梅毒实验室诊断标准
性病实验室梅毒SOP
目的：规范的梅毒螺旋体检验操作，确保检测结果准确。
适用范围：性病实验室工作人员责任人：实验操作者1、标本的采集与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1操作应规范化。
1.1.2所有标本都应当被视为具有传染性，医务人员应戴手套谨慎操作。
1.2梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法，各期梅毒的检测方法及部位见下表。
1.2.1血液1.2.1.1血清标本根据需要，用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml，室温静置1-2小时（或37℃静置30分钟），待血液凝固、血块收缩后，3000r/min离心10-15分钟，分离新鲜血清，备用。
也可采用保存于2-8℃或-20℃的血清。
溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。
1.2.1.2血浆标本根据需要，用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml，轻轻颠倒混匀8-10次，3000r/min离心10-15分钟，分离血浆，备用。
血库血浆以及EDTA 抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验（一般仅用于RPR实验，），但易出现假阳性反应（需用血清复试），如用其他抗凝剂应首先评价后再用。
1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂，1岁以下儿童采用足跟部）。
一次性采血针刺破皮肤，用无菌棉签擦掉第一滴血。
收集滴出的血液，立即用于检测。
1.2.2皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测，或取渗出液直接涂片，用于镀银染色试验。
1.2.2.2用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，刮取渗出液，加入有DNA保存液（1ml/管）的标本管中，备用。
1.2.3淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结，注入0.3ml无菌生理盐水并反复抽吸2-3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片后立即进行暗视野镜检或备用。
梅毒实验室诊断标准
梅毒实验室诊断标准梅毒是一种性传播疾病，常常被忽视或者被误诊。
因此，梅毒实验室诊断是非常重要的。
在实验室中，我们必须根据一些特定的标准和指南来确诊患者是否患有梅毒。
下面就是梅毒实验室诊断标准的一些重要信息和要求。
1. 梅毒实验室诊断标准的类型梅毒实验室诊断标准包括两类：直接检测和间接检测。
直接检测包括酸化染色、暗视野显微镜检查和核酸检测等。
间接检测包括梅毒螺旋体抗体检测和梅毒螺旋体结构抗原酶联免疫吸附检测等。
2. 梅毒实验室诊断标准的优点梅毒实验室诊断的优点是能够快速准确地诊断患者是否患有梅毒。
这对于治疗和防止传染病的传播是至关重要的。
实验室检测可以提供比症状检查更准确的结果，特别是在早期诊断中，因为症状往往不明显或没有症状。
3. 梅毒实验室诊断标准的要求在进行实验室测试之前，我们必须注意以下要求：（1）样本的获取必须符合标准。
例如，尿液、血液、脑脊液、皮损等。
（2）样本的储存和运输必须严格按照标准，避免污染或破坏。
（3）操作人员必须具备专业知识和技能，以确保测试结果的准确性。
4. 梅毒实验室诊断标准的解读在进行实验室测试之后，我们必须仔细解读测试结果。
鉴于梅毒是一种非常复杂的疾病，我们需要权衡许多因素，如病人的症状，既往病史等。
不同的测试结果需要不同的解读方法。
结论在人们越来越重视健康的时代，实验室检测成为了诊断疾病的关键手段之一。
梅毒实验室诊断标准的确立，将有助于准确识别和预防梅毒的传播。
我们应该加强对实验室操作、标本采集和处理、测试结果解读等方面的培训，以确保实验室测试的准确性和安全性。
性病实验室诊断标准及应用20180627
不能开展暗视野、 IgM 采静脉血、RPR定量
能开展暗视野、IgM
阴 性
滴度﹤母 亲4倍，无 症状 每3个月 RPR定量， 观察症状
预治疗
阳 性
滴度﹤母 亲4倍，有 症状
阴 性
滴度≧母 亲4倍，无 论有无症 状
阳 性
无此线？
治疗、 随访 18月 TPPA
连续2次阴 性
6月后RPR未阴， 滴度低水平
TPPA类试验
传单增多症 麻风 疟疾 莱姆病 大家忘 掉只有 梅毒才 能达到 1:8？ 也要忘 掉其它 疾病达 不到1:8
感染因素
非感染因 素
SLE 甲状腺炎
RPR在妊娠患者中，有28%的假阳性发生
梅毒血清学检测策略的思考
梅毒血清学检测---策略一
非梅毒螺旋体抗原血清试验（RPR 非梅毒螺旋体抗原血清试验（ RPR) )
分期/类
病例分 类 6.1.1 疑似病 例
符合条件
描述
实验室对应的条件
6.1 一期 梅毒
应同时符合4.1.1和4.1.2 并符合4.1.3.2或4.1.3.3 中的一项
4.1.1 流行病学史 4.1.2 临床表现 4.1.3.2非梅毒螺旋体血清学试验 4.1.3.3. 梅毒螺旋体血清学试验 4.1.1 流行病学史 4.1.2 临床表现 4.1.3.1暗视野显微镜检查、镀银 染色检查或核酸扩增试验 4.1.3.2非梅毒螺旋体血清学试验 4.1.3.3. 梅毒螺旋体血清学试验
性传播疾病实验室诊断标准及应用
四川省医学科学院˙四川省人民医院 四川省医学科学院˙ 雍刚
检验人员应该做什么？
• • • • 满足临床和病人的需求。 满足梅毒诊断标准要求。 检验项目齐全。 做好质量管理，保证结果准确。
报告性病诊断标准
隐性梅毒的诊断标准
胎传梅毒的诊断标准
确诊病例－实验室诊断病例 病史：生母为梅毒患者或感染者 临床表现：2岁以内发病的早期胎传梅毒，类似于二期梅毒表现；2岁以后发病的晚期胎传梅毒，类似于三期梅毒的表现。胎传隐性梅毒，无症状。 实验室检查 皮损或胎盘检查：TP暗视野检查阳性。患儿检出19S-lgM抗体。 或 RPR/TRUST阳性，抗体滴度等于或高于生母4倍(2个稀释度)，其中滴度低者需随访；和TPPA/TPHA阳性 疑似病例－疑似病例 病史：生母为梅毒患者或感染者 临床表现：2岁以内发病的早期胎传梅毒，类似于二期梅毒表现；2岁以后发病的晚期胎传梅毒，类似于三期梅毒的表现。胎传隐性梅毒，无症状。 实验室检查 RPR/TRUST阳性，抗体滴度等于或高于生母4倍(2个稀释度)。未做TPPA/TPHA
价格昂贵 操作繁琐
TPHA
超声裂解的梅毒螺旋体致敏红细胞 产生肉眼可见的凝集反应
敏感性好 操作简单
红细胞易产生非特异性凝集
TPPA
原理与TPHA相同，以人工合成的惰性明胶作为载体
试剂稳定 结果清晰
早期梅毒敏感性低于FTA-ABS
TP-ELISA
超声裂解或重组的梅毒螺旋体抗原包被聚乙烯板 酶标抗原
价格较低 大样本筛查 可实现自动化
非梅毒螺旋体抗原血清试验
梅毒螺旋体抗原血清试验
感染因素
