M5酶标仪简介
酶标仪使用方法
酶标仪使用方法酶标仪是一种常见的实验仪器，用于检测细胞、蛋白质等生物体内分子的含量和活性。
它通过测量化学反应的光学信号来确定分子的浓度，广泛应用于生物学、医学领域等科研实验和临床检测中。
本文将介绍酶标仪的使用方法，以帮助读者更好地理解和应用这一仪器。
酶标仪由灯源、检测系统、计算机等部分组成。
首先，我们需要在酶标板上加样。
通常情况下，酶标板上有多个孔，每个孔都可以加入不同的样品。
在加样之前，我们需要准备好需要测量的样品和相应的试剂。
试剂的种类和用途会根据测量的目的不同而有所差异，这一点可以在实验设计之前根据实验要求和文献资料进行选择。
将待测样品加入到酶标板的不同孔中后，需要将酶标板放入酶标仪中进行测量。
打开酶标仪的电源，选择相应的波长和测量模式。
波长的选择取决于我们所使用试剂的性质。
一般来说，我们会根据试剂说明书或者先前的实验经验来确定测量所需的最佳波长。
在测量过程中，仪器会通过激发光源照射在酶标板上，并测量样品发出的荧光或吸光度等光信号。
这些光信号和样品中分子的含量或活性有关。
仪器会通过检测系统将光信号转化为电信号，并发送给计算机进行分析和处理。
正确设置酶标仪的参数对于获取准确的实验结果至关重要。
首先，我们需要设置合适的增益或灵敏度。
过低的增益会导致信号过于弱小无法被检测到，而过高的增益则会引起信号饱和。
合理选择增益可以保证信号大小在仪器的可检测范围内，同时尽量减少噪音的干扰。
除了增益之外，还需要设置积分时间。
积分时间是指仪器采集光信号的时间长度。
一般来说，如果信号较强，则可以选择较短的积分时间，而如果信号较弱，则需要选择较长的积分时间来提高信噪比。
过长或过短的积分时间都会对测量结果产生影响，因此需要在实验前进行优化和调试。
在测量过程中，我们还需要进行质量控制。
质量控制是一种用于验证实验方法正确性和结果可靠性的手段。
可以通过在酶标板上添加标准品或质控品来进行质量控制。
标准品是已知浓度的样品，而质控品是具有已知活性的样品。
全波长酶标仪作用
全波长酶标仪作用
全波长酶标仪是一种广泛应用于分子生物学和生物化学分析中
的分析仪器。
它主要用于测定生物样品中的酶活性和蛋白质含量，以及检测核酸浓度和纯度。
全波长酶标仪可以通过可见光和紫外线光谱技术来测定样品的
吸收光谱，从而确定样品中生物分子的浓度和纯度。
这个过程基于比尔-朗伯定律，即样品吸收的光强度与其浓度成正比。
全波长酶标仪具有多种波长选择，可以在不同的波长下测定样品的吸光度，从而提高测定的准确性和灵敏度。
该仪器也可以自动计算和记录样品的吸收光谱，使数据分析更加简单和高效。
总之，全波长酶标仪是分子生物学和生物化学领域中必不可少的分析工具，能够帮助科学家们更加准确地测定生物样品中的酶活性、蛋白质含量、核酸浓度和纯度等参数。
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M5介绍
M-5产品介绍
配置
选择配置
广泛的临床应用
• 穿刺架：NGB-004穿刺架配 6CV1s探头 NGB-006穿刺架配 3C5s探头 NGB-008穿刺架配 3C1s探头 NGB-007穿刺架 配 10L4s和7L4s探头
• 脚踏开关 脚踏开关接口组件（脚踏开关的接口为USB接口 ）、 ECG组件
• 功能：3D成像 宽景成像 包 HPRF组件 DICOM 3.0接口及软件
国内超声市场部
M-5产品介绍
Logic Book(XP)
特点:
PC平台 腹部、妇产、血管、小器官、心脏等测量及分析软件 TruScan平台 ATO自动组织优化 自适应彩色增强技术 6段TGC 2D, 方向性能量多普勒,频谱多普勒和 M 型 2.0-5.0Mhz凸阵探头 一体化图文管理系统 4000 幅图像存储能力 原始数据管理系统 325帧(15 秒) 标准电影回放(64 MB) 2个USB接口 PC卡槽 可连接5 GB的PC卡及无线和有线网卡 电池供电1小时 选配:3D,CD-R/W,DICOM3.0台车,脚踏开关
国内超声市场部
M-5产品介绍
1、优异的外观设计
15寸大屏幕液晶显示器,可折叠
优异的外观设计
重量6.5KG
蓄电池供电,方便室外及移动操作
屏幕高亮度及高对比度不受角度影
响任意角度无偏差
国内超声市场部
M-5产品介绍
优异的外观设计
方便携带的流线形手柄
流线形手柄前置，可做为 手托缓解腕部疲劳，同时 更方便携带
线复合 空间复合 帧复合
有效抑制随机躁声和杂散回声，增强目标组织显示效果，提高整场图像的 均匀度。提高图像的时间和空间分辨率，令2D和彩色血流显示更加完美
酶标仪基本知识及其检测原理
酶标仪基本知识及检测原理酶标仪（MicroplateReader）是对酶联免疫检测（EIA）实验结果进行读取和分析的专业仪器。
酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。
酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别在近几年中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，同时促进了生殖健康技术水平提高。
目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目，如：乙肝五项、爱滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。
过去多数采用目测方法，报出的结果缺乏科学的依据。
例如：某弓形虫检测试剂盒中，临界值规定为：阴性对照品的OD值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。
肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行，但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。
国内多家权威机构，如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性，并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应使用酶标仪，并提供酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。
同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变（如：肝炎、爱滋病、优生优育等），判读更要求严谨，由误诊引起的纠纷很难处理。
