双孢菇
双孢菇发展调研报告
双孢菇发展调研报告引言双孢菇，又称为双孢蘑菇、油菇，是一种常见的食用菌类，被广泛种植和消费。
本调研报告旨在对双孢菇的发展进行深入调查和分析，以期为种植者、市场参与者和消费者提供有关双孢菇行业的全面情况和未来趋势的信息。
背景双孢菇是一种生长迅速、产量高、适应性广泛的真菌类。
它的味道鲜美、营养丰富，被广泛用于烹饪。
双孢菇的市场需求量大，且有稳定的消费群体。
市场现状据市场调研数据显示，双孢菇是目前市场上最受欢迎的食用菌之一。
其在各大超市、农贸市场和菜场都有销售，且价格相对稳定。
根据统计数据，双孢菇的市场需求量每年都在稳步增长，销售额呈现持续增长的趋势。
产业链分析1. 种植环节双孢菇种植是双孢菇产业链的起点，决定着产业链的成败。
种植者需了解气候和土质要求，掌握种植技术，合理施肥灌溉，关注病虫害防治等。
另外，对于合理的种植面积规划和品种选择也至关重要。
2. 加工环节加工环节主要包括采摘、分级、清洗、包装等。
充分保证食品安全和质量是这个环节的核心任务。
加工企业应建立标准作业程序，提高自动化程度，加强质量管理，确保产品的新鲜度和口感。
3. 销售环节销售环节是双孢菇产业链的末端，直接关系到双孢菇产品的消费能力和市场份额。
销售渠道多样化、宣传推广力度加大是提升销售额的关键。
农贸市场、超市、电商平台等都是销售双孢菇的主要渠道。
潜在机遇与挑战1. 机遇随着人们对健康饮食的重视，双孢菇作为一种低脂肪、低热量、高纤维素的食材，受到越来越多人的喜爱。
这为双孢菇的推广和销售提供了机遇。
2. 挑战双孢菇市场竞争激烈，品种繁多，如何保持产品的竞争力是一个挑战。
种植者需提高自身技术水平，加强与加工企业的合作，依托大数据和智能化技术提高生产效率和降低成本。
发展趋势1. 品种的细分化随着消费者需求的不断变化，双孢菇的品种细分化趋势将会持续加强。
根据消费者的口味和需求差异，种植者和加工企业需根据市场需求研发新的品种，以满足不同消费者的要求。
双孢菇的栽培技术
双孢菇的栽培技术双孢菇（Agaricus bisporus）是一种常见的食用菌类，也是市场上最常见的蘑菇品种。
双孢菇味道鲜美，营养丰富，同时生长速度较快，容易栽培。
下面是双孢菇的栽培技术要点。
1.培养基准备双孢菇的培养基主要是由牛粪、蘑菇渣、秸秆等有机物组成。
首先将这些原料进行堆堆发酵，使其温度可以达到50-65℃，并保持在这个范围内发酵10-15天。
发酵完成后，将堆料整理平整，制成层叠的菌棒。
2.菌棒灭菌将菌棒放入大型高温灭菌锅中，将锅内的温度升至110-120℃，保持2-3小时以杀灭有害细菌和真菌，为真菌的生长提供有利条件。
3.菌棒接种将灭菌的菌棒移入接种室进行接种。
接种一般采用稀缩孢子悬液或菌丝糊进行。
悬液和菌丝糊的制备需要严格的无菌操作，以防止杂菌的侵入。
将接种好的菌棒放在栽培箱中，然后进行下一步的栽培。
4.栽培环境控制双孢菇的栽培一般需要温度、湿度和光照条件的控制。
菌棒接种后，将栽培箱放置在温度为22-25℃、湿度为80-90%的环境中。
保持适当的湿度可以促进双孢菇的生长，同时避免过高的湿度对真菌的生长产生不利影响。
另外，双孢菇对光照的需求不高，一般在栽培过程中保持一定的半阴暗状态即可。
5.喷水保湿双孢菇的生长需要充足的水分，保持适当的湿度有助于真菌的正常生长。
在栽培过程中，可以定时进行喷水保湿，但避免过多的水分积聚。
当发现菌体表面有结露时，应立即停止喷水。
6.通风换气通风换气是双孢菇栽培中重要的环节之一、通过排除污浊的空气和增加新鲜空气的流通，可以提高菌丝生长的环境。
在栽培箱中设置通风口，定时进行通风，每次通风时间一般为15-30分钟。
7.收获和储存双孢菇一般在菌棒接种后的20-25天左右可以开始收获。
