天宁饮对偏头痛大鼠三叉神经核尾部c-fos蛋白表达及血清5-羟色胺的影响

合集下载

青藤碱对偏头痛模型大鼠脑干c-fos、c-jun表达的影响

青藤碱对偏头痛模型大鼠脑干c-fos、c-jun表达的影响

青藤碱对偏头痛模型大鼠脑干c-fos、c-jun表达的影响罗国标;刘晓丽;张中菊;杨丽【期刊名称】《中风与神经疾病杂志》【年(卷),期】2013(30)6【摘要】目的观察青藤碱对偏头痛模型大鼠脑于c-fos、c-jun表达的影响,了解青藤碱有无治疗偏头痛的作用.方法 60只健康Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、舒马普坦对照组和青藤碱低、中、高剂量治疗组.皮下注射硝酸甘油(NTG)复制实验性偏头痛动物模型,药物干预4h后断头取脑.免疫组化法检测脑干c-fos、c-jun表达水平,显微镜下计数阳性细胞数.结果与空白对照组相比较,模型组脑干c-fos、c-jun表达明显增多,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型组相比较,青藤碱高、中、低剂量组和舒马普坦组脑干c-fos、c-jun表达明显减少,差异有显著统计学意义(P<0.01);与舒马普坦组相比较,青藤碱高剂量组脑干c-fos、c-jun表达无差异,无统计学意义(P>0.05).结论青藤碱可能通过某些作用机制治疗偏头痛,阻断疼痛刺激信号传入脑干,抑制脑干c-fos、c-jun表达,减轻颅内疼痛长时程反应.【总页数】3页(P513-515)【作者】罗国标;刘晓丽;张中菊;杨丽【作者单位】贵州省黔东南州人民医院,贵州觊里556000;遵义医学院附属医院病理科,贵州遵义563099;贵州省遵义市第一人民医院,贵州遵义563099;遵义医学院附属医院神经内科,贵州遵义563099【正文语种】中文【中图分类】R742【相关文献】1.舒脑欣滴丸对偏头痛模型大鼠脑膜组织形态及脑干c-fos基因mRNA表达的影响 [J], 杜帅;张艳军;佟永领;刘丽华;刘俊静2.痛宁胶囊对硝酸甘油型偏头痛模型大鼠下丘脑、脑干c-fos表达的影响 [J], 付秋菊;杨德功;钟荣玲;曹鹏;朱婉华;田耀洲3.青藤碱对偏头痛模型大鼠血浆CGRP、SP含量及脑干5-HT表达的影响 [J], 杨丽;罗国标;刘晓丽;张中菊;易桂标4.和解止痛颗粒对偏头痛大鼠模型c-fos、c-jun基因表达的影响 [J], 成光宇;赵德喜;荣春书;刘立明;李琳;姚金文;顾兆伟;翟超5.头风饮对实验性偏头痛动物模型c-fos、c-jun基因表达的影响 [J], 任永欣;彭成;姚干因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

天宁饮治疗偏头痛的临床疗效研究

天宁饮治疗偏头痛的临床疗效研究

天宁饮治疗偏头痛的临床疗效研究江国安;陈华峰;夏晓丽【摘要】目的探究偏头痛患者实施中药天宁饮治疗的临床效果.方法择取2017年11月~2018年7月在我院接受治疗的50例偏头痛患者为研究对象,根据随机数字表法将其分为对照组与观察组,每组25例.对照组实施西医盐酸氟桂利嗪治疗,观察组行中医天宁饮治疗,比较两组患者临床疗效,及治疗前后中医证候积分.结果治疗前两组患者中医证候积分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组患者中医证候积分相比对照组显著更低,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者临床治疗总有效率96.00%显著高于对照组76.00%,差异有统计学意义(P<0.05).结论偏头痛患者行中医天宁饮治疗效果确切,可有效改善患者临床症状,有利于患者的康复,因此可在临床中针对该种治疗方法进行推广.【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2019(009)003【总页数】3页(P57-59)【关键词】天宁饮;盐酸氟桂利嗪;偏头痛;中医证候积分【作者】江国安;陈华峰;夏晓丽【作者单位】广东省韶关市中医院,广东韶关 512026;广东省韶关市中医院,广东韶关 512026;广东省韶关市中医院,广东韶关 512026【正文语种】中文【中图分类】R277.7偏头痛是临床常见疾病,属于周期性发作病症,其发病因素为患者神经血管调节功能异常所致,患者多伴有单或双侧反复头痛等临床表现,可遗传[1]。

