液相色谱常见问题及处理方法
高效液相色谱仪常见故障及解决方法

高效液相色谱仪常见故障及解决方法一、泵故障1. 故障现象:泵无法正常启动或启动后无法正常停止。
解决方法:检查泵头是否有污物堵塞,清除污物;检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好,如有松动,重新插紧。
2. 故障现象:泵的流量不稳定或无法调节。
解决方法:检查泵头是否有污物堵塞,清除污物;检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好,如有松动,重新插紧;检查泵头与柱塞之间的密封圈是否损坏,如损坏,更换密封圈。
二、流动相跑空1. 故障现象:流动相液位下降至最低液位以下,导致无法正常进样。
解决方法:检查流动相的储液瓶是否已空,如已空,重新更换储液瓶;检查流动相的流速设置是否正确,如不正确,重新设置流速;检查管路是否有泄漏点,如存在泄漏点,修复泄漏点。
2. 故障现象:流动相液位迅速下降,导致无法正常进样。
解决方法:检查废液瓶是否已满,如已满,倾倒废液;检查管路是否有堵塞或弯折,如有,更换管路或调整管路布局。
三、峰面积重复性差1. 故障现象:同一色谱条件下,每次运行同一色谱图时,峰面积重复性差。
解决方法:检查进样阀的切换次数是否过多,如过多,减少切换次数;检查进样针的清洗是否彻底,如不彻底,加强清洗;检查样品前处理的稳定性是否可靠,如不可靠,重新进行样品前处理。
2. 故障现象:不同色谱条件下,每次运行同一色谱图时,峰面积重复性差。
解决方法:检查流动相的组成是否恒定,如不恒定,重新配制流动相;检查色谱柱的稳定性是否可靠,如不可靠,更换色谱柱;检查检测器的波长是否准确,如不准确,重新调整波长。
四、峰丢失1. 故障现象:在色谱图中看不到预期的峰。
解决方法:检查进样针是否堵塞或断裂,如堵塞或断裂,更换进样针;检查进样阀的切换次数是否过多,如过多,减少切换次数;检查样品前处理是否可靠,如不可靠,重新进行样品前处理。
2. 故障现象:在流动相中添加了某种物质后,出现了预期之外的峰。
解决方法:检查流动相中添加的物质是否稳定,如不稳定,重新配制流动相;检查检测器的灵敏度是否足够高,如不够高,调整灵敏度;检查色谱柱的类型是否正确,如不正确,更换色谱柱。
高效液相色谱常见故障及解决方案

高效液相色谱常见故障及解决方案1.压力过高或过低-压力过高可能是由于柱堵塞或流动阻力增加所致。
解决方案包括更换柱、清洗柱或检查管路是否存在问题。
-压力过低可能是由于泵的磁力搅拌器不工作或进样器封堵所致。
解决方案包括检查泵的磁力搅拌器是否工作正常,清洗进样器。
2.峰形不对称-峰形不对称可能是由于进样量不均匀或柱温度过高所致。
解决方案包括确保进样量均匀和降低柱温度。
3.峰尾或前肩-峰尾可能是由于柱温度过高、流速过快或流动相pH值不合适所致。
解决方案包括降低柱温度、减慢流速或调整pH值。
-前肩可能是由于流动相中存在杂质或柱堵塞所致。
解决方案包括更换流动相或清洗柱。
4.杂峰或基线噪声-杂峰可能是由于样品纯度不高、固定相老化或试剂污染所致。
解决方案包括提高样品纯度、更换固定相或检查试剂是否污染。
-基线噪声可能是由于进样器密封不良、流动相气泡或电噪声所致。
解决方案包括检查进样器密封情况、减少流动相中的气泡或检查电子设备是否存在干扰。
5.柱寿命短-柱寿命短可能是由于样品预处理不彻底、柱收尾不当或流动相pH值不合适所致。
解决方案包括增加样品预处理步骤、正确收尾柱或选择合适的流动相pH值。
6.流量不稳定-流量不稳定可能是由于柱堵塞、进样器密封不良或流动相流速波动所致。
解决方案包括清洗柱、检查进样器密封情况或调整流动相流速稳定性。
7.进样量偏差-进样量偏差可能是由于进样器封堵、进样器针头磨损或进样器流速不稳定所致。
解决方案包括清洗进样器、更换进样器针头或调整进样器流速稳定性。
8.柱温度不稳定-柱温度不稳定可能是由于温控系统故障或环境温度变化所致。
解决方案包括检查温控系统是否工作正常或采取措施保持恒定环境温度。
这些是HPLC常见故障及其解决方案的例子。
在实际操作中,操作人员应该根据具体情况诊断和解决故障,并遵循相关的操作规程和安全操作指南。
液相常见问题及解决方法

液相常见问题及解决方法问题1:液相困扰人群广泛且珍贵液相是化学实验中常见的一种分析技术,它广泛应用于各个领域。
然而,在进行液相分析时,常常出现一些问题,影响了实验结果的准确性和稳定性。
以下是液相常见问题及解决方法的一些示例:问题1.1:样品制备不足导致分析结果不准确•问题描述:样品制备不足是液相实验中常见的问题之一。
样品制备不足可能导致分析结果偏低或波动大,影响实验结果的可靠性。
•解决方法:1.确保样品制备过程中的各个步骤严格按照标准操作进行,避免操作失误。
2.采用适当的提取方法和提取溶剂,确保样品中目标成分的充分提取。
3.样品制备前要进行充分的前处理,如过滤和稀释等,以避免可能影响分析的干扰物质。