肺结核 病毒性肝炎 肺炎球菌性肺炎 亚急性细菌性心内膜炎 传染性单核细胞增多症 水痘、麻疹、钩端螺旋体病 麻风
传染性单核细胞增多症 麻风 莱姆病 疟疾
非感染因素
自身免疫性疾病（系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征等） 毒品成瘾者 肝硬化 衰老 孕妇
镀银染色 可见到染成棕褐色的梅毒螺旋体
《梅毒诊断标准》WS 273
WS 273--2007梅毒诊断标准1 范围本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。
2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
2.1 梅毒Syphilis梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。
2.2 前带现象Prozone phenomenon非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称?为quot;前带现象"。
3缩略语下列缩略语适用于本标准。
VDRL Venereal Disease Research Laboratory 性病研究实验室（玻片试验）USR Unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验）TRUST Toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验RPR Rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验）FTA-ABS Fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验）TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验4 诊断依据4.1 一期梅毒4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史。
4.1.2 临床表现：4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2～4周。
一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。
梅毒诊断标准
Gong XD NCSTD
胎传梅毒的诊断
怀疑感染梅毒的新生儿婴儿应在出生时、生后3个月、6个月、12个 月、18个月做梅毒血清学检查。
检查RPR滴度很重要，母亲与新生儿或婴儿最好在同一个实验室进行 检测，如果新生儿或婴儿的滴度高于母亲提示有胎传梅毒。
梅毒螺旋体抗原血清学试验： TPPA/TPHA/TP-ELISA阳性
脑脊液检查：白细胞计数≥10×106/L，蛋白量＞500mg/L，且 无其他引起这些异常的原因。脑脊液VDRL试验或FTA-ABS试 验阳性。
组织病理检查：有三期梅毒的组织病理变化三期梅毒组织病理 变化。
三期梅毒的实验室诊断原则：RPR/TRUS阳性；
病史 临床表现 实验室检查
硬下疳皮损：TP暗视野检查阳性；
或
RPR/TRUST阳性，TPPA/TPHA/TP-ELISA阳性
疑似病例－疑似病例
病史 临床表现 实验室检查
RPR/TRUST阳性，未做TPPA/TPHA/TP-ELISA，未做TP暗视 野检查
Gong XD NCSTD
TPPA/TPHA/TP-ELISA阳性；还要做脑脊液检查和组织病理检查。
Gong XD NCSTD
三期梅毒的诊断标准
确诊病例－实验室诊断病例
病史 临床表现 实验室检查
RPR/TRUST阳性；和TPPA/TPHA/TP-ELISA阳性 脑脊液检查：WBC、蛋白量异常，VDRL或FTA-ABS阳性； 三期梅毒组织病理变化。
疑似病例－疑似病例
病史 临床表现 实验室检查
RPR/TRUST阳性，未做TPPA/TPHA/TP-ELISA
梅毒诊断标准(WS-273—2007)修订版
梅毒诊断标准(WS-273— 2007)修订版WS 273--2007梅毒诊断标准1范围本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。
2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
2.1梅毒Syphilis梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。
2.2前带现象Prozone phenomenon非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中, 有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象"。
3缩略语下列缩略语适用于本标准。
VDRL Venereal Disease ResearchLaboratory性病研究实验室（玻片试验）USR Unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验）TRUST Toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验RPR Rapid plasma reagin快速血浆反应素（环状卡片试验）FTA-ABS Fluorescent treponemal antibody-absorption荧光螺旋体抗体吸收（试验）TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay梅毒螺旋体血凝试验TPPA Treponema pallidum particle agglutination assa y梅毒螺旋体颗粒凝集试验4诊断依据4.1 一期梅毒4.1.1流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史。
4.1.2临床表现：4.1.2.1硬下疳：潜伏期一般为2〜4周。
一般为单发，但也可多发；直径约1cm〜2cm,圆形或椭圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。
梅毒实验室诊断方法
梅毒实验室诊断之宇文皓月创作梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。
一、显微镜检查法（一）暗视野显微镜检查【基来源根基理】梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋凑趣穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边沿斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。
【仪器资料】1．暗视野显微镜。
2．钝刀（刮勺）、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。