据相关调查研究结果显示,我国该疾病发病率约为10%,对患者的工作及正常生活造成极大的不便[2]。

西医针对该疾病的治疗多给予麦角碱、曲坦类等特异性药物,或钙离子拮抗剂、β受体阻断剂等非特异性药物,虽然该种疗法具有一定的疗效,但是停药后复发率高[3]。

部分患者担心对其产生依赖性,因此选择中医疗法。

本研究择取2017年11月~2018年7月在我院接受治疗的50例患者分组开展中西医对照研究,现报道如下。

头风饮对实验性偏头痛动物模型c_fos_c_jun基因表达的影响

头风饮对实验性偏头痛动物模型c_fos_c_jun基因表达的影响
MICROW2500 型 恒 冷 箱 切 片 机 ; 电 子 天 平 PA2003 型 ; PHS23C 精密酸度计 ; 隔水式电热恒温培养箱 ;MIAS 97 图象 分析系统等 。
2 方法 2. 1 分组 、造模 、给药
根据 Cristina Tassorelli 等人报道的方法[7] ,取 SD 大鼠 60 只 ,随机分成空白对照组 、偏头痛模型组 、阳性对照组 ,头风 饮高 、中 、低剂量组 ,各组动物均为 10 只 。除空白对照组外 , 其余各组动物皮下注射硝酸甘油注射剂 10 mg/ kg ,复制实验 性偏头痛动物模型 。30 min 后按组灌胃给药 。空白对照组 不作处理 ,偏头痛动物模型组灌胃蒸馏水 10 mL/ kg ,阳性对 照组灌胃麦角胺咖啡因药液 10 mL/ kg(相当于酒石酸麦角胺 2mg) ,头风饮高 、中 、低剂量组分别灌胃 116. 8 %、58. 4 %、29. 2 %头风饮药液 10 mL/ kg ,分别相当于原生药 11. 68 g/ kg、5. 84 g/ kg、2. 92 g/ kg。 2. 2 灌注 、取材 、切片
3. 2. 1 头风饮对实验性偏头痛动物模型 c2fos、c2jun 基因表 达阳性细胞数的影响
实验性偏头痛动物模型组脑干 、下丘脑 c2fos、c2jun 表达 阳性细胞数明显增多 ,与空白对照组比较有极显著性差异 ( P < 0. 01) ;头风饮高剂量组脑干 、下丘脑 c2fos 阳性细胞数目明 显减少 ,与模型组比较有极显著性差异 ( P < 0. 01) ,与阳性对 照组 、空白对照组比较无显著性差异 。头风饮高剂量组脑
(3) 阳性药物 : 麦角胺咖啡因片 ,每片含酒石酸麦角胺 1mg ,由上海信谊药业有限公司生产 ,批准文号 :沪卫药准字 (1995) 第 0710 号2007 ,生产批号 :970401。 1. 2 动物

