Stathmin与间隙连接蛋白26相互作用并在小鼠耳蜗表达

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缝隙连接蛋白43(Cx43)与神经炎症的研究进展

缝隙连接蛋白43(Cx43)与神经炎症的研究进展王亚楠【摘要】缝隙连接蛋白43 (connexin43,Cx43)是中枢神经系统(central nervous system,CNS)中含量最丰富的连接蛋白,主要分布于星形胶质细胞,以缝隙连接(gap j unction,GJ)和半通道(hemichannel,HC)的形式存在,分别介导细胞间和细胞与外环境间的信息交流.随着人口的老龄化,阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)、脑卒中及术后认知功能障碍等疾病的发生率越来越高,神经炎症是这些CNS疾病的一个共同特征,涉及到白细胞聚集、胶质细胞激活、炎性因子释放等,该过程需要高效的信息交流,研究表明Cx43在该过程中发挥着不可忽视的作用,主要表现为GJ抑制和HC活性增加并影响神经功能.本文重点综述Cx43与神经炎症的关系,为多种CNS疾病的治疗提供新的靶点.【期刊名称】《复旦学报（医学版）》【年(卷),期】2018(045)006【总页数】5页(P906-910)【关键词】缝隙连接蛋白43 (Cx43);神经炎症;缝隙连接;半通道【作者】王亚楠【作者单位】复旦大学附属中山医院麻醉科上海 200032【正文语种】中文【中图分类】R741随着人口的老龄化,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)、脑中风、术后认知功能障碍等疾病的发生率越来越高,神经炎症是这些中枢神经系统(central nervous system,CNS)疾病的一个共同特征。

近年来有较多研究发现缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)在神经炎症中起着重要的作用并且能够影响神经功能,但是其具体的作用机制还未确定。

本文基于已有的研究对Cx43与神经炎症的关系及其对神经功能的影响作一总结,为临床上CNS疾病的治疗提供新的思路。

缝隙连接蛋白43的结构及功能 1986年Paul克隆测序出第1个缝隙连接蛋白(connexin,Cx),至今在人类和鼠类中发现至少分别有20个和19个成员。

药物筛选生物技术方法考核试卷

7.生物技术药物筛选中，__________技术可以用于筛选和优化生物大分子药物。
8.药物筛选的__________阶段主要是对筛选出的先导化合物进行结构优化和活性评估。
9.__________是一种基于细胞的分析技术，可以用于药物筛选中的毒性评估。
10.__________技术可以用于药物筛选中的靶点发现和验证。
6.生物技术药物筛选仅限于蛋白质类药物。（√）
7.药物筛选中的先导化合物优化不需要考虑药物的药代动力学性质。（×）
8. NMR技术可以用于药物分子的结构鉴定和结合亲和力测定。（√）
9.在药物筛选中，所有的化合物筛选都是通过高通量筛选进行的。（×）
10.基因组学技术可以用于药物筛选中的靶点发现和验证。（√）
A. qPCR
B. RNAi
C. ChIP
D. Western Blot
三、填空题（本题共10小题，每小题2分，共20分，请将正确答案填到题目空白处）
1.药物筛选的生物技术方法中，__________技术可以用于研究蛋白质与配体之间的相互作用。
2.在高通量筛选中，常用的生物检测方法包括__________和__________。
标准答案
一、单项选择题
1. D
2. B
3. C
4. B
5. D
6. B
7. C
8. B
9. C
10. C
11. C
12. B
13. C
14. A
15. B
16. A
17. D
18. A
19. A
20. A
二、多选题
1. ABD
2. AB
3. BD
4. ABCD
5. ABC

噪声对小鼠耳蜗外侧壁缝隙连接蛋白Connexin26表达的影响

但未见明显浓集或断裂。结论噪声可下调小鼠耳蜗外侧壁Ｃｘ２６的表达，Ｃｘ２６可能参与了噪声性聋的发病
机制。
【关键词】噪声；耳蜗；Ｃｏｎｎｅｘｉｎ２６；ＷａｎｇＪｉｅ，ＺｈｕＱｉｎｇｃｈｕｎ，ＱｉｕＪｉａｎｈｕａ
（ＮａｖａｌＣｏｎｖａｌｅｓｃｅｎｔＺｏｎｅ，ＨａｎｇｚｈｏｕＳａｎａｔｏｒｉｕｍ，ＮａｎｊｉｎｇＭｉｌｉｔａｒｙ
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６ —７２９９．２０１３．０３．０１６
网络出版时间：２０１３ —３ —１１１０：０３网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／４２．１３９１．Ｒ．２０１３０３１１．１００３．０１３．ｈｔｍｌ
Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ，３１０００２，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃｏｎｎｅｘｉｎ２６ｉｎｏｆｍｉｃｅｃｏｃｈｌｅａｌａｔｅｒａｌｗａｌｌａｆｔｅｒｎｏｉｓｅ

