胡萝卜素的提取

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胡萝卜素的提取

胡萝卜素的提取

胡萝卜素的提取胡萝卜素是一种天然存储在许多植物和蔬菜中的营养素,它被称为类胡萝卜素,其中最常见的是β-胡萝卜素。

许多人会食用含有胡萝卜素的食品来保持健康并通过饮食摄入足够的营养素。

胡萝卜素的提取在工业化食品和医疗领域中也得到了广泛应用。

胡萝卜素的来源胡萝卜素是一种以植物为来源的类维生素A物质,其最常见的来源是含有β-胡萝卜素的蔬菜和水果,如胡萝卜、南瓜、番茄、甜椒、芒果等。

此外,胡萝卜素也可以从一些海洋生物中提取出来,如大西洋贻贝和螃蟹等。

胡萝卜素的提取为了将胡萝卜素从植物或其他来源中提取出来,通常需要采用一些特殊处理方法。

以下是一些常见的胡萝卜素提取方法:溶剂提取法这个方法是采用有机溶剂(如乙醇、乙酸乙酯、己烷等)将胡萝卜素从植物中提取出来。

首先将植物的组织分解,并用溶剂提取其中的胡萝卜素。

这种方法的优点是可以提取出高浓度的胡萝卜素,但缺点是操作过程中比较危险,容易引起火灾。

超声波提取法这个方法是利用声波振荡研磨材料,使胡萝卜素从植物细胞中释放出来。

这种方法的优点是操作简单、提取效率高,但需要器材的投资成本较高。

萃取分离法这个方法是利用分子筛、凝胶层析、液液萃取等化学方法将胡萝卜素从植物材料中分离出来。

这种方法相对较安全,但是提取效率不如其他两种方法高。

胡萝卜素的应用胡萝卜素在食品工业和医疗领域中有广泛的应用。

以下是几个常见的胡萝卜素应用:食品添加剂在食品加工过程中,胡萝卜素可以作为食品添加剂,被加入到许多食品中,如果汁、糖果、蛋糕、乳制品等。

胡萝卜素可以增加食品的色泽,增加食品的美味感。

化妆品胡萝卜素可以作为一种天然染料,被用于化妆品中,如口红、指甲油、眼影等。

胡萝卜素可以增强化妆品的外观和颜色。

药物在医疗领域中,胡萝卜素可以被用于治疗各种疾病,如皮肤病、癌症、心脏病、糖尿病等。

胡萝卜素具有抗氧化、抗肿瘤等功效,可以提高机体免疫力,有益于人体健康。

胡萝卜素是一种重要的营养元素,可以从许多蔬菜、水果和海鲜中提取出来。

实验十胡萝卜素的提取

实验十胡萝卜素的提取

实验十胡萝卜素的提取背景知识1.从胡萝卜等蔬菜和水果中提取出的橘黄色物质包括多种结构类似物,统称胡萝卜素。

胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键,根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类,β—胡萝卜素是其中最主要的组成成分。

2.β-胡萝卜素摄入人体消化器官后,可以转化成维生素A。

它可以治疗和预防某些疾病:如维持眼睛和皮肤的健康,改善夜盲症、皮肤粗糙的状况,有助于身体免受自由基的伤害等。

胡萝卜素还是常用的食品色素,广泛地用作食品、饮料、饲料的添加剂。

最近发现的天然胡萝卜素还有使癌变细胞恢复成正常细胞的作用。

因此胡萝卜素的提取和鉴定引起人们很大的兴趣。

活动目标1.基本目标(1)说出有关胡萝卜素的基础知识,简述提取胡萝卜素的基本原理。

(2)尝试用萃取法提取胡萝卜素,用蒸馏法浓缩胡萝卜素,用纸层析法鉴定胡萝卜素。

2.发展目标(1)在实验探究中体验知识的形成过程。

(2)养成良好的实验习惯和实事求是的科学态度。

(3)体验生物技术在生产、生活中的应用价值。

实验准备1.实验原理(1)胡萝卜素是橘黄色结晶,化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。

(2)石油醚沸点高,加热时不易挥发,能充分溶解胡萝卜素,用石油醚萃取胡萝卜素不会发生石油醚与水混合的现象。

(3)萃取的胡萝卜素提取液,可以通过蒸馏法蒸去过多的石油醚而浓缩胡萝卜素。

(4)在石油醚中胡萝卜素等组分的溶解度不同,纸层析法使其在滤纸上分离、展层和显色,通过与胡萝卜素标准样品层析带的颜色、位置、宽度的比较分析,能够鉴定胡萝卜素的存在,并大体估计它的含量。

