藻蓝蛋白抑制血管平滑肌细胞过度增殖性管腔狭窄的机制研究_褚现明
山东省济南市市中区山东省实验中学2023-2024学年高二下学期5月期中生物试题(原卷版)
山东省实验中学高二下学期期中考试生物试题（2024.5.7）（考试时间：90分钟，满分100分）一、单项选择（本题共15小题，每题2分，共40分，每小题只有一个选项符合题目要求）1. 黏菌是一群类似霉菌的生物，在分类学上介于动物和真菌之间，形态各异，多营腐生生活，少数寄生在经济作物上，危害寄主，与念珠藻一样没有叶绿体。
下列有关黏菌和念珠藻的说法正确的是（）A. 黏菌和念珠藻完成生命活动所需的能量主要由线粒体提供B. 营寄生生活的黏菌合成蛋白质需要借助宿主细胞的核糖体来完成C. 黏菌和念珠藻在结构上最大的区别是有无以核膜为界限的细胞核D. 黏菌和念珠藻都没有叶绿体，只能利用现成的有机物来满足自身需要2. 项圈藻是固氮蓝藻中的一种，分裂产生的子代互相不脱离，连成蓝绿色念珠状群体，形似“项圈”而得名。
项圈藻的众多细胞中有极个别形状较大而无色的个体，称为异形胞，该异形胞具有固氮功能。
下列相关叙述正确的是（）A. 项圈藻呈蓝绿色是因为其叶绿体中含有叶绿素和藻蓝素B. 项圈藻细胞中不会出现DNA和蛋白质结合所形成的复合体C. 项圈藻细胞和低等绿色植物细胞分裂过程中都会出现纺锤丝D. 项圈藻中异形胞的形成是基因的选择性表达的结果3. 宫颈癌是由人乳头瘤病毒（HPV）引起的发病率较高的癌症之一。
2018年4月九价HPV疫苗批准进入我国，该疫苗能预防9种类型的HPV，建议接种年龄在16至26岁，半年内需进行3次注射。
下列叙述错误的是（ ）A. HPV侵入人体宫颈等细胞内才能增殖B. 九价HPV疫苗具有与9种HPV相似的抗原结构C. 注射疫苗后产生的细胞毒性T细胞能识别和消灭HPVD. 3次注射可获得大量的抗体和记忆细胞4. 下列操作和叙述正确的是（ ）A. 检测脂肪实验中，采用体积分数为75%的酒精洗去浮色B. 施用一定浓度的Mg2+溶液可能使桂花树泛黄的叶片变绿C. 显微镜下观察到某细胞质逆时针方向流动，实际上是顺时针方向流动D. 鉴定蛋白质和还原糖实验中，采用的氢氧化钠溶液的浓度不同，硫酸铜的浓度相同5. 植物的生长发育离不开水和无机盐，合理灌溉和合理施肥是农作物高产、稳产的保障，下列叙述正确的是（）A. 农作物的根细胞通过自由扩散的方式吸收水和无机盐B. 施肥和灌溉为农作物提供物质和能量以利于其生长C. 农作物根细胞中无机盐浓度的大小会影响细胞的吸水或失水D. 水和无机盐、多糖等物质结合成结合水，从而失去流动性和溶解性6. 不良饮食习惯会危害人体健康。
功能食品藻蓝蛋白的生理活性研究进展
功能食品藻蓝蛋白的生理活性研究进展郝帅;秦玉;王成涛【期刊名称】《食品与生物技术学报》【年(卷),期】2017(036)012【摘要】藻蓝蛋白是一种存在于蓝藻、螺旋藻细胞中的色素蛋白复合体,除了能够捕获光能为藻类细胞提供能量外,藻蓝蛋白还具有抗炎性、抗肿瘤、抗氧化等多种生理功能,全面了解和掌握藻蓝蛋白的生理调控功能以及作用机制对藻蓝蛋白的开发与利用有着重要的指导意义.作者以藻蓝蛋白的研究现状出发,分别从抗肿瘤、抗炎、抗氧化以及免疫调节活性几个方面对藻蓝蛋白的生理功能和作用机制进行了阐述,对藻蓝蛋白提取过程中关键瓶颈——藻毒素的去除方法进行了总结和分析,并进一步提出了研究藻蓝蛋白调控机制的新筛选方法.作者为深入研究藻蓝蛋白的调控机理以及进一步开发安全性药物提供参考.【总页数】8页(P1233-1240)【作者】郝帅;秦玉;王成涛【作者单位】北京工商大学北京食品营养与人类健康高精尖创新中心,北京100048;北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心,北京100048;北京工商大学北京食品营养与人类健康高精尖创新中心,北京100048;北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心,北京100048;北京工商大学北京食品营养与人类健康高精尖创新中心,北京100048;北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心,北京100048【正文语种】中文【中图分类】R151.1;R282.77【相关文献】1.