细胞生物学实验5 巨噬细胞吞噬现象的观察
巨噬细胞吞噬细胞功能实验
实验一巨噬细胞吞噬细胞功能实验原理：巨噬细胞具有活跃的吞噬功能，能清除体内抗原物质及变性的细胞，在特异性及非特异性免疫中均起重要作用。
巨噬细胞受抗原刺激后活化，可使其吞噬功能明显增强。
此次实验我们用体内法来介绍巨噬细胞的吞噬功能。
体内法：在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡红细胞，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷美兰染色，显微镜下计数吞噬鸡红细胞的百分数，及观察巨噬细胞内被杀死而染为紫色的鸡红细胞的形态、数目，以判断巨噬细胞的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。
方法：（1）试验前3天，小白鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
（2）实验时，每只小鼠腹腔注射鸡红细胞1ml，轻柔腹部，使鸡红细胞在腹腔中分布均匀，利于吞噬。
（3）30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用滴管取出腹腔液，均匀涂布于载玻片上，然后再滴一小滴0.06%冷美兰溶液，盖上盖玻片（4）高倍镜下进行观察，计数。
实验结果：100个巨噬细胞中已吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞的数目吞噬百分率 = ———————————————————×100%100个巨噬细胞100个已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞中鸡红细胞的数目吞噬指数 = ———————————————————×100%100个已经吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞结果分析：正常值吞噬百分率：62.77±1.38吞噬指数：1.058±0.049我们的实验结果偏低，原因可能是腹腔注射时没有完全注射到腹腔内，部分残留在腹腔壁上。
实验二沉淀反应（双向琼脂扩散实验）原理：双向琼脂扩散试验是定性实验。
将可溶性抗原与相应抗体与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内，两者均可扩散，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
如果不是相应的抗原与抗体，就不出现沉淀线。
本试验常用于分析抗原抗体的纯度及相互关系。
方法：（1）将熔化的1%琼脂加在玻片上，3ml/板。
细胞吞噬活动的观察报告
细胞吞噬活动的观察报告引言细胞吞噬活动是细胞内的一种重要的生物学过程，主要通过细胞膜的内突形成吞噬体，将外界的固体颗粒或液滴包裹并将其内吞到胞质内。
细胞吞噬活动对于生物体的免疫防御和废物的排泄具有重要作用。
本次观察报告旨在通过显微镜观察细胞吞噬活动的过程，并进一步了解细胞吞噬的机制。
材料与方法实验材料1. 细胞样本（例如白细胞、巨噬细胞等）2. 荧光染料（例如荧光标记的微球）3. 显微镜和相关阳光器材4. 细胞培养基实验方法1. 将细胞样本转移到细胞培养基的一片培养皿中。
2. 取适量的荧光染料溶液，加入细胞培养基中，与细胞样本一同培养。
3. 使用显微镜观察细胞吞噬活动的过程，通过拍摄照片或录制实验视频记录下来。
实验结果观察过程中，我们发现细胞吞噬活动呈现出以下几个阶段：1. 识别阶段：细胞通过感知周围环境，活动自如地游动，并能迅速对潜在被吞噬物体进行识别。
我们观察到细胞在培养皿中自由移动，在接触到荧光标记的微球时，能够迅速转向并靠近微球。
2. 吞噬体形成阶段：当细胞接近微球时，细胞膜会突起形成一个或多个吞噬杯，将微球包裹其中，并与其他细胞膜结合形成一个完整的吞噬体。
我们观察到细胞膜突起形成吞噬杯的过程，最终形成一个完整的吞噬体。
3. 吞噬体的内吞和消化阶段：吞噬体会进一步收缩和内吞，将被包裹的微球引入细胞质内，并在胞质中进行消化分解。
我们观察到吞噬体逐渐收缩，微球被完全引入细胞质内，并通过显微镜观察到微球逐渐失去荧光信号，进入消化分解过程。
讨论与结论通过观察细胞吞噬活动的过程，我们可以看到细胞吞噬活动是一种高度有序的过程，其中涉及到多个细胞器和分子的协同作用。
细胞在识别阶段通过感知外界环境和目标物体的特征，迅速靠近并形成吞噬体；在吞噬体的内吞和消化阶段，细胞通过调控吞噬体的收缩和内吞过程，将目标物体引入细胞质内进行消化分解。
细胞生物学实验报告(9)
细胞生物学实验报告
实验十实验名称巨噬细胞吞噬现象的观察
1.在高倍镜下绘出在不同吞噬阶段的巨噬细胞图各一个(如鸡血红细胞附于巨噬细胞表面、部分吞入鸡血红细胞、吞入形成吞噬泡已开始被消化分解等)，示吞噬作用的过程。
2.实验前一天，给小白鼠腹腔注射含台盼蓝淀粉肉汤的目的是什么?
