生物技术---免疫学技术
临床实验室中常见的检验科学技术
临床实验室中常见的检验科学技术在临床实验室中，常见的检验科学技术包括但不限于：
一、免疫学技术
免疫学技术在临床实验室中的应用非常广泛，可以用于检测抗体、
抗原、免疫球蛋白等的含量和种类。
常见的免疫学技术包括酶联免疫
吸附实验（ELISA）、免疫荧光技术、凝集试验等，这些技术可以用于诊断感染性疾病、自身免疫疾病、肿瘤等疾病。
二、生化学技术
生化学技术主要用于检测体液中的生化指标，如血糖、肾功能、肝
功能、血脂等。
常见的生化学技术包括比色法、荧光法、电化学法等，这些技术可以反映机体内的物质代谢情况，对于疾病的诊断和治疗具
有重要意义。
三、核酸检测技术
核酸检测技术广泛应用于病原体的检测，如病毒、细菌、真菌等。
PCR技术是其中最常见的方法之一，可以对微生物的核酸进行扩增和
检测，具有高度的特异性和敏感性。
四、细胞学技术
细胞学技术主要用于检测细胞形态学及数量学特征，如血液细胞分类、细胞核形态、染色体核型等。
常见的细胞学技术包括涂片染色、
流式细胞术、显微镜观察等，可以帮助医生进行疾病的诊断和治疗。
五、微生物学技术
微生物学技术主要用于检测致病微生物的种类和数量，如细菌培养、抗生素敏感试验、真菌培养等。
这些技术可以帮助医生确定感染的致
病菌种类，从而选择合适的治疗方案。
综上所述，临床实验室中常见的检验科学技术包括免疫学技术、生
化学技术、核酸检测技术、细胞学技术和微生物学技术等，这些技术
在临床诊断和治疗中起着至关重要的作用，有助于提高医疗水平，保
障患者的健康。
生物技术专业“免疫学”教学改革与实践
ｉ ｎ ｃ ｌ ｕ ｄ ｅ ｆ ｏ ｃ ｕ ｓ ｎ ｇ ｏ ｎ ｍａ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｌ ｓ ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ， ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｉ ｎ ｇ ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｅ ｓ ｔ ｏ ｆ ｓ ｔ ｕ ｄ ｅ ｎ ｔ ｓ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， ａ ｄ ｊ ｕ ｓ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｔ ｅ ａ ｃ ｈ ｉ ｎ ｇ
Ａｐｒ ． ２ ０１ ３
、 ， ０ １ ． ３ Ｏ Ｎ Ｏ． ２
生物 技术专业 “ 免疫学＂教学改革与实践
朱艳平 ，
（ 新 乡学院 ａ ． 生命科 学与 技 术 系；ｂ ． 多肽生物 技 术研 究 中心 ，河南 新 乡 ４ ５ ３ ０ ０ ３）
摘
要 ：对 生物 技 术专 业免 疫 学课 程教 学 多个环 节进 行 改革 和 实践 ， 包括 注 重教材 选择 、培 养学 生兴趣 、
（ ａ ． Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｌ ｉ ｆ ｅ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ａ ｎ ｄ Ｔｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ； ｂ． Ｐｏ ｌ ｙ ｐ ｅ ｐ ｔ ｉ ｄ ｅ Ｂｉ ｏ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｃｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ， Ｘｉ ｎ ｘ ｉ ａ ｎ ｇ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｘｉ ｎ ｘ ｉ ａ ｎ ｇ ４ ５ ３ ０ ０ ３ ， Ｃｈ ｉ ｎ ａ ）