当菌盖完全展开，并且菌褶开始裂开时，说明双孢菇已成熟。
收获时应将整个菌盖割下，避免菌丝破损。
收获后的双孢菇可以用湿纸巾包裹，放入塑料袋中进行冷藏保存。
总结：双孢菇是一种较容易栽培的食用菌类，只需要进行一定的环境条件控制，就可以获得丰收的成果。
双孢菇栽培技术
双孢菇具有肉质丰厚、味道鲜美、营 养丰富等特点。它喜欢生长在富含有 机质的土壤中，并且需要适宜的温度 、湿度和通风条件。
双孢菇的营养价值
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蛋白质含量高
双孢菇含有丰富的蛋白质 ，对于人体维持正常生理 功能具有重要作用。
维生素和矿物质
双孢菇富含多种维生素， 如维生素B、维生素D等， 以及钾、磷、钙等矿物质 ，有助于维持人体健康。
低脂肪、低热量
双孢菇中的脂肪和热量含 量很低，适合减肥人群食 用。
双孢菇的市场需求与栽培前景
市场需求：随着人们对健康饮食的重视，双孢菇作为一种营养丰富的食材，市场需求不断增 加。
栽培前景：双孢菇的栽培周期短、产量高、投资回报快。随着市场需求的增长，双孢菇的栽 培前景非常广阔。栽培双孢菇有助于满足市场需求，同时也为农民提供了一种具有经济效益 的种植选择。
的生长创造条件。
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双孢菇栽培中常见问题与解决方 案
菌丝生长缓慢
要点一
原因
温度过低或过高、湿度不足、通风不良等。
要点二
解决方案
调整温度至适宜范围，保持适宜湿度，增加通风换气次数 ，提供充足光照。
菇体变形或色泽异常
原因
环境因素不适宜、营养不良、病原菌感染等。
解决方案
调整温、湿度及光照等环境条件，优化培养基配方，及 时防治病原菌感染。
节能保温技术
研发新型保温材料和技术，减少 栽培过程中的能源消耗。
高效照明系统
采用LED等高效照明技术，提供适 宜的光照环境，降低电力成本。
水分管理技术
改进浇水方式，提高水分利用效率 ，减少水资源浪费。
智能化、机械化栽培设备的应用
自动化控制系统
双孢菇怎样繁殖种植方法
双孢菇怎样繁殖种植方法简介双孢菇（Agaricus bisporus）是一种常见的蘑菇，也是市场上最常见的食用菌之一。
它的特点是颜色洁白，肉质鲜嫩，口感丰富，营养丰富，深受人们喜爱。
本文将介绍双孢菇的繁殖种植方法，帮助菇农了解如何培育出优质的双孢菇。
材料准备- 菇菌种：双孢菇栽培基质或切花菇- 栽培基质：蘑菇的生长介质，一般选用蘑菇菌床或蘑菇菌包- 培养设施：温度、湿度和光照控制设备- 菇棚：存放和种植双孢菇的专用设施- 养料：用于给菇菌提供养分的有机肥料或化学肥料- 工具：铁叉、草笼、水桶、喷雾瓶等步骤1. 准备基质双孢菇的主要基质有蘑菇菌床和蘑菇菌包两种选择。
蘑菇菌床由麦秸、稻草、沙子和有机肥料等材料混合而成，最适宜的PH值为7.2-7.5。
蘑菇菌包一般由菌丝、麦麸和其他物质制成。
无论选择何种基质，都需要在培养前进行消毒处理。
2. 菇菌接种将菇菌种均匀地撒在基质上，并用铁叉稍微翻动一下，使菌种更好地与基质接触。
接种后，用草笼覆盖住菌床或菌包，保持湿度，有利于菇菌的生长。
3. 维护环境- 温度：双孢菇的适宜生长温度为18C-24C，菇棚内要保持适宜的温度，可根据菌种生长习性进行调节。
- 湿度：双孢菇生长期间需要保持适宜的湿度，一般在85%-95%之间。
可使用喷雾瓶进行喷水，或者设备自动喷水系统进行湿度控制。
- 光照：双孢菇属于性喜光菌，需要适度的光照，但不能直射阳光。
可以通过调整菇棚的窗帘或使用人工灯光来控制光照。
4. 施肥和管理双孢菇在生长过程中需要充足的养分供应，可以定期使用有机肥料或化学肥料进行施肥。
同时，定期进行通风，保持菇棚内空气流通，有助于菇菌生长。
