内标法

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试简述内标法外标法和标准曲线法的区别与联系

试简述内标法外标法和标准曲线法的区别与联系

试简述内标法外标法和标准曲线法的区别与联系内标法、外标法和标准曲线法都是常用的分析化学方法,用于定量分析样品中所含物质的浓度。

本文将分别介绍这三种方法,包括其基本原理、优缺点、适用范围和应用注意事项,并进一步比较它们之间的异同点,以帮助读者更好地理解这些方法。

一、内标法1.内标法可以消除不同样品之间的误差。

每个样品都添加相同浓度的内标物质,可以保证分析仪器响应的稳定性和可靠性,从而提高分析结果的精度和准确性。

2.内标法适用于分析系统不稳定、标准曲线多次测定误差较大或样品矩阵干扰较强等情况下。

通过引入内标物质,可以抵消这些误差和干扰因素,从而获得更准确的分析结果。

3.内标法在实际分析中应用较为广泛,包括食品、环境、药品等领域。

内标物质的选取应注意其在样品提取、分离、检测等过程中不会受到干扰和损失。

二、外标法1.外标法适用于分析系统稳定,且标准曲线经过多次测定和优化的情况。

外标法要求标准曲线的线性范围宽,以及样品矩阵中不含有干扰物质,否则会影响测定结果的准确性。

2.优点是操作简单,结果直观,且适用于多种分析仪器。

外标法需要预先制备标准溶液,因此需要时间和精力投入,并且标准溶液的制备和保存需注意一定的技巧。

3.外标法通常用于分析水样、血清等样品中的常规成分,例如微量元素、蛋白质等。

三、标准曲线法2.标准曲线法的优点是可以定量分析多种成分,并且适用于多种分析仪器。

标准曲线法需要对标准曲线进行建立、优化和验证,因此需要投入较多的时间和精力。

3.标准曲线法适用于定量分析各种样品中的成分或物质,包括食品、环境、药品、化妆品等。

标准曲线法的建立过程需要谨慎,尤其要注意质量控制和实验总体性能验证。

总结比较以上三种定量分析方法各有其特点,选用何种方法应根据实际情况而定。

实际应用中,常常选择标准曲线法和内标法相结合的模式,以提高定量分析结果的精度和准确性,并进一步检验和确保实验结果的正确性,如常用的加标法分析。

标准曲线法和外标法均应为线性关系,对于标准曲线法,通常需要至少5个或以上的标准浓度级别和与之相对应的响应信号结果,将数据进行回归拟合,从而建立标准曲线方程,并验证其可靠性和准确性。

内标法和外标法

内标法和外标法

内标法和外标法内标法和外标法是化学分析中常用的两种方法,它们都是利用某些物质的性质作为参照物,来对待测物进行定量分析。

下面将从定义、原理、应用等方面对内标法和外标法进行详细介绍。

一、内标法1. 定义内标法又称为内标准法,是指在样品中加入已知浓度的一种物质(称为内标物),与待测物同时经历同样的处理过程,通过内部比较来确定待测物质量的分析方法。

2. 原理在内标法中,加入的内标物应与待测物具有相似的化学性质和反应特点,且在样品制备过程中不会发生任何干扰。

经过同样处理后,待测物和内标物被共同进入仪器进行检测。

由于二者共同经历了相同的处理过程,因此其信号比值可以用来消除仪器响应波动、操作误差等因素对结果造成的影响。

3. 应用内标法适用于各种复杂样品(如环境水、土壤、生物组织等)中微量元素或有机化合物的定量分析。

其优点是可以消除大多数干扰因素,提高分析精度和准确度。

二、外标法1. 定义外标法又称为外标准法,是指在待测物质中加入已知浓度的一种物质(称为外标),通过比较待测物与外标的信号强度来确定待测物质量的分析方法。

2. 原理在外标法中,加入的外标应与待测物具有相似的化学性质和反应特点,且在样品制备过程中不会发生任何干扰。

经过同样处理后,待测物和外标被分别进入仪器进行检测。

由于二者具有相似的化学性质和反应特点,因此其信号强度比值可以用来确定待测物的含量。

3. 应用外标法适用于各种简单样品(如纯化合物、溶液等)中微量元素或有机化合物的定量分析。

其优点是操作简便、数据处理方便等。

三、内标法与外标法的比较1. 精密度内标法精密度高于外标法。

由于内标物与待测物共同经历了相同的处理过程,因此可以消除大多数干扰因素对结果造成的影响,提高分析精度和准确度。

2. 灵敏度外标法灵敏度高于内标法。

由于外标与待测物分别进入仪器进行检测,因此可以直接比较其信号强度,提高了灵敏度。

3. 适用范围内标法适用于各种复杂样品(如环境水、土壤、生物组织等)中微量元素或有机化合物的定量分析。

内标法

内标法

内标法一、内标法什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法 internal standard method 是色谱分析中一种比较准确的定量方法,尤其在没有标准物对照时,此方法更显其优越性。

