天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)
天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒(天门冬氨酸底物法)产品技术要求华宇亿康
天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒（天门冬氨酸底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的活性。
1.1 产品型号/规格1×10mL；1×20mL；1×40mL；2×50mL；4×40mL；4×50mL；5×50mL；2×100mL；4×100mL；2×40mL；1×20L；1×10L；1×5L；1×1L。
1.2 主要组成成分试剂：Tris缓冲液 5.0mmol/L乳酸脱氢酶≥6000U/L苹果酸脱氢酶≥3000U/Lα-酮戊二酸 14.0mmol/LL-天门冬氨酸 210.0mmol/L烟酰胺嘌呤二核苷酸 0.18mmol/L2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；中文包装标签应清晰、准确、牢固。
2.1.2 试剂应为无色至浅黄色澄清液体。
2.2 净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在光径1cm、主波长340nm下，以纯化水为检测样本时，吸光度应不小于1.000。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率在光径1cm、主波长340nm下，以纯化水为检测样本时，吸光度变化率(△A/min)应不大于0.004。
2.4 分析灵敏度AST含量为100U/L时，测定吸光度变化率（△A/min）应在0.030～0.090范围内。
2.5 线性范围2.5.1 在[5，500]U/L范围内，相关系数r应不小于0.990；2.5.2 在[5，100]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±10U/L；在（100，500]U/L 范围内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.6 测量精密度2.6.1 重复性分别重复测定高、低值两个浓度样本，测定结果的变异系数（CV）均应不大于5%。
2.6.2 批间差用三个批号的试剂盒测定同一浓度样本，测定结果的相对极差（R）应不大于10%。
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒(IFCC法)产品技术要求derui
医疗器械产品技术要求编号:
天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定试剂盒
（IFCC法）
2、性能指标
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以蒸馏水为空白时，波长340nm，光径1.0 cm，温度37℃，吸光度≥ 1.0。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以蒸馏水为空白时，波长340nm，光径1.0 cm，温度37℃，吸光度变化率≤0.004。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试130 U/L被测物时，吸光度变化率≥ 0.02。
2.4线性范围
2.4.1试剂盒在10 ~800U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。
表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒批内精密度CV 值应≤5.0%。
2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤10.0%。
2.6准确度
1
相对偏差（Bias%）应在参考物质靶值±10%以内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
2。
天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒(天门冬氨酸底物法)产品技术要求aiweide
天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒（天门冬氨酸底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人体血清中天门冬氨酸氨基转移酶的活性。
1.1 包装规格a) 试剂1：2×45 mL，试剂2：1×18mL；b) 试剂1：4×50 mL，试剂2：2×20mL；c) 试剂1：2×100mL，试剂2：2×20mL。
1.2 主要组成成分1.2.1试剂1主要组分Tris缓冲液100 mmol/LL-天冬氨酸240 mmol/L苹果酸脱氢酶>600 U/L乳酸脱氢酶﹥1200U/Lα-氧代戊二酸12mmol/LProClin300 适量1.2.2试剂2主要组份Tris缓冲液100 mmol/L还原型辅酶Ⅰ0.18mmol/LProClin300 适量2.1外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：无色或淡黄色澄清液体。
2.2试剂装量应不低于试剂瓶标示装量。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：在340nm处测定试剂空白吸光度，应≥1.5。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：在340nm处测定空白吸光度变化率|△A/min|应≤0.05。
2.4分析灵敏度测定AST含量为40U/L样本时，其|△A/min|应≥0.01。