天宁饮治疗偏头痛的临床疗效研究

天宁饮治疗偏头痛的临床疗效研究

天宁饮治疗偏头痛的临床疗效研究偏头痛是一种常见的神经-血管性头痛病症,其症状包括单侧头痛、恶心、呕吐和光、声过敏等。

目前,偏头痛的治疗主要是通过药物治疗和非药物治疗,但是长期使用药物会带来一定的不良反应,因此寻求安全有效的非药物治疗手段是非常重要的。

天宁饮作为传统中医药治疗偏头痛的一种方法,其临床疗效备受关注。

本研究旨在探讨天宁饮治疗偏头痛的临床疗效。

一、研究背景传统中医药在治疗偏头痛疾病方面有着悠久的历史,天宁饮作为其中的一种治疗方法,被认为在改善偏头痛症状方面具有一定的疗效。

到目前为止,对于天宁饮治疗偏头痛的临床疗效研究相对较少,因此有必要开展本研究,以进一步验证其有效性。

二、研究目的1.评估天宁饮治疗偏头痛的临床疗效。

2.探讨天宁饮在改善偏头痛症状方面的作用机制。

3.为天宁饮在临床上的推广应用提供科学依据。

三、研究方法1.研究对象:选取符合偏头痛诊断标准的患者作为研究对象,共计100例。

2.分组方法:将研究对象随机分为观察组和对照组,每组50例。

观察组患者给予天宁饮治疗,对照组患者给予常规治疗,比较两组疗效差异。

3.治疗时间:观察组连续治疗3个月,对照组采用常规治疗。

4.观察指标:分别在治疗前、治疗后1个月、2个月和3个月记录两组患者的头痛频度、头痛持续时间和头痛强度等指标。

5.数据分析:采用统计学方法分析两组患者的临床疗效和症状改善情况。

四、研究预期五、研究意义本研究的结果有望为天宁饮在治疗偏头痛方面的临床应用提供科学依据,为中医药治疗偏头痛疾病提供新的思路和方法。

本研究也有望促进中医药和现代医学的结合,为推动中医药在头痛症状改善方面的研究和应用提供新的动力。

六、结语偏头痛是一种临床常见的疾病,对患者生活质量和健康造成了不小的影响。

传统中医药作为我国传统文化的重要组成部分,在治疗偏头痛方面有着独特的优势和潜力。

本研究旨在探讨天宁饮治疗偏头痛的临床疗效,并期望可以为中医药在治疗偏头痛方面的临床应用提供新的思路和方法。

头痛宁对偏头痛大鼠硬脑膜及三叉神经节IL-1β表达影响

头痛宁对偏头痛大鼠硬脑膜及三叉神经节IL-1β表达影响

头痛宁对偏头痛大鼠硬脑膜及三叉神经节IL-1β表达影响金善泉;王成云;董欣;陈柯言;张雪;万琪【期刊名称】《中国疼痛医学杂志》【年(卷),期】2017(023)003【摘要】目的:研究头痛宁对反复发作性偏头痛大鼠硬脑膜及三叉神经节IL-1β(interleukin-1beta)表达的影响.方法:选择健康成年雄性SD大鼠60只,初始质量180~220 g.