5. 收获和储存双孢菇的生长周期为90-120天左右，菌盖张开后可进行收获。
要注意采摘时不要将菌褶损坏，最好在菌伞完全张开后进行采摘。
采摘后，将双孢菇放置在通风干燥的地方，避免阳光直射，以免影响其食用品质。
总结通过以上步骤，我们可以实现双孢菇的繁殖和种植。
双孢菇
双孢菇的特性双孢菇（俗称圆蘑菇，洋蘑菇），属草腐菌，中低温性菇类，我国稻草、麦草丰富，气候比较适合双孢菇的生长，具有很大发展潜力。
养料：双孢菇是一种腐生菌，不能进行光合作用，配料时，在作物秸秆（麦秸草、稻草）中加入适量的农家粪（如牛、羊、马、猪、鸡和人粪尿等），还须加入适量的氮、磷、钾、钙、硫等无机养分。
合理的配方是获得高产的一个重要基本条件。
温度：双孢菇菌丝体生长温度范围4℃－32℃，最适温度22℃－25℃；子实体生长温度范围5℃－25℃，最适温度14℃－18℃。
湿度：培养料的含水量以60％左右为宜，覆土的含水量16％－20％。
菌丝体生长阶段空气相对温度60％－70％，子实体生长阶段85％－95％，过干或过湿对菌丝体生长都不利。
酸碱度（PH）：双孢菇宜偏碱性，偏酸对菌丝体和子实体生长都不利，而且容易产生杂菌。
菌丝生长的PH值范围是5—8，最适7—8，进棚前培养料的PH值应调至7.5－8，土粒的PH值应在8—8.5。
每采收完一期菇喷水时加少许石灰，以保持PH值，抑制杂菌孳生。
空气：双孢菇是一种好气性真菌，因此要有良好的通风条件。
光照：双孢菇的菌丝体和子实体均不需要光，但在一般散射光的条件下还是可以生长的，但不能强光照射。
子实体在阴暗的环境下长得洁白、肥大，若光线太强，长出的子实体表面硬化，畸形菇多，商品价值差。
双孢菇鲜食最佳，不宜久放，规模种植时，可做成罐头，出口换汇。
大面积发展双孢菇，必须考虑深加工问题，否则，产品积压变质，就会造成损失。
双孢菇的价值和效益双孢菇具有较高的营养价值和药用效果。
鲜菇蛋白质含量为35%—38%，还含有丰富的维生素B1，维生素B2，维生素PP，核干酸，烟酸，抗坏血酸和维生素D等，营养价值是蔬菜和水果的4—12倍，享有“保健食品”和“素中之王”美称。
双孢菇所含的蘑菇多糖和异蛋白具有一定的抗癌活性，可抑制肿瘤的发生；所含的酪氨酸酶能溶解一定的胆固醇，对降低血压有一定作用；所含的胰蛋白酶、麦牙糖酶等均有助于食物的消化。
双孢菇
双孢菇第一节概述一、生物学特征双孢菇又名白蘑菇、洋蘑菇、蘑菇，在分类学隶属真菌门，担子亚门、层菌纲、无隔担子菌亚纲、伞菌目、伞菌科、磨菇属，学名为Agricas bisporus(Lange)Sing。
双孢菇经过长期选育又朽白色、棕色和奶色三个变种。
白色变种俗称白蘑菇，来源于法国，其色泽纯白，外观好看，鲜食及加工罐头都很适宜，历来各国栽培甚多，棕色、奶色变种色泽欠佳，虽刘外界布较强的抵抗力，但质量较差，因此较少进行人工栽培。
双孢菇栽培历史悠久，范围广泛，是目前唯一进行全球性栽培的食用菌，产量居世界之首位，以美国、中国、法国、英国、韩国栽培最多。
我国的双孢菇栽培随着栽培技术的不断改革和创新，近20多年来发展非常迅速，并且有相当的规模，产量逐年提高。
二、生活条件(一)营养双孢菇是草腐菌，生长发育需要的碳素营养可通过分解纤维素、半纤维素和木质素获得。
所需要的氮素营养可通过腐熟的牲畜粪等获得。
因此，各种农作物秸秆和各类粪肥，可作为栽培双孢菇的养料。
(二)温度菌丝生长的温度范围为6～32℃，最适22~24℃，25℃以上菌丝虽然生长很快，但纤细无力，且易早衰。
32℃以上菌丝发黄，倒伏，以至停止生长。
10℃以下，菌丝生长缓慢。
子实体形成的温度是6～22℃，最适14～16℃，低于12℃子实体生长缓慢，16℃以上，子实体生长快，但菌柄细长、皮薄、易开伞，质量差，产量低。
