ELISA法与GICA法检测HBSAg方法学评价
HBsAg弱阳性样本的3种测定方法比较
HBsAg弱阳性样本的3种测定方法比较王进;董长林;陈国军;陆建红;杨勇;林中;陈琪【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2008(029)011【摘要】目的比较胶体金免疫层析试验(GICA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)与微粒子化学发光检测技术(MEIA)检测HBsAg弱阳性样本的结果符合率,以了解3种方法的特异性与灵敏度等诊断指标.方法用3种方法平行检测收集的血清标本HBsAg,并相互比较.结果 3种方法检测HBsAg的结果符合率为74.3%,其中ELISA与MEIA结果符合率为94.9%;GICA与MEIA结果符合率为76.9%.GICA 检测HBsAg弱阳性样本时的各项诊断指标都不甚理想.结论 1. GICA的灵敏度和特异性分别为81.3%和81.3%,较ELISA和MEIA低,检测HBsAg弱阳性样本时存在一定程度的漏检率和误诊率,只能起筛查作用,遇到HBsAg弱阳性的血清标本必须与ELISA法并用,实行双检.2. ELISA较MEIA灵敏度和特异性略低,当测定标本的OD值在临界值附近即检测灰区时建议用MEIA复检.【总页数】2页(P978-979)【作者】王进;董长林;陈国军;陆建红;杨勇;林中;陈琪【作者单位】314000,浙江嘉兴,武警浙江总队医院检验科;314000,浙江嘉兴,武警浙江总队医院检验科;314000,浙江嘉兴,武警浙江总队医院检验科;314000,浙江嘉兴,武警浙江总队医院检验科;314000,浙江嘉兴,武警浙江总队医院检验科;314000,浙江嘉兴,武警浙江总队医院检验科;314000,浙江嘉兴,武警浙江总队医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R446.61;R512.62【相关文献】1.乙型肝炎表面抗原弱阳性样本的三种测定方法比较 [J], 高云2.三种方法测定HBsAg弱阳性样本的分析比较 [J], 赵芳;李保民3.三种方法检测HBsAg弱阳性样本的结果比较 [J], 王玉辉4.两种HBsAg定量检测方法对弱阳性样本检测结果的一致性比较 [J], 杨小娟;徐琴芳;吴国荣5.3种检测HBsAg弱阳性样本方法比较 [J], 曹真虎;钱超因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
MECIA、ELISA和GICA在HBV表面抗原测定中的比较
MECIA、ELISA和GICA在HBV表面抗原测定中的比较作者：卢利平胡瑾瑾宋娟芬来源：《健康周刊》2018年第10期【摘要】目的：比较胶体金免疫层析试验（GICA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）及微粒子酶免疫发光检测技术（MECIA）检测表面抗原（ HBsAg）弱阳性样本的结果符合率，以了解三种方法对检测低水平乙型肝炎表面抗原的价值。
方法：乙型肝炎病毒（HBV）感染人群中有一部分血清乙型肝炎表面抗原（HBsAg）呈低水平存在。
用三种方法平行检测收集的血清标本 HBsAg，并相互比较。
所有阳性结果用抗体中和确认试验进行确认。
结果：在HBsAg ≥ 5ng/ml时，这三种方法有很高的符合率;在 1～ 5 ng/ml之间时， ELISA和 MECIA也有很高的一致性（ 92%），但 GICA法的符合率只有 61.4%;而在极低水平 HbsAg（< 1ng/ml）时，GICA法无法检测， ELISA有 33.3%的检测符合率。
结论： ELISA和 GICA对低水平HbsAg的检测效能低于 MECIA。
【关键词】微粒子化学发光检测技术（MECIA）;胶体金免疫层析试验（GICA）;酶联免疫吸附试验（ELISA）;乙型肝炎表面抗原（HBsAg）乙型肝炎严重危害人类健康，部分患者可转为慢性感染，甚至发展为肝硬化或肝癌，其危害远远大于其他类型肝癌。
乙型肝炎表面抗原（HBsAg）是诊断和筛查乙型肝炎病毒感染的重要指标。
目前， HbsAg检测方法有胶体金免疫层析试验（GICA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）及微粒子酶免疫发光检测技术（MECIA）等检测技术。