【标本收集】1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损概况的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。
2．淋巴液：无菌操纵下穿刺淋凑趣，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。
【操纵步调】1．加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。
2．聚光：将标本玻片置载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。
3．镜检：在镜下观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。
【结果判读】梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表示为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5～20m，直径小于0.2m，有6～12个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方式。
暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体为阳性结果。
【结果陈述】1．阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。
2．阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。
【临床意义】1．暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。
2．螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。
3．如未见到梅毒螺旋体，其实不克不及排除患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。
【注意事项】1.取材时尽量防止出血，以免影响镜下观察。
2.取材后应立即置暗视野显微镜下观察。
3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。
（二）镀银染色检查【基来源根基理】梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。
【仪器资料】1．显微镜。
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一、梅毒分类诊断标准
（一）一期梅毒的诊断标准。
1、病史：有性接触史或性伴感染史。
2、临床表现：具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。
3、实验室检查：硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性和TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性。
同时符合1、2、3为确诊病例。
同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查）或结果为阴性的为疑似病例。
（二）二期梅毒的诊断标准
1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史。
2、临床表现：病期2年内，多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损，尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹，也可出现其它损害（关节、眼、内脏等）。
3、实验室检查：皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA （或TPHA或TP-ELISA）阳性。
同时符合1、2、3为确诊病例。
同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳
性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）的为疑似病例。
（三）三期梅毒的诊断标准。
1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。
2、临床表现：病期2年以上。
有如下特征中的任一项表现，包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿，上腭、鼻中隔等穿孔性损害；骨、眼损害，其它内脏损害；神经梅毒；心血管梅毒。
3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA （或TPHA或TP-ELISA）阳性；或脑脊液检查：WBC≥10×106/L，蛋白>500mg/L，并排除其它引起这些异常的原因。
或三期梅毒组织病理变化。
同时符合1、2、3为确诊病例。
同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。
（四）隐性梅毒的诊断标准。
1、病史：有性接触史或性伴感染史。
2、临床表现：无任何梅毒症状与特征。
有明确的2年内梅毒接触史或梅毒发病史为早期，病期超过2年或无法判断病期者均为晚期。
3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性（无梅毒史者
阳性，滴度≥1:8；有梅毒治疗史者阴转阳或滴度升高≥4倍），同时TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性，且脑脊液检查（白细胞、蛋白量）无异常。
同时符合1、2、3为确诊病例。
同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性（无梅毒史者阳性，滴度≥1:8；有梅毒治疗史者阴转阳或滴度升高≥4倍），未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）和脑脊液检查的为疑似病例。
（五）胎传梅毒的诊断标准。
1、病史：生母为梅毒患者或感染者。
2、临床表现：2岁以内发病的早期胎传梅毒，类似于获得性二期梅毒表现；2岁以后发病的晚期胎传梅毒，类似于获得性三期梅毒的表现，尤其注意标记性损害。
胎传隐性梅毒，无症状，2岁以内为早期胎传隐性梅毒，2岁以后为晚期胎传隐性梅毒。
3、实验室检查：皮损或胎盘检查：TP暗视野检查阳性。
或RPR（或TRUST）阳性【抗体滴度等于或高于生母4倍（2个稀释度）】，同时TPPA（或TPHA）阳性。
同时符合1、2、3者为确诊病例。
同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性【抗体滴度等于或高于生母4倍（2个稀释度）】，未做TPPA （或TPHA）和TP暗视野检查的为疑似病例。