亚麻酸对大鼠行为_视网膜及肝脑脂肪酸构成的影响
亚麻酸
α-亚麻酸认识α-亚麻酸：1、概述：α-亚麻酸是人体健康必需却又普遍缺乏，急需补充的一种必需营养素。
2、健康的基础：α-亚麻酸是构成细胞膜和生物酶的基础物质，对人体健康起决定性作用。
3、智力和视力的基础：α-亚麻酸在大脑固体总质量占10%；在管学习的海马细胞中占25%；在脑神经及视网膜的磷脂中占50%。
每日补充1300mg α-亚麻酸，智力水平直接提高20%—30%。
4、、防止营养散失的关键：缺乏α-亚麻酸，维生素、矿物质、蛋白质等营养素不能被有效吸收和利用，造成营养散失。
5、认证：美国FDA研究证明：缺乏α-亚麻酸将导致儿童大脑及视网膜发育迟缓，注意力不能集中，营养不均衡，不能有效吸收，直接导致：智力发育迟缓，动作不协调，视力弱，多动症，肥胖，厌食，发育缓慢，免疫力低下等30兜沃症状和疾病。
6、与DHA等的关系；α-亚麻酸比DHA等作用更强、更安全，α-亚麻酸在体内可转化为DHA、DPA、EPA等，而补充DHA等只能起到部分作用。
专业点讲：α-亚麻酸是DHA的鸥体。
7、营养短板：如果把八大类营养物质比作木板，它们共同组成一个木桶，对所有人而言那么α-亚麻酸都将是最短的一块板，它的高度直接决定健康和营养的水平。
健康智慧的关键是营养平衡营养平衡的关键是补充营养短板α-亚麻酸是所有人群的营养短板o α—亚麻酸的理化性质化学名：全顺式-91215-十八碳三烯酸(Allcis-91215-Octadecatrienoic acid)表示符号：18：3Δ9，12，15或18：3n—3、ω—3α—亚麻酸化学结构图：由于α—亚麻酸分子中存在三个共轭双键，所以有非常强的还原性，高温、空气中的氧气、紫外线以及一些重金属离子都可以将其氧化，故富含α—亚麻酸的食用油应该避光、密封保存，使用时尽量避免高温煎炸，同时在油中加入适量的维生素E作保护作用。
经过分离富集的高纯度α—亚麻酸不饱和度更高，如制成保健食品，则最好独自包装，如制成软胶囊的形式，而不能简单地使用瓶装的形式。
怀孕的健康大白鼠在食用脂肪酸后血浆和组织脂肪酸的组成的改变摘要
怀孕的健康大白鼠在食用(n 6:n 3)脂肪酸后血浆和组织脂肪酸的组成的改变摘要研究不同脂肪酸比例的饮食水平（n 6:n 3）对大白鼠血浆和组织脂肪酸组成的影响。
治疗组包括仅仅只控制大白鼠饮食的比例，只饲喂50%豆油(SBO)：50%鱼肝油（CLO)(1:1),84% SBO:16%克洛(6:1),96% SBO:4%克洛(30:1)。
在怀孕的第15天采集血液样本, 然后对血浆和组织进行脂肪酸的分析。
在血浆n 3 PUFA的饮食1:1组明显高于其他饮食组,而总n 6 PUFA在血浆中明显高于在饮食中作为对照组比较的30:1组和饮食1:1组。
饮食1:1组与总n 3 PUFA比较，动物脂肪和肝组织中的二十二碳六烯酸明显表现出的更大的百分比,这清楚地反映了CLO对于n 3脂肪酸的贡献。
总n 6 PUFA在饮食30:1、饮食1:1和对照组中，亚油酸和花生四烯酸有显著区别。
这些结果证明以n 6:n3这个饮食比率饲喂怀孕的老鼠，显著影响血浆和组织中脂肪酸的比例。
1前言脂肪酸在哺乳动物组织中扮演者两个主要生理角色:一个是结构性角色和一个是能量储存和生产的角色。
首先,脂肪酸是磷脂和糖脂的基本单位,因此是生物膜的重要组成成分。
事实上, 超过一半的脂肪酸链最主要的是磷脂，他们主要是负责膜双层非极性的性质[1]。
饲喂脂肪的种类在机体组织内PUFA的新陈代谢,中是非常重要的，因为每个食用的脂肪酸会影响其他脂肪酸的利用率[2]。
亚油酸、亚麻酸,和油酸(不必须的)具有同样的稀释酶序列竞争基质。
这些脂肪酸对稀释酶的亲和力的大小如下ALA>LA>油酸。
低浓度的ALA非常有效抑制LA的代谢。
但是,适度的LA水平在抑制ALA的新陈代谢中是必要的,而只有高浓度的油酸可以抑制LA的新陈代谢。
因此, 在正常的身体组织和体液中，ALA和LA的代谢产物通常高于油酸的的代谢产物。
因为饮食中的脂肪成分可以变成上述所说的其中一个脂肪酸,新陈代谢可以根据亲和力而转变,以及消耗脂肪的总量。
天然保健物质_亚麻酸
Dial Transplant,2002,17:1779-178514Lovett JK,How ard SC,Rothw ell PM.Puls e pres sure is ind e -pen dently as sociated w ith car otid plaque ulceration[J].J Hyper -tens ,2003,21:1669-167615 M iwa Y,Tsu shima M ,Arima H,et al.Pulse pressu re is an ind e -penden t predictor for th e progression of aortic w all calcification in patients w ith controlled hyperlipidemia [J ].H ypertension,2004,43:536-54016Inoue T,M atsuoka M ,Nagahama K,et al.Cardiovas cular risk factors associated w ith pulse pres sure in a screened coh ort in O -kinawa,Japan[J].H ypertens Res,2003,26:153-15817 M iyagi T,M uratani H ,Kimu ra Y,et al.In crease in puls e pres -sure relates to diabetes mellitus and low HDL cholesterol,but not to hyperlipidemia in hyp erten sive patients aged 50years or older[J].H ypertens Res,2002,25:335-34118Jokiniity JM ,M ajahalme SK,Kahonen M A,et al.Pu lse pressu re is th e best predictor of futu re left ventricular m as s and change in left ventricular mass:10years of follow -up [J ].J H ypertens,2001,19:2047-205419Riz zo V,D-i M aio F,Petretto F,et al.Ambulatory pulse pres -sure,left ventricular hypertrophy and function in arterial hyper -ten sion[J].Echocardiograp hy,2004,21:11-1620Ab ram son JL,W eintraub WS,Vaccarino V.As sociation be -tw een pulse pressure and C -reactive protein among apparen tly h ealthy US adu lts[J].H ypertension,2002,39:197-20221Fran klin SS ,Gus tin W ,Wong ND,et al.H emodynamic patterns of age -related changes in blood pressu re.T he Fram ingham h eart study[J].Circulation,1997,96:308-31522C hang JJ,Luchsinger J A,S hea S.Antihypertensive medication class an d puls e pressure in the elderly:analysis based on the Third National H ealth and Nutrition Examination Su rvey [J ].Am J M ed,2003,115:536-54223Carretta R,Trenkw alder P,M artinez F,et al.Pu lse pressu re re -spons es in patients treated w ith Valsartan an d hydrochloroth iaz -ide combin ation therapy[J].J Int M ed Res,2003,31:370-37724Cus hman W C,M aterson BJ,William s DW ,et al.Pulse pres sure changes with six classes of antihypertens ive agen ts in a random -ized,controlled trial[J].Hy perten sion,2001,38:953-95725M ourad J J,Blach er J,Blin P,et al.Conventional antihypertens -ive drug th erapy d oes not prevent the increas e of puls e pres sure w ith age[J].Hyp erten sion,2001,38:958-961天然保健物质:A -亚麻酸司全金(解放军总医院老年心脏内科,北京 100853)[关键词]保健物质; A -亚麻酸[中图分类号]R972 [文献标识码]A [文章编号]1673-1913(2006)03-0184-03收稿日期:2006-03-03作者简介:司全金,男,1965年3月生,河南省许昌县人,主任医师,教授,从事老年心血管内科专业。
