生物分离与纯化技术模拟试卷十一答案
生物分离与纯化技术模拟试卷十一答案
生物分离与纯化技术模拟试卷十一答案装订线1．盐析：23．451A0.02～10μ2A B C D 3A ．羟型阴B 4A1％～10％5A 、阴性洗脱B 6A 、水B 、甲醇C 7．在一定的pH 和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作(A) A 、KS 盐析法B 、β盐析法C 、重复盐析法D 、分部盐析法 8．在超滤过程中，主要的推动力是（C ） A 、浓度差B 、电势差C 、压力D 、重力9．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（A ） A 、粗且长的B 、粗且短的C 、细且长的D 、细且短的10．如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下面哪种细胞破碎的方法最佳？（C ） A.匀浆法B.超声波法C.渗透压休克法D.冻融法 11．盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是（B ） A ．分辨率高B ．变性作用小C ．杂质易除D ．沉淀易分离 12．磺酸型阳离子交换树脂可用于分离（E ） A 、强心苷B 、有机酸C 、醌类D 、苯丙素E 、生物碱13．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（C ） A ．离子交换色谱B ．亲和色谱C ．凝胶过滤色谱D ．反相色谱14．洗脱体积是（C）。
A、凝胶颗粒之间空隙的总体积B、溶质进入凝胶内部的体积C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积15．下列细胞破碎的方法中，哪个方法属于非机械破碎法(A)A.化学法B.高压匀浆C.超声波破碎D.高速珠磨三、判断题（每小题1分，共10分）2．阴树脂易受有机物污染，可用有机溶剂浸泡或淋洗。
（×）3．吸附力较弱的组分，有较低的Rf值。
（×）4．凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定。
（√）5．等密度梯度离心中，梯度液的密度要包含所有被分离物质的密度。
（√）6．疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液（√）7．采用溶剂提取法提取中草药有效成分时，选择溶剂的原则是“相似相溶原则”。
生物分离纯化习题 (1)
第一章绪论一、名词解释生物物质生化分离技术二、填空题1.生物物质的来源、、、、。
2.生物分离纯化工作按照生产规模可分为、、三个层次。
3.蛋白质保存方法、、。
三、选择题1.选择生物物质分离纯化技术和工艺的依据（）A、物理性质B、化学性质C、生物学性质D、生理性质2、生物活性越高的成分，一般它在物质中的含量越（）。
A、高B、低C、一般D、无法提取3分离纯化过程需要加入（）保持生物大分子的活性。
A、糖类B、缓冲溶液C、中性盐D、半胱氨酸四、简答题1.生物分离纯化的特点？2.生物分离纯化原材料的选择要注意哪些问题？3.影响生物产品保存的主要因素？第二章预处理技术一、名词解释凝聚作用絮凝作用凝聚值二、填空题1．组织与细胞的破碎方法有、、、。
2.降低发酵液黏度的方法、。
3.加入助滤剂的方法、。
4.除去杂蛋白的常用方法、、。
5.凝聚值越小，则凝聚剂的凝聚能力越。
6.检查细胞破碎效果的方法有、、。
三、选择题1.大多数蛋白质的等电点在（）范围。
A、酸性B、碱性C、中性D、不固定2.加入助滤剂可使滤液（）A、滤速增大B、滤速减小C、增加成本 D 、保持渗透性3.除去钙离子的试剂（）A、草酸B、草酸钙C、草酸钠D、铁离子4．分离DNA、RNA混合物（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法5．分离大小不同、密度不同的物质（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法6．分离大小相近、密度不同的物质（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法7．分离大小不同、密度相近的物质（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法四、简答题1.改变发酵液过滤特性的方法有哪些？2.影响絮凝效果的因素有哪些？3.超声波破碎法的特点？4.进行细胞破碎所使用的表面活性剂有哪些？5.影响离心效果的因素有那些？6.常用的离心设备有哪些？第三章固相析出分离法一、名词解释（每题2分）1．结晶2．盐析法二、填空（每空1分）1．常用的盐析用盐有、、2．盐析方法有两种类型，分别为、，其中用于提取的前期，用于提取的后期3．盐析用中性盐的浓度多用来表示，也就是把饱和时的浓度看作1或100%。
生物分离技术题库(带答案)
题库名称：生物分离技术一、名词解释1．质量作用定律：化学反应的速率与参加反应的物质的有效质量成正比。
2．凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。