（1）小鼠腹腔注射含台盼蓝的淀粉肉汤液，可诱导巨噬细胞大量产生，增强巨噬细胞吞噬活性。
（2）在吞噬过程中，细胞吞噬淀粉时，会吞一些台盼蓝进去，而台盼蓝会使巨噬细胞染上一定的颜色。
3.巨噬细胞内有哪几种结构对执行复杂的吞噬功能最为重要?
具有流动性的细胞膜，胞质含有大量初级溶酶体、次级溶酶体、吞噬小泡和吞噬小体，此外还有较发达的高尔基复合体、少量线粒体和粗面内质网等。
实验八巨噬细胞吞噬现象的观察
实验八巨噬细胞吞噬现象的观察
一、实验原理
巨噬细胞由骨髓干细胞分化生成，然后进入血液到达各组织内，并进一步分化为各种巨噬细胞，当病原微生物或其它异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又有趋化性，能响应招引因子的招引，产生活跃的变形运动，主动向病原体和异物移行，在接触到病原体和异物时，即伸出伪足，将之包围并内吞入胞质，形成吞噬体，继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合，形成吞噬性溶酶体，通过其中水解酶等作用下，将病原体杀死，消化分解，最后将不能消化的残渣排了出细胞外。
台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。
如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。
此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。
二、实验步骤
1．在小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤（含台盼蓝）1ml。
2．24h后注射1%鸡红细胞悬液1ml，轻按腹部使分散。
3．20分钟后脱颈骨处死小鼠。
4．开腹取腹腔液（慎防小鼠血污染）。
5．腹腔液滴于载玻片上，盖上盖玻片。
6．显微镜观察吞噬现象。
三、实验结果
四．结果讨论。
实验五巨噬细胞吞噬现象的观察
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
（4）6%淀粉肉汤（含台盼蓝染液）
牛肉膏
0.3g
蛋白胨
1.0g
氯化钠
0.5g
蒸馏水
100ml
加热后加入可溶性淀粉6.0克，促使溶解，再煮 沸灭菌，置4℃冰箱保存。用时水浴融化，加入适量台
盼蓝染液混匀，使呈蓝色。
实验步骤
1、在实验前一天，给小白鼠腹腔注射6%的淀粉肉汤 （含台盼蓝）1ml。 2、实验时，取一只注射过淀粉肉汤的小白鼠，腹腔注 射1%的鸡红细胞悬液1ml，轻按小白鼠腹部，使悬液 分散。 3、20min后，用颈椎脱臼法处死小白鼠（用右手抓住 鼠尾，左手拿一把剪刀或镊子按住颈椎，右手用力向 后拉即可）。
抽取静脉血
试剂
3.试剂：
（1）0.85%生理盐水
（2）Alsever溶液：
葡萄糖
2.05g
柠檬酸钠
0.89g
柠檬酸
0.05g
氯化钠
0.42g
蒸馏水
100ml
调PH值至7.2，过滤灭菌或高压灭菌10min，置 4℃冰箱保存。
（3）0.4%台盼蓝(trypan blue)染液
台盼蓝染粉 0.4g
0.85%生理盐水 100ml
徒手抓小白鼠
给小白鼠腹腔注射给药
给小白鼠腹腔注射给药
实验步骤
4、将小白鼠置于解剖盘中，把腹部剪开一小口子，把 内脏推向一侧，用吸管吸取适量的生理盐水冲洗腹腔 ，并吸取腹腔液，吸时一吸一松，以免把内脏吸出。 5、每人取一张干净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻 片，置显微镜下观察。 6、每人取一张干净载玻片，滴一滴没有注射淀粉肉汤 的腹腔液，盖上盖玻片，置显微镜下观察。
细胞生物学实验文档
实验小鼠巨噬细胞吞噬的观察一、实验目的：通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的实验，了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功能。
了解吞噬在机体非特异免疫中的重要作用。
二、实验原理：高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞，具有吞噬的功能。
它们广泛分布在组织和血液中，在机体的非特异免疫功能中起着重要的作用。
当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又具有趋化性，它通过产生活跃的变形运动，主动向病原体和异物移行聚集，首先把异物吸附在细胞表面，随之，吸附区域的细胞膜向内凹陷，伸出伪足包围异物，并吞入胞质，形成吞噬泡，继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合，形成吞噬溶酶体，把病原体杀死，异物消化分解。
三、实验仪器、材料和试剂（1）仪器、用具：显微镜、、解剖盘、注射器、吸管、载玻片、盖玻片。
（2）材料：小鼠（体重20g左右），鸡血。
（3）试剂：6%淀粉肉汤（含0.3%台盼蓝）。
四、方法与步骤（1）实验前24h，每天给小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤（含台盼蓝）1ml。
（2）实验时，再往腹腔内注射1ml1%鸡红细胞悬液，并轻柔腹部，使鸡红细胞悬液分散。
