细胞膜的渗透性及巨噬细胞的吞噬作用
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定,实验报告（共2篇）
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定,实验报告(共2篇)实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察姓名：李思露学号：131140040一、实验目的1. 通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程；2. 了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法二、实验原理吞噬作用也称为胞吞作用（cellular eating），指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质（直径一般大于250mm）的过程。
许多原生动物通过吞噬作用摄取营养；高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分。
不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨噬细胞吞噬功能强弱不同，个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强弱的重要反映。
吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体，可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物，引起受体胞内区活化，进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用。
内吞内吞体吞噬溶酶体胞吐巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞，原因是，凋亡细胞细胞膜内侧面的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞模式识别受体识别。
吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指数两个指标反映。
吞噬百分率＝吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100％吞噬指数＝吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数三、实验材料、试剂及器材（一）材料：1. 健康小白鼠：6-8周龄健康小白鼠，实验前1~2天，每只腹腔注射4％淀粉肉汤1mL。
2. 抗凝鸡血（二）试剂:1. 4%淀粉肉汤2. D-Hanks液3. 0.85％生理盐水4. 180IU/mL肝素钠生理盐水溶液（三）用品普通光学显微镜、10mL低速离心机、托盘天平、水浴箱（37℃）、5mL一次性注射器、10mL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等四、实验操作1. 巨噬细胞收集：脱颈处死小鼠；腹腔注入2mL生理盐水，揉匀；剪开腹部皮肤，暴露腹膜；用带(转载于: 写论文网:)针头的注射器插进腹腔吸取腹腔液。
细胞实验预习报告
实验一细胞凝集反应实验目的：1.了解细胞膜表面结构。
2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理。
3.学习研究细胞凝集反应的方法。
实验原理：凝集素是一类含糖、并能与糖专一结合的蛋白质，被认为与糖的运输、储存物质的积累、细胞间的互作以及细胞分裂的调控有关。
凝集素使细胞凝集是因为它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞发生凝集。
大多数凝集素存在于储藏器官中，作为一种氮源；对某些植物而言，受到危害时，凝集素作为一种防御蛋白发挥作用。
凝集素与糖结合的活性及专一性决定其功能。
实验材料及试剂：1.马铃薯块茎2.显微镜、粗天平、载玻片、滴管2支、离心管2支3.PBS缓冲液4.2%的红细胞液实验步骤：1.制备鸡血悬液：取1ml鸡血于离心管中，加食盐水至5ml，用滴管吹打均匀，平衡后放入离心机中，2000r/min来离心5min。
离心完毕后，将上清液倾倒再加食盐水至5ml，2000r/min，离心5分钟。