亚麻酸重要生理活性功效及应用
编辑本段重要生理活性功效及应用随着研究的深入，α—亚麻酸与健康及疾病的关系，已引起了国内外学者瞩目和高度重视。
尽管α—亚麻酸资源数量少，能够摄取到的食物种类也少，但它们的生理活性却是人体不可缺少的。
综合全球医学和营养学的研究结果，α-亚麻酸有以下基本功效：1、调节血脂作用血脂异常严重威胁人类健康和生命，它是动脉粥样硬化病灶形成和进展的重要危险因素，已证实调脂药物可以延缓动脉粥样硬化事件(如心肌梗死和卒中)的发生。
很多实验得出α-亚麻酸具有降低血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白和极低密度蛋白，升高血清高密度脂蛋白的作用。
在α—亚麻酸降低血清胆固醇的机理中，除增加胆固醇排泄外，抑制内源性胆固醇合成也很重要。
HMG-CoA是胆固醇合成的主要限速酶，α-亚麻酸抑制其活性而减少胆固醇的合成。
Tield 等发现，摄入α—亚麻酸能使家兔肝HMG-CoA还原酶活性降低，同时使ACAT活性升高。
α—亚麻酸对脂肪合成酶系的抑制和加强线粒体中的β-氧化，使甘油三酯的合成减少而消耗增加。
α—亚麻酸在降低家兔血脂的同时无肝脏积累脂质的现象，而属于ω—6PUFA的亚油酸和γ—亚麻酸虽然也有降低血脂的作用，但其主要是促使脂质由血液向肝脏转移而降低血脂，导致脂肪肝。
同时有论文报道深海鱼油中ω—PUFA的不同类型而出现不同的降脂作用，EPA主要在降低甘油三酯方面起作用，DHA在降低胆固醇方面起作用，作为它们母体的α-亚麻酸在调节血脂时可以起到全面降脂、排脂的作用。
2、预防心肌梗塞和脑梗塞从发生机理来看，血栓主要有两种，一是脂质栓子，二是血液凝固。
大多数的抗血栓药物只是对其中的某一因素产生作用，而α—亚麻酸的抗血栓作用则是完全的、全面的。
在超高倍的电子显微镜下，通过对末梢血的观察，可以明显看到胆固醇的结晶和乳糜颗粒，有的患者还出现大块的斑块，这些胆固醇结晶和脂质斑块黏附在血管内壁，即可形成脂质血栓，高脂血症是形成脂质血栓的主要原因。
气相色谱法快速测定食品中的油酸_亚油酸_亚麻酸的含量
·检验技术·气相色谱法快速测定食品中的油酸、亚油酸、亚麻酸的含量黄湘东,黄伟雄,梁春穗 【摘要】 目的 建立用气相色谱法快速测定食品中油酸(C18∶1)、亚油酸(C18∶2)、亚麻酸(C18∶3)含量的方法。
方法 采用外标法,将样品用氢氧化钾-甲醇溶液甲脂化后进行气相色谱法测定,通过对不同极性毛细管柱的分离效果比较,同时对三种物质的分离条件进行优化。
并在所选最佳分离效果的毛细管柱及优化条件下进行回收率、精密度及线性关系的试验。
结果 使用S UPE LC OW AX T M210柱建立的检测方法在较短时间内能将三种物质完全分离,目标物出峰时间由原来的110min缩短到10min内。
该方法对油酸、亚油酸、亚麻酸三个不同浓度(即C18∶1为8315、24517和36815mg/L,C18∶2为15215、64817和97310mg/L,C18∶3为5519、12913和19410mg/L)的平均回收范围在9510%～10211%之间;精密度RSD%范围在210～612之间;最低检出限均为015mg/L。
结论 使用S UPE LC OW AX T M210柱建立的检测方法能快速、准确地测定食品中油酸、亚油酸、亚麻酸的含量。
【关键词】 油酸; 亚油酸; α亚麻酸; 色谱法,气相 中图分类号:O657.71;TS201.2 文献标识码:B 文章编号:1671-5039(2004)03-0057-03 油酸、亚油酸、亚麻酸是人体所必须的不饱和脂肪酸[1,2],主要存在于小麦胚芽油中,具有降低胆固醇、调节血脂、预防心脑血管疾病等作用,亚麻酸对视网膜还具有较高营养生理作用[3],由于这三种物质的结构和相对密度近似,相对分子质量彼此仅相差2个H,要将它们分离并不容易,本方法通过采用不同长度和不同极性毛细管柱进行分析,找出了最佳的测定方法。
1 材料和方法111 仪器与试剂 惠普HP25890(Ⅱ)气相色谱仪,氢火焰离子化检测器FI D,载气N2,燃气H2,助燃气空气,标准品均为美国Singma公司产品,甲醇为色谱醇,氢氧化钾为分析纯,混合液(石油醚和苯1+1,石油醚、苯均为重蒸馏液)。
α-亚麻酸对大鼠学习记忆功能和海马神经元的影响
旦拯笠垡：堡鏖醒盟左题堂墨运坚婴篮塑塑呈控经五的影响笙！翅表２空间搜索实验结果（ｉ±ｓ。
ｎ＝１０）组别总路程（ｃｍ）中心区域（ｅｍ）穿越次数（次）与正常对照组比较：１）Ｐ＜Ｏ．０５・６６５・２．３海马神经元超微结构观察青花椒籽油组细胞胞浆内溶酶体数毋增加、粗面内质网肥大和增生；线粒体肥大和增生，表现为线粒体嵴的数量增多（见图１）。
对照组粗面内质网有大母的板层小体出现，部分内质网扩张并断裂形成大小不一的囊泡状、湖状和池水状；线粒体嵴密集、扭曲和黏连部分出现髓鞘样结构、晶体包含物和脂滴样结构（见图２）。
图１青花椒籽油组海马神经元结构（ｘ４０ｏｏｏ）图２正常对照组海马神经元结构（ｘ４０ｏｏｏ）３讨论ａ一亚麻酸属于ｃ０３系脂肪酸，在体内主要以二十碳五烯酸（ＥＰＡ）和二十二碳六烯酸（ＤＨＡ）的形式存在，而ＤＨＡ除富集于主动脉以外，还大量存在于生殖细胞、大脑皮质及视网膜中，这提示Ｏｔ．亚麻酸及其衍生物同这些组织的功能有关∞】。
海马结构是与学习记忆有关的重要脑区，本研究中青花椒籽油组大鼠海马神经元超微结构与对照组相比有明显改变，其大鼠脑海马神经元粗面内质网肥大和增生，表明蛋白质合成增强，内质网发育完善表明细胞分化程度和活性较高，而线粒体的肥大与增生和细胞功能增强、能量需求增高有密切关系。
Ｏｔ一亚麻酸在体内可直接进行分解代谢，代谢产物最重要的是ＤＨＡ和ＥＰＡ等多不饱和脂肪酸及前列腺索Ｈ１。
ＤＨＡ和ＥＰＡ参与到神经元细胞膜磷脂中，使细胞膜液态流动性提高，通透性增加，细胞充满活力。
ＤＨＡ对大脑神经细胞分裂、增殖、神经传导、突触生长和发育起着极为重要作用，是大脑形成和智力开发的必需物质”］。
而青花椒籽油中含有丰富的不饱和脂肪酸∽’，Ｏｔ一Ⅱ麻酸含量约３３％，实验组大鼠脑海马结构的变化可能与饲料中富含仅一亚麻酸有关。
本研究选用见栓孕鼠开始饲喂青花椒籽油饲料，并连续饲喂两代，主要由于大鼠脑发育的关键时期为妊娠期及｝ｎ生后５—２５ｄ。
富含亚麻酸的膳食亚麻籽油对2型糖尿病大鼠外周血和脾脏髓源抑制
doi:10.3969/j.issn.1000⁃484X.2020.02.002㊃基础免疫学㊃富含亚麻酸的膳食亚麻籽油对2型糖尿病大鼠外周血和脾脏髓源抑制细胞及炎症因子的影响①朱丽丽 张晓霞② 王 振③ 薛 静 汪 婷 王 浩 (宁夏医科大学基础医学院,银川750004) 中图分类号 R392.6 文献标志码 A 文章编号 1000⁃484X (2020)02⁃0136⁃06①本文为国家自然科学基金(81602713)和宁夏高等学校一流学科建设项目(宁夏医科大学西部一流建设学科基础医学)(NXYLXK2017B07)㊂②宁夏医科大学中医学院,银川750004㊂③宁夏医科大学总医院消化内科,银川750004㊂作者简介:朱丽丽,女,在读硕士,主要从事代谢免疫学方面研究,E⁃mail:1431082928@㊂通讯作者及指导教师:王 浩,男,博士,副教授,硕士生导师,主要从事代谢免疫学方面研究,E⁃mail:wanghaograduate@㊂[摘 要] 目的:探讨富含亚麻酸的膳食亚麻籽油(FO)对2型糖尿病(T2DM)大鼠髓源抑制细胞(MDSCs)比例变化及其与血浆炎症因子的相关关系㊂方法:SD 大鼠随机分为正常组(NC)㊁糖尿病组(T2DM)㊁亚麻籽油干预对照组(NC+FO)和亚麻籽油干预组(T2DM+FO)㊂NC+FO 组和T2DM+FO 组每天摄取亚麻籽油饮食(10%w /w),NC 组和T2DM 组给予10%玉米油饲料喂养㊂干预5周后,流式细胞术检测外周血和脾脏MDSCs 含量;ELISA 检测各组血浆中IL⁃1β㊁TNF⁃α和IL⁃10水平,Pearson 分析两者相关性㊂结果:与T2DM 组相比,T2DM+FO 组大鼠外周血和脾脏中MDSCs 含量显著增加(P 均<0.05),血浆IL⁃1β和TNF⁃α表达水平降低(P 均<0.05),IL⁃10升高但差异无统计学意义(P >0.05)㊂分析外周血和脾脏细胞中MDSCs 含量与炎症因子相关性,发现MDSCs 与IL⁃1β和TNF⁃α呈负相关㊂结论:FO 可募集血浆和脾脏中MDSCs,降低血浆中IL⁃1β㊁TNF⁃α含量,进而发挥抗炎作用,延缓T2DM 