实验十二 去壁低渗法制备植物染色体标本

实验十二 去壁低渗法制备植物 染色体标本
一、实验目的
1.了解植物细胞周期中染色体的动态变化。 2.学习去壁低渗火焰干燥法进行植物染色体制 片的基本原理和方法。
二、实验原理
• 植物染色体的常规压片技术在植物细胞遗传学研究中发挥了重要 作用,特别 是许多植物的染色体计数和组型分析都是用这种方法完 成的,但这种方法也存在一定缺陷,如染色体很难完全散开,容易产 生重叠、变形、断裂，影响显带结果等，给核型分析增加了不少 困难。另外，在当前植物染色体Giemsa分带研究中，由于压片法 很难完全除掉细胞质及细胞壁对染色体的覆盖，因而常常造成 Giemsa带可重复性较低，使植物染色体Giemsa分带研究受到一定 的影响。其次，由于植物染色体处理方法尚不理想，影响到亚显 微结构的研究。因此改革植物染色体压片法是促进植物染色体的 研究，特别是植物染色体Giemsa分带和亚显微结构研究的重要关 键。20世纪70年代以来，一些从事植物染色体研究的学者，参照 动物及人类染色体标本制备技术，开展了对植物细胞去壁、低渗、 火焰干燥方法的研究，取得了很好的结果，目前这种方法已广泛 用于染色体计数、组型分析、显带、显微操作、原位杂交等分子 细胞遗传学研究领域。
三、实验材料
• 水稻（Oryza sativa）、玉米(Zea mays)、蚕豆（Vicia faba）、豌豆(Pisum sativum)种子或洋葱(allium cepa)鳞茎。
四、实验器具与药品
• ⒈器具：恒温培养箱，显微镜，载玻片， 酒精灯。 • ⒉药品试剂：对二氯苯饱和溶液，甲醇， 冰醋酸，70%酒精，纤维素酶，果胶酶， Giemsa原液，1/15mol/L(pH6.8～7.2)， 0.075mol/L KCl。
五、实验步骤
结果观察
• 先在低倍物镜下进行观察，找到较好的 中期分裂相后，直接加显微镜油并转换 为油镜头进行观察（若使用香柏油，则 需加盖玻片，因为在香柏油中染色体会 褪色）。选择较好的分裂相用显微镜上 配备数码照相装置摄影，并将打印照片 附于实验报告中。
蚕豆根尖2n=2x=12
豌豆根尖 2n=2x=14
玉米根尖 2n=2x=20
水稻根尖 2n=2x=24
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五、作业
• 比较动植物低渗法制作染色体玻片的异 同。