代谢组学的研究方法和研究流程
代谢组学小常识
代谢组学小常识概念：•代谢组：指一个细胞、组织或器官中所有代谢物的集合, 包含一系列不同类型的小分子（通常分子量<1000）, 比如肽、碳水化合物、脂类、核酸等。
•代谢组学：通过考察生物体系（细胞、组织或生物体）受刺激或扰动后，其代谢产物的变化或其随时间的变化，来研究生物体系的一门科学。
实验流程：（以液质联用为基础的代谢组学为例）•样本前处理：在保证小分子代谢物完整的前提下，处理的步骤越简单越好，以保证操作容易重复，也为大批量样本的处理节约时间。
•数据采集：依据实验目的有所不同。
o非目标代谢组学：选用高分辨质谱仪（TOF，Orbitrap等），有助于检测到尽可能多的化合物，另外高分辨的质核比数据也有助于数据库检索以及化合物的鉴定。
o目标代谢组学：通常使用三重四极其杆质谱，提高检测的灵敏度以及定量的准确性。
•数据预处理：峰提取，排列，归一化。
o多数质谱商家都提供了配套的预处理软件，例如安捷伦公司的MassHunter，热电的Sieve，沃特世的MarkerLynx以及Progenisis QI。
o同时也有一些基于网络的可以免费获取的软件。
建议使用配套的软件，因为不需要额外的数据转换，不需要上传数据，节省时间。
•数据分析：多元统计分析包括主成份分析（PCA）,偏最小二乘判别分析（PLS-DA），正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA），聚类分析（HCA）等。
各个厂商也提供了相应的统计分析软件，比如安捷伦的MPP，热电的Sieve，沃特世的Ezinfor。
目前常用的第三方软件是Simca-p，同时也有一些网络的开源软件可以使用。
•化合物鉴定：数据库检索，标准品对比，二级质谱对比。
代谢组学文章中常见的统计图（一）主成分分析（PCA）PCA得分图（score plot），用来看样本天然的分组情况，在分析时不加任何分组信息。
图中每一个点代表一个样本，样本在空间中所处的位置由其中所含有的代谢物的差异决定。
代谢组学的研究方法和研究流程演示文稿
代谢组学的研究方法和研究流程演示文稿代谢组学是研究生物体在特定状态下代谢物的整体谱图和变化规律的科学，主要通过技术手段获取和分析生物体内的代谢物，以揭示生物体在生理和病理过程中的代谢调控机制。
下面将介绍代谢组学的研究方法和研究流程，并以演示文稿的形式展示。
（演示文稿开始）第一页：代谢组学的研究方法第二页：样本采集样本采集是代谢组学研究的第一步，选择合适的样本对后续研究至关重要。
常用的样本包括血液、尿液、组织以及细胞培养基等。
样本采集需要遵循一定的操作规范，以保证采集到的样本质量。
第三页：代谢物提取代谢物提取是将样本中的代谢物从复杂的基质中分离出来的关键步骤。
传统的提取方法包括有机溶剂法、热甲醇法和酶解法等。
近年来，也出现了一些新的提取方法，如固相微萃取和液滴吸取等，具有提取效率高、代谢物稳定性好的优点。
第四页：代谢物分析代谢物分析是对提取的代谢物进行检测和定量的过程。
常用的代谢物分析技术包括质谱分析、核磁共振等。
质谱分析可以分为液相色谱质谱联用（LC/MS）和气相色谱质谱联用（GC/MS）两类，核磁共振可以分为核磁共振波谱（NMR）和磁共振成像（MRI）等。
第五页：数据处理数据处理是代谢组学研究中非常重要的一步，对代谢物的谱图进行选取、分析和建模，以研究代谢物在各个生理状态之间的变化。
常用的数据处理方法包括主成分分析（PCA）、线性判别分析（LDA）、偏最小二乘回归（PLS-DA）等。
第六页：代谢组学的研究流程第七页：实验设计实验设计是代谢组学研究的重要环节，包括实验组和对照组的确定、样本数目的确定、实验周期的安排等。
合理的实验设计可以最大程度地减少实验误差，提高研究结果的可靠性。