细胞通讯-参考答案

细胞通讯-参考答案第五章细胞通讯一、填空题1.细胞通讯的方式有（分泌化学信号进行的通讯）（间隙连接通讯）和（细胞接触通讯）2. G蛋白的α亚基上有三个活性位点，分别是（鸟苷结合位点），（GTP酶活性位点），和（ADP核糖基化位点）。

3. 动物细胞间通讯是是通过连接的主要方式是(间隙连接),植物细胞的通讯连接方式是通过（胞间连丝）。

4. 钙调蛋白是由148个氨基酸组成的肽，有（四）个钙结合位点。

5. NAP是了解较多的一类肽类激素，它可以降低血压。

这类信号的传递需要通过第二信使（cGMP ）的放大作用，并产生两种效应：1)( 刺激肾分泌钠和水)；2)(诱发血管内壁平滑肌松弛).6. 细胞识别作用引起三种反应：1）（内吞作用）；2)(细胞粘着);3）(接触抑制).7. 根据参与信号传导的作用方式的不同，将受体分为三大类：1）（离子通道偶联受体）；2)( G蛋白偶联受体)；3）（酶关联受体）。

8. Gi是起抑制作用的G蛋白，作用方式是（Gi的α亚基与腺苷环化酶结合起抑制作用）。

9. Gs的α亚基和Gi的α亚基上都有细胞毒素ADP核糖基化位点，但结合的毒素是不同的，前者结合是（百日咳病毒），后者结合的是（霍乱毒素）。

10. 细胞外信号分子都有一个基本的功能：（与受体结合传递信息）。

11. 受体交叉是指（两种不同的受体除了与各自的配体结合外，还可以与对方的配体结合）。

12. 胞内受体一般有三个结构域：1）（与信号分子结合的C端结构域）；2）（与DNA结合的中间结构域）；3（活化基因转录的N 端结构域）。

13. 蛋白激酶C（PKC）有两个功能域：一个是（亲水生物催化活性中心），另一个是（疏水的膜结构域）。

14. 甘油二酯（DAG）可被（DAG激酶磷酸化成磷脂酸）而失去第二信使的作用，也可被（DAG激酶水解成单脂酰甘油）而失去第二信使的作用。

15. 从蛋白质结构看，蛋白激酶A是由（四个亚基）组成的，而蛋白激酶C是由（一条肽链）组成。

Stathmin在脑胶质瘤血管内皮细胞中的表达及意义

生堡煎经匡堂苤查至业笙！至旦箜墨鲞箜！至塑Ｑ些』盟璺塑堡亟旦曼鱼塑垒堕至鲤堡ｙＱ！：墨：№！！至．１２１３．·基础研究·Ｓｔａｔｈｍｉｎ在脑胶质瘤血管内皮细胞中的表达及意义刘晓东慕璐岩刘晓谦【摘要】目的观察Ｓｔａｔｈｍｉｎ及ＣＤｌ０５在脑胶质瘤血管内皮细胞中的表达，探讨其在脑胶质瘤血管形成中的作用。

方法用ＳＰ免疫组化法检测ｌＯ例正常脑组织和７８例脑胶质瘤血管内皮细胞中Ｓｔａｔｈｍｉｎ和ＣＤｌ０５蛋白表达，并通过检测肿瘤微血管密度（ＭＶＤ）分析肿瘤血管形成。

结果正常脑组织血管内皮细胞中Ｓｔａｔｈｍｉｎ和ＣＤｌ０５均无表达。

脑胶质瘤血管内皮细胞中二者均呈高表达；随着胶质瘤病理级别的增高，Ｓｔａｔｈｍｉｎ和ＣＤｌ０５表达上调，ＭＶＤ值增高，Ｓｔａｔｈｍｉｎ．ＭＶＤ和ＣＤｌ０５．ｍ与脑胶质瘤病理分级均成正相关（，－－ｏ．９１２，Ｐ＜０．０５；ｒ＝０．９３６，Ｐ＜Ｏ．０５）；且Ｓｔａｔｈｍｉｎ．ＭＶＤ和ＣＤｌ０５．ＭＶＤ之间也存在正相关（，－－－ｏ．９９６。