（3）20-30min后，用脊椎脱臼法处死小鼠（右手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指与食指同时按住鼠头，使脊髓与脑髓间断开致死）。
（4）迅速剖开腹腔，用未装针头的注射器或吸管吸取腹腔液。
（5）取一张干净的载玻片，滴一滴腹腔液，制成血涂片，盖上盖玻片，显微镜下检查。
四、作业：绘图示出所观察到的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的各种形态。
实验糖类的细胞化学——PAS反应——过碘酸席夫反应（PAS）显示糖原等多糖物质一、实验目的：掌握细胞中糖类物质的鉴别方法，了解糖类物质在细胞中的分布和形态。
二、实验原理：在石蜡切片中，低分子糖和单糖、双糖已在固定和脱水过程中消散，因此在石蜡切片中只含有高分子的糖和糖原、粘多糖、粘蛋白、糖蛋白等。
高聚物质有自由的醛根，所以不能直接采用醛基反应鉴定，糖中的醛基必须在某些氧化剂和水解剂的作用下才能露出。
吞噬现象观察实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。
2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，加深对吞噬作用机制的理解。
二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞，能够识别、吞噬并消化各种抗原物质，如细菌、病毒、细胞碎片等。
在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，了解吞噬作用的过程和机制。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：清洁级雄性小鼠（体重20-25g）。
2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。
3. 实验仪器：超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 麻醉小鼠，打开腹腔，收集腹腔巨噬细胞。
2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次，制成细胞悬液。
3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合，置于37℃水浴中温育30分钟。
4. 取出混合液，用台盼蓝染色液染色，置于显微镜下观察。
5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。
五、实验结果在显微镜下观察到，巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。
具体表现为：1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞，表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。
2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变。
3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。
六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，这与巨噬细胞的免疫功能相一致。
2. 吞噬过程中，巨噬细胞表面出现鸡红细胞，说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。
3. 吞噬后，巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变，说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。
4. 吞噬鸡红细胞过程中，部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化，说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。
七、实验结论通过本实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，加深了对吞噬作用机制的理解。
实验结果表明，巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用，具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。
吞噬观察_实验报告
一、实验目的1. 通过观察巨噬细胞吞噬异物的过程，了解巨噬细胞在免疫应答中的作用。
2. 掌握细胞培养、制片和显微镜观察等基本实验技能。
二、实验原理巨噬细胞是免疫系统中重要的免疫细胞，具有吞噬、消化和呈递抗原等免疫功能。
在非特异性免疫中，巨噬细胞能够吞噬异物，从而清除体内的病原体和有害物质。
本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验，了解巨噬细胞吞噬作用的过程。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：昆明种小鼠2. 试剂：生理盐水、鸡红细胞、Hank's液、中性红染料、PBS缓冲液3. 仪器：显微镜、细胞培养箱、离心机、移液器、培养皿、吸管、剪刀、镊子、刀片等四、实验步骤1. 实验动物处理：取昆明种小鼠，处死并解剖，收集腹腔巨噬细胞。