2.5线性范围2.5.1测试浓度在[0，600] U/L范围内，线性回归的相关系数（r）应不低于0.990；2.5.2测试浓度在[0，60] U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±6 U/L；测试浓度在(60，600] U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.6 测量精密度2.6.1重复性：重复测试三个水平的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于5％。
2.6.2批间差：抽取3个不同批号的试剂，对同一份样本进行重复测定，相对极差≤10％。
2.7准确度以国家标准物质为检测样本时，测定结果相对偏差不超过±10％。
2.8 稳定性取在2℃～8℃条件下贮存达到18个月的试剂进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒(天门冬氨酸底物法)产品技术要求lideman
天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定试剂盒（天门冬氨酸底物法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的含量1.1规格试剂1（R1）:4×80mL, 试剂2（R2）：4×16mL；试剂1（R1）:5×60mL, 试剂2（R2）：5×12mL；试剂1（R1）:3×40mL, 试剂2（R2）：3×8mL；试剂1（R1）:2×80mL, 试剂2（R2）：2×16mL；试剂1（R1）:2×400mL, 试剂2（R2）：2×80mL；试剂1（R1）:5×45mL, 试剂2（R2）：5×15mL；试剂1（R1）:2×70mL, 试剂2（R2）：1×70mL；试剂1（R1）:1×20mL, 试剂2（R2）：1×6mL。
1.2试剂组成见表1：试剂1（R1）（以下简称R1）,试剂2(R2)（以下简称R2）。
表1 试剂组成2.1 外观液体双试剂：R1（缓冲液）：无色液体，R2（启动液）：无色液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1 空白吸光度在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度＞1.0 ABS。
2.3.2空白吸光度变化率在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，用去离子水作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应<0.004 ABS/min。
2.4 分析灵敏度浓度为50U/L时，吸光度变化率绝对值≥0.014。
2.5 线性范围在[1-600]U/L线性范围内，线性相关系数r2≥0.996。
在（100-600]U/L,范围内的相对偏差不超过10%；测定结果为[1-100]U/L时绝对偏差不超过10U/L。
2.6 精密度试剂盒测试项目精密度CV< 5 %。
天门冬氨酸氨基转移酶标准操作程序
天门冬氨酸氨基转移酶测定标准操作程序1. 摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆中天门冬氨酸氨基转移酶的活力，作辅助诊断用。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中天门冬氨酸氨基转移酶的浓度。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定天门冬氨酸氨基转移酶浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒采用的是紫外-苹果酸脱氢酶法。
5. 原理底物L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸在天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）作用下生成草酰乙酸，生成的草酰乙酸在苹果酸脱氢酶（MDH ）作用下转化成L-苹果酸，同时伴随着NADH 的氧化，引起在波长340 nm 处吸光度下降，下降速率与血清中AST 活力成正比。
谷氨酸草酰乙酸酮戊二酸天门冬氨酸---L L AST +−−→−+α酮戊二酸苹果酸草酰乙酸-++-−−→−++++αNAD L H NADH MD H6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：Tris 缓冲液、β-NADH 、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶（MEDH ）、L-天门冬氨酸、α-酮戊二酸7.3 试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
7.4 试剂准备：试剂为即用式。
8. 标准品和质量控制8.1 校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
AST
天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒（IFCC 推荐法） 使用说明书【产品用途】本试剂用于人血清或血浆中天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）的体外定量测定。
【测定原理】L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸AST草酰乙酸 + L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH + H ＋MDHL-苹果酸 + NAD ＋+ H 2O 在波长340nm 处测定NADH 降低速率，可计算出AST 活性。