2.材料、试剂、器具(1)材料:新鲜胡萝卜(2)试剂:胡萝卜标准溶液样品、石油醚(3)器具:(果蔬)打磨机、电热烘箱、萃取回流装置、水蒸气蒸馏浓缩装置、铁架台、酒精灯、研钵、滤纸、毛细玻管、250ml量筒、2000ml烧杯、50ml烧杯、玻璃棒、200ml锥形瓶、漏斗、大培养皿实验过程1.实验步骤实验装置图:2.预测与结果图6-7 提取胡萝卜素的装置图6-2 水蒸气蒸馏装置2. 在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳等有机溶剂中,哪种最适合用于提取胡萝卜素?3.在胡萝卜颗粒加热、干燥过程中,应将温度和时间控制在一定的范围内,请说明原因?实验评价(评价量表)拓展延伸1.探究萃取胡萝卜素的最佳条件(最适温度和最佳时间)。

提取胡萝卜素的方法

提取胡萝卜素的方法

提取胡萝卜素的方法
提取胡萝卜素的方法有以下几种:
1. 溶剂萃取法:将胡萝卜粉碎并与适当的溶剂(如正己烷)混合,经过反复浸泡、过滤和浓缩,最终得到含有胡萝卜素的溶液。

2. 超声波辅助萃取法:将胡萝卜与适量的溶剂一同置于超声器中,在超声波的作用下,胡萝卜素可以更容易地溶解到溶剂中,加快提取过程。

3. 压榨法:将胡萝卜通过压榨机进行压榨,使胡萝卜素和榨取物分离,再通过沉淀、过滤和浓缩等步骤获得纯度较高的胡萝卜素。

4. 精制法:将胡萝卜粉碎后与溶剂混合,通过结晶、过滤、洗涤等步骤去除杂质并提纯胡萝卜素。

5. 高效液相色谱法(HPLC):利用高效液相色谱仪将胡萝卜素分离出来,并通过检测器进行定量分析和纯化。

需要注意的是,在提取胡萝卜素的过程中,温度、溶剂的选择和浓缩等因素都会对提取效果产生影响,需要根据实际情况进行调整和优化。

胡萝卜素提取原理

胡萝卜素提取原理

胡萝卜素提取原理
胡萝卜素是存在于植物中的一类天然色素,主要存在于胡萝卜等橙黄色蔬菜中。

胡萝卜素在食品、医药和化妆品工业中具有重要的应用价值,因此人们需要从植物中提取胡萝卜素。

胡萝卜素的提取原理主要包括以下几个步骤。

1. 选材:选择新鲜、成熟、品种纯正的胡萝卜作为提取材料,以保证胡萝卜素含量较高。

2. 破碎:将胡萝卜切碎、研磨或压碎,增大胡萝卜表面积,有利于后续的物质转移。

3. 溶剂浸提:将破碎的胡萝卜与适量的溶剂(如正己烷、乙醚等)混合,进行浸提。

溶剂可以溶解胡萝卜素,并将其从胡萝卜细胞中释放出来。

4. 滤液分离:将经过浸提的混合物进行过滤分离,将溶剂滤掉,得到含有胡萝卜素的滤液。

5. 重结晶:将滤液进行蒸馏或加热浓缩,使胡萝卜素逐渐结晶,在结晶过程中去除杂质。

6. 精制:对得到的胡萝卜素晶体进行精制处理,通过再结晶、析出等方法,去除胡萝卜素中的杂质,提高纯度。

7. 干燥:将精制后的胡萝卜素晶体进行干燥处理,去除残留的
溶剂和水分,使其达到稳定的干燥状态。

通过以上步骤,就能够从胡萝卜中提取出较纯的胡萝卜素。

提取后的胡萝卜素可以应用于食品工业中的色素添加剂、保健品、药物等领域,满足人们对胡萝卜素的需求。

天然胡萝卜素的提取及性能研究

天然胡萝卜素的提取及性能研究

天然胡萝卜素的提取及性能研究一、天然胡萝卜素的提取方法目前,主要的天然胡萝卜素提取方法有以下几种:1.溶剂提取法:使用有机溶剂(如乙醇、丙酮、二氯甲烷等)将胡萝卜冷冻破碎,浸泡后滤取,获得含有胡萝卜素的溶液,进一步浓缩与去除溶剂即可得到纯度较高的胡萝卜素产品。