藻蓝蛋白生理活性及作用机制研究进展 [J], 赵艳景;胡虹;王颖2.螺旋藻藻蓝蛋白生理活性的研究进展 [J], 郝玮;潘岭3.第八届食品科学国际年会暨第十六届美国功能食品中心国际会议第四届美国功能食品和生物活性物学会国际论坛功能食品和生物活性物的研究与应用食品质量与安全控制技术研究通知(第一轮) [J],4.第八届食品科学国际年会暨第十六届美国功能食品中心国际会议第四届美国功能食品和生物活性物学会国际论坛功能食品和生物活性物的研究与应用食品质量与安全控制技术研究通知(第一轮) [J],5.第八届食品科学国际年会暨第十六届美国功能食品中心国际会议第四届美国功能食品和生物活性物学会国际论坛功能食品和生物活性物的研究与应用食品质量与安全控制技术研究通知(第一轮) [J],因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
2024年藻蓝蛋白市场前景分析
藻蓝蛋白市场前景分析简介藻蓝蛋白是一种从蓝藻中提取出的天然蛋白质，具有丰富的营养价值和广泛的应用前景。
随着人们对健康饮食和营养补充品的需求日益增长，藻蓝蛋白作为一种天然、高蛋白质的产品，受到了市场的广泛关注。
本文旨在分析藻蓝蛋白市场前景，并探讨其潜在的发展机会和挑战。
市场需求1.健康饮食趋势：健康饮食已经成为现代生活方式的重要组成部分，人们越来越注重摄入高质量蛋白质的重要性。
藻蓝蛋白作为一种天然、健康的蛋白质来源，符合现代消费者对健康食品的需求。
2.蛋白质补充品市场增长：随着健身和运动成为大众生活的一部分，对蛋白质补充品的需求不断增长。
藻蓝蛋白作为一种高纯度和易消化吸收的蛋白质来源，有望在健身和运动市场中获得广泛应用。
3.素食主义者增加：随着人们对动物保护和可持续发展的关注增加，越来越多的人选择素食主义。
藻蓝蛋白作为一种植物性蛋白质，可以满足素食主义者对蛋白质需求的同时避免动物来源的蛋白质。
市场规模和增长趋势1.藻蓝蛋白市场规模：根据市场研究报告，全球藻蓝蛋白市场从2019年的1.5亿美元增长到2025年的3.5亿美元，年均复合增长率达到10％。
这显示了藻蓝蛋白市场的迅速增长势头。
2.应用领域多样化：藻蓝蛋白广泛应用于食品和饮料、保健品、医药和化妆品等领域。
随着人们对高蛋白质食品和功能性食品需求的增加，藻蓝蛋白在食品和保健品领域的应用有望进一步扩大。
3.新产品开发：与传统的蛋白质来源相比，藻蓝蛋白具有许多优点，例如易消化吸收、良好的营养价值和储存稳定性。
这为藻蓝蛋白在新产品开发方面带来了更大的潜力，例如能量棒、蛋白质饮料等。
发展机会和挑战1.增加供应链可持续性：藻蓝蛋白的市场发展需要一个稳定的、可持续的供应链。
由于对藻类的采集和提取技术要求较高，供应链的建立面临一定的挑战。
开发可持续的藻类生产技术和提取技术是未来市场发展的关键。
2.提高产品质量和安全性：藻蓝蛋白市场的成功与产品的质量和安全性息息相关。
钝顶螺旋藻藻蓝蛋白诱导HeLa细胞凋亡的分子机制研究
钝顶螺旋藻藻蓝蛋白诱导HeLa细胞凋亡的分子机制研究李冰;褚现明;高美华;张学成【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2009(25)8【摘要】目的探讨钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)藻蓝蛋白(C-phycocyanin,CPC)对体外人宫颈癌细胞(HeLa细胞)凋亡的影响及分子机制.