的进展㊂[关键词] 2型糖尿病;亚麻籽油;髓源抑制细胞;炎症因子Effects of dietary flaxseed oil rich in α⁃linolenic acid on myeloid⁃derived suppressor cells in peripheral blood ,spleen and plasma inflammatory factors in rats with type 2diabetesZHU Li⁃Li ,ZHANG Xiao⁃Xia ,WANG Zhen ,XUE Jing ,WANG Ting ,WANG Hao .Department of Basic Medical Sciences ,Ningxia Medical University ,Yinchuan 750004,China[Abstract ] Objective :To investigate the effects of dietary flaxseed oil (FO)rich in α⁃linolenic acid on myeloid⁃derivedsuppressor cells(MDSCs)and plasma inflammatory factors in rats with type 2diabetes mellitus(T2DM).Methods :Rats were randomly divided into four group:normal group(NC),diabetes group(T2DM),FO intervention control group(NC+FO)and FO intervention group (T2DM+FO).The NC+FO and T2DM+FO groups received FO diet(10%w /w)daily,and the NC and T2DM groups were fed 10%corn oil diet.And then the levels of MDSCs in peripheral blood and spleen were detected by flow cytometry after 5weeks of intervention.The levels of IL⁃10,IL⁃1βand TNF⁃αin plasma were detected by ELISA.And then pearson was used to analyze the correlation between MDSCs and inflammatory factors.Results :Compared with T2DM group,the proportions of MDSCs in peripheralblood and spleen of T2DM+FO group were significantly increased(P <0.05).The levels of plasma IL⁃1βand TNF⁃αwere decreased in T2DM+FO group(P <0.05).There was no significant difference of IL⁃10among diverse groups(P >0.05).The percentage of MDSCs in peripheral blood and spleen were negatively correlated with the levels of IL⁃1βand TNF⁃α,respectively.Conclusion :FO may contribute to suppressing inflammation via recruiting MDSCs and reducing the levels of pro⁃inflammatory cytokines,thereby alleviating theprogression of the disease.[Key words ] T2DM;Flaxseed oil;MDSCs;Inflammatory factors㊃631㊃中国免疫学杂志2020年第36卷 糖尿病是公认的重大健康问题[1],全球患病人数超过4.5亿[2],严重威胁人类身体健康㊂2型糖尿病(type2diabetes mellitus,T2DM)是一种由遗传和环境多种因素共同引起的以胰岛素抵抗为主㊁同时伴有胰岛β细胞功能受损的内分泌疾病[3]㊂临床研究显示[4],炎症因子如IL⁃6㊁IL⁃1β和TNF⁃α可激活一系列信号通路,诱发低度炎症反应,干扰正常胰岛素信号传导,引起胰岛素抵抗㊂其中炎症因子介导的慢性免疫炎症反应在T2DM发病机制中起着至关重要的作用[5]㊂髓源性抑制细胞(myeloid⁃derived suppressor cells,MDSCs)是骨髓祖细胞和未成熟髓细胞组成的异质细胞群,是树突状细胞㊁粒细胞和巨噬细胞的前体㊂MDSCs在罹患癌症㊁炎症和感染期间增殖明显[6⁃8],显著抑制T细胞反应[9⁃11]㊂目前,对MDSCs 不仅局限于肿瘤的研究,在慢性炎症㊁病毒感染和自身免疫性疾病中的研究也日益增多[12]㊂除临床干预外,膳食添加剂有望成为预防和缓解糖尿病的重要手段㊂而亚麻籽油(flxseed oil, FO)是目前ω⁃3多不饱和脂肪酸含量最高的植物油脂之一[13],含有丰富的亚麻酸(α⁃linolenic acid, ALA),具有包括抗炎在内的多种生物学功能的优质食用油[14]㊂本课题组前期研究发现,FO可以通过降低小鼠血浆中TNF⁃α㊁IL⁃1β㊁IL⁃6水平及调节肠道菌群来改善酒精性肝病[15]㊂然而,FO对T2DM大鼠MDSCs及血浆炎症因子的影响尚不清楚㊂在该实验中为确保摄入能量一致,采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)和烟酰胺(nicotina⁃mide,NA)依次腹腔注射成功诱导T2DM模型[16],并用流式细胞术检测外周血和脾脏中MDSCs比例变化,用ELISA测定血浆中炎症因子表达,用Pearson方法分析MDSCs和炎症因子的相关性,初步探索FO对T2DM的作用,为FO抗炎和实际开发应用提供更多理论依据㊂1 材料与方法1.1 材料 180~200g雄性SD大鼠32只,由宁夏医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK (宁)2015⁃0001㊂FO购自宁夏六盘珍坊生态农业科技有限公司,饲料由南通特罗菲饲料科技有限公司提供,血糖仪和试纸购自鱼跃公司㊂STZ和NA均购自Sigma公司㊂RPMI1640培养基购自HyClone试剂公司㊂大鼠荧光抗体FITC⁃His48和PE⁃CD11b/c购自美国赛默飞世尔公司㊂IL⁃10㊁IL⁃1β和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF⁃α)试剂盒购自江莱生物㊂大鼠外周血细胞分离试剂盒购自索莱宝公司㊂Cytoflex流式细胞仪是美国贝克曼库尔特有限公司产品,酶标仪是美国赛默飞世尔科技公司产品㊂1.2 方法1.2.1 实验分组㊁造模与给药 同一批次的SD雄性大鼠32只,适应性喂养1周后,随机分为正常组和造模组㊂造模方法如下,按参考文献[17,18],大鼠禁食不禁水12h后,以65mg/kg剂量腹腔注射新鲜配制的STZ溶液(现用现配,避光冰上操作), 15min后,腹腔注射110mg/kg的NA溶液,正常组腹腔注射等体积的柠檬酸缓冲液和生理盐水,分别于注射后第3天和第7天,尾静脉取血检测空腹血糖,两次血糖值均≥11.1mmol/L并伴有多饮㊁多食㊁多尿症状视为T2DM造模成功㊂随机从正常组和糖尿病组选取8只分别作为正常组(NC)㊁糖尿病组(T2DM)㊁亚麻籽油干预对照组(NC+FO)和亚麻籽油干预组(T2DM+FO)㊂NC组和T2DM组脂肪主要为10%w/w玉米油,NC+FO组和T2DM+FO组是亚麻籽油等量代替玉米油,确保能量相等㊂1.2.2 标本采集 亚麻籽油连续干预5周后,禁食过夜,腹腔注射水合氯醛麻醉大鼠,腹主动脉采血后,将其置于含EDTA⁃2K抗凝管中,4℃2000r/min 离心10min,分离出血浆和血细胞㊂1.2.3 外周血单细胞悬液的制备 用等体积的PBS稀释大鼠新鲜血细胞,在离心管中加入和血细胞等体积的淋巴细胞分离液,将稀释后血细胞平铺于分离液上方,4℃2000r/min离心5min 后吸取白膜层,加入细胞清洗液洗涤白膜层细胞,4℃1500r/min离心5min后弃上清㊂然后加入适量红细胞裂解液,1500r/min离心5min 后,清洗细胞,弃上清㊂最后加入RPMI1640重悬细胞,调整细胞悬液浓度为2×106个/ml,供后续实验使用㊂1.2.4 脾脏单细胞悬液的制备 分离各组大鼠脾脏组织,将取出的脾脏放入培养皿中,加入适量RPMI1640后,分离研磨脾脏㊂300目滤膜过滤,4℃1500r/min离心5min后弃上清,然后加入适量红细胞裂解液,4℃1400r/min离心8min,弃上清,用RPMI1640清洗细胞一次,如红细胞过多,再裂解一次㊂RPMI1640重悬细胞,调整细胞悬液浓度为2×106个/ml,供后续实验使用㊂1.2.5 