先取20只随机分为4组,每组5只,分别为生理盐水7天组(sham)、致炎剂(inflammatory soup,IS)1天组(IS1)、致炎剂3天组(IS3)和致炎剂7天组(IS7),建立反复发作性偏头痛大鼠模型;再取25只随机分为5组,每组5只,分别为致炎剂7天对照组(IS7)、0.375 g/kg头痛宁干预组(T1)、0.75 g/kg头痛宁干预组(T2)、1.5 g/kg头痛宁干预组(T3)和3.0 g/kg头痛宁干预组(T4),取硬脑膜及三叉神经节进行IL-1β蛋白免疫印迹分析(western blot)及IL-1βmRNA实时荧光定量PCR检测.最后取15只,随机分为3组,每组5只,分别为生理盐水7天组(sham)、致炎剂7天组(IS7)和3.0 g/kg头痛宁干预组(T4),灌流固定后各组分别取大鼠硬脑膜及三叉神经节进行IL-1β蛋白免疫荧光检测.结果:(1)与生理盐水7天组比较,致炎剂7天组IL-1β的表达在硬脑膜(P<0.01)及三叉神经节(P<0.01)均明显升高;(2)与致炎剂7天组相较,在大鼠硬脑膜/三叉神经节,0.75 g/kg头痛宁干预组(P<0.01/P<0.01)、1.5 g/kg头痛宁干预组(P<0.01/P<0.05)和3.0g/kg头痛宁干预组(P<0.01/P<0.01)IL-1β表达均明显降低,0.375 g/kg头痛宁干预组IL-1β表达下降不明显;(3)与致炎剂7天组相较,3.0 g/kg头痛宁干预组三叉神经节神经元细胞胞质内免疫荧光斑点数明显减少,大鼠硬脑膜未能成功染色;(4)与致炎剂7天组相较,3.0 g/kg头痛宁干预组在硬脑膜(P<0.01)及三叉神经节(P<0.05)IL-1βmRNA表达均减少.结论:头痛宁抑制硬脑膜及三叉神经节IL-1β基因转录,下调IL-1β的表达可能是其治疗偏头痛的机制之一.【总页数】7页(P168-174)【作者】金善泉;王成云;董欣;陈柯言;张雪;万琪【作者单位】南京医科大学第一附属医院神经内科,南京210029;南京医科大学第一附属医院神经内科,南京210029;南京医科大学第一附属医院神经内科,南京210029;南京医科大学第一附属医院神经内科,南京210029;南京医科大学第一附属医院神经内科,南京210029;南京医科大学第一附属医院神经内科,南京210029【正文语种】中文【相关文献】1.散偏汤对偏头痛模型大鼠中脑、三叉神经节CGRP、PENK基因、蛋白表达的影响 [J], 刘燕;赵永烈;刘金民2.偏头痛大鼠硬脑膜及三叉神经节上TRPV1的表达变化 [J], 刘欣;刘沙;燕兰云;史兆春;武文卉;黄琳;郭永涛;万琪3.头痛宁对偏头痛模型大鼠硬脑膜、三叉神经节及脑干区JNK-1和PAR-2表达的影响 [J], 方莉;白金娟;连亚军;徐会茹;顾盼4.异氟烷预处理对偏头痛大鼠行为学症状及三叉神经节相关蛋白表达的影响 [J], ZHOU Wei; LIU Zhigang5.芎芷镇痛方对偏头痛大鼠行为学及三叉神经节TRPV1表达的影响 [J], 陈炯华;方雪;白茹雪;白羽;严展鹏;李壮壮;周影因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

