土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书 微量法
连续监测法测定血清亮氨酸氨基肽酶的活性及临床应用
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连续监测法测定血清亮氨酸氨基肽 酶的活性 及临床应用
土壤亮氨酸氨基肽酶测定方法
土壤亮氨酸氨基肽酶测定方法土壤亮氨酸氨基肽酶（leucine aminopeptidase）是一种能够水解亮氨酸氨基肽的酶。
下面是一种常用的土壤亮氨酸氨基肽酶测定方法：材料：- 亮氨酸-对硝基酯 (L-啮合亮胺酸对硝基酯) 库存溶液- 0.1 M 氢氧化钠溶液- pH 8.5 磷酸缓冲液- 0.01 M 纳氢磷酸钠缓冲液 (pH 7.0)- 可见光分光光度计- 土壤样品步骤：1. 准备土壤样品：将土壤样品通过筛网过滤，去除大颗粒杂质。
将过滤后的土壤样品均匀地取出一定量，放入离心管中。
2. 提取土壤亮氨酸氨基肽酶：向离心管中加入足够的 pH 8.5磷酸缓冲液，使土壤悬浊液在振荡器上完全浸没。
使用振荡器在室温下轻轻振荡土壤悬浊液30分钟。
3. 离心样品：将土壤悬浊液离心10分钟，以除去残渣和土壤颗粒。
4. 准备标准曲线：取一系列含有不同浓度亮氨酸-对硝基酯的标准溶液。
将每种标准物质转移到不同的离心管中，每管加入适量的 0.01 M 纳氢磷酸钠缓冲液 (pH 7.0)。
5. 按以下步骤分别处理标准溶液和提取液：- 各取一定体积的标准溶液和提取液，分别加入一定体积的0.1 M 氢氧化钠溶液。
保持温度稳定，反应30分钟。
- 在30分钟后，各体系用 0.01 M 纳氢磷酸钠缓冲液 (pH 7.0) 稀释。
6. 测定吸光值：用可见光分光光度计分别测量标准溶液和提取液的吸光值。
以纳氢磷酸钠缓冲液 (pH7.0) 为白底。
7. 绘制标准曲线：将标准曲线上的吸光值与相应亮氨酸-对硝基酯的浓度进行关联，绘制标准曲线。
8. 计算土壤亮氨酸氨基肽酶活力：使用标准曲线中的吸光值和提取液的吸光值，计算土壤亮氨酸氨基肽酶的活力。
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒(L-亮氨酸-p-硝基苯胺底物法)产品技术要求baiding
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒（L－亮氨酸-p-硝基苯胺底物法）适用范围：用于体外定量测定人血清中的亮氨酸氨肽酶的活性。
1.1规格
1.2组成
2.1 外观
2.1.1试剂1：无色液体，无浑浊，无不溶物。
2.1.2试剂2：无色至淡黄色液体。
2.1.3包装外观应整洁，标签字迹清晰，不易脱落。
2.2 净含量
液体试剂的净含量不低于标示体积。
2.3 试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
试剂空白吸光度≤0.3 。
2.3.2试剂空白吸光度变化率
试剂空白吸光度变化率（ΔA/分）≤0.002。
2.4 分析灵敏度
样本浓度为50 U/L时，ΔA/分≥0.010。
2.5 线性区间
在[14，300]U/L范围内，线性相关系数r≥0.990，测试浓度在[14，50]U/L 时，绝对偏差不超过±5U/L，测试浓度在（50，300]U/L时，相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度
2.6.1 批內精密度
用高、中、低3个浓度的样本测试试剂盒，各重复测试10次，其变异系数（CV）应不大于6%。
2.6.2批间差
用样本分别测试3个不同批次的试剂盒，每个批次测试3次，其相对极差（R）应不大于10%。
2.7 准确度
回收率在85%-115%范围内。
2.8 稳定性
原包装试剂盒在2℃～8℃避光保存下有效期为12个月，有效期满后3个月内测试，应满足2.3、2.4、2.5、2.6.1和2.7的要求。
体外诊断试剂-产品临床意义化验产品临床意义
医学体外诊断试剂---产品临床意义1.D-二聚体测定试剂盒（D-Dimer）2.纤维蛋白（原）降解产物测定试剂盒（FDP）13.抗凝血酶III测定试剂盒（AT-III）4.纤维蛋白溶酶原测定试剂盒（S-PLG）5.凝血酶原时间测定试剂盒（PT）6.活化部分凝血活酶时间测定试剂盒（APTT）37.凝血酶时间测定试剂盒（TT）8.纤维蛋白原测定试剂盒（FIB）9.a2纤溶酶抑制物测定试剂盒（S-APL）10.铜兰蛋白（CP）11.总胆汁酸（TBA ）12.前白蛋白（PA）13.腺苷脱氨酶（ADA ）14.5 ‘ -核苷酸酶（5 ‘-NT）15.胆碱酯酶（CHE ）16.a-L岩藻糖苷酶（AFU）17.甘胆酸（CG ）18.亮氨酸氨基肽酶（LAP）19.总胆红素（TBIL）20.直接胆红素（DBIL）21.丙氨酸氨基转移酶（ALT）22.天门冬氨酸氨基转移酶（AST）23.天冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶（ASTm ）124.碱性磷酸酶（ALP）25.Y -谷氨酰氨基转移酶（GGT ）26.