问题1.2:柱寿命短导致分离效果下降•问题描述:在液相分析中,柱寿命是一个重要的指标。
柱寿命短可能导致分离效果下降,分析结果不准确。
•解决方法:1.使用高质量的液相色谱柱,选择具有较长寿命的柱材料和填料,以提高柱寿命。
2.避免使用过高的流速和压力,以减少对柱的损伤。
3.注意样品的准备和预处理,以减少对柱的污染。
问题1.3:溶剂残留影响结果准确性•问题描述:溶剂残留是液相实验中常见的问题之一。
溶剂残留可能会干扰分析结果,影响结果的准确性。
•解决方法:1.在制备溶剂和洗涤溶剂时,选择纯度高、溶剂残留低的溶剂。
2.采用适当的溶剂饱和度和流速,以避免溶剂残留的问题。
3.在分析前,进行合适的样品预处理,如蒸发浓缩和固相萃取等,以减少溶剂残留的影响。
问题2:常见的仪器故障及解决方法液相实验中,仪器故障是常见的问题之一。
仪器故障可能导致实验无法进行或结果不可靠。
以下是常见的仪器故障及解决方法的示例:问题2.1:泵压不稳定导致结果波动大•问题描述:泵压不稳定是液相实验中常见的问题之一。
泵压不稳定可能导致分析结果波动大,影响分析结果的可靠性。
•解决方法:1.检查液相泵的密封件是否正常,是否需要更换。
2.确保供液系统中的气泡被完全排除,以避免泵压波动。
液相色谱常见问题及其对策

HPLC如何得到好的结果 …
• 流动相
• 缓冲液 / 溶剂选择, 梯度优化, 流速选择 • 脱气,流速稳定, 流动相制备
•柱
• 高柱效, 二级作用力, lot variation, 温度控制
• 检测
• 灵敏度, 选择性, 温度波动影响
• 样品
• 提取方法选择, 样品溶剂选择, 氧气影响
• 仪器
吸滤头
20
液相色谱容易出问题的部件
吸滤头 材料:不锈钢烧结,孔径10um 故障:堵塞 表现:管路中不断有气泡生成 措施:用5%~20%的稀硝酸,超声波清洗,
再用蒸馏水清洗 注意点:吸滤头拆下时不必将塑料管剪断
21
液相色谱容易出问题的部件
LC-10ATvp泵:串联 式往复泵
LC-10ADvp泵:并联式 往复泵
泵漏液 1、单向阀松动 2、泵密封损坏 3、放空阀损坏 4、接头松动(不要拧的太紧)
6
液相色谱常见问题及其对策-漏液
进样阀漏液 可能原因 1、转子密封损坏 2、定量环堵塞 3、进样口密封松动 4、进样针尺寸不合适 5、废液管产生虹吸 6、废液管堵塞
7
液相色谱常见问题及其对策-漏液
检测器漏液 可能原因 1、流通池垫片损坏 2、流通池透镜破碎 3、手紧接头处漏液 4、废液管堵塞 5、流通池堵塞
29
液相色谱容易出问题的部件 柱子
故障:系统高压、峰型变差(拖尾峰、前沿峰、分叉 峰),保留时间的改变
解决措施:清洗
正相柱,正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇 反相柱,甲醇、乙腈、氯仿、异丙醇、0.05M稀硫酸
30
液相色谱容易出问题的部件
峰产生有肩或分叉的原因
1. 柱子劣化 (进口处产生不均匀的空隙)
液相色谱分析中常见问题及其解决方法

六通阀的示意图
色谱柱系统的故障
柱温箱的温度控制失灵 系统和保留时间压力改变, 色谱柱堵塞 系统压力升高 色谱柱柱效下降或色谱柱损坏 样品出峰时间改变,峰形变坏,分离效果 变差
检测器
检测器的类型 紫外或二极管阵列检测器 荧光检测器 示差折光检测器 电化学检测器 蒸发光散射检测器
紫外/可见光检测器的光路系统, 氘灯提供190nm~600nm 紫外/可见光检测器的光路系统,由氘灯提供190nm~600nm 宽带光谱,光线径直射到全息凹面光栅上 宽带光谱,光线径直射到全息凹面光栅上,衍射的单色光射到 半透射反光镜,被分成两束光线,一束经流通池后照射到测量 半透射反光镜,被分成两束光线,一束经流通池后照射到测量 光电池上,另一束经参比池照射到参比光电池上, 光电池上,另一束经参比池照射到参比光电池上,光电池把光 能量转换成微小电流信号, 能量转换成微小电流信号,光栅由一台微机控制的步进电机精 确地驱动以改变波长。 确地驱动以改变波长。如图所示:
泵头有气泡 排气 进口阀或出口阀失灵 超声清洗或更换 系统泄露 用了错误的流动相或流动相比例不对 用了错误的色谱柱 色谱柱或保护柱或混合过滤器有堵塞的现象 色谱柱的柱温不对 压力模块出现故障,通常是压力传感器或仪器主板的问题
基线问题 (一)基线的漂移
光源的未完全稳定,解决方法:延长仪器预热时间, 流动相的比例在变化,和色谱柱之间未达到化学平衡,延 长平衡时间 环境温度在变化 保持恒温 色谱柱或流通池被污染
基线问题 (二)基线的噪声
电信号噪音 特征: ①很均匀密集的毛刺,光源能量过低或者光路污染,更换光 源或清洗光路,仪器接地不良 ②突然出现的无规则的脉冲式尖锐信号,且与流动相流速无 关,仪器的电路板的问题,检查仪器接地情况或者报修
液相色谱仪可能会出现的故障及处理方法

液相色谱仪可能会出现的故障及处理方法液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