(三)湿度菌丝体生长阶段要求培养料含水量60％～65％，空气相对湿度80%左右，培养料含水量低于50％时，菌丝生长缓慢，绒毛菌丝多而纤细。
子实体生长阶段要求培养料含水量60％～65％，覆土含水量保持在18％～20％，空气相对湿度85％～90％，超过95％，菌盖易发生各种细菌性病斑，若低于70％，菌盖表面变硬，易空心、白心；低于50％，停止出菇，菇蕾会枯萎死亡。
(四)空气双孢菇属好气性菌类，菌丝体阶段、子实体阶段都需要充足的新鲜空气。
出菇阶段，ＣＯ２浓度应控制在0.1％以下，否则子实体菌盖小，菌柄细长，易开伞。
双孢菇具体需要什么生长环境？有哪些种植技术要求？
双孢菇具体需要什么生长环境？有哪些种植技术要求？双孢菇，也叫白蘑菇。
广泛分布在欧洲、北美和亚洲温带地区，在中国各地均有分布。
有白色棕色、奶油色之分。
它肉厚盖大、味道鲜美、适口性强，富含蛋白质维生素多种矿物质元素和氨基酸，提高特别是硒含量尤为丰富，具有提高人体免疫力、抗病毒的功效，是深受大众欢迎一种食药用菌。
一，双孢菇喜爱的生长环境。
双孢菇的生长有着它自身的特点，也有着其自身生长所喜爱的环境这环境主要有因素组成。
【1】温度。
双孢菇属中温型品种，孢子萌发温度在24~26℃之间，菌丝体最适宜的生长温度是24~26℃，子实体发育和生长温度为16~20℃。
【2】湿度。
双孢菇菌丝体生长最适宜的空气相对湿度为70%左右，子实体生长的最适湿度为80~90%。
【3】光照。
双孢菇的菌丝体和子实体均可在黑暗中生长，受到光照射的子实体会发黄。
【4】空间氧气含量。
双孢菇是好气型真菌，菌丝体和子实体生长都需要消耗大量的的氧气，喜欢含氧量充足的空间。
【5】土壤。
双孢菇喜欢在弱碱的土壤环境中生长，最适宜的PH值为7~7.6，土壤含水量在65%左右生长的最好。
土壤的营养结构即碳氮比达到17~18:1时，就能完全满足双孢菇的生长对营养的需要。
在以上各环境因素达到双孢菇最适宜生长状态时，双孢菇生长状态也最好，这样空间温度、湿度、光照氧气含量和土壤，就是双孢菇最需要的环境。
双孢菇的种植，具有一定的技术要求，这种技术要求从培养料制作开始，直至采收完毕。
一，培养料制作的技术要求。
双孢菇属草腐菌，用作双孢菇种植的培养料原料很多，棉籽壳、米糠、麦糠、稻草、麦秸、玉米芯、豆饼、牲畜粪便、石膏、生石灰等等都是种植双孢菇的好原料。
【1】掌握培养料质量。
制作种植双胞菇的培养料原料，必须保证质量，也就是无腐烂，无霉变，不带虫卵，不带杂菌。
这样的原料才能保证所含营养富足，保证杂菌和虫卵不能进入种植过程，降低染菌和遭受虫害的风险。
【2】调节好培养料的营养结构。
双孢菇栽培技术
（4）空气
双孢菇是好气性菌类，发菌期、 出菇期都要求良好的通风。
（5）酸碱度
双孢菇菌丝体在pH5.5-8.5之 间均可生长，最适pH为7-7.5。所以 播种时培养料的pH应在7.5左右，覆 土的酸碱度可调节在7.5-8之间。
加工产品：开封维康冻干食品厂
周口润鹏食品有限公司
自行盐渍，批量销售
3.双孢菇需要的营养
双孢菇生产要想获得优质、高产、高效，必需满足其对 营养的要求。
双孢菇是一种草腐菌，是异养生物，不能进行光合作用， 完全依赖培养料中的营养物质来满足生长发育的需要。这些 营养物质包括： （1）碳源 双孢菇能够利用的碳源非常广泛，单糖、双糖、 树胶、果胶、淀粉、纤维素、半纤维素、木质素和泥碳等均 可利用。这些碳源主要存在于玉米秸、麦秸、稻草、豆秸、 玉米芯等农作物秸秆之中，研究发现，双孢菇菌丝生长阶段 主要是消耗培养料中的木质素，而出菇阶段主要是消耗纤维 素和半纤维素，两个阶段对碳源的要求完全不同。碳源主要 由稻草、麦秸、玉米秸、玉米芯或棉籽壳提供。
2.匍匐型（高产型）：气生菌丝弱，基内菌丝旺盛。 产量高，抗逆性强，质量差。S-176