总蛋白（TP）27.白蛋白（ALB）28.胱抑素 C （Cysc）29.视黄醇结合蛋白（RBP ）30.0 2微球蛋白（0 2MG ）31.a1微球蛋白测定试剂盒（a1-MG ）32.N-乙酰-0-D-M基葡萄糖苷酶（NAG ）33.肌酐（CR ）34.尿酸（UA）35.尿素氮（BUN ）36.尿总蛋白（UTP ）37.尿微量白蛋白（MALB）38.纤维蛋白（原）降解产物（FDP ）39.同型半胱氨酸（HCY）40.游离脂肪酸（NEFA）41.血管紧张素转化酶（ACE ）42.超敏C反应蛋白（HS-CRP）43.甘油三酯（TG ）44.总胆固醇（TCH）45.高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）46.低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）47.载脂蛋白 AI（ApoAI）48.载脂蛋白B（ApoB）49.载脂蛋白E（ ApoE）50.脂蛋白（a）（LP（a））51.肌红蛋白（Mb）52.肌钙蛋白I（cTn I）53.肌酸激酶同工酶（CKMB ）54.肌酸激酶（CK）55.乳酸脱氢酶（LDH）56.a-羟丁酸脱氢酶（HBDH ）57.葡萄糖（GLU ）58.糖化血清蛋白（GSP ）59.糖化血红蛋白（HBAIC）60.糖化白蛋白（GA ）61.0-羟丁酸（0-DH）62.乳酸（Lac）63.丙酮酸（PYR）64.a-淀粉酶（a-AMY ）65.脂肪酶（LIP）66.钙离子（Ca）67.镁离子（Mg ）68.无机磷（P）69.二氧化碳（Co2 ）70.钾离子（K）71.钠离子（Na ）72.氯离子（CI）73.锌离子（Zn）74.铁离子（Fe）75.抗链球菌溶血素O（ASO ）76.类风湿因子（RF）77.C-反应蛋白（CRP）78.铁蛋白（Ferr）79.转铁蛋白（Tf）80.免疫球蛋白G （IgG）81.补体C3（C3）82.B 因子（BF）83.al-酸性糖蛋白（a 1-AG ）84.al-抗胰蛋白酶（a1-AT）85.尿a2巨球蛋白（Ua2-MG ）86,唾液酸（SIA）87.超氧化物歧化酶（SOD ）尿液蛋白临床意义体外诊断试剂产品临床意义1.D-二聚体测定试剂盒（D-Dimer）方法学：乳胶增强免疫比浊法参考值：血浆：01.0mg/L线性范围：0.520mg/LD-二聚体是在血液凝固与纤溶系统中，由于凝固第十三因子的作用，安定的交联纤维蛋白被纤溶酶分解的FDP的一种，血液中存在YY/DXD、YD/DY、DD/E、DD复合体等各种分子类的D-二聚体。
土壤亮氨酸氨基肽酶测定方法
土壤亮氨酸氨基肽酶测定方法土壤中的氨基肽酶是一种重要的酶类，其在土壤中的活性和含量可以反映土壤的肥力和微生物活性水平。
因此，准确测定土壤中的氨基肽酶活性对于了解土壤质量和健康状况具有重要意义。
本文将介绍一种常用的土壤亮氨酸氨基肽酶测定方法。
亮氨酸氨基肽酶是一种常见的土壤酶，其主要作用是水解蛋白质中的肽键，将肽链分解成氨基酸。
该酶的活性可以通过测定其对亮氨酸的水解能力来反映。
下面将详细介绍测定土壤亮氨酸氨基肽酶活性的步骤。
我们需要准备测定土壤亮氨酸氨基肽酶活性所需的试剂和设备。
试剂包括亮氨酸（L-Valine）、显色底物（如对硝基苯酚）、缓冲液等。
设备包括离心机、分光光度计等。
第一步是样品的处理。
我们需要从土壤中提取亮氨酸氨基肽酶。
首先，将土壤样品与缓冲液混合，并在室温下静置一段时间。
然后，使用离心机将混合液离心，以分离土壤颗粒和溶液。
最后，取出溶液作为待测样品。
第二步是酶活性测定。
将待测样品与亮氨酸底物混合，使其反应一定的时间。
然后，加入显色底物，使溶液产生颜色。
颜色的深浅与亮氨酸氨基肽酶的活性成正比。
使用分光光度计测定溶液的吸光度，即可得到亮氨酸氨基肽酶的活性值。
需要注意的是，为了保证测定结果的准确性，我们还需要进行一些对照实验。
例如，可以设置空白对照组，即不加入待测样品，只加入缓冲液和底物，测定其吸光度。
另外，可以设置热灭活对照组，即将待测样品在高温条件下处理，使酶活性丧失，然后测定其吸光度。
通过对照实验的比较，可以进一步验证测定结果的准确性。
除了以上介绍的方法，还有其他一些常用的土壤亮氨酸氨基肽酶测定方法。
例如，可以使用荧光底物来测定酶活性，其原理是亮氨酸氨基肽酶在水解底物时产生荧光信号，通过测量荧光信号的强度来反映酶活性。
此外，还可以使用同露光底物等其他底物来测定亮氨酸氨基肽酶的活性。
土壤亮氨酸氨基肽酶是一种重要的土壤酶类，其活性的测定对于了解土壤质量和微生物活性具有重要意义。
通过测定亮氨酸氨基肽酶的活性，可以评估土壤的肥力和健康状况。
索莱宝（Solarbio）AKP ALP活性检测试剂盒说明书
组织及血液碱性磷酸酶（AKP/ALP ）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC2140规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体30 mL×1瓶4℃保存试剂一液体10 mL×1瓶4℃保存试剂二液体10 mL×1瓶4℃保存试剂三液体30 mL×1瓶4℃保存标准液液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制：1、标准液：10 μmol/mL 酚标准液，临用前蒸馏水稀释至2.5μmol/mL 备用。