GICA法操作简单，基本上用于快速检验; ELISA法具有较高灵敏度和特异性，可进行定量和半定量测定等优点，可以在酶免分析仪上做批量检测，是目前实验室最常用的检测 HBsAg的方法，这两种方法被较多的用于基层医院。
MECIA是在 ELISA基础上发展起来的一种检测技术， HBsAg检测的敏感性和特异性得到显著提高，并易于自动化，但存在成本高的缺點。
对ELISA方法检测HBSAg结果的分析
对ELISA方法检测HBSAg结果的分析当前国内临床检测乙型肝炎表面抗原(HBSAg)多采用ELISA双抗体夹心法，其基本原理是:1.将抗体包被在载体后作为固相，加入待测标本，使其中的相应抗原通过免疫学反应结合到固相抗体上，洗涤除去未结合的抗原。
2.加入酶结合物与已结合在固相抗体上的抗原反应，并洗涤除去未结合的游离未结合物。
3.加入酶（常用辣根过氧化物酶）的相应底物，固相化的酶催化底物反应生成有色产物。
在一定温度下一定时间后终止反应，显色物的量与在固相上的抗原有关。
该方法检测HBSAg时，影响的因素很多，有内源性物质和外源性物质两大类。
血清是最常见的ELISA标本，大约有40%的人血清标本中含有类风湿因子，补体，嗜异性抗体，嗜靶抗原自身抗体等非特异性物质，对ELISA测定有干扰作用易造成假阳性或假阴性结果，这不是人为因素造成的。
在临床检验工作中，常因标本量多，紧急要求出检验报告，较难逐个分析其内源性的物质，而忽略它的存在。
而工作中，因血样的采集，储存及操作程序等不当所致的外源性物质的干扰，最易影响ELISA的测定结果。
本文对检验工作中经常出现的如标本溶血，标本被细菌污染，标本储存过久，标本凝固不全等因素进行分析。
1.标本溶血由于各种人为因素引起标本溶血，使红细胞溶解细胞内的过氧化物酶进入血浆，并大量吸附于细胞碎片及纤维蛋白原上,从而造成以辣根过氧化物酶为标记的ELISA测定中，非特异性显色，出现假阳性。
有试验证明溶血标本HBSAg假阳性率达91.7%[1]。
要认真做好标本的保存和处理工作，防止溶血。
2.标本受到污染标本受细菌污染，因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶同样易产生非特异性显色，出现假阳性。
3.标本放置时间在冰箱中保存过久的标本，血清中IGg可聚合成多聚体，AFP可形成二聚体，在ELISA测定中会导致本底过深，甚至造成假阳性。
采血后若不在当天检测，应置于2-8℃冰箱中，若要储存，则置于-20℃低温冰箱内保存。
ELISA法和GIGA法测定乙型肝炎病毒血清标志物的比较研究
ELISA法和GIGA法测定乙型肝炎病毒血清标志物的比较研究目的 探讨金标快速检测板法（GIGA法）检测乙型肝炎病毒血清标志物五项的结果准确性。
方法 选取2016年3月1～31日于我院产科门诊进行“母婴筛查”的患者357例，其待测血清标本同时采用ELISA（酶联免疫吸附法）和GIGA进行检测，对两种方法检测结果的一致性进行方法学分析。
结果 357例血清标本中，286例GIGA法与ELISA法5项结果完全相符，总符合率达80.11%，71例结果不完全一致。
采用ELISA法检测，HBsAg阳性结果的标本36例中，GIGA法有1例患者没有检出。
结论 乙肝五项血清标志物的结果GIGA法比ELISA法准确性稍低，但GIGA法操作简便、快速，易于观察结果，且GIGA法中HBsAg检测结果与ELISA法基本一致，适用于急诊手术前以及献血前的快速筛查。
[Abstract]Objective To explore the GIGA method detect hepatitis B virus serumients joined the “maternal accuracy of the results of the five makers.Methods 357 pat，2016 toand infant screening” in the Obstetrics Clinic of our hospital from March 1st，the serum specimen was tested by ELISA method andMarch 31，2016 were selected，the consistency of test results of the two methods GIGA method