【产品规格】R 1：60ml×2 R 2：15ml×2 R 1：80ml×2 R2：20ml×2【试剂成分及浓度】R 1 每1000ml 内含 100mmol Tris 缓冲液；15mmol α-酮戊二酸； 0.24mmol NADH ；3.0KU MDH ；R 2每1000ml 内含 3.0KU L-天门冬氨酸。
【样品和仪器要求】不溶血血清或肝素抗凝血浆。
样品中AST 在2-8℃可稳定3天。
各类全自动生化分析仪和半自动生化分析仪。
【试剂贮存条件与稳定性】试剂2-8℃避光密封保存，自生产之日起可稳定12个月。
避免污染在2-8℃下，试剂瓶开启后稳定14天；单试剂工作液稳定7天。
【测定方法】主/副波长：340nm/405nm 反应方法：速率法 反应方向：负【结果计算】AST(U/L) =（ΔA 测定/min -ΔA 空白/min ）× 3376 3376为在波长340nm/405nm ，比色杯光径1cm 下的理论K 值，其中NADH340nm 处的毫摩尔消光系数取6.22，建议各实验室根据实测K 值计算。
【正常参考值范围】37℃ 成人：5-49U/L建议各实验室建立自已的正常参考值范围。
【注意事项】1.试剂与样品用量可根据不同仪器要求，按比率改变，计算公式不变。
2.试剂请于2-8℃贮存，避免冷冻、污染，否则将导致失效。
3.高脂或黄疸样品在340nm 处有较高的吸收值，应稀释后再测定。
4.试剂若不慎溅到人体表面如皮肤、眼睛等，必须用清水冲洗；如果误服则需要到医院治疗。
AST
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)测定操作规程（SOP文件）1实验原理和检验目的本试剂用于人血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的体外定量测定。
AST门冬氨酸+ α-酮戊二酸谷氨酸+ 草酰乙酸MDH草酰乙酸+ NADH + H+ 苹果酸+ NAD+在波长340nm处测定NADH降低速率，计算出AST活力。
2标本采集和处理2.1标本种类和采集方法标本：新鲜无溶血血清。
受检者（体检对象或病人）的准备：对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯。
静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布。
2.2标本处理方法标本要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
样品采集后要离心标本，吸出血清。
标本应立即测定。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3试剂3.1试剂组成3.2试剂准备试剂为液体双试剂，开瓶即可使用，用后及时置于2～8℃避光保存。
3.3试剂稳定性试剂在2-8℃避光保存可稳定12个月，试剂开盖后稳定7天。
R1和R2以2：1混匀，即为单一工作试剂。
单一工作试剂稳定1周。
4校准4.1校准品每日进行试剂空白校准操作。
使用朗道（RONDOX）进行全点校准操作。
4.2校准品准备朗道（RONDOX）校准物复溶30分钟，充分溶解混匀后即可使用。
4.3校准品稳定性朗道（RONDOX）冻干校准物2～8℃密闭保存稳定至有效期，复溶后校准物15℃～25℃稳定8小时，2℃～8℃稳定2天，-15℃～-25℃稳定2周。
4.4试剂校准周期校准周期为2天。
当试剂批号更换时应重新校准。
5质控5.1质控品采用朗道（RONDOX）（正常范围质控）和朗道（RONDOX）（病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。
5.2可接受性判断质控物的检测值应在给定质控范围，或可以通过参加卫生部室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。
5.3质控操作每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。
如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操作，以排除可能发生的偶然误差；如果仍不符合质控要求，则应考虑质控品的重新准备、试剂的重新校准或更新、仪器的维护等。
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)简介：Leagene 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)其检测原理是天门冬氨酸氨基转移酶(AST)催化天门冬氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，草酰乙酸与NADH 经LDH 催化生成NAD +，上述方法实际为AST 速率法，其反应公式如下：在上述偶联反应中，NADPH 的氧化速率与样本中酶活性呈正比。
对于单试剂比色法，血清与试剂完整成分的底物溶液混匀，ALT 催化反应立即启动，进而计算酶的活性单位。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：① 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃保存1个月有效，用于AST/GOT 的检测。
② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存1个月有效，用于AST/GOT 的检测。
③ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的AST/GOT 含量。
2、 分光光度计检测：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。
如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