流式细胞仪检测MDSCs 吸取上述提取的细胞悬液各100μl加入流式管中,分别加入1μl抗大鼠FITC标记的His48和PE标记的CD11b/c表㊃731㊃朱丽丽等 富含亚麻酸的膳食亚麻籽油对2型糖尿病大鼠外周血和脾脏髓源抑制细胞及炎症因子的影响 第2期面抗体,轻轻混匀,4℃避光孵育30min 后,每管加入1ml 细胞染色缓冲液,4℃1400r /min 离心5min 清洗细胞,弃上清,重复洗涤细胞一次,然后用滤纸将流式管管口吸干,最后加入300μl RPMI1640重悬细胞,立即上机检测㊂1.2.6 血浆中炎症因子的检测 IL⁃10㊁IL⁃1β和TNF⁃α按照江莱试剂盒说明书进行检测㊂1.3 统计学处理 采用SPSS21.0软件处理数据,结果以x ±s 表示㊂正态分布资料,组间比较采用单因素方差分析㊂采用Pearson 相关分析法分析MDSCs 比例与血浆炎症因子的相关性㊂P <0.05为差异具有统计学意义㊂2 结果2.1 FO 对T2DM 大鼠外周血中MDSCs 的影响 实验结果如图1所示,在NC㊁T2DM㊁NC +FO 和T2DM +FO 组中,外周血中MDSCs 的比例分别为(3.54±1.31)%㊁(7.44±1.67)%㊁(4.41±1.32)%和(9.62±2.12)%㊂T2DM 组大鼠外周血中MDSCs 比例显著高于NC 组(P <0.05);与T2DM 组比较,T2DM+FO 组MDSCs 比例显著升高(P <0.05)㊂上述结果表明,FO 干预T2DM 大鼠可增加外周血MDSCs 水平㊂2.2 FO 对T2DM 大鼠脾脏细胞中MDSC 的影响 实验结果如图2所示,在大鼠脾脏细胞中,NC㊁T2DM㊁NC+FO 和T2DM+FO 组中MDSCs 的比例分别为(3.84±1.37)%㊁(6.35±1.50)%㊁(4.10±1.33)%和(9.11±3.49)%㊂T2DM 组大鼠脾脏细胞中MDSCs 比例显著高于NC 组(P <0.05);与T2DM 组比较,T2DM +FO 组脾脏中MDSCs 比例显著升高(P <0.05)㊂以上结果说明,FO 可明显增加T2DM 大鼠脾脏细胞中MDSCs 含量㊂2.3 FO 对T2DM 大鼠炎症因子表达水平的影响,与NC 组比较,T2DM 组大鼠血浆IL⁃1β和TNF⁃α表达水平显著升高(P <0.001);FO 干预后,血浆中IL⁃1β和TNF⁃α含量显著降低,差异具有统计学意义(P <0.05)㊂T2DM +CO 组IL⁃10含量低于NC +CO 组,FO 干预后IL⁃10含量升高,但差异无统计学意义(P >0.05)(图3)㊂2.4 各组大鼠血浆炎症因子与MDSCs 相关性分析 大鼠外周血(MDSCs vs.IL⁃1β:r =-0.7855,P =0.0025;MDSC vs.TNF⁃α:r =-0.8204,P =0.0011)和脾脏(MDSCs vs.IL⁃1β:r =-0.8228,P =0.0010;MDSCs vs.TNF⁃α:r =-0.8095,P =0.0014)中MDSCs 含量和大鼠血浆中IL⁃1β㊁TNF⁃α呈负相关(图4)㊂图1 流式细胞术检测FO 对T2DM 大鼠外周血MDSCs 比例的影响Fig.1 Flow cytometry analysis of percentage of MDSCs from peripheral blood in T2DM rats after FO interventionNote:*.P <0.05.图2 流式细胞术检测FO 对T2DM 大鼠脾脏细胞中MDSCs 比例的影响Fig.2 Flow cytometry analysis of percentage of MDSCs from spleen in T2DM rats after FO interventionNote:*.P <0.05.㊃831㊃中国免疫学杂志2020年第36卷图3 ELISA 检测各组大鼠血浆IL⁃1β㊁TNF⁃α和IL⁃10水平Fig.3 ELISA analysis levels of plasma IL⁃1β,TNF⁃αandIL⁃10in different groupsNote:*.P <0.05,***.P <0.001.图4 炎症因子与外周血及脾脏中MDSCs 相关性分析Fig.4 Correlation between inflammatory cytokines andMDSCs of peripheral blood and spleenNote:A,B.Correlation analysis between IL⁃1βand MDSCs in peripheralblood and spleen;C,D.Correlation between TNF⁃αand MDSCs in peripheral blood and spleen.3 讨论T2DM 属于一种慢性低度炎症状态,TNF⁃α㊁IL⁃1β和IL⁃6等促炎因子升高,抗炎因子IL⁃10降低[19,20],炎症因子通过调节免疫系统,从而参与T2DM 的发生发展[21]㊂近年来研究显示,T2DM 的进展与慢性低度炎症密切相关[22⁃26]㊂FO 作为一种优质的食用油,富含ω⁃3多不饱和脂肪酸,可阻断NF⁃κB 信号通路,抑制多种炎症因子的表达,降低炎症反应[27,28]㊂除此之外,FO 还具有抗动脉粥样硬化㊁降血糖㊁降血压㊁降血脂等多种作用[14,29]㊂MDSCs 是骨髓来源的具有免疫抑制作用的一群异质性细胞,主要包括:未成熟粒细胞㊁单核细胞㊁骨髓前体细胞和树突样细胞,在感染㊁炎症及肿瘤中MDSCs 的数量显著增加[30,31]㊂有研究显示,MDSCs可以抑制促炎因子IL⁃1β和TNF⁃α的生成,促进抗炎因子IL⁃10的产生,发挥抑制炎症作用[32]㊂最近有研究发现,在T2DM 患者外周血和脾脏细胞中,MDSCs 比例显著增加,延缓了疾病的发生发展[33]㊂Yin 等[34]通过动物模型研究证实,在MDSCs 移植到T2DM 小鼠体内后,发现转移的MDSCs 具有降低血糖和预防糖尿病发作的能力㊂目前为止尚未确定大鼠MDSC 分子标志,CD11b /c㊁His48是当前研究中报道最多的谱系标志[35,36],故本研究采用其作为检测标志分子㊂在本研究中,通过流式细胞术分析发现,T2DM 组大鼠外周血和脾脏细胞中MDSCs 比例明显高于NC 组;而相对于T2DM 组,T2DM +FO 组外周血和脾脏细胞中MDSCs 比例也显著增加,说明FO 能够使MDSCs 在外周血和脾脏中大量增殖,抑制其向成熟的髓系细胞分化,从而发挥负向免疫调控的作用[37,38]㊂通过ELISA 检测大鼠血浆中细胞因子,发现T2DM 组血浆炎症因子IL⁃1β和TNF⁃α水平显著高于NC 组,此结果提示T2DM 大鼠炎症因子的表达升高,与之前的研究结果一致[19,20],这可能和胰岛素抵抗有关[39]㊂在FO 干预后,T2DM+FO 组IL⁃1β和TNF⁃α水平明显降低,说明FO 可有效改善T2DM 的炎症反应,可能与ALA 激活GPR120和抑制TLR4下游信号通路有关[40,41],为此我们将在接下来开展相关深入研究㊂在本研究中,抗炎因子IL⁃10在T2DM 组减少,在T2DM+FO 组增加,但是差异没有统计学意义㊂分析外周血和脾脏细胞中MDSCs 含量与血浆中IL⁃1β和TNF⁃α的相关性,发现MDSCs 与炎症因子IL⁃1β和TNF⁃α呈负相关,可能和MDSCs 抑制炎症因子的表达有关[10]㊂综上所述,FO 可诱导T2DM 大鼠的MDSCs 在外周血和脾脏细胞中募集,并且降低血浆中炎症因子IL⁃1β和TNF⁃α的含量,延缓T2DM 的进展,可为T2DM 的免疫抑制治疗提供新的思路㊂而且FO 作为一种优质食用油,安全实惠,提示其对T2DM 的辅助治疗具有良好应用前景㊂参考文献:[1] Taheri Rouhi SZ,Sarker MMR,Rahmat A,et al .The effect ofpomegranate fresh juice versus pomegranate seed powder on metabolic indices,lipid profile,inflammatory biomarkers,and the histopathology of pancreatic islets of Langerhans in streptozotocin⁃nicotinamide induced type 2diabetic Sprague⁃Dawley rats [J].㊃931㊃朱丽丽等 富含亚麻酸的膳食亚麻籽油对2型糖尿病大鼠外周血和脾脏髓源抑制细胞及炎症因子的影响 第2期BMC Complem Altern Med,2017,17(1):156.[2] Chatenoud L.World diabetes day:perspectives on immunotherapyof Type1diabetes[J].Eur J Immunol,2015,45(11):2968⁃2970.