HPLC法同时测定槐角中4种黄酮苷元组分
HPLC法测定不同主产地黄芪饮片的4种黄酮的含量
HPLC法测定不同主产地黄芪饮片的4种黄酮的含量蒲清荣;黄锐;赵剑;明俊男;罗群;李静【摘要】目的采用HPLC法同时测定不同主产地黄芪饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的含量.方法色谱柱固定相为Inertsil ODS-SPC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-水(含0.2％甲酸),梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,紫外检测波长260 nm,柱温为40℃.结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素在0.00569 ～0.0569、0.00448 ～0.0448、0.00257～0.0257、0.00265～0.0265mg/mL时与色谱峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为98.72％、99.32％、100.03％、99.78％,RSD为1.06％、2.32％、2.86％、1.08％.结论该方法准确灵敏,可作为评价不同产地黄芪饮片的质量控制方法.【期刊名称】《云南中医中药杂志》【年(卷),期】2016(037)003【总页数】3页(P63-65)【关键词】黄芪饮片;毛蕊异黄酮葡萄糖苷;芒柄花苷;毛蕊异黄酮;芒柄花素;HPLC 【作者】蒲清荣;黄锐;赵剑;明俊男;罗群;李静【作者单位】四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000【正文语种】中文【中图分类】R284.2【Abstract】Objective: To determine the contents of calycosin-glucoside, ononin, calycosin and formononetin in Astragalus Pieces of different main origins by HPLC. Methods: Column stationary phase was Inertsil ODS-SPC18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm) and mobile phase was acetonitrile-water (containing 0.2% formic acid), by gradient elute, with 1.0 mL·min-1 of flow rate and 260 nm of ultraviolet detector wavelength, at 40℃ of column temperature. Results: The calycosin-glucoside, ononin, calycosin and formononetin showed a good linear relationship with chromatographic peak areas at the range of 0.00569-0.0569, 0.00448-0.0448, 0.00257-0.0257 and 0.00265-0.0265mg/mL. The average recovery was 98.72%, 99.32%, 100.03% and 99.78%, and RSD was 1.06%, 2.32%, 2.86% and 1.08%. Conclusion: The method is accurate and sensitive and can be valued as a quality control method for Astragalus Pieces of different origins.【Key words】Astragalus Pieces, calycosin-glucoside, ononin, calycosin, formononetin, HPLC黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao.或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。