3．分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一常数叫分配系数。
4．干燥速率：干燥时单位干燥面积，单位时间内漆画的水量。
5．CM-Sephadex C-50：羧甲基纤维素、弱酸性阳离子交换剂，吸水量为每克干胶吸水五克。
6．絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程7．过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常用方法之一。
8．萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的9．吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。
10．反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。
11．离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离12．离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高13．离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。
14．固相析出技术：利用沉析剂（precipitator）使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定形固体沉淀的过程。
15．助滤剂：助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤16．沉降：是指当悬浮液静置时，密度较大的固体颗粒在重力的作用下逐渐下沉，这一过程成为沉降17．色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），达到分离的目的。
生物分离与纯化技术模拟试卷五答案
生物分离与纯化技术模拟试卷五答案装订线一、名词解释（每小题3分，共15分)1．离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层,实现固液分离2．固相析出技术:利用沉析剂使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定形固体沉淀的过程。
3．乳化液膜系统：乳化液膜系统由膜相、外相和内相三相组成，膜相由烷烃物质组成，最常见的外相是水相，内相一般是微水滴。
4．反相色谱：是指固定相的极性低于流动相的极性，在这种层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而先从柱中流出.5．等电点：是两性物质在其质点的净电荷为零时介质的pH 值,溶质净电荷为零，分子间排斥电位降低,吸引力增大，能相互聚集起来，沉淀析出，此时溶质的溶解度最低。
二、单选题（每小题1分,共15分）1．在蛋白质初步提取的过程中,不能使用的方法（C)。
A 、双水相萃取B 、超临界流体萃取C 、有机溶剂萃取D 、反胶团萃取2．离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂，通过（A ）将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上. A 、静电作用 B 、疏水作用 C 、氢键作用 D 、范德华力 3．丝状(团状）真菌适合采用(A ）破碎.A 、珠磨法B 、高压匀浆法C 、A 与B 联合D 、A 与B 均不行 4．真空转鼓过滤机工作一个循环经过(A ）。
A 、过滤区、缓冲区、再生区、卸渣区B 、缓冲区、过滤区、再生区、卸渣区C 、过滤区、缓冲区、卸渣区、再生区D 、过滤区、再生区、缓冲区、卸渣区 5．阴离子交换剂（C ）.A 、可交换的为阴、阳离子B 、可交换的为蛋白质C 、可交换的为阴离子D 、可交换的为阳离子 6．凝胶色谱分离的依据是(B ）。
A 、固定相对各物质的吸附力不同B 、各物质分子大小不同C 、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D 、各物质与专一分子的亲和力不同7．依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。
生物分离-题库+答案
一、填充题1. 生物产品的分离包括R emoval of insolubles(固液分离)，I solation(浓缩)，Putification(纯化)和P olishing(精制)；2. 发酵液常用的固液分离方法有离心和过滤等；3. 离心设备从形式上可分为管式，套筒式，碟片式等型式；4. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为微滤膜，超滤膜，纳滤膜和反渗透膜；5. 多糖基离子交换剂包括葡聚糖离子交换剂和离子交换纤维素两大类；6. 工业上常用的超滤装置有板式，管式，螺旋卷式和中空纤维式；7. 影响吸附的主要因素有吸附剂的性质，温度，溶液PH值，盐浓度吸附物浓度，和吸附剂用量；8. 离子交换树脂由载体，活性基因和可交换离子组成。