3.杂交型（半气生半匍匐型）：基内菌丝、气生菌 丝均旺盛，产量高，抗逆型强，质量高。是目前栽 培的主要类型。荷兰主栽品种为HorstU1、U3， 国内主要为As2796。
子实体----双孢菇
子实体：繁殖器官，相当于小麦或玉米等
封丘县是全国贫困县，为了实现农业结构调 整，促进农民增收致富，2000年以来发展双孢菇 产业，利用稻草、麦秸、玉米秸、玉米芯和棉籽壳 等原料栽培双孢菇，栽培面积5万平方米，计划近 年发展10万平方米。现在产量20斤/平方米。以2 元/斤保护价回收，每平方米产值40元，而每平方 米投资不足10元，栽培1平方米净收入30元。
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河南农业大学本科毕业生论文（设计）标题热风处理时间对鲜切双孢菇褐变的影响学院食品科学技术学院专业班级食品科学与工程2013-1班学生姓名杨珍珍指导老师徐超撰写日期：2015年5月15日热风处理时间对鲜切双孢菇褐变的影响摘要：以双孢菇为研究对象，研究了在温度40℃湿度85%的热风处理不同的时间对双孢菇采后褐变的影响。
研究表明，在温度40℃湿度85%的条件下，与其他处理时间相比，热风处理30min，能较好保持双孢菇的外观品质和感官品质。
降低了与双孢菇褐变有关的PPO、POD酶的活性，同时也抑制了使双孢菇木质化的PAL酶的活性，有效地抑制了双孢菇的褐变。
关键词：处理时间；双孢菇；褐变Effects of hot air treatment time on browning of fresh-cut Agaricus bisporusYangZhenzhenClass 2013-1, Food Science and Engineering College of Food Science and TechnologyAbstract:In the double spore mushroom as the research object, studied at a temperature of 40 DEG C humidity of 85% different hot processing time of Agaricus bisporus Post harvest browning effects. Research shows that, at a temperature of 40 DEG C 85% humidity conditions, compared with other processing time, hot air treatment 30min, can better maintain the Agaricus bisporus the appearance quality and sensory quality. Reduced PPO, POD enzyme and the activity of Agaricus bisporus browning, but also inhibit the PAL enzyme of Agaricus bisporus lignified activity, can effectively inhibit the browning of Agaricus bisporus.Key words: processing time; Agaricus bisporus; browning1、引言双孢菇因其担子上通常生着2个担孢子而得名，在分类上隶属于真菌门担子菌纲无隔担子菌亚纲伞菌目蘑菇科蘑菇属，学名为Agaricus bisporus[1]，又名洋蘑菇，是世界各地广泛栽培的食用菌，味道鲜美，营养价值高，受到广大消费者的喜爱。
在我国，双孢菇早已被作为药食同源的功能性食品，《中国药用真菌图鉴》中记载了其药用功能：“含有胰蛋白酶，麦芽糖酶等多种酶类，可以治疗消化不良。
