虫草头孢菌粉中16种氨基酸的含量测定_石云峰
虫草头孢菌粉为新鲜冬虫夏草中分离得到的麦角 菌科真菌虫草头孢 （ Cephalosporiun sinensis． Chen． Sp． nov） 经液体深层发酵所得的菌丝体的干燥粉末，具有 补肺肾、益精气的功能，可用于治疗两虚引起的咳嗽、 气喘、咯血、腰酸背痛及慢性支气管炎的辅助治疗［1-2］。 研究表明，虫草头孢菌粉中所含的氨基酸作为蛋白质 的基本结构单位和生物代谢过程中的重要物质，是人 体的必需 营 养 成 分 之 一［3］。 虫 草 头 孢 菌 粉 已 收 载 于 国家标准中［标准号： WS-10001-（ HD-1280） -2002］，标 准中已对腺苷、甘露醇类物质等有效成分进行控制，但 未对氨基酸含量进行控制［4］，笔者参考 文 献［5 ］，研 究 建立虫草头孢菌粉中的 16 种氨基酸的异硫氰酸苯酯 （ PITC） 柱前衍生化反相高效液相色谱（ RP-HPLC） 测 定 方 法， 从 而 控 制 虫 草 头 孢 菌 粉 的 质
310004，China； 2． Hangzhou Institute for Drug Control，HaBiblioteka gzhou 310017，China）
ABSTRACT Objective To establish a quantitative method for detecting 16 amino acids in cordyceps mycelium powder． Methods The sample was hydrolyzed for 24 h at 110 ℃ ，and derived with phenyl isothiocyanate （ PITC） ，with norleucine serving as an internal standard． High performance liquid chromatography （ HPLC） was performed on a Agela Venusil XBP C18 （ 150 mm×4． 6 mm，5 μm） column with gradient elution of 0． 1 mol·L－1 acetic acid-sodium acetate buffer solution （ pH 6． 5） acetonitrile （ 95∶ 5） （ A） and acetonitrile-water （ 4∶ 1） （ B） at a flow rate of 1． 0 mL·min－1 ，detected at 254 nm． Results Sixteen amino acids had a good linearity in the range of 1． 81－7． 50 μg·mL－1（ r = 0． 998 3－1． 000 0） ． The average recoveries were 95． 3% – 104． 1% ，except His 92． 9 % ，Met 90． 6% ，and RSD less than 2． 0% ，except His 2． 8% and Met 3． 3% ． Conclusion The method is sensitive and accurate with high repeatability and stability，and is helpful for the determination of amino acids in cordyceps mycelium powder．
表 1 梯度洗脱程序 Tab． 1 Gradient elution program
时间 / min 0． 0 3． 0 9． 0 18． 0 23． 0 24． 0 25． 0 25． 1 30． 0