柴胡疏肝散对偏头痛大鼠NF-κB、C-fos及5-HT的影响

柴胡疏肝散对偏头痛大鼠NF-κB、C-fos及5-HT的影响

柴胡疏肝散对偏头痛大鼠NF-κB、C-fos及5-HT的影响胡久略;郅琳;张瓅方;史马广寒;丁吉善;杨淑慧【期刊名称】《科学技术与工程》【年(卷),期】2016(016)012【摘要】为观察柴胡疏肝散对硝酸甘油偏头痛大鼠模型中脑导水管周围灰质(PAG) 5-HT、NF-κB、C-fos表达的影响,以探讨其可能的作用机制.用60只SD大鼠随机分为6组:空白组、模型组、对照组及中药高、中、低剂量组,各组灌胃给予相应药液(或生理盐水),连续14 d,末次灌胃后以皮下注射硝酸甘油的方式复制偏头痛大鼠模型.通过蛋白印迹法观察偏头痛大鼠PAG NF-κB的表达;通过免疫组化法观察其5-HT、C-fos表达.结果预防性使用柴胡疏肝散能减少硝酸甘油偏头痛模型大鼠PAG NF-κB、C-fos的表达,提高硝酸甘油偏头痛模型大鼠PAG 5-HT的表达;临床等效剂量效果与氟桂利嗪相当(P>0.05),大剂量效果优于氟桂利嗪(P<0.05).说明:①硝酸甘油偏头痛大鼠模型PAG NF-κB蛋白表达增加;②柴胡疏肝散能抑制硝酸甘油偏头痛大鼠NF-κB信号通路,减少其下游基因C-fos的表达,减轻神经源性炎症;该效应在一定剂量范围内具有量效关系;③硝酸甘油偏头痛大鼠模型PAG 5-HT表达降低;柴胡疏肝散能提高硝酸甘油偏头痛大鼠PAG 5-HT的表达,减少疼痛刺激伤害;该效应在一定剂量范围内具有量效关系.【总页数】6页(P205-210)【作者】胡久略;郅琳;张瓅方;史马广寒;丁吉善;杨淑慧【作者单位】南阳理工学院,南阳473004;仲景宛西制药股份有限公司,南阳474550;南阳理工学院,南阳473004;南阳理工学院,南阳473004;南阳理工学院,南阳473004;南阳理工学院,南阳473004;南阳理工学院,南阳473004【正文语种】中文【中图分类】R931.71【相关文献】1.盐酸青藤碱对偏头痛大鼠中脑PAG区域NF-κB、COX-2和5-HT表达的影响[J], 詹剑;杨丽;易桂标;郝仁方;罗国标;张中菊2.麻芎舒痛方治疗偏头痛的临床效果及对血清5-HT、NF-κB和炎症因子水平的影响 [J], 张金培;杨屹;靳艳;3.麻芎舒痛方治疗偏头痛的临床效果及对血清5-HT、NF-κB和炎症因子水平的影响 [J], 张金培;杨屹;靳艳4.麻芎舒痛方治疗偏头痛的临床效果及对血清5-HT、NF-κB和炎症因子水平的影响 [J], 张金培;杨屹;靳艳;5.中医综合方案治疗偏头痛的临床效果及对患者5-HT、NF-κB、NO水平的影响[J], 吕静;庞智文因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

祛风清热定痛方对偏头痛大鼠镇痛效应及神经递质含量的影响

祛风清热定痛方对偏头痛大鼠镇痛效应及神经递质含量的影响

祛风清热定痛方对偏头痛大鼠镇痛效应及神经递质含量的影响李磊;司宁宁;杨宾;李瑞杰;张效科【摘要】Objective The analgesic effect of Qufeng Qingre Dingtong decoction was studied through the animal experiment research, and its mechanism of action was explored. Methods Rats were&nbsp;randomly divided into blank group, model group, Zhengtian Pill group, Qufeng Qingre Dingtong high and small dose groups, 8 rats in each group. Analgesic effect of Qufeng Qingre Dingtong decoction was observed by the hot plate method after continuous drug administration for 7 days. Migraine rat model was prepared by nitroglycerin. ELISA method was used to detect NE, DA and 5-HT contents in brain tissue. It was considered to be statistically significant when the value of P was less than 0. 05. Results ( 1 ) Compared with the model group, Qufeng Qingre Dingtong high-dose group could significantly improve pain threshold from 60 min after the administration of drugs (P<0. 01), Qufeng Qingre Dingtong low-dose group, Zhengtian pill group improved pain threshold from 120 min after administration (P<0. 05). (2) Compared with the model group, NE, DA, 5-HT contents in brain tissue were very significantly increased in Qufeng Qingre Dingtong high dose group and Zhengtian Pill group (P<0. 01). Compared with Zhengtian Pill group, Qufeng Qingre Dingtong high dose group had significant differences (P<0. 05). Conclusion Qufeng Qingre Dingtong decoction has obvious analgesic effect and its mechanism in the treatment of migraine might achieve by regulating NE, DA and 5-HTrelease.%目的:通过动物实验研究祛风清热定痛方的镇痛作用,并探讨其治疗偏头痛的作用机制。