Ｐ＜０．０５）。

结论Ｓｔａｔｈｍｉｎ与ＣＤｌ０５在脑胶质瘤血管内皮细胞中均呈高表达，在肿瘤微血管形成过程起重要作用。

【关键词】Ｓｔａｔｈｍｉｎ；ＣＤｌ０５；血管内皮细胞；神经胶质瘤【中图分类号】Ｒ７３０．２６４【文献标识码】Ａ【文章编号】１６７１—８９２５（２００９）１２—１２１３—０４ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆＳｔａｔｈｍｉｎｉｎｈｕｍａｎｇｌｉｏｍａｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅＨｓＬＩＵＸｉａｏ－ｄｏｎｇｔＭＵＬｕ－－ｙａｎ，Ｌ，ｕＸｉａｏ－ｑｉａｎ．＊ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｇｅｒｙ，乃，动∞ＭｕｎｉｃｉｐａｌＰｅｏｐｌｅ＇ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＪｉｌｉｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｔｏｎｇｈｕａ１３４００１，ＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＬＩＵＸｉａｏ－ｑｉａｎ，Ｅｎｔａｉｌ：ｌｉｕｘｉａｏｑｉａｎ＠ｖｉｐ．１６３．ｃｏｍ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｓｔａｔｈｍｉｎａｎｄＣＤｌ０５ｉｎｈｕｍａｎｇｌＩｉｏｍａｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓａｎｄｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｉｒｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｒｏｌｅｓｉｎｇｌｉｏｍａａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ１１１ｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｓｔａｔｈｍｉｎａｎｄＣＤｌ０５ｉｎｔｈｅｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄｂｙＳＰｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｅｈｅｍｉｃａｌｓｔａｉｎｉｎｇｉｎ１０ｎｏｒｍａｌｃｅｒｅｂｒａｌｔｉｓｓｕｅｓａｍｐｌｅｓａｎｄ７８ｃａｓｅｓｏｆｇｈｏｒｌ瑚ｔ．Ｔｈｅｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙ（ＭＶＤ）ｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｔｕｎｌｏｌ－ａｎ＃ｏｇｅｎｅｓｉｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＮｏｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｓｔａｍｍｉｎａｎｄＣＤｌ０５Ｗａｓｆｏｕｎｄｉｎｔｈｅｎｏｒｍａｌｈｕｍａｎｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅ；ｗｈｉｌｅｈｉｇｈｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｂｏｔｈｓｔａｔｈｍｉｎａｎｄＣＤ１０５ＷａｓｓｈｏｗｅｄｉｎｔｈｅｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌＢｏｆｇｌｉｏｍａ．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｓｔａｔｈｍｉｎａｎｄＣＤｌ０５ａｎｄｔｈｅｖａｌｕｅｏｆＭＶＤｉｎｃｒｅａｓｅｄｆｏｌｌｏｗｉｎｇｔｈｅｒｉｓｅｏｆｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｇｒａｄｅｓｏｆｇｌｉｏｍａ；ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｉｎｅａｒｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗａｓｓｈｏｗｅｄｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｖａｌｕｅｓｏｆｓｔａｔｈｍｉｎ．ＭⅣＤａｎｄＣＤｌ０５·ＭＶＤａｎｄｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｇｒａｄｅｓｏｆｔｈｅｇｌｉｏｍａ（，－－－０．９１２，Ｐ＜０．０５；ｒ－－－０．９３６，Ｐ＜０．０５）；ｓｔａｔｈｍｉｎ－ＭＶＤａｎｄＣＤｌ０５．ＭＶＤｗｅｒｅａｌｓｏｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｉｖｅ（ｒ－－Ｏ．９９６．Ｐ＜Ｏ．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ’ｎｌｅＳｔａｔｈｍｉｎａｎｄＣＤｌ０５ｉｓｈｉｇｈｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｔｈｅｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｏｆｈｕｍａｎｇｌｉｏｍａ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇｉｔｓｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｔｕｍｏｒａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｓｔａｔｈｍｉｎ；ＣＤｌ０５；Ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ；Ｇ１ｉｏｍａ脑胶质瘤发病率占颅内原发性肿瘤的第一位。