方法首先通过MTT法检测藻蓝蛋白对HeLa细胞增殖的影响,然后通过电镜观察藻蓝蛋白处理后的细胞的凋亡形态,琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA结构变化,流式细胞仪显示不同浓度藻蓝蛋白对HeLa细胞的细胞周期变化的影响,免疫组化法检测藻蓝蛋白对细胞表面凋亡相关基因表达的影响,检测凋亡相关的caspase的活性及细胞色素C的释放,以揭示藻蓝蛋白诱导HeLa细胞凋亡的作用机制.结果与未用藻蓝蛋白作用的对照组相比,藻蓝蛋白组的HeLa细胞存活率明显降低,并存在浓度剂量效应.藻蓝蛋白处理后的细胞呈现典型的凋亡形态,如细胞皱缩、细胞膜微绒毛消失、起泡,染色体密集,形成凋亡小体.凋亡细胞的DNA出现断裂,呈梯状的电泳带(DNA ladder),分子量为180～200 bp及其倍体.并且发现藻蓝蛋白处理后的处于亚二倍体峰HeLa细胞数蛋白浓度随藻蓝蛋白浓度的增高而明显增多.另外藻蓝蛋白能促进HeLa细胞内促凋亡基因(Fas、ICAM-1)的表达并抑制抗凋亡基因(Bcl-2)的表达,从而促进细胞内凋亡信号的传导.藻蓝蛋白可以激活caspase酶并可促进凋亡蛋白--细胞色素C从线粒体到细胞质释放.结论钝顶螺旋藻藻蓝蛋白具有诱导体外HeLa细胞凋亡的作用,通过促进凋亡信号在HeLa细胞内的传导从而达到抗肿瘤的效果.【总页数】6页(P1045-1050)【作者】李冰;褚现明;高美华;张学成【作者单位】青岛大学医学院生物学教研室,山东,青岛,266012;青岛大学医学院附属医院心内科,山东,青岛,266000;青岛大学医学院生物学教研室,山东,青岛,266012;中国海洋大学海洋生命学院,山东,青岛,266003【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R329.24;R329.25;R737.330.22;R977.6【相关文献】1.天花粉蛋白诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的分子机制研究 [J], 黄益玲;胡火军;黄利鸣;李红军2.蛇床子素诱导HeLa细胞凋亡的作用机制研究 [J], 赵晓娟3.大戟苷诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究 [J], 张德莉;李晓强;白银亮;何荣霞;吕银凤;文惠方;魏丽4.桔梗皂苷-D诱导Hela细胞凋亡的作用及机制研究 [J], 马琳琳;何慧;张世科;李威5.As_4S_4诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及相关分子机制研究 [J], 尹伶;濮德敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
211188572_藻蓝蛋白对环磷酰胺致小鼠肝肾损伤的保护作用
李新月，赵猛，丁子康，等. 藻蓝蛋白对环磷酰胺致小鼠肝肾损伤的保护作用[J]. 食品工业科技，2023，44（10）：379−386. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022080069LI Xinyue, ZHAO Meng, DING Zikang, et al. Protective Effect of Phycocyanin on Cyclophosphamide-induced Immunocompromised Mice[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(10): 379−386. (in Chinese with English abstract). doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022080069· 营养与保健 ·藻蓝蛋白对环磷酰胺致小鼠肝肾损伤的保护作用李新月，赵 猛，丁子康，王晓梅，王瑞俊，张忠山*（湖州师范学院生命科学学院，浙江省水生生物资源养护与开发技术研究重点实验室，浙江湖州 313000）摘 要：目的：研究藻蓝蛋白对环磷酰胺诱导小鼠肝肾组织损伤的保护作用，为评价肝肾治疗药物提供新的研究思路。