流动相 A-B 比例 100∶ 0 100∶ 0 86∶ 14 75∶ 25 45∶ 55 0∶100 0∶100 100∶ 0 100∶ 0
酸分别为 92． 9% 和 90． 6% 外，其余 14 种氨基酸在 95． 3% ～ 104． 1% 之间； RSD 除组氨酸、甲硫氨酸分别为 2． 8% 和 3． 3%
外，其余均＜2． 0% 。结论 该方法灵敏、准确，具有良好的重复性和稳定性，可用于虫草头孢菌粉中氨基酸的检测。
关键词 虫草头孢菌粉； 氨基酸； 异硫氰酸苯酯； 内标法； 色谱法，高效液相
2． 2 溶液的制备 2． 2． 1 内 标 溶 液 取 正 亮 氨 酸，精 密 称 定， 加 0． 02 mol·L－1 盐酸溶液制成每毫升含 0． 1 mg 的溶 液，即得内标贮备液。 2． 2． 2 混合对照品溶液 取 16 种氨基酸适量，精密 称定，加 0． 02 mol·L－1 盐酸溶液制成每毫升分别含 Asp 0． 12 mg、Glu 0． 14 mg、Ser 0． 06 mg、Gly 0． 06 mg、 His 0． 02 mg、 Arg 0． 07 mg、 Thr 0． 06 mg、 Ala 0． 08 mg、Pro 0． 05 mg、Tyr 0． 06 mg、Val 0． 04 mg、 Met 0． 01 mg、Ile 0． 05 mg、Leu 0． 08 mg、Phe 0． 06 mg 和 Lys 0． 05 mg 的混合溶液，即得对照品储备液。取 内标贮备液 1． 0 mL 置于 20 mL 量瓶中，加对照品储备 液 2． 0 mL，加 0． 02 mol·L－1 盐酸溶液定容，摇匀，作 为 对 照 品 溶 液。 取 上 述 对 照 品 溶 液 2． 0 mL，加 入 1 mol·L－1 三乙 胺 乙 腈 溶 液 1． 0 mL，再 加 入 0． 1 mol·L－1 异硫氰酸丙酯（ PITC） 乙腈溶液 1． 0 mL，混 匀，室温下放置 2 h，加入 4． 0 mL 正己烷，放置 20 min， 取下层溶液，滤过，即得。 2． 2． 3 供试品溶液 取样品约 20 mg，精密称定，置 玻璃安瓿中，加 6 mol ·L－1 盐酸 6 mL，充氮熔封，于 110 ℃ 水解 24 h，放冷，打开安瓿封口，将内容物移入 蒸发皿中，蒸干，残渣加 0． 02 mol·L－1 盐酸溶液溶解 并转移至 25 mL 量瓶中，定容，作为样品储备液。取内 标贮备液 1． 0 mL 置于 20 mL 量瓶中，加样品储备液
中图分类号 R286； R927． 2
文献标识码 A
文章编号 1004－0781（ 2012） 12－1624－04
Determination of 16 Amino Acids in Cordyceps Mycelium Powder by RP-HPLC
SHI Yun-feng1 ，LIN Li-qin2 ，WANG Jin-lan1 （ 1． Zhejiang Institute for Food and Drug Control，Hangzhou
收稿日期 2012－06－12 修回日期 2012－08－15 作者简介 石云峰（ 1979 －） ，男，内蒙古人，主管药师，硕 士，主要从事药品检验与药品质量标准的研究。电话： 0571 － 86459422，E-mail： lin－net@ 163． com。