第八页：样本采集样本采集根据研究目的和实验设计进行，合理选择适用的样本，并在采集过程中严格遵守操作规范，确保样本的质量。
第九页：代谢物分析代谢物分析是对采集到的样本进行代谢物提取和分析，通过质谱分析和核磁共振等技术，获取样本中代谢物的谱图信息。
代谢组学小常识
代谢组学小常识Prepared on 21 November 2021代谢组学小常识概念：代谢组：指一个细胞、组织或器官中所有代谢物的集合, 包含一系列不同类型的小分子（通常分子量<1000）, 比如肽、碳水化合物、脂类、核酸等。
代谢组学：通过考察生物体系（细胞、组织或生物体）受刺激或扰动后，其代谢产物的变化或其随时间的变化，来研究生物体系的一门科学。
实验流程：（以液质联用为基础的代谢组学为例）样本前处理：在保证小分子代谢物完整的前提下，处理的步骤越简单越好，以保证操作容易重复，也为大批量样本的处理节约时间。
数据采集：依据实验目的有所不同。
o非目标代谢组学：选用高分辨质谱仪（TOF，Orbitrap等），有助于检测到尽可能多的化合物，另外高分辨的质核比数据也有助于数据库检索以及化合物的鉴定。
o目标代谢组学：通常使用三重四极其杆质谱，提高检测的灵敏度以及定量的准确性。
数据预处理：峰提取，排列，归一化。
o多数质谱商家都提供了配套的预处理软件，例如安捷伦公司的MassHunter，热电的Sieve，沃特世的MarkerLynx以及Progenisis QI。
o同时也有一些基于网络的可以免费获取的软件。
建议使用配套的软件，因为不需要额外的数据转换，不需要上传数据，节省时间。
数据分析：多元统计分析包括主成份分析（PCA）,偏最小二乘判别分析（PLS-DA），正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA），聚类分析（HCA）等。
各个厂商也提供了相应的统计分析软件，比如安捷伦的MPP，热电的Sieve，沃特世的Ezinfor。
目前常用的第三方软件是Simca-p，同时也有一些网络的开源软件可以使用。
化合物鉴定：数据库检索，标准品对比，二级质谱对比。
代谢组学文章中常见的统计图（一）主成分分析（PCA）PCA得分图（score plot），用来看样本天然的分组情况，在分析时不加任何分组信息。
图中每一个点代表一个样本，样本在空间中所处的位置由其中所含有的代谢物的差异决定。
代谢组学小常识
代谢组学小常识概念：代谢组：指一个细胞、组织或器官中所有代谢物的集合, 包含一系列不同类型的小分子（通常分子量<1000）, 比如肽、碳水化合物、脂类、核酸等。
代谢组学：通过考察生物体系（细胞、组织或生物体）受刺激或扰动后，其代谢产物的变化或其随时间的变化，来研究生物体系的一门科学。
实验流程：（以液质联用为基础的代谢组学为例）样本前处理：在保证小分子代谢物完整的前提下，处理的步骤越简单越好，以保证操作容易重复，也为大批量样本的处理节约时间。
数据采集：依据实验目的有所不同。
o非目标代谢组学：选用高分辨质谱仪（TOF，Orbitrap等），有助于检测到尽可能多的化合物，另外高分辨的质核比数据也有助于数据库检索以及化合物的鉴定。
o目标代谢组学：通常使用三重四极其杆质谱，提高检测的灵敏度以及定量的准确性。
数据预处理：峰提取，排列，归一化。
o多数质谱商家都提供了配套的预处理软件，例如安捷伦公司的MassHunter，热电的Sieve，沃特世的MarkerLynx以及Progenisis QI。
o同时也有一些基于网络的可以免费获取的软件。
建议使用配套的软件，因为不需要额外的数据转换，不需要上传数据，节省时间。
数据分析：多元统计分析包括主成份分析（PCA）,偏最小二乘判别分析（PLS-DA），正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA），聚类分析（HCA）等。