微管解聚蛋白Stathmin与肿瘤相关性的研究进展

ｃａｌｌ
ｍａｌｉｇｎａｎｔｔｕｍｏｒｓ．Ｓｔａｔｈｍｉｎｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｓｉｏｎｔｈｅ
ａｆｆｅｃｔｔｈｅ
ｅｆｆｉｃａｃｙ
ｏｆａｎｔｉｍｉｅｒｏｔｕｂｕｌｅｄｒａｇｓ．Ｓｔａｔｈｍｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
ａｌｌ
ｉｍｐｒｏｖｅ
ｅｆｆｉｃａｃｙ
ｏｆｔｈｏｓｅａｎｔｉｍｉｃｍｔｕｂｕｌｅｄｒｕｇｓｉｎｍａｌｉｇｎａｎｔｃｅｌｌｓ．ＳｔａｔｈｍｉｎｇｅｎｅｐｒｏｖｉｄｅｓＳｔａｔｈｍｉｎ；Ｃｅｌｌｃｙｃｌｅ；Ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ；Ｔｕｍｏｒｔｈｅｒａｐｙ
中都可以检测到Ｓｔａｔｈｍｉｎ高表达。已有研究证实，Ｓｔａｔｈｍｉｎ蛋白的高表达能够影响某些作用于微管的化疗药物的疗效，抑制其表达可以提高这些药物的疗效。Ｓｔａｔｈｍｉｎ基因为肿瘤基因治疗提供了新的分子靶点。
【关键词】
Ｓｔａｔｈｍｉｎ；细胞周期；微管；肿瘤治疗文献标识码：Ａ文章编号：１００９—０４６０（２０１０）０７—０６５８—０４
ａｔｔｒａｃｔｉｖｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｔａｒｇｅｔｆｏｒｔｕｍｏｒｔｈｅｒａｐｙ．
【ＫｅｙＷｏｒｄｓ】
化疗是恶性肿瘤治疗的一种主要方法，然而其疗效目前仍存在明显的个体差异。但是目前临床上缺乏可以预测疗效的生物学指标来指导个体化治疗。Ｓｔａｔｈｍｉｎ蛋白是近年来研究较多的一个微管解聚蛋白，通过磷酸化调节自身活性从而影响细胞内微管系统动力平衡，这对细胞周期的变化起着重要作用。目前已知Ｓｔａｔｈｍｉｎ在多种恶性肿瘤中有高水平表达，其表达水平的高低对肿瘤发生、发展及肿瘤患者生存预后都有着重要影响。降低Ｓｔａｔｈｍｉｎ在恶性肿瘤的表达可以抑制肿瘤细胞的分裂、增殖，同时可以协同增加抗微管类肿瘤药物的疗效，这为肿瘤的治疗开辟了新的途径。

外周神经胶质细胞缝隙连接的表达与功能调控

外周神经胶质细胞缝隙连接的表达与功能调控摘要：缝隙连接是胞间通道的集合体，是相邻细胞间的跨膜通道。

连接蛋白Cx29、Cx32和Cx46在施万细胞中表达，Cx43在施万细胞和卫星胶质细胞中均有表达，并形成功能性的缝隙连接通道或半通道。

缝隙连接蛋白直接或间接参与细胞信号整合，借助连接蛋白磷酸化及定向突变研究，其分子调控机制逐步清晰施万细胞和卫星胶质细胞中连接蛋白及其磷酸化的阐明，有助于解释其在外周神经胶质中的表达与功能调控。

关键词：缝隙连接；施万细胞；卫星胶质细胞；连接蛋白；磷酸化缝隙连接（gap junction，GJ）是胞间通道的集合体，相邻细胞间的跨膜通道，对胞间小于lkD小分子物质转换起门控作用，例如离子、第二信使（Ca2+、1P3、cAMP和ATP）、营养盐和代谢物。

脊椎动物中，缝隙连接是由头对头锚定在一起的半通道（也称连接子）构成，每一半通道由6个连接蛋白（connexin，Cx）构成聚合体。

每一Cx包含4个跨膜区（Ml-M4）、两个胞外环和3个胞质区（分别是C-端、胞质环、N-端）。

截止目前，已报道小鼠基因组中有20个连接蛋白基因家族成员（命名为Cja/Cjb/Gje），人类基因组中有21个（命名为GJA /GJB/CJE），其中小鼠连接蛋白基因中有19个与人类的存在直系同源，且高度保守，因此，其表达产物均常以Connexin表示。

缝隙连接参与机体功能平衡、调节、再生和发展，如在增殖细胞、心脏细胞、肝细胞、视网膜细胞、晶状体细胞等生理功能中均扮演重要角色，在外周神经胶质中更是承担着核心调节功能。