9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是引发剂；甲叉双丙烯酰胺的作用是交联剂；TEMED的作用是增速剂；10 影响盐析的因素有溶质种类，溶质浓度，PH值和温度；11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有自然起晶，刺激起晶法和晶种起晶法；12.简单地说，离子交换过程实际上只有外部扩散，内部扩散和化学交换反应三步；13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式为Q=q。
c/(k+c)；14.反相高效液相色谱的固定相是非极性的，而流动相是极性的；常用的固定相有和C18 C8；常用的流动相有甲醇和乙腈；15.超临界流体的特点是与气体有相似的粘度（扩散系度），与液体有相似的密度；16.离子交换树脂的合成方法有共聚（加聚）和均聚（缩聚）两大类；17.常用的化学细胞破碎方法有渗透压冲击法，增溶法，脂溶法，酶消化法和碱处理法；18.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其导电点的不同；19.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有 PH梯度和离子强度（（盐）梯度）；20.晶体质量主要指晶体大小，晶体性状和晶体纯度三个方面；21.亲和吸附原理包括吸附质的制备，吸附和洗脱三步；22.根据分离机理的不同，色谱法可分为吸附色谱，分配色谱，离子交换色谱和凝胶色谱；23.盐析实验中用于关联溶质溶解度与盐浓度的Cohn方程为 1gs=β-KsI ；当保持体系温度，PH值不变，仅改变溶液离子强度进行的盐析操作称为Ks盐析法；当保持离子强度不变，改变温度，PH值进行的盐析操作称为β盐析法；24.蛋白质分离常用的色谱法有金属螯合色谱，共价色谱，离子交换色谱和疏水作用色谱；25.S DS PAGE电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS）的目的是消除各种待分离蛋白的电荷和分子形状差异，而将分子量作为分离的依据；26.常用的蛋白质沉析方法有盐析，等电点沉析和有机溶剂沉析；27.常用的工业絮凝剂有聚丙烯酰胺和聚苯乙烯两大类；28.典型的工业过滤设备有板框式过滤机、真空转鼓过滤机和垂直片式硅藻土过滤机；29.常用离心设备可分为离心沉降和离心过滤两大类；30.根据物化理论，萃取达到平衡时，溶质在萃取相和萃余相中的化学势相等；31.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为物理吸附、化学吸附、交换吸附32.影响亲和吸附的因素有配基浓度、空间障碍、载体孔径、微环境和载体与配基结合位点；33.阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强酸性~、弱酸性~和中强酸性~；其典型的活性基团分别有磺酸基团次甲基磺酸基团、羧酸基团、磷酸基团次磷酸基团；34.阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强碱性~、弱碱性~和中强碱性~；其典型的活性基团分别有季铵基团、伯铵基团、兼有以上两种基团；35.DEAE Sepharose是阴离子交换树脂，其活性基团是二乙基氨基乙基；36.CM Sepharose是阳离子交换树脂，其活性基团是羧甲基；37.影响离子交换选择性的因素有水合离子半径、离子化合价、溶液PH、离子强度、有机溶剂和交联度；38.离子交换操作一般分为静态和动态两种；39.蛋白质等生物大分子，在溶液中呈稳定的分散状态，其原因是由于静电斥力作用和水化膜层；40.盐析用盐的选择需考虑盐析作用要强、有够大的溶解度、生物学上是惰性的、来源丰富、经济等41.影响有机溶剂沉淀的因素有温度、PH、样品浓度、离子强度和金属离子的助沉作用；42.常用的超滤装置有板式、管式、螺旋卷式和中空纤维式；43.依据电泳原理，现有电泳分离系统可分为区带电泳、静态电泳和移动界面电泳；44.依据建立pH梯度的原理不同，等电聚焦（IEF）可分为载体两性电解质电泳和同相电泳；45.双相电泳中，第一相是导电聚焦；第二相是SDS-PAGE；46.结晶包括三个过程过饱和溶液形成、晶核的形成和晶体生长；47.过饱和溶液的形成方法有热过饱和溶液冷却法、部分溶剂蒸发法、真空蒸发冷却法和化学反应结晶；48.晶核自动形成时，体系总的吉布斯自由能的改变ΔG由ΔGs和ΔGv组成；49.物料中所含水分可分为化学结合水、物化结合水和机械结合水三种；50.根据干燥曲线，物料干燥可分为恒速和降速两个阶段；51.工业生产中常用的助滤剂有硅藻土和珍珠岩；52.液－液萃取从机理上分析可分为物理萃取和化学萃取两类；53.基本的离子交换过程由、、和组成；54.吸附包括将待分离物料通入吸附剂中，吸附质被吸附到吸附剂表面，料液流出和吸附质解析回收后，吸附剂再生四个过程组成；55.大孔网状吸附剂有极性，非极性和中等极性三种主要类型；56.亲和吸附剂表面连接的“手臂链”的作用是降低空间位阻的影响；57.根据修饰基团的不同，离子交换树脂可分为强碱阳，强强碱阴，强酸阳和强酸阴等四大类；58.根据聚合方法，离子交换树脂的合成方法可分为加聚法和缩聚法两类；59.根据聚合单体，离子交换树脂的合成方法可分为共聚法和均聚法两类；60.