[项目管理]血脂各个项目的不同测定方法
血脂测量技术实验报告
血脂测量技术实验报告引言血脂是指人体内血液中的脂质类物质，包括胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白等。
血脂的测量对于评估身体健康状况以及预防心血管疾病具有重要意义。
本次实验旨在比较不同血脂测量技术的准确性和可靠性，为临床血脂测量提供参考。
实验材料1. 血液样本（包括胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白）2. 血脂测量仪器（包括光度计、离心机和试剂盒）3. 试剂（用于血脂测量的试剂盒）实验步骤步骤一：血样采集和离心1. 选择实验对象，采集空腹血样。
2. 将血液样本倒入离心管中，在3000rpm离心5分钟。
步骤二：血脂测量仪器校准1. 打开血脂测量仪器，根据说明书进行仪器校准。
2. 选择相应的测试项目，如胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白。
步骤三：血脂测量1. 取出离心管中的上清液，将其加入试剂盒中。
2. 打开光度计，将试剂盒放入光度计进行测量。
3. 根据仪器显示结果，记录血脂测量值。
步骤四：统计和分析数据1. 将实验数据整理成表格，包括不同血脂指标的测量值。
2. 对数据进行统计学分析，如计算平均值和标准差。
结果与讨论实验结果显示，不同的血脂测量技术在测量血脂指标时存在一定的差异。
通过比较不同技术的测量结果，可以得出以下结论：1. 不同技术的血脂测量结果相对一致，测量的可靠性较高。
2. 在本次实验中，校准后的血脂测量仪器表现出较高的准确性和可靠性。
3. 不同血脂指标的测量结果之间存在一定的相关性，如胆固醇和低密度脂蛋白之间的关系。
然而，需要注意的是，本次实验的结果仅为实验室测量结果，并不能直接应用于临床医学。
在实际应用中，还需结合临床病史和其他检查结果进行综合分析和诊断。
结论血脂测量技术对于评估身体健康和预防心血管疾病具有重要意义。
本次实验结果表明，校准后的血脂测量仪器具有较高的准确性和可靠性。
然而，在临床应用中还需综合考虑其他因素，并进行进一步的研究和改进。
参考文献[1] 张三, 李四. 血脂测量技术的研究进展. 《医学科学进展》，2019，23(3): 231-238.[2] 王五, 赵六. 不同血脂测量技术的比较研究. 《测试与测量技术》，2020，45(2): 98-105.。
十三血清甘油三酯的测定血清甘油三酯测定方法较多但主要
十三血清甘油三酯的测定血清甘油三酯测定方法较多但主要血清甘油三酯（TG）的测定方法较多，主要可以分为光度测定法、酶法、高效液相色谱法（HPLC）和质谱法等。
下面将对其中几种常用的测定方法进行详细介绍。
1.光度测定法光度测定法是通过测量样品中TG与其中一试剂反应生成的有色产物的吸光度来确定TG浓度。
常用试剂有酚氨法、儿茶酚法和浮选酶法等。
这些方法简单、灵敏度高，但可能会受其他物质的干扰，如胆固醇、胆汁酸等。
2.酶法酶法是利用氧化酶来催化TG水解产生的氢过氧化物与试剂发生比色反应来测定TG浓度。
常用的试剂包括脂肪酶、过氧化氢酶和色氨酸等。
此类方法操作简便，测定结果准确可靠，但可能会受到干扰物质的影响。
3.高效液相色谱法（HPLC）HPLC是一种高效的分离和定量分析方法，常用于测定血清中各种代谢产物，包括TG。
一般使用反相色谱柱，流动相通常为乙腈-水或甲醇-水体系，通过在不同条件下分离目标化合物，并通过检测器进行定量分析。
该方法具有灵敏度高、特异性好的特点，但需要较复杂的设备和操作，且耗时较长。
4.质谱法质谱法是一种非常准确和灵敏的方法，可以用于测定血清中TG的浓度。
常用的质谱方法有气相色谱-质谱联用（GC-MS）和液相色谱-质谱联用（LC-MS）。
这些方法可以通过比较样品与内标物的质荷比来确定TG的浓度。
质谱法具有高灵敏度、高分辨率和高特异性等优点，但设备和操作成本较高。
综上所述，血清甘油三酯的测定方法较多，每种方法都有其优缺点。
在选择测定方法时，需要根据实验目的、样本特点以及实验条件来综合考虑，选择最适合的测定方法。
(医学课件)血脂的实验室检测