槐花中黄酮类化合物提取、分离和鉴定
[适用对象] 中药国际交流、中药知识产权、中药制药工程、中药资源专业[实验学时]一、实验目地要求学习黄酮类化合物地提取、分离和检识，通过实验要求：（）了解沸水提取黄酮类化合物地原理和操作.（）了解由芸香苷水解制取槲皮素地方法.（）掌握黄酮类化合物地主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分地检识方法.二、实验原理由槐花中提取芸香苷地方法很多，本实验是根据芸香苷在冷水和热水中地溶解度差异地特性进行提取和精制.纸色谱地分离原理是利用各种化合物在流动相和固定相中分配系数地不同而达到分离目地.文档来自于网络搜索三、仪器设备烘箱、水浴锅、铁架台，烧杯，三角烧瓶，滤纸，试管，层析槽，毛细管等.四、相关知识点槐花为豆科植物槐 .地干燥花及花蕾，主要含芸香苷（芦丁），含量高达，水解生成槲皮素、葡萄糖及鼠李糖.文档来自于网络搜索芸香苷（），分子式 ，分子量，淡黄色针状结晶，178℃.难溶于冷水（﹕），略溶于热水（﹕），溶于热甲醇（﹕），冷甲醇（﹕），热乙醇（﹕），冷乙醇（﹕），难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚等，易溶于吡啶及稀碱液中.文档来自于网络搜索槲皮素（），分子式 ，分子量，黄色针状结晶，.314℃（分解）.溶于热乙醇（﹕），冷乙醇（﹕），可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶等，不溶于石油醚、苯、氯仿、乙醚中，几不溶于水.文档来自于网络搜索OO O H OH OHOHOR五、实验步骤（一）芸香苷、槲皮素和糖地纸色谱鉴定、点样：取新华一号色谱滤纸，规格 × ，在滤纸下端约 处用铅笔画一直线，间隔 分别点上下列样品或标准溶液：文档来自于网络搜索 （）糖样品溶液 （）标准葡萄糖溶液（）标准鼠李糖溶液 （）芸香苷样品甲醇溶液（）芸香苷标准品溶液 （） 槲皮素样品甲醇溶液（）槲皮素标准品溶液、展开剂：正丁醇醋酸水（﹕﹕）上层上行展开.、显色：展开完毕，将滤纸取出，记录溶剂前沿位置.待溶剂挥尽后，在（）与（）点之间剪开，分别显色.文档来自于网络搜索 （）糖地显色：喷苯胺邻苯二甲酸试剂，在105℃烘分钟，显棕色斑点.计算并比较样品和标准品地值.文档来自于网络搜索 （）黄酮化合物地显色：①可见光下观察色斑，紫外灯下观察荧光斑点.②经氨气薰后再观察.③待氨气挥尽后，喷甲醇溶液，再观察.④计算并比较样品与标准品地值.（二）芸香苷和槲皮素性质试验、酸性试验：取小试管支，每支一组，第一组每管中加入芸香苷，第二组每管中加入槲皮素，每组四管中分别加入稀氨水、碳酸氢钠水溶液、碳酸钠水溶液、氢氧化钠水溶液各，振摇后观察各管溶解情况.溶解地溶液应呈黄色.再加浓盐酸数滴酸化，黄色褪去或变浅，并有沉淀析出或产生混浊.文档来自于网络搜索、反应：取试样置小试管中，加乙醇溶解，加α萘酚试剂滴，摇匀.倾斜试管，沿管壁徐徐注入浓硫酸约静置.观察两层溶液地界面变化，出现紫色环者为阳性，表示样品分子中含有糖地结构（糖和苷类均呈阳性反应），比较芸香苷和槲皮素地不同.文档来自于网络搜索、试验：取试样数，溶于热水中，加斐林氏试剂甲、乙等量混合液，沸水浴上加热，如产生氧化亚铜地暗红色或黄色沉淀表示有还原糖或其它还原性物质.充分加热作用后滤去沉淀，滤液滴加浓盐酸酸化，在水浴上加热水解，水解液以中和，再进行斐林氏试验，此时显阳性反应者表示样品为糖苷化合物.比较芸香苷和槲皮素地不同.文档来自于网络搜索、盐酸镁粉反应：取芸香苷，加乙醇，在水浴上加热溶解，加镁粉约，滴加数滴浓盐酸，溶液由黄色渐变红色者表示有黄酮类化合物.以同法试验槲皮素.文档来自于网络搜索如用锌粉代替镁粉，则芸香苷（羟基与糖结合成苷）仍有作用，而槲皮素（黄酮醇类）不呈还原显色反应.因此可区别两者.文档来自于网络搜索、锆柠檬酸反应：取样品，加甲醇，在水浴上加热溶解，再加二氯氧锆甲醇溶液滴，凡有羟基或羟基地黄酮即呈鲜黄色.然后加柠檬酸甲醇溶液滴，有羟基地黄酮黄色不褪.比较芸香苷和槲皮素地不同.文档来自于网络搜索、三氯化铝反应：取样品溶于甲醇中，加三氯化铝甲醇溶液滴，黄酮类呈鲜黄色，并有荧光.