连续重复5次，最后得到的鸡血细胞再加入食盐水至5ml，即为2%的红细胞悬液。
2.取两个玻片，分别向两玻片上滴加一滴鸡血。
向其中一个鸡血玻片上再滴加一滴土豆凝集素，另一玻片不加，作为对照。
然后同时向两玻片滴加一滴PBS缓冲液，静置5min，观察血细胞的凝集反应。
注意事项：1.注意控制加入双凹片孔中的液体的量，以免双凹片的2个孔中液体混合。
2.样品加到孔中后，摇一下双凹片，并进行计时。
实验二叶绿体的分离与荧光现象实验目的:1.通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法。
2.观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，并熟悉荧光显微镜的使用方法。
实验原理：将组织匀浆悬浮在等渗介质中进行差速离心，是分离细胞的常用方法。
由于沉降系数和所受到的离心力的不同以及自身性质的不同，可用不同的转速来分离出不同的细胞器。
荧光显微技术是利用荧光显微镜对可发荧光的物质进行观测的一种技术。
某些物质在一定短波长的光的照射下吸收光能进入激发态，从激发态回到基态时就能在极端的时间内射出比照射光波长更长的光，这种光称为荧光。
组织胚胎学重点名词解释及问答题_0
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 组织胚胎学重点名词解释及问答题组织胚胎学重点名词解释及问答题 2 人体胚胎学总论胚盘 embryonic disc 在受精后第二周胚泡植入时，内细胞群的细胞增殖分化，逐渐形成由上胚层和下胚层紧贴在一起的圆盘状结构称为胚盘或二胚层受精 fertilization 获能精子进入卵内，与卵细胞融合形成受精卵的过程称为受精。
原条 primitive streak 胚发育至第三周初，胚盘外胚层细胞增殖迁移至胚盘外胚层中线上形成一条增厚的细胞索，称为原条。
原条头端略膨大，称为原结，继而在其背侧中线出现一浅沟，称为原沟。
原条的出现确定了胚盘的方位，原条所在一端为尾端。
丛密绒毛膜 chorion frondosum 随着胚胎发育进展，极端滋养层处的绒毛因定位于基蜕膜，血供充足和反复分支，生长茂密，形成丛密绒毛膜，将和基蜕膜一起组成胎盘。
植入 implantation 胚泡埋入子宫内膜的过程称为植入。
发生在受精后的 5-12 天。
胚泡 blastocyst 受精后第四天，桑葚胚进入了子宫腔并继续分裂，细胞间出现小腔隙，腔隙逐渐汇合，形成一个囊泡状的胚，称为胚泡。
胎盘 placenta 是由胚胎的丛密绒毛膜和母体的基蜕膜共同组成的器官，是胎儿和母体进行物质交换的门户，也是重要的内分1 / 24泌器官。
3 上皮组织基膜 basement menmbrane 是上皮基底面与深层结缔组织之间的薄层膜状结构，PAS 反应呈阳性。
由透明板，致密板，网板构成。
4 血液造血干细胞 Hemopoietic stem cell,HSC 骨髓中的干细胞，是最原始的造血细胞，具有高度自我复制能力、多向分化能力、细胞的不均一性，可生成各种血细胞成分，包括红细胞、白细胞和血小板。
实验一 巨噬细胞吞噬功能实验
实验一巨噬细胞吞噬功能实验1、【实验原理】(1)巨噬细胞作为单核吞噬细胞系统的主要细胞，具有活跃的吞噬功能。
能清除体内抗原物质及变性的细胞，在特异性及非特异性免疫中均起重要作用。
MΦ受抗原刺激后活化，可使其吞噬功能明显增强。
(2)此实验采用体内法，即：在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡红细胞30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷美蓝染色，油镜下计数吞噬鸡红细胞的百分数，及观察巨噬细胞中内因被杀死而染为蓝色的鸡红细胞的形态、数目，以判断巨噬细胞中的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异免疫水平。
2、【实验步骤】（1）试验前3d，小白鼠腹腔注射6％无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
（2）实验时，每只小鼠腹腔注射鸡红细胞液1ml，轻揉腹部，使红细胞在腹腔中分布均匀，利于吞噬（3）30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用吸管取出腹腔液，均匀涂布于载玻片上，然后再滴一小滴0.03％冷美蓝溶液，盖上盖玻片。