外周神经胶质细胞主要包括施万细胞（Schwann cells，SCs）和卫星胶质细胞（satellite gliacells，SGCs）。

SCs包裹在轴突外层，SGCs分布在神经元周围。

SCs和SGCs在外周神经系统中，通过缝隙连接维持神经细胞稳态、促进突触形成以及神经信号调制。

例如，损伤介导的Cx43可塑性是调停神经敏化和放大疼痛反映的重要因素之一，Cx43抑制剂是神经损伤的镇痛剂。

【国家自然科学基金】_连接蛋白26_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140803

2008年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
科研热词错义突变酪氨酸激酶-3配体载体补髓生血颗粒缝隙连接26 纤维连接蛋白稳定细胞系真核表达癌,肝细胞慢性再生障碍性贫血基因表达人釉原蛋白上皮-间叶样表型转化 hbx
推荐指数 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
Байду номын сангаас
2012年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
科研热词重组蛋白sjlys-c 重组抗体质粒稳定性西维因表达载体荧光假单胞菌肌肉生长抑制素耳聋缝隙连接蛋白26 突变电转化生物活性猪海参溶菌酶感音神经性小鼠基因敲除噬菌体展示可溶性蛋白原核表达前肽分离纯化凋亡 slic gc含量
推荐指数 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2014年序号 1 2 3 4
2014年科研热词耳聋 ,感音神经性缝隙连接蛋白26 基因凋亡推荐指数 1 1 1 1
推荐指数 3 3 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2010年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
科研热词间隙连接突变酵母双杂交连接蛋白基因连接蛋白43 连接蛋白26(cx26) 表达胺碘酮肿瘤耳聋缝隙连接蛋白26 紧密连接突变体相互作用蛋白质毛细胞抗心律失常药扫描电子显微镜心肌梗死心动过速,室性听觉免疫组织化学免疫共沉淀 stathmin cx26 cldn6