方法：雌性BALB/c 小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组以及藻蓝蛋白低、中、高剂量组。
采用腹腔注射环磷酰胺后建立小鼠肝肾损伤模型，然后空白组和模型组小鼠灌胃生理盐水，样品组给予不同剂量藻蓝蛋白溶液（50、100、200 mg/kg ），阳性对照组灌胃盐酸左旋咪唑（40 mg/kg ），灌胃时间5 d 。
采用试剂盒法分别测定各组小鼠血清中的白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤因子-α（TNF-α）和免疫球蛋白（IgG ）、超氧化物歧化酶（SOD ）、丙二醛（MDA ）水平；肝组织的超氧化物歧化酶（SOD ）、丙二醛（MDA ）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px ）、天冬氨酸氨基转移酶（AST ）、谷丙转氨酶（ALT ）；及肾组织的超氧化物歧化酶（SOD ）、丙二醛（MDA ）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px ）、尿酸（UA ）、尿素氮（BUN ）水平并观察小鼠肝脏、肾脏组织形态学变化。
藻蓝蛋白
功效
藻蓝蛋白可以帮助调节、合成人体代谢所需要的多种重要的酶，对抑制癌细胞的生长和促进人体细胞再生、 保养卵巢、促进人体内合成弹力蛋白具有重要作用，同时藻蓝蛋白调节人体免疫系统，增强免疫系统功能，提高 人体对疾病的抵抗力。因此，藻蓝蛋白被食品专家形象地誉为“食物钻石”。它在以下方面具有很好的效果。
FPC用于荧光探针具有以下优点： （1）在较宽光谱范围内有较高吸收系数； （2）在较宽的PH范围内有较高的荧光产率； （3）它们的荧光不因其它生物分子的存在而消失； （4）有较好的水溶性； （5）液体或固体状态存在时都极为稳定，且能保存较长时间。 FPC作为标记物，与生物素、亲和素、DNA分子和各种单克隆抗体结合制成荧光探针，其应用领域主要包括荧 光显微检测、荧光激活细胞分类、流式细胞荧光测定、荧光免疫检测、双色或多色荧光分析以及单分子检测等。
性状
蓝色颗粒或粉末，属蛋白质结合色素，因此具有与蛋白质相同的性质，等电点为3.4。溶于水不溶于醇和油 脂。对热、光、酸不稳定。在弱酸性和中性下稳定（pH4.5~8），酸性时（pH4.2）发生沉淀，强碱可至脱色 。
应用
藻蓝蛋白的应用研究很广泛，可归纳以下几方面：
(1)天然食用色素：藻蓝蛋白是水溶性色素，无毒，纯蓝，清亮可爱，可作为食品着色剂、化妆品的添加剂。
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1、抗癌细胞、抗肿瘤。
藻蓝蛋白已被证明能抑制癌症细胞扩展。科学家研究发现，藻蓝蛋白有明显抑制癌细胞的功能。可以制成抗 肿瘤的辅助治疗药物，用以化疗的辅助治疗可增强机体的免疫力。在一项科学实验中，用提取的藻蓝蛋白喂养有 肝癌的大鼠发现：经过藻蓝蛋白喂养的大鼠成活率比对照组高得多，在5星期后，治疗组大鼠有90%活下来，而未 治疗组只成活25%，8星期后，治疗组有25%的大鼠活下来，未治疗组的大鼠都死了。这说明口服藻蓝蛋白可以提 高患有癌症的生物的成活率。
规模化制备藻蓝蛋白工艺技术研究进展
规模化制备藻蓝蛋白工艺技术研究进展
邵明飞;赵楠;刘冰;秦松
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2013(039)002
【摘要】藻蓝蛋白作为蓝色天然色素蛋白,具有抗氧化、清除体内自由基、增强机体免疫力、抗炎、保肝护肝等生理功能及高效的荧光特性,被广泛应用于食品、化妆品、医药、分子探针等领域.现今制约藻蓝蛋白大规模商业化生产的主要原因是没有稳定、高效、经济的制备工艺.文中综述了近几年藻蓝蛋白制备工艺中发展较快、实用性较强的工艺技术,并在此基础上提出了一种工艺方案.
