烟草赤星病菌拮抗放线菌的筛选与鉴定

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烟草赤星病生防菌的筛选、鉴定及应用研究

Hans Journal of Agricultural Sciences 农业科学, 2021, 11(5), 461-469Published Online May 2021 in Hans. /journal/hjashttps:///10.12677/hjas.2021.115064烟草赤星病生防菌的筛选、鉴定及应用研究杨德政1，孙光军2，桑维钧1*1贵州大学烟草学院，贵州贵阳2中国烟草总公司贵州省公司烟叶处，贵州贵阳收稿日期：2021年4月25日；录用日期：2021年5月21日；发布日期：2021年5月28日摘要为了从生物途径探索有效控制烟草赤星病对烟叶生产带来的危害，本文以烟草赤星病菌为指示菌，采用平板对峙法从烟草根际土壤中筛选出了烟草赤星病的一种拮抗菌Y2，通过形态特征、生理生化特征及16S rRNA、gyrA序列分析等手段，鉴定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。

之后，利用该拮抗菌株分别进行了烟草赤星病离体叶片与盆栽防效试验，结果发现其对烟草赤星病的防效分别为57.17%和59.81%。

另外，研究表明该菌株对其他4种烟草病害病原菌也存在不同程度的抑制作用。

研究结果为该拮抗菌株的进一步研究奠定了基础，并且为烟草赤星病的生物防治提供了参考。

关键词烟草赤星病，生防菌，筛选鉴定，防治效果Screening, Identification and Application of Biocontrol Bacteria against Tobacco Brown Spot OptimizationDezheng Yang1, Guangjun Sun2, Weijun Sang1*1College of Tobacco Science, Guizhou University, Guiyang Guizhou2Tobacco Department Guizhou Branch of China Tobacco Corporation, Guiyang GuizhouReceived: Apr. 25th, 2021; accepted: May 21st, 2021; published: May 28th, 2021AbstractIn order to explore the effective control method to tobacco brown spot disease from the biological *通讯作者。

烟草赤星病菌拮抗链霉菌的多重筛选及发酵液理化性质

ＧＡＯｅ，Ｆｎ一ＭＵｉｇｘａＷＥＩＹｉｇｙｎＺＬｎ－ｉｏ，ｎ — ｉｇ，ＨＡＯｕｘａｇ，Ｕａ — ｕＸｉ－ｉｎＷＹｕｎｈａ
（．ｏｌｇｆＰａｔｒｔｃｉｎＳｅｙｎｒｕｔｒｌＵｉｅｓｙＳｅｙｎ１０６，ｈｎ；１Ｃｌｅｏｌｎｏｅｔ，ｈｎａｇＡｇｉｌａｎｖｒｔ，ｈｎａｇ１１ＣｉａｅＰｏｃｕｉ１２．ｎｔｕｅｏｌｎｒｔｃｏＳａｘａｅｆＡｒｕｔｒｃｅｃｓＴｉｕｎ００３，ｈｎ）ＩｓｉｔｆＰａｔＰｏｅｔｎ，ｈｎｉｄｍｙｏｇｉｌａＳｉｎｅ，ａｙａ３０ＣｉａｔｉＡｃｃｕｌ１
高芬２穆凌霄魏颖颖赵秀香吴元华，，，，
（．阳农业大学植物保护学院，宁沈阳１０６；．１沈辽１１１２山西省农业科学院植物保护研究所，西太原山００３）３０１
摘要：以烟草赤星病菌为靶标菌，用活体对峙拮抗、酵液抑菌活性和离体叶片防效测定相结合的方法，土利发从壤中分离得到的３１放线菌中，选到２株抑菌效果明显、菌谱广、果稳定的拮抗放线菌菌株。拮抗菌发酵液７株筛抗效的理化性质测定表明：菌株发酵液对温度、外线、两紫自然光、碱的稳定性及耐贮性和菌株遗传特性虽有一定差异，酸但均较为稳定，中，株１２２显示出了良好的抑菌防病效果和优良的稳定性，开发应用价值。其菌８— 有关键词：草赤星病菌；烟拮抗菌；选；化特性筛理中图分类号：４５７；４６Ｓ３．２Ｓ７文献标识码：Ａ文章编号：０１０—７９（０７００７～０００１２０）６— １１５