P2X4受体在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核的表达及意义

P2X4受体在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核的表达及意义

P2X4受体在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核的表达及意义刘超阳;刘清;王莎;秦光成;陈力学;周冀英【期刊名称】《中国疼痛医学杂志》【年(卷),期】2018(024)003【摘要】目的:观察P2X4受体 (P2X4 receptor, P2X4R) 在慢性偏头痛 (chronic migraine, CM) 大鼠三叉神经脊束尾核 (trigeminal nucleus caudalis, TNC) 的表达变化,探讨其在CM中的作用.方法:SD雄性大鼠随机分为5组,对照组 (n = 12)、模型组 (n = 12)、模型+溶剂组 (n = 6)、模型+TNP-ATP 30 nmol组 (n = 6)、模型+TNP-ATP 60 nmol组 (n = 6).硬脑膜反复滴注 "炎性汤" (inflammatory soup, IS) 建立CM模型.von Frey test检测眶周及后足机械痛阈值,Western blot 检测P2X4R及神经元激活标志蛋白c-Fos的表达,免疫荧光检测P2X4R定位情况.结果:荧光染色显示P2X4R主要表达于TNC小胶质细胞.与对照组相比,模型组大鼠眶周及后足痛阈值显著降低 (P < 0.01),P2X4R及c-Fos表达量显著上调 (P < 0.05).给予P2X4R抑制剂TNP-ATP后,大鼠眶周及后足痛阈值显著升高 (P < 0.05), c-Fos表达量显著降低 (P < 0.05).结论:TNC小胶质细胞P2X4R表达上调,可能通过影响神经元的激活从而参与CM发病过程.【总页数】7页(P169-175)【作者】刘超阳;刘清;王莎;秦光成;陈力学;周冀英【作者单位】重庆医科大学附属第一医院实验研究中心,重庆 400016;重庆医科大学附属第一医院实验研究中心,重庆 400016;重庆医科大学附属第一医院实验研究中心,重庆 400016;重庆医科大学附属第一医院实验研究中心,重庆 400016;重庆医科大学附属第一医院实验研究中心,重庆 400016;重庆市神经病学重点实验室,重庆400016【正文语种】中文【相关文献】1.ASIC3在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核的表达 [J], 王莎;吴白雪;刘超阳;秦光成;周冀英;陈力学2.针刺对慢性脑缺血大鼠三叉神经脊束核神经元钙通道Cav1.3表达及凋亡的影响[J], 郭森;魏萌;杨松鹤;乔跃兵3.偏头痛模型大鼠三叉神经脊束核和三叉神经节中PACAP及CGRP表达的变化[J], 吴杭飞;韩珣;张晴;董钊;于生元4.偏头痛模型大鼠三叉神经脊束核和三叉神经节中PACAP及CGRP表达的变化[J], 吴杭飞;韩珣;张晴;董钊;于生元;;;;;;;5.NLRP3炎性小体在慢性偏头痛小鼠三叉神经脊束尾核的表达及作用 [J], 贺维;龙婷;张艺馨;秦光成;陈力学;周冀英因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

·实验研究·DOI :10.13935/j.cnki.sjzx.150909基金项目:江苏省泰州市科技支撑计划项目(TS2013011)作者单位:1.江苏省泰州市中医院,江苏泰州225300;2.南京中医药大学,江苏南京210046通讯作者:全亚萍,Email :quanyaping1@126.com 天宁饮对偏头痛大鼠三叉神经核尾部c -fos蛋白表达及血清5-羟色胺的影响全亚萍1蒋凤荣2卞勇2王念1陈蓉蓉1李方1王玮1【摘要】目的探讨天宁饮对偏头痛大鼠三叉神经核尾部c -fos 蛋白表达及血清5-羟色胺(5-HT )的影响。

方法健康雄性SD 大鼠60只,随机分成空白对照组,模型组,阳性对照组,天宁饮高、中、低剂量组,每组10只。

皮下注射硝酸甘油(NTG )复制大鼠偏头痛模型,药物干预后4h 留取血液以及脑组织标本,观察大鼠三叉神经核尾部c -fos 蛋白以及血清5-HT 的变化。

结果阳性对照组、天宁饮高剂量组和中剂量组大鼠三叉神经核尾部c -fos 蛋白表达明显抑制(P <0.05,P <0.01),5-HT 显著升高(P <0.05,P <0.01)。