【总页数】5页(P135-139)
【作者】邵明飞;赵楠;刘冰;秦松
【作者单位】中国科学院烟台海岸带研究所生物资源实验室,山东烟台,264003【正文语种】中文
【相关文献】
1.螺旋藻藻蓝蛋白的规模化提取和色谱纯化技术研究进展 [J], 吴蕾;庞广昌;陈庆森
2.铌酸钾钠基无铅压电陶瓷的制备工艺技术研究进展 [J], 冯莎莎;李方旭;肖定全
3.环己烷氧化制备环己酮工艺技术及研究进展 [J], 戚品豹;孙永成;陈英斌;赵思远
4.甘氨酸制备和提纯工艺技术及研究进展 [J], 王向龙;龚文照;赵广;张伟;贾晨;袁秋华;冯志武
5.氧化铜纳米材料制备工艺技术及应用研究进展 [J], 常敬先;吴娜娜;闫四海
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《基于RNA-Seq技术分析藻蓝蛋白对自然衰老小鼠卵巢功能恢复的机理研究》范文
《基于RNA-Seq技术分析藻蓝蛋白对自然衰老小鼠卵巢功能恢复的机理研究》篇一一、引言随着人口老龄化问题日益突出，研究如何延缓卵巢功能衰退，提高老年女性生活质量已成为科研领域的重要课题。
藻蓝蛋白作为一种天然的生物活性物质，其具有抗氧化、抗衰老等生物活性，被认为对卵巢功能恢复具有潜在的作用。
本研究利用RNA-Seq技术，深入探讨藻蓝蛋白对自然衰老小鼠卵巢功能恢复的机理。
二、材料与方法1. 材料（1）实验动物：选用自然衰老小鼠作为研究对象。
（2）藻蓝蛋白：购买自正规生物制品公司，纯度较高。
（3）RNA-Seq技术：用于检测小鼠卵巢组织中基因表达的变化。
2. 方法（1）分组与处理：将小鼠分为对照组和实验组，实验组小鼠给予藻蓝蛋白处理，对照组则不作处理。
（2）卵巢组织收集：处理一段时间后，收集小鼠卵巢组织。
（3）RNA提取与测序：提取卵巢组织中的RNA，进行RNA-Seq测序。
（4）数据分析：对测序结果进行生物信息学分析，比较两组间基因表达差异。
三、结果与分析1. 基因表达差异分析通过RNA-Seq技术，我们发现在实验组小鼠卵巢组织中，有大量基因的表达发生了改变。
其中，与抗氧化、抗炎、细胞增殖和凋亡等相关的基因表达明显上调，而与衰老相关的基因表达则明显下调。
这表明藻蓝蛋白可能通过调节这些基因的表达，从而发挥其对卵巢功能的恢复作用。
2. 信号通路分析进一步分析发现，藻蓝蛋白处理的实验组小鼠卵巢组织中，与PI3K/Akt、MAPK等信号通路相关的基因表达发生了明显变化。
这些信号通路在细胞生长、增殖、存活和凋亡等过程中发挥重要作用，可能与藻蓝蛋白对卵巢功能的恢复有关。
3. 生物学功能验证为了进一步验证RNA-Seq结果的可靠性，我们通过Western blot、PCR等方法检测了部分关键基因和蛋白的表达情况。
结果表明，RNA-Seq结果与生物学功能验证结果基本一致，进一步证实了藻蓝蛋白对自然衰老小鼠卵巢功能恢复的作用。
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sis were analyzed．Results Pulsatilla saponin induced hemolysis in a concentration-dependent manner in the tested concentrations ranging from0.5mmol·L－1to2 mmol·L－1．The hemolytic rate was increased and the time needed for inducing hemolysis was shortened as the concentration of pulsatilla saponin was raised．The chloride channel blockers，NPPB and tamoxifen facili-tated the hemolysis induced by pulsatilla saponin．Compared with pulsatilla saponin alone，application of pulsatilla saponin together with the chloride channel blockers elevated the hemolytic rate and decreased the time to cause complete hemolysis．Conclusions Pul-satilla saponin can induce hemolysis concentration-de-pendently．