ｉ ｎｎｏ ｖａ ｔ ｉ ｎｇ ｔ ｅａ ｃ ｈｉ ｎ ｇ ｍｏ ｄｅ ｌ ｓ ．
Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ： ｉ ｍ ｍｕ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ； ｔ ｅ ａ ｃ ｈ ｉ ｎ ｇ ｒ ｅ ｆ ｏ ｒ ｍ ａ ｎ ｄ ｐ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｃ ｅ ； ｂ ｉ ｏ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｐ ｒ ｏ ｆ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ ｓ
医学免疫学实验技术
医学免疫学实验技术医学免疫学实验技术是研究和应用免疫学原理和方法的一门学科。
它主要通过实验手段来观察和分析生物体对外界抗原的免疫反应，从而揭示机体的免疫机制和疾病发生发展的规律。
本文将从实验技术的基本原理、常用实验方法和应用领域等方面进行介绍。
一、实验技术的基本原理免疫学实验技术的基本原理是利用生物体对抗原的特异性免疫反应来检测、分离和定量抗原或抗体。
根据抗原和抗体的相互作用原理，可以通过免疫沉淀、电泳、免疫荧光、酶联免疫吸附等方法来分离和检测抗原或抗体。
同时，还可以利用免疫反应的特异性和高度敏感性来检测和定量微量物质。
二、常用实验方法1. 免疫沉淀法：该方法利用抗原与抗体的特异性结合，将抗原-抗体复合物与载体（如蛋白A、蛋白G等）结合，经过离心沉淀后，可以分离出抗原和抗体。
2. 免疫电泳法：该方法将待测样品经过电泳分离后，利用抗体与目标抗原的结合，形成免疫沉淀带。
通过电泳分离的方式，可以实现对不同抗原的检测和分离。
3. 免疫荧光法：该方法利用荧光标记的抗体与待测样品中的抗原结合，通过荧光显微镜观察荧光信号的强弱来检测抗原的存在和定量。
4. 酶联免疫吸附法：该方法利用酶标记的抗体与待测样品中的抗原结合，通过酶的催化作用，将底物转化为可见的产物，从而实现对抗原的检测和定量。
三、应用领域医学免疫学实验技术在临床诊断、疾病预防和药物研发等领域具有广泛的应用价值。
1. 临床诊断：免疫学实验技术可以用于检测和诊断各类感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等。
例如，通过检测患者体液中的特定抗体或抗原，可以判断患者是否感染了某种病原体或患有某种疾病。
2. 疾病预防：免疫学实验技术可以用于疫苗的研制和评价。
通过检测疫苗接种后患者体内产生的特定抗体水平，可以评估疫苗的免疫效果，并为疫苗的改良和研发提供依据。
3. 药物研发：免疫学实验技术可以用于药物的研发和评价。
通过检测药物对免疫反应的影响，可以评估药物的免疫调节作用和毒副作用，为药物研发提供参考。
免疫学技术及其在生物学中的应用前景
免疫学技术及其在生物学中的应用前景随着技术的不断发展，免疫学技术也不断得到了完善。
作为一门跨学科的科学，免疫学技术已经成为许多领域的重要工具。
它不仅可以广泛应用于医学领域，还可以在生物学，生物工程学，农业领域等方面得到应用。
免疫学技术是指基于免疫学原理开发的一系列技术，包括免疫荧光染色、ELISA技术、流式细胞术等。
这些技术基于抗体和抗原的特异性结合，可以检测和鉴定复杂的分子和细胞，从而广泛应用于疾病诊断、药物开发、病原体检测等临床和研究领域。
在疾病诊断方面，免疫学技术可以迅速检测出某些病原体或疾病标志物，包括传染病、肿瘤等。
例如，ELISA技术可以检测出HIV、乙肝、结核等疾病的存在，有助于及早发现患者的感染情况，采取合适的治疗措施。