[3] Mrozinska S,Radkowski P,Gosiewski T,et al.Qualitativeparameters of the colonic flora in patients with HNF1A⁃MODY are different from those observed in Type2diabetes mellitus[J].J Diabetes Res,2016,2016:3876764.[4] Shoelson SE,Lee J,Goldfine AB.Inflammation and insulinresistance[J].J Clin Invest,2006,116(7):1793⁃1801. [5] Lackey DE,Olefsky JM.Regulation of metabolism by the innateimmune system[J].Nat Rev Endocrinol,2016,12(1):15⁃28.[6] Zhou Q,Tang X,Tian X,et al.LncRNA MALAT1negativelyregulates MDSCs in patients with lung cancer[J].J Cancer,2018, 9(14):2436⁃2442.[7] Sun J,Xu P,Du X,et al.Piperlongumine attenuates collagen⁃induced arthritis via expansion of myeloid⁃derived suppressor cells and inhibition of the activation of fibroblast⁃like synoviocytes[J].Mol Med Rep,2015,11(4):2689⁃2694.[8] Guo C,Hu F,Yi H,et al.Myeloid⁃derived suppressor cells have aproinflammatory role in the pathogenesis of autoimmune arthritis [J].Ann Rheum Dis,2016,75(1):278⁃285.[9] Youn JI,Nagaraj S,Collazo M,et al.Subsets of myeloid⁃derivedsuppressor cells in tumor⁃bearing mice[J].J Immunol,2008,181(8):5791⁃5802.[10] Gabrilovich DI,Nagaraj S.Myeloid⁃derived suppressor cells asregulators of the immune system[J].Nat Rev Immunol,2009,9(3):162⁃174.[11] Talmadge JE.Pathways mediating the expansion andimmunosuppressive activity of myeloid⁃derived suppressor cellsand their relevance to cancer therapy[J].Clin Cancer Res,2007,13(18Pt1):5243⁃5248.[12] Goh C,Narayanan S,Hahn YS.Myeloid⁃derived suppressor cells:the dark knight or the joker in viral infections?[J].ImmunolRev,2013,255(1):210⁃221.[13] 张晓霞,尹培培,杨灵光,等.不同产地亚麻籽含油率及亚麻籽油脂肪酸组成的研究[J].中国油脂,2017,42(11):142⁃146.Zhang XX,Yin PP,Yang LG.Oil contents in flaxseeds fromdifferent origins and fatty acid compositions of flaxseed oils[J].China Oils Fats,2017,42(11):142⁃146.[14] Liu Y,Chen F,Odle J,et al.Fish oil enhances intestinal integrityand inhibits TLR4and NOD2signaling pathways in weaned pigsafter LPS challenge[J].J Nutr,2012,142(11):2017⁃2024.[15] Zhang X,Wang H,Yin P,et al.Flaxseed oil ameliorates alcoholicliver disease via anti⁃inflammation and modulating gut microbiotain mice[J].Lipids in health and disease,2017,16(1):44. [16] Jangale NM,Devarshi PP,Dubal AA,et al.Dietary flaxseed oiland fish oil modulates expression of antioxidant and inflammatorygenes with alleviation of protein glycation status and inflammationin liver of streptozotocin⁃nicotinamide induced diabetic rats[J].Food Chem,2013,141(1):187⁃195.[17] Masiello P,Broca C,Gross R,et al.Experimental NIDDM:development of a new model in adult rats administeredstreptozotocin and nicotinamide[J].Diabetes,1998,47(2):224⁃229.[18] Ghasemi A,Khalifi S,Jedi S.Streptozotocin⁃nicotinamide⁃inducedrat model of type2diabetes(review)[J].Acta PhysiologicaHungarica,2014,101(4):408⁃420.[19] Agrawal N,Delanoue R,Mauri A,et al.The drosophila TNF eigeris an adipokine that acts on insulin⁃producing cells to mediatenutrient response[J].Cell Metab,2016,23(4):675⁃684. [20] Fathy SA,Mohamed MR,Ali M,et al.Influence of IL⁃6,IL⁃10,IFN⁃gamma and TNF⁃alpha genetic variants on susceptibility todiabetic kidney disease in type2diabetes mellitus patients[J].Biomarkers,2018:1⁃13.[21] Odegaard AO,Jacobs DJ,Sanchez OA,et al.Oxidative stress,in⁃flammation,endothelial dysfunction and incidence of type2diabetes[J].Cardiovasc Diabetol,2016,15:51. [22] Qin J,Li Y,Cai Z,et al.A metagenome⁃wide association study ofgut microbiota in type2diabetes[J].Nature,2012,490(7418):55⁃60.[23] Forslund K,Hildebrand F,Nielsen T,et al.Disentangling type2diabetes and metformin treatment signatures in the human gutmicrobiota[J].Nature,2015,528(7581):262⁃266. [24] Karlsson FH,Tremaroli V,Nookaew I,et al.Gut metagenome inEuropean women with normal,impaired and diabetic glucosecontrol[J].Nature,2013,498(7452):99⁃103. [25] Saito T,Hayashida H,Furugen ment on:Cani et al.(2007)Metabolic endotoxemia initiates obesity and insulinresistance:Diabetes56:1761⁃1772[J].Diabetes,2007,56(12):e20,e21.