文档来自于网络搜索六、实验报告要求应包括原理描述、实验流程、数据记录、解决问题地能力、实验结果、实验效果及建议等.七、思考题、检识黄酮类化合物地常用化学方法有哪些？、本实验中各种色谱地原理是什么？解释化合物结构与值地关系.、试讨论苷类成分地检识程序.八、实验成绩评定方法本门实验课程考核成绩占课程总成绩地％，该实验考核成绩占实验总成绩地％.考核分实验预习、实验过程操作、实验报告等三个方面，其成绩计算为预习实验占（包括原理描述、实验流程）、实验过程操作占％（包括数据记录、解决问题地能力）、实验报告占％（包括实验结果、实验效果）.文档来自于网络搜索。
RP_HPLC法测定葛根药对中四种黄酮类药效组分的含量_程京艳
时间（ min） 0 ～ 30 30 ～ 50 50 ～ 60
流动相 A（ % ） 20→35 35→ 65→40 40→30
2. 2 供试品溶液的制备 按照配伍比例计算出各药 对相应的剂量： 葛根 9 g，麻黄 6. 75 g，天花粉 18 g，升 麻 9 g，黄芩 3. 375 g，黄连 3. 375 g。精密称取各组药 对，加 10 倍量水煎煮 2 次，第 1 次 30 min，第 2 次 20 min，合并煎液，趁热过滤，滤液浓缩至每 1 mL 相当与 原药材 0. 1 g 的药液，分别取各药液 1 ～ 10mL 容量瓶 中，用甲醇稀释至刻度，离心，分出上清液，相对浓度为 0. 01 g·mL － 1 作为供试品溶液。 2. 3 标 准 溶 液 的 制 备 分 别 精 密 称 取 葛 根 素 6. 0 mg、3' － 羟基葛根素 3. 9 mg，大豆苷 6. 4 mg，大豆苷元 6. 1 mg，置于 100 mL 容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至 刻度，摇 匀，标 准 溶 液 浓 度 分 别 为 0. 060 mg · mL － 1 ， 0. 039 mg·mL － 1 ，0. 064 mg·mL － 1 、0. 061 mg·mL － 1 。 2. 4 线性关系考察 精密吸取 1 μL，5 μL，10 μL，15 μL，20 μL，药效组分标准溶液，按表 2 项下的色谱条 件测定 峰 面 积，以 峰 面 积 为 纵 坐 标，对 照 品 进 样 量 （ μg） 为横坐标，进行线性回归，得回归方程：
大豆苷元： y = 1781. 5x － 7. 2236，Ｒ2 = 0. 9997； 线 性范围： 0. 061 ～ 1. 22 μg 2. 5 精密度试验 精密吸取药效组分标准溶液 10 μL（ n = 5） ，按上述色谱条件测定，记录峰面积，ＲSD 分 别为 0. 90% 、0. 14% 、0. 45% 、0. 60% ，表 明 精 密 度 良 好，符合定量分析要求。 2. 6 稳定性试验 精密吸取葛根药对供试品溶液，分 别在放置 0 h、2 h、4 h、6 h、8 h 后，注入液相色谱仪，测 得 峰 面 积，ＲSD 分 别 为 0. 99% 、0. 45% 、1. 12% 、 1. 05% ，表明供试品溶液 8h 内性质稳定。 2. 7 重现性试验 精密吸取供试品溶液（ n = 5 ） ，按 表 1 项 下 所 列 色 谱 条 件 测 定 峰 面 积，ＲSD 值 分 别 为 0. 32% 、0. 17% 、0. 49% 、1. 59% ，表明本方法重现性良 好。 2. 8 回收率试验 精密吸取各药液 0. 5 mL（ 正常量 的 1 /2） ，分别精密加入 4 种对照品，按供试品溶液制
高效液相色谱法同时测定枳壳饮片中4种黄酮类化合物的含量
高效液相色谱法同时测定枳壳饮片中 4 种黄酮类化合 物的含量1
张宏武 1，封宇飞 2，邹忠梅 1
1 中国医学科学院中国协和医科大学，药用植物研究所，北京（100094） 2 卫生部北京医院药学部临床药理室，北京（100730）
E-mail: hongwu_zhang@
摘 要:建立高效液相色谱法测定枳壳饮片中柚皮芸香苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含