在药物开发领域，免疫学技术也是不可缺少的工具。
药物研究人员可以利用免疫学技术检测药物的作用和效果，帮助筛选和研发具有治疗性的分子。
例如，流式细胞术可以评估药物治疗后对细胞的影响，有助于判断药物治疗效果的好坏。
免疫学技术在基因组学、蛋白质组学等生物学领域也得到了广泛应用。
例如，我们可以利用免疫染色技术检测蛋白质在细胞内的分布和定位。
同时，免疫学技术还可以在蛋白质组学方面进行鉴定和分离，有助于深入研究蛋白质功能以及生命活动的本质。
未来，免疫学技术将继续在各个领域得到应用。
例如，在植物保护中，我们可以利用免疫学技术检测植物的抗病性，有助于筛选高抗性的品种。
在食品工业方面，免疫学技术可以检测食品污染，确保食品的安全性和卫生性。
在环境保护领域，免疫学技术也可以应用于污染物的监测和分析，有助于提高环境质量，保障人类健康。
总的来说，免疫学技术已经成为现代生物学研究和临床诊断的重要工具。
在未来的发展中，不断推动免疫学技术的创新和改进，将会更好地服务于人类健康和生物学研究的发展。
免疫技术知识点总结
免疫技术知识点总结引言：免疫技术是指应用免疫学原理和方法对生物体内外的疾病相关分子、病原微生物、肿瘤细胞和其他异常细胞进行检测、诊断和治疗的技术。
免疫技术包括多种方法和技术，如免疫印迹、免疫沉淀、酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光、免疫细胞化学染色、流式细胞术、免疫透射电子显微镜、膜免疫印迹、免疫电泳、免疫印迹染色、免疫转印、免疫荧光显微镜、免疫标记、无标记免疫法等等。
免疫技术的发展历程：免疫技术的发展历程可以追溯到19世纪末20世纪初。
1890年，德国科学家Kitasato Shibasaburo和Emil von Behring最早使用动物血清来治疗白喉，这被认为是免疫治疗的开端。
20世纪初，Landsteiner和戈德斯坦因此做出血型系统。
20世纪50年代，Burnet和Medawar提出了免疫记忆理论。
20世纪60年代末出现了单克隆抗体技术，并且引起了广泛的关注。
后来，蛋白质重组技术的发展，进一步推动了单克隆抗体技术的迅速发展。
20世纪80年代，Shinefield对麻疹病毒进行了初步研究，发展了麻疹免疫法。
21世纪初，Barris等人发现了免疫癌症治疗领域的新靶点。
免疫技术在免疫诊断、治疗、监测和预防传染病等方面发挥着重要作用，受到了广泛的关注和应用。
免疫技术的类型：免疫技术包括两大类，一类是体内免疫技术，一类是体外免疫技术。
1.体内免疫技术：体内免疫技术是指利用生物体自身的免疫系统去检测和治疗疾病。
这种免疫技术包括疫苗接种、免疫刺激药物治疗和免疫调节治疗等。
疫苗接种是指给生物体注射或口服疫苗，以引起机体的免疫应答，从而防御相应的病原微生物。
免疫刺激药物治疗是指利用免疫刺激药物来调节机体的免疫系统，促使机体产生更强的免疫反应，从而治疗疾病。
免疫调节治疗是指利用免疫调节药物来调节机体的免疫系统，抑制免疫反应，从而治疗疾病。
2.体外免疫技术：体外免疫技术是指将生物体内的细胞或液体移出体外，然后进行相应的免疫实验，从而检测疾病或治疗疾病。
生物医学领域的免疫学技术
生物医学领域的免疫学技术随着科技的进步，生物医学领域的研究也得到了飞速的发展。
其中，免疫学技术在疾病的预防、诊断和治疗等方面扮演着重要角色。
免疫学技术是通过研究人体免疫系统的功能及其反应产生的方法。
在医学中，免疫学技术广泛应用于制备和使用抗体、免疫细胞以及其他免疫相关物质，从而加强机体对细菌和病毒的免疫力。
免疫学技术中最为常见的技术之一是ELISA。
ELISA（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay）是通过检测特定抗体和抗原反应实现的诊断技术。