量。 1 仪器与试药 1． 1 仪 器 Agilent 1100 高 效 液 相 色 谱 仪； DHG9023A 型电热恒风干燥箱（ 上海精宏实验设备有限公 司） 。 1． 2 试药 PITC，Alpha Aesar 公司，纯度 99． 0% ； 乙 腈为色谱纯，醋酸钠、三乙胺、醋酸皆为分析纯。正亮 氨酸对照品，Sigma 公司，纯度≥98． 5% 。氨基酸对照 品（ 批号： 100624-200805） ，包括天冬氨酸（ Asp） 、谷氨 酸（ Glu） 、丝氨酸（ Ser） 、甘氨酸（ Gly） 、组氨酸（ His） 、 精氨酸 （ Arg） 、苏 氨 酸 （ Thr） 、丙 氨 酸 （ Ala） 、脯 氨 酸 （ Pro） 、缬 氨 酸 （ Val ） 、甲 硫 氨 酸 （ Met ） 、异 亮 氨 酸 （ Ile） 、亮氨酸（ Leu） 、苯丙氨酸（ Phe） 、赖氨酸（ Lys） 及 脯氨酸（ Pro） 均来自中国食品药品检定研究院。草头 孢菌粉为国内企业提供，批号分别为 101102，110101， 110203，20110705，20110706，20100811，20110203， 20110205，101009，20110617，样品号分别为 1 ～ 10。
10 mL，加 0． 02 mol·L－1 盐酸溶液定容，摇匀，作为样 品溶液。取上述样品溶液 2． 0 mL，按“2． 2． 2”项下“加 入 1 mol·L－1 三乙胺乙腈溶液 1． 0 mL”起操作，即得。 2． 2． 4 空 白 溶 液 取 0． 02 mol · L－1 盐 酸 溶 液 2． 0 mL，按“2． 2． 2”项下“加入 1 mol·L－1 三乙胺 乙腈溶液 1． 0 mL”起操作，即得。 2． 2． 5 内标溶液 取内标储备液 1． 0 mL，置于 20 mL 量瓶中，加 0． 02 mol·L－1 盐酸溶液定容，摇匀，取上述 溶液 2． 0 mL，按“2． 2． 2”项下“加入 1 mol·L－1 三乙胺 乙腈溶液 1． 0 mL”起操作，即得。 2． 3 系统适用性溶液 取混合对照品溶液、供试品溶 液、空白溶液及内标溶液各 4 μL，按“2． 1”项下色谱条 件进行测定，16 种氨基酸及内标各色谱峰之间分离度 较好，空白无干扰，见图 1。16 种氨基酸及内标色谱峰 分离度及理论板数见表 2。 2． 4 线性关系和检测限 精密吸取“2． 2． 2”项下对 照品储备液 0． 5，1，2，3，4，5 mL，分别置 20 mL 量瓶 中，分别加入内标贮备液 1． 0 mL，加 0． 02 mol·L－1 盐 酸溶液定容，摇匀。取上述溶液 2． 0 mL，按“2． 2． 2”项 下“加入 1 mol·L－1 三乙胺乙腈溶液 1． 0 mL”起操作， 即得系列浓度溶液，按上述色谱条件进样测定，分别以 氨基酸对照品峰面积与内标峰面积比为纵坐标，对照 品浓度（ μg·mL－1 ） 为横坐标，绘制工作曲线，计算回 归方程。见表 3。将供试品溶液稀释 10 倍后进样测 定，峰面积最小的蛋氨酸（ Met） 的色谱峰 S / N = 10，故 认为该方法可用于氨基酸的定量测定。 2． 5 精密度实验 取 1 号样品的供试品溶液，按上述 色谱条件连续进样 6 次，计算 16 种氨基酸进样精密 度，16 种 氨 基 酸 峰 面 积 与 内 标 峰 面 积 比 的 RSD 均＜2． 0% 。 2． 6 稳定性实验 取 1 号样品的供试品溶液，按上述 色谱条件分别于 0，4，12，16，20 h 进样，16 种氨基酸峰 面积与内标峰面积比的 RSD 均＜2． 0% 。 2． 7 重复性实验 精密称取 1 号样品 6 份，每份约 20 mg。按“2． 2． 2”项下方法制备供试品溶液，依上述 条件进样测定，计算各氨基酸含量，除 His 和 Met 的 RSD 分别为 2． 6 % 和 3． 8% 外，其余 14 种氨基酸的 RSD 均＜2． 0% 。 2． 8 加样回收实验 精密称取已测知含量的 1 号样 品 6 份各 10 mg，分别置玻璃安瓿中，精密加入氨基酸 混合 对 照 品 储 备 溶 液 2． 5 mL，加 6 mol · L－1 盐 酸 6 mL，按“2． 2． 3 ”项下自“充氮熔封，于 110 ℃ 水 解 24 h”起操 作，制 备 所 需 溶 液，按 上 述 色 谱 进 样 测 定，计算回 收 率，Asp、Glu、Ser、His、Arg、Thr、Ala、P ro、
