,仙人掌中含有S OD 、多糖、生物碱、黄酮甙、强心甙、皂甙、维生素等结构较复杂的有机分子、聚合物,具有护肤、润肤、抗衰老、消炎等功效,仙人掌提取液化妆品基质中含量越高,其使用价值越大.但会对其体系稳定性、感官涂抹效果有一定影响.另外为了尽量保留仙人掌的有效成分,对提取液未作脱色、纯化处理,提取液中的色素也会影响其色泽.在以上确定了适宜单甘酯、白油含量的基础上,为了确定适宜的仙人掌提取液添加量,以提取液含量为1510%,2010%,2510%,3010%,3510%的不同配比进行润肤霜试制.试验结果如表4所示.表4 仙人掌汁不同含量对润肤霜性状影响的试验Tab .4 The effect of cactus ju i ce w ith var i ous con ten ts on the e m olli en t cream property1#2#3#4#5#仙人掌汁/%15102010251030103510耐寒试验稳定稳定稳定稳定稳定耐热试验稳定稳定稳定稳定不稳定离心试验稳定稳定稳定稳定稳定涂抹分散性好好好稍差差色 泽洁白白色白色白色、略暗白色、较暗 表4表明,在所设计配方中,随着仙人掌汁含量的提高,润肤霜涂抹分散性和体系稳定性变差,这可能是仙人掌汁中含有多糖,多糖溶液较粘稠,同时高分子聚合物对乳化体系具有敏化作用所致.随着仙人掌汁含量的提高,润肤霜色泽变暗.由于色泽会大大影响消费者的喜好,因此,在体系稳定的基础上,在不同仙人掌汁含量的试验配方中,选择色泽呈白色,仙人掌汁含量为2510%的配方为试制润肤霜的目标配方.215仙人掌润肤霜放大试验在确定了适宜单甘酯、白油和仙人掌提取液适宜含量的试验基础上,以硬脂酸215%、十六醇210%、单甘酯610%、I .P .M 910%、尼泊金丙酯011%、15#白矿油910%、TEA 016%、甘油810%、T ween -80013%、尼泊金甲酯012%、仙人掌汁2510%、香精011%、蒸馏水(余量)为配比进行了一次制备115kg 仙38第6期 刘晓波:仙人掌润肤霜的试制人掌润肤霜的放大试验,并对其进行了感官指标、理化指标检测,结果如表5所示.表5 润肤霜样品感官指标、理化指标Tab.5 The che m i ca l,physi ca l and sen suous i n dex of the e m olli en t cream理化指标pH耐热耐寒感官指标色泽香气膏体61540℃,24h膏体无油水分离-20℃,24h恢复至室温无油水分离现象白色香味纯正细腻 所制备的试验样品在室温条件下,经3a多长期储存(2000年7月制备,储存至2003年12月),其使用性状仍无改变.样品经昆明理工大学生化学院生物工程系1997级10余名男女学生试用,除1人有轻微皮肤过敏反应外,试用者反映使用效果与市面销售的中档润肤霜无明显差异,其中2名试用者还反映有消炎效果.3结论试验表明,采用油相:硬脂酸215%、十六醇210%、单甘酯610%、I.P.M910%、尼泊金丙酯011%、15#白矿油910%;水相:TEA016%、甘油810%、T ween-80013%、尼泊金甲酯012%、仙人掌汁2510%、香精011%、蒸馏水(余量)的配方能制备出稳定性、涂抹分散性等感官指标较佳的仙人掌润肤霜.仙人掌润肤霜是在护肤膏霜中加入仙人掌成分,由于护肤用品较洁肤用品与皮肤接触时间长,更能发挥仙人掌中有效成分的润肤、护肤、抗衰老、消炎、祛除黄斑等作用,但确切的抗衰老、消炎、祛除黄斑等特殊功效尚需进行深入的研究.参考文献:[1]阎世翔.化妆品科学(上册)[M].北京:科学技术文献出版社,1995.1～3,110～122.[2]王建新.天然活性化妆品[M].北京:中国轻工业出版社,1997.66～237.[3]阎世翔.中草药在化妆品中的应用[J].中国化妆品,2004,(8):84～86.[4]王者悦.中国药膳大辞典[M].大连:大连出版社,1992.222.[5]陶美华,曾富华,卢向阳.仙人掌属植物的化学成分、药理作用及开发利用[J].亚热带植物科学,2004,33(1):64～68.[6]周立刚,杨成宗,吴建勇.仙人掌属药用植物的研究进展[J].中草药,2004,35(1):103～105.[7]陈朝银,赵声兰,曹建新.仙人掌茎有效成分分析[J].中国野生植物,2004,16(4):24～27.[8]梁立兴.银杏外种皮的研究现状及开发利用前景[J].中国资源综合利用.2003,(10):12～14.[9]万克英,李朝华,余广松.仙人掌汁外用对应变性接触性皮炎的影响[J].华中医学杂志,2003,27(2):73～74.[10]许伟,王桂秋,许艳霞,等.仙人掌抗衰老作用的实验研究[J].中国中医药科技,2003,10(2):101～102.[11]张友兰,王利军,潘智才.保湿粉刺露的研制[J].日用化学工业,2000,30(5):21～23.[12]冯兰宾,袁铁彪.化妆品生产工艺[M].北京:轻工业出版社,1986.37.48昆明理工大学学报(理工版) 第30卷。