叶绿素的光敏性质探究
植物叶绿素荧光特性及其生态意义研究
植物叶绿素荧光特性及其生态意义研究植物叶绿素荧光是一个重要的属性，它可以告诉我们很多关于植物生长和繁殖的信息。
这篇文章将介绍植物叶绿素荧光的特性和生态意义，并描述一些有趣的研究结果。
叶绿素荧光是植物在光合作用中产生的辐射能的损失。
在光合作用中，植物将光能转化为化学能，并在过程中产生氧气和三磷酸腺苷（ATP）。
然而，一些光能不能被利用，而是通过叶绿素的荧光释放到周围环境中。
这些发射的光谱可以用来测量植物在光合作用中的效率。
植物叶绿素荧光的特性叶绿素荧光谱通常呈现双峰，其中一个峰位于低能量端，另一个峰位于高能量端。
这个双峰结构是由于叶绿素分子从激发态退回到基态时发射光子的不同机制导致的。
叶绿素分子的激发态可以通过两种不同的途径退回到基态，即辐射跃迁和非辐射跃迁。
前者会导致能量通过荧光或热散失，后者通过电子传递到叶绿素分子的其它部位，从而产生化学反应。
不同途径的影响使得叶绿素荧光谱有双峰结构，其中高能峰和低能峰分别对应于这些退激发途径。
此外，在植物处于不同的环境或生理状态下，叶绿素荧光谱也会发生变化。
例如，叶绿素荧光谱的低能峰可以由于温度和水分的变化而发生变化。
当植物受到氧化压力时，如叶片受到光合亏损或氧化逆境时，荧光信号也会增加。
叶绿素荧光在生态学中的应用叶绿素荧光在生态学中有着广泛的应用，从植物的生理响应到生态系统的生物地球化学循环。
以下是一些例子：- 环境压力监测：叶绿素荧光的变化可以指示植物对环境压力的响应，如干旱、温度、光照和污染等。
因此，通过监测叶绿素荧光信号的变化可以更好地理解植物对环境变化的适应性和敏感性。
- 生物地球化学循环：植物叶绿素荧光可以用来估算植物的净生产力和呼吸作用的速率。
这些数据可以用于计算碳汇、生产力和生态系统氮循环等生物地球化学循环的参数。
- 地球观测：叶绿素荧光信号在遥感数据中被广泛使用。
卫星可以监测植物叶绿素荧光信号，从而提供全球植被生长状况的信息。
这种信息可以用于监测全球气候变化和评估全球生态系统的健康状况。
植物叶绿素荧光特性及其在抗旱研究中的应用
植物叶绿素荧光特性及其在抗旱研究中的应用植物是人类生命的重要物质基础，而叶绿素则是植物生命的重要组成部分。
叶绿素具有很多特性，其中最为重要的是荧光特性。
本文将就植物叶绿素荧光特性及其在抗旱研究中的应用进行探讨。
一、叶绿素荧光特性叶绿素在光能量的作用下，吸收蓝光和红光后通过光合作用合成生物质，同时散发出绿光。
然而，当植物遭遇压力时，光合作用会受到抑制，而叶绿素则会发生鬼影效应，散发出不同于正常光合作用时的荧光信号，称为叶绿素荧光。
叶绿素荧光具有多种波长和不同时间尺度的特征。
在光合作用正常的情况下，叶绿素荧光强度较弱，而当植物受到环境胁迫时，会出现荧光强度升高的现象。
此外，叶绿素荧光的发射波长也会受到影响，通常可分为低能级和高能级两类，其中低能级荧光由氧化还原电子接受器所产生，而高能级荧光则来自于光化学反应中反向电子转移所产生。
由于叶绿素荧光和植物的环境条件息息相关，可以通过对叶绿素荧光特性的研究，获得植物在不同环境下的光合作用状况，从而为植物的生长发育以及应对压力提供有力支持。
二、叶绿素荧光在抗旱研究中的应用作为重要的植物生理信号，叶绿素荧光被广泛应用于植物抗旱研究中，既可以作为抗旱育种的优良指标，也可以为了解植物在抗旱过程中的生理特性提供有价值的信息。
下面我们将重点介绍叶绿素荧光在抗旱研究中的应用。
1. 植物光合能力的评估叶绿素荧光可以为植物光合能力的评估提供有力支持。
特别是在干旱等压力下，光合能力明显受到影响，叶绿素荧光的变化可以及时反映植物光合作用的状况。
研究表明，叶绿素荧光在叶片的不同部位和不同光合作用阶段有不同的变化规律和响应方式，因此对于不同物种、不同品种，以及在不同环境下的植物进行研究时，需要结合具体环境因素和生理特性进行分析。
2. 叶片水分状态的评估在干旱环境下，植物叶片中的水分含量明显下降。
此时，叶绿素荧光信号的强度和峰值均会出现变化，可以反映叶片的水分状态。