2.超声波提取法:利用超声波的微震动作用破壁细胞,并加速胡萝卜素的脱附,从而提高胡萝卜素的提取效率。

3.酶解提取法:通过加入适量的酶解剂,如纤维素酶、蛋白酶等,分解细胞壁,使胡萝卜素从细胞内溶解出来。

以上几种提取方法各有优缺点,可以根据实际需求选择合适的提取方式。

二、天然胡萝卜素的性能研究1.良好的抗氧化性:天然胡萝卜素具有较强的自由基清除能力,能够有效保护细胞免受氧化损伤,预防慢性疾病的发生。

2.明显的抗癌作用:多项研究表明,天然胡萝卜素能够抑制肿瘤细胞的生长和扩散,对一些癌症有一定的预防和治疗作用。

3.抗衰老效果:天然胡萝卜素可增强人体免疫力,预防老年相关疾病的发生,并且有助于维持皮肤健康,延缓皮肤衰老。

4.良好的稳定性:天然胡萝卜素在常温条件下相对稳定,不易被热、光、氧等因素破坏,适合作为食品和保健品添加剂。

5.可溶性强:天然胡萝卜素具有良好的脂溶性,能够更好地被人体吸收。

在胡萝卜素的性能研究中1.利用现代生物技术手段研究胡萝卜素的生物合成途径和调控机制,可以为提高胡萝卜素的产量和质量提供理论基础。

2.分离与鉴定胡萝卜素衍生物和代谢产物的结构,探索其作用机制,挖掘其潜在的药物和保健食品应用价值。

3.研究胡萝卜素与其他营养物质之间的相互作用,并探讨其协同作用对人体的影响,为优化膳食结构提供理论依据。

4.开展临床研究,探索胡萝卜素对心血管疾病、癌症、眼疾等重大疾病的预防和治疗作用,为药物研发和临床治疗提供依据。

总之,天然胡萝卜素的提取及性能研究是一个重要的领域,不仅可以为人类健康提供重要的营养和保健作用,还可以为食品、医药和化妆品等领域的研发与应用提供支持。

提取胡萝卜素的方法

提取胡萝卜素的方法

提取胡萝卜素的方法
一、提取步骤
1、物料准备:准备胡萝卜粉末或叶片,石油醚、乙醇、石油酸和碳
酸氢钠等溶剂,以及一定比例的石蜡,一定比例的有机酸(如乙酸)和镁
粉等辅助原料。

2、将胡萝卜粉末或叶片放入回收瓶中,用乙醇或石油醚调成浓度为25%~30%的混合液,控制温度在25℃~35℃之间。

3、混合液在缓冲剂(碳酸氢钠)及pH值(4.5~5.2)的作用下,进
行一次提取,将胡萝卜素的大部分提取出来,收集其上清液,也就是胡萝
卜素提取液。

4、再把步骤3中的渣滓(叶片本身),用石油酸进行二次提取,并
且加入一定比例的石蜡,使胡萝卜素更稳定,将胡萝卜素完全提取出了,
收集渣滓和上清液,这就是胡萝卜素的提取液。

5、将胡萝卜素提取液放入一定的条件中,加入一定比例的有机酸,
再加入镁粉,将胡萝卜素固定,使其不受水解的影响,然后过滤,收集滤渣,就是胡萝卜素提取物。

二、胡萝卜素提取的注意事项
1、溶剂的比例要恰当:溶剂的比例和浓度对提取效果有很大的影响,如果溶剂比例不当,会影响提取效果。

2、碱度控制:缓冲剂(碳酸氢钠)的PH值要在4.5-5.2之间。

胡萝卜素的提取实验报告

胡萝卜素的提取实验报告

胡萝卜素的提取实验报告胡萝卜素的提取实验报告背景介绍:胡萝卜素是一种重要的营养成分,具有丰富的抗氧化性质和对人体健康的多种益处。

为了充分利用胡萝卜素的营养价值,本实验旨在探索一种高效的提取胡萝卜素的方法。

实验材料:1. 新鲜胡萝卜2. 无水乙醇3. 水4. 氯仿5. 石油醚6. 丙酮7. 玻璃棒8. 漏斗9. 蒸馏瓶10. 离心机实验步骤:1. 准备工作:将新鲜胡萝卜洗净,去皮,切成细丁状。