各个厂商也提供了相应的统计分析软件，比如安捷伦的MPP，热电的Sieve，沃特世的Ezinfor。
目前常用的第三方软件是Simca-p，同时也有一些网络的开源软件可以使用。
化合物鉴定：数据库检索，标准品对比，二级质谱对比。
代谢组学文章中常见的统计图（一）主成分分析（PCA）PCA得分图（score plot），用来看样本天然的分组情况，在分析时不加任何分组信息。
图中每一个点代表一个样本，样本在空间中所处的位置由其中所含有的代谢物的差异决定。
PCA载荷图（loading plot），用来寻找差异变量。
代谢组学概述
代谢组学概述代谢组学(metabonomics/metabolomics)是效仿基因组学和蛋白质组学的研究思想，对生物体内所有代谢物进行定量分析，并寻找代谢物与生理病理变化的相对关系的研究方式，是系统生物学的组成部分。
其研究对象大都是相对分子质量1000以内的小分子物质。
先进分析检测技术结合模式识别和专家系统等计算分析方法是代谢组学研究的基本方法。
一：代谢组学分析流程一般来说，代谢组的分析流程有：首先将代谢组分进行预处理，预处理的方法由测量分析方法决定，如使用质谱方法分析，则需要预先对代谢组分进行分离和离子化。
接着，再对预处理后的组分进行定性和定量分析。
预处理中，常用分离方法包括：气相色谱（Gas chromatography，GC），高效液相色谱（High performance liquid chromatography，HPLC）。
气相色谱具有较高的分辨率，但需要对代谢组分进行气化，并且对组分分子质量有一定的限制。
高效液相色谱也在代谢组分析中被广泛地使用，因其在液相中对代谢组分进行分离，因此不用对组分进行气化，相较气相色谱具有测量范围更广，更灵敏的优点。
此外，毛细管电泳法（Capillary electrophoresis）也可以对代谢组分进行分离，其应用较少，但在理论上其分离效率比高效液相色谱法高。
在预处理时，常常会加入内参（internal standards），以方便后续对样品的质量进行监控和对比，由于不同的实验批次、样品顺序对后续测量也有一定对影响，因此，还会加入空对照和混合样品对照来进行质量监控。
对不同的代谢组分进行定性和定量分析的方法包括质谱分析法（Mass spectrometry，MS)和核磁共振谱（Nuclear Magnetic Resonance Imaging，NMR）等。
其中，质谱分析法具有灵敏度高，特异性强等优点，被广泛地应用于检测代谢组分，可以对经过分离、离子化处理后的代谢组分进行定性和定量。
代谢组学的研究方法和研究流程演示文稿
代谢组学的研究方法和研究流程演示文稿代谢组学是研究生物体内代谢产物的全谱组分和相互关系的科学，主要应用于生命科学和医学领域。
下面是代谢组学的研究方法和研究流程的演示文稿。
研究方法：1.样本采集：首先，需要选择适当的研究对象，如人体组织、动物模型或细胞株。
然后，采集样本，如血液、尿液、组织、细胞等。
样本采集应该遵循严格的操作规范，以保证准确性和可重复性。
2.代谢分析：采集样本后，需要进行代谢分析。
常用的代谢分析方法包括质谱和核磁共振等技术。
质谱可以分析代谢物的质量和结构信息，而核磁共振可以提供代谢物的定性和定量分析。
3.数据处理：代谢组学研究会产生大量的数据，因此，数据处理是非常重要的一步。
通过使用统计学和生物信息学等方法，对代谢谱数据进行整理、标准化和归一化处理，以便于后续的数据分析和解释。
4.数据分析：在数据处理后，需要进行数据分析。
常用的数据分析方法包括差异分析、主成分分析和聚类分析等。
通过比较不同组间的代谢物丰度差异，可以找出与特定生理或疾病状态相关的代谢物。
5.代谢网络分析：代谢组学不仅关注代谢物本身，还研究代谢物之间的相互关系。