尤其在干旱环境下，叶绿素荧光信号的强度和峰值变化更为显著，因此可作为评估植物抗旱能力的重要指标之一。
植物光敏色素的结构和功能研究
植物光敏色素的结构和功能研究植物是地球上最为重要的生命形式之一，作为光合生物，植物需要通过吸收阳光中的光能来完成自身的生长、发育和繁衍。
而植物能够利用光能的重要途径，就是通过植物光敏色素对不同波长光线的选择性吸收和反应。
随着现代科学技术的不断发展，对于植物光敏色素的结构和功能的研究也越来越深入，对于揭示植物的生命活动以及提高植物的生产力和适应性具有重要的意义。
本文将从植物光敏色素的基本特征、结构和功能及其在植物生理生态方面的研究进行探讨和总结。
一、植物光敏色素的基本特征植物光敏色素是植物体内的一类光感蛋白，主要存在于植物叶片、茎、花、根和果实等组织部位，其主要作用是通过吸收外界光能来促进植物的光合作用和其他生物学过程。
根据其吸收波长和结构特征的不同，植物光敏色素可以分为三类：类黄酮、叶绿素和类胡萝卜素。
1. 叶绿素：叶绿素是植物中最为常见的光敏色素，其结构与嗜银杆菌叶绿素类似，由一个长有卡宾环结构的类胡萝卜烯分子和一个镁离子组成。
叶绿素能够吸收蓝绿光和红光，其吸收光谱范围为400-700nm。
叶绿素在光合作用中起到了核心作用，能够转换并储存太阳光能，并将其转化为有机物质。
2. 类黄酮：类黄酮是植物中的次要黄色素，其结构特征为具有一个或多个苯环和/或吡喃环的多羟基黄酮化合物。
类黄酮的吸收光谱范围主要为250-550nm，对紫光和蓝光吸收最强，但不能吸收红光。
类黄酮在植物中的功能主要是通过吸收紫外光和蓝光来减轻光破坏并保护光合色素。
3. 类胡萝卜素：类胡萝卜素是植物中黄色和红色色素的主要来源，其结构特征为由若干个异构体的类胡萝卜烯分子组成。
类胡萝卜素的吸收光谱范围为400-500nm，其吸收红光的能力较弱。
类胡萝卜素在植物中主要功能是保护光合色素，调节抗氧化作用和参与胡萝卜素代谢。
二、植物光敏色素的结构和功能植物光敏色素的结构和功能之间密不可分，其复杂的结构及其对外界各种因素的敏感性决定了其具有多种重要的生物学功能。
叶绿素的光敏性质探究
叶绿素的光敏性质探究（与二氢卟吩e4对比）研究背景光敏剂的光漂白（photobleaching）是指在光的照射下，光敏剂所激发出来的荧光强度随着时间推移逐步减弱乃至消失的现象，这是光动力诊断临床应用中考虑光剂量和检测需用时间的一个重要因素。
长波红光在组织中具有较大的穿透深度，从而能保证足够的治疗深度：大的吸光度能保证充分利用光能量和尽可能减少药物剂量；光敏剂吸光度的大小是决定药物剂量的理论依据。
过多的光敏剂分布于癌组织中势必会影响光的穿透深度，然而使用过少的光敏剂又不能产生应有的疗效。
因此，光敏剂的使用剂量要依据其吸光度的大小和肿瘤组织的大小来权衡。
对于同一种光敏剂，它的漂白时间将随入射光的光能流率的增大而减小。
再次，除了与光敏剂的类型有关外，还与初始浓度和入射光源的波长有关。
初始浓度越大，光漂白时间越长。
实验意义：探究不同浓度的叶绿素在不同光源、不同时间的照射下，其吸光度随时间的变化，探测其光漂白特性，为更好地在临床应用上要保持光敏剂的有效杀伤浓度，且控制好光敏剂的激发时间，这样才能保证治疗的效果。
初步设想：探究叶绿素在不同浓度，不同光源，不同光照时间对光的敏感性：（1）用紫外检测得到叶绿素的紫外可见吸收光谱，与二氢卟吩e4的光谱图比较。
（最好能同时测定荧光光谱）（2）在叶绿素的最大吸收波长处检测浓度为0.05 mg/ml ，0.1 mg/ml ，0.2 mg/ml ，0.3 mg/ml， 0.4mg/ml的叶绿素的吸光度，并制作曲线图，验证其是否符合朗伯-比尔定律。
（3）实验设置了不同的六组光源：白光、红外光、黄光、绿光、蓝光、紫外光，分别对0.4mg/ml的叶绿素待测样品进行垂直照射10min、20min、30min、40min、50min、60min、80min、100min，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，通过光谱的变化，探究光敏剂叶绿素明显的光漂白特性。
