麦康凯琼脂培养基
各种培养基及部分结果判读 HHT
各种培养基及部分结果判读1、营养琼脂（NA）用于一般细菌或真菌的培养及传代，细菌或真菌可在该培养基上形成菌落。
（注：主要做院感监测）2、5%羊血琼脂培养基（SBA）用于分离标本中一般细菌及需要血液成分的部分苛氧菌，多数细菌能在该培养基上形成具有典型特征的菌落，部分细菌能形成溶血现象。
根据溶血特征分为α溶血、β溶血、γ溶血，溶血特征有助于细菌鉴定。
3、巧克力培养基（CA）由于培养基中的血液受热破坏，血红素（X）及辅酶（V）释放出来,适合嗜血杆菌、奈瑟菌等需特殊生长因子细菌的分离培养。
大多数苛氧菌在该培养基上生长良好。
4、麦康凯培养基（MAC）该培养基属于弱选择性培养基，胆盐抑制革兰氏阳性细菌及部分真菌生长，对大部分肠道细菌及非发酵菌无抑制作用。
常作为革兰氏阴性杆菌的分离和初步鉴别之用，发酵乳糖的细菌在培养基上产粉色菌落，不发酵乳糖的菌落呈无色。
结果判读：大肠埃希菌：粉红色大菌落鼠伤寒沙门菌：无色中等军菌落奇异变形菌：淡橙色大菌落5、伊红亚甲蓝琼脂（EMB）该培养基是一种含酸碱染料的弱选择性培养基，伊红亚甲蓝既是指示剂又是选择剂，对革兰氏阳性菌有抑制作用。
不分解乳糖的细菌为无色或者灰白色。
用于分离肠道细菌及非发酵菌。
结果判读：铜绿假单胞菌：无色小菌落大肠埃希菌：紫红色有金属光泽的大菌落伤寒沙门菌：灰白色中等菌落球菌：不生长6、SS培养基该培养基为常用的弱选择性肠道致病菌分离鉴定培养基，用于从粪便标本或者环境中分离鉴定沙门氏菌和志贺氏菌。
结果判读：大肠埃希菌：红色菌落痢疾志贺菌：无色透明中等菌落鼠伤寒沙门菌：无色菌落，有黑色中心金葡菌：不生长7、XLD培养基XLD培养基即木糖-赖氨酸-去氧胆酸盐培养基，用于从粪便标本或环境标本中分离鉴定沙门氏菌和志贺氏菌。
原理是加入去氧胆酸钠抑制某些肠道正常菌群来增加选择性。
正常肠道菌群因发酵木糖、蔗糖和乳糖呈黄色菌落，志贺和一些变形杆菌不发酵三种糖中的任何一种，而产生红色菌落。
几种常见培养基作用
1.中国蓝平板：含有牛肉粉、蛋白胨、乳糖、琼脂、氯化钠、中国蓝、玫瑰红等成份。
是一种弱选择性（亦有学者称为无抑制性）选择培养基。
成份中的中国蓝为指示剂，玫瑰红为弱抑制剂，仅能抑制革兰阳性菌生长，而对大肠杆菌没有抑制作用，发酵性革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同，在此平板上的菌落颜色不同，便于鉴别菌种。
根据菌落形态，可做出相应的处理或报告。
例如：大肠埃希菌菌落呈蓝色；痢疾志贺菌呈淡红色；鼠伤寒沙门菌呈淡红色。
2.巧克力平板：普通营养琼脂成份添加进氯化血红素，万古霉素，辅酶A。
用途：除可以分离奈瑟菌，嗜血杆菌外，由于加入了万古霉素，可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长，在分离培养上具有重要意义，不能用血平板来替代。
巧克力平板含有嗜血杆菌生长需要的营养因子X因子和V因子。
其原理为：绵羊血中的V因子通常处于被抑制状态，加热到80～90℃12Min即可破坏红细胞膜上的不耐热抑制物，可使V因子释放，故嗜血杆菌在加热的血琼脂培养基即巧克力琼脂培养基上生长较佳。
3. TCBS：含酵母膏粉蛋白胨氯化钠柠檬酸钠硫代硫酸钠胆酸钠牛胆粉蔗糖柠檬酸铁溴麝香草酚兰麝香草酚兰琼脂；其中：氯化钠可刺激弧菌的生长；蔗糖是可发酵的糖类；胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH（8.6）可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。
利用指示剂来区分是否发酵蔗糖：副溶血性弧菌不发酵蔗糖，菌落呈蓝绿色。
霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色。
TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离，是GB2008、SN标准指定培养基。
4.MAC平板：即麦康凯琼脂培养基，用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典)，主要成分：蛋白胨脙胨猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠琼脂乳糖1%结晶紫水溶液0.5%中性红水溶液。
麦康凯平板的原理：利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长，而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用．利用乳糖发酵，中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开．沙门菌及志贺菌呈无色菌落，大肠埃希菌呈桃红色菌落．SS培养基2.原理培养基中牛肉膏、蛋白胨等为营养物;煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸钠等抑制非病原菌生长,而胆盐能促进某些病原菌生长。