1、柱压高原因:缓冲液盐分沉积于柱内;或者是样品污染沉积。
措施:如果是缓冲液盐分沉积于柱内,则用40~50℃的纯水低速正向冲洗柱子,逐渐提高流速冲洗,柱压大幅度下降后再用常温纯水清洗,最后用纯甲醇冲洗柱子30分钟。
如果是样品污染沉积导致,则用纯水反向冲洗柱子,再用甲醇冲洗,随后用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子,再用甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后用甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟。
2、气泡溢出原因:主要是由于过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,内部霉菌繁殖形成菌团阻塞了过滤器导致。
措施:将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,利用超声清洗既分钟。
或者将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小时,再用纯水清洗,打开purge键清洗脱气,直到没有气泡冒出。
打开泄压阀,打开泵,纯水冲洗过滤器1小时左右。
3、无压力指示,也无液体流过原因:泵密封垫圈磨损;或大量气泡进入泵体。
措施:更换密封垫圈,或用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。
4、压力波动大,流量不稳定原因:系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物。
措施:观察流动相的量,动相要充分脱气。
如果是单向阀和阀座不能密封,则拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。
5、出峰不佳,峰分叉原因:色谱柱被污染,或者柱头填料塌陷。
措施:色谱柱被污染则需清洗色谱柱。
如果柱头填料塌陷或硬结,则去除硬结部分,冲新装入新填料。
液相色谱常见问题及处理方法(LC-MS)

13
色谱柱的维护
1. 在使用新柱之前,最好用强洗脱溶剂在低流量下 (0.20.3 ml/min)冲洗 30 min,长时间未用的分析柱也要同 样处理。 2. 定期使用强洗脱溶剂冲洗柱子。 3. 使用缓冲盐作为流动相后,要先用水(含有少量甲醇 5~10%)冲洗,再用有机溶剂(甲醇)冲洗。 4. 净化样品。 5. 分离条件优化(防止鬼峰出现)。 6. 不使用时,两头要盖上盖子,避免固定相干枯。 7. 使用预柱。 8. 避免流动相组成及极性的剧烈变化(梯度洗脱) 14 9、避免压力脉冲的剧烈变化
pK1 pK2 4.76 7.2 1 pK3 6.40 12.32
22
醋酸
柠檬酸 磷酸
4.87
3.13 2.16
20
使用氟树脂膜的减压脱气法
氟树脂膜
真空室
往送液泵
真空泵 流动相 控制器
21
3. 缓冲液 选择缓冲液的步骤 1、确定最佳分离状态时的流动相pH; 2、选择具有与流动相的pH相近的pKa 的缓冲液 (即使浓度稀也具有较强的缓冲能力); 3、确认检测波长下缓冲液是否有较大的吸收; (在波长210nm附近及以下进行检测时,不能 用醋酸和柠檬酸的缓冲液) 常用弱酸的pKa
1)泵中气泡使液流波动,改变保留时间和峰面积; 2)柱中气泡使流动相绕流,峰变形; 3)气泡过多可使泵压力不稳甚至停止工作; 4)检测器中的气泡产生基线波动, ① 示差折光检测器——使折射率变化 ② UV检测器(200nm以下)——溶解氧气有吸收 ③ 荧光检测器——溶解氧气有荧光猝灭作用
脱气的方法
1. 超声波脱气法 2. 使用氟树脂膜的减压脱气法
1. 高效液相色谱分析方法的建立 2. 高效液相色谱仪常见问题及处理方法 3. 制备型高效液相色谱技术 4. 高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)
液相色谱图谱常见问题及解决办法

液相色谱图谱常见问题及解决办法液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。
其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而有些问题必须通过修改操作程序来解决。
本文汇总了一些关于液相色谱图谱问题的解决办法,这些办法也许能更有效的帮你解决问题。
一、峰拖尾原因和解决方法1、筛板阻塞a、反冲色谱柱b、更换进口筛板c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷填充色谱柱3、干扰峰a、使用更长的色谱柱b、改变流动相或更换色谱柱4、流动相PH选择错误调整PH值。