（4）另外，关于温度的影响关系实验，在恒温水浴锅里设置叶绿素溶液（0.4mg/ml）的温度分别为7℃，17℃，27℃，37℃，47℃，57℃，然后检测其吸光度，探究温度对吸光度的影响。
叶绿素荧光是光合作用研究的探针课件
D-荧光检测器；A-信号放大器；SF-短波滤光片；LF-长波滤光片 18
荧光猝灭－任何使荧光产额低于其最大值的过程。
光化学猝灭－由光化学反应引起的荧光产额的降低，它
依赖于氧化态QA的存在。 非光化学猝灭－由非光化学过程如热耗散过程引起的荧 光产额的降低。
●Fv/Fo： 是Fv/Fm的另一种表达形式，但从度量上，该
指标变化范围大，比Fv/Fm更易区别不同处理间的差别。
两个指标的意义基本相同。一般没有必要同时用Fv/Fm和
Fv/Fo来表示PSII最大光化学效率。
26
在非胁迫条件下，Fv/Fm的值很稳定， 据Bjorkman and Demmig对大量植物的测定， 其平均值为0.832+0.004，但在逆境条件下， Fv/Fm显著降低。正因为如此，所以Fv/Fm 的降低常作为发生光抑制或PSII遭受其他伤 害的指标。
叶绿素荧光是研究光合作用的探针
叶绿素荧光是研究光合作用的一个敏感的探针，叶 绿素荧光分析具有灵敏、简便，快速和对植物无破坏损 伤的特点。它既可以用于叶绿体、叶片，也可以遥感用 于群体、群落。它既是室内光合基础研究的先进工具， 也是室外自然条件下诊断植物体内光合机构运转状况、 分析植物对逆境响应机理的重要方法。
1.光化学反应（光合作用、光呼吸、氮代谢） 2. 放热，又称非辐射能量耗散 3. 发射荧光 这三者之间存在此消彼长的竞争关系，所以可以通过 荧光的变化探测光合作用的变化。
通常色素分子是处于能量的最低状态－基态，吸收一
个光量子后，会引起原子结构内电子分布的重新排列。其
中一个低能的电子获得能量而成为激发态。
100 m mol m-2 s-1 PFD. ▲, chilling treatment under low irradiance;
分析叶绿素荧光的原理和应用
分析叶绿素荧光的原理和应用叶绿素荧光是一种十分常见的现象，它不仅仅是生命科学领域中的一个重要指标，同时还有广泛的应用前景。
本文将从原理、测量方法、应用方面进行分析，探究叶绿素荧光的作用和意义。
一、原理叶绿素荧光的产生是叶绿素分子吸收光子所产生的能量，在发生碰撞后的一部分能量导致光子发射出去发生荧光。
这种发射光谱是叶绿素基态发射峰的红外边，并且受到长波长（630 nm）和短波长（450-460 nm）激发的光谱区域。
其中，630 nm波长激光产生的荧光一般称为永久荧光（P叶绿素荧光），450 nm波长激光产生的荧光则通常称为瞬态荧光（R叶绿素荧光）。
叶绿素荧光的产生与叶绿素分子的光合作用有着密不可分的联系。
在光合作用中，叶绿体中的叶绿素会吸收光子，将其能量捕获并传递给其他分子，最后被转化为化学能。
但在某些情况下，能量被退回到叶绿素中，这样就会产生荧光发射。
因为荧光光谱的位置和形态与吸收光谱是相反的，所以通过荧光可以了解叶绿素分子的吸收和转移过程。
二、测量方法通过测量叶绿素荧光可以获取许多与光合作用有关的信息，包括叶绿素荧光发射的强度和发射峰的位置等。
测量叶绿素荧光的方法可以分为光谱测量和成像测量两种。
在光谱测量中，通常使用荧光光谱仪对样品进行测量。
通过选择合适波长的激发光及检测荧光的波长范围，可以获取不同波段的荧光光谱。
这种测量方法适用于对荧光分子光学特性的研究和对不同类型样品的快速分析。
成像测量则是通过显微成像技术实现的。
光学显微镜通常需要卷起样品和探针，然后将样品放在显微镜下面进行观察。
从这样的观察中可以光学地感知叶绿素荧光分布的空间分布和位置信息。
三、应用叶绿素荧光的应用非常广泛。
它可以用于控制光照条件和生长，了解植物的代谢和健康状态。
同时，还可以通过测量不同波段的荧光光谱和波长，对不同类型的样品进行研究和分析。