内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积(或峰高)及相对校正因子,按下列公式和方法即可求出被测组分在样品中的百分含量:按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和内标物,分别配成溶液,精密量取各溶液,配成校正因子测定用的对照溶液。

取一定量进样,记录色谱图。

用含对照品和内标物的对照溶液所得色谱峰响应值,按下式算出(f):f= (As/ms)/(Ar/mr)其中As和Ar分别为内标物和对照品的峰面积或峰高,ms和mr分别为加入内标物和对照品的量。

再取各品种项下含有内标物的待测组分溶液进样,记录色谱图,再根据含内标物的待测组分溶液色谱峰响应值,计算含量(mi):mi=f×Ai/(As/ms)其中 Ai和As分别为供试品和内标物的峰面积或峰高,ms为加入内标物的量。

必要时,再根据稀释倍数、取样量和标示量折算成为标示量的百分含量,或根据稀释倍数和取样量折算成百分含量。

内标法是一种间接或相对的校准方法。

在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。

内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。

使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。

采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。

理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。

什么叫内标法怎样选择内标物

什么叫内标法怎样选择内标物

什么叫内标法?怎样选择内标物内标法是一种间接或相对的校准方法。

在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。

内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。

使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。

采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。

理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。

当然,在色谱分析条什下,内标物必须能与样品中各组分充分分离。

需要指出的是,在少数情况下,分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率,此时,他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标,来测定感兴趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所说的选择原则。

在使用内标法定量时,有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值?影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。

由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。

化学方面的因素包括:1、内标物在样品里混合不好;2、内标物和样品组分之间发生反应;3、内标物纯度可变等。

对于一个比较成熟的方法来说,色谱方面的问题发生的可能性更大一些,色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大,对面积比的影响则要小一些,但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度,那么一定有某个重要的色谱问题存在,比如进样量改变太大,样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别,检测器非线性等。

进样量应足够小并保持不变,这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。

气相色谱定量分析中内标法外标法的比较及选择

气相色谱定量分析中内标法外标法的比较及选择

气相色谱定量分析中内标法外标法的比较及选择
一、内标法和外标法介绍
气相色谱定量分析使用内标法(Internal Standard Method)和外标法(External Standard Method)。

内标法是将标准物质和样品在相同汽油中进行混合,标准物质称为内标,样品称为测试样品,在色谱分析过程中,内标峰和检测峰同时出现,通过比较内标峰和检测峰的高度,或称之为峰面积比,从而计算出样品的浓度。

外标法是首先制备一个标准溶液,其中含有一种或多种待测物质,根据含量,将标准溶液分别加入样品中,然后同时测定标准溶液和样品,在色谱曲线上,标准溶液和检测的样品曲线应在相同的水平上,比较它们之间的峰高比来计算样品的浓度。

二、内标法和外标法的比较
1、内标法和外标法在精确度上的差别:内标法和外标法的精确度存在一定差别,外标法在待测物质之间的选取和控制上要比内标法更容易,可以更容易满足更高的分析精度要求。

2、内标法和外标法在灵敏度上的差别:外标法的检测灵敏度比内标法高出1-2个数量级,但外标法的检测灵敏度和油质组成有关,油质中含有大量未知物质,会使检测灵敏度受到限制。

3、内标法和外标法在选取上的差别:一般情况下,当待检测物质在蛋白质水溶液或血清等生物体内存在时,应选用内标法;。

内标法及外标法方法原理优缺点

内标法及外标法方法原理优缺点

内标法及外标法方法原理优缺点内标法(internal standard method)和外标法(external standard method)都是常见的分析方法,用于定量分析中。