产品说明：AKP/ALP 是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。
AKP/ALP 广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。
在碱性环境中，AKP/ALP 催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm 有特征光吸收；通过测定510nm 吸光度增加速率，来计算AKP 活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）称取约0.1g 组织，加提取液1mL 充分研磨，4℃，10000rpm 离心10min ，取上清液待测。
血液可直接用于测定，或者适当稀释后用于测定。
二、操作步骤1、可见分光光度计预热30min 以上，调节波长到510nm，蒸馏水调零。
2、操作表试剂名称（μL ）测定管对照管空白管标准管蒸馏水--20-标准品---20上清液20---试剂一200200200200试剂二200200200200混匀后置于37℃水浴中保温15min试剂三600600600600上清液-20--混匀后于510nm测定吸光度，分别记为A测定管、A对照管、A空白管、A标准管。
[整理后]亮氨酸氨基肽酶测
![[整理后]亮氨酸氨基肽酶测](https://img.taocdn.com/s3/m/ce1a7b56f46527d3250ce01f.png)
亮氨酸氨基肽酶
【计算】
【计算因子说明】 ΔA/min----每分钟吸光度变化率 e--------- 摩尔消光系数 Vt-----------反应液总体积 (ml) Vs------- 标本体积 (ml) 1000--------变化因数 d--------- 1比色杯光径 (cm) F*-------- 3100 理论因数 【正常值】 血清LAP活性单位：20～60U/L
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亮氨酸氨基肽酶
【临床意义】 LAP是一种蛋白酶，肝内含量很丰富。肝内外胆淤时， LAP活力显著增高，尤其在恶性胆淤时，其活力随病情进 展而持续增高。试剂对肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。 肝坏疽、肝肿瘤、肝炎、乳腺癌、 肝癌、胆道癌、胰腺 癌、子宫内膜癌、卵巢癌明显增高。肝硬化、传染性肝炎 可中度增高，常为参考值的2-4倍。阻塞性黄疸明显增高， 常达参考值5倍以上，并出现在胆红素或ALP上升之前。 不像其他肝功的酶，只能检测血液样本，LAP还可以检测 尿液。在一些病例中可以检测尿液中LAP的变化，而不必 采血。亮氨酸氨基肽酶（LAP）LAP在人体各组织中广泛存 在，在毒性物质或疾病影响到富含LAP的近端小管时，尿 LAP活性最高。肾小球基底膜通透性增高、肾小管上皮细 胞损害、药物致中毒性肾损害和肾肿瘤时LAP增高。肿瘤 治疗后尿LAP增高提示肿瘤复发。对各种肾脏病例进行分 析，发现LA酶
LAP是一种蛋白酶，LAP广泛分布于人体各组织，以 肝、胆、肾、小肠以及子宫肌层内含量最多。肝内外胆淤 时，LAP活力显著增高，尤其在恶性胆淤时，其活力随病 情进展而持续增高。对肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。 【检测方法】 一般采用L-Leucine-p-nitroanilide作为底物通过 LAP水解，通过检测P-nitroaniline来测定LAP的活性，此 方法在六十年代即为推荐方法。
α-淀粉酶(α-AL)活性检测试剂盒说明书 微量法
α-淀粉酶（α-AL）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0615规格：100T/48S产品内容：试剂一：液体20mL×1瓶，室温保存。
若有黄色晶体析出，可适当加热溶解后再用。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入10mL蒸馏水，置于常温水中并加热至煮沸，期间不断搅拌粉剂至溶解。
标准品：粉剂×1支，10mg无水葡萄糖，临用前加1mL蒸馏水，配成10mg/mL葡萄糖标准液。
产品说明：淀粉水解酶，包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。
α-AL(EC 3.2.1.1)随机催化淀粉中α-1,4-糖苷键水解，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉的粘度降低，因此又称为液化酶。