1. 光合作用研究光合作用是植物在光照下进行的复杂反应过程，荧光在这个过程中起着至关重要的作用。
叶绿素荧光分析
叶绿素中存在一定量的叶绿素蛋白复合物，其中影响光能吸收的因素是叶绿素蛋白复合物的含量和成分比例，捕光蛋白复合体中叶绿素a/b值较为关键，较高比例的捕光蛋白复合体（LHCP）有利于弱光下植物吸收和利用光能(Sane,1977)。
叶绿素a/b值，即叶绿素a与叶绿素b的比值，也与光合作用速率有密切关系：比值低，有利于吸收光能；比值高，在强光下的光合速率通常较高，抵抗光抑制能力较强(储钟稀等，1986)。
同时，叶绿素含量与该比值呈负相关，即叶绿素含量高，叶绿素a/b比值较低，作物叶色较深。
也有人报道认为叶绿素a/b比值与光合作用速率呈显著的负相关，该比值也可能是影响光合作用速率的内在因子之一。
“光能被色素分子吸收以后，并不是全部用于光合作用：一部分光能被传递到光反应中心，用于光化学反应；一部分光能可以辐射成荧光的方式被耗散掉；另一部分光能以热辐射的方式耗散掉，色素发射荧光的能量与用于光合作用的能量相互竞争，这是以叶绿素a荧光通常被作为光合作用无效指标的依据”(植物生理学 2003:123)，此外分子的荧光特性是由该分子的化学性质和周围环境因素的相互作用所控制的，因此叶绿素荧光测量是以叶绿素a荧光作为探针，探测和研究植物光合生理状况及各种外界因子对其的影响，是无损伤研究光合作用过程的重要手段(林世青等 1992; Krause and Weis 1988)。
植物叶片荧光动力学参数与光合特性的关系在自然条件下，叶绿素荧光和光合作用的关系十分密切(Bolhar-Nordenkampf H Ret al. 1989；Genty B et al. 1989；Schreiber U et al. 1994 )，一方面是当强光持续照射植物时，为了避免叶绿体吸收光能超过光合作用过程中光化学反应的消耗能力及过量的光能灼伤光合机构，荧光起到了重要的保护作用：一部分光能以荧光的方式被耗散掉(Gilmore A and Gofindjee，1999)；另一方面，自然条件下叶绿素荧光和光合速率一般是呈负相关的，当荧光变弱时光合速率就高，反之亦然，植物的营养受胁程度与光合作用的荧光特性有着密切的关系(徐彬彬等 2000；Krause G H and Weis E 1984；Liehtenthaler H K and Rinderle U 1984；Mefarlane J C er al. 1980；Sehreiber U and Bilger W 1987；)，因此叶绿素荧光可作为营养诊断探测叶片光合功能的快速、无损伤探针(张木清 2005)通过植物荧光特性探测可以了解植物的生长发育以及对逆境胁迫、病虫害等的生理响应，与“表观性”的气体交换指标相比叶绿素荧光更具有反映“内在性”的特点(Lin S Q etal. 1992)。
光动力疗法所用叶绿素类光敏剂的研究进展
常 重要 的 因素 ， 组织 的增 加和 吸收波 长 的减少都 将影 响光 的 吸收和分 散 。组 织 吸收成 分包括 核 酸 、 氨基 酸、 血红 蛋 白和 黑色 素等 ， 对于核 酸 和氨基 酸 ， 们 的吸收 波长 通 常在 ２０～ ０ ｎ 之 间 ， 以它们 对 于 它 ５ ３０ ｍ 所
通 讯 联 系 人 ， － ｉ：ｔｘ ｘ＠ １６ ｃｎ Ｅｍａ ｙｄｗ ｒ ２ ．ｏ ｌ
第 ５期
王进军 等 ： 光动力疗法 所用 叶绿素类 光敏剂 的研究进展
４ ３
２ 理想 光敏剂 的结构 特征 和光 敏性 质
单线 态氧 在细胞 质 中 的扩 散 范 围局 限于 ４ ｎ＇ 内 ， 以光线 的组织 穿 透深 度 对 光动 力 治 疗 是非 ５ ｌ之 ｌ ｌ 所