2. 提取胡萝卜素:将胡萝卜丁放入蒸馏瓶中,加入适量的无水乙醇和水,使胡萝卜丁完全浸泡。

用玻璃棒搅拌均匀,封好瓶口,放置于室温下静置24小时。

3. 过滤提取液:将提取液倒入漏斗中,用滤纸覆盖漏斗,过滤掉胡萝卜渣。

收集过滤液。

4. 萃取胡萝卜素:将过滤液倒入离心管中,加入等体积的氯仿,并摇匀。

离心管放入离心机中,离心10分钟。

5. 分离上层液和下层液:离心后,离心管中的液体分为两层,上层为氯仿层,下层为水层。

将上层液转移到干净的离心管中。

6. 蒸发溶剂:将氯仿层液倒入蒸发皿中,用低温加热蒸发溶剂,直至残留物完全干燥。

7. 溶解干燥物:将干燥物溶解于适量的丙酮中,得到胡萝卜素提取物。

实验结果:经过以上步骤,我们成功地提取到了胡萝卜素。

通过目测和比色法,我们发现提取物呈现橙黄色,与胡萝卜素的特征颜色一致。

这表明我们的提取方法是有效的。

实验讨论:1. 提取液的选择:我们选择了无水乙醇和水作为提取液,这是因为胡萝卜素是脂溶性物质,而无水乙醇能够有效地溶解脂溶性物质。

同时,加入适量的水可以帮助提高胡萝卜素的溶解度。

2. 萃取剂的选择:我们选择了氯仿作为萃取剂,因为氯仿是一种常用的有机溶剂,对胡萝卜素有良好的溶解力。

同时,氯仿与水不相溶,可以方便地与水层分离。

3. 蒸发溶剂的选择:我们选择了氯仿作为蒸发溶剂,因为氯仿具有较低的沸点和较好的挥发性,可以迅速蒸发,留下胡萝卜素。

4. 提取物的保存:胡萝卜素是一种易氧化的物质,容易受到光、热和氧气的影响而降解。

提取胡萝卜素的原理

提取胡萝卜素的原理

提取胡萝卜素的原理
胡萝卜素是一种天然存在于植物中的有机化合物,主要存在于胡萝卜等橙色蔬菜及水果中。

胡萝卜素包括β-胡萝卜素和α-
胡萝卜素等多种衍生物,它们是维生素A的前体物质。

胡萝卜素的提取原理主要涉及以下几个步骤:
1. 采集植物材料:选择富含胡萝卜素的植物作为提取原料,如胡萝卜、番茄等。

注意在采集过程中保持材料的新鲜度和完整性。

2. 打破细胞壁:胡萝卜素存在于植物细胞的细胞液中,因此需要打破细胞壁以释放其中的胡萝卜素。

可以采用研磨、破碎等物理方法或使用酶解剂进行细胞壁的破坏。

3. 溶剂萃取:将破碎后的植物材料与适当的有机溶剂(如乙醚、丙酮等)混合,通过溶剂的选择性提取作用,将胡萝卜素从细胞液中提取出来。

4. 溶剂蒸发:将溶剂中的胡萝卜素溶液进行蒸发,使溶剂逐渐挥发,留下含有胡萝卜素的浓缩液。

5. 结晶、析出:通过调整温度、pH值等条件,使胡萝卜素在
溶液中结晶析出,可以进一步提升提取纯度。

6. 纯化与精制:使用一些分离纯化技术,如色谱层析、重结晶、薄层析等,去除胡萝卜素溶液中的杂质,提高胡萝卜素的纯度。

通过以上步骤,可以提取得到高纯度的胡萝卜素。

提取的胡萝卜素可以应用于食品、保健品、化妆品等领域,具有抗氧化、美容养颜、增强免疫力等多种功效。

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胡萝卜素提取的设计方案一,实验目的1、学习柱色谱法、薄层色谱法的原理及其方法。