人工冬虫夏草不同部位氨基酸含量的测定[1]
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食品科学
2011, Vol. 32, No. 08 259
人工冬虫夏草不同部位氨基酸含量的测定
陆艳艳，邱细敏 *，黄思玉，肖 依，王检兵，陈 成
(湖南师范大学医学院，湖南 长沙 410006) 摘 要：目的：检测人工冬虫夏草不同部位中氨基酸的含量。方法：使用氨基酸分析仪，以茚三酮为衍生试剂， 采用柱后衍生法测定人工虫草不同部位中氨基酸含量。结果：在蛹虫草的固体培养残基、子实体、菌丝体中都至 少含有 17 种常见氨基酸和 8 种必需氨基酸，总氨基酸含量分别为 8.32%、21.68% 和 23.19%，必需氨基酸的含量分 别为 3.74%、8.11% 和 8.88%。结论：人工虫草中不但子实体含有腺嘌呤、腺苷和虫草素，菌丝体及固体培养残 基也含有这 3 种主要核苷类物质，具有进一步开发利用价值。 关键词：人工虫草；子实体；菌丝体；固体培养残基；氨基酸
3 讨 论
谷氨酸(Glu)有较高的营养价值，它能解除代谢过程 中氨的毒害作用，具有保肝护肝作用，且能改进维持 大脑机能，对于治疗神经损伤、癫痫均有一定疗效。 脯氨酸(Pro)在稳定生物大分子结构、解除氨毒等方面起重 要作用，且能坚固牙齿、治疗神经组织退化等疾病[ 1 5 ] 。 因此人工冬虫夏草可能在治疗这些疾病方面有更明显的 效果，这一推测有待于进一步论证。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
人工冬虫夏草 湖南益康高科技生物有限公司；Na 型阳离子交换柱(4.6mm × 60mm)。
氨基酸标准液 日本日立公司；盐酸(化学纯)；醋 酸钠、醋酸、丙二醇、柠檬酸二钠等( 均为色谱纯) 。
AUY120 电子分析天平 日本岛津公司；L-8800 全 自动氨基酸分析仪 日本日立公司。 1.2 方法
虫草头孢菌粉标准
虫草头孢菌粉标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：虫草头孢菌粉，是一种具有广泛用途的微生物农药，它是利用虫草菌和头孢菌两种微生物混合制成的一种有益的生物制剂。
虫草头孢菌粉的有效成分虫草菌和头孢菌都是天然微生物，对环境无污染，对人畜无毒害。
而且，其具有很强的杀虫、杀菌作用，可以广泛用于农作物的病虫害防治。
本文将介绍虫草头孢菌粉的标准制定过程、产品特性、使用方法以及其在农业生产中的应用。
一、虫草头孢菌粉的标准制定过程1. 界定产品范围：首先确定虫草头孢菌粉的产品范围，包括所含有效成分、理化指标、生物特性等。
2. 汇总市场需求：调研市场对虫草头孢菌粉的需求情况，包括应用领域、用量、作物类型、防治对象等，为制定标准提供参考依据。
4. 完善测试方法：确定虫草头孢菌粉的测试方法，检测有效成分含量、微生物数量、杀菌、杀虫效果等指标。
5. 进行实验验证：通过实验验证虫草头孢菌粉的产品标准，确认其符合要求。
6. 制定使用规范：制定虫草头孢菌粉的使用规范，包括使用方法、注意事项、规范用量等，以确保产品在实际应用中达到最佳效果。
二、虫草头孢菌粉的产品特性1. 天然无毒：虫草头孢菌粉由虫草菌和头孢菌混合制成，对环境无污染，对人畜无毒害，是一种绿色环保的生物制剂。
2. 精确靶向：虫草头孢菌粉能精确靶向农作物病虫害，有效控制害虫、病菌的繁殖，减少农药使用量。
3. 高效安全：虫草头孢菌粉具有很强的杀虫、杀菌作用，能够快速有效地控制农作物的病虫害，确保作物健康生长。
4. 长效稳定：虫草头孢菌粉能够长效稳定地保持在农作物表面，持续发挥防治作用，有效延长防治效果。
5. 安全无残留：虫草头孢菌粉在农作物上残留时间短，不会对人畜产生危害，符合绿色环保要求。
1. 原料准备：虫草头孢菌粉的原料为虫草菌和头孢菌，根据产品说明书准备所需的原料和工具。