stathmin在微管解聚与聚合中的作用

stathmin在微管解聚与聚合中的作用Stathmin是一种蛋白质，它在微管解聚与聚合中起着重要
的作用。

微管是细胞内的一种细胞骨架元件，主要由蛋白质分子组成，负责维持细胞结构的稳定性和参与多种细胞过程。

Stathmin通常作为微管动力蛋白，通过调控微管的动力学特性来影响细胞的形态和功能。

具体而言，Stathmin的主要作用是抑制微管的聚合。

当Stathmin结合到微管蛋白亚单体（如αβ-异二聚体）上时，它能够阻止蛋白质亚单体聚合成为微管。

这种抑制作用使得微管无法继续聚合，从而影响细胞的骨架结构和细胞内部的运输。

当Stathmin的表达水平增加时，微管的聚合过程被抑制，导致微管解聚增加。

这种现象在细胞增殖、迁移和分化等过程中表现明显。

Stathmin的调控还涉及到微管的动力变化，在细胞运动、有丝分裂和细胞极性形成等多个细胞过程中起着重要的作用。

它可以通过调节微管增长和解聚速率，控制微管的稳定性和动态重构。

Stathmin在微管解聚与聚合中的作用是通过抑制微管的聚合来影响细胞结构和功能。

它在细胞运动、增殖、分化和有丝分裂等过程中，调控微管动力学特性，发挥重要的生理功能。

对Stathmin的研究有助于进一步理解细胞骨架的动态变化以及与疾病发展的关联。

关于成骨肉瘤组织中stathmin基因的表达意义

关于成骨肉瘤组织中stathmin基因的表达意义论文网：【关键词】成骨肉瘤，关键词: Stathmin;原位杂交;成骨肉瘤摘要:目的明确stathmin基因在人成骨肉瘤组织有高表达并对其进行组织学定位. 方法用地高辛标记全长stath-min基因，原位杂交方法检测stathmin基因在45例人成骨肉瘤组织及10例正常组织中的表达情况. 结果在45例成骨肉瘤组织中有24例stathmin基因呈阳性表达（阳性率53%），阳性颗粒可见于胞质及胞核;10例正常组织中2例呈弱阳性表达，差异显著（P<0.05）. 结论 Stathmin基因在骨肉瘤中的高表达与骨肉瘤的发生、发展有重要的相关性，该基因有望成为人成骨肉瘤生物治疗中的重要靶基因.Keywords:stathmin;in situ hybridization;osteosarcomaAbstract:AIM To observe over expression of stathmin gene and its localization in the tissue of osteosarcoma.METHODS The over expression of the stathmin gene was determined in45osteosarcoma specimens by insitu hybridiza-tion with Digoxigenin labled full length stathmin gene which were amplified from K562cells by RT-PCR method.RESULTS Over expression of stathmin gene was observed in24cases of osteosarcoma tissue（positive rate，53%）and positive signal was observed in both cytoplasm and nuclear.Among10cases of normal tissue，only2showed weak posi-tive signal.There was significant difference in expression of stathmin gene between osteosarcoma tissue and nomal tissue.CONCLUSION Over expreesion of stathmin gene may play a key role in the pathogenisis and development of osteosarco-ma.It may be a very important biotherapy target in the treat-ment of osteosarcoma.0 引言成骨肉瘤（osteosarcoma）是常见的恶性程度极高的骨源性肿瘤，5a存活率不足20%［1］ .Stathmin（又称Op18，p19，Prosolin及Metablostin）.是从淋巴瘤中筛选出的特征性表达基因［2］，我们应用RT-PCR方法首次在人成骨肉瘤SOSP-9607细胞系［3］中检测到stathmin基因高表达.我们应用地高辛标记的全长stathmin基因为探针，原位杂交（in situ hy-bridization，ISH）方法检测其在多种成骨肉瘤组织中表达情况.1 材料和方法1.1 材料本研究所手术取骨肉瘤组织标本45（男33，女12）例，年龄8～43岁，另选正常组织标本10例.标本经40g・L-1 甲醛固定，石蜡包埋，厚5μm连续切片，病理确诊，骨母细胞型18例，软骨母细胞型13例，纤维母细胞型14例.1.2 方法全长stathmin基因的RT-PCR扩增:Trizol法提取K562细胞总RNA，反转录合成cDNA第一链（Gibico公司反转录试剂盒及说明），常规PCR扩增stathmin基因，所用引物如下（合成于上海博亚生物技术公司）:上游引物:5’-CAT ATG GCT TCT TCT GAT ATC CAG-3’;下游引物:5’-CTC GAG TTA GTC AGC TTC AGT CTC GTC-3’.PCR反应体系为:模板cDNA5μL，10×PCR缓冲液5μL，10mmol・L-1 dNTP2μL，10nmol・L-1-1 引物5μL及Taq DNA聚合酶1μL，加水至50μL，于94℃30s，58℃30s，72℃40s，反应35个循环.采用15g・L-1 低溶点琼脂糖凝胶电泳分离并回收PCR产物中480bp条带（Fig1）.探针标记:Digoxigenin标记盒购于德国Boehriger Mannheim公司，标记过程按说明书进行.所用杂交试剂为博士德公司试剂盒，杂交步骤按说明书进行.切片常规脱蜡至水，加5mL・L-1 过氧化氢甲醇液封闭内源性过氧化物酶，胃蛋白酶消化暴露核酸，每块组织切片分别滴加20μL杂交液（10mg・L-1 ）杂交过夜，滴加封闭液，加鼠抗地高辛抗体，分别滴加生物素化的羊抗鼠二抗和ABC复合物后DAB显色.常规脱水、透明、封片.对照实验分别用已知阳性的K562细胞甩片同步染色作为阳性对照;以PBS液替代抗地高辛抗体作为阴性对照.阳性对照为阳性，阴性对照为阴性.以细胞质或胞核呈棕黄色为阳性细胞，每例切片均至少观察5个具有代表性的高倍视野.图1 RT-PCR扩增全长stathmin基因电泳回收结果略统计学处理:以SVSTA统计软件进行χ2 检验.2 结果在骨肉瘤45例标本中24例stathmin基因呈过表达，阳性率53%，10例正常组织中仅2例呈弱阳性反应，阳性颗粒可见于胞质及胞核（Fig1，2）.Stath-min 基因在人成骨肉瘤组织和正常组织中的表达存在显著性差异（Tab1，P<0.05）.Stathmin基因在不同病理类型成骨肉瘤中的阳性表达率无显著差异（P>0.05，Fig3）.图2 －图3 略表1 不同病理类型成骨肉瘤组织中stathmin基因的表达略3 讨论微管相关蛋白（microtubule-associated pro-teins，MAPs）通过磷酸化和去磷酸化直接与MT结合调整其功能行为.MAPs磷酸化过程是在不同蛋白激酶作用下实现的，stathmin是这一过程中的重要调节因子［4］，是一种高度保守的细胞内蛋白，细胞周期过程中在胞外信号的介导下被蛋白激酶磷酸化.因此，抑制stathmin活性对细胞纺垂体形成至关重要，从而起到抑制细胞生长作用［5］ .骨肉瘤中存在多种癌基因及抑癌基因的改变已被众多研究所证实，但至今未见成骨肉瘤中有关stathmin基因表达异常的报道.我们首次应用RT-PCR证实了stathmin基因在成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中有高表达的基础上，进一步应用原位杂交方法检测了成骨肉瘤组织标本中该基因表达情况，结果显示在成骨肉瘤组织中该基因有较高的阳性表达率.提示部分成骨肉瘤的发生、发展可能与该基因表达异常有关.目前，临床肿瘤治疗中所用化疗药很多为通过干扰微管及微管蛋白之间动力平衡系统发挥抗肿瘤作用.联合应用意义更大.应用反义核酸抑制stath-min表达与化疗药物为同一分裂途经上不同位点的作用，因此可起到协同抗肿瘤效应.这一模式在乳腺癌治疗中已成功应用并收到良好的效果.我们研究结果可为今后骨肿瘤临床治疗药物选择提供理论依据.参考文献:［1］Fan QY.Current concepts and principples of treat for tumor of muscu-skeletal system ［J］.Di-si Junyi Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），1999;20（12）:1013-1016.［2］Zhong JS，Nelson M，Wang L.Indentification and chromosomal localizition of CTNNALI，a novel protein homoloous to alpha-catenin ［J］.Genmics，1998;54:149-154.［3］Yang DT，Fan QY，Zhang DZ.Establishing and characterizing a human osteosarcoma cell ［J］.Di-si Junyi Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），1998;19（3）:264.［4］Segerman B，Laarsson N，Mutational Analysis of Op18/Stath-min-Tubulin-interacting surfaces ［J］.J Biol Chem，2000;275:35759-35766.［5］Wallon G，Rappsilber J，Mann M.Model for stathmin/Op18binding to tubulin ［J］.EMBO，2000;19（2）:213-222.。