[26] Jayashree B,Bibin YS,Prabhu D,et al.Increased circulatorylevels of lipopolysaccharide(LPS)and zonulin signify novelbiomarkers of proinflammation in patients with type2diabetes[J].Mol Cell Biochem,2014,388(1⁃2):203⁃210. [27] Moura⁃Assis A,Afonso MS,de Oliveira V,et al.Flaxseed oil richin omega⁃3protects aorta against inflammation and endoplasmicreticulum stress partially mediated by GPR120receptor in obese,diabetic and dyslipidemic mice models[J].J Nutr Biochem,2018,53:9⁃19.[28] Jung UJ,Torrejon C,Chang CL,et al.Fatty acids regulateendothelial lipase and inflammatory markers in macrophages andin mouse aorta:a role for PPARgamma[J].Arterioscler ThrombVasc Biol,2012,32(12):2929⁃2937.[29] 孙 佳,胡 彦,丁友芳,等.马鲁拉油与6种植物油理化性质㊁脂肪酸组成㊁营养物质比较[J].中国油脂,2017,42(02):38⁃41.Sun J,Hu Y,Ding YF,et al.Parison of physicochemicalproperties,fatty acid compositions and nutrient contents betweenmarula oil and six kinds of vegetable oils[J].China Oils Fats,2017,42(02):38⁃41.[30] Marvel D,Gabrilovich DI.Myeloid⁃derived suppressor cells in thetumor microenvironment:expect the unexpected[J].J ClinInvest,2015,125(9):3356⁃3364.[31] 曹倩文,田 雨,宋天姣,等.小鼠肺肿瘤发展过程中外周血NKT和MDSC细胞变化[J].中国免疫学杂志,2016,32(9):1272⁃1275.Cao QW,Tian Y,Song TJ,Changes of NKT and MDSC during de⁃velopment of mouse lung tumor[J].Chin J Immunol,2016,32(9):1272⁃1275.[32] Gabrilovich DI,Nagaraj S.Myeloid⁃derived suppressor cells asregulators of the immune system[J].Nat Rev Immunol,2009,9(3):162⁃174.[33] Wang T,Wen Y,Fan X.Myeloid⁃derived suppressor cellssuppress CD4+T cell activity and prevent the development of type2diabetes[J].Acta Biochim Biophys Sin(Shanghai),2018,50(4):362⁃369.(下转第153页)㊃041㊃中国免疫学杂志2020年第36卷[8] Zhang HJ,Wei QF,Wang SJ,et al.LncRNA HOTAIR alleviatesrheumatoid arthritis by targeting miR⁃138and inactivating NF⁃κB pathway[J].Int Immunopharmacol,2017,50:283⁃290. [9] He S,Liu P,Jian Z,et al.miR⁃138protects cardiomyocytes fromhypoxia⁃induced apoptosis via MLK3/JNK/c⁃jun pathway[J].Biochem Biophys Res Commun,2013,441(4):763⁃769. [10] Giza DE,Fuentes⁃Mattei E,Bullock MD,et al.Cellular and viralmicroRNAs in sepsis:mechanisms of action and clinicalapplications[J].Cell Death Differ,2016,23(12):1906⁃1918.[11] Bodor GS.Biochemical markers of myocardial damage[J].EJIFCC,2016,27(2):95⁃111.[12] Hochstadt A,Meroz Y,Landesberg G.Myocardial dysfunction insevere sepsis and septic shock:more questions than answers?[J].J Cardiothorac Vasc Anesth,2011,25(3):526⁃535. [13] 王丽辉,申亚晖,郭艳青,等.双歧杆菌联合乌司他丁对脓毒症模型大鼠免疫功能的影响[J].中国免疫学杂志,2018,34(1):95⁃98.Wang LH,Shen YH,Guo YQ,et al.Effect of bifidobacteriumcombined wtih ulinastatin on immunologic function of CLP rats[J].Chin J Immunol,2018,34(1):95⁃98.[14] Pathan N,Franklin JL,Eleftherohorinou H,et al.Myocardialdepressant effects of interleukin6in meningococcal sepsis areregulated by p38mitogen⁃activated protein kinase[J].Crit CareMed,2011,39(7):1692⁃1711.[15] Cimolai MC,Alvarez S,Bode C,et al.Mitochondrial mechanismsin septic cardiomyopathy[J].Int J Mol Sci,2015,16(8):17763⁃17778.[16] Park MH,Hong JT.Roles of NF⁃κB in cancer and inflammatorydiseases and their therapeutic approaches[J].Cells,2016,5(2):15.[17] Panday A,Inda ME,Bagam P,et al.Transcription factor NF⁃κB:an update on intervention strategies[J].Arch Immunol Ther Exp,2016,64:463⁃483.[收稿2019⁃01⁃11 修回2019⁃05⁃27](编辑 刘格格)(上接第140页)[34] Yin B,Ma G,Yen CY,et al.Myeloid⁃derived suppressor cellsprevent type1diabetes in murine models[J].J Immunol,2010,185(10):5828⁃5834.[35] Lei GS,Zhang C,Lee CH.Myeloid⁃derived suppressor cellsimpair alveolar macrophages through PD⁃1receptor ligation duringpneumocystis pneumonia[J].Infect Immun,2015,83(2):572⁃582.[36] Jia W,Jackson⁃Cook C,Graf M R.Tumor⁃infiltrating,myeloid⁃derived suppressor cells inhibit T cell activity by nitric oxideproduction in an intracranial rat glioma+vaccination model[J].JNeuroimmunol,2010,223(1⁃2):20⁃30.[37] Umansky V,Blattner C,Fleming V,et al.Myeloid⁃derivedsuppressor cells and tumor escape from immune surveillance[J].Semin Immunopathol,2017,39(3):295⁃305.