波 长大 于 ６ ０ ｍ 的光 的吸收作 用很 小 。大多数 组织 的 吸收本质 是 由血 红 蛋 白控制 的 ， ０ｎ 而血 红 蛋 白的最 强 吸收 峰 出现 在波 长小 于 ６ ０ ｍ 处 ＿ 。 随着 波 长 从 ６ ０ ｍ 增 加 至 ８ ０ ｍ， 些 吸 收 峰 的增 长很 弱 。 ２ｎ ６ ２ｎ ０ｎ 这 其他 的内源性 发色基 是 黑色 素 ， 是 由酪 氨 酸 分 子凝 结 而成 的 聚合 物 ， 在 ４ ０～７ ０ ｍ 区 间 均有 吸 它 并 ０ ０ｎ 收， 但对 较长 波长 的吸收 相对减 少 。 以上 所有 因素 提供一个 事 实 ， 于 ５ ０ ｍ 波长 的光穿 透力 很 低 ， 小 ５ｎ 而 在 ５ ０—６ ０ ｍ 穿透 力则成 倍增 长 ， ５ ３ｎ 当达到 ７ ０～８ ０ ｍ 后 ， 组织 的穿 透能力 大 幅度 提 升 。然 而 ， 长 ０ ０ｎ 对 波 大 于 ８ ０ ｍ 的结果 却不 能令 人满 意 。 如果 吸 收 波 长太 长 （ 于 ８ ０ ｍ） ０ｎ 大 ０ ｎ 则难 于满 足 形成 ，的能 量要 Ｏ 求 ， 味着光 子没有 足够 的能 量使 处于 三线态 的光 敏剂将 基态 氧分 子激 发到单 线态 。而且 ． 意 当波 长增加 时 ， 合物对 光 的稳 定性 通 常也会 减弱 。 因此 ， 化 理想 的光 敏剂应 该在 ６ ０～ ０ ｎ 之间 （ 治疗 窗 口” ６ ８０ ｍ 即“ ）
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叶绿素的光敏性质探究（与二氢卟吩e4对比）研究背景光敏剂的光漂白（photobleaching）是指在光的照射下，光敏剂所激发出来的荧光强度随着时间推移逐步减弱乃至消失的现象，这是光动力诊断临床应用中考虑光剂量和检测需用时间的一个重要因素。
长波红光在组织中具有较大的穿透深度，从而能保证足够的治疗深度：大的吸光度能保证充分利用光能量和尽可能减少药物剂量；光敏剂吸光度的大小是决定药物剂量的理论依据。
过多的光敏剂分布于癌组织中势必会影响光的穿透深度，然而使用过少的光敏剂又不能产生应有的疗效。
因此，光敏剂的使用剂量要依据其吸光度的大小和肿瘤组织的大小来权衡。
对于同一种光敏剂，它的漂白时间将随入射光的光能流率的增大而减小。
再次，除了与光敏剂的类型有关外，还与初始浓度和入射光源的波长有关。
初始浓度越大，光漂白时间越长。
实验意义：探究不同浓度的叶绿素在不同光源、不同时间的照射下，其吸光度随时间的变化，探测其光漂白特性，为更好地在临床应用上要保持光敏剂的有效杀伤浓度，且控制好光敏剂的激发时间，这样才能保证治疗的效果。
初步设想：探究叶绿素在不同浓度，不同光源，不同光照时间对光的敏感性：（1）用紫外检测得到叶绿素的紫外可见吸收光谱，与二氢卟吩e4的光谱图比较。
（最好能同时测定荧光光谱）（2）在叶绿素的最大吸收波长处检测浓度为0.05 mg/ml ，0.1 mg/ml ，0.2 mg/ml ，0.3 mg/ml， 0.4mg/ml的叶绿素的吸光度，并制作曲线图，验证其是否符合朗伯-比尔定律。
（3）实验设置了不同的六组光源：白光、红外光、黄光、绿光、蓝光、紫外光，分别对0.4mg/ml的叶绿素待测样品进行垂直照射10min、20min、30min、40min、50min、60min、80min、100min，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，通过光谱的变化，探究光敏剂叶绿素明显的光漂白特性。
（4）另外，关于温度的影响关系实验，在恒温水浴锅里设置叶绿素溶液（0.4mg/ml）的温度分别为7℃，17℃，27℃，37℃，47℃，57℃，然后检测其吸光度，探究温度对吸光度的影响。
（5）量取1ml 0.8mg/ml的叶绿素溶液分别加入1.0ml0. 05mol/L的HCl溶液，1.0ml0.01mol/L的HCl溶液，1.0ml水，1.0ml0.01mol/L的NaOH溶液，1.0ml 0. 05mol/L的NaOH溶液，用pH计测定其pH值，再测定其在最大吸收波长下的吸光度，探究pH值对吸光度的影响。