2、掌握从胡萝卜中分离提纯胡萝卜素的原理和方法。

3、学会用色谱法从胡萝卜中提取胡萝卜素并鉴定之。

4、初步了解胡萝卜素的来源以及生产方法。

二,实验原理:β-胡萝卜素可通过化学合成,植物提取和微生物发酵3种方法生产,根据生产方式不同分为化学合成β-胡萝卜素和天然β-胡萝卜素两大类。

本实验是从胡萝卜中提取天然β-胡萝卜素。

而提取的方法可选择色谱法。

因为色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。

具有极其广泛的用途。

色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能(即分配)的不同,或其他亲和作用性能的差异,使混合物的溶液流经该物质,进行反复的吸附或分配等作用,从而将各组分开。

流动的混合物溶液称为流动相,固定的物质称为固定相(可以是固体或液体)。

根据组分在固定相中的作用原理不同,可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、排阻色谱等;根据操作条件的不同,又可分为柱色谱、纸色谱、薄层色谱、气相色谱及高效液相色谱等类型。

1、柱色谱法柱色谱(柱上层析)常用的有吸附柱色谱和分配柱色谱两类。

前者常用氧化铝、硅胶作固定相。

在分配柱色谱中以硅胶、硅藻土和纤维素作为支持剂,以吸收大量的液体作固定相,而支持剂本身不起分离作用。

吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大,经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。

当待分离混合物溶液流过吸附柱时,各种成分同时被吸附在柱的上端。

当洗脱剂流下时,由于不同化合物吸附能力不同,往下洗脱的速度也不同,于是形成不同层次,即溶质在柱中自上而下按对吸附剂亲和力大小分别形成若干色带,再用溶剂洗脱时,已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集;或者将柱吸干,挤出后按色带分割开,再用溶剂将各色带中的溶质萃取出来。

对于柱上不显色的化合物分离时,可用紫外光照射后所呈现的荧光来检查,或在用溶剂洗脱是分别收集洗脱液,逐个加以鉴定。

2、薄层色谱法薄层色谱法(ThinLayerChomatography,缩写TLC)是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于跟踪反应进程。

它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。

薄层色谱是在载玻片上才、均匀铺上一薄层吸附剂,制成薄板,用毛细管将样品点在起点处,把此薄层板置于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm,待展开剂前沿利顶端约1cm附近时取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色,测定斑点位置,计算比移值(Rf)。

由于层析是在薄层上进行的,故称为薄层层析。

薄层色谱常用的有吸附色谱和分配色谱两类。

一般能用硅胶或活性氧化铝薄层色谱分开的物质,也能用硅胶或氧化铝柱色谱分开,凡能用硅藻土和纤维素作支持剂的分配柱色谱能分开的物质;也可分别用硅藻土和纤维素薄层色谱展开,因此,薄层色谱常用作柱色谱的先导。

同时也可以用吸收剂非极性大孔吸附树脂,具本实验的类胡萝卜素具有末端带环的长链结构,故平均孔径为290~300A的X-5大孔吸附树脂更利于他们的吸附和吸附过程中的传质。

3、胡萝卜素的分离β-胡萝卜素分子中的碳骨架是由8个异戊二烯单位连接而成的,是四萜类化合物。

它的分子中有一个较长的π-π共轭体系,能吸收不同波长的可见光,因而,呈现一定的颜色,β-胡萝卜素是黄色物质,所以,又叫做多烯色素。

β-胡萝卜素的结构式如下:胡萝卜素是最早发现的一个多烯色素。

后来,又发现了许多在结构上与胡萝卜素类似的色素,于是就把这类物质叫做胡萝卜色素类化合物,或者叫做类胡萝卜素。

这类化合物大都难溶于水,易溶于弱极性或非极性的有机溶剂,因此又把这类物质叫做脂溶性色素。

胡萝卜素是一种天然的食物色素,主要存在于深色蔬菜,绿色、红色、深绿色的蔬菜中和黄色的,橘色的水果(如胡萝卜、菠菜、生菜、马铃薯、番薯、西兰花、哈蜜瓜和冬瓜)等有色植物中。