子实体内含有人体必需的7种氨基酸，多种维生素和矿盐，是不愧为健康食品[2]。
”然而，双孢菇在采后贮藏和加工过程中，极易发生褐变，褐变不仅影响产品外观质量，而且降低其感官品质和内在营养价值[3-4]。
(赵东海,张建平,候菊花.蘑菇中多分氧化酶的酶学特性研究[J].食品机械,2004,20(5):12-13.)在贮藏过程中，底褐变不仅影响产品外观质量，而且对风味和应用品质都有一定程度的损害。
造成双孢菇褐变的因素是多方面的，从本质上可分为两大类：酶促褐变和非酶促褐变，其中酶促褐变的因素有三个：底物浓度、酶类物质和氧气。
（杨光宇,牟德化.果蔬汁多酚氧化酶酶促褐变机理及酶促褐变抑制研究进展，河北科技大学生物科学与工程学院，河北石家庄 2009,12(8):4）物浓度对双孢菇褐变的影响是固定不变的，我们可以控制的因素只有有酶和氧气。
而在双孢菇内，PPO主要存在于完整细胞的质体（包括叶绿体、有色体和白色体）和微体中，而PPO的底物存在于液泡中，处于潜伏状态，在完整的细胞中作为呼吸传递物质，在酚-醌之间保持着动态平衡，不发生酶促褐变。
当双孢菇切开后组织被损伤，氧气大量侵入，酶原被激活，酚类物质经酶的催化作用氧化为醌类物质，从而引起褐变反应。
为了延长鲜切双孢菇的贮藏，就要有效的抑制酶促褐变的，从酶的活性控制的方法来看，酶促褐变的抑制方法有化学方法、生物方法和物理方法。
化学方法会给双孢菇带来一定的化学污染；生物方法会涉及植物的抗病和抗虫等生理活动，利用反义RNA技术虽然降低了酶的活性，增加了该植物对病虫害的敏感性；而物理方法不仅可以避免化学方法给食物带来的污染，又不会增加植物对病虫害的敏感性。
不同热风处理是在温度40℃湿度85%的条件下热风处理不同的时间，抑制双孢菇中的与褐变有关的酶，从而有效抑制双孢菇的褐变。
将鲜切后的双孢菇分别处理0min、1min、5min、10min、20min、30min，比较能有效抑制双孢菇褐变的热风处理时间，从而得出最适合的处理时间，为鲜切双孢菇的贮藏保鲜提供理论依据。
2、材料与方法2.1主要实验材料：2.2主要仪器与设备2.3试验方法2.3.1双孢菇的前处理将买来的双孢菇从4℃的环境中取出，选择表面光滑、新鲜的双孢菇作为实验材料。
切去菌柄剩下可食的子实体，用水冲去子实体上的培养料，将子实体切成5cm厚的薄片，取6片带有菌褶（颜色不能太深）的薄片放在6个筐里待用。
每个筐里的双孢菇的重量达到350g左右；将每个筐里的双孢菇薄片在RH85％40℃的恒温恒湿箱中分别处理0min、1min、5min、10min、20min、30min。
达到处理时间1min 后立即将双孢菇片从恒温恒湿箱中取出，用电子天平称取50g左右的双孢菇片放在6个保鲜袋中，处理5min、10min、20min、30min的方法同处理1min的方法相同，控制好时间，编号分别为0500、0502、0504、0506、0508、0510，1000、1002、1004、1006、1008、1010,2000、2002、2004、2006、2008、2010,3000、3002、3004、3006、3008、3010；处理0min的双孢菇片不在恒温恒湿箱中处理，直接分装到保鲜袋中，标号分别为0000、0002、0004、0006、0008、0010；将装封好的双孢菇片放在4℃的冰箱中冷藏保存。
2.2.2双孢菇褐变指数的测定在前处理当天将编号分别为0000、0100、0500、1000、2000、3000的双孢菇片从冷藏室中取出，若双孢菇表面有水分，应当将双孢菇表面的水分晾干。
打开色差仪，用白板校正，分别测量不同处理时间的双孢菇片，每测三片取其平均值，记录L*、a*、b*、△E* 。