量。采用 SunfireC18 色谱柱（150mm×4.6mm，5µm），以乙腈-0．1％磷酸溶液（20：80） 为流动相，流速为 1mL·min-1，检测波长为 283nm，柱温为 30℃。结果：柚皮芸香苷、柚皮 苷、橙皮苷和新橙皮苷 4 个化合物分别在 0.074~123.7µg·mL-1；0.60~999.0µg·mL-1 ； 0.072~120.3µg·mL-1；0.59~982.0µg·mL-1 范围内线性良好，其平均回收率分别为 96.6%， 96.1%，96.0%，97.2%。该方法简便、快速、准确、重复性好，可用于枳壳中柚皮芸香苷、 柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的同时测定。 关键词:高效液相色谱法；枳壳；柚皮芸香苷；柚皮苷；橙皮苷；新橙皮苷
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Sunfire C18 色谱柱（150mm×4.6mm，5µm），以乙腈-0.1％磷酸溶液（20：80）为流动 相，流速为 1mL·min-1，检测波长为 283nm，柱温为 30℃。进样量为 10uL。在该色谱条件 下，柚皮芸香苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷均能达到基线分离。见图 1。
1 仪器与试药
Waters 2690 高效液相色谱仪（996-PDA 二极管阵列检测器,515 泵，Empower 工作站），AT201 型十万分之一电子天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公 司）；Millipore 超纯水机（美国 Millipore 公司）；柚皮芸香苷、柚皮苷、橙皮苷、 新橙皮苷对照品均为自制，经光谱分析和 HPLC 面积归一化法测定含量分别为 97.4%、 96.8%、97.8%、95.8%。乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。28 批麸炒枳壳样品购于全国 12 个不同省、市药店及不同的产地。所有样品由中国医科院药用植物研究所林余霖副研究 员鉴定，均为芸香科植物 Rulaceae 植物酸橙 Citrus aurantium L．及其栽培变种的干燥未成 熟果实。
HPLC法同时测定遍地金中4种黄酮类成分的含量
HPLC法同时测定遍地金中4种黄酮类成分的含量作者：邱海洋等来源：《湖北农业科学》2014年第16期摘要：建立同时测定遍地金（Hypericum wightianum）药材中槲皮素、槲皮苷、木犀草素、山奈酚含量的高效液相色谱分析方法。
采用Agilent Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，检测波长360 nm，柱温30 ℃，槲皮素、槲皮苷、木犀草素、山奈酚线性范围分别为0.078～2.340 μg、0.106～3.180 μg、0.04～1.200 μg、0.062～1.860 μg；遍地金中槲皮苷、槲皮素、木犀草素、山奈酚的含量分别为0.385%、0.022%、0.012%和0.111%，该方法简便快速、准确实用。
关键词：遍地金（Hypericum wightianum）；高效液相色谱法；槲皮素；槲皮苷；木犀草素；山奈酚中图分类号：O657.32；文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）16-3898-03Abstract：To simultaneously determine the contents of quercitrin，quercetin，luteolin and kaempferol in harb Hypericum wightianum， the samples were separated on the column of Kromasil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm） eluted with methanol and water（0.04% phosphoric acid）. The sample size was 10 μL. The wavelength uesd was 360 nm and column temperature was 30℃. The