胡萝卜素与维生素A结构相近,活性较高的有α、β、γ胡萝卜素,其中β胡萝卜素活性最高。

胡萝卜素是一种脂溶性色素,脂肪有助于它被人体的吸收。

β胡萝卜素的主要作用是:1.它是高效的维生素a源,在体内,根据体内维生素A量的多少,β胡萝卜素可自动分解而补充维生素A的不足。

而且,胡萝卜素食一种十分安全的维生素A原,可较多地贮存在肝脏内,根据人体内维生素A的水平,胡萝卜素可自动逐步转化为维生素A,不会由于维生素A过量而中毒。

2.对体内氧自由基的清除作用。

氧自由基是引起肿瘤、衰老、心血管疾病的主要原因之一。

天然β-胡萝卜素的独特结构使它充当了体内氧自由基的“清道夫”,从而起到防癌、抗衰老的重要作用。

3.免疫保护作用,天然β-胡萝卜素可提高体内各种免疫淋巴细胞的数量和增殖反应能力,增强自然杀伤细胞对肿瘤细胞的杀伤作用和中性细胞的吞噬作用,从而巩固了人体的防御体系,起到祛病防身的作用。

β-胡萝卜素用途十分广泛,在医药方面具有抗氧化、抗肿瘤、抗衰老提高免疫力等作用; 在食品和饮料添加剂方面更是一种非常重要的天然色素, 是世界公认的优秀有营养的添加剂; 在化妆品领域, 其优良的着色性能使口红、胭脂色泽自然丰满, 又能起到营养和保护皮肤作用; 在饲料中添加可使畜禽强壮, 排卵和受孕能力加强。

β-胡萝卜素的分子式均为C40 H56 ,分子量为536.85,熔点184℃,深红紫至暗红色有光泽的斜6面体或板状微结晶的晶体或晶性粉末。

β-胡萝卜素具有两边反向对称的化学结构,分子结构中包含两个β-紫罗酮环和四个异戊二烯。

本实验的β-胡萝卜素是全反式-β-胡萝卜素。

β-胡萝卜素是不饱和碳氢化合物,难溶于甲醇、乙醇,可溶于乙醚、石油醚、正已烷、丙酮,易溶于氯仿、二硫化碳、苯等有机溶剂。

根据上面的性质,β-胡萝卜素常用的提取方法有:有机溶剂提取液法,酶反应法,微波辅助提取法,超声波辅助提取法,超临界流体萃取法等。

本实验采用有机溶剂提取法,故可利用石油醚、丙酮、无水甲醇、乙酸乙酯和无水乙醇等弱极性溶剂作为提取剂将它们从植物材料中浸提出来。

然后,根据它们对吸附剂吸附能力的差异,用柱色谱进行分离,用薄层色谱检测分离效果。

本实验采用的是以丙酮有机溶剂萃取类胡萝卜素,以石油醚为洗脱剂,柱内填充为硅胶进行柱色谱分离,然后在以(1:9)丙酮一石油醚溶液为展开剂进行薄层色谱检测分离效果。

三、仪器和试剂仪器三角瓶(50ml)、分液漏斗(150ml)、蒸馏瓶(50ml)、普通蒸馏装置(或减压蒸馏装置)、漏斗、色谱柱、硅胶薄层板、量筒、烧杯、层析缸。

试剂胡萝卜、丙酮、石油醚(bp30~60℃)、硅胶(层析用,200~300目)、无水硫酸钠、石油醚(bp60~90℃)、丙酮:石油醚(1:9)(V/V)。

四、实验装置图五、实验步骤1、含胡萝卜素石油醚溶液的制备将新鲜胡萝卜洗净、擦干,切去尾部,切碎。

称取碎鲜胡萝卜10g于小研钵中,研碎。

碎胡萝卜移至50mL三角烧瓶中,每次用丙酮10mL萃取2次,再用石油醚(bp30~60℃)萃取固体两次,每次10mL。

把石油醚溶液加到丙酮液中。

在分液漏斗中将混合液与50mL 饱和氯化钠溶液振荡,分去下层,用蒸馏水洗涤上层液两次,每次50mL,分去水,用无水硫酸钠干燥石油醚液(约1h),把混合液倒入50mL圆底烧瓶中,热水浴加热蒸馏,除去溶剂,得固体。