通过构建代谢物之间的相互作用网络，可以揭示生物体内代谢的整体结构和功能。
研究流程：1.问题定义：首先，需要明确研究的目的和问题。
例如，研究特定疾病的代谢异常机制，或者寻找新的生物标志物等。
2.实验设计：根据问题的定义，制定合适的实验设计。
包括选择适当的研究对象和样本，确定样本采集的时间点和条件等。
3.样本采集和处理：根据实验设计，采集样本，并进行适当的处理，如离心、冻存等。
样本的处理应按照规定的操作流程进行，以确保样本的质量和完整性。
4.代谢分析和数据处理：对样本进行代谢分析，获得代谢谱数据。
然后，对数据进行处理，如整理、标准化和归一化等。
5.数据分析和解释：根据实验设计和数据处理的结果，进行数据分析。
通过比较不同组间的代谢物丰度差异，找出与特定生理或疾病状态相关的代谢物。
代谢组学小常识
代谢组学小常识概念：•代谢组：指一个细胞、组织或器官中所有代谢物的集合, 包含一系列不同类型的小分子（通常分子量<1000）, 比如肽、碳水化合物、脂类、核酸等。
•代谢组学：通过考察生物体系（细胞、组织或生物体）受刺激或扰动后，其代谢产物的变化或其随时间的变化，来研究生物体系的一门科学。
实验流程：（以液质联用为基础的代谢组学为例）•样本前处理：在保证小分子代谢物完整的前提下，处理的步骤越简单越好，以保证操作容易重复，也为大批量样本的处理节约时间。
•数据采集：依据实验目的有所不同。
o非目标代谢组学：选用高分辨质谱仪（TOF，Orbitrap等），有助于检测到尽可能多的化合物，另外高分辨的质核比数据也有助于数据库检索以及化合物的鉴定。
o目标代谢组学：通常使用三重四极其杆质谱，提高检测的灵敏度以及定量的准确性。
•数据预处理：峰提取，排列，归一化。
o多数质谱商家都提供了配套的预处理软件，例如安捷伦公司的MassHunter，热电的Sieve，沃特世的MarkerLynx以及Progenisis QI。
o同时也有一些基于网络的可以免费获取的软件。
建议使用配套的软件，因为不需要额外的数据转换，不需要上传数据，节省时间。
•数据分析：多元统计分析包括主成份分析（PCA）,偏最小二乘判别分析（PLS-DA），正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA），聚类分析（HCA）等。
各个厂商也提供了相应的统计分析软件，比如安捷伦的MPP，热电的Sieve，沃特世的Ezinfor。
目前常用的第三方软件是Simca-p，同时也有一些网络的开源软件可以使用。
•化合物鉴定：数据库检索，标准品对比，二级质谱对比。
代谢组学文章中常见的统计图（一）主成分分析（PCA）PCA得分图（score plot），用来看样本天然的分组情况，在分析时不加任何分组信息。
图中每一个点代表一个样本，样本在空间中所处的位置由其中所含有的代谢物的差异决定。
质谱代谢组学
EI 电离经常会导致分子离子的丢失------找不到匹配
的EI谱------缺少的分子离子的质量信息将使可能的化合物的数 量变得非常庞大 因此，GC/MS最适合对已知的或预期的代谢物进行分析
5、LC/MS 分析
二、GC-MS和LC-MS
液相色谱可以分离无挥发性和未衍生化的代谢物。因此， LC/MS可以分析的化合物种类范围比GC/MS 更广
2、代谢组学的一般流程
一、代谢组学基本知识
代谢组学
发现代谢组学
靶向代谢组学
3、发现代谢组学的一般流程
一、代谢组学基本知识
代谢谱分析（也称为差异表达分析），在一组实验和对 照样品中，寻找丰度改变有统计学意义的感兴趣代谢物
鉴定，进行代谢谱分析后，测定这些代谢 物的化学结构
解释，研究流程的最后一步，解释所发现的 代谢物与生物过程或生物状态之间的关联
而且重现性好，而且不会受离子抑制的影响