常用平板
3. TCBS：含 酵母膏粉 蛋白胨 氯化钠 柠檬酸钠 硫代硫酸钠 胆酸钠 牛胆粉 蔗糖 柠檬酸铁 溴麝香草酚兰 麝香草酚兰 琼脂；其中：氯化钠可刺激弧菌的生长；蔗糖是可发酵的糖类；胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH（8.6）可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。利用指示剂来区分是否发酵蔗糖：副溶血性弧菌不发酵蔗糖，菌落呈蓝绿色。霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色。TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离，是GB2008、SN标准指定培养基。
PS:ss是 沙门氏菌 志贺氏菌的意思 .沙门 志贺氏培养基。
对于培养基的理解特别是鉴别性或选择性的培养基，关键的地方在于理解引起变色的原因（一般是对糖的利用引起）及起选择作用的原因（抑霍乱的传染性极强，易导致疾病大流行。一旦发生大流行，短时间出现的大量病人很快会摧毁我们的防治体系，严重危害社会安全，所以有疑似患者要及时上报。
4.MAC平板：即麦康凯琼脂培养基，用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典)，主要成分：蛋白胨 脙胨 猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠 琼脂 乳糖 1%结晶紫水溶液 0.5%中性红水溶液。麦康凯平板的原理：利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长，而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用．利用乳糖发酵，中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开．沙门菌及志贺菌呈无色菌落，大肠埃希菌呈桃红色菌落．
PS:中国蓝平板本身为淡紫色或淡红色（与PH值有关），在乳糖被发酵后，PH变低，因而中国蓝变蓝。
麦康凯琼脂对照培养基使用说明
麦康凯琼脂对照培养基麦康凯琼脂对照培养基用途：培养基适用性实验麦康凯琼脂对照培养基外观：本品为肉粉色均一粉末，加入水中混悬均匀，灭菌后融化状态为半透明棕红色液体麦康凯琼脂对照培养基酸度：本品灭菌后pH7.4，符合2010版中国药典灭菌后pH7.2±0.2的规定。
麦康凯琼脂对照培养基注意事项：1.检查平板内是否干裂或染菌，如长菌请勿使用；2.请在洁净的环境下操作，避免杂菌干扰；3.在冰箱储存很久的培养基容易出现一些冷凝水，请在洁净的环境下将水倒出，然后在培养箱放置10-30Min，待其表面干燥后再接种；或在使用前，提前一到两周放置室温即可；4.弃物处理：使用后应高压灭菌或焚烧后按一般垃圾处理，也可按专业技术人员指示方法处理。
保存：避光保存，放于阴凉干燥处。
麦康凯琼脂对照培养基其他相关对照培养基：硫乙醇酸盐流体对照培养基改良马丁对照培养基营养琼脂对照培养基营养肉汤对照培养基玫瑰红钠琼脂对照培养基胆盐乳糖对照培养基甘露醇氯化钠琼脂对照培养基沙氏葡萄糖肉汤对照培养基麦康凯琼脂对照培养基沙门、志贺菌属琼脂对照培养基4-甲基伞形酮葡萄苷酸（MUG)对照培养基沙氏葡萄糖琼脂对照培养基念珠菌显色对照培养基绿脓菌素测定用对照培养基基础梭菌增菌对照培养基哥伦比亚琼脂对照培养基溴化十六烷基三甲铵琼脂对照培养基基础四硫磺酸钠亮绿对照培养基基础乳糖发酵对照培养基酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂（YPD）对照培养基胰酪大豆胨琼脂对照培养基胰酪大豆胨肉汤对照培养基R2A琼脂对照培养基三糖铁琼脂对照培养基麦康凯液体对照培养基紫红胆盐葡萄糖琼脂对照培养基肠道菌增菌液体对照培养基木糖赖氨酸脱氧胆酸盐对照培养基。
微生物限度检验记录
检验日期
报告日期
培养基及批号
胰酪大豆胨琼脂培养基
沙氏葡萄糖琼脂培养基
胰酪大豆胨液体培养基
麦康凯液体培养基
麦康凯琼脂培养基
pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液
供试品溶液制备
取供试品10g，加pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1：10的供试液，取上液1ml，加pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液至9ml，混匀，作为1：100的供试液。
麦康凯液体培养基