影响离子交换速度的因素有颗粒大小、交联度、温度、离子化合价、离子大小、搅拌速度和溶液浓度；61.分配色谱的基本构成要素有固定相、载体和流动相；62.反相色谱常用的流动相有异丙醇和乙腈等； 63.反相色谱常用的固定相有C8和C18等；64.Sepharose系列的离子交换树脂的载体是琼脂糖凝胶；65.分子筛色谱（凝胶色谱）的主要应用是生物大分子的初级分离、脱盐；66.影响有机溶剂沉析的主要因素有温度、溶液的PH值、离子强度、样品浓度、金属离子的助沉析作用和搅拌速度；67.根据膜材料的不同，常用的膜可分为合成有机聚合物膜和无机材料膜两类；68.根据膜结构的不同，常用的膜可分为对称性膜、不对称膜和复合膜三类；69.强制膜分离过程是指超滤和反渗透过程；70.电泳系统的基本组成有电泳槽、电源、外循环恒温系统、凝胶干燥器、灌胶模具、电泳转移装置、电泳洗脱仪和凝胶扫描和摄录装置；71.电泳后，样品的主要染色方法有考马斯亮蓝和银染法；72.SDS－PAGE电泳中，SDS的加入是为了消除不同样品分子间电荷和分子形状的差异；加入二硫叔糖醇的目的是使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂；73.电泳过程中，加入溴酚兰的目的是1.增大样品密度确保DNA均匀进入样品孔内2.使样品呈现颜色3.以0.5XTBE做电泳液时，溴酚兰的泳动率约与30的双链DNA相同；74.固体可分为结晶和无定形两种状态；75.结晶过程包括过饱和溶液的形成、晶核的形成和晶体生长三个过程；76.结晶的前提是溶液达到过饱和状态；结晶的推动力是过饱和度；77.根据晶体生长扩散学说，晶体的生长包括溶质通过扩散作用穿过靠近晶体表面的一个滞流层，从溶液中转移到晶体的表面、到达晶体表面的溶质长入晶面，使晶体增大，同时放出结晶热和结晶传递回到溶液中三个过程； 78.影响晶体生长的主要因素有杂质、搅拌和温度；二. 讨论题1.请结合图示简述凝胶排阻色谱（分子筛）的分离原理；答：凝胶排阻色谱的分离介质（填料）具有均匀的网格结构，其分离原理是具有不同分子量的溶质分子，在流经柱床是，由于大分子难以进入凝胶内部，而从凝胶颗粒之间流出，保留时间短；而小分子溶质可以进入凝胶内部，由于凝胶多孔结构的阻滞作用，流经体积变大，保留时间延长。
生物分离与纯化技术模拟试卷二答案
生物分离与纯化技术模拟试卷二答案一、名词解释（每小题3分，共15分）1．凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。
2．分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一常数叫分配系数。
3．离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。
4．等电点沉淀：调节体系pH 值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。
5．正相色谱：是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。
二、单选题（每小题1分，共15分）1．针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（ C ）。
A.凝胶过滤B.离子交换层析C.亲和层析D.纸层析2．从组织中提取酶时，最理想的结果是（ C ）A.蛋白产量最高B.酶活力单位数值很大C.比活力最高D.Km 最小3．蛋白质分子量的测定可采用（ C ）方法。
A ．离子交换层析 B.亲和层析 C.凝胶层析 D.聚酰胺层析4．结晶过程中，溶质过饱和度大小（A ）。
A 、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度B 、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度C 、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度D 、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度5．洗脱体积是（C ）。
A 、凝胶颗粒之间空隙的总体积B 、溶质进入凝胶内部的体积C 、与该溶质保留时间相对应的流动相体积D 、溶质从柱中流出时所用的流动相体积6．工业上常用的过滤介质不包括（ D ）A.织物介质B.堆积介质C.多孔固体介质D.真空介质7．下列哪项不是蛋白质的浓度测定的方法（ D ）。
A 、凯氏定氮法 B.双缩脲法 C.福林-酚法 D.核磁共振8．高压匀浆法破碎细胞，不适用于（D ）A. 酵母菌 B 大肠杆菌 C. 巨大芽孢杆菌 D.青霉9．阳树脂在软化中易受Fe3+污染，可通过（C ）清除铁化合物。
生物分离与纯化技术模拟试卷十二答案
生物分离与纯化技术模拟试卷十二答案装订 线一、名词解释（每小题3分，共15分）1．反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到浓缩的效果，这种操作成为反渗透。
2．树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量，在充填柱上操作达到漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。