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Ｆｕｔｏａｎｔｒｃｉｎｏｔｔｉｔｃｎｎｘｎ６ａｄｔｘｅｓｏｎｈｎｃｉｎｌｉｅａｔｏｆｓａｈｍｎｗｉｈｏｅｉ２ｎｉｓｅｐｒｓｉｎｉｔｅｍｕｒｎｏｈｌａｉｅｃｃｅ
ｔｎｉｒｎｒｉｉｓｅｗｒｘｍｉｅｓｎｏ — ｉｎｍｕｉｅｂａｎｔｕｅｅｅａｎｄｕｉｇｃ — ｍｍｕｏｒｃｐｔｔｎｔｃｎｑｅ．ＴｅｅｐｅｓｏｆｔｅｉｔｒｃｉｇｏｓｉｎｐｅｉｉｉｅｈｉｕｓｈｘｒｓｉｎｏｎｅａｔａｏｈｎｐｏｅｎｉｒｅｃｃｌａｗｓｃｎｍｅｉＴ－ＣＲａｄＷｅｔｒｌｔｍｅｈｄ．ＲｅｕｔＳａｈｎｉｔｒｃｉｎｗｔｒｔｉｎｍｕｉｏｈｅａｏｆｄｗｔＲｎｉｈＰｎｓｅｎｂｏｔｏｓｓｌｓｔｔｍｉｎｅａｔｉｏｈＣＸ２ａｅｎｔｔｄｂｔｎＨＥ９ｅｌｎｎｍｕｉｅｂａｎｔｓｅｏｈｍｏｅｕｅｏｌｃｌｅｎｃｔｐａｍａｏ６ｗｓｄｍｏｓａｅｏｈｉＫ２３ｃｌａｄｉｒｎｒｉｉｕ．Ｂｔｌｃｌｓｃ－ｏａｉｄｉｙｏｌｓｆｒｓｓｚＨＥ９ｅｌ．ＳａｈｎａｓｘｒｓｅｎｍｉｅｃｃｌａＫ２３ｃｌｓｔｔｍｉｌｏｅｐｅｓｄｉｃｏｈｅ．ＣｏｃｕｉｎＴｈａａｉｄｃｔｈｔＳａｈｎｉｔｒｃｓｗｔｎｌｓｏｅｄｔｎｉａｅｔａｔｔｍｉｎｅａｔｉｈ
【要】目的摘
筛选和鉴定连接蛋白２ｃｎｅｉ２，Ｘ６６（ｏｎｘｎ６Ｃ２）的相互作用蛋白质，析其在小鼠内耳的表达，分
酵母双杂交技术筛选Ｃ２Ｘ６的相互作用蛋白质。体外真核细胞表达系统ＨＥ２３细胞在Ｋ９
ＹＡＮＧＺｏｇｃｕ，Ａ０Ｚ ’ ｈｎ－ｈｎＸＩｉＸＩＤｉｇｈａＥｎ－ｕ
ＤｐｒｅｔｆＯｏｒｎｏｇｎｅｄＮｃｕｅ，ｈｅｏｄＸｉｓａＨｏｉｌｆＣｎｒｌｏｔｎｅｉ，ｅａｔｎｔｌｙｇｌｙａｄＨａ－ｅｋＳｒｒｔＳｃｎａｙｓｔｅｔｕｈＵｉｒｔｍｏａｏｇｙｅｎｐａｏａＳｖｓｙ