at the same time，286 cases of GIGA methodwere analyzed.Results In 357 cases of serum specimens，the total consistent rate waswere completely accorded with ELISA method five items80.11%.But 71 samples were not completely consistent.36 cases of HBsAg positiveof specimens w ith ELISA method，one patient was not been detected withresultsGIGA method.Conclusion The accuracy o f five s erum marker of hepatitisB virus，GIGA method is slightly lower than ELISA method，but GIGA method is simple，and GIGA method of HBsAg detection results are basicallyfast and easy observationidenticalwith ELISA method，it i s s uitable for r apid s creening before e mergencysurgery and blood donation.[Key words]HBV；Serum markers；ELISA；GIGA我国是乙型肝炎病毒感染率较高的国家之一，众多学者[1-6]报道我国人口HBsAg阳性率为9.8%～15.28%。
几种HBsAg检测方法的比较与分析
几种HBsAg检测方法的比较与分析作者：李小毓来源：《中国实用医药》2013年第11期【摘要】目的分析电化学发光法（ECLIA）、酶联免疫法（ELISA）和胶体金免疫层析法（GICA）在不同水平乙肝病毒表面抗原（HBsAg）检测中的结果差异，并进行定量分析与评价。
方法选取138例HBsAg低浓度（介于05～10ng/ml）和214例高浓度（>10ng/ml）临床样本，分别用ECLIA、ELISA、GICA进行检测，并与162例非乙肝患者正常血清检测结果对照，对结果进行统计分析。
结果低浓度样本中，ECLIA、ELISA、GICA检测HBsAg为阳性的分别为125、133、121例；高浓度样本中，三种方法灵敏度分别为991%、995%、986%，差异不明显。
结论 ELISA和GICA的敏感度和特异度均低于ECLIA。
在HBsAg低浓度情况下，ECLIA与ELISA及GICA的灵敏度差异有统计学意义。
在HBsAg值高浓度情况下，ECLIA与ELISA的灵敏度差异无统计学意义，ECLIA与GICA的灵敏度差异有统计学意义。
【关键词】乙肝病毒表面抗原；电化学发光法；酶联免疫法；胶体金免疫层析法作者单位：473000 南阳市张仲景医院检验科乙型肝炎是我国目前流行最广泛、危害最严重的病毒性肝炎之一。
HBsAg检测是临床诊断和治疗乙肝病毒感染者病程和传染性的重要指标[1]。
许多高灵敏度的检测方法先后应用于临床免疫学检验[2]，为定量分析和比较这些方法的差异，我们分别从高水平和低水平HBsAg样本进行几种方法的比较，结果如下。
1 资料与方法11 样本来源收集我院2008年～2011年临床新鲜血清样品，分别取HBsAg低水平样本138例，高浓度样本214例，并取162例非乙肝患者正常血清样本作为对照。
12 试剂和仪器 ECLIA法采用POCHEE601型全自动免疫分析仪及配套试剂（德国罗氏）；ELISA试剂采用北京万泰生物药业有限公司产品；GICA法采用美国雅培药业有限公司提供全自动发光免疫仪器。
ELISA法和胶体金试纸条法在乙肝表面抗原检测中的应用研究
ELISA法和胶体金试纸条法在乙肝表面抗原检测中的应用研究目的研究ELISA法和胶体金试纸条法（GICA）在乙肝表面抗原检测中的准确度和特异性，分析方法的应用价值。
方法选取本院妇幼保健院检验科在2016年5月～2017年12月收集的共计460例血样标本，分别运用ELISA法及GICA法进行检测，比较检测结果。
结果ELISA法乙肝表面抗原阳性率为47.61%，GICA法阳性率为41.96%，差异有统计学意义（P＜0.05）。