通过将抗体固定在一个平面的材料上，然后加入具有特定蛋白质的样本，如果样本中存在与抗体特异结合的蛋白质，则发生反应，并通过辅助试剂（包括荧光素、辣根过氧化酶等）来检测化学反应的信号。
ELISA广泛应用于检测各种由感染性疾病引起的抗体，同时也用于诊断免疫和非免疫血清学变化如自身免疫疾病、肿瘤、急慢性感染等。
除了ELISA技术，Immunofluorescence技术也在生物医学领域得到广泛应用。
Immunofluorescence技术是一种通过荧光探测器来检测免疫标记的技术。
它基于已知的抗原-抗体反应，在荧光技术的辅助下，使得抗体或特定抗原在细胞或组织内具有明显的荧光标记。
该技术已经在许多不同的免疫疾病的诊断和治疗领域中得到广泛应用，例如自身免疫疾病、肿瘤、传染性疾病等等。
在免疫学技术领域，流式细胞术也是一个非常重要的技术。
流式细胞术是一种能够检测和分离单个细胞的工具。
它使用一种称为荧光素的技术将单个细胞标记成不同颜色，以便在混合物中进行分类和分析。
因为它可以捕获复杂的免疫差异性，因此流式细胞术在研究免疫系统的疾病和对治疗反应的检测方面提供了重要的信息。
最后一种被广泛应用的免疫学技术是Western blotting。
Western blotting是一种能够检测，定量和分离特定蛋白的免疫学技术。
这项技术需要特定的抗体和蛋白耦合，然后通过电泳和转移到沉积膜上进行检测。
免疫学中的新技术及其应用
免疫学中的新技术及其应用免疫学是生命科学中重要的一门学科，探究维持机体免疫平衡的机理，是预防和治疗疾病的基础。
近年来，随着生物技术的进步，免疫学研究发生了很大变革，新技术层出不穷，极大地推动了免疫学的发展和应用。
本文将对免疫学中的新技术及其应用进行介绍和探讨。
一、单细胞技术单细胞技术是指针对单个细胞进行研究和分析的一系列技术。
在免疫学研究中，单细胞技术可以高精度地筛查体液中的少量免疫细胞亚群，发现并分析其生物学特性。
具体包括：1.流式细胞术（FACS）FACS是一种利用特定抗体分离细胞的技术。
通过标记特定蛋白，可以分离出具有特定表型的细胞，并通过检测细胞的荧光信号等方法，实现具体免疫细胞亚群的鉴定和分离。
2.单细胞转录组测序技术（scRNA-seq）scRNA-seq是一种单细胞基因表达分析技术。
将单个细胞分离出来，进行RNA的提取和扩增，然后通过测序技术，分析每个单个细胞的基因表达谱。
这样可以对单个免疫细胞的转录组进行深入研究，从而发现新的免疫细胞次群和不同状态下的转录组变化。
3.单细胞蛋白质组测序技术（CyTOF）CyTOF是一种单细胞蛋白质组分析技术。
通过标记特定抗体，能够同时检测单个细胞中大量的蛋白质，并进行其精确的鉴定和定量。
这种方法可以对单个免疫细胞的表型和功能进行更为深入的研究。
二、免疫组化技术免疫组化技术是指通过特异性抗体标记需要检测的免疫细胞或者分子，利用这些标记分子的颜色或者光信号，进行显微镜下的定位和分析。
在免疫学研究中，免疫组化技术被广泛应用到疾病诊断和治疗策略的制定中，并作为新兴的高通量筛查方法。
1.多重荧光染色和成像技术通过将不同颜色的荧光抗体标记不同的抗原，将样品进行多重荧光染色，从而可以同时检测多个目标分子在单个细胞或组织中的分布。
随着成像技术的进步，这种技术已经在神经科学和免疫学等学科中得到了广泛应用。
2.原位杂交技术（ISH）ISH是一种检测基因表达的技术，可以研究不同细胞中基因的表达情况。
11.免疫学技术概论
第十一章免疫学技术概论免疫学技术是指利用免疫反应的特异性原理，建立各种检测与分析技术，以及建立这些技术的各种制备主意。
免疫学技术包括：①免疫血清学技术：用于检测抗原或抗体的体外免疫反应技术，或称免疫检测技术②细胞免疫技术：用于分析研究机体细胞免疫功能与状态的免疫学技术③免疫制备技术：用于建立免疫检测主意的技术第 1 节免疫血清学技术抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性结合反应，因抗体主要来自血清，因此在体外举行的抗原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术。