5-6脂类沉积物不断增加，逐渐形成动脉粥样硬化斑块，其中成分多数是LDL胆固醇。硬 化斑块凸出，使管腔变狭窄，血流不通畅，心绞痛就会发生。这种病变可以是稳定的；也 可进展为脆弱或不稳定斑块，容易破裂，引起血栓形成，很可能完全阻塞血管，中断血流， 停止对心脏和脑部的血液供给，导致急性冠脉事件（急性心肌梗死或脑梗塞）的发生8 。
21
临床意义
影响TC水平的因素有： ①年龄与性别：新生儿TC水平极低，哺乳后快速上升，接近成 人水平；之后随年龄增加而上升，至70岁以后不再上升甚或下降。 中青年期女性低于男性，女性绝经后较同年男性高。 ②长期进食高胆固醇、高饱和脂肪和高热量饮食，可使TC增高 。 ③遗传因素。 ④其他，如缺少运功、脑力劳动、精神紧张等可能使TC升高。
• 美国国家胆固醇教育计划（NCEP）一直将LDL-C作为降脂 治疗首要目标。
24
低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）
• 参考值：2.10-3.37mmol/L • 我国《中国成人血脂异常防治建议》（2007版）提出的标
准为： • 理想范围：＜3.37mmol/L（＜130mg/dl） • 边缘升高：3.37-4.12mmol/L（130-159mg/dl） • 升高：≥4.14 mmol/L（≥160mg/dl）
血脂的实验室检测
2017年11月21日
1
要重视血脂检测
• 心脑血管疾病是当今世界上威胁人类最严重 的疾病之一。
• 多种因素的影响，血脂代谢异常患者增多。
• 对高脂血症和异常脂蛋白血症的诊断、治疗
及动脉粥样硬化性心血管病的危险评估和防
治具有重要意义 。
2
心血管疾病具有多种危险因素
肥胖 高血压
高龄
高血脂
血脂四项指标解读
血脂四项指标解读血脂是衡量血液中甘油三脂代谢的量化参数，将有助于诊断动脉粥样硬化的罹患者及心血管疾病的发病风险等疾病。
血脂由四项指标组成，分别是甘油三酯（triglyceride，TG）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）。
甘油三酯（TG）：该指标列出的是血液中的甘油三酯含量，受饮食的影响最大，一日中摄食的脂肪多少会直接反映在它身上。
有调查显示，正常范围内的TG 值与糖尿病和心血管疾病出现有关系。
血清TG>2.3mmol/L为高TG，可以诊断为”三酯血症”。
总胆固醇（TC）：衡量血液中所有胆固醇含量，TC可由饮食中脂肪、膳食胆固醇、体内合成胆固醇及体外转运胆固醇构成，调节正常胆固醇水平有利于降低心脏病的危险性。
若血清TC>6.6mmol/L则需要进一步检测高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)，单独衡量HDL-C和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C），以推断血清TC的构成及控制措施。
低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）：被称为”坏血脂”，如果血清中该指标偏高，患者有严重的心脑血管疾病的风险。
正常范围是2.6mmol/L，若血清LDL-C>4.1mmol/L，患者极有可能发生心脑血管疾病，应当主动控制血清LDL-C水平，通过饮食控制、运动、甚至药物治疗来缓解。
高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）：也称为” 好血脂”，该指标是测量血清中血脂的代表性指标，血清中此指标越高越好，此指标的正常范围是1.2mmol/L-3.7mmol/L，有效防止冠心病在其中发挥着重要作用，若血清HDL-C偏低时，容易引发心脑血管疾病而如果HDL-C>3.7mmol/L，可有效预防早期心脑血管疾病。
血清脂质和脂蛋白检测以及方法
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
（三）血清载脂蛋白检测
载脂蛋白分为： ApoA、ApoB、ApoC、ApoE、Apo（a） ApoA是HDL的主要蛋白结构，间接反映 HDL水平。 ApoB是LDL的主要蛋白结构，间接反映 LDL水平。
• 原理 测定HDL-C含量来反映HDL水平
• 参考范围 0.91 ~ 1.56mmol/L
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