[38] Zhang H,Li Z,Wang L,et al.Critical role of myeloid⁃derivedsuppressor cells in tumor⁃induced liver immune suppressionthrough inhibition of NKT cell function[J].Front Immunol,2017,8:129.[39] Rose DP,Gracheck PJ,Vona⁃Davis L.The interactions of obesity,inflammation and insulin resistance in breast cancer[J].Cancers(Basel),2015,7(4):2147⁃2168.[40] Jung UJ,Torrejon C,Chang CL,et al.Fatty acids regulateendothelial lipase and inflammatory markers in macrophages andin mouse aorta:a role for PPARgamma[J].Arterioscler ThrombVasc Biol,2012,32(12):2929⁃2937.[41] Moura⁃Assis A,Afonso MS,de Oliveira V,et al.Flaxseed oil richin omega⁃3protects aorta against inflammation and endoplasmicreticulum stress partially mediated by GPR120receptor in obese,diabetic and dyslipidemic mice models[J].J Nutr Biochem,2018,53:9⁃19.[收稿2019⁃03⁃20 修回2019⁃04⁃20](编辑 倪 鹏)(上接第145页)[16] Liu J,Yang J,Xu Y,et al.Roscovitine,a CDK5inhibitor,alleviates sevoflurane⁃induced cognitive dysfunction via regulationTau/GSK3βand ERK/PPARγ/CREB signaling[J].Cell PhysiolBiochem,2017,44(2):423⁃435.[17] Mi Y,Qi G,Fan R,et al.EGCG ameliorates high⁃fat⁃and high⁃fructose⁃induced cognitive defects by regulating the IRS/AKT andERK/CREB/BDNF signaling pathways in the CNS[J].FASEBJ,2017,31(11):4998⁃5011.[18] Ko YH,Kwon SH,Hwang JY,et al.The memory⁃enhancingeffects of liquiritigenin by activation of NMDA receptors and theCREB signaling pathway in mice[J].Biomol Ther(Seoul),2018,26(2):109⁃114.[19] 廖 浩,裴文迪.抗NMDA受体抗体在神经精神狼疮发病机制中的研究进展[J].中国免疫学杂志,2018,34(1):137⁃140,143.Liao H,Pei WD.Research progress of anti⁃NMDA receptorantibody in the pathogens is of neueopsychotic lupus[J].Chin JImmunol,2018,34(1):137⁃140,143.[20] Rodriguez CI,Zwerling J,Kalanthroff E,et al.Effect of a novelNMDA receptor modulator,rapastinel(Formerly GLYX⁃13),inOCD:proof of concept[J].Am J Psychiatry,2016,173(12):1239⁃1241.[21] Preskorn S,Macaluso M,Mehra DO,et al.Randomized proof ofconcept trial of GLYX⁃13,an N⁃methyl⁃D⁃aspartate receptorglycine site partial agonist,in major depressive disordernonresponsive to a previous antidepressant agent[J].J PsychiatrPract,2015,21(2):140⁃149.[收稿2019⁃03⁃27 修回2019⁃05⁃21](编辑 倪 鹏)㊃351㊃范腾阳等 长链非编码RNA HOTAIR靶向miR⁃138对脓毒症诱导的大鼠心肌炎症反应和氧化应激的影响及作用机制研究 第2期。
转载α亚麻酸和γ－亚麻酸的区别
转载α亚麻酸和γ－亚麻酸的区别α亚麻酸和γ－亚麻酸的区别匡长祥营养传播站 2015-10-15 10:23:02 亚麻脂肪作用阅读(0) 评论(0)声明：本文由入驻搜狐公众平台的作者撰写，除搜狐官方账号外，观点仅代表作者本人，不代表搜狐立场。
举报γ－亚麻酸是亚油酸的衍生物，是顺6、顺9、顺12－十八碳三烯酸。
γ－亚麻酸在少数植物油脂中存在，月见草、微孔草、螺旋藻中含有γ－亚麻酸。
γ－亚麻酸具有抗心血管疾病、降血脂、降血糖、抗癌、美白和抗皮肤老化等作用。
亚油酸18：2（n－6）是人体必需脂肪酸，也是维持生命的重要物质，广泛存在于各种食物之中，尤以植物油含量丰富。
亚油酸能在体内转化成γ－亚麻酸、DH－γ－亚麻酸（20：3）和花生四烯酸（20：4），然后花生四烯酸在环氧化酶的作用下可合成前列腺素PGG2、PGH2、PGI2，血栓素TXA2，在5－脂氧化酶的作用下可生成白三烯LTA4、LTB4等，其中前列腺素PGI2具有抗血栓、治疗周围血管疾病，预防心血管疾病的作用。
而血栓素具有收缩血管和促进血小板聚集作用，是导致心血管疾病的因素之一。
白三烯是某些变态反应、炎症以及心血管等疾病中的化学介质。
也就是说，人类的免疫、发炎、过敏和心血管疾病均与其有关。
近年来的研究表明，人体每天只要摄入0.5克的γ－亚麻酸，不但会使DH－γ－亚麻酸含量明显增加，同时，会使花生四烯酸的含量也有增加。
这就告诉我们，当γ－亚麻酸过多时，就会使花生四烯酸的量增加，花生四烯酸同样也具有降低胆固醇，预防心血管疾病的作用。
但花生四烯酸这些作用需要有一个前提，这个前提就是不过量的情况下花生四烯酸对我们的身体是有益的，一但过量情况就会向相反的方向发展，就会衍生出许多对身体健康不利的物质，如前面所提到的血栓素和白三烯，另外还有氧化作用后产生的自由基。
人体内的自由基来自两个方面，一是来自外界的污染物，二是来自于身体的内部。
n－6脂肪酸是极易氧化的一种脂肪酸，花生四烯酸更易氧化，这种氧化导致人体内产生自由基，它是人体正常代谢的副产物，对人体组织有损伤作用。
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文章编号:1001-0580(2002)03-0301-03 论 著 -亚麻酸对大鼠行为、视网膜及肝脑脂肪酸构成的影响复旦大学医学院营养与食品卫生教研室(上海200032) 徐章华 邵玉芬摘 要:目的 研究 -亚麻酸对第二代大鼠学习记忆、视网膜发育及肝、脑脂肪酸构成的影响。
方法 利用全合成饲料对Wistar大鼠进行两代喂养,以M orris水迷宫、视网膜电位测定仪及气相色谱仪进行第二代大鼠学习记忆、视网膜电位及肝、脑脂肪酸构成分析。
结果 -亚麻酸(苏子油)能够促进大鼠的脑、视觉发育,提高仔代大鼠的学习记忆能力和视网膜电位;在生化方面提高了肝总脂中C18:3、C20:5和脑总脂中C22:6的百分含量; -亚麻酸缺乏(茶油)将对脑、视觉发挥正常功能造成不利影响。
结论 -亚麻酸(苏子油)对脑和视网膜具有较高的营养生理作用。