【键词】ＳａｍｎＣ２；相互作用蛋白质；酵母双杂交；免疫共沉淀关ｔｔｉ；Ｘ６ｈ【图分类号】Ｒ３．，３９５中３９１Ｒ４．６【文献标识码】Ａ【章编号】１７－９２２１）１０１０文６２２２（０００－５－６
Ｃａｇｈ１０１Ｃｈｎｈｎｓａ４０１，ｉａ
【ｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｃｅｎａｄｉｅｔｐｏｉｓｉｔａｔｇｗｔＸ６ａｄｔｔｄｅｒｘｒｓｉｓｎｔｅＡｓｃ】ｊｃｉｏｓｒｅｎｄｎｉｒｔｎｅｃｎｉＣ２ｎｓｙｔｉｅｐｅｓｎｒｖ￣ｅｎｒｉｈｏｕｈｏｉｈ
探讨与听觉的关系。方法
内过表达人Ｃ２Ｘ６和相互作用蛋白质，观察它们的定位，用免疫共沉淀实验观察在体外真核细胞中是否存在相并互作用。进一步在小鼠脑组织中用免疫共沉淀方法验证Ｃ２Ｘ６和相互作用蛋白质在真核生物体内的相互作用。逆转录聚合酶链反应（ｅｅｓａｓｒｔｎｐｌｍｒｓｈｉｒａｔｎＲ — Ｃ和蛋白质印迹法（ｓｒｌ）析相Ｒｖｒｔｎｃｉｉｏｅａｅｃａｎｅｃｏ，ＴＰＲ）ｅｒｐｏｙｉＷｅｔｎｂｏ分ｅｔ
ｙａｔｔｙｒｄｔｃｎｑｅＴｅＣ —ｏａｉａｉｎｏＸ２ｎｎａｄｄｔｒｔｉ（ｔｔｍｉ）ｐｏｕｅｒｍｈｅｓｅｓｗｏｈｂｉｅｈｉｕ．ｈＯｌｃｌｔｆＣ６ａｄｏｅｃｎｉａｅｐｏｅｎｓａｈｎｒｄｃｄｆｏｔｅｙａｔｚｏ
ｔｈｂｒｄｃｅｅｉｉｅｏｅｕｅｐｒｓｉｎｙｓｅｗｏｙｉｓｒｎｎｇｎｘｇｎｏｓｘｅｓｏｓｔｍＨＥＫ２９ｃｌｓ３ｅｌｗｅｅｅｔｄｕｉｇｏｆｃｌｒｔｓｅｓｎｃｎｏａｍｉｒｓｏｙｎｉｃｏｃｐａｄｍ— ｍｕｆｕｒｓｅｅｔｃｉｕｅ．ＴｈｅｉｔｏｉｔｒｃｉｎｅｏｇｎｏｓｅｐｅｓｏｎｓｓｅＨＥＫ２ｅｌｎｄｉｉｏｉｅａ — ｎｏｏｅｃｎｃｅｈｎｑｓｌｎｖｉｎｅａｔｒｏｎｉｘｅｕｘｒｓｉｙｔｍ９３ｃｌｓａｎｖｖｎｔｒｃ
中华耳科学杂志２１００年第８卷第１期
・５１・
确阕
Ｓａｍｎ与间隙连接蛋白２相互作用并在小鼠ｔｈｉｔ６耳蜗表达
杨中纯肖自安谢鼎华
４０１）１０１中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉一颈外科（头长沙
ｍｕｉｅｏｈｌａｒｎｃｃｅ．ＭｅｈｏｓＰｏｅｎｓｔｄｒｔｉｐｏｅｔａｌａｂｅｆｉｔｒｃｉｇｗｉｈＣＸ２ｗｅｅｓｒｅｎｄｎｉｎｉｉｄｂｙｈｅｔｎｉｌｙｃｐａｌｏｎｅａｔｎｔ６ｒｃｅｅａｄｄｅｔｆｅｔ
互作用蛋白质在小鼠耳蜗的表达。结果酵母双杂交实验筛选和鉴定到ｓｔｍｎ与Ｃ２ｔｈｉａＸ６相互作用，者在体外过两
表达系统ＨＫ９Ｅ２３真核细胞中有共定位。疫共沉淀实验证实在体外真核细胞和真核生物体内存在相互作用，免而且ｓｔｍｉ小鼠耳蜗表达。结论ｔｈｎ在ａｓｔｍｎ与Ｃ２ｔｈｉａＸ６相互作用，且在小鼠耳蜗表达。并