对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰5、样品与填料表面的溶化点发生反应a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂b、更改色谱柱二、峰前延原因和解决方法1、柱温低升高柱温2、样品溶剂选择不恰当使用流动相作为样品溶剂3、样品过载降低样品含量4、色谱柱损坏更换色谱柱三、峰分叉原因和解决方法1、保护柱或分析柱污染取下保护柱再进行分析。
如果必要更换保护柱。
如果分析柱阻塞,拆下来清洗。
如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施。
如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。
2、样品溶剂不溶于流动相改变样品溶剂。
如果可能采取流动相作为样品溶剂。
四、峰变形原因和解决方法1、样品过载减少样品载量五、早出的峰变形原因和解决方法1、样品溶剂选择不恰当a、减少进样体积b、运用低极性样品溶剂六、早出峰拖尾程度大于晚出峰原因和解决方法1、柱外效应a、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路)b、使用小体积的流通池七、K’增加时,脱尾更严重原因和解决方法1、二级保留效应,反相模式a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)c、加入盐或缓冲剂(或离子化样品)d、更换一支柱子2、二级保留效应,正相模式a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)c、加入水(或多官能团化合物)d、试用另一种方法3、二级保留效应,离子对加入三乙胺(或碱性样品)八、酸性或碱性化合物的峰拖尾原因和解决方法1、缓冲不合适a、使用浓度50-100mM的缓冲液b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液九、额外的峰原因和解决方法1、样品中有其他组份2、前一次进样的洗脱峰a、增加运行时间或梯度斜率b、提高流速3、空位或鬼峰a、检查流动相是否纯净b、使用流动相作为样品溶剂c、减少进样体积十、保留时间波动原因和解决方法1、温控不当调好柱温2、流动相组分变化防止变化(蒸发、反应等)3、色谱柱没有平衡在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱十一、保留时间不断变化原因和解决方法1、流速变化重新设定流速2、泵中有气泡从泵中除去气泡3、流动相选择不恰当a、更换合适的流动相b、选择合适的混合流动相十二、基线漂移原因和解决方法1、柱温波动控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器2、流动相不均匀。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
液相色谱常见问题及处理方法HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法1、样品量不足,解决办法为增加样品量2、样品未从柱子中流出。
可根据样品的化学性质改变流动相或柱子3、样品与检测器不匹配。
根据样品化学性质调整波长或改换检测器4、检测器衰减太多。
调整衰减即可。
5、检测器时间常数太大。
解决办法为降低时间参数6、检测器池窗污染。
解决办法为清洗池窗。
7、检测池中有气泡。
解决办法为排气。
8、记录仪测压范围不当。
调整电压范围即可。
9、流动相流量不合适。
调整流速即可。
10、检测器与记录仪超出校正曲线。
解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。
为什么HPLC柱柱压过高柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。
其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因。
1、拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;2、把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查;3、将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动池)。
这时,如果柱压仍不下降,再检查;4、更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。
若柱压还高,请与厂商联系。
一般情况下,在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题,SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。