linear ranges of quercitrin， quercetin ，luteolin and kaempferol were 0.078-2.340 μg，0.106-3.180 μg， 0.040-1.200 μg and 0.062-1.860 μg， respectively. The contents of four flavonoids from seven different areas in Qinghai province and different organs were 0.385%，0.022%，0.012% and 0.111%. The method was rapid and accurate.Key words：Hypericum wightianum；HPLC；quercitrin；quercetin； luteolin；kaempferol金丝桃属植物在抗抑郁、抑制中枢神经、抗肿瘤和抗病毒[1-3]方面的突出作用，使得该属植物的研究受到国内外普遍关注[4]。
HPLC测定侧柏叶中异槲皮苷等4种黄酮含量
Western Journal o f Traditional Chinese Medicine,2020 Vol.33 No. 11 DOI: 10. 12174/j. issn. 1004-6852. 2020. 11. 11H P L C测走侧柏吋中异槲皮香等4种黄酮含量*王娟弟〃，马潇宋平顺u1甘肃省药品检验研究院中药材藏药检验研究室，甘肃兰州730071;2甘肃省中藏药检验检测技术工程实验室[摘要]目的：采用高效液相色谱法同时测定侧柏中杨梅苷、槲皮苷.异槲皮苷和穗花双黄酮的含量。
方 法：色谱柱为2〇1184\£(；1丨口56 01115-(；丨8(4.6贈1><25〇腦，54111)。
流动相为乙腈（4)-〇.1%碑酸溶液(8)。
梯度洗脱;检测波长：254 rnn;柱温：40X：;流速：1. 000 mL/min;进样量：10 pL。
结果：侧柏叶中杨梅苷含量为0. 407~2. 721 mg/g，槲皮苷含量为0. 096~4. 528 m g/g,异槲皮苷含量为0. 025~0. 254 m g/g,穗花双黄酮含量为0• 032~0. 768 mg/g。
结论:该方法简便、可行、重复性好，可作为侧柏叶的质量控制方法.[关键词]侧柏叶;杨梅苷;榭皮苷;异槲皮苷;穗花双黄酮；高效液相色谱[中图分类号]R284. 2 [文献标识码]A[文章编号]10〇4_6852 (2020) 11-0040-05 The Contents of Four Kinds of Flavone in Platycladus Orientalis Leaves Determined by H P LCWANG Juandi'2, MA Xiao12A, SONG Pingshun121 Lab for Traditional Chinese Medicinal Materials and Tibetan Medicine Testing,Gansu Institute for Drug Control, Lanzhou 730071, China;2 Gansu Provincial Engineering Lai) for Chinese and Tibetan Medicine Testing TechnologyAbstract Objective: To determine the contents of myricetin, quercetin, isoquercitrin and amentoflavone simultaneously by HPLC. Methods: Chromatographic column was ZORBAX Eclipse plus-C,8(4.6 mmx 250 mm, 5(Jim); mobile phase was acetonitrile (A)-O.l% phosphoric acid solution (B); gradient elution; detection wavelength:254nm, column temperature:40°C ;current velocity: 1.000 mL/min; sample size: 10 |xL. Results: The contents ofmyricetin were between 0.407 and 2.721 mg/g, the contents o f quercetin between 0.096 and 4.528 mg/g, the contentso f isoquercitrin between 0.025 and 0.254 mg/g, and the contents of amentoflavone between 0.032 and 0.768 mg/g.Conclusion: The method, simple, feasible and reproducible, could be used as quality control method of platycladusorientalis leaves.Keywords platycladus orientalis leaves; myricetin; quercetin; isoquercitrin; amentoflavone; HPLCpanulaceae):a review of phytochemistry,bioactivity and quality control[J].J Nat Med 2015,69 (1)：1-21. [6] LIU X H,LIU Y,SUN X W,et a 1.Quantitative determination of adenosine in codonopsis pi losula by HPLC[ J].Pharmacy Today,2010,20：13-15.[7] MIZUTANI K,YUDA M,TANAKA 0,et al. Tanchenosides Iand I I from chuan-dangshen,the root of codonops is tangshen ol iv[J].Chemical & Pharmaceutical Bulletin,1988,36 (7)：2726-2729.[8] REN J,LIN Z,YUAN Z.Tangshenosides from codonopsislanceolata,roots[J].Phytochemistry Letters，2013,6 (4):567-569.[9] YUDA M,0HTANI K,Mizutani K,et al.Neolignan glyco-sides from roots of codonopsis tangshen[J].Phytochemistry, 1990,29 (6): 1989-1993.[10] SONG D,CH0U G X,ZH0NG G Y,et al.Two new phenylpro-panoid derivatives from codonopsis tangshen 01iv[J].Helvetica Chimica Acta,2008,91 (10)：1984-1988.[11] MEI R Q,LU Q,HU Y F,et a 1.Three new polyyne(=Poly-acetylene)glucosides from the edible roots of codonopsis cordifolioidea [J].Helvetica Chimica Acta, 2008,91 (1): 90-96.[12] LEE I R,K0 J H. Isolation of triterpenoid and phenyl-propanoid from codonopsis ussuriensis[J].Arch Pharm Res, 1992,15 (4)：289-291.收稿日期：2019-12-01*基金项目:西藏藏医学院2018年度院级科研项目(2018YJZR06)。
HPLC测定槐角中槐苷含量
1. 2 苷 ( HAD - 2 , 纯度约 90 %) 0. 1620
g , 用 90 %乙醇加热溶解 , 趁热过滤 , 冰箱中放置 过夜 , 析出近白色粉末固体 , 抽滤 , 所得固体用 95 %乙醇洗涤 ,烘干 ,得近白色粉末 72. 2 mg。申光 WRS - 1A 数字式自动熔点测定仪测得熔点为 298. 0 ℃～300. 0 ℃。通过 UV、1 H - NMR 和 13C NMR 鉴定为槐苷 。样品作 HPLC 纯度测定 ,进样量 5μl ; HPLC 测试条件 : C - 18 柱 : 10μ YWG, ID 4. 0 mm;流速 : 1. 0 ml/ min ;压力 : 147 bar ;温度 : 20 ℃;