ELISA法及GICA法在对乙型病毒性肝炎表面抗原检测结果上具有密切的相关性（P＜0.05）。
ELISA法灵敏度和特异度均高于GICA法（P＜0.05）。
结论ELISA法在阳性率、特异度及灵敏度等指标上均较GICA法高，但由于GICA法器材更为小巧、简洁直观，且无需大型设备辅助，较为广泛地应用于普查及急诊前检查中。
Abstract：Objective To study the accuracy and specificity of ELISA and colloidal gold strip method in the detection of hepatitis B surface antigen.Methods A total of 460 blood samples were collected from laboratory Department of Maternal and Child Health Hospital from May 2016 to December 2017.ELISA and GICA methods were used to detect and compare the results.Results The positive rate of HBsAg in ELISA was 47.61%，and the positive rate in GICA was 41.96%，the difference was statistically significant （P＜0.05）.The ELISA method and GICA method have close correlations on the results of surface antigen detection of hepatitis B virus（P＜0.05）.The sensitivity and specificity of ELISA were higher than those of GICA（P＜0.05）.Conclusion The ELISA method is more accurate than the GICA method in terms of positive rate，specificity，and sensitivity，but the GICA method is more compact，simple，and intuitive，and does not require large-scale equipment，and is widely used in census and pre-emergency tests.Key words：Hepatitis B surface antigen；Colloidal gold；Viral hepatitis type B乙型病毒性肝炎（viral hepatitis type B）是由乙型肝炎病毒引起的以肝臟病变为主的一种传染病，简称乙肝，在全球的发病率呈逐渐增高趋势，据统计，全球大约存在20亿乙肝病毒携带者[1]，乙肝是目前世界范围感染率最高的疾病。
ELISA法检测血清中HBsAg的结果不确定度分析
ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＨＢｓＡｇ的结果不确定度分析目前ELISA法在临床检验中已被广泛应用,具有一定的代表性,而有关ELISA 法检测结果的不确定度评定的应用报道很少。
本文根据JJF1059—1999《测量不确定度评定与表示》[1],通过对典型例子不确定度的分析和量化,建立了ELISA法检测HBsAg结果不确定度的评定程序,通过对检测结果不确定度的评估,对检测结果进行完整地表达,避免或降低了出现假阴性结果的风险。
1 材料与方法1.1 材料试剂为乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒(酶联免疫法),上海科华生物技术有限公司产品。
设备为Thermo MK3型酶标读数仪。
依据GB15990—1995《乙型病毒性肝炎的诊断标准及处理原则》[2]进行检测。
1.2 方法在板架上放好酶标板条,每孔加入50 μL待测血清或阴、阳性对照,设阴、阳性对照各2孔。
每孔加入酶结合物50 μL,置37℃孵育30 min。