2. 制备过程：按照产品说明书的操作步骤，将虫草菌和头孢菌按比例混合制成虫草头孢菌粉。
3. 使用方法：将虫草头孢菌粉均匀喷施在农作物叶面或土壤表面，根据病虫害类型和严重程度确定使用剂量。
发酵虫草菌粉质量标准
发酵虫草菌粉拼音名：Fajiao Chongcaojun Fen英文名：书页号：X5-8 标准编号：WS3-181(Z-60)-94(Z)批准文号：（91）卫药准字Z-82号本品为从青海新鲜冬虫夏草中分离得到的麦角菌科真菌冬虫夏草[Cordyceps sinensis(Berk.)Sae.] 的无性世代──中华束丝孢(Synnematum sinense Yin et Shen sp. now)菌种经液体发酵培养所得菌丝体的干燥粉末。
【性状】本品为灰色至淡黄色粉末；气微腥。
【鉴别】 (1)取本品少量，加亚甲蓝染色后，置显微镜下油镜检视，可见有隔,多核菌丝。
(2) 取本品约1g，加无水乙醇5ml，摇匀，静置过夜，吸取上清液1ml，蒸干，残渣加冰醋酸1ml使溶解,加醋酐1ml，再加硫酸1滴，初显黄色，渐变红色、紫色、蓝色、墨绿色。
【检查】水分照水分测定法(中国药典1990年版一部附录30页烘干法)测定，不得过6.0％。
炽灼残渣不得过7.0％(中国药典1990年版一部附录32页)。
卫生学检查应符合《药品卫生标准》的规定。
【含量测定】 (1)氨基酸取本品约20mg，精密称定，置180×18mm试管中，加盐酸液(6mol/L)6ml，真空封管，放入110℃(±1℃)烘箱中，水解24小时。
打开试管封口, 把内容物移入蒸发皿中，试管用水25ml分次冲洗，洗液并入蒸发皿中，蒸干，残渣用盐酸液(0.02mol/L)分次洗涤，含并洗涤液，滤过，滤液移至50ml量瓶中,稀释至刻度，摇匀。
用氨基酸自动分析仪测定。
本品含总氨基酸不得少于30.0％。
其中酪氨酸的相对百分比含量不得少于2.0％。
赖氨酸不得少于5.5％，组氨酸不得少于4.5％；精氨酸不得少于8.5％。
(2)甘露醇取本品1g，精密称定,置150ml圆底烧瓶内,加乙醇100ml,回流2小时。
放冷2小时,滤过,精密量取滤液4ml,照甘露醇含量测定法(中国药典1990年版二部附录76 页)自“置碘量瓶”起，依法测定。
发酵虫草菌粉药材标准
发酵虫草菌粉药材标准一、菌种鉴定1. 发酵虫草菌粉应采用经过鉴定并确认的菌种进行发酵。
2. 菌种应具有稳定、优良的发酵性能，以确保产品质量。
二、菌粉制备1. 发酵虫草菌粉的制备应按照规定的工艺流程进行，确保产品质量。
2. 制备过程中应严格控制温度、湿度、时间等条件，以确保菌种的活性。
3. 制备好的菌粉应进行干燥、粉碎等处理，以便于保存和使用。
三、质量检测1. 发酵虫草菌粉的质量检测应包括外观、性状、鉴别、含量等项目。
2. 外观应呈淡黄色或黄绿色，无杂质，无异味。
3. 性状应符合规定，具有发酵虫草菌粉应有的特性。
4. 鉴别应采用显微镜观察等方法进行，以确定菌种的真实性。
5. 含量应符合规定，以保证产品的有效性和安全性。
四、安全性评估1. 发酵虫草菌粉的安全性评估应包括急性毒性试验、长期毒性试验、致畸试验等项目。
2. 急性毒性试验应显示低毒性或无毒性。
3. 长期毒性试验应显示无潜在毒性作用。
4. 致畸试验应显示无致畸作用。
5. 经过安全性评估的产品方可投入生产和使用。
五、包装与标识1. 发酵虫草菌粉的包装应采用密封性好、防潮、防氧化等材料。
2. 包装上应有清晰的标识，包括产品名称、规格、生产日期、有效期等内容。
3. 标识应符合国家相关法规和标准的规定。
六、储存与运输1. 发酵虫草菌粉应储存在阴凉、干燥、通风的地方，避免阳光直射和高温。
2. 运输过程中应避免剧烈震动和碰撞，防止产品破损或变质。
3. 储存和运输过程中应保持产品包装的完整性和密封性。
七、有效期与稳定性1. 发酵虫草菌粉的有效期应根据产品的稳定性试验结果确定。