Chloride channel blockers play a synergistic reaction in the process of pulsatilla saponin-induced hemolysis．Key words：pulsatilla；pulsatilla saponin；erythro-cytes；hemolysis；chloride channels；chloride channel blockers网络出版时间:2012－9－1810:16网络出版地址:http://www．cnki．net/kcms/detail/34．1086．R．20120918．1016．201210．1383_013．html藻蓝蛋白抑制血管平滑肌细胞过度增殖性管腔狭窄的机制研究褚现明1，2，冷敏1，安毅1，李冰3，李丹1，李永红1，徐庆科1，李健1 (1．青岛大学医学院附属医院东区心内科，山东青岛266100;2．北京大学人民医院心脏中心，北京100044;3．青岛大学医学院生物学教研室，山东青岛266012)doi：10．3969/j．issn．1001－1978．2012．10．013文献标志码：A文章编号：1001－1978（2012）10－1383－06中国图书分类号：R-332；R322．74；R329.24；R543；R977.6摘要：目的联合体内外实验，探讨钝顶螺旋藻藻蓝蛋白（C-PC）抑制血管平滑肌细胞过度增殖、血管损伤后内膜增生和管腔狭窄的作用和机制。
方法培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞，用不同浓度的藻蓝蛋白进行干预，用氚标记胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）参入率检测血管平滑肌细胞DNA合成和增殖状态，用Western blot和图像分析方法检测细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子P21、P27的表达。
构建大鼠胸主动脉球囊损伤后再狭窄动物模型，用藻蓝蛋白进行灌胃干预，术后14d取胸主动脉应用HE染色、免疫组化和计算机图像分析仪进行形态学、肌动蛋白（SM-α-actin）、增殖细胞核抗原（PCNA）、P21、P27表达水平检测。
结果胎牛血清诱导的血管平滑肌细胞增殖活跃，P21、P27低表达；藻蓝蛋白明显促进P21、P27蛋白表达，明显抑制胎牛血清诱导的血管平收稿日期：2012－05－02，修回日期：2012－07－01基金项目：国家自然科学基金项目（No81001346，81071246）；山东省医药卫生科技发展计划面上项目（No2011HZ023）；青岛市公共领域科技支撑计划项目〔No2012-1-3-5-（4）-nsh〕；青岛市医药卫生科技发展项目（No2007WSZD076）作者简介：褚现明（1978－），男，博士，主治医师，研究方向：动脉粥样硬化性疾病的新药防治，E-mail：chuxianming@med-mail．com．cn；李冰（1980－），女，博士，副教授，硕士生导师，研究方向：藻蓝蛋白抗肿瘤及血管增殖性疾病，通讯作者，E-mail：libing_516@yahoo．com．cn 滑肌细胞增殖和DNA合成。
大鼠胸主动脉球囊损伤后，平滑肌细胞向内膜迁移、过度增殖、形成明显的新生内膜，导致管腔狭窄，SM-α-actin免疫组化证实新生内膜富含平滑肌细胞，PCNA高表达的同时P21、P27处于低表达水平；藻蓝蛋白干预后明显促进P21、P27基因表达，下调PCNA表达，抑制新生内膜形成、病理性血管重构，从而明显抑制管腔狭窄。
结论钝顶螺旋藻藻蓝蛋白具有抑制血管平滑肌细胞过度增殖、血管损伤后管腔狭窄的作用，其机制与促进细胞周期关键调节因子P21、P27基因表达有关。
关键词：藻蓝蛋白；血管平滑肌细胞；P21；P27；细胞周期；球囊损伤；再狭窄血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）的过度增殖是动脉粥样硬化（atherosclero-sis，AS）和冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention，PCI）后再狭窄（restenosis，RS）等血管增殖性疾病的主要病理机制［1－3］。
细胞增殖必须通过细胞分裂周期进行，因此，细胞分裂周期是各种刺激因子诱导VSMCs增殖的最终共同通路；P21、P27作为细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子（CKIs）对细胞周期起负性调控作用，是细胞周期调控的关键因子，而增殖细胞核抗原（proliferation cell nuclear anti-gen，PCNA）可作为反映细胞增殖程度的可靠指标，表达越多说明增殖能力越强，反之亦然［4－6］。