洗板5次后,每孔加显色剂A液、B液各50μL,置37℃孵育15 min。
每孔加入终止液50 μL后,用酶标仪读数,取主波长450 nm,参考波长630 nm读取各孔OD值。
2 结果2.1 被测物数学模型公式:ΔA=S-CO式中:ΔA—结论判定;S—待测血清吸光度值(OD值);CO—临界值(cut-off)=NCx×2.1。
NC—阴性对照OD值;NCx—阴性对照平均OD值;2.1为修正系数。
2.2 结果判定当阴性对照OD均值0.05时以实际OD值计算。
ΔA≥0者为HBsAg阳性,ΔA0.05时以实际OD值计算,见表2。
3 讨论3.1 分析和量化不确定度分量3.1.1 临界值CO的不确定度就是阴性对照平均值(NCx)的不确定度,NCx的不确定度主要由2个分量组成,即:由系统效应引起的阴性对照OD值NC的不确定度和由重复性试验(只有当阴性对照OD值NC大于0.05时)中随机效应rep引起的不确定度。
阴性对照NC代表的是阴性对照在某特定波长下的吸光度值,根据朗伯一比耳定律,吸光度值与吸光系数(a或ε)、液层厚度(b)和阴性样液浓度(C0)成正比,对于某一特定的显色反应来说,吸光系数是个常数。
金标免疫层析试验酶联免疫吸附试验检测HBsAg比较论文
金标免疫层析试验与酶联免疫吸附试验检测HBsAg的比较【摘要】目的比较金标免疫层析试验(gica)与酶联免疫吸附试验(elisa)检测hbsag的结果符合率，以了解gica法的特异性与敏感度。
方法用gica法和elisa法平行检测受检者血清标本hbsag。
结果gica法和elisa法检测hbsag的结果符合率为99.65%。
结论gica法较elisa法敏感度稍低，用gica法检测hbsag时存在一定程度的漏检率（即假阴性），即在低滴度hbsag的血清标本时不宜使用gica法；gica法操作简便、快速,适用于临床急诊标本及健康人群的筛查，elisa法灵敏度高、特异性强,适用于综合性医院常规检测。
【关键词】乙型肝炎表面抗原金标免疫层析试验酶联免疫吸附试验特异性与敏感度中图分类号：r3文献标识码：a文章编号：1005-0515（2011）2-361-01乙型肝炎是目前流行最广泛、危害着人民健康最严重的病毒性肝炎之一。
目前，乙肝病毒hbv血清标志物的常用检测方法有elisa 法，金标记免疫层析法和化学发光法。
[1]我科多年来一直使用elisa法检测hbv血清标志物，为了避免人为差错的发生，对经elisa法测得hbsag阳性的血清标本再次用gica法复检，结果发现，对于少数hbsag阳性的血清标本gica法无法测出，呈阴性（实为假阴性）。
于是，我决定用gica法和elisa法同时检测血清标本中hbsag，加以比较。
1 材料与方法1.1 标本来源 2010年1月1日～12月31日我院门诊及住院患者静脉血清标本293份。
1.2 试剂和仪器 (1)试剂：gica试纸条为英科新创科技有限公司生产，elisa试剂盒为北京万泰生物药业有限公司生产，均在有效期内使用。
(2)仪器：上海热电仪器厂 mk-3酶标仪与mk-2洗板机。
1.3 方法 293份血清标本以gica试纸条和elisa试剂盒平行检测hbsag,严格按照说明书操作。
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ELISA法与GICA法检测HBSAg方法学评价
摘要】目的：探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）法与胶体金免疫层析（GICA）法
检测乙型肝炎表面抗原（HBSAg）的应用价值。
方法：对医院650例体检和门诊
病人分别进行ELISA法语GICA法检测HBSAg。
结果：ELISA法检测HBSAg后，阳
性例数为69例，阳性率为10.63%，GICA法检测HBSAg后，阳性例数为64例，
阳性率为9.85%，差异无统计学意义（P>0.05）；ELISA法灵敏度为95.5%、特异
性为92.8%，GICA法灵敏度为88.4%，特异性为91.6%，ELISA法与GICA法相较，灵敏度较高，特异性无明显差异。
结论：ELISA法与GICA法检测HBSAg均有良好
的效果，ELISA法灵敏度较高适合常规检测，GICA法操作简便、快速，适合普查
筛查。
【关键词】酶联免疫吸附试验法胶体金免疫层析法乙型肝炎表面抗原
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）35-0272-02