浓度为 127. 6 mg/ L 。两份测定液在相同的条件
下 ,进样量为 5μl 作 HPLC 分析 ,结果见表 3 :
表 3 槐角中槐苷含量分析
样品
浓度 保留时间 峰面积 测得浓度 槐苷含量
(mg/ L) (min)
(mg/ L) ( %)
乙酸乙酯可溶部分 104. 8 4. 465 4512176 25. 1 23. 9
HPLC 测定槐角中槐苷含量
槐花药材的含量测定及方法学验证实验报告
槐花药材的含量测定及方法学验证实验报告槐花药材的含量测定及方法学验证姓名：廖卓* 学号:11071105一、实验目的1、掌握比色法测定槐花药材中总黄酮含量的方法及原理。
2、熟悉槐花药材的含量测定的方法学验证。
二、实验原理槐花为豆科植物SophorajaponicaL的干燥花及花蕾[1]。
夏季花开放或花蕾形成时采收，及时干燥，除去枝，梗及杂质。
前者习称“槐花”，后者习称“槐米”。
槐花药材的主要有效成份是黄酮类化合物，其中芦丁的含量最高，所以槐花药材的鉴别及含量测定均以芦丁为指标成分。
芦丁（C27H30O16,610.51）黄酮类化合物在碱性条件下与铝盐发生配位反应，生成红色的配位化合物，使得最大吸收波长红移至可见光区，且具有较高的吸收系数。
黄酮类与铝盐的配位反应是定量完成的，因此可采用比色法测定槐花药材中总黄酮的含量，避免其他非黄酮成分对测定准确度的影响[2]。
三、仪器与试药仪器：紫外—可见分光光度计,100ml容量瓶，25ml容量瓶、10ml移液管，超声波清洗器、漏斗、玻璃棒试剂：槐花药材，芦丁对照品，5%亚硝酸钠溶液，10%硝酸铝溶液，氢氧化钠试液，乙醇。
四、实验步骤总黄酮含量测定取芦丁对照品50mg，精密称定，置于25ml量瓶中，加60%乙醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加60%乙醇至刻度，摇匀。
精密量取10ml,置于100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得浓度为0.2mg/ml的芦丁对照品溶液。
（2）检测波长的选择：取A对照品溶液，在400～600nm波长进行光谱扫描，发现光谱图最大吸收，选定波长说明：一般选择待测样品化合物吸收度最大，即吸收曲线最高点为测定波长。
化合物的最大吸收峰λmax或该化合物经显色后的最大吸收峰，通过分光光度计进行扫描后确定或通过二极管阵列检测来确定，并与该化合物文献值相比较应一致。
在最大吸收峰处测定时灵敏度高，误差小。
因此一般情况下选择最大吸收波长作为检测波长。
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Ｓｉ ｕ ｔ ｎ ｏ ｅ ｅ ｍ ｉ ｔｏ ｏ ｈ ｏ ｒ ｋｉ ｓ ｏ ａ ｏ ｉ ｍ ｌａ ｅ ｕｓｄ ｔ ｒ ｎａ ｉｎ ｆｔ ｅ ｆ ｕ ｎｄ ｆｆ ｖ ｎｏ ｄ ｌ
ａ ｌｃ ｎ ｓｉ ｏ ｈ ｒ ａ ｏ ｉａ Ｌ ｙＨＰ Ｃ ｇｙ ｏ ｅ Ｓｐ ｏａ ｐ ｎｃ ．ｂ Ｌ ｎ ｊ
Ａ ｓ ａｔＡ ｈ ｈｐ ｒ ｒ ｎ ｅｌ ｕｄｃｒｍ ｔｇａｈ （ Ｐ Ｃ ｂ ｔ ｃ： ｉ ｅ ｏ ｒ ｇ ｆ ｍａ ｃ ｑ ｉ ｈｏ ａ ｒｐ ｙ Ｈ Ｌ ）ｍｅ ｏ ｒｓ ｕｔ ｅｕ ｅ ｒ ｎ ｔ ｎ ｏ ｉ ｏ ｔ ｄｆ ｉ ｌ ｎ ｏ ｓｄｔ ｍｉａ ｏ ｆ ｈ ｏ ｍ ａ ｅ ｉ
２１ ０ ２年 ７月
安徽大学学报 （ 自然科 学版 ）
Ｊｕｎｌ ｆ ｎ ｕ Ｕ ｉ ｒ ｔ Ｎ ｔｒｌ ｃ ｎｅＥ ｉｏ ） ｏｒａ ｏ Ａ ｈ ｉ ｎ ｅｓｙ（ ａ ａ Ｓ ｉ ｃ ｄｔ ｎ ｖ ｉ ｕ ｅ ｉ
Ｊ ｌ ０ ２ ｕ ｙ２ １
Ｖｏ ． ６ Ｎｏ ４ １３ ．
ｂ ｔｅｎｔｅ ｅｋａｅ ｎ ｊｃｅ ｍ ｕ ｔ ｈ ｎｔｅａ ｏ ｎ ．２ — ． ８ ｇｆ ｕｒｅｉ， ． ３ － ．０ ｅ ｅ ａ ｒａａ ｄｉ ｅｔ ａ ｏ ｎ ｗ ｅ ｍ ｕ ｔｓ ０ ９ ０ ２ ５Ｉ ｒ ｅｃｔ ０ ０ ０ ０ ３ ０ ｗ ｈｐ ｎ ｄ ｈ ｉ０ ｘｏ Ｑ ｎ