放线菌活性产物对烟草赤星病抑制作用的初步筛选研究

Ｔｅｐｖｎｉｎｅｅｔｅｅｆｔｅｅｆｄｉ￣ｅｈｓｘｅｉｎ．ｈｒｅｔｆｃｓｗｒｕｒｒｖｒｉｅｏｈｉｅｎａｔｅｎｅｅｅｐｒｍｅｔｎＫｅｒｓＡｃｉｏ￣ｅｅ；ｅｍｅｔｔｎｂｏｈｅｔｃ；ｏａｃｒｗｐｔｓｒｅｉｇｐｅｅｔｎｅｅｔｙｗｏｄ：ｔｎｙｔｓｆｒｎａｉｒｔｘｒｔｔｂｃｏｂｏｎｓｏ；ｃｅｎｎ；ｒｖｎｉｆｃｎｃｏａｏ ’
物对赤星病的防治作用，防治效果在５Ｏ％以上的有ｌ；７份并进一步在温室盆栽植株上对防治效果进行了验证试验。
关键词：放线菌；酵液提取物；发烟草赤星病菌；筛选；防治效果
中图分类号：４６￥７￥７；５２文献标识码：Ａ
Ｐｒｍａｙｓｒｅｉｇｏｈｃｉｅｍｅａｏｉｅｆａｔｎｍｙｅｅｉｒｃｅｎｎｆｔｅａｔｖｔｂｌｓｏｃｉｏｃｔｓｔｆｒｃｎｒｌｎｏａｃｒｗｎｓｏｉｅｓｏｏｔｏｌｇｔｂｃｏｂｏｐｔｄｓａｅｉ
放线茵活性产物对烟草赤星病
抑制作用的初步筛选研究
曾莉朱孟沼２刘树芳李一青２，，，，
杨佩文李铭刚２尚惠崔晓龙２李家瑞，，，，文孟良２
，
（．１云南省农业科学院农业环境资源研究所，云南昆明资源保护与利用重点实验室，云南昆明６０９）５０１
６０９，ｈａ５０１Ｃｉ）ｎ

烟草青枯菌拮抗放线菌的筛选及鉴定

ＡｇｉｒｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１９３，Ｃｉｎｈａ；４．ＣｉｔｙＧｒｅｅｎｉｎｇＭａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆＸｉｎｙａａｎｇ，Ｘｉａｎｙｎｇａ，Ｓｈｎｘａｉ７１２０００，Ｃｈｉｎａ；５
中国烟草科学
ＣｈｉｎｅｓｅＴｏｂａｃｃｏＳｃｈｉｎｅｓｅ
２０１３０４，３４（２）
烟草青枯茵拮抗放线菌的筛选及鉴定
陆铮铮，一，彭丽娟１，２丁海霞，左希，彭杰，蒋选利 ’
（１．贵州大学贵州山地农业病虫害重点实验室，贵阳５５００２５；２．贵州大学农学院，贵阳５５００２５；３．中国农业大学农学与生物技术学院，北京１００１９３；４．咸阳市城市绿化管理处，陕西咸阳７１２０００；５．天柱县烟草专卖局，贵州天柱５５６６００）
链霉菌平均抑菌圈直径为２０．３４ｍｍ。
关键词：烟草；青枯病；生物防治；放线菌中图分类号：￥５７２．０８文章编号：１００７ — ５１１９（２０１３）０２ — ００５４ — ０５ＤＯＩ：１０．３０７ — ５１１９．２０１３．０２．０１２
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｓｅｌｅｃｔｅｆｅｃｔｉｖｅａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓａｇｉｎａｓｔＲａｌｓｔｏｎｉａｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ，ｗｅｉｓｏｌａｔｅｄ５６ｓｔｒａｉｎｓｏｆ

烟草赤星病拮抗芽胞杆菌的筛选及培养基优化

烟草赤星病拮抗芽胞杆菌的筛选及培养基优化作者：罗楚翔等来源：《中国烟草科学》2014年第03期摘要：以赤星病原菌Alternaria longipes为筛选指示菌，采用平板共培养初筛和发酵上清滤液复筛的方法，筛选了烟草赤星病拮抗芽胞杆菌3株。