常规检测HBSAg的方法主要为ELISA法，该方法具有较高的准确性，但是操
作复杂且用时过多[1]。
GICA是国外兴起的减速、简便的诊断技术，为比较两种方法对检测HBSAg的应用价值，笔者对医院2011年-2012年间在医院体检及门诊病人650例分别采用ELISA法和GICA法进行HBSAg的检测，取得了令人满意的结果，报告如下：
1 资料与方法
1.1病例来源与标本采集
650例研究对象均为2011年-2012年间在医院体检及门诊病人，其中男341例，女309例，年龄22-75岁，平均年龄（41.5±6.8）岁。
排除高血压、高血脂、糖尿病、肾脏疾病、肿瘤和免疫系统疾病患者。
于清晨空腹时采集静脉血4ml，
分成2份，1份用于GICA检测，另一份离心分离血清用于ELISA检测。
1.2方法
ELISA检测采用双抗体夹心法，检测时在使用样本的同时加入卫生部临检中
心提供的质控血清进行质控。
加入酶结合物，在37℃下恒温培育30min，洗涤后
加底物显色，加入终止酶后使用酶标仪判读。
本次研究采用GF-M3000分析仪，
结果判读：阴性：A＜0.1，弱阳性：A＜0.5，阳性：A＞0.5。
GICA检测：在不浸过标记线的前提下将检测条箭头方向插入血清样品中，
10s后取出，平放30min后进行判读。
结果判读：阴性：色带出现于控制线，未
出现于检测线；阳性：粉红色色带分别出现于控制线与检测线；无效：未出现色带。
1.3统计学方法
应用SPSS13.0软件对研究所得数据进行数据的统计与处理，计数资料采用x2检验，计量数据以（x-±s）表示，采用t检验，p<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1检测结果 ELISA法检测HBSAg后，阳性例数为69例，阳性率为10.63%，GICA法检测HBSAg后，阳性例数为64例，阳性率为9.85%，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。
表1 检测结果比较
2.2诊断指标比较 ELISA法灵敏度为95.5%、特异性为92.8%，GICA法灵敏度为88.4%，
特异性为91.6%，ELISA法与GICA法相较，灵敏度较高，特异性无明显差异。
3 讨论
乙型肝炎具有较高的传染性，乙型肝炎病毒携带者（HBV）和慢性持续感染者是其主要传染源[2]。
检查乙型肝炎感染的重要指标之一就是乙型肝炎表面抗原（HBSAg），此指标是常规体检项目，因此HBSAg的检测对乙型肝炎的检查、预防和治疗具有十分重要的意义。
ELISA法是利用酶的高效催化与放大作用与特异性抗原相结合的一种标记免疫技术[3]，该方法灵敏度高、特异性强、定量与半定量测定皆可等优点，在酶分析仪上进行批量检测，结果判读显示明确，是普遍采用的一种HBSAg检测方法，但是该方法受温度、时间、洗涤、加样等多种因素影响，操作步骤较繁琐，耗费时间较长，对现场筛查与急诊实际应用价值不大，适合于常规检测。
GICA法是采用双抗体夹心测定原理，用胶体金替代酶标记抗HBS，快速定性检测血液或血清中的HBSAg，通过色带线表现出来。
该方法不需要设备仪器，操作过程简单，耗费时间少，30min内即可完成，广泛用于临床HBSAg初筛、急诊以及现场筛查。
但是其仍旧有一定的局限，在HBSAg浓度较低时容易出现假阴性造成漏诊。
在本次研究结果中，ELISA法与GICA法均有良好的检测结果，阳性检测率差异无统计学意义（P>0.05），ELISA法比之GICA法灵敏度较高，特异性差异不明显，与大多数学者研究结果基本一致[4]。
ELISA法与GICA法各种均具有明显的优势，也有一定的局限性，在GICA法检测后用ELISA法复检是准确率最高的方法。
在临床的应用中，需根据实际情况具体选择检测方法。
参考文献
[1]魏桂芬,丘文慧,张宇平.乙型肝炎血清标志物四种检测方法的对比分析[J].海南医学院学报,2012,18(4):498-500.
[2]田鹏飞,孟淑艳.GICA法检测急诊病毒三项的应用评价[J].中国保健营养,2012,22(5):572-573.
[3]朱柏林.ELISA法与GICA法检测HBsAg方法学评价[J].医学信息,2013(11).
[4]欧雁冰,胡恒贵,李林茹.2种方法检测乙型肝炎表面抗原的比较[J].蚌埠医学院学
报,2012,37(5):585-586.。