（4）低倍镜下找到观察区域后，换高倍镜下进行观察，计数3、【实验结果】4、【结果分析】（1）如图所示，在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液，可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并且可以看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。
（2）镜下可见吞噬细胞核呈蓝色，被吞噬的鸡红细胞呈椭圆形，其胞浆呈红色而核被染成蓝色。
(3)由于未将腹腔液和冷美蓝溶液充分混合均匀，使得视野中出现大片深染区域。
总体实验结果较好，视野中央可见清晰的吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞。
5、【注意事项】（1）涂片的薄厚要适当，否则影响计数。
（2）小鼠腹腔注射时不要刺伤内脏。
（3）如小鼠腹腔液过少，可注入适量生理盐水。
（4）剪开小鼠腹腔时应避免出血，否则将影响试验结果。
（5）被吞噬的鸡红细胞时间过长可被消化，时间过短未被吞噬，必须掌握好吞噬作用时间。
实验二双向琼脂扩散实验1、【实验原理】（1）可溶性抗原与相应抗体特异性结合，两者比例适当并有电解质存在及一定的温度条件下，经一定的时间，可形成肉眼可见的沉淀线/环的现象，称为沉淀反应。
2014 细胞生物学实验第一次实验课内容(细胞膜的通透性,巨噬细胞吞噬作用的观察)
实验一细胞膜的通透性【实验目的】了解物质分子质量、脂溶性、电解质和非电解质溶液对细胞膜透性的影响。
【实验原理】细胞膜在不断变化的环境中，必须保持自身的稳恒状态，才能生存。
细胞膜允许一些物质通透，又能降低甚至阻挡另一些物质的通透，所以细胞膜具有选择通透性。
水分子可以自由通过细胞膜，当细胞处于低渗液环境时，水分子大量渗入到细胞内，使细胞膨胀，进而破裂，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这就是溶血现象。
溶血现象可作为测量物质进人血红细胞速度的一种指标。
红细胞置于乙二醇、丙三醇（甘油）、葡萄糖等摩尔浓度的高渗液中，乙二醇等分子进入血红细胞，使细胞内的渗透性活性分子的浓度大为增加，继而导致水的摄入，细胞膨胀，细胞膜破裂，发生溶血。
溶血现象发生的快慢与进入细胞的物质的分子质量大小有关。
分子质量大的进入细胞慢，发生溶血所需的时间也长。
非极性化合物易溶于脂溶剂，但在水中溶解度甚小。
碳链越长，脂溶性越大。
一种化合物在脂溶剂中的溶解度与其在水中溶解度之比，称为分配系数。
各种非电解质溶液，只要单位体积中所含的分子数相同，就具有相同的渗透压。
电解质溶液，如氯化钠与葡萄糖分子数相等时，氯化钠产生的渗透压要大得多。
具有相同渗透压的某非电解质溶液与某电解质溶液浓度之比，称为等渗系数，用i来表示。
i=葡萄糖的等渗摩尔浓度/氯化钠的等渗摩尔浓度发生溶血者为低渗液，所以把发生溶血的前一管溶液的浓度近似视为红细胞等渗摩尔浓度。
【实验仪器、材料和试剂】(1) 仪器、用具：小烧杯、试管、试管架、刻度吸管、注射器、秒表。
(2) 材料：含适量肝素的鸡血。
(3) 试剂：l mol/L乙二醇水溶液，l mol/L丙三醇水溶液，l mol/L 葡萄糖水溶液，3 mol/L甲醇，3 mol/L乙醇，3 mol/L 丙醇，1/8 mol/L、1/9 mol/L、1/10 mol/L、1/12 mol/L、1/14 mol/L葡萄糖溶液， 1/12 mol/L、1/13 mol/L、1/14 mol/L、1/16 mol/L、1/18 mol/L氯化钠溶液。
巨噬细胞作用机制-概述说明以及解释
巨噬细胞作用机制-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述巨噬细胞是一种重要的免疫细胞类型，主要存在于机体的组织间隙和器官中。
它们被认为是机体的第一道防线，参与了多种免疫反应和炎症过程。
巨噬细胞通过吞噬病原微生物、清除细胞的废弃物以及调节炎性免疫反应等多种途径来发挥其作用。
巨噬细胞的活性和功能特点决定了它们在免疫应答中的重要地位。
巨噬细胞可以通过识别病原微生物的表面标志物，如细菌的LPS、真菌的β-葡聚糖等，来介导吞噬作用。
这种吞噬过程可以有效地摧毁入侵的病原微生物，防止它们进一步扩散和感染。
同时，巨噬细胞还可以分泌多种抗菌蛋白和抗炎因子，如巨噬细胞激活因子、一氧化氮等，来增强抗菌和抗炎反应。