2. 在有效期内，产品应保持稳定的质量和药效。
3. 对于过期或不符合质量标准的产品，应按照相关规定进行处理。
八、生产与销售规范1. 生产厂家应具备相应的生产资质和条件，确保产品质量和安全。
2. 生产过程中应严格遵守国家相关法规和标准，确保产品质量符合规定。
3. 产品销售应遵守国家相关法规和规定，不得进行虚假宣传或误导消费者。
虫草头孢菌粉粗多糖的理化性质和含量测定研究_邹峥嵘
取虫草菌粉粗多糖溶液２ｍｌ，加入浓硫酸２ｍｌ，静 置５ｍｉｎ，再加入新配制的斐林试剂２ｍｌ，在沸水浴中反 应２ｍｉｎ，观察反应中颜色的变化。
取虫草菌粉粗多糖溶液２ｍｌ，加入新配制的双缩脲 ２ｍｌ（先加Ａ 试剂２ｍｌ，再加Ｂ 试剂３～４ 滴），在沸水浴 中反应２ｍｉｎ，观察反应中颜色的变化。
粉直接制备而成，化学组分十分复杂，作用机制不明 确，质量控制的标准和方法也有待完善，从而极大地 影响了产品的使用和推广。虫草多糖作为虫草中含量最 高的生物活性物质，引起了人们对它的极大兴趣和广泛 关注。大量医学实验证实，虫草多糖可活化巨噬细胞， 刺激抗体产生，提高人体免疫能力［４－５］。此外，虫草多 糖的抗肿瘤活性也逐渐被人们公认［６］。
※基础研究
食品科学
2007, Vol. 28, No. 09 87
浓硫酸 天津市永大化学试剂开发中心；氢氧化钠、 硫酸铜、碳酸钡、葡萄糖 南昌鑫光精细化工厂。以 上试剂均为分析纯。 １．３ 仪器
ＳＨＢ－Ｃ型循环水真空泵、Ｒ２０１型旋转蒸发器 郑 州杜甫仪器厂；ＷＦＪ－７２００型可见光光度计 尤尼柯（上 海）仪器有限公司；ＢＳ２２３电子天平 北京赛多利斯仪器 系统有限公司；ＤＨＧ－９２４０Ａ型电热恒温鼓风干燥箱 上 海精宏实验设备有限公司；ＨＨ－６型数显恒温水浴锅 国 华电器有限公司； ＳＧ２５０－Ｈ型超声波清洗器 上海冠特 超声仪器有限公司。 １．４ 方法
１ 材料与方法
１．１ 材料 虫草菌粉（Ｃｓ－４） 深圳市汇康生物科技有限公司南昌
分公司。 １．２ 试剂
乙醇、石油醚 天津市福晨化学试剂厂；乙酸乙 酯、苯酚 成都市科龙化工试剂厂；正丁醇、氯仿、
收稿日期：２００７－０８－１０ 作者简介：邹峥嵘（１９７０－），男，副教授，主要从事天然产物的研究和开发。
蚊子草中氨基酸及矿质元素的含量测定
Ａｂ ｔａ ｔＴ ｅｅ ｎ ｏ ｔ ｔ ｏ ａ ｎ ｃ ｓ ｎ ｉｅａ ｅ ｍ ｎｓ ｎ ￣ ｐ ｍｌｌ ｐ ｌ ｔ（ ａ ） ａ ｉ ｓ ｃ ： ｏｄ ｔ ｍｉｅ ｎｅ ｓ ｆ ｍｉ ａ ｉ ｄｍ ｎ ｒｌ ｌ ｅ ｔ ｉ ｂ ｌ ｅ ｕａ ａ ｅ Ｐ ｌ Ｍ ｘ ｒ ｒ ｃ ｎ ｏ ｄａ ｅ ｉ ｍａ １ ｍ．Ａ ｉｏａｉｓ ｅｅ ｅ ｒ ｉｅ ｍ ｎ ｃ ｒ ｄ ｔ ｍ ｎ ｄ ｄｗ ｅ
Ｊ Ｒ Ｅ Ｌ Ａ Ｈ ８ ０系 列 Ｍ ｒ一１型 电感 耦 合 等 Ａ Ｒ Ｌ — Ｓ ０ ａｋ Ｉ 离 子 体原 子发 射光 谱仪 （Ｃ ） Ｒ立 ８ ５ ５ 氨基 酸 ＩＰ ； ３—０
分 析仪 ； 高氯酸 、 硝酸为优级纯 。 蚊子草 地上 部分 ２ ０ ０ ８年 ７ ８月 份采 于吉林 省 长 ￣ 白』 ， 吉林 大学药学院王广树教授鉴定 为蚊子草 。 ｆ经 Ｉ 将 蚊 子草用 蒸馏 水 、去离子水 洗 净后置 烘箱 中干燥 、 粉
特 产 研 究
Ｓ ｅｉ ｉ ｃ ｎ ｍｉ Ａ ｉ ｌ ｎ ｌ ｔ ｓ ｒｈ ｐ ｃ ｌ ｌ Ｅ ｏ ｏ ｃ ｎｍａ ａｄＰａ ｅ ｃ ａＷ ｄ ｎ Ｒｅ ａ
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文章编 号 ：０ １ ４ ２ （ ０ ０ ０ － ０ ９ ０ １０— ７ １２ １ ）１０ ４ － ２
蚊子草 中氨基 酸及矿质 元素 的含量测定