液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?1、筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。
2、存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化漂移现象1、温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定2、流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡快速变化现象1. 流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定2、泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。
3、流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合HPLC 仪器问题1、我的HPLC泵压明显的偏高,请问可能的原因?答:流速设定过高;流动相或进样中有机械杂质,造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞;流动相粘度过大;柱温过低;缓冲盐结晶;压力传感器故障。
2、基线不稳,上下波动或漂移的原因是什么,如何解决?答:a.流动相有溶解气体;用超声波脱气15-30分钟或用充氦气脱气b.单向阀堵塞;取下单向阀,用超声波在纯水中超20分钟左右,去处堵塞物c.泵密封损坏,造成压力波动;更换泵密封d.系统存在漏液点;确定漏液位置并维修f.柱后产生气泡;流通池出液口加负压调整器g.检测器没有设定在最大吸收波长处;将波长调整至最大吸收波长处h.柱平衡慢,特别是流动相发生变化时;用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
3、接头处为何经常漏液,如何处理?答:接头没有拧紧;拧松后再紧,手紧接头以手劲为限,不要使用工具,不锈钢接头先用手拧紧,再用专用扳手紧1/4-1/2圈,注意接头中的管路一定要通到底,否则会留下死体积。
接头被污染或磨损;建议更换接头。
接头不匹配,建议使用同一品牌的配件。
4、进样阀漏液是如何造成的?答:a.转子密封损坏;更换转子密封b.定量环阻塞;清洗或更换定量环c.进样口密封松动;调整松紧度d.进样针头尺寸不合适,一般是过短;使用恰当的进样针(注意针头形状)e.废液管中产生虹吸;清空废液管谱图问题1、问:造成峰拖尾的原因是什么,如何消除?答:a.筛板阻塞;反冲色谱柱、更换进口筛板b.色谱柱塌陷;填充色谱柱c.有干扰物质的存在;使用更长的色谱柱、改变流动相或更换色谱柱e.流动相PH值不合适;调整PH值,对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰f.样品与填料表面的溶化点发生反应;加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂或更改色谱柱2、问:造成峰分叉的原因是什么,如何消除?答:保护柱或分析柱污染;取下保护柱再进行分析。
如果必要更换保护柱。
如果分析柱阻塞,拆下来清洗。
如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施。
如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。
样品溶剂不溶于流动相;改变样品溶剂,如果可能采取流动相作为样品溶剂。
3、问:K值增加时,拖尾更严重,这是为什么?答:反相模式,二级保留效应;a.加入三乙胺(或碱性样品)b.加入乙酸(或酸性样品)c.加入盐或缓冲剂(或离子化样品)d.更换一支柱子4、问:保留时间的波动有几种可能的原因?答:温控不当;调节好柱温。
流动相组分变化;防止流动相蒸发、反应等,做梯度时尤其要注意流动相混合的均匀。
色谱柱没有平衡;在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。
液相色谱常用符号与术语表ACN 乙腈AcetonitrileAUFS 满量程的吸光度单位Absorbance units, full scaleAs 峰不对称因子B 二元流动相中的强溶剂;例如:反相HPLC的甲醇/水混合液中的甲醇BSA 牛血清白蛋白(一种蛋白质)Bovine serum albuminCAF 咖啡因(中性溶质)CaffeineCRF 色谱响应因子Chromatographic response function;色谱图总分离度的定量指标dc 色谱柱内径(cm)DMOA 二甲基辛胺DimethyloctylamineDNB 2,4-二硝基甲酰(基)2,4-Dinitrobenzoyldp 色谱柱填料的粒度(cm)DRYLAB 液相资源公司(LC Resources INC.)的计算机模拟软件。