寻找更高效、低毒的防治动脉粥样硬化等血管·3831·中国药理学通报Chinese Pharmacological Bulletin2012Oct;28(10):1383 8增殖性疾病的药物仍是当今医学研发的焦点。
目前，纯天然药物或海洋药物以其独特的疗效和廉价、低毒的特点备受关注，蕴育着巨大开发潜力。
螺旋藻（spirulina platensis）具有独特的保健和药用价值，联合国粮农组织称之为“21世纪的超级保健食品”。
螺旋藻富含藻蓝蛋白（C-phycocyanin，C-PC），含量达60% 70%。
分离纯化的藻蓝蛋白具有水溶性、安全、无毒的特点。
研究表明藻蓝蛋白具有抑制癌细胞生长、调节免疫的作用，同时具有改善血脂代谢、改善内皮功能，提示C-PC的抗动脉粥样硬化性增殖的作用［7－9］，但国内外尚缺乏相关实验研究。
本研究联合体内外实验，观察C-PC对大鼠VSMCs增殖、大鼠胸主动脉球囊损伤后新生内膜过度增生、血管重构和管腔狭窄的作用，检测C-PC对VSMCs DNA合成、细胞周期关键调节因子（PCNA、P21、P27）表达的调控作用，探讨C-PC抑制VSMCs 过度增殖、血管损伤后管腔狭窄的作用和关键机制。
1材料与方法1．1材料藻蓝蛋白由本课题组提取纯化获得（纯度为A620nm /A280nm=4.71）［10］；♂SD大鼠18只（北医动物中心）；DMEM培养基、胎牛血清（Gibco 公司）；胰蛋白酶（上海生物化学试剂公司）；氚标记胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）（中国科学院北京原子能研究所）；SP和SLABC试剂盒（北京中山生物技术公司）；DAB（武汉博士德公司）；肌动蛋白（SM-α-ac-tin）单克隆抗体、PCNA小鼠单克隆抗体、P21单克隆抗体、P27兔多克隆抗体（美国ZYMED）。
紫外分光光度计（日本岛津公司）；高速低温冷冻离心机3K30型（美国PE公司）；311型CO2孵箱（Forma 公司）。
2F球囊导管，OLYMPUS光学显微镜及全自动照相系统、VIDAS计算机图像分析系统。
1．2细胞实验1．2．1血管平滑肌细胞培养采用组织贴块法培养。
无菌操作下取出大鼠（Wistar大鼠，100 150 g，♂，约4周龄左右）胸主动脉，按组织贴块法将中层平滑肌组织块移入培养瓶，加入含10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养基，37ħ5%CO2培养箱内培养，倒置显微镜下观察组织块边缘细胞生长情况。
用胰蛋白酶消化后传代培养。
光镜下观察细胞呈典型的“峰-谷”表现，经肌动蛋白抗体免疫组化鉴定后，证实为VSMCSs，实验采用第4 8代细胞。
1．2．2实验分组对照组（control）：处于静止期的VSMCs；FBS组：加入20%FBS；藻蓝蛋白干预组（C-PC+FBS），分4个亚组：同时加入20%FBS和藻蓝蛋白（10、20、40、80mg·L－1）［7－9］。
每组设6个平行点样孔。
1．2．33H-TdR掺入率测定将VSMCs接种于96孔培养板上（1ˑ108·L－1），培养24h后换新鲜培养液，待细胞生长至80%融合时，弃去培养液，换用无血清DMEM培养液，饥饿培养细胞24h，使细胞同步化于G0期。
对照组每孔加100μl pH7.4 PBS，FBS组加入20%FBS，实验组每组每孔分别加入C-PC溶液（终浓度分别为10、20、40、80mg·L－1）。
干预同步化的VSMCs24h后再加入3H-TdR （3.7ˑ107Bq·L－1）孵育24h后，收集细胞并破碎细胞膜后放入闪烁杯中，加入闪烁液5ml，用液体闪烁计数仪测定其放射性强度。
1．2．4Western blot收获各组细胞，提取蛋白并定量，经12%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白后，用电转移至硝酸纤维素膜上，1%牛血清白蛋白封闭，洗膜后分别加兔抗P21、P27多克隆抗体（工作浓度1ʒ100）孵育1h，再度洗膜后加辣根过氧化酶（HRP）标记的羊抗兔IgG（工作浓度1ʒ200）孵育1 h，用DAB显色液显色1h，凝胶图像分析系统（VI-DAS21）上进行光密度（A值）扫描。
1．3动物实验1．3．1动物分组及处理选用体质量400 500g 的♂SD大鼠18只。
大鼠随机平均分为3组。
（1）藻蓝蛋白治疗组（C-PC）：行球囊损伤大鼠胸主动脉术，术前4d开始每天给予2ml C-PC（25g·L－1）［7－9］灌胃。