3．两性树脂：同时含有酸、碱两种基团的树脂叫两性树脂4．流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流动相。
5．离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交换平衡。
二、单选题（每小题1分，共15分）1．其他条件均相同时，优先选用那种固液分离手段（B ） A. 离心分离 B 过滤 C. 沉降 D.超滤2．人血清清蛋白的等电点为4.64，在PH 为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A ） A ：正极移动；B ：负极移动；C ：不移动；D ：不确定。
3．影响电泳分离的主要因素（B ）A 光照B 待分离生物大分子的性质C 湿度D 电泳时间4．当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度 （ C ） A 、增大 B 、减小 C 、先增大，后减小 D 、先减小，后增大 5．关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律，下列（A ）项是正确的叙述。
A 、氢键形成是能量释放的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。
B 、氢键形成是能量吸收的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。
C 、氢键形成是能量释放的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。
D 、氢键形成是能量吸收的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。
6．反渗透膜的孔径小于( C )A 0.02～10µmB 0.001～0.02µmC <2nmD < 1nm 7．凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是（ B ）A 、凝胶排斥B 、凝胶吸附C 、柱床过长D 、流速过低 8．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是 （A ） A 、粗且长的 B 、粗且短的 C 、细且长的 D 、细且短的9．在萃取液用量相同的条件下， 下列哪种萃取方式的理论收率最高 （ C ） A.单级萃取 B.三级错流萃取 C.三级逆流萃取 D.二级逆流萃取 10．用大孔树脂分离苷类常用的洗脱剂是（B ） A 、水 B 、含水醇 C 、正丁醇 D 、乙醚 E 、氯仿 11．不能用于糖类提取后的分离纯化的方法是（B ） A 、活性炭柱色谱法 B 、酸碱溶剂法C 、凝胶色谱法D 、分级沉淀法E 、大孔树脂色谱法12．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用 （ A ） A 、分离量大分辨率低的方法 B 、分离量小分辨率低的方法C 、分离量小分辨率高的方法D 、各种方法都试验一下，根据试验结果确定 13．气相色谱柱主要有（C ）。
最新生物分离与纯化技术模拟试卷十一答案
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2．洗脱：利用适当的溶剂，将树脂吸附的物质释放出来，重新转入溶液的过程。
3．树脂的再生：就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。
4．疏水层析：是利用表面偶联弱疏水性基团（疏水性配基）的疏水性吸附剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术。
5．过滤介质：是指能使固一液混合料液得以分离的某一介面，通常指滤布或膜过滤中所用的膜。
二、单选题（每小题1分，共15分） 1．微滤膜所截留的颗粒直径为( A )A 0.02～10µmB 0.001～0.02µmC <2nmD < 1nm 2．关于分配柱层析的基本操作错误(D )。
A 装柱分干法和湿法两种B 分配柱层析法使用两种溶剂，事先必须先使这两个相互相饱和C 用硅藻土为载体，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平D 分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分，或极性很相似的成分。