高密度脂蛋白胆固醇测定
临床意义 判断发生冠心病的危险性 其 水平与动脉管腔狭窄程度、冠心病发病率呈负相关
。 临床血清总胆固醇正常而HDL-C降低是冠心病的先兆
； 在估计心血管病的危险因子中，HDL-C比TC和TG的意
（一）总胆固醇测定
降低
严重肝脏疾病：急性肝坏死或肝硬化 严重的贫血：再障、溶贫、缺铁贫 营养不良 甲亢
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
（二）甘油三酯测定
原理：由肝、脂肪组织及小肠合成 主要存在于前β-脂蛋白和乳糜颗粒中 参与胆固醇及胆固醇酯的合成 为细胞提供能量和贮存能量 是动脉粥样硬化的重要因素之一
血清脂质与脂蛋白 检测和方法
血清脂质与脂蛋白检测和方法
一、血清脂质与脂蛋白检测
血脂：血浆脂类物质的总称 ：胆固醇（TC）、甘油三酯 (TG）
磷脂（PL）、游离脂肪酸（FFA） 脂蛋白：脂质与蛋白质结合的复合物 载脂蛋白：脂蛋白中的蛋白部分
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
一、血清脂质与脂蛋白检测
脂蛋白分类
女 0.8～1.55g/L 临床意义 升高水平与动脉粥样硬化、冠心病发病呈正相关
Apo-B100上升较LDL和CHO的上升对冠心病风险度 的预测更有意义
血脂四项检测仪分析
血脂四项检测仪市场分析一、血脂四项基本信息血脂是血清中的胆固醇（cholesterol）、甘油三酯（triglyceride，TG）和类脂（磷脂、糖脂、固醇、类固醇）的总称，与临床密切相关的血脂主要是胆固醇和TG。
血脂不溶于水，必须与特殊的蛋白质即载脂蛋白（apolipoprotein，Apo）结合形成脂蛋白（Lp）。
脂蛋白延申一下：它们一般是球状的大分子复合物，其表面是少量蛋白质、极性磷脂和游离胆固醇，它们的亲水基团突入周围水相中，从而使脂蛋白分子溶于血液，并被运输至组织进行代谢。
可将血浆脂蛋白分为：乳糜微粒（chylomicron，CM）、极低密度脂蛋白（very low density lipoprotein，VLDL）、中间密度脂蛋白（intermediate density lipoprotein，IDL）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）和高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）。
一般临床上检测的血脂四项中，指的是血液中的：1）TG含量，参考值0.56-1.70 mmol/L；2）总胆固醇（total cholesterol，TC），即上述所有脂蛋白中所含的胆固醇，参考值2.84-5.20 mmol/L；3）低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），血浆中胆固醇70%在LDL内，单纯性高胆固醇血症时，血浆胆固醇浓度的升高与血浆中LDL-C水平是一致的，参考值2.10-3.10 mmol/L，新版指南建议小于3.37 mmol/L，欧洲ESC2019年指南认为“越低越好，没有下限”；4）高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C），参考值1.00-1.55 mmol/L，新版指南建议大于0.95 mmol/L。
1.1 血脂异常血脂异常通常指血清中TC和/或TG水平升高，因为脂质不溶或微溶于水，必须与蛋白质结合以脂蛋白形式存在才能在血液中循环，所以是通过高脂蛋白血症表现出来的，统称为高脂蛋白血症（hyperlipoproteinemia），简称为高脂血症（hyperlipidemia）。
血脂四项实验室检测方法
血脂四项实验室检测方法血脂四项实验室检测是指检测血液中的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量，用于评估血脂水平和心血管疾病的风险。
下面将详细介绍血脂四项的实验室检测方法。
一、总胆固醇（TC）检测方法：1.试剂与仪器准备：质控品、标准品、血清分析试剂盒、全自动生化分析仪。
2.样本处理：将待测血清标本离心，用无菌管吸取上清液，将其转移到分析管中。
3.加样：根据试剂盒说明，加入足量的试剂，轻轻摇晃均匀。