一、免疫血清学反应的基本原理抗原与抗体的特异性结合，主要是基于抗原与抗体分子结构及立体构型的互补，以及由多种因素造成的两者在分子间引力参加下发生的可逆性免疫化学反应。
1.抗原抗体的结合力①库仑引力/静电引力：是抗原与抗体带有相反电荷的氨基与羧基之间互相吸引的力。
其大小与两个电荷间距离的平方呈反比。
②范德华引力：是原子与原子、分子与分子互相临近时分子极化作用产生的一种吸引力，引力大小与分子空间构象的互补性有关。
③氢键作用：是供氢体上的氢原子和受氢体原子间的引力。
④疏水作用：在水溶液中两个疏水基团互相接触，因为对水分子的排斥而趋向聚拢的力。
疏水作使劲在抗原抗体结合力中作用最强。
2.抗原抗体的亲和力与亲合力①亲和力(affinity)：指抗体的抗原结合位点与相应的抗原决定簇之间的结合强度，它是抗原抗体间固有的结合力。
亲和力可用平衡常数K表示：K＝K1/K2 （K1为结合常数，K2为解离常数）②亲合力(avidity)：指一个抗体分子与囫囵抗原表位之间结合的强度，与抗体结第 1 页/共7 页合价直接相关。
亲合力表现为多价优势。
3.抗原抗体的胶体特性及亲水性转化为疏水性①胶体特性：抗体和大多数抗原同属蛋白质，在通常的反应条件下均带有负电荷，使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体。
②亲水性改变：抗原抗体结合使表面电荷减少，水化层变薄，失去亲水性能，抗原抗体复合物由亲水胶体转化为疏水胶体。
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作业标准记得牢，驾轻就熟除烦恼。 2020年 10月1 9日星 期一9 时38分4 4秒21 :38:4 419 October 2020
好的事情马上就会到来，一切都是最 好的安 排。下 午9时3 8分44 秒下午 9时38 分21:3 8:442 0.10. 19
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法律规定
《食品卫生法》 《食品添加剂卫生管理办法》（GB2760） 《动物性食品中兽药残留最高限量》（农业部公告第235号，
2002年12月24日）规定：禁用药物，动物性食品中不得检出： 瘦肉精、沙丁胺醇、西马特罗等31种 违法者的法律责任：民事赔偿、行政处罚、刑事处罚
盐酸克伦特罗残留检测方法
牢记安全之责，善谋安全之策，力务 安全之 实。20 20年1 0月19 日星期 一9时3 8分44 秒Mon day, October 19, 2020
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谢谢大家！
从包装铝箔袋中取出检测卡平放。吸取3滴 （约100ul）混匀溶液加入到试剂板加样孔中
5
6
样液滴入加样孔后开始计时，5～10分钟左右判定结果
7
树立质量法制观念、提高全员质量意 识。20 .10.19 20.10 .19Mo nday, October 19, 2020
人生得意须尽欢，莫使金樽空对月。 21:38: 4421: 38:44 21:38 10/19 /2020 9:38:44 PM
第三章
免疫学技术
基本概念 抗原的制备：颗粒抗原、半抗原、人工抗原 抗体的制备：多克隆抗体、单克隆抗体、基因工程抗体
免疫学技术--抗原抗体反应
可对抗原或抗体进 行定性、定量ห้องสมุดไป่ตู้定 位的检测
抗体抗原以非共价 键结合
不可见反应：几秒几分钟 可见反应：数分钟 （小时、日）
影响因素 电解质 温度 酸碱度