麦康凯琼脂培养基
pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液
供试品溶液制备
取供试品，用开孔面积为20cm2的消毒过的金属模板压在内层面上，将无菌棉签用氯化钠注射液稍蘸湿，在板孔范围内擦抹5次，换1支棉签再擦抹5次，每个位置2支棉签共擦抹10次，共擦抹5个位置100cm2。每支棉签抹完后剪断，放入盛有30ml氯化钠注射液的锥形瓶中，将所有棉签放入瓶中后迅速摇晃1分钟，即得供试品溶液。
供试品
阳性对照
阴性对照
结果
□检出大肠埃希菌□未检出大肠埃希菌（规定：不得检出）
检验项目
四、沙门菌
胰酪大豆胨液体培养基增菌培养
（33℃，24h）
RV沙门菌增菌液体培养基选择培养
（33℃，24h）
木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基分离培养（33℃，48h）
三糖铁琼脂培养基
鉴别（33℃，24h）
供试品
阳性对照
麦康凯液体培养基选择培养
（42℃，48h）
麦康凯琼脂培养基分离培养
（33℃，72h）
供试品
阳性对照
阴性对照
结果
□检出大肠埃希菌□未检出大肠埃希菌（规定：不得检出）
检验项目
四、金黄色葡萄球菌
临床医学检验技师初级(师)微生物学及检验(细菌感染的病原学诊断)-试卷1
临床医学检验技师初级【师】微生物学及检验【细菌感染的病原学诊断】-试卷1(总分：60分，做题时间：90分钟)一、 A1型题(总题数：30，score:60分)1.下列革兰染液成分不包括【score:2分】【A】稀释复红【B】结晶紫【C】95％酒精【D】卢戈碘液【E】5％石炭酸复红【此项为本题正确答案】本题思路：革兰染液成分有结晶紫、95％酒精、卢戈碘液、稀释复红。
2.临床上最常见的真菌培养基是【score:2分】【A】脑心浸膏琼脂【B】沙保琼脂【此项为本题正确答案】【C】尿素琼脂【D】马铃薯葡萄糖琼脂【E】玉米粉聚山梨酯一80琼脂本题思路：本题考查真菌的临床培养。
真菌培养常用的培养基有沙保琼脂、脑心浸膏琼脂、米粉吐温琼脂、蔡氏培养基、马铃薯葡萄糖琼脂等，其中沙保琼脂适用于分离绝大多数真菌，应用广泛。
3.下列关于培养基性能试验说法不正确的是【score:2分】【A】分离培养基应每周测试1次【B】鉴别培养基需每批及每月测试1次【C】如需观察多项性能，可使用多种菌株完成【D】每批新购、新配的培养基，均应用已知性质的标准菌株进行预测【E】用于测试分离培养基性能的菌株，原则上应使用预期最容易生长的细菌菌种，并且应多量生长【此项为本题正确答案】本题思路：本题考查对培养基性能试验的理解。
用于测试分离培养基性能的菌株，原则上应使用预期最难生长的细菌菌种，并且应少量生长，其余均正确。
4.专性需氧菌经人工液体培养基培养后，可观察到的生长现象是【score:2分】【A】液体表面形成菌膜【此项为本题正确答案】【B】液体底部有沉淀【C】液体变色【D】可闻到腐败性的恶臭【E】液体分层本题思路：专性需氧菌在液体培养基中培养时，因生长代谢时需要氧气，故呈表面生长，常在液体表面形成菌膜。
5.中国蓝培养基属于【score:2分】【A】基础培养基【B】营养培养基【C】鉴别培养基【D】选择培养基【此项为本题正确答案】【E】增菌培养基本题思路：中国蓝平板可抑制革兰阳性菌，有选择地促进革兰阴性细菌生长，是很好的弱选择培养基。
鉴别培养基
麦康凯琼脂麦康凯可能是世界上常用的一种鉴别培养基，它主要通过乳糖发酵鉴别肠道致病菌，还能抑制革兰氏阳性菌生长，发酵乳糖的细菌能使培养基变红，这是因为细菌发酵乳糖产酸而使培养基的PH值变成酸性的。
不发酵乳糖的细菌没有颜色的变化。
麦康凯抑制阳性菌的生长，是因为其中加了结晶紫。
MACCONKEY AGARMacConkey agar is probably the most popular solid differential medium in the world. It is mainly used in identification of lactose fermenting, Gram-negative enteric pathogens and for inhibiting growth of Gram-positive organisms. Bacterial colonies that can ferment lactose turn the medium red. This red color is due to the pH indicators response to the acidic environment created by fermenting lactose. Organisms that do not ferment lactose do not cause a color change.配方g/l蛋白胨 20.0 乳糖 10.0 胆盐 5.0 氯化钠 5.0 中性红 0.075 琼脂 12.0 pH 7.4±0.配制取52克CM7，加1升蒸馏水，加热至溶解完全，121℃灭菌15分钟。