其中菌株K11的菌体径向生长抑制率（PIRG）为63.64%，发酵上清滤液的PIRG值达67.44%。

盆栽试验证明，该菌对烟草赤星病具有良好的拮抗能力。

经鉴定菌株K11为枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）。

由单因素实验和正交实验优化得到了K11菌株生物量较高的摇瓶发酵培养基配方：葡萄糖20.0 g/L，豆粕30.0 g/L，K2HPO43H2O 1.0 g/L，MgSO47H2O 0.1 g/L。

优化后生防菌株K11的生物量比对照提高6.5倍，生物量高达1.28×1010 CFU/mL，芽胞形成率在95%以上。

关键词：烟草赤星病；生物防治；枯草芽胞杆菌；培养基优化中图分类号：S572.08 文章编号：1007-5119（2014）03-0050-06 DOI：10.13496/j.issn.1007-5119.2014.03.011Abstract： Three strains were selected as the Bacillus agtagonists against tobacco brown spot disease from 93 strains stored in our lab， the strain K11 showed the highest percentage inhibition of radial growth （PIRG）. The PIRG was 63.64% by the dual culture while 67.44% in culture filtrate tests. According to the physiological and biochemical characteristics， the strain K11 was identified as Bacillus subtilis. Based on the single factor experiments and orthogonal experiments for K11， an optimum fermentation medium for biomass production in flasks composed of glucose 20.0 g/L，soybean meal 30.0 g/L， K2HPO43H2O 1.0 g/L， and MgSO47H2O 0.1 g/L. Under the optimum fermentation conditions， the highest biomass yield was 1.28×1010 CFU/mL， which was 6.5 times of the initial KMB medium， and the sporulation rate reached as much as 95%.Keywords： tobacco brown spot disease； biological control； Bacillus subtilis； medium optimization烟草是我国重要的农业经济作物。

烟草赤星病拮抗菌的筛选

关键词：赤星病；菌；拈抗发酵液中图分类号：７；３．￥６４５２４￥７文献标识码：Ａ文章编号：０６００（０１１— １００１０—６Ｘ２１）３００—２
ＳｒｅｉｇｏｔｇｎｓｃＢｃｅｉｍｏＡｌｒａｉｌｒａａ（ｒｓＫｅｓｌｒｃｅｎｎｆＡｎａｏｉｉａｔｒｔｕｔｔｎｒａｔｎｔＦｉ）ｉｓｅａｅｅｅ
ＨｕａｒｖｎｅｂｓｎｏｆｎｕｕｅｍｅｈｄｎｗｉｈｔｅＢ１ｓｏｅｈｓｏｇｓａｔｇｎｓｔｅａｉｎｎＰｏｉｃｙｕｉｇｃｎｏｔｃｈｒｔｏ，ｉｈｃｈｒｈｗｄｔｅｔｎｅｔｎａｏｉｍｏＡｌｍｒ７ｒｔａ
本试验从湖南省浏阳烟区中选择有健康烟株
的田块，摘其下部的健康烟叶，对采摘的烟叶采并
是一种发生在烟草生长中、后期的，害叶面部位危
的真菌病害，１９从８２年在美国首次报道以来，烟草赤星病危害日趋严重，已经成为烟叶生产上的主要
２．ＨｕｔｉＲａｌｎｄＴＶ（ｉｅｓｔａｌｚｉａｒｏＭｖｒｉｙ，Ｃｈａｇｈ０１，ＰＲｎｓａ４１２８
Ａｂｔａｔｇｔ－ｉｓｒｉｓｗｅｅｉｏａｅｎｅｅｔｄｆｏｔｅｈａｈｏａ，ｅｖｓｃｌｃｅｒｍｉｙｎｒａｏｓｒｃ：ＥｉｈｙｓｘｔｎｒｓｌｔｄａｄｓｌｃｅｍｈｅｈｙｔｂｃｏｌａｅｏｌｔｄｆｏＬｕａｇａｅｆａｒｃｅ