DRYLAB I用于等度预测,DRYLAB G用于梯度预测F 流动相的流速(ml/min)FC-113 1,1,2-三氟-1,2,2-三氯乙烷GPC 凝胶渗透色谱法Gel-permeation chromatographyHA 酸性溶质,能电离出A-Hex 己烷HexaneHr 二相邻谱带之间的谷高HVA 高香草酸Homovanillic acidh’ 峰高h1,h2 相邻谱峰1和谱峰2的峰高IEC 离子交换色谱法Ion-exchange chromatographyIP 离子对Ion-pairIPC 离子对色谱法Ion-pair chromatographyJ 色谱峰强度参数K’ 所给谱峰的容量因子,k’=(tR-t0)/t0=tR’/t0,tR=t0(1+k’)k 梯度洗脱过程中,某溶质的k’的平均值或有效值kw 以水做流动相k’的外推值k1,k2 相邻谱峰1和谱峰2的容量因子L 色谱柱长度(cm)Lc 检测器流动池光路的长度(cm)M 溶质的分子量MC 二氯甲烷Methylene chlorideMDST 混合设计统计技术Mixture-design statistical technique;一种优化流动相的软件MeOH 甲醇MethanolMTBE 甲基叔丁醚Methyl-t-butyl etherMW 溶质的分子量N 色谱柱塔板数NAPA N-乙酰普鲁卡因胺N-Acetylprocainamide(碱性溶质)N0 检测器的基线噪音ODS 十八烷基硅烷OctadecylsilylP 色谱柱的压力降[通常以巴(bar)表示,也用psi;另外,也用作柱极性参数PA 普鲁卡因胺Procainamide(碱性物质)PAH 聚芳香烃Polyaromatic HydrocarbonPESOS 优化流动相的计算机软件(美国Perkin-Elmer产品)pKa 溶质酸性常数的负对数;当pH=pKa时,溶质中有一半是电离的Rk 保留值范围,Rk=(最末谱峰k’)/(最初谱峰k’)RRM 相对分离度图(通常N=10000)Rs 相邻二谱峰的分离度S 当流动相中的%B改变时,测量溶质保留值的变化速率的参数SAL 水杨酸Salicylic AcidSEC 尺寸排阻色谱法Size-exclusion chromatographyS/N 信噪比Signal to noise ratiot 分离时间(min)(样品进样时t=0)tp 梯度系统的滞后时间(min)TBA 四丁基铵离子Tetrabutylammonium ionTEA 三乙胺TriethylamineTHF 四氢呋喃Tetrahydrofurantk 在用于校正等度洗脱溶剂强度的流动相离开梯度混合器时,梯度洗脱的时间TLC 薄层色谱法Thin-layer chromatographyTMA 四甲基铵Tetramethylammonium(盐)TMS 三甲基硅烷TrimethylsilyltO 色谱柱的死时间(min)tR 溶质的保留时间(min)tG 梯度时间(min),即梯度开始至结束的时间t1,t2 相邻谱峰1和谱峰2的保留时间(min)ti 色谱图中第一峰的保留时间(min)tf 色谱图中最末峰的保留时间(min)△tg tf-titx (tf-ti)/2UV 紫外光Vm 色谱柱的死体积(mL),Vm=t0FVMA 香草扁桃酸Vanillymandelic acidwm 化合物的进样量w1,w2 相邻谱峰1和谱峰2于半峰高处(W1/2)的宽度(min)W1,W2 相邻谱峰1和谱峰2的基线宽度(min)W1/2 半峰高处的谱带宽度xd,xe,xn 溶剂选择参数,分别用于测定溶剂的酸度、碱度和偶极性的程度? 分离因子,?=k2/k1△? 梯度洗脱期间流动相成分的变化?o 溶剂强度参数? 化合物的克分子吸收系数? 流动相的粘度(Pa?s)? 流动相中强溶剂的体积份数%B 二元流动相中强溶剂的体积百分比(%v)液相色谱法简介气相色谱不能由色谱图直接给出未知物的定性结果,而必须由已知标准作对照定性。
当无纯物质对照时,定性鉴定就很困难,这时需借助质谱、红外和化学法等配合。
另外大多数金属盐类和热稳定性差的物质还不能分析。
此缺点可高效液相色谱法来克服。
在经典液相色谱的基础上,引入了气相色谱的理论与技术,在70年代初建立了高效液相色谱分析法(以HPLC 表示)。
在常压下操作的液相色谱,分离一个样品往往长达几小时至几十小时,因此工作效率很低。
人们曾对这种经典液相色谱法试用了柱前加压或柱后减压的办法来提高流速,以缩短分离时间,但是结果失败了。
根据液相色谱理论,因为随着载液(流动相)流速的提高,板高则增大,所以柱效会显着降低。
随着生产技术的提高,人们制成了细小(<10?m)而高效的填充物,从而使柱效大大提高。
但是随着填充物粒度的减小,柱压降显着增大,为了得到合理的载液流速,使用了高压;输液泵,使流速达到1~10mL/min。