一、内标法内标法是指在分析样品中加入指定量的内标物质,通过该内标物质与目标分析物相对稳定的对比关系来进行定量分析。

内标法常见的应用场景包括药物检测、环境监测、食品安全等。

内标法的具体操作步骤如下:1.准备内标物质:根据目标分析物的性质选择一个与其化学性质相近的内标物质,并准备好内标物质的标准溶液。

2.加入内标物质:将内标物质的标准溶液与待分析样品混合,使得内标物质和目标分析物共存于同一体系中。

3.分析样品:将加入内标物质的样品进行分析,得到目标分析物的响应信号和内标物质的响应信号。

4.计算:通过对比目标分析物的信号和内标物质的信号,计算出目标分析物的含量。

内标法的优点:1.消除误差:内标法可以减小仪器和环境的非特异性因素对分析结果的影响,从而减小误差。

2.稳定性高:内标物质的选择通常是与目标分析物性质相似,并且具有稳定性较高的物质,可以增加分析结果的准确性和重现性。

3.方便快捷:内标法的操作相对简单,适用于高通量的样品分析。

内标法的缺点1.内标物质的选择:选择合适的内标物质需要对目标分析物的化学性质有一定的了解,有时可能会遇到难以找到合适的内标物质的情况。

2.干扰因素:如果样品中存在与内标物质相似的物质或者存在与目标分析物相互作用的物质,可能会干扰分析结果。

二、外标法外标法是指将待测样品与已知浓度、纯度的外部参考物质进行比对,通过浓度差异来进行定量分析。

外标法常见的应用场景包括药物分析、生物学研究等。

外标法的具体操作步骤如下:1.准备外标物质:选择一个与目标分析物具有相似物理化学性质的外标物质,并准备好外标物质的标准溶液。

2.建立标准曲线:根据外标物质的标准溶液的不同浓度,分别测量其响应信号,并绘制标准曲线。

3.测量样品:将样品进行测量,得到目标分析物的响应信号。

内标法总结

内标法总结

内标法总结1. 概述内标法(Internal Standard Method)是一种定量分析方法,广泛应用于化学分析中。

该方法通过添加已知含量的内标物(Internal Standard)到待测样品中,用于校准和验证样品的分析结果。

内标法具有高准确性和精密度的特点,因此在定量分析中被广泛采用。

2. 内标物的选择在内标法中,选择合适的内标物对准确和可靠的结果至关重要。

内标物应满足以下要求:•结构化学性质相似:内标物与待测物具有相似的化学性质,以保证其在样品制备和分析过程中的行为相似。

•不干扰分析:内标物在分析过程中不受干扰物的影响,以保证准确的定量分析结果。

•可区分:内标物与待测物在分析过程中能够被准确区分,以避免误差发生。

根据实际需求和分析目标,可以选择合适的内标物,例如同位素标记化合物、内标元素、内标物标定等。

3. 内标法的步骤内标法的具体步骤如下:步骤1:准备内标物和待测样品选择合适的内标物,并准备已知浓度的内标物溶液。

同时,准备待测样品。

步骤2:内标溶液的添加向待测样品中加入已知浓度的内标物溶液,通常是以一定的体积比例添加。

步骤3:样品制备对待测样品进行必要的制备处理,例如溶解、摇匀、稀释等步骤,以保证内标物和待测物的均匀分布。

步骤4:测定样品根据具体的分析方法和仪器设备,对待测样品进行测定。

可以使用各种常用的分析技术,如色谱法、质谱法、光谱法等。

步骤5:数据计算与分析根据测定结果,使用内标法的计算公式,计算出待测物的浓度。

同时,进行数据分析,包括准确性和精密度的评估。

步骤6:结果验证根据内标法的可靠性和精确性,验证测定结果的准确性和可靠性。

可以通过对样品进行再测定、对比分析等方法进行结果验证。

4. 内标法的优点内标法作为一种定量分析方法,具有以下优点:•增加准确性:内标物作为内部参考物质,能够校正样品制备和测定过程中的误差,提高分析结果的准确性。

•提高精密度:内标法通过添加内标物,能够减小样品制备和测定过程中的变异性,提高分析结果的精密度。

内标法

内标法

内标法(Internal Standard Method)是将一定重量的纯物质作为内标物质(见文章内标物质)添加到混合物中的一定量的样品进行分析,然后对含有内标物质的样品进行色谱分析,根据公式确定内标物质和被测成分的峰面积(或峰高)以及相对校正系数,以计算出被测样品中成分的百分比。

内标法是色谱分析中更准确的定量方法,尤其是在没有标准参照物的情况下,这种方法显示出其优越性。

内标法是将一定重量的纯物质作为内标物添加到一定量的分析样品混合物中,并根据测试样品与内标物的质量比计算出被测成分的含量。

相应的色谱峰面积比和相对校正系数[1]。

其中,As和Ar分别是内标物和参比物质的峰面积或峰高,Ms 和Mr分别是内标物和参比物质的添加量。

然后,注入含有内标物的待测成分溶液,记录色谱图,并根据含有内标物的溶液的色谱峰响应值计算含量(MI):
其中,Ai和As分别是被测对象和内标的峰面积或峰高,MS是内标的添加量。