仪器药品：SHIMADZU 生产的UV 1700 spectrophotometer (UV 1700 岛津分光光度计)、紫外灯、红光灯、黄光灯、绿光灯、蓝光灯、白光灯、罩灯的纸箱、插座、移液枪、石英比色皿、蒸馏水、擦镜纸、烧杯、4ml一次性试管（8支）、标签纸、容量瓶、黑色塑料袋、计时器、叶绿素（1 mg/ml，0.4mg/ml，0.3 mg/ml，0.2 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml），0.5mol/L NaOH溶液，0.5mol/L HCl 溶液实验所需的药品预先配制好，配好的药品盛装在棕色细颈玻璃瓶中, 避光低温保存在冰箱冷藏室。
实验步骤：叶绿素的光敏性质实验1.待测叶绿素溶液的配制（1）1.0mg/ml叶绿素溶液称取25mg 叶绿素，用去离子水完全溶解，再定容至25ml；（2）0.8mg/ml叶绿素溶液移取8ml（1）号溶液，用去离子水定容至10ml；（3）0.4mg/ml叶绿素溶液移取10ml（1）号溶液，用去离子水定容至25ml；（4）0.3mg/ml叶绿素溶液：移取3ml（1）号溶液，用去离子水定容至10ml；（5）0.2mg/ml叶绿素溶液移取2ml（1）号溶液，用去离子水定容至10ml；（6）0.1mg/ml叶绿素溶液移取1.0ml（1）号溶液，用去离子水定容至10ml；（7）0.05mg/ml叶绿素溶液移取0.5ml（1）号溶液，用去离子水定容至10ml；2.光照实验（1）选取0.4mg/ml，0.3 mg/ml，0.2 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml叶绿素溶液，在测量溶液0分钟光照时的紫外吸收光谱，先找出最高吸收峰值对应的吸收波长，根据光敏剂的光源选择原理，选取了符合波长的光源作为激发光源。
在激发光源一致的条件下，再进行不同光敏物质的分组照射及紫外吸收光谱检测。
在不同浓度的叶绿素溶液进行紫外检测（450~700nm），得出扫描图谱。
附注：样品在502nm（S带）和656nm（Q带）处有两个特征吸收峰，在656nm 处叶绿素有一个强吸收峰，在502nm处有一个弱吸收峰，目前的分析工作仍在Q 带进行检测。
选择Q带波长是因为在Q带检测有较高的灵敏性，物质在Q带的吸收强度比S带强。
因此选定656nm为叶绿素的检测波长。
随着溶液浓度的增大，叶绿素在可见光区的吸收也增大，但是吸收带的形状没有发生变化。
不管是在高浓度还是在低浓度下，除了吸收强度有所变化外，吸收峰的相对大小和位置没有变化，也没有出现新的吸收带。
说明在不同浓度溶液中叶绿素均以单体形式存在。
0.00.51.01.52.02.53.03.5A b s波长/nm（2）在相同最大吸收波长656nm 下，对刚配制好的各浓度叶绿素溶液进行紫外检测测定吸光度，分析叶绿素的吸光度对浓度的关系是否符合朗伯-比尔定律。
叶绿素浓度与吸光度的关系曲线满足：y=4.9757-0.063 (R2=0.9999)，可见叶绿素在浓度值为0.05~0.4mg/mL范围内，其与吸光度呈现一定的线性关系，符合朗伯-比尔定律。
故在以下不同光照时间中，只选取了0.4mg/mL浓度的叶绿素溶液作为实验检测。
（2.1）采用紫光的光源在暗室中对待测样品（叶绿素，0.4mg/ml）进行10min、20min、30min、40min、50min、60min、80min、100min、时间的垂直照射，每次照射后取适量溶液进行紫外-可见吸收光谱的检测，分析叶绿素的光漂白特性。
叶绿素在波长为紫光的光源下的光照时间与吸光度的关系：吸光度AA b s波长/nm（2.2）用红光作为光源，分别把叶绿素的0.4 mg/ml 进行10min 、20min 、30min 、40min 、50min 、60min 、80min 、100min 时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，在同种物质、时间间隔一样（10min ）的条件下进行了对比实验。