结论天宁饮可有效抑制硝酸甘油诱导的大鼠偏头痛模型三叉神经核尾部c -fos 蛋白的表达,升高大鼠偏头痛模型血清5-HT ,缓解头痛症状。

【关键词】天宁饮;偏头痛;动物模型;c -fos 蛋白;5-HT 【中图分类号】R285.5【文献标识码】AImpacts of Tianning Decoction on C -for Protein Expression in the CaudalTrigeminal Nucleus and Serum 5-HT in the Rats of MigraineQUAN Ya -ping 1,JIANG Feng -rong 2,PIAN Yong 2,WANG Nian 1,CHEN Rong -rong 1,LI Fang 1,WANG Wei 1(1.Jaingsu Taizhou Chinese Medicine Hospital ,Taizhou Jiangsu 225300;2.Nanjing University of Traditional Chinese Medicine ,Nanjing Jiangsu 210046)【Abstract 】Objective To discuss the impacts of Tianning decoction on c -fos protein expression in the caudal trigeminal nucleus and serum 5-HT in the rats of migraine.Methods Sixty healthy male SD rats were randomized into a blank control group ,a model group ,a positive control group ,a high -dose group of Tianning decoction ,a middle -dose group of Tianning decoction and a low -dose group of Tianning decoc-tion ,10rats in each group.Nitroglycerin (NTG )was injected subcutaneously to duplicate the migraine modelsin the rats.In 4h after medication intervention ,blood and brain tissue sample were collected so as to observe the changes in c -fos protein expression in the caudal trigeminal nucleus and serum 5-HT in the rats of mi-graine.Results In the positive control group ,the high -dose group and the middle -dose group of Tianningdecoction ,the c -fos protein expression in the caudal trigeminal nucleus was apparently inhibited (P <0.05,P <0.01)and serum 5-HT was increased significantly (P <0.05,P <0.01)in the rats of migraine.Con-clusion Tianning decoction effectively inhibits c -fos protein expression in the caudal trigeminal nucleus and serum 5-HT in the rats of migraine and relieves headache.【Key words 】Tianning Decoction ;Migraine ;Animal Model ;C -fos Protein ;5-HT偏头痛是一种临床常见的慢性神经血管性疾患,患病率高,对生活质量的影响很大[1],目前,对于偏头痛的治疗主要是急性期治疗和预防治疗。

我们在长期的临床实践中使用天宁饮治疗,能迅速缓解头痛,减轻伴随症状,疗效优于西药对照组[2]。

本实验采用硝酸甘油法制作偏头痛大鼠模型,探讨天宁饮对实验性偏头痛大鼠三叉神经核尾部c -fos 蛋白表达及血清5-羟色胺(5-HT )的影响。

1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物SD 大鼠60只,清洁级,雄性,体重180 220g ,由浙江省实验动物中心供给,动物合格证号:SCXK (浙)2014-0001。

1.1.2药品与试剂天宁饮[颗粒剂,江苏江阴天江制药厂生产,由川芎(批号112145)、白芷(批号1402029)、僵蚕(批号1403131)、全虫(批号1311098)、赤芍(批号1402096)、钩藤(批号1312082)按15ʒ10ʒ3ʒ10ʒ10ʒ15比例组成],加蒸馏水,分别配成浓度为1.32g/ml、0.66g/ml、0.33g/ ml的药液,4ħ冰箱保存备用。

硝酸甘油注射液,广州白云山明兴制药有限公司,批号131101;盐酸氟桂利嗪(商品名:西比灵),西安杨森制药有限公司,批号131218454。

5-HT Elisa试剂盒,上海源叶生物科技有限公司,批号14042302;抗体购自BIO-WORLD公司,批号140408;ElivisionTMsuper免疫组化检测试剂盒,购自福建迈新生物技术有限公司,批号20140415;PBS缓冲液,自行配制,每升中含8g 氯化钠(NaCl),0.2g氯化钾(KCl),1.44g磷酸一氢钠(Na2HPO4),0.24g磷酸二氢钾(KH2PO4),pH 调至7.4。