淀粉水解酶催化淀粉水解生成还原糖，还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质，在540nm有吸收峰；通过测定540nm吸光度增加速率，计算淀粉酶活性。
α-AL耐热，但是β-淀粉酶可在70℃钝化15min。
因此粗酶液经过70℃钝化15min，就只有α-AL能够催化淀粉水解。
需自备的仪器和用品：酶标仪或可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、96孔板/微量比色皿、研钵和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：称取约0.1g样本，加0.8mL蒸馏水匀浆；匀浆后在室温下放置提取15min，每隔5min振荡1次，使其充分提取；6000g，室温离心10min，吸取上清液并且加蒸馏水定容至10mL，摇匀，即为淀粉酶原液。
二、测定步骤和加样表（在EP管中依次加入下列试剂）：1、分光光度计预热30min以上，调节波长到540nm，蒸馏水调零。
2、将葡萄糖标准液用蒸馏水稀释为1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078和0.0039mg/mL的标准溶液。
3、按操作表依次加入各试剂：试剂（μL）对照管测定管标准管空白管α-淀粉酶原液7575--蒸馏水---75标准溶液（mg/mL）--75-70℃水浴15min左右，冷却试剂一150---将以上对照管、测定管和试剂二置于40℃恒温水浴中保温10min左右试剂二75757575在40℃恒温水浴中准确保温5min试剂一-150150150混匀，90℃水浴10min，取200μL至96孔板或微量比色皿中，540nm处读取对照管、测定管、标准管、空白管的吸光度，分别记为A对照、A测定、A标准和A空白，计算ΔA测定=A测定-A对照，ΔA标准=A标准-A空白。
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土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性检测试剂盒说明书微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC4025
规格：100T/48S
产品内容：
试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存；临用前加入3mL丙酮溶解。
产品说明：
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。
S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
自备实验用品及仪器：
天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙酮、30目筛（或更小）。
操作步骤：
一、样本处理
土样自然风干，过30-50目筛。
二、测定步骤
1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，波长调至405nm，蒸馏水调零。
2、加样表：
测定管对照管
土样（g）0.030.03
甲苯（μL）1515
震荡混匀，室温静置15min。
试剂一（μL）255255
试剂二（μL）30-
30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。
流水冷却至室温。
试剂二（μL）-30
14000g常温离心10min，取200μL上清于405nm处测定吸光值，分别记为A测定管、A对照管，计算ΔA=A测定管-A对照顾管。
三、酶活计算公式
（1）按微量比色皿计算：
酶活性定义：每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。
S-LAP活性（U/g）=△A÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.507×△A÷W。
ε：对硝基苯胺摩尔消光系数：9.87×103L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，300μL=3×10-4L；W：土样质量，g；T：反应时间，60min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。
（2）按96孔板计算：
酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。
S-LAP活性（U/g）=△A÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.844×△A÷W。
ε：对硝基苯胺摩尔消光系数：9.87×103L/mol/cm；d：96孔板光径，0.6cm；V反总：反应总体积，300μL=3×10-4L；W：土样质量，g；T：反应时间，60min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。