测量后的双孢菇片用液氮迅速冷冻后装在有相应编号的保鲜袋中，放在-80℃的冰箱中冻藏。
在处理后的第3天将编号分别为0002、0102、0502、1002、2002、3002的双孢菇片从冷藏室内取出，处理同上。
余下的样品每隔一天进行一次测定，方法同上。
直到测定完毕。
将样品从冷冻室内取出，用粉碎机进行粉碎（在此过程中动作要迅速以防止双孢菇发生褐变影响实验结果的测定）。
粉碎后的双孢菇再装入有相应编号的保鲜袋中放入冷冻室待用。
2.2.3过氧化物酶（POD）活性的测定酶液提取：取1g果肉，与50mmol/LPH5.5乙酸缓冲液（含0.8g/LPVPP）冰浴研磨后，定容至7mL，10000r/min离心20min（4℃），上清液即为酶液，用于酶活性的测定。
POD活性的测定[5Xu et al.2009]：0.5mL酶提液加2 mL8mmol/L愈创木酚（用50mmol/LPH5.5乙酸缓冲液配制），在30℃水浴中平衡5min，然后加入24mmol/L H2O2，摇匀，立即计时。
测定460nm处的增加值，每30s记录1次，记录5min。
以1min内A460nm增加为1个酶活力单位（U），POD活性表示为U·mg-1蛋白。
2.2.4多酚氧化酶（PPO）活性的测定酶液提取：同POD。
酶活性测定[6Zheng et al.2007]：0.05mL酶提液加入2.45mL100mmol/L邻苯二酚（50mmol/LPH5.5乙酸缓冲液配制），摇匀，立即计时。
测定398nm处吸光度值的增加值，每30s记录1次，记录5min。
以1min内A398nm增加0.01为1个酶活力单位（U），PPO活性表示为U·mg-1蛋白。
2.2.5总酚（TP）含量的测定标准曲线的制作：将没食子酸配成浓度为0.5mg/mL的标准液制作标准曲线。
酶液提取：称取1g果肉，加入8mL无水乙醇，90℃水浴10min，取出，冷却，4200r/min 离心10min。
上清液转入25mL容量瓶中，沉淀重复以上步骤在提取1次，合并上清液，用无水乙醇定容至25mL，即为样品液。
总酚含量的测定：取上述上清液0.5mL于试管中，加2.5mL福林试剂和2mL0.75％Na2CO3溶液，25℃水浴35min后测定760nm处吸光值，用蒸馏水做参比。
样品和对照敢各重复3次，取平均值，依据标准曲线计算样品的总酚含量。
2.2.6苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的测定酶液提取：1g果肉与10mL含5mmol/ L巯基乙醇的0.05mol/LPH8.5硼酸钠缓冲液和0.4％PVPP,冰浴研磨，10000r/min离心15min（4℃），上清液即为酶液。
硼酸-硼砂缓冲液（0.1mol/L）的配制：将两种母液混合后，用蒸馏水稀释至200mL。
母液A（0.2mol/L硼砂溶液）：称取19.07g硼砂（Mr=382.43）, 溶解，稀释至1000mL。
（硼砂已失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
）母液B（0.2mol/L硼酸溶液）：称取12.37g硼酸（Mr=82.04）,溶解，稀释至1000mL。
PH 0.05mol/L硼砂溶液/mL 0.05mol/L硼酸溶液/mL8.2 35 658.4 45 558.7 60 409.0 80 20苯丙氨酸解氨酶活性的测定：0.3mL酶提液、3mL0.05mol/LPH8.5硼酸钠缓冲液、0.7mL0.02mol/ L L-苯丙氨酸（0.05mol/LPH8.5硼酸钠缓冲液配制），总体积为4mL。
摇匀后置40℃水浴保温60min，加0.1mL5mmol/ LHCL终止反应。
以蒸馏水代替酶提液作为对照（调零），在290nm处测定吸光度值。