作者 简 介 ： 锦 竹 （９ ０ ）女 ， 林 省 长 春 市人 ， 教 授 ， 事 人 然 药 物 化 学 及药 物 剂 型研 究 。 杨 １７ 一 ， 吉 副 从 通 讯 作 者 ： 晓虹 （ ４ ）Ｅ ｍａ ｘ ｝ ｇａｇ ８ ． Ｉ 杨 １５ 一 ， — ｎ ９ ｍｎｙｎ８ ＠１６Ｃ ｌ ２ Ｏ１
蚊子草 ［ ｉ ｅｄ ｌ ａ ａ Ｐ ｌ Ｍ ｘｍ］ Ｆｌ ｎ ｕａ ｌ ｔ ａ） ａｉ 为蔷薇科 ｉ ｐ ｐ ｍ ｅ（ １
冬虫夏草中各种化学成分的检测方法
冬虫夏草中各种化学成分的检测方法作者：侯芳菲来源：《农业工程技术·农产品加工》2013年第03期摘要：阐述近五年来冬虫夏草中核苷类、甘露醇、多种氨基酸等成分的检测方法，其中包括高效液相色谱法、毛细管电泳法、分光光度法等方法。
关键词：冬虫夏草化学成分检测冬虫夏草具有抗炎、抗肿瘤、降血糖、免疫调节、保护受损肝肾、镇静和抗疲劳等作用，冬虫夏草的化学成分复杂，近五年有关冬虫夏草化学成分测定方法的研究对象主要为核苷类、甘露醇、多种氨基酸、甾醇类及无机元素等。
1 核苷类物质的测定核苷类物质为冬虫夏草的主要活性成分之一，具有广泛的生理功能，其中以虫草素、腺苷等具有明显的药理作用。
近五年的测定方法主要为高效液相色谱法和毛细管电泳法。
1.1 HPLC方法测定中药成分非常复杂，HPLC因其具有各种分析柱、高选择性和高灵敏度的检测器，所以具备分离效能高、分析速度快、灵敏度高和适用范围广等优点，所以成为中药研究的最重要的分析方法。
郑永彪[1]等建立了冷冻保鲜冬虫夏草中尿苷和腺苷的HPLC测定方法。
采用Waters sunfire色谱柱（4.6mm×250mm，4.6μm），流动相系统为乙腈和水的比例和体积流量的梯度洗脱程序，柱温35℃，检测波长260nm。
结果尿苷和腺苷的线性范围分别为0.0340～0.340μg，0.00494～0.0494μg，平均加样回收率分别为98.70%（RSD为0.48%）、97.39%（RSD为1.6%）。
该方法简便快捷、准确精密、重复性好，能用于冷冻保鲜冬虫夏草中腺苷和尿苷的同时测定。
周伟平[2]等建立了采用Agilent EclipseXDB-C18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱同时测定西藏产冬虫夏草中尿苷及腺苷的含量的方法，检测波长为260nm，以甲醇-水为流动相梯度洗脱，流速1.0mL/min，柱温33℃。
尿苷及腺苷的线性范围为32.95～439.3μg/mL（r=0.9999）和3.486～46.48μg/mL（r=0.9999），平均回收率分别为98.5%、95.6%，RSD值分别为1.8%和2.4%（n=6）。
冬虫夏草的化学成分
冬虫夏草 - 化学成分冬虫夏草内包括水分10.84%，粗蛋白25.32%，粗纤维18.55%，碳水化合物28.9%，灰分4.1%，脂肪8.4%，有效成分概括起来主要有以下几类。
核苷类化合物核苷类物质（腺苷、尿苷、鸟苷）为冬虫夏草有效成分之一，尤以腺苷具有明显的药理作用。
1951年，由加拿大学者Cunningham等从虫草的培养物中分离得到冬虫夏草素（cordycepin）。
国内学者吕瑞绵等从西藏产冬虫夏草中分离得到尿嘧啶、腺嘌呤、腺嘌呤核苷。
水溶性核苷类成分主要集中在子座部分，虫体含量甚低，并且从子座的水浸液分离得到微量的次黄嘌呤、鸟嘌呤、腺嘌呤和核苷。
刘静明等从长春蛹冬虫夏草菌丝中分离得到腺苷、腺嘌呤和冬虫夏草素，其中腺嘌呤和冬虫夏草素首次从菌丝体中分离得到。
多糖类成分虫草多糖（cordyceps. polysacchride,CP）是主要活性成分之一，具有抗肝纤维化、免疫调节、抗肿瘤、降血糖等多方面的作用。
1977年，宫崎等人从冬虫夏草中分离出来一种水溶性的高度分支的半乳糖甘露醇聚糖，非还原性末端均为D-呋喃半乳糖吡喃甘露糖。
Tadashi等从冬虫夏草中提取分离出一个含蛋白的半乳甘露聚糖（CT- 4N），测定该多糖主要由D-甘露糖和D-半乳糖摩尔比为3∶5组成。