在制得的固体物加入3mL石油醚(bp60~90℃)拌硅胶1g,在通风橱内抽干,得黄色硅胶颗粒,待上柱。

2、装柱和分离(装置如图1)取20cm*1cm色谱柱一根,垂直装置,以50ml三角烧瓶作洗脱液的接受器。

用镊子取少许脱脂棉放于干净的色谱柱底部,轻轻塞紧,再在脱脂绵上盖一层厚0.5cm的海石砂(或用一张比柱内径略小的滤纸代替),关闭活塞,向柱内倒入石油醚(bp60-90℃)至约为柱高的3/4处,打开活塞,控制流出速度为1滴/s。

通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入层析硅胶。

用洗耳球轻轻敲打柱身,使填装紧密。

当装填到3/4时,再在上面加一层0.5cm厚的海石砂,操作时一直保持上述流速,注意不能使液面低于砂子的上层。

当液面流至离海石砂面1cm时,立即从玻璃漏斗加入已制备好的含胡萝卜素的黄色硅胶,随后用0.5ml石油醚洗下管壁的硅胶,如此连续2—3次,直至洗净为止,然后在色谱柱上装上滴液漏斗,用石油醚(bp60-90℃)作洗脱剂进行洗脱,洗1滴/s 。

当有一黄色的谱带分出,待黄色组分绝大部分洗出时,把洗脱剂换成1:9丙酮一石油醚(bp60-90℃)混液作洗脱剂进行洗脱,控制流出速度如前(这混液洗脱剂有助于混合物中极性较大的组分移动),又可分出两个黄色组分。

在45—90min内,柱中物料将全部洗脱出来。

观察这些物料通过柱子的移动情况。

在三角烧瓶中收集3份洗出液。

用纸色谱、薄层色谱对各段洗出液进行色谱分析。

3. 薄层色谱法样品:柱色谱法中洗脱出的份样品液展开剂:1:9丙酮一石油醚溶液薄层板的制备:取3片载波体,洗净,晾干。

在50ml烧杯中放置3g硅胶G,逐渐加入0.5%cmC水溶液8ml,调成均匀的糊状,将此糊状物倾于上述洁净的载玻片圣桑,用手将带浆的载玻片在水平的桌面上做上下轻微的颤动,并不时转动方向,制成厚薄均匀,表面光洁的平整的薄层板,然后放在水平桌面上,在室温放置晾干后放入烘箱中,缓慢升温至110℃,恒温0.5h,取出,稍冷后置干燥器中备用。

点样:取出上述制好的薄层板,分别在距一端点1cm处用铅笔轻轻划一横线作为起始线。

用毛细管吸取少量样品液,在一块板的起点线上点第一个色带的样品液,根据柱色谱分离的色带,依次点样,如果样点颜色较浅,可重复点样,重复点样前必须待前次样点挥干后进行。

样点直径不超过2mm。

展开:待样点干燥后,小心地放入已加入展开剂的250ml广口瓶中进行展开。

在瓶的内壁贴一张高5cm,环绕周长4/5的滤纸,下面浸入展开剂中,以使容器内被展开剂蒸气饱和。

点样一端浸入展开剂0.5cm(样点不浸泡在展开剂中)。

盖好瓶塞,观察展开剂前沿上升离板的上端1cm处取出,尽快用铅笔在展开剂上升的前沿处划一记号,晾干后,量出展开剂和样点移动的距离,计算Rf值。

六、注意事项1、本实验采取的工艺不同于其他工艺,体现在原料粉碎时加入了稳定剂(5ml氨水和35ml 乙醇)来防止β-胡萝卜素被氧化,由此可提高提取率。

2、色谱柱填装紧密与否,对分离效果很有影响。

若柱中留有气泡或各部分松紧不匀(更不能有断层或暗沟)时,会影响渗滤速度和显色的均匀。

但如果填装时过分敲击,又会因太紧密而流速太慢。

3、加入砂子的目的是。

在加料是不致把吸附剂冲起,影响分离效果。

4、为了保持色谱柱的均一性,使整个吸附剂浸泡在溶液或溶液中是必要的。

否则当柱中溶液流干是。

柱身干裂,影响渗滤和显色的均一性。

5、若不用滴液漏斗,也可用每次倒入10ml洗脱剂的方法进行洗脱。

6、载玻片上涂层要均匀,既不应有纹路、带团粒,也不应有能看到玻璃的薄涂料点。

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