3．在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量 （ C ） A ．羟型阴 B ．氯型阴 C ．氢型阳 D ．钠型阳 4．下列哪项不是常用的树脂再生剂（ D ） A 1％～10％HCl B H2S04、 C NaCl 、 D 蒸馏水5．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作 （ C ） A 、 阴性洗脱 B 、 剧烈洗脱 C 、竞争洗脱 D 、非竞争洗脱 6．活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强？ （ A ） A 、水 B 、甲醇 C 、乙醇 D 、三氯甲烷7．在一定的pH 和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作 ( A ) A 、KS 盐析法 B 、β盐析法 C 、重复盐析法 D 、分部盐析法 8．在超滤过程中，主要的推动力是 （ C ） A 、浓度差 B 、 电势差 C 、压力 D 、重力9．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是 （A ） A 、粗且长的 B 、粗且短的 C 、细且长的 D 、细且短的10．如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下面哪种细胞破碎的方法最佳？ （ C ） A.匀浆法 B.超声波法 C. 渗透压休克法 D. 冻融法 11．盐析法与有机溶剂沉淀法比较， 其优点是（ B ） A ．分辨率高 B ．变性作用小 C ．杂质易除 D ．沉淀易分离 12．磺酸型阳离子交换树脂可用于分离（E ）A 、强心苷B 、有机酸C 、醌类D 、苯丙素E 、生物碱 13．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（ C ） A ．离子交换色谱 B ．亲和色谱 C ．凝胶过滤色谱 D ．反相色谱 14．洗脱体积是（C ）。
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生物分离与纯化技术模拟试卷十一答案
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一、名词解释（每小题3分，共15分）
1．盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。
2．洗脱：利用适当的溶剂，将树脂吸附的物质释放出来，重新转入溶液的过程。
3．树脂的再生：就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。
4．疏水层析：是利用表面偶联弱疏水性基团（疏水性配基）的疏水性吸附剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术。
5．过滤介质：是指能使固一液混合料液得以分离的某一介面，通常指滤布或膜过滤中所用的膜。
二、单选题（每小题1分，共15分） 1．微滤膜所截留的颗粒直径为( A ) A ～10μm B ～μm C <2nm D < 1nm 2．关于分配柱层析的基本操作错误(D )。
A 装柱分干法和湿法两种
B 分配柱层析法使用两种溶剂，事先必须先使这两个相互相饱和
C 用硅藻土为载体，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平
D 分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分，或极性很相似的成分。
3．在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量 （ C ） A ．羟型阴 B ．氯型阴 C ．氢型阳 D ．钠型阳 4．下列哪项不是常用的树脂再生剂（ D ） A 1％～10％HCl B H2S04、 C NaCl 、 D 蒸馏水
5．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作 （ C ） A 、 阴性洗脱 B 、 剧烈洗脱 C 、竞争洗脱 D 、非竞争洗脱 6．活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强？ （ A ） A 、水 B 、甲醇 C 、乙醇 D 、三氯甲烷
7．在一定的pH 和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作 ( A ) A 、KS 盐析法 B 、β盐析法 C 、重复盐析法 D 、分部盐析法 8．在超滤过程中，主要的推动力是 （ C ） A 、浓度差 B 、 电势差 C 、压力 D 、重力
9．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是 （A ） A 、粗且长的 B 、粗且短的 C 、细且长的 D 、细且短的
10．如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下面哪种细胞破碎的方法最佳？ （ C ） A.匀浆法 B.超声波法 C. 渗透压休克法 D. 冻融法 11．盐析法与有机溶剂沉淀法比较， 其优点是（ B ） A ．分辨率高 B ．变性作用小 C ．杂质易除 D ．沉淀易分离 12．磺酸型阳离子交换树脂可用于分离（E ）
A 、强心苷
B 、有机酸
C 、醌类
D 、苯丙素
E 、生物碱 13．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（ C ） A ．离子交换色谱 B ．亲和色谱 C ．凝胶过滤色谱 D ．反相色谱 14．洗脱体积是（C ）。
A 、凝胶颗粒之间空隙的总体积
B 、溶质进入凝胶内部的体积