如有必要,应根据稀释倍数,样品量和标记量转换为指示量的百分比,或根据稀释倍数和样品量转换为百分比的比例将质量已知的纯物质添加到待测样品的溶液中,并将待测成分的含量与纯物质的量作标准进行比较。

纯物质称为内标。

ž选择要求
答:原始样本中没有任何成分
B.保留时间应接近但不与被测物体重叠
C.是高纯度标准物质,还是已知物质的含量
D.在给定的色谱条件下的化学稳定性。

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一、内标法
什么叫内标法?怎样选择内标物?
内标法是一种间接或相对的校准方法。

在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。

内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。

使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。

采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。

理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。

当然,在色谱分析条什下,内标物必须能与样品中各组分充分分离。

需要指出的是,在少数情况下,分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率,此时,他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标,来测定感兴趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所说的选择原则。

在使用内标法定量时,有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值?
影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。

由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。

化学方面的因素包括:
1、内标物在样品里混合不好;
2、内标物和样品组分之间发生反应,
3、内标物纯度可变等。

对于一个比较成熟的方法来说,色谱方面的问题发生的可能性更大一些,色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大,对面积比的影响则要小一些,但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度,那么一定有某个重要的色谱问题存在,比如进样量改变太大,样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别,检测器非线性等。

进样量应足够小并保持不变,这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。

如果认为方法比较可靠,而色谱固看来也是正常的话,应着重检查积分装置和设置、斜率和峰宽定位。

对积分装置发生怀疑的最有力的证据是:面积比可变,而峰高比保持相对恒定,
在制作内标标准曲线时应注意什么?
在用内标法做色话定量分析时,先配制一定重量比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析,测量峰面积,做重量比和面积比的关系曲线,此曲线即为标准曲线。

在实际样品分析时所采用的色谱条件应尽可能与制作标准曲线时所用的条件一致,因此,在制作标准曲线时,不仅要注明色谱条件(如固定相、柱温、载气流速等),还应注明进样体积和内标物浓度。

在制作内标标准曲线时,各点并不完全落在直线上,此时应求出面积比和重量比的比值与其平均位的标准偏差,在使用过程中应定期进行单点校正,若所得值与平均值的偏差小于2,曲线仍可使用,若大于2,则应重作曲线,如果曲线在铰短时期内即产生变动,则不宜使用内标法定量。

二、外标法
用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。

此法可分为工作曲线法及外标一点法等。

工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线,求出斜率、截距。

在完全相同的条件下,准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液,根据待测组分的信号,从标准曲线上查出其浓度,或用回归方程计算,工作曲线法也可以用外标二点法代替。

通常截距应为零,若不等于零说明存在系统误差。

工作曲
线的截距为零时,可用外标一点法(直接比较法)定量。

外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i组分的含量。

将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样,测得峰面积的平均值,用下式计算样品中i组分的量:
W=A(W)/(A)
式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分的重量及相应的峰面积。

(W)及(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i组分的重量及相应峰面积。

外标法方法简便,不需用校正因子,不论样品中其他组分是否出峰,均可对待测组分定量。

但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。

此外,为了降低外标一点法的实验误差,应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。


外标法external standard method
色谱分析中的一种定量方法,它不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定,把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。

外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度,分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近,以利于定量分析的准确性。

三、定量分析中怎样选择内标法或外标法(来源:药物分析网)
选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组分),然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液,进样得相对校正因子。

再将内标物加入欲测组分的样品中,进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。

用内标法公式计算即可。

内标法是将一定量的纯物质作内标物,加入到准确称量的试样中,根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比,来计算被测组分的含量。

选择内标物有4个要求:1.内标物应是该试样中不存在的纯物质;2.它必须完全溶于试样中,并与试样中各组分的色谱峰能完全分离;3.加入内标物的量应接近于被测组分;4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近,或在几个被测组分色谱峰中间。

内标法的优点是测定的结果较为准确,由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的,因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。

内标法的缺点是操作程序较为麻烦,每次分析时内标物和试样都要准确称量,有时寻找合适的内标物也有困难。

外标法简便,但进样量要求十分准确,要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行,否则造成分析误差,得不到准确的测量结果。

1、氢火焰离子化检测器(FID)用于微量有机物分析
2、热导检测器(TCD)用于常量、半微量分析,有机、无机物均有响应
3、电子捕获检测器(ECD)用于有机氯农药残留分析
4、火焰光度检测器(FPD)用于有机磷、硫化物的微量分析
5、氮磷检测器(NPD)用于有机磷、含氮化合物的微量分析
6、催化燃烧检测器(CCD)用于对可燃性气体及化合物的微量分析
7、光离子化检测器(PID)用于对有毒有害物质的痕量分析。

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