简单的鉴定方法只需要扣除了背景的EI 图谱，和一个通用 EI谱库检索，如NIST 谱库。更有效的鉴定方法是采用包含了 预期的化合物保留时间和EI 图谱的特定应用数据库同时对分 析物的色谱保留时间和质谱图进行检索
4、GC/MS 分析
EI源的缺点
二、GC-MS和LC-MS
三、发现代谢组学
3、发现代谢组学有以下六个步骤
3、数据标准化，对保留时间和响应的漂移给予必要的校正
三、发现代谢组学
4、统计分析，用于发现样品组别之间的统计学差异
5、鉴定，GC/MS 所得的EI 图谱非常适合进行谱库检索 6、解释，一旦代谢物被鉴定出来，就需要通过解释实验结 果，推断其在代谢的生物通路中的地位
代谢组学：基于质 谱的研究方法
汇报人：张富昌 指导教师：田中民 西安交通大学 2014年4月13日
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代谢组学的研究方法和研究流程分子微生物学１12３０0０0３林兵随着人类基因组计划等重大科学项目的实施，基因组学、转录组学及蛋白质组学在研究人类生命科学的过程中发挥了重要的作用，与此同时, 代谢组学(ｍｅtaｂoloｍiｃs）在2０世纪90年代中期产生并迅速地发展起来，与基因组学、转录组学、蛋白质组学共同组成系统生物学。
基因组学、转录组学、蛋白质组学和代谢组学等各种组学0在生命科学领域中发挥了重要的作用，它们分别从调控生命过程的不同层面进行研究, 使人们能够从分子水平研究生命现象, 探讨生命的本质, 逐步系统地认识生命发展的规律.这些组学手段加上生物信息学, 成为系统生物学的重要组成部分。
代谢组学的出现和发展是必要的, 同时也是必须的。
对于基因组学和蛋白质组学在生命科学研究中的缺点和不足, 代谢组学正好可以进行弥补。
代谢组学研究的是生命个体对外源性物质（药物或毒物)的刺激、环境变化或遗传修饰所做出的所有代谢应答, 并且检测这种应答的全貌及其动态变化。
代谢组学方法为生命科学的发展提供了有力的现代化实验技术手段, 同时也为新药临床前安全性评价与实践提供了新的技术支持与保障.1 代谢组学的概念及发展代谢组学最初是由英国帝国理工大学Ｊereｍｙ N ichｏｌson教授提出的，他认为代谢组学是将人体作为一个完整的系统，机体的生理病理过程作为一个动态的系统来研究, 并且将代谢组学定义为生物体对病理生理或基因修饰等刺激产生的代谢物质动态应答的定量测定。
20０0年，德国马普所的Fｉeｈn等提出了代谢组学的概念，但是与Ｎ ichoｌs ｏn提出的代谢组学不同, 他是将代谢组学定位为一个静态的过程，也可以称为/代谢物组学, 即对限定条件下的特定生物样品中所有代谢产物的定性定量分析。
同时Ｆieｈn还将代谢组学按照研究目的的不同分为4类: 代谢物靶标分析，代谢轮廓（谱)分析, 代谢组学，代谢指纹分析。
现在代谢组学在国内外的研究都在迅速地发展, 科学家们对代谢组学这一概念也进行了完善, 作出了科学的定义: 代谢组学是对一个生物系统的细胞在给定时间和条件下所有小分子代谢物质的定性定量分析，从而定量描述生物内源性代谢物质的整体及其对内因和外因变化应答规律的科学。
与基因组学、转录组学、蛋白质组学相同, 代谢组学的主要研究思想是全局观点。
与传统的代谢研究相比, 代谢组学融合了物理学、生物学及分析化学等多学科知识, 利用现代化的先进的仪器联用分析技术对机体在特定的条件下整个代谢产物谱的变化进行检测，并通过特殊的多元统计分析方法研究整体的生物学功能状况。
由于代谢组学的研究对象是人体或动物体的所有代谢产物, 而这些代谢产物的产生都是由机体的内源性物质发生反应生成的，因此，代谢产物的变化也就揭示了内源性物质或是基因水平的变化，这使研究对象从微观的基因变为宏观的代谢物，宏观代谢表型的研究使得科学研究的对象范围缩小而且更加直观，易于理解, 这点也是代谢组学研究的优势之一.代谢组学的优势主要包括：对机体损伤小，所得到的信息量大，相对于基因组学和蛋白质组学检测更加容易。