编号 名称TE0135 100TTE0135 200TStorageALT 检测液(R)成分 终浓度 2×50ml 2×100ml 4℃ 避光Tris 缓冲液 100mM L-天门冬氨酸 240mM 酮戊二酸 12mM NADH 0.22mM LDH 2500U/L 防腐剂 15mM使用说明书1份加入物空白管 测定管 AST 检测液(R)(μl)900900混匀孵育。
蒸馏水(μl) 45 －待测样品(μl) －45混匀，孵育，在340nm处各管吸光度变化，计算各管ΔA/min。
3、生化分析仪检测：按照下表设置主要参数。
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天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)简介：
转氨酶是催化α-氨基酸和α-酮酸之间氨基转换反应的一组酶，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)旧称谷草转氨酶(GOT)主要存在于心肌、骨骼肌、肝脏，以心肌含量最高，肝脏次之。
AST能够催化天门冬氨酸和a-酮戊二酸的氨基转移作用，形成谷氨酸和草酰乙酸。
Leagene 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)其检测原理是天门冬氨酸氨基转移酶(AST)催化天门冬氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，草酰乙酸与NADH经LDH催化生成NAD+，上述方法实际为AST速率法，其反应公式如下：
L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸→草酰乙酸+L-谷氨酸。
草酰乙酸+NADH+H+→L-苹果酸+NAD+。
在上述偶联反应中，NADPH的氧化速率与样本中酶活性呈正比。
对于单试剂比色法，血清与试剂完整成分的底物溶液混匀，ALT催化反应立即启动，通过分光光度计或自动分析仪检测在处吸光度下降速率(-ΔA/min)，下降速率(-ΔA/min)与AST活性呈正比，比色杯光径1.0cm，进而计算酶的活性单位。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、蒸馏水
2、比色杯
3、分光光度计或自动分析仪操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品：编号
名称TE0135
100T
TE0135
200T
Storage
ALT检测液(R)
成分终浓度
2×50ml 2×100ml 4℃避光Tris缓冲液100mM
L-天门冬氨酸240mM
酮戊二酸12mM
NADH 0.22mM
LDH 2500U/L
防腐剂15mM
使用说明书1份
①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，
-20℃保存1个月有效，用于AST/GOT的检测。
②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存1个
月有效，用于AST/GOT的检测。
③(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续
计算单位蛋白重量组织或细胞内的AST/GOT含量。
2、分光光度计检测：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避
免产生气泡。
如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
加入物空白管测定管
AST检测液(R)(μl) 900 900
混匀，孵育。
蒸馏水(μl) 45 －
待测样品(μl) －45
混匀，孵育，各管吸光度变化，计算各管ΔA/min。
3、生化分析仪检测：按照下表设置主要参数。
如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用
量或适当稀释后再进行测定。
波长340nm
反应温度37℃
孵育时间90s
连续监测时间60s
比色杯光径 1.0cm
系数3376
待测样品15μl
ALT检测液(R) 300μl
计算：
分光光度计计算公式：AST(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(945/45)=ΔA/min×3376 式中：6220=NADH的吸光度
945=反应液的总体积(μl)
45=待测样品体积(μl)
生化分析仪计算公式：AST(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(315/15)=ΔA/min×3376
式中：ΔA/min=测定的340nm吸光度的升高速率
6220=NADH的吸光度
315=反应液的总体积(μl)
15=待测样品体积(μl)
参考范围：成年健康人血清AST：8-40U/L
性能指标：
空白吸光度值≥1.0
空白测定值≤5U/L
线性范围：0-1000U/L
批内CV<4.0%
批间相对CV<6%
灵敏度：5U/L
注意事项：
1、抗坏血酸≤30mg/dl，游离胆红素≤40mg/dl，结合胆红素≤40mg/dl，甘油三酯≤
2000mg/dl对测定结果无影响。
2、如果生化分析仪内无所要求波长的滤光片，应选择接近的滤光片。
3、二硝基苯肼显色液溶解以后，如果仍然有结晶析出，应弃用。
4、血清中ALT活性在室温可以保存2天，4℃保存1周，-20℃保存1个月。
5、严重黄疸、脂血或溶血的血清，可能会引起测定管吸光度增高。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
打开包装以后，4℃保存一个月。
相关：
编号名称
DH0006 苏木素伊红(HE)染色液
PE0018 SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。