盐酸克伦特罗快速检测试剂板的中央膜面上固定有两条隐形线，克 伦特罗抗原固定在测试区作为检测线（T线），二抗固定在质控区 作为对照线（C线）。
当待检样品溶液滴入试剂板加样孔后，样品溶液因层析作用往上扩 散。如果样品溶液含有相应药物的残留，药物将和胶体金颗粒上的 抗体先行反应，因此当胶体金颗粒随样品溶液扩散至T线时，胶体 金颗粒上抗体活性位点将因被样品溶液中的药物占据而无法与T线 上药物抗原结合；所以当样品中盐酸克伦特罗含量1ppb(检测限) 以上时，试剂板上的T线将较C线显色淡或甚至无显色，判定为阳 性。反之，当样品中盐酸克伦特罗含量在1ppb以下或无残留时， 试剂板上的T线显色与C线相近或偏深，判定为阴性
踏实肯干，努力奋斗。2020年10月1 9日下 午9时3 8分20. 10.19 20.10 .19
追求至善凭技术开拓市场，凭管理增 创效益 ，凭服 务树立 形象。 2020年 10月1 9日星 期一下 午9时3 8分44 秒21:3 8:442 0.10. 19
严格把控质量关，让生产更加有保障 。2020 年10 月下午9 时38 分20.10 .1921 :38Oc tober 19, 2020
BAS用于检测的基本方法： BAB法或BRAB法 BA法 ABC法
酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay）
酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay）
均相酶免疫测定法 无需“固定在载体 上”；无需“温育后 清洗”
《动物尿液中盐酸克伦特罗的测定——气相色谱/质谱法》 （NY/XQ 421－2003），检出限：1.0ppb
《尿液中盐酸克仑特罗的测定胶体金免疫层析法 （NY/T933-2005），检出限：3.0ppb
猪肉全程监控中瘦肉精检测方法的选择
生猪饲养
屠宰场
大型批发市场
零售市场
餐饮业
饲料检测 猪尿检测
斑点免疫结合试验 以微孔薄膜为载体，
酶免疫反应阳性结果 在膜上出现色斑点 胶体金标记较酶标记 更为简便
猪肉和尿液盐酸克伦特罗的 免疫胶体金法快速检测
瘦肉精中毒事件
2000年以来，内地相继发生18起瘦肉精中毒事件，中毒人数 达1700多人，死亡1人（不包括上海2006年集体中毒事件）
瘦肉精残留及危害不容忽视，瘦肉精替代品暗潮涌动 上海9.13瘦肉精食物中毒事件（2006年）
瘦肉精介绍
“瘦肉精”化学性质特别稳定，加热到170℃时才能被分解，故一 般家庭厨房加热不能将其分解破坏
食用后在胃肠道吸收快，作用维持时间持久。中毒后主要症状表 现为头疼、头晕、心悸、心慌、面色潮红、四肢发抖等症状
违法者使用该物质以提高猪的瘦肉率和颜色鲜艳程度，不知情的 市民 错误地认为这样的肉才是“好肉”而特别喜欢选购
双抗体夹心法
1、将已知抗体吸附于载体上 2、温育后清洗 3、加入可能含特异性抗原的待检液 4、温育后清洗 5、加入酶标记特异性抗体 6、温育后清洗 7、加入酶作用底物 8、测定颜色反应深浅
酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay）
竞争法
1、将已知抗体吸附于载体上 2、温育后清洗 3、加入可能含特异性抗原的待检液
第三章
生物技术---免疫学技术
基本概念
抗原（antigen）： 进入动物体内能刺激动物的免疫系统发生免疫应答，从 而引起动物产生抗体或形成致敏淋巴细胞，并能和抗 体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质 分完全抗原和半抗原
抗体(antibody)： 抗原刺激动物免疫系统，由免疫系统产生分泌的能和相 应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白
第三章
第三章
免疫学技术
酶联免疫法 放射免疫法 荧光免疫法 其他