由于代谢组学发展的时间较短, 并且由于代谢组学的分析对象是无偏向性的样品中所有的小分子物质，因此对分析手段的要求比较高, 在数据处理和模式识别上也不成熟，存在一些不足之处。
同时生物体代谢物组变化快, 稳定性较难控制，当机体的生理和药理效应超敏时，受试物即使没有相关毒性，也可能引起明显的代谢变化，导致假阳性结果。
代谢组学应用领域大致可以分为以下7个方面：（1）植物功能基因组研究, 主要以拟南芥为研究模型，也包括一些转基因作物的研究.（2）疾病诊断, 根据代谢物特征图谱诊断肿瘤、糖尿病等疾病.（ 3）制药业即新药临床前安全性评价，主要通过高通量比对预测药物的毒性和有效性，通过全面分析来发现新的生物指示剂.（ 4）微生物领域.（5)毒理学研究，包括利用代谢组学平台研究环境毒理及药物毒理。
( 6）食品及营养学，即研究食品中进入体内的营养成分及其与体内代谢物的相互作用.（ 7 ）在中药现代化及其机理上的研究。
2 代谢组学的研究方法代谢组学的研究过程一般包括代谢组数据的采集、数据预处理、多变量数据分析、标记物识别和途径分析等步骤。
首先，采集生物样品（如尿液、血液、组织、细胞和培养液等），对其进行生物反应灭活、预处理。
再运用先进的分析手段如核磁共振、质谱或色谱等检测样品中所有代谢物的种类、含量、状态，从而得到原始的大量的反映生物样品信息的实验数据，而后使用多变量数据分析方法对获得的多维复杂数据进行降维和信息挖掘，从这些复杂大量的信息中筛选出最主要的最能反映代谢物变化的主要成分，再通过模式识别将其与标准的代谢物谱进行比对，或是根据代谢物谱在时程上的变化来寻找生物标记物，研究相关代谢物变化涉及的代谢途径和变化规律, 以阐述生物体对相应刺激的响应机制。
同时由于不同分析手段各有其特点，在不同应用领域使用的分析方法也是有所不同的。
2。
1 核磁共振技术核磁共振( nuclearmａgnetiｃ reｓonaｎce，NMR )是有机结构测定的四大谱学之一, 作为一种分析物质的手段, 由于其可深入物质内部而不破坏样品，并具有迅速、准确、分辨率高等优点而得以迅速发展和广泛应用。
在代谢组学发展的早期， NMＲ技术被广泛应用在毒性代谢组学的研究中。
ＮMR 的优势在于能够对样品实现无创性、无偏向的检测，具有良好的客观性和重现性, 样品不需要烦琐处理，具有较高的通量和较低的单位样品检测成本。
此外, １Ｈ—NMＲ对含氢化合物均有响应, 能完成样品中大多数化合物的检测, 满足代谢组学中的对尽可能多的化合物进行检测的目标。
NMＲ虽然可对复杂样品如尿液、血液等进行非破坏性分析，与质谱法相比, 它的缺点是检测灵敏度相对较低(采用现有成熟的超低温探头技术，其检测灵敏度在纳克级水平）、动态范围有限，很难同时测定生物体系中共存的浓度相差较大的代谢产物；同时，购置仪器所需的投资也较大。
为了改进NＭR检测灵敏度较低的缺点，可采用高分辨核磁共振技术或使用多维核磁共振技术和液相色谱- 核磁共振联用（LC-NMR）。
魔角旋转（mａgｉcangle sp ｉnninｇ，MAＳ)核磁共振技术是20世纪90 年代初发展起来的一种新型的核磁共振技术，在代谢组学的研究中,魔角旋转核磁共振波谱技术已被成功地应用到研究生物组织上，因为生物组织在核磁共振实验中会由于磁化率不均匀、分子运动受限等因素而引起谱线增宽.这些因素利用固体核磁共振中的ＭAＳ方法可以消除。
例如大鼠肝脏、哺乳动物肾脏以及大鼠睾丸组织等.２。
2 质谱联用技术ＧC—MS是代谢组学常用的方法,原先主要应用于植物组学研究，随着代 }工程和分析技术的快速发展，其在微生物代谢组学的应用越来越引起关注.GC—MS的分离效率高,易于使用且较为经济,特别是采用标准的电子轰击（EI）模式后，其使用范围和重复性都进一步提高。