此外，巨噬细胞还能够执行胞吞作用，吞噬细胞内的病原微生物，如细胞内寄生的病毒和细胞表面的病原微生物。
通过这种方式，巨噬细胞可以有效地清除感染的细胞，并保持整个机体的免疫环境。
巨噬细胞通过与其他免疫细胞的相互作用来参与多种免疫反应。
它们可以与T细胞、B细胞和自然杀伤细胞等免疫细胞相互作用，协同发挥免疫调节的作用。
巨噬细胞还可以释放多种免疫调节分子，如细胞因子、趋化因子等，来影响其它免疫细胞的活性和功能。
总之，巨噬细胞作为机体免疫系统中的重要成分，通过吞噬、胞吞和调节免疫反应等多种机制来对抗病原微生物的入侵和组织的损伤。
巨噬细胞的活性和功能特点使其在炎症反应和免疫应答中起到关键的作用。
尽管巨噬细胞的作用机制已经被广泛研究，然而仍有许多问题需要进一步探索和解答。
未来的研究将有助于更好地理解巨噬细胞的功能以及它们在免疫疾病和炎症性疾病中的作用，为疾病的治疗和预防提供新的思路和方法。
1.2 文章结构文章结构部分的内容如下：文章结构部分主要介绍本文的组织结构和内容安排。
通过清晰的结构和合理的安排，读者可以更好地理解文章的主题和内容。
首先，本文的结构可以分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分将提供对于巨噬细胞作用机制主题的概述，说明本文的写作意图和目的。
实验四 细胞膜的通透性和巨噬细胞的吞噬作用
巨噬细胞的吞噬作用
实验步骤
1．实验前1天取小白鼠腹腔注射6％蛋白胨1毫升。
2．小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液1ml。
2. 30分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠。
3. 将小鼠置于解剖盘中，剪开腹部，用吸管吸取腹腔液，滴 1滴于载玻片上，加盖玻片后即可观察。
实 验 报 告 及 思 考 题
实验报告：
分析讨论
从溶质分子的脂溶性、是否带电荷、分子大小等
特点，分析上述溶质分子能否跨膜运输，其跨膜 运输的方式，以及造成红细胞溶血的时间差异。
第二部分：巨噬细胞的吞噬作用
实验原理
吞噬作用原来是单细胞动物摄取营养物质的方式， 也是一种原始的防御方式。随着进化，在高等哺乳 动物中产生了两种专司吞噬作用的细胞（巨噬细胞 和嗜中性粒细胞），这成为非特异免疫功能的重要 组成部分。 巨噬细胞是由骨髓干细胞分化而成的，后进入血液 进入组织。 巨噬细胞具有趋化性，能响应病原体或异物入侵， 产生活跃的变形运动，主动向病原体移动。
方向取决于细胞内外的渗透压。 当细胞外的渗透压＞细胞内的渗透压，水分子由 细胞内外流，细胞表现为失水萎缩现象； 当细胞外的渗透压＜细胞内的渗透压时，水分子 由细胞外内流，细胞表现为充水膨胀甚至破裂现 象。
实验原理
红细胞放在不同的溶液中，由于细胞膜对不同溶
质的通透性不同，有的溶质可以渗入，有的溶质
0.17 mol/L NaCl
0.05 mol/L NaCl 0.4 mol/L NaCl
0.17 mol/L NaNO3 0.17 mol/L NH4AC 0.17 mol/L NH4Cl 0.34 mol/L 葡萄糖 0.34 mol/L 甘油 0.34 mol/L 乙醇 0.34 mol/L 丙酮
实验四 膜的通透性和巨噬细胞的吞噬作用
实验四膜的通透性和巨噬细胞的吞噬作用细胞膜又称细胞质膜（plasma membrane),是指围绕在细胞最外层，由脂双层分子和蛋白质组成的生物膜。
细胞膜在细胞与环境之间形成一个通透性的屏障，使细胞具有一个相对稳定的内环境，同时还在细胞与环境之间的物质运输，能量转换及信息传递过程中起着决定性的作用。
小分子物质进出细胞主要通过简单扩散，协助扩散，主动运输及基团转移等方式，而大分子和颗粒物质主要通过胞吞作用和胞吐作用出入细胞。
吞噬作用是细胞胞吞作用的一种类型，是单细胞动物摄取营养物质的主要方式，也是高等动物的一种非特异性免疫防护机制。
高等动物中只有某些特化的细胞如巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能，这些细胞起着防御微生物的侵染和清除衰老的细胞或细胞碎片的作用。
一、实验目的(一)掌握细胞膜对物质通透性的一般规律。
(二)了解并掌握溶血现象及其发生机制。
(三)了解巨噬细胞在非特异免疫中的作用。
二、实验原理(一)细胞膜的通透性 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障。