拮抗放线菌的分离筛选及鉴定的开题报告

拮抗放线菌的分离筛选及鉴定的开题报告
一、研究背景
放线菌具有广泛的生物学活性和药物应用价值，被广泛用于新药研发。

由于其群体性生长和菌株的多样性，在生物制剂生产和药物研发中
经常出现拮抗放线菌的影响。

因此，对放线菌进行抗性研究和拮抗放线
菌的分离、筛选及鉴定是非常必要的。

二、研究目的
本研究旨在从自然土壤中分离出拮抗放线菌菌株，通过筛选和鉴定，获得具有较高抗拮抗菌能力的菌株，并研究其抗放线菌的机制。

三、研究内容
1. 采集自然土壤样品进行微生物分离培养。

2. 将分离获得的菌株与多种放线菌进行拮抗实验，筛选具有较高拮
抗能力的菌株。

3. 对具有较高拮抗能力的菌株进行形态学和生理生化鉴定。

4. 研究拮抗菌株对放线菌的抗菌能力及抗菌机制。

5. 对拮抗菌株进行发酵培养及提取，进一步研究其抗菌成分。

四、研究意义
本研究首先可以从自然生态中寻找具有抗放线菌能力的拮抗放线菌
菌株，为生物制剂生产和药物研发提供新的菌株资源。

其次，可以探究
拮抗放线菌的抗菌机制，为进一步改良生物制剂的生产研发提供理论基础。

最后，研究拮抗放线菌的抗菌成分，可以为开发新型抗菌剂提供新
思路和研究路径。

烟草种质资源田间抗赤星病的鉴定试验

烟草种质资源田间抗赤星病的鉴定试验烟草是中国重要的经济作物之一，而赤星病是烟草上的常见病害之一。

为了提高烟草的产量和质量，保障烟草生产的顺利进行，必须进行对烟草种质资源田间抗赤星病的鉴定试验，以筛选出对赤星病具有抗病力的烟草种质资源。

一、试验目的本次试验的目的是对不同烟草种质资源在田间条件下的抗赤星病能力进行鉴定，为选育抗赤星病的烟草品种提供科学依据。

二、试验材料本次试验选取10个具有代表性的烟草种质资源，种质资源的选取应涵盖不同类型的烟草，以确保试验结果的代表性和可比性。

三、试验方法1. 地点选择：试验选择病菌量较高的烟草种植区域，以确保试验结果的可靠性。

2. 试验设计：采用随机区组设计，每个品种设立3个重复区块，每个区块面积为20平方米。

3. 播种和管理：在相同的土壤和气候条件下，使用相同的播种方法和管理措施，以消除其他因素对试验结果的影响。

4. 病害处理：在烟草生长期间，定期巡查病情，对生病的植株进行标记并记录病情的严重程度。

5. 数据收集：在烟草生长适当阶段，对各品种的抗病性状进行评价，包括病情发生率、病情严重度等。

6. 数据处理和分析：采用适当的统计方法对试验结果进行分析，评估各品种的抗赤星病能力。

四、试验结果根据试验结果的统计分析，对10个烟草品种的抗赤星病能力进行了评估。

结果显示，品种A、B和C表现出较强的抗病性，病情发生率和严重度均较低；而品种D、E和F的抗病性较差，病情发生率和严重度较高。

本次试验结果表明，品种A、B和C具有较强的抗赤星病能力，可作为烟草抗赤星病育种的优质材料。

而品种D、E和F的抗病性较差，需要进一步筛选或进行改良。

还需要对其他种质资源进行类似的田间鉴定试验，为选育抗赤星病的优质烟草品种提供更多的选择。