另外，住院手术病人术前的丙肝、爱滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段，正逐渐被许多单位所采用。
酶标仪的使用方法作为微孔板比色计的酶标仪，其基本功能不外乎一个比色测定，所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面的差异，当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。
在临床实验室实际工作中，实验人员在使用酶标仪进行测定操作时，有时难免会对酶标仪的一些性能指标产生迷惑，甚至对酶标仪的应用产生错误的理解。
酶标仪——精选推荐
酶标仪酶标仪是什么？⽤来做酶联免疫反应的专⽤仪器。
本质上是⼀台光电⽐⾊计。
按照⽤途可以分为光吸收酶标仪和多功能酶标仪。
光吸收酶标仪，只有光吸收模块，所以只能做光吸收实验，核酸蛋⽩定量，酶学分析，ELISA，细胞分析。
主要型号：F50，SUNRISE。
区别，通道数不同。
F50为8通道，SUNRISE为12通道，包括⼀个参⽐通道。
光源不同，F50为LED冷光源，SUNRISE为卤素灯热光源。
波长范围不同，F50为400～750，SUNRISE为340～750，并且，可配温控模块。
另外，SUNRISE12个通道，检测更快。
有1个参⽐通道，可以开机可以⾃动校准波长。
可配温控模块，温控还是⽐较好的。
不⽤配电脑，集成有触控⾯板，内置Windows ce的系统。
F50体积⼩巧，检测准确，免费升级，免维护，不⽤换灯，卤素灯最多2年就需要更换，不⽤预热，使⽤⽅便。
两款都是经典的光吸收酶标仪。
相当的⽪实，耐⽤，⽽且也够准确。
多功能酶标仪除了光吸收模块，还有温控，⽓体模块，进样器，荧光模块，发光模块，震荡模块。
所以，波长范围200~1000全波长。
还会看到⼀个参数：OD范围：0～4。
在酶标仪上，测量光吸收量⽤OD表⽰样品的吸光度。
典型应⽤，核酸定量，因为核酸在260有特征吸收。
蛋⽩在280有特征吸收，故可以定量蛋⽩。
⽽，两者的⽐值，可以反应样品核酸的纯度。
DNA或RNA的浓度OD260=1.0相当于50 g/ml双链DNA(dsDNA)40 µg/ml单链DNA/RNA20 µg/ml寡核苷酸(Oligos)DNA或RNA的纯度DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0蛋⽩质定量—最常⽤的两种⽅法y Bradford法—考马斯亮蓝染⾊法考马斯亮蓝G-250和蛋⽩结合形成蓝⾊化合物（在595 nm处有最⼤吸收峰）BCA法蛋⽩质的酞胺键在碱性条件下和Cu2+反应⽣成Cu+与BCA结合形成紫⾊复合物（在562 nm处有最⼤吸收峰）因为特征吸收波长的原因，F50，SUNRISE不能做核酸和蛋⽩定量。
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用，如TECAN(M1000、M200等)，Thmeral(Varioskan Flash)，Bio-tek（Synergy 4等），MD（M2、M5）都可以应用于荧光检测。
1.概述室温下，大多数分子处于基态的最低振动能级，处于基态的分子吸收能量（光能、化学能、电能或热能）后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量，这种现象称为“发光现象”。
分子发光包括荧光，磷光，化学发光，生物发光等。
受到光照时发光，光照切断时发光立即消失的叫荧光，光照切断时，发光逐渐变弱以致消失的叫磷光，吸收化学反应的化学能量而发光叫化学发光，由生物能转变为光辐射的称作生物发光。
由于发光物质不同荧光有分子荧光和原子荧光之分，分子荧光为带光谱，原子荧光为线光谱，通常所说的荧光为分子荧光。
通过测定所发射荧光的特性和强度，可以对物质进行定性、定量分析。
2.荧光检测技术2.1荧光强度(FI)荧光强度与荧光物质的浓度成正比，这是荧光分析法是量分析的依据。
在生物学上的应用非常广泛，可以进行生物大分子定量，酶活性分析，荧光免疫分析，细胞学分析（细胞增殖，细胞毒理，细胞吸附等）和分子间相互作用。
2.1.1细胞凋亡检测Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。
Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。
但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase-3的活性明显下降。
设计出荧光物质偶联的短肽Z-DEVD-AMC。
在共价偶联时，AMC不能被激发荧光，短肽被水解后释放出AMC，自由的AMC才能被激发发射荧光（图1）。
酶标仪工作原理及使用方法
酶标仪简介：酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。
可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。
测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
酶标仪原理：酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单.微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.光是电磁波，波长100nm~400nm称为紫外光，400nm~780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。
人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。
绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。
酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
酶标仪基本知识及其检测原理
酶标仪基本知识及其检测原理光是电磁波，波长100nm-400nm称为紫外光，400nm-780nm之间的光可被人眼观察到，大子780nm称为红外光。
人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。
绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。
酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
检测单位：光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
检测单位用OD值表示，OD是opticaldelnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度，OD=10g（1/trans），其中trans为检测物的透光值。
根据Bouger-amberT-beer法则，OD值与光强度成下述关系：E=OD=logⅠ0/Ⅰ其中E表示被吸收的光密度，Ⅰ0为在检测物之前的光强度，Ⅰ为从被检测物出来的光强度。
OD值由下述公式计算：E=OD=C×D×E其中：C为检测物的浓度；D为检测物的厚度；E为摩尔因子。
在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。
如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。
因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。
但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。
在参照波长下，检测物光的吸收最小。
检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。
Anthos酶标仪检测值计算仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095.仪器定义没有光源下的透光值为0%，没有检测物的透光值为100%。
则实际检测中，检测物的透光值均在0%一100%之间。
透光值的计算如下：T=（Meas-Min）/（Max-Min）其中T为透光值，Meas为检测的二进位数值，Min为在0%的情况下检测的二进位数值，Max为在100%的情况下检测的二进位数值，举例如下：Anthos酶标仪的中心定位仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。
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，避免溶液蒸发腐蚀或损坏仪器内部光路系统。如果为有腐蚀性或挥发性
溶液，请带盖检测。 对于可见光吸收检测，使用全透明微孔板；紫外光吸收检测，使用紫外
可透全透明微孔板；荧光强度和荧光偏振，使用黑色不透明板，需要检测
底读的用黑色底透微孔板；化学发光和时间分辨荧光，使用白色不透明微 孔板。 SpectraMax M5 随仪器有一块紫红色的适配板，在检测96 孔板和384 孔 板光吸收以及荧光顶读的时候必须预先置于插槽中，然后再进行检测。
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二、检测样品分组设定
设定标准品
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二、检测样品分组设定
设定标准曲线：选择Experiment New Graphy
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二、检测样品分组设定
设定未知样品并根据标准品计算相应的浓度
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三、仪器保养注意事项
适用 6-384 孔板。96 孔微孔板最佳检测体积为200ul；384 孔微孔板最 佳检测体积为80ul 检测后的微孔板和比色皿不要长期置于仪器插槽中，检测后从仪器中取出
CuvetteSet
Note：可以写入实验记录，如实验名称、所用样品、实验时间、实验总结 CuvetteSet:可以编辑对比色皿进行检测设定和对所检测样品的分组 Plate：可以编辑对微孔板进行检测设定和对所检测样品的分组 等。
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一、软件操作步骤简介
• 仪器检测参数设定-Setting
五种读板模式
M5 酶标仪Βιβλιοθήκη 1M5 酶标仪简介
一、软件操作步骤
二、检测样品分组设定
三、仪器保养注意事项
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一、软件操作步骤
• 双击软件图标 打开软件
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一、软件操作步骤简介
• 软件界面-菜单栏
‘File’下拉菜单内含另存，保存，输出，打印等命令 ‘Edit’下拉菜单内含剪切，复制，粘贴，删除，重新计算等命令 ‘Experiment’下拉菜单内含新实验，新记录，新微孔板，新比色皿，新图等命 令 ‘View’下拉菜单内含关于页面显示的命令 ‘Protocols’下拉菜单内含超过120 种可以应用于各类生化和细胞实验的模版 ‘Control’下拉菜单内含开关插槽，震板，温控等命令 ‘Window’下拉菜单内含页面排列的命令
‘Help’下拉菜单内含软件版本号，SoftMax Pro User Guide 和Formula
Reference Guide
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一、软件操作步骤简介
• 软件界面-图标栏
仪器连接不正确时，图标栏显示 单击
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一、软件操作步骤简介
• 软件界面-文档区域
Experient区域-可以增加实验，它包括三个部分：Note、Plate和
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一、软件操作步骤简介
• 仪器检测参数设定-Setting
四种检测类型
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二、检测样品分组设定
单击Template，出现如下对话框
9
二、检测样品分组设定
设定空白
选中所用微孔A1 & A2 点击Groups 栏中的下拉菜单选中blank
结果结果如图所示
则其他的数据结果均显示为扣除本底(A1&A2 平均值)的结果