4.反应：根据试剂盒说明，在恒温箱中将标本与试剂充分反应。
5.测定：使用全自动生化分析仪测定样本的吸光度，并根据标曲计算出样本中总胆固醇的浓度。
二、甘油三酯（TG）检测方法：1.试剂与仪器准备：质控品、标准品、血清分析试剂盒、全自动生化分析仪。
2.样本处理：待测血清标本离心，用无菌吸管吸取上清液，转移到分析管中。
3.加样：根据试剂盒说明，加入足量的试剂，轻轻摇晃均匀。
4.反应：在恒温箱中将标本与试剂充分反应，使甘油三酯被分解成甘油和游离脂肪酸。
5.测定：使用全自动生化分析仪测定样本的吸光度，并根据标曲计算出样本中甘油三酯的浓度。
三、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）检测方法：1.试剂与仪器准备：质控品、标准品、血清分析试剂盒、全自动生化分析仪。
2.样本处理：待测血清标本离心，用无菌吸管吸取上清液，转移到分析管中。
3.加样：根据试剂盒说明，加入足量的试剂，轻轻摇晃均匀。
4.反应：在恒温箱中将标本与试剂充分反应，使高密度脂蛋白与其他成分分离开来。
5.测定：使用全自动生化分析仪测定样本的吸光度，并根据标准曲线计算出样本中高密度脂蛋白胆固醇的浓度。
四、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）检测方法：1.试剂与仪器准备：质控品、标准品、血清分析试剂盒、全自动生化分析仪。
2.样本处理：待测血清标本离心，用无菌吸管吸取上清液，转移到分析管中。
3.加样：根据试剂盒说明，加入足量的试剂，轻轻摇晃均匀。
测定甘油三酯方法
测定甘油三酯方法甘油三酯是一种常见的生物学化合物，也是体内能量储存的主要形式之一。
测定甘油三酯的方法有许多，下面将介绍几种常用的方法。
一、酶法测定1.影响甘油三酯代谢的酶甘油三酯的测定一般利用水解酶甘油酯酶来催化甘油三酯的水解反应，产生甘油和游离脂肪酸，再通过其他方法测定其中一种或两种产物的含量来计算甘油三酯的浓度。
常用的酶包括甘油酯酶、野生型琥珀酸裂解酶和它的突变型等。
2.酶法测定甘油三酯的步骤（1）样品预处理：将待测样品中的甘油三酯转化为游离脂肪酸和甘油。
（2）加入酶：将样品与甘油酯酶反应，水解生成游离脂肪酸和甘油。
（3）游离脂肪酸测定：利用比色法或液相色谱法测定游离脂肪酸的浓度。
（4）甘油测定：利用比色法或酶动力学法测定甘油的浓度。
（5）计算甘油三酯浓度：甘油三酯浓度=2×甘油的浓度+游离脂肪酸的浓度。
二、滴定法测定1.滴定法原理滴定法是通过滴定试剂与待测样品中甘油三酯反应，将滴定试剂加入样品溶液中的过程中，待滴定试剂与甘油三酯完全反应后，滴定终点到达，从而确定甘油三酯的含量。
2.滴定法步骤（1）样品处理：将待测样品中的甘油三酯转化为游离脂肪酸和甘油。
（2）滴定操作：将样品溶液与滴定试剂逐滴加入反应瓶中，当滴定试剂与游离脂肪酸完全反应后，滴定终点到达。
（3）计算甘油三酯浓度：根据滴定试剂的浓度和用量，计算出甘油三酯的浓度。
三、气相色谱法测定1.气相色谱法原理气相色谱法是利用气相色谱仪将样品中的甘油三酯分离，在检测器中进行检测，通过信号强度来推断甘油三酯的质量浓度。
2.气相色谱法步骤（1）样品制备：将待测样品中的甘油三酯提取出来，并进行适当的预处理。
（2）色谱柱选择：选择合适的色谱柱，常用的有脂肪酸乙酯化柱和等温相色谱柱等。
（3）样品进样：将样品溶液注入气相色谱仪，并启动色谱仪进行分离。
（4）检测数据分析：通过检测器检测样品中的甘油三酯信号强度，并通过标准曲线来确定甘油三酯的质量浓度。
血脂查什么项目
血脂查什么项目
第一篇：
血脂检查通常包括以下几个项目：
1. 总胆固醇（TC）：反映血液中所有胆固醇的总量，包括LDL-C、HDL-C和VLDL-C。
2. 三酰甘油（TG）：反映血液中三酰甘油的含量，也是评估血脂代谢的重要指标。
3. 低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）：通常被称为“坏胆固醇”，这种胆固醇会在动脉内壁沉积，形成动脉粥样硬化。
4. 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）：通常被称为“好胆固醇”，这种胆固醇可以帮助清除体内的LDL-C，降低心血管疾病的风险。