待琼脂表面变干方可接种。
特点CM7符合世界卫生组织（WHO）推荐的培养基。
工业用于检测水、乳制品和生物标本的大肠菌群和肠道致病菌，临床用于分离肠细菌。
此培养基可抑制革兰氏阳性菌，可区分乳糖发酵性和非发酵性菌。
常见微生物培养基
常见微生物培养基1. 肉汤培养基（Nutrient Broth）：这是一种常用的基础培养基，适用于多种微生物的生长。
它含有牛肉浸膏、酵母提取物和蛋白胨等成分，提供了丰富的氮源、维生素和生长因子。
2. 肉汤琼脂（Nutrient Agar）：在肉汤培养基的基础上添加琼脂，使其成为固体培养基。
这种培养基常用于分离和鉴定微生物，因为固体培养基可以形成单个菌落，便于观察和计数。
3. 血琼脂（Blood Agar）：在肉汤琼脂中加入5%的脱纤维羊血或马血。
这种培养基对于需要氧气和营养丰富的环境的微生物（如链球菌和肺炎球菌）特别有效。
4. 麦康凯琼脂（MacConkey Agar）：这是一种选择性培养基，用于分离和鉴定肠道杆菌。
它含有胆盐和结晶紫，可以抑制革兰氏阳性菌的生长，同时促进革兰氏阴性菌的生长。
5. 沙保罗琼脂（Sabouraud Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有葡萄糖、蛋白胨和琼脂。
它还含有抗生素氯霉素，可以抑制细菌的生长。
6. 鲁哥氏碘液（Lugol's Iodine）：这是一种用于检测细菌的染色剂，通常与革兰氏染色法一起使用。
它可以帮助区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
7. 马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有马铃薯提取物和葡萄糖。
它为真菌提供了丰富的碳水化合物和氮源。
8. 三糖铁琼脂（Triple Sugar Iron Agar）：这是一种用于鉴定肠道杆菌的培养基，含有乳糖、蔗糖和葡萄糖。
通过观察细菌在培养基上的生长情况和产酸情况，可以区分不同的肠道杆菌。
9. 革兰氏染色法（Gram Stain）：这是一种用于区分细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的颜色，可以区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
10. 荧光染色法（Fluorescent Stain）：这是一种用于检测细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的荧光颜色，可以区分不同的细菌种类。
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编号：022142
中文名称：麦康凯琼脂培养基（药典）
英文名称：MacConkey Agar
用途：
供分离发酵乳糖的革兰氏阴性肠道杆菌。
（《中华人民共和国药典》2010年版）原理：
胨提供碳氮源、维生素和生长因子;牛胆盐可抑制革兰氏阳性菌的生长; 氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；乳糖为可发酵的糖类；中性红是pH指示剂，细菌发酵乳糖产酸时菌落呈粉红色并在菌落周围出现胆盐沉淀的浑浊圈。
微生物图鉴：
配方（每升）：
胨20.0g
牛胆盐5.0g
氯化钠5.0g
琼脂14.0g
乳糖10.0g
中性红0.03g
最终pH 7.2 ± 0.2
使用方法：
1、称取本品54.0g，加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121T高压灭菌15mi n。
2、待培养基冷至50〜55°C倾注灭菌平皿，待凝固后，备用。
3、取待检样品划线接种于麦康凯平板。
4、将平板置培养箱于30〜35 C培养18〜24h。
5、观察结果。
在做致泻大肠埃希氏菌微生物检验时，观察结果不但要注意乳糖发酵的菌落，同时也要注意不发酵和迟缓发酵的菌落。
质量控制：
下列菌株经30〜35C培养18〜24h，生长情况如下表：
菌名菌号生长状况菌落特征
大肠埃希氏菌CMCC(B)44102 良好粉红或红，周围有混浊胆盐沉淀圈
弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864 良好粉红或红，周围有混浊胆盐沉淀圈
鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115 良好无色半透明
金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003 不长或差
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。
贮存期三年
规格：250g。