2. 巨噬细胞培养：将收集的巨噬细胞用Hank's液洗涤，制成细胞悬液，接种于培养皿中，置于细胞培养箱中培养。
3. 制片：将培养好的巨噬细胞用生理盐水洗涤，加入中性红染料染色，制片。
4. 观察与记录：在显微镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程，记录吞噬现象。
五、实验结果与分析1. 巨噬细胞形态：在显微镜下观察，巨噬细胞呈圆形或椭圆形，细胞核较大，细胞质丰富，含有吞噬体。
2. 吞噬现象：在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程，吞噬现象如下：（1）巨噬细胞与鸡红细胞接触，巨噬细胞表面出现皱褶，逐渐包裹鸡红细胞。
（2）巨噬细胞将鸡红细胞包裹在内，形成吞噬体。
（3）吞噬体逐渐向细胞内部移动，吞噬体逐渐增大。
（4）吞噬体最终与溶酶体融合，消化鸡红细胞。
六、实验讨论1. 巨噬细胞在免疫应答中的作用：巨噬细胞是免疫系统中重要的免疫细胞，具有吞噬、消化和呈递抗原等免疫功能。
在本实验中，巨噬细胞能够吞噬鸡红细胞，说明巨噬细胞在非特异性免疫中具有清除体内病原体和有害物质的作用。
2. 吞噬作用的过程：巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程包括接触、包裹、形成吞噬体、移动、消化等步骤。
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实验5 巨噬细胞吞噬现象的观察
〔实验目的〕
1、通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察，加深理解细胞吞噬作用的过程及
意义
2、掌握小鼠腹腔注射给药和脊柱脱臼处死的方法
〔实验原理〕
巨噬细胞由骨髓干细胞分化而来，然后进入血液到达各组织，并进一步分化成为巨噬细胞。
当病原体或其他异物进入机体时，能招引巨噬细胞。
巨噬细胞具有趋化性，能响应招引因子的招引，产生活跃的变形运动向异物或病原体移行，在接触到病原体或异物时即伸出伪足，将之包围并吞入胞内，形成吞噬泡，既而细胞中的溶酶体与吞噬泡融合，形成吞噬溶酶体，通过水解酶的作用将病原体杀死消化，最后将不能消化的残留物排除细胞外。
〔试剂材料〕
1、器材：解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、注射器、吸管、吸水纸
2、试剂：
（1）0.85%生理盐水
（2）Alverse溶液：葡萄糖2.05g，柠檬酸钠（NaC6H5O7.2H2O）0.89g, 柠檬酸（C6H6O7. H2O）
0.05g, 氯化钠0.42g，蒸馏水100ml。
pH值调至7.2，过滤或高压灭菌，4℃
保存
（3）4%台盼蓝染液：台盼蓝粉末0.4g，0.85%生理盐水100ml，4.6%淀粉肉汤（牛肉膏
0.3g，蛋白胨1.0g，氯化钠0.5g，蒸馏水100ml，加热后加入可溶性淀粉6g，使其
溶解，煮沸灭菌，4℃保存。
用时加热融化，加入适量台盼蓝染液）
3、材料：
（1）小白鼠
（2）1%鸡红细胞
〔内容方法〕
一、腹腔巨噬细胞的吞噬
1、实验前二天，每天向小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤（含台盼蓝，起标记作用）1ml以刺激腹腔产生较多的巨噬细胞。
2、实验时，每组取一只上述处理的小鼠，腹腔注射1%鸡血悬液0.5~1ml，注射后轻揉小鼠腹部以使红细胞悬液分散均匀。
3、20分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠，迅速剖开小鼠腹部，向腹腔部注射0.5~1ml生理盐水，用吸管轻轻使生理盐水与腹腔液混匀。
4、用吸管抽取腹腔液，涂片，自然干燥。
5、甲醛固定10min。
6、染色：自然干燥后用Giemsa染液染色10in，蒸馏水轻轻冲洗后干燥。
注意染色后勿倾
去染液再冲洗，应直接冲洗，以免染液中细小颗粒附着于标本。
7、镜检。
操作程序
向小鼠腹腔注射淀粉肉汤（含台盼兰）1ml
24小时
再次注射前液 1ml
24小时
向小白鼠腹腔注射1%鸡血悬液 0.5~1ml
20分钟
处死小白鼠，剖开腹腔
向腹腔内加入生理盐水0.5~1ml，混匀吸取腹腔液，滴片
镜检
二、皮下组织中巨噬细胞的观察
1、活体注射，皮下或肌肉台盼蓝溶液（0.5%台盼蓝水溶液），2-3ml/kg，每天注射1次，注射1周，耳朵变蓝后使用
2、取皮下组织，自然干燥
3、甲醛-乙醇固定液固定5min
4、水洗3min
5、盖片观察
〔实验结果〕
在高倍镜下可见有许多较大的圆形和形状不规则的巨噬细胞，因未染色细胞核不易见到，其胞质中含有数量不等的兰色圆形小颗粒（即吞入的含台盼兰的淀粉肉汤所形成）；还可见少量黄色椭圆形有明显细胞核的鸡红细胞，慢慢移动玻片标本，仔细观察视野中的巨噬细胞表面，有的红细胞已部分被吞入；有的巨噬细胞内已吞入了一个或多个红细胞形成吞噬泡，思考一下巨噬细胞将如何进一步处理被吞噬的红细胞？
〔实验作业〕
1、绘图说明巨噬细胞吞噬过程
2、计算吞噬指数和吞噬百分率
注意事项：注射的鸡红细胞在鼠腹中的时间要控制好，时间过短红细胞未被吞噬，时间过长被消化，影响观察。