酶联免疫法（enzyme immunoassay)
以酶标记抗体或抗原进行的抗体抗原反应
酶结合物应具有双功能： 高度特异的免疫反应、生物催化放大作用
基本方法 间接法 双抗体夹心法 竞争法
生物素-亲和素系统（biotin-avidin system，BAS）
政府部门 监督抽检 GC-MS
猪尿检测 猪肉检测
酶联免疫法 免疫胶体金
GC-MS确认 大型仪器确认
阳性
猪肉 检测
猪肉 检测
猪肉 检测
免疫胶体金 酶联免疫法
免疫胶体金
免疫胶体金
筛检阳性
销毁和溯源
GC-MS确认 大型仪器确认
阳性
免疫胶体金快速检测板的外观图
免疫胶体金快速检测板(试剂)的结构图
检测原理
某些新进展
酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay）
间接法
1、将已知可溶性抗原吸附于载体 2、温育后清洗 3、加入可能含特异性抗体的待检液 4、温育后清洗 5、加入酶标记的二抗 6、温育后清洗 7、加入酶作用底物 8、测定反应颜色深浅
酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay）
和酶标记的已知抗原液 4、温育后清洗 5、加入酶作用底物 6、测定颜色反应深浅
酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay）
生物素-亲和素系统（biotin-avidin system）
基本概念 生物素：是一种维生素H，经活化后，可与抗体、抗原、酶以多 配一的方式共价结合，且不影响它们的活性 亲和素：从卵蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，可与酶偶合，以1 配多的方式对生物素有很强的亲和力
安全象只弓，不拉它就松，要想保安 全，常 把弓弦 绷。20 .10.19 21:38 :4421 :38Oc t-201 9-Oct- 20
加强交通建设管理，确保工程建设质 量。21 :38:4 421:3 8:442 1:38M onday , October 19, 2020
安全在于心细，事故出在麻痹。20.1 0.192 0.10.1 921:3 8:442 1:38: 44Oct ober 19, 2020
浆过的猪肉组织样，盖紧管盖
2
1
加热完成后取出冷却至室温；可以明显看 到底部有溶液渗出
将装有样品的离心管在90℃以上水浴锅中 加热10 分钟
4
3
吸取3滴（约100ul）煮出的样品渗出液到 1.5ml的离心管中
操作步骤
吸取3滴（约100ul）盐酸克伦特罗组织样 专用稀释液到1.5ml离心管中。充分混合均匀
胶体金免疫层析法检测瘦肉精的技术指标
灵敏度 肉样或组织样：1ppb(标准前处理)或5ppb（简单前处理） 尿样： 1ppb(标准前处理)
特异性：与沙丁胺醇等苯乙胺类药物没有交叉反应； 准确性：与瘦肉精ELISA试剂盒的检测结果符合率>90％ 有效期：半年（冷藏闭光保存）
操作步骤
于5ml离心管中加入5g左右剪碎或是高速匀
《动物性食品中克伦特罗残留量的测定》 （GB5009.192-2003） 第一法：气相色谱——质谱法，检出限：0.5ppb 第二法：高效液相色谱法，检出限：0.5ppb 第三法：酶联免疫法（ELISA筛选法） ，检出限：0.5ppb
《动物组织中盐酸克伦特罗的测定——气相色谱/质谱法》 （NY/T 468－2006），检出限：2.0ppb
瘦肉精介绍
“瘦肉精”学名为盐酸克伦特罗，医学上又称克喘素，常用于治疗哮喘。 由于盐酸克伦特罗添加于饲料饲喂动物后可明显促进动物生长,提高
瘦肉率, 所以养殖户称其为“瘦肉精”，曾在国内外广泛用于动物饲养 生猪食用瘦肉精后皮毛光亮，呼吸急促，个别会出现腿抽搐，站不
稳，爬坡困难；宰后猪的肌肉特别鲜红，后臀肌肉饱满，肥肉非常薄