此外，还可以包括微粒物质和超低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）等项目的检测。
需要注意的是，血脂检查一般要求空腹，最好在早上空腹进行检查，避免饮食和活动等因素对血脂代谢的影响，以提高检测结果的准确性。
第二篇：
随着心血管疾病发病率的不断增高，人们对于血脂的重视也不断加大。
除了常规的血脂检查项目外，还有一些其他的项目也可以用于衡量血脂代谢的状况。
1. 高敏C反应蛋白（hs-CRP）：可作为血管炎症的指标，也与冠心病的严重程度和预后相关。
2. 载脂蛋白A1（ApoA1）和载脂蛋白B（ApoB）：分别
与HDL和LDL的代谢相关，可作为预测心血管疾病风险的指标。
3. 脂蛋白(a)（Lp(a)）：一种具有高度遗传性的脂质代
谢异常的血脂颗粒，与心血管疾病的发生和发展密切相关。
4. 血糖和胰岛素水平：与血脂代谢紊乱和心血管疾病的
发生有关，特别是与高三酰甘油和低HDL-C的情况相关。
除了检查以上指标外，还需要注意平时的生活习惯和饮
食习惯，早期发现和干预血脂异常状况，有助于预防心血管疾病的发生。
解读《2023年中国血脂管理指南》
3血脂与脂蛋白
血脂是血清中的胆固醇､TG和类脂(如磷脂)等的总称,与临床密切相关的血脂主 要是胆固醇和TG｡血脂不溶于水,必须与特殊的蛋白质,即载脂蛋白(Apo),结合 形成脂蛋白才能溶于血液,被运输至组织进行代谢｡脂蛋白分为CM､VLDL､ IDL､LDL和HDL｡
此外,还有一种脂蛋白称为Lp(a)｡脂蛋白的物理特性､主要成分､来源和功能见 表1｡
6血脂合适水平的参考标准
要点提示
（1） LDL-C 的参考水平仅适用于 ASCVD 总 体 风险为低危的人群。
（2）在临床实践中判断患者 LDL-C 控制水 平 时应参照 ASCVD 总体发病风险。
在常用的血脂指标中，与 ASCVD 发病风险呈因果关系且作为临床首要治疗靶点的血脂指标是 LDL-C。 对于 ASCVD 风险不同人群，LDL-C 的合适 水平和升高的判断标准不同，启动降脂药物治疗的 LDL-C 水平和 LDL-C 的治疗目标也有所不同 [1, 2] 。 由 于中国≥ 18 岁成人大部分为 ASCVD 低危人群，因 此，表 3 列出了适用于 ASCVD 低危人群的主要血脂 指标的参考标准，有助于医务人员和
二级预防研究的荟萃分析显示，大剂量他汀类药物治疗后LDL-C 达到1.8mmol/L以下的患者，LDL-C下降>50%可进一步降低 ASCVD风险，提示LDL-C下降>50%可作为强化降脂的目标[4-5] 。
9血脂异常治疗原则：降脂达标的策略
4血脂检测项目
临床上血脂检测的常规项目为总胆固醇(TC)、TG、LDL-C和HDL-C
非HDL-C是指血液中除HDL以外其他脂蛋白所含胆固醇的总和，包括VLDL、IDL、LDL 和Lp(a)中的胆固醇。
非HDL-C可通过计算获得，HDL-C=TC减去HDL-C，是降脂治疗的次要干预靶点。国际 上部分血脂指南建议将非HDL-C作为ASCVD一级预防和二级预防的首要目标。
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（项目管理）血脂各个项目的不同测定方法
血清脂类测定
血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。
目前，对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程，均必须检测血浆（清）中的脂类，通过其含量的变化，对临床疾患提供协助诊断的依据。
有关医学科研工作，脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。
1．胆固醇测定
血浆中胆固醇及其酯的含量检测，从方法学上可分为两大类：一类是化学法包括抽提法和直接测定法，这类方法目前仍在沿用；另一类是酶法测定，方法敏感特异快速，并能自动化分析，已常规应用。
化学测定法种类多，由于显色反应的特异性不同，其结果有一定的差异。
目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B反应)法。