关键词: -亚麻酸;行为;视网膜;脂肪酸;苏子油中图分类号:R151 2 文献标识码:AEff ects of -linolenic Acid on Rats Behavior,Retina and Liver,Brain Fatty Acid C omposition X U Zhang-hua,SH A O Yu-f eng.Dep ar tment of N utrition and Food Hy giene,Fudan M edical College(Shanghai200032,China) Abstract:Objective T he seco nd g eneration r ats were used to study t he effect of -linolenic acid on memor y,r etina and brain,liver fatty acid composition.Methods Based on the M orr i s Water plaza,ER G equipment and gas chromatog raphy,t he second generation rats w ere analyzed.Results -linolenic acid(per illaoil)could promote brain and retina dev elo pment,elevate the learning ability and the electroretinalgraphic amplitudes,elevate the learning ability and the electroretinalgraphic ampl-i tudes,increase the percent of C18:3、C20:5in liv er tot al fatty acids and C22:6in brain total fat ty acids: -linolenic acid deficieny impair spatial learning and visual funct ion.C onclusion -linolenic acid(perilla oil)had important nutritional v alue.Key words: -linolenic acid;behavior;retina;fatty acid;perilla oil3脂肪酸是一类长链多不饱和脂肪酸(PU FA),主要包括 -亚麻酸(C18:3, -LnA)、二十碳五烯酸(C20:5,EPA)、二十二碳六烯酸(C22:6,DHA)。
自80年代至今,人们对 3的研究多集中在EPA、DHA上,而对其前体物质 -亚麻酸研究的较少。
近年来,对 3脂肪酸摄入绝对或相对不足所造成的行为及视觉发育上的改变越来越受到学者们的重视。
本次试验利用富含 -亚麻酸的苏子油进行两代喂养,一方面旨在研究 -亚麻酸在行为、视网膜等方面的营养生理学作用,另一方面也为进一步开发富含 -亚麻酸的植物油脂提供理论依据。
1 材料和方法1 1 动物选择 选择上海医科大学动物部饲养的6周龄Wistar大鼠20只,其中雌鼠14只,雄鼠6只;体重,165 15g,清洁级,批号23~56。
1 2 饲料与分组 饲料为全合成饲料。
由56%玉米淀粉、20%酪蛋白、5%蔗糖、8%纤维素、5%混合无机盐 、1%混合维生素 、5%油脂构成(重量比)( 、 参见AOAC met hods, 1980,P770)。
先把动物分笼饲养,全合成饲料适应性喂养1周后,按体重分成 -亚麻酸组(苏子油)、 -亚麻酸缺乏组(茶油)。
每组为7只雌鼠、3只雄鼠。
饲养5周后,各组雌、雄鼠分别交配,分娩后保留各组第2代雄鼠,雌鼠移走;第2代雄鼠养至14周时(平均周龄为14周 5天),分别进行行为试验,视网膜电位测试及肝、脑总脂肪脂的抽提及脂肪酸的分析。
动物房室内照明控制12h亮暗周期节律,室温保持在20 ,相对湿度为80%。
表1 两种油脂的脂肪酸组成(%)C16:0C18:0C18:1C18:2C18:3 6系 3系苏子油6 662 1818 119 4563 609 4563 60茶油8 623 2179 747 600 377 600 371 3 油脂来源和性状 苏子油系对苏子冷榨而得,淡黄色,清澈透明,味道清香;茶油市售,深黄色,较浑浊,茶香味。
两种油均未测出胆固醇,过氧化物值均小于4meq/kg,脂肪酸组成(气相色谱法)见表1。
1 4 试验方法 (1)水迷宫试验(M orr is W at er M aze)。
利用M orr is 水迷宫,记录大鼠每次找到平台所花的时间。
每鼠每天测试4次,每次找到平台后让其在平台上探视周围环境30s,然后让其在平台外一盒子中休息30s,以中断它对平台周围环境的熟悉,然后再从另一象位放入水中,如此循环,如大鼠在60s之内找不到平台,则人工把它放在平台上。
同样在平台上停留30s,余下步骤同上,整个试验持续15天,分3阶段,每一阶段以大鼠找到平台所花平均时间低于20s为试验终止标准。
第一阶段为连续6天测试;第二阶段为改变平台位置,连续3天测试;第三阶段为间隔1周后,平台放置原位置上进行测试。
每阶段、每次测试的试验条件均相同,室温26 5 0 50 ,水温23 0 50 。
(2)视网膜电位测试(ERG)。
分别在各组中随机选择完成M orris 水迷宫试验的大鼠5~6只,暗适应1 5~2 5h然后用1%戊巴比妥麻醉,取出眼球;切除含角膜和晶状体的前半部,制成眼杯(ey e-cup),将眼杯置于滤纸上,然后放入灌流槽中(以上操作均在暗红光下进行)。
灌流液流经视网膜后由另一测流出。
参考电极A嵌于槽底部,记录电极B直接与视网膜玻璃体一测接触。
刺激光强为2 79 102dh/cm2,持续时间为400ms,间隔2min,ERG反应经前置放大器放大后显示于双线记忆示波器,然后输入纸带记录仪。
试验时通以95%O2+5%CO2混合空气,维持pH值为7 6~7 8,同时加入4mmol/L谷氨酸(购自Sigma公司),以压抑b波,而对a波没有影响。
视网膜在此条件下,可维持3h以上的良好状态。
(3)肝、脑脂肪酸分析。
将做完M orris 水迷宫和ERG测试的大鼠(每组5~7只),乙醚麻醉后在低温环境下取大脑右半球及上叶肝,迅速进行脂类的抽提。
抽提酪化方法参见Lepage的一步酯化法 1 。
利用GC-9A气相色谱仪,C-R3A记录仪,5%OV-301中国公共卫生2002年第18卷第3期CHINA P UBLI C HEAL TH Vol.18No.3M ar2002275玻璃色谱柱及氢火焰离子化检测器(F ID)进行脂肪酸的气相色谱分析。
1 5 统计分析 在IBM -PC 机上利用Epi info 建立数据库,然后进行T 检验等,全部结果用均数 标准差( X SD)表示。
2 结果和分析2 1 各组大鼠一般情况 由表2可见,第2代仔鼠出生的平均数目、重量及断乳时 -亚麻酸组(苏子油)和 -亚麻酸缺乏组(茶油)的体重未见显著差异(P >0 05),并且两组大鼠在试验开始时体重也未见显著差异(P >0 05)。
表2 两组大鼠生长情况组别F 0体重*(g)F 1数目**出生重量(g)断乳时体重(g)试验时体重(g) -亚麻酸组(苏子油)169 60 6 90425 37 0 9850 5 8 05(n =10)228 8 16 3(n =10) -亚麻酸组(茶油)168 40 8 90484 76 1 2854 11 2 47(n =14)223 1 12 8(n =14)注:*第一代母鼠试验初期体重 **第二代仔鼠出生的数目2 2 -亚麻酸(苏子油)对大鼠行为的影响(学习、记忆能力) 由表3可以看出,第一阶段(1~6天)二组大鼠在M orris 水迷宫中找到平台所花时间随学习天数的增加呈下降趋势。
自第4天以后, -亚麻酸组(苏子油)所花时间显著少于 -亚麻酸缺乏组(茶油)(P <0 05),1~6天总计消耗的平均时间也显著少于a-亚麻酸组(茶油)(P <0 05);进入第二阶段(8~10天),只需3天就达到了试验结束标准。
移动平台位置后1~3天平均学习时间 -亚麻酸组(苏子油)少于 -亚麻酸缺乏组(茶油)(P <0 05);虽然间隔一周后(第三阶段),两组在M orr i s 水迷宫中的学习时间末见显著性差异(P >0 05),但从整个试验周期(1~17天)来看, -亚麻酸组(苏子油)在Mo rris 水迷宫的平均学习时间显著少于 -亚麻酸缺乏组(茶油)(P <0 01)。
表3 两组大鼠三阶段学习、记忆能力的比较(单位:S)第1阶段第1天第2天第3天第4天第5天第6天第1-6天 -亚麻酸缺乏组(茶油)(n =14)43 76 11 4536 36 11 2124 48 9 7123 71 8 2322 54 8 7318 11 3 8928 18 12 66-亚麻酸组(苏子油)(n =10)42 10 11 4629 08 8 8623 07 11 416 10 7 1515 27 3 909 73 3 2822 58 13 39P 值<0 05<0 05<0 05<0 05<0 05第2阶段策1天第2天第3天第1~3天第3阶段间隔1周后第1~17天 -亚麻酸缺乏组(茶油)(n =14)28 42 14 3427 37 10 2117 82 6 6124 93 12 3816 17 4 8326 02 12 31 -亚麻酸组(苏子油)(n =10)23 89 14 2021 17 5 45*15 65 7 6720 24 10 0920 23 13 8821 62 12 48P 值<0 05<0 05<0 012 3 -亚麻酸(苏子油)对视网膜电位(ERG )的影响 图1可见正常视网膜电位的a 、c 波波形,同时显示 -亚麻酸组(苏子油)的ERG 为47 51 6 46微伏,显著高于 -亚麻酸缺乏组(茶油)的35 62 6 84微伏,P 值小于0 01。