C 、与该溶质保留时间相对应的流动相体积
D 、溶质从柱中流出时所用的流动相体积 15．下列细胞破碎的方法中，哪个方法属于非机械破碎法( A ) A.化学法 B. 高压匀浆 C. 超声波破碎 D.高速珠磨 三、判断题（每小题1分，共10分） 1．伯胺基在pH<7的溶液中使用。
（√ ）
2．阴树脂易受有机物污染，可用有机溶剂浸泡或淋洗。
（× ） 3．吸附力较弱的组分，有较低的Rf 值。
（× ） 4．凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定。
（√ ）
5．等密度梯度离心中，梯度液的密度要包含所有被分离物质的密度。
（√ ）
6．疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液（√ ） 7．采用溶剂提取法提取中草药有效成分时，选择溶剂的原则是“相似相溶原则”。
（ √ ） 8．丙酮，介电常数较低，沉析作用大于乙醇，所以在沉析时选用丙酮较好。
（×） 9．中性多糖类药物常用水作溶剂来提取，也可用水浸煮，也可以用冷水浸提。
（ ∨ ）
10．有机溶剂（如胍、乙醇、尿素和异丙醇等）可以削弱疏水分子间的相互作用。
可以用于任何规模的细胞破碎。
（√ ）
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四、填空题（每小题1分，共15分）
1．影响晶体生长速度的主要因素有（杂质）、（搅拌）、（过饱和度）和（温度）。
2．阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为（强碱型），（弱碱型）和（中等强度）；其典型的活性基团分别有（季氨基）、（伯、仲、叔氨）、（强弱基团都具备）。
3．工业离心设备从形式上可分为（管式），（套筒式），（碟片式），等型式。
4．根据干燥曲线，物料干燥可分为（恒速干燥阶段）和（降速干燥阶段） 两个阶段； 五、简答题（每小题7分，共35分） 1．简述生物活性物质分离纯化的主要原理。
答： 生物大分子分离纯化的主要原理是：1）根据分子形状和大小不同进行分离，如差速离心与超离心、膜分离、凝胶过滤等；2）根据分子电离性质（带电性）差异进行分离，如离子交换法、电泳法、等电聚焦法；3）根据分子极性大小及溶解度不同进行分离，如溶剂提取法、逆流分配法、分配层析法、盐析法、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等；4）根据物质吸附性质的不同进行分离，如选择性吸附与吸附层析等；5）根据配体特异性进行分离，如亲和层析法等。
2．液一液萃取时溶剂的选择要注意以下几点：
（1）选用的溶剂必须具有较高选择性，各种溶质在所选的溶剂中之分配系数差异愈大愈好。
（2）、选用的溶剂，在萃取后，溶质与溶剂要容易分离与回收。
（3）、两种溶剂的密度相差不大时，易形成乳化，不利于萃取液的分离，选用溶剂时应注意。
（4）、要选用无毒，不易燃烧的价廉易得的溶剂。
3．试述活性炭的吸附剂的吸附特点
（1）在水溶液中吸附力最强，在有机溶剂中吸附力较弱。
（2）对极性基团（-COOH 、-NH2、-OH 等）多的化合物的吸附力大于极性基团少的化合物，。
（3）对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物。
（4）对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物。
（5）发酵液的pH 与活性炭的吸附效率有关，一般碱性物质在中性下吸附，酸性下解吸；酸性物质在中性下吸附，碱性解吸。
（6）活性炭吸附溶质的量在未达到平衡前一般随温度升高而增加；但在升高温度时应考虑到溶质对热的稳定性。
4．简述凝胶层析有哪些用途？
①作为分析工具；作为脱盐工具②生物大分子的浓缩 ③除热原物质④生物大分子的分离纯化；分子量的测定 5．蛋白质的纯度鉴定的方法有哪些。
(1)色谱法用分子筛或离子交换色谱检查样品时，如果样品是纯的，应显不单一的洗脱峰。
该样品在色谱性质上是均一的，称为“色谱纯”。
(2)电泳法用PAGE 检查样品呈现单一区带，也是纯度的一个指标，这表明样品在电荷和质量方面的均一性。
可以说纯的蛋白质电泳仅有一条区带，但仅有一条区带却不一定是纯的，仅能表明它在电泳上的均一性，称为“电泳纯”。
(3)免疫化学法 免疫学技术是鉴定蛋白质纯度的有效方法，它根据抗原与抗体反应的特异性，可用已知抗体检查抗原或已知抗原检查抗体。
用此法检测的纯度称为“免疫纯”。
六、案例分析题（共10分） 影响离子交换树脂交换速度的因素？
①树脂颗粒的大小：树脂颗粒大小要适中。
②搅拌和流速。
③离子浓度：过稀、过浓都对交换速度不利。
④离子的水化半径：离子在水溶液中要发生水化，水化离子在水溶液中的大小以水化 半径来表示。
水化半径小的离子，较易吸附。
一价阳离子；Li+<Na+<k+≈NH+<Rb+<Cs+<Ag+<Ti+
二价阳离子：Mg2+<Cu2+≈Ni2+<Co2+<Ca2+<Sr2+<pb2+<Ba2+ 阴离子：F —<HCO3—<C-<HSO3—<Br —<NO3—<I —<Cl3— ⑤树脂酸碱性的强弱和溶液的pH 值。
⑥交联度愈低，树脂愈易膨胀，交换速度也就愈快。
⑦有机溶剂的影响：当有机溶剂存在时，会降低树脂对有机离子的选择性，而容易吸附无机离子。