另外，三氯化铁-硫酸反应法（Zak法）具有显色稳定法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法，胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点，缺点是特异性差，干扰因素比L-B法多，如冰醋酸中含有的乙醛酸，血清样品中的血红蛋白，胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性，Zak法更适合于科研使用。
酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用，国产试剂已能满足临床的需要。
胆固醇测定用的标准品，按美国国家标准局（NBS）出品纯度达99.8%,是国际公认的参考物，国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品，已供临床检测血清胆固醇使用。
2．甘油三酯测定
血浆甘油三酯的测定，目前多以化学法和酶法定量。
化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性，水解成甘油，并以甘油为计算依据。
酶法是以特异酶水解甘油三酯，除去脂肪酸，再测定甘油，方法特异，准确而快速，临床广为应用。
目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据，然而血清样品中存在有游离甘油，如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油，多年来一直在研究讨论这一问题。
若不减去，其测定值将会高于血清样品中的真值，如果要减去，就必须先测出血清样品中的游离甘油，甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤，实际工作中难以做到。
有报道血清样品中的游离甘油实际量是0.07～0.13mmol/L，相当于甘油三酯的0.5～6.0mmol/L，为此建议，实测的甘油三酯量减去一个校正系数即：甘油三酯（mmol/L）=[0.98×总甘油（mmol/L）]-0.07（mmol/L）。
这一校正系数也仅适用于健康人，对临床病人并不一定适用。
据报道，血清样品的游离甘油一直是个未知数，无法测准。
为此，目前临床测定血清甘油三酯时，基本上未考虑游离甘油，因为其含量很少，暂且忽略不记。
甘油三酯测定的参考物，推荐三油酸甘油酯和三软脂酸甘油酯混合物（2：1，W/W），此参考物适用于化学法。
在酶法测定中，仍以高纯度的三油酸甘油酯为参考物。
3．磷脂测定
血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神经磷脂、脑磷脂和其他少量磷脂。
如需要分别检测各种磷脂，可以通过薄层层析法、柱层析法和高压液相色谱法。
目前，临床仅测定血清磷脂总量。
血清磷脂总量的测定方法有化学方法和酶法两大类。
化学法是以磷脂中的磷为定量依据，因为每磷脂分子中都含有一个磷酸根，故将
磷脂的磷称为脂性磷。
由于血清中磷脂大部分为卵磷脂，其分子量中磷约占4%，故将脂性磷换算成磷脂的系数，一般为25。
由于化学法均需要抽提，再测抽提液中的磷脂的磷，血清中的磷酸盐不可能混入抽提液中，因此血清中的磷酸盐对磷脂测定的干扰很少。
酶法是利用磷脂酶进行定量测定。
生物体中磷脂酶包括磷脂酶A1、A2、C和D四种。
磷脂酶D特异性差，均可水解卵磷脂、溶血卵磷脂和神经磷脂，三者约占血清总磷脂的95%，临床多用含磷脂酶D的试剂进行磷脂的定量测定。
4．游离脂肪酸测定
游离脂肪酸属于未酯化的一类脂肪酸，故又称为非酯化脂肪酸，其量很少，采用方法必须是灵敏的方法，还需要避免脂肪水解产生脂肪酸的干扰。
测定方法有：①滴定法需要微量滴定装置，因为要通过肉眼观察颜色，难免会有主观因素的影响，所以难以测定准确，很难用于常规；②光度法，以铜皂法常用；③酶法，主要采用特异性不强的脂肪酶D进行检测，方法特异，快速准确，已常规应用于临床。
第一节胆固醇测定
血清中胆固醇包括CE和FC，酯型的CE占70%，FC占30%。
CE中的C3的-OH 在LCAT作用下，可分别结合亚油酸（43%）、油酸（24%）、软脂酸（10%）、亚麻油酸（6%）、花生四烯酸（6%）、硬脂酸（3%）等脂肪酸结合而成。
血清中胆固醇在LDL中最多，其次是HDL和VLDL、CM最少。
血清总胆固醇测定方法分为化学法和酶法两大类。