它是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。
各种物质出入细胞的方式是不同的，在简单扩散的跨膜运动中，跨膜物质首先溶解在膜脂中，再从膜脂一侧扩散到另一侧，最后进入细胞质水相中。
水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，这种现象就是渗透。
渗透作用是细胞膜的主要功能之一。
将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内，可使细胞膨胀而破裂，血红蛋白释放到介质中，红细胞悬液由不透明变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。
将红细胞放在某些高渗溶液中，由于红细胞膜对各种溶质的通透性不同，疏水性强的极性小分子物质如乙醇，甘油能够较快速地进入红细胞，使细胞内地渗透性活性分子地浓度大为增加，继而导致水地摄入，导致溶血现象；而在高渗地电解质溶液中，由于电解质在水中解离成带电荷的离子使得这些电解质的渗透作用大大降低，过膜速度缓慢甚至不能过膜，所以不易发生溶血现象。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
华南师范大学实验报告
学生姓名何茂辉学号20062501302
专业生物科学年级、班级06科三
课程名称细胞生物学实验实验项目
实验类型□验证□设计□综合实验时间09 年 5 月19 日
实验指导老师尤蓉、周仁超实验评分
细胞膜的渗透性及巨噬细胞的吞噬作用
实验目的：
1.通过红细胞的溶血过程的观察,了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞膜
的速度。
2.通过小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程，了解巨噬细胞对大分子或颗粒物质
的内吞作用。
实验原理：
1.红细胞在低渗液中，细胞很快吸水而胀裂，称为溶血。
在等渗液中，由于
有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高，细胞也会吸水胀裂，由于各种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同。
2.高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细胞和嗜中性粒细胞)，专司吞噬
作用，为非持异免疫功能的重要组成部分。
3.小鼠腹腔注射淀粉肉汤液，可诱导巨噬细胞大量产生,增强巨噬细胞吞噬活
性。
实验步骤：
细胞膜的渗透性(兔红细胞)
1.取1mL兔的抗凝全血于50mL小烧杯中，再加入10mL0.17 mol/L氯化钠，稀
释兔血制成兔的红细胞悬液，观察它的特点为一种不透明的红色浑浊液体。
2.取1支试管加入10ml蒸馏水，再加入1ml红细胞悬液，摇动2次混匀，可
见溶液由不透明的红色迅速变成红色澄清液
3.取6支试管贴上标签，依次加入下列等渗溶液10ml：①0.32M甲醇、②0.32M
乙醇、③0.32M丙醇、④0.32M乙二醇、⑤0.32M甘油、⑥0.32M葡萄
糖
4.向每支试管加入1ml红细胞悬液，摇动2次混匀，观察是否有溶血现象发生，
记下溶血时间并给予分析
小鼠巨噬细胞的吞噬作用观察
1.实验前一天向小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤液(含台盼蓝)1ml
2.鸡红细胞悬液制备：取抗凝全血1mL，移入10mL离心管,加入4mL生理盐水
混匀, 1500rpm离心5 min。
洗涤2次,最后按压积红细胞体积加生理盐水配成1%鸡红细胞悬液
3.小鼠腹腔注射1％的鸡红细胞悬液1ml，轻揉腹部使鸡红细胞分散
4.20～30min后,颈椎脱臼法处死小鼠
5.将小鼠置于解剖盘中，剪开腹腔，把内脏推向一侧，加适量生理盐水与腹
腔液混匀,用吸管吸取腹腔液于试管或小烧杯中备用
6.吸取腹腔液1～2滴，制作临时装片
7.镜检
结果与分析：
1、
2、
思考题
1、溶液的渗透压主要与哪些因素有关?对简单盐溶液如何粗略计算出其渗透压? 溶液的渗透压主要与溶液中溶质颗粒总数有关。
渗透压=ciRT或n/VRT(ci是解离常数、R是气体常数、T是绝对温度)，可以通过这两个公式粗略计算出简单盐溶液的渗透压。
2、实验前一天向小白鼠腹腔注射含台盼蓝淀粉肉汤液的目的是什么?
注射含台盼蓝淀粉肉汤液的目的是诱导巨噬细胞大量产生,增强巨噬细胞吞噬活性。