其他试剂均为进口分装或国产分析纯。

1.1.3实验仪器Leica ASP300S全自动真空组织脱水机;Thermo包埋机,型号Histostar;Thermo手动切片机,型号Finesse E+;Shandon全自动染色机;Thermo全波长酶标仪。

1.2实验方法1.2.1动物分组及造模给药前后,SD大鼠分笼饲养,每笼5只,喂以全价颗粒鼠饲料(南京协同生物工程有限公司),自由饮水饮食,室温20 25ħ,每天人工光照12h,室内通风良好,实验室相对湿度65% 70%。

60只SD大鼠适应性喂养7d后,随机分成空白对照组、偏头痛模型组、阳性对照组、天宁饮高、中、低剂量组,每组10只。

空白对照组不作处理。

余50只大鼠造模,采用Cristina Tassorelli方法,在SD大鼠皮下注射硝酸甘油(GTN)10mg/kg,造模30min后大鼠出现双耳发红,前肢频繁挠头,爬笼次数增多,烦躁不安,为造模成功。

1.2.2给药方法除空白对照组,其余各组于造模后30min后给药。

模型组予10ml/kg蒸馏水灌胃;阳性对照组予0.00005g/ml西比灵灌胃;天宁饮高剂量组予1.32g/ml天宁饮药液10ml/kg灌胃;天宁饮中剂量组予0.66g/ml天宁饮药液10ml/kg灌胃;天宁饮低剂量组予0.33g/ml天宁饮药液10 ml/kg灌胃。

1.3标本留取1.3.1血液标本每一组动物均在4h后留取血液标本。

用10%水合氯醛以350mg/kg给大鼠腹腔麻醉以后,剪开腹腔,暴露腹主动脉,眼科剪剪开一小口,小心插入灌注针,用钝性动脉夹固定,采血4ml加入肝素化的真空采血管,混匀后3000r/min离心10min,分离血浆,提取上层血清,于-20ʎ保存样品。

1.3.2脑组织标本每一组动物均在4h后留取脑组织标本。

大鼠深麻醉以后,剪开胸廓,暴露心脏,在心尖搏动最明显处,眼科剪剪开一小口,向着主动脉的方向小心插入灌注针,用钝性动脉夹固定,灌注针连接50ml注射器,剪开右心耳,先用生理盐水灌注,直到从右心耳流出的液体颜色变透明。

将大鼠断头,切开大鼠颅盖骨,取出大鼠头部右侧的三叉神经节,置于4%多聚甲醛0.1mol/L PBS液中固定24h。

1.4检测指标及方法1.4.15-HT检测试剂盒应平衡至室温20 28ħ,将标准品按每孔各50μl,做好标记。

将处理好的待测样本每孔各50μl依次加入,做好标记。

在标准品孔及待测样本孔分别加入50μl酶联亲和物,充分混匀。

将包被微孔板覆膜并在37ħ孵育反应60min后充分弃尽孔内剩余残夜,用预先稀释好的清洗液反复冲洗5次,并扣干孔内剩余液体。

每孔依次加入底物Ⅰ和Ⅱ各50μl,充分混匀。

在室温下避光反应15min。

反应过后每孔分别加入终止液50μl,充分混匀,终止反应。

在30min内使用酶标仪在450nm下读取光密度(OD)值。

以OD值为纵坐标,标准品浓度为横坐标,绘制标准曲线。

根据血清样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。

1.4.2c-fos蛋白表达免疫组化检测组织标本经4%多聚甲醛固定后,常规脱水,石蜡包埋。

石蜡切片常规脱蜡至水。

PBS洗3次,每遍5min。

用蒸馏水或PBS配置新鲜的3%H2O2室温封闭10min,蒸馏水洗1次。

抗原修复。

PBS洗5min。

甩去多余液体滴加一抗室温下孵育60min或4ħ过夜(过夜后在37ħ复温45min)。

相关文档
最新文档