叶绿素在红光光源下的光照时间与吸光度的关系：1.551.601.651.701.751.801.851.90吸光度A时间/min-0.50.00.51.01.52.02.53.03.54.04.5A b s波长/nm（2.3）用黄光光源分别把叶绿素的0.4 mg/ml 进行10min 、20min 、30min 、40min 、50min 、60min 、80min、100min 时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，在同种物质、时间间隔一样（10min ）的条件下进行了对比实验。
叶绿素在波长为黄光光源下的光照时间与吸光度的关系：1.401.451.501.551.601.651.701.751.801.85吸光度A时间/minA b s波长/nm（2.4）用绿光灯光分别把叶绿素的0.4 mg/ml 进行10min 、20min 、30min 、40min 、50min 、60min 、80min 、100min 时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，在同种物质、时间间隔一样（10min ）的条件下进行了对比实验。
叶绿素在波长为绿光灯光源下的光照时间与吸光度的关系：1.701.751.801.851.901.95吸光度A时间/min0.00.51.01.52.02.53.0A b s波长/nm（2.5）用蓝光灯分别把叶绿素的0.4 mg/ml 进行10min 、20min 、30min 、40min 、50min 、60min 、80min 、100min 时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，在同种物质、时间间隔一样（10min ）的条件下进行了对比实验。
叶绿素在波长为蓝光灯光源下的光照时间与吸光度的关系：1.601.651.701.751.801.851.90吸光度A时间/min0.00.51.01.52.02.53.0A b s波长/nm（2.6）用白光分别把叶绿素的0.4 mg/ml 进行10min 、20min 、30min 、40min 、50min 、60min 、80min 、100min 时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，在同种物质、时间间隔一样（10min ）的条件下进行了对比实验。
叶绿素在波长为白光灯光源下的光照时间与吸光度的关系：1.651.701.751.801.85吸光度A时间/min0.00.51.01.52.02.53.0A b s波长/nm（3）在最大吸收波长656nm 下（严格控制光照时间），2℃、17℃、27℃、37℃、47℃、57℃的0.4mg/ml 叶绿素溶液测定吸光度，探究温度对叶绿素光谱特性的影响。
0.00.51.01.52.02.53.0A b s波长/nm在温度为2℃和17℃时，叶绿素的最大吸收波长为654bn ，波长发生了蓝移，而在27、37、47、57℃时，最大吸收波长都在656nm ，没有发生改变。
1.561.571.581.591.601.611.62A b s温度/℃（4）在最大吸收波长下656nm （严格控制光照时间），在0.8mg/ml 叶绿素溶液的中，分别加入1.0ml 水，1.0ml0.01mol/L 的HCl 溶液，1.0ml0.01mol/L 的NaOH 溶液，1.0ml0.005mol/L 的HCl 溶液，1.0ml0.005mol/L 的NaOH 溶液，用pH 计测定其pH 值，再测定紫外吸收值，观测pH 值对溶液吸光度的影响。
（即叶绿素的检测浓度均为0.4mg/mL ） 探究pH 对叶绿素光谱特性的影响。
0.00.51.01.52.02.53.0A b s波长/nm0.4mg/mL 的叶绿素溶液在pH=1.12时，最大吸收波长为662nm ，发生了红移，而在pH=2.00时，最大吸收波长为654nm ，发生了蓝移。
而在pH=6.60、11.93、12.77时，最大吸收波长都在656nm 没有发生改变。