在今后的烟草育种工作中，将根据本次试验结果并结合其他相关数据，重点选育抗赤星病的烟草新品种，提高烟草的产量和质量，保障烟草生产的顺利进行。

也将不断开展相关试验，积累更多的数据，为烟草育种工作提供科学依据和技术支持。

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展丽然一张克诚冉隆贤２石义萍阿拉坦夫王万群．，，，，，
（．国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室．京１中北１０９；河北农业大学林学院，北保定００４２．河０１０）７０１
维普资讯
● ‘ Ｔ－ＡＲＧＴＲＥＢＩＵＬＵＡＢＲｌＩＳＨ ∞ ＯＥｉ－ＩＩＬ
华北农学报・０８．３增刊）２０２３２０２（：３ —３
Hale Waihona Puke 烟草赤星病菌拮抗放线菌的筛选与鉴定
２ＦｒｓｙＣｌｇ，ｓｃｌｒｌｎｖｒｔｏｅｅ，ａｄｎ０１０，ｈａ．ｏｅｒｏｅｅＡｒｕｕａＵｉｓｙｆｂｉＢｏｉｔｌｉｔｅｉＨｇ７０１Ｃｉ）ｎ
Ａｉｓｒｃ：ｔｔａｔＴｗｅｔｔｎｍｙｅｒｓｌｔｄｆｏｓｉｔｉｕｉｎｉｏａｉｎ，ｗｈｃｏｌｃｅｒｍｉｉｎｂｏｋ，ｎｙＡｃｉｏｃｓｗｅｅｉｏａｅｒｍｏｌｈｄｌｔｏｓｌｔｏｉｈｃｌｔｄｆｏＪｎｂａｒｏｅ
摘要：用稀释平板分离法从张家界金鞭溪采集的土样中分离到２采０株放线菌。以烟草赤星病菌为靶标菌进行筛
选，过平皿对峙培养的方法，通筛选出Ｓ１Ｓ６Ｓ１，－０４株抑菌效果明显的菌株（菌率 ≥５％）抑菌率分别为－，－，－６Ｓ２等抑０，
５．％，３４，１９，１４。进一步应用管碟法对菌株发酵液的代谢产物进行测定，果表明，株Ｓ２抑菌１７５．％５．％７．％结菌－０的圈直径为２．ｍ，菌带最宽，烟草赤星病菌的抑制作用最显著。为了加深对该菌株的了解，研究还对其形态６３ｍ抑对本
ａｅｗｅｅ５１、ｒｔｒ７％，３．５４％，１．５９％，１．７４％，ｄｔｅｈｅｍｅｔｔｎｌｕｄｏｔａｎｓｅｅｍｉｅｎａｈｎｔｅｆｒｎａｉｉｉｆｓｒｉｓＷａｄｔｒｎｄ，Ｔｅｒｓｌｏｑｈｅｕｔｓ
ＳｒｅｉｇａｄＩｅｔｆｃｔｏｆｔｅＡｎａｏｓｉｔｎｍｙｅｃｅｎｎｎｄｎｉｉａｉｎｏｈｔｇｎｔｃＡｃｉｏｃｓｉ
ＡｇｉｓｔｒａｉｔｒａａａｎｔＡｌｅｎｒａＡｌｅｎｔ
特征、养特征以及生理生化特性作了测定，步鉴定菌株Ｓ２培初－０为链霉菌属（ｔｐｍｃｐ．的球孢类群（／／Ｓｒｔｙｅｓｐ）ｅｏｓＧｏｓｂ．ｐｒ）ｏｕ。最后，菌谱试验表明，株Ｓ０不仅对烟草赤星病菌作用明显，其他病原真菌同样有抑制作用，菌ｓ抑菌－２对抑谱广。关键词：草赤星病菌；烟分离；筛选；定鉴中图分类号：４５７￥３．２文献标识码：Ａ文章编号：００— ０１２０）刊一２０— ４１０７９（０８增０３０
ＺａｇＪａｉ．ＡｎａｏｉｉｔｉｓｗｒｃｅｅｏｈｉａｔｉａｇｔｄａａｎｔＡｅｎｒｌｒａａ．Ｐｉｃｌｒｈｎｉｊｅｔｎｓｃｓａｎｅｅｓｒｎｄｆｒｔｅｂｏｃｉｔｔｒｅｉｓｈｒａｉａｔｎｔｇｔｒｅｖｙｅｇａｅａｒｕｔｅ — ｕｓｏｅ一，．，一ａｄＳ２ｅｅｓｒｅｅｈｃａｉｈｒｉｉｉｏａｅｉｉｉｏａｅ＞５％）ＩｅｉｈｂｔｎｈｗｄＳ１Ｓ６Ｓ１ｎ．０ｗｒｃｅｎｄｗｉｈｈｄｈｇｅｎｂｔｎｒｔ（ｎｂｔｎｒｔ６ｈｉｈｉ０．ｒｎｉｉｏ ’ ｈｉ