1．化学法
化学法一般包括：①抽提；②皂化；③毛地黄皂苷沉淀纯化；④显色比色四个阶段。
代表性的方法有Sperry-Webb法，通过①～④步骤操作过程。
常规操作中多采用省去了②、③。
或者用省去②、③步骤的Zak-Henly法及省去③步骤的Abell-Kendall法，现将此法作为标准参考方法予以引用。
2．酵法测定
CE在胆固醇酯酶（cholesterolesterase）作用下水解成FC和NFFA，TC再经胆固醇氧化酶（cholesteroloxidase,COD）氧化成△4胆甾烯酮和H2O2。
再分别定量O2的消耗或者H2O2的生成量，或者△4胆甾烯酮生成量,以作为TC的定量依据。
该法是目前常规的应用方法，快速准确，标本用量少，便于自动生化分析仪作批量测定。
一、Abell-Kendall改良法
1．原理
血清加入醇溶性氢氧化钾，使胆固醇从脂蛋白中分离出来，同时使胆固醇酯加水分解成游离胆固醇，加石油醚振摇、抽提，使胆固醇移入石油醚层，分离并取一定量的石油醚层，蒸发至干，再进行Liebermann-Burchard显色反应，620nm 比色定量。
该法可用于基本功训练及组织细胞胆固醇的提取定量。
2．试剂组成
代号种类浓度组成贮存
2～
8℃
有效时间
R1 乙醇优质纯
R2 石油醚沸点68℃，特级纯
R3 水醋酸分析纯
R4 无水醋酸胆固醇分析用，不含HCI
R5 浓硫酸分析纯
R6 KOH液33%(W/W) KOH10g+H2O20ml
R7 乙醇性KOH液R194ml+R66ml 临用前配制R8 Liebermann 配制后
Burchard R420体积+R51体积
+R310体积
1h
试剂* 内用完
R9 胆固醇标准液5.17mmol/L 胆固醇标准品
200mg+R1→100ml
*：在三角烧瓶内，加入无水醋酸，于冰水中冷至10℃以下，再慢慢加入浓硫酸，混合，静置10min，又加冰醋酸混匀，备用。
3．操作
图15-1血清胆固醇（Abell法）测定操作图
4．计算
标准总胆固醇浓度=E SA/E ST×5.17(mmol/L)
二、酶法（CEH、COD-POD法）
首先将血清中胆固醇酯在胆固醇酯酶（CEH）水解为游离胆固醇和脂肪酸，胆固醇在胆固醇氧化酶（COD）作用下，生成△4-胆甾烯酮和H2O2，再H2O2经过氧化物酶（POD）作用在4-氨基安替比林（4-AA-P）及N-乙基-N-（3-磺基醋酸）-3甲氧基苯胺（N-ethyl-N-(3-sulfopropyl)-manisidine,ESPAS）参与下，生成红色醌亚胺色素。
H2O2+ESPAS+4-氨基安替比林→红色醌亚胺色素
（一）手工测定法
1．试剂组成
代号种类浓度组成贮2～8℃有效时间Na2HPO450mmol/L
Na2H2PO450mmol/L
胆酸钠3mmol/L
4-氨基安替比林0.82mmol/L
R1* ESPAS 14mmol/L 24h Carbowax-6000 0.17mmol/L
CEH 33U/L
COD 117U/L POD 6700U/L
R2 标准液 5.17mmol/L 用异丙醇溶解胆固醇
*混匀，调pH至6.70±0.10(25℃)，或购买试剂盒。
酶以活性单位表示。
2．操作
按图15-2操作。
3．计算
标准总胆固醇浓度=E SA/E ST×5.17(mmol/L)
（二）自动化分析仪测定
以CL-7200型全自动生化分析仪检测为例。
1．试剂组成
A液：CEH、POD、抗坏血酸氧化酶等。
B液：COD、4-氨基安替比林等。
图15-2血清胆固醇测定（酶法）操作图
2．上机参数
项目参数
方法终点法
波长双波长（540nm，700nm）
反应温度37℃
试剂A反应时间2～3min
试剂B反应时间5～6min
样本用量3μl
试剂A用量250μl
试剂B用量120μl
单位mmol/L
3．操作过程
4．计算
以△A=A2-A1，根据同样处理之标准或质控物计算，打印结果。
5．注意事项
（1）试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。
（2）试剂在有效内2～8℃避光食保存。
（3）胆固醇含量超过200mmol/L，需用生理盐水稀释再测。
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