但是GC—MS需要对挥发性较低的代谢物进行衍生化预处理，这一步骤会耗费额外的时间，甚至引起样品的变化。
受此限制，GC—MS无法分析热不稳定性的物质和分子量较大的代谢产物。
近来，多维分离技术如二级气相色谱飞行时间质谱（GＣ—GC—ＴOF—MS）,检测范围更广，但由于实际应用困难和花费较高等问题使其并未普遍使用。
第1篇关于微生物代谢组学的文献报道了应用3种不同的ＧC—ＭS技术,分析肠系膜明串珠菌发酵生产葡聚糖过程中脂肪酸、氨基酸和糖类以监测微生物污染。
ＬC—ＭS无需进行样品的衍生化处理，检测范围广,可以作为GＣ—ＭS的补充，非常适合于生物样本中低挥发性或非挥发性、热稳定性差的代谢物。
LC与电喷雾（ＥSＩ）质谱连用可以分析大部分极性代谢物,此外，离子配对(IP）LC—MS、亲水相互作用液相色谱ＨILI Ｃ—MS、反相ＬＣ—ＭＳI等可以进行不同种类代谢物的及时定量分析。
Breｒａu等利用H ＩＬIC—MＳ获得了大肠杆菌和酿酒酵母饥饿胁迫应答的代谢指纹图谱，测出68种胞内代谢物的浓度发生了改变。
ＬC—ESI—MS—MＳ分析被用于测量葡萄糖冲击下的酿酒酵母的糖分解和三羧酸循环中间代谢产物。
ＣE—MS分离样品效率比普通的色谱质谱联用要高得多,仅需要极少的进液量（ｎL），而且其测试时问短，试剂成本低。
ＣE-ＭS在微生物代谢组领域发挥着越来越重要的作用。
O ｈashｉ等［221通过CＥ—TOF—ＭＳ对大肠杆菌的阴离子和阳离子代谢产物进行了全面分析和定量，鉴别出主要代谢物中的37５个亲水性中问体,并对其中的198个代谢物进行了定量。
Ｈarada等运用反相电渗流（ＥOF)CＥ—ＭS高效分离了辅酶A、有机酸、核苷酸和磷酸糖.So ｇa等用CE—MS系统研究了枯草杆菌在芽孢发生过程中的代谢谱的变化过程,识别出1692种代谢物，并鉴别出其中的15０种。
3 代谢组学的研究流程代谢组学研究的技术平台一般流程包括样品制备、代谢产物的检测和分析鉴定、数据分析与模型建立.下图为代谢组学的流程图微生物代谢物样品的制备一般分为微生物培养、淬灭和代谢产物的提取。
根据研究对象、目的和采用的分析技术不同,所需的样品提取和预处理方法各异,不存在一种普适性的标准化方法。
在样品淬灭和代谢物的提取过程中,应遵循的原则是：(1)淬灭工艺最好可以立即冻结细胞代谢。
（2）在淬灭过程中要求细胞膜无明显损伤，以免胞内代谢物外泄。
（3）提取过程中应该尽可能多的提取胞内代物。
（4)代谢产物不应该遇到任何物理或化学修饰。
（5)得到的样品基质应与所选择的分析方法相容.冷甲醇和液氮是最常用的淬灭方法，而在提取方面由于特定的提取条件往往仅适合某些类化合物，目前尚无一种能够适合所有代谢产物的提取方法。
应该根据不同的化合物选择不同的提取方法，并对提取条件进行优化.2 代谢产物的分析鉴定生命科学领域的巨大进步与先进分析技术密不可分，进行代谢组学研究首要解决的是分析方法上的理论和技术问题。
传统的酶法定量胞内外代谢物只能分析一个样品中的一个或几个代谢物,且需要的样品体积大。
而胞内代谢物'浓度一般很低，在淬灭或提取过程中又会被稀释,所得的样品体积一般很少，这些都将严重影响酶法定量的可靠性。
代谢组学定量胞内外代谢物的分析方法要求具有高灵敏度、高通量和无偏向性的特点。
在分析复杂的胞内外产物时，所选用的分析方法是十分重要的，一般根据样品的特性和试验目的，选择最合适的分析方法。
目前最常用的分离分析手段是气相色谱与质谱联用（GC—MS)、液相色谱与质谱联用（ＬＣ—MS）、毛细管电泳与质谱联用(CE—MS)以及核磁共振(ＮMR)。
３数据分析策略在代谢组学研究中，大多数是从检测到的代谢产物信息中进行两类（如基因突变前后的响应）或多类（如不同表型问代谢产物)的判别分类以及生物标记物的发现。