要： 建立 同时测定槐角 中 ４种黄酮苷元组分（ 槲皮素 、 染料木 素 、 山奈素 、 鼠李素 ） 异 的高效 液相
色谱测定方法． 采用分离柱 Ｈ ｐ ｒｌ Ｄ 。 ２ ｍｘ ． ｍ Ｉ ５ Ｉ ； ｙ ｅ ｉＢ ＳＣ８ ５ｃ ４ ６ｍ Ｄ， ｍ） 主泵 压力 ９ＭＰ ； ｓ （ ｘ ａ 流动 相为 甲
ＨＥ Ｊ ｎ ，Ｌ ＩＸｉｏ ｑｎ ｕ Ｅ ａ － ｉｇ ，ＨＥ Ｊ ｎ ，ＣＨＥ Ｚ ｅ ｕ Ｎ ｈ ｎ ，ＹＡＮＧ Ｍｉｇｗ ｎ －ｕ
（ ．Ｃ ｅ ｉ ｒ ａ ｄ ＢｏｏｙＳ ｉ ｃ ｏｌ ｅ Ｇ ｉ ｏ ｏ ｌ Ｃ ｌ ｇ ， ｕｙ ｎ ５ ０ １ ， ｈｎ ； １ ｈ ｍ ｓ ｙ ｎ ｉ ｇ ｃ ｎ ｅＣ ｌ ｇ ， ｕｚ ｕ Ｎ ｒ ｏ ｅ ｅ Ｇ ｉ ｇ ５ ０ Ｃ ｉ ｔ ｌ ｅ ｅ ｈ ｍａ ｌ ａ ８ ａ
ｄ ｖｌ ｅ ．Ｓ ｐ ｒ ｉｇ ｃｌｍ ｉ ｙ ｅｓ Ｄ （ ５ ｍ ｘ４ ６ ｍｍ Ｉ ｅｅｏ ｄ ｅ ａａ ｎ ｏｕ ｎ ｗｔ Ｈ ｐｒｉ Ｂ Ｓ Ｃ８ ２ ｃ ． Ｄ，５ ｍ） ｗ ｓｕ ｅ ｎ ｔ ｐ ｔ ｈ ｌ ｌ ａ ｓｄ ｉ ｈ ｅ ｅｐ ｒ ｅ ｔ ａ ｄＣ ３ Ｈ： ２ Ｈ Ｐ ４ ４ ５ ０ ３ ａ ｓｄａ ｏ ｉ ｈ ｓ．Ｄ ｔｃ ｏ ａ ｅ ｎ ｔ ｗ ｓ ｘｅ ｍ ｎ， ｎ Ｈ Ｏ ｉ Ｈ Ｏ： ３ Ｏ （ ８：２：． ）ｗ ｓｕｅ ｓｍ ｂｌ ｐ ａｅ ｅ ｔ ｎｗ ｖｌ ｇｈ ａ ｅ ｅｉ ｅ
第３ ６卷 第 ４期
Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ法 同时测 定槐 角中 ４种黄酮苷元组分
何 军 ， 雷晓青 何 琚 ， 震 杨 明武 ， 陈 ，
（． １ 贵州师范学院 化学与生命科学学 院 ， 贵州 贵阳 摘 ５ ０ １ ；． ５０ ８ ２ 贵州大学 贵州省生化工程 中心 ， 贵州 贵 阳 ５ ０２ ） ５ ０ ５
醇 ： ： 酸 （８： ０ ３ ； 速 ０ ８ｍ ｍ ｎ 检 测 器 为 Ｖ 水 磷 ４ ５ ．）流 ２： ． Ｌ・ ｉ～； ＷＤ 紫 外 检 测 仪 ， 长 ２４ ｎ ， 敏 度 ０ ０ 波 ５ ｍ 灵 ．４
Ａ 柱温 ４ Ｕ； ５℃． 槲皮 素在 ０ ０９— ．８ ｔ、 ．２ ０ ２５Ｉ 染料木素在 ０ ００～ ．０ ｇ 山奈素在 ０ ０ １ ０ ３ ５ ｇ ． ｇ ．３ ０ ３０ ｔ 、 ｚ ． ３ ～ ．０ 、 异 鼠李素在 ００ ４— ．４ ｇ ．２ ０ ２ ０ｌ 线性关系 良好 ， 分别 为 ０ ９ ９７ ０ ９ ９５ ０９ ９８０ ９ ９８ ４种组分平 均 ｘ ｒ ．９ 、．９ 、．９ 、．９ ． 回收率为 ９ ． ％ 、９ ２ 、８ ３ 、８８ ，Ｓ ８ ９ ９ ． ％ ９ ．％ ９ ．％ Ｒ Ｄ分别 为 ０ ６ ｎ＝９ ． ） 结果显
示， 该方法同时测定 ４种有效成分 ， 简便 、 快速 、 准确 、 敏度 高 ， 灵 重复性好．
关键词 ： Ｐ Ｃ； Ｈ Ｌ 槲皮素 ； 料木 素 ； 染 山奈素 ； 鼠李素 异 中图分类号 ： ９７ ２ Ｒ ２ ． 文献标志码 ： Ａ ’ 文章编号 ：００ ２ ６ （０ ２ ｏ — ０４ ０ １０ — １２ ２ １ ）４ ０ ８ — ５
ｆ ｒｅ ｅｔ ｅ ｃｍ ｏｅ ｔ Ｑ ｅｃｔ ；Ｇ ｎｓ ｉ ；Ｋ ｅ ｐｅｏ；Ｉ ｒａ ｎ ｔ ｏ ｆ ｃｉ ｏ ｐ ｎ ｎｓ（ ｕｒｅｉ ｕ ｆ ｖ ｎ ｅｉ ｅ ｔ ｎ ａｍ ｆｒ ｌ ｓ ｈ ｍ ｅｉ ｎＳ ｐ ｏａａ ｏ ｉ ．ｗ ｓ ｏ ｎ）ｉ ｏｈ ｒ ｐ ｎｃ Ｌ ａ ｊ ａ
２ ｅｅｒｈＣ ｎｅ ｉ ｈｍ ｓｙＥ ｇ ｅｒ ｇｏ ｕｚｏ ｒｖ ｃ ， ｕｚｏ ｎｖｒ ｔ， ｕｙｎ ５０ ２ ， ｈｎ ） ．Ｒ ｓａｃ ｅｔｒ ｆ ｏ ｅ ｉｒ ｎｉ ｅｉ ｆ ｉ ｕＰｏｉ ｅ Ｇ ｉ ｕＵ ｉ ｓｙ Ｇ ｉ ｇ ５ ０ ５ Ｃ ｉａ ｏＢ ｃ ｔ ｎ ｎ Ｇ ｈ ｎ ｈ ｅｉ ａ
２５ ｍ ｎ ｈ ｏ ｒ ｔ ｓ０． ４ ｎ ａ ｄ ｔ ｅｆ ｗ ａｅｗａ ８ ｍＬ ・ｒ ｉ ～．Ｃｏｕｍｎ ｔｍｐ ｒ ｔ ｒ ｓｓ ｔａ ５ ｌ ａ ｎ ｌ ｅ ｅ ａｕ ｅｗａ ｅ ｓ４ ．Ｔｈ ｒ ｓｇ ｏ ｉ ｅ ｒｔ ｅ ｅｗａ ｏ ｄｌｎ ａ ｉ ｙ