季晖等从人工菌丝经热水提取乙醇沉淀DEAE-Toyopear1650 M柱层析得多糖精品（CHWP），产率1.71%，凝胶过滤法测得其分子量为3.2×104，CHWP经纸层析和气相层析分析显示含D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖，其克分子比值为1.0∶2.7∶1.8，并且通过药理实验验证了CHWP的降血糖作用。
甾醇及糖醇类成分20世纪80年代初，学者从冬虫夏草、凉山冬虫夏草、亚香棒冬虫夏草中已分离出麦角甾醇、麦角甾醇过氧化物、麦角甾醇-β-D吡喃葡萄糖苷、2，2-二羟基麦角甾醇、β-谷甾醇、D-甘露醇和蕈糖。
吕瑞绵等从西藏产冬虫夏草中分离得到了蕈糖、甘露糖等糖醇类及麦角甾醇。
一种虫草头孢菌粉药物制剂中核苷类成分的含量测定方法[发明专利]
专利名称：一种虫草头孢菌粉药物制剂中核苷类成分的含量测定方法
专利类型：发明专利
发明人：严敏,谢义鹏,施猛,周锦,刘艳霞
申请号：CN201910425597.7
申请日：20190521
公开号：CN111983042A
公开日：
20201124
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种虫草头孢菌粉制剂的质量控制方法，借助高效液相色谱分离技术，对活性成分腺苷进行了含量测定。
该方法灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确的评价虫草头孢菌粉制剂的质量，对控制质量和保证疗效具有重要意义。
申请人：扬子江药业集团四川海蓉药业有限公司
地址：611830 四川省成都市都江堰市彩虹大道南段802号
国籍：CN
代理机构：成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)
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虫草头孢菌粉的作用是什么【医学养生常识】
虫草头孢菌粉的作用是什么文章导读冬虫夏草是一种非常名贵的滋补的中药材，可以食用，也可以药用，与天然人参，鹿茸被称作是三大滋补品。
冬虫夏草也是我国特产，也是名贵的中药材，它具有补虚损，易精气，止咳化痰的功效。
而虫草头孢菌粉是保健营养滋补品，现在已经被广泛运用到制药当中，我们现在来看看虫草头孢菌粉的作用是什么吧。
虫草头孢菌粉是从天然冬虫夏草新鲜标本中分离得到的虫草头孢新菌株，采用生物工程技术精制而成。
通过现代测试手段分析证明:其成分与天然冬虫夏草基本一致，富含多种氨基酸和微量元素，其中虫草酸、虫草素、虫草多糖、氨基酸的含量远远高于天然冬虫夏草。
虫草头孢菌粉中主要有效成分如下：氨基酸（18种人体所需氨基酸）、多种微量元素；多糖：大于等于10%，启动巨噬细胞，增强免疫及造血能力；腺苷（虫草素）：大于等于0.3%，舒缓压力及紧张情绪、帮助睡眠、增强体力、耐力增加。
男士不容易疲倦；女士能活血，提升气血，产前产后调理更佳，面色红润，手暖足温，美容健体。
有效维持健康胆固醇；虫草酸（D-甘露醇）大于等于13.0%，舒畅器官、止咳平喘、减少呼吸道问题、针对鼻部敏感症状、强化肾上腺素、减少呼吸道问题；麦角甾醇：大于等于0.15%，强化心脏及心血管功能，抑制有害细胞生长；超氧歧化酶（SOD）：少量，抗氧化、增强脑部供氧量、提升脑力及记忆力，舒缓读书压力。
对抗身体或机能老化，令心、肺、肾及脑部保持健康精灵；蛋白质：31.0%--35.0%，是构成人体细胞及生命活动的基础物质。
以上就我们给大家介绍的一些关于虫草头孢菌粉的作用，相信大家对它已经有了一些了解了。
虫草头孢菌粉其中异亮氨酸提供能量；苯氨酸用于治疗贫血；蛋氨酸用于合成胆碱，肌酸，肾上腺素等；亮氨酸能够促进生长；苯丙氨酸还能转化为肾上腺素、甲状腺素、黑色素、多巴胺等；赖氨酸促进生长发育等。