NADH氧化酶(NOX)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
碧云天谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-1683301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(NADPH 法)产品编号 产品名称包装 S0056谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(NADPH 法)100次产品简介：谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(NADPH 法)(Cellular Glutathione Peroxidase Assay Kit with NADPH)是一种简单易行的通过紫外比色来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GPx)活性的试剂盒。
绝大部分细胞内的谷胱甘肽过氧化物酶都是含硒的，且硒为该酶的活性中心组成部分。
细胞内也有很少量的不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶存在。
本试剂盒检测的是最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
本试剂盒的使用灵活方便，样品用量和检测时间的范围宽，样品用量可以根据样品中GPx 的活力在0.1-50微升之间调整，检测时间可以根据样品中GPx 的活力在5-30分钟内进行调整。
本试剂盒和总谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(S0058)配合使用，可以定量检测出样品中不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
谷胱甘肽过氧化物酶可以清除活细胞内的过氧化物，在保护细胞免受自由基损伤过程中起着关键作用。
细胞内的脂类容易和自由基发生反应，产生脂类过氧化物。
谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)还原脂类过氧化物，从而消除自由基的毒害作用。
谷胱甘肽过氧化物酶几乎在所有组织中都有分布。
在一些病理状况下谷胱甘肽过氧化物酶的活力会发生明显上调或下调。
谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)催化过氧化氢以及许多有机过氧化物，产生水或有机醇。
但以过氧化氢为底物进行检测会受同样可以分解过氧化氢的过氧化氢酶(Catalase)的影响，因为过氧化氢酶的酶活性会干扰谷胱甘肽过氧化物酶的测定。
如何检测NAD激酶的活性？
如何检测CheKine™NAD激酶（NADK）活性？细胞代谢是指发生在细胞内的所有有序化学变化的总称，简单理解就是指细胞里的所有化学反应。
细胞代谢活动的测量可作为细胞研究的一个重要指标，广泛应用基础研究和药品研发当中。
Abbkine CheKine™细胞代谢学产品线包括大量相关代谢物、酶、营养和代谢物定量检测试剂盒等。
那么今天我们来一起看看有关细胞代谢分析的相关研究，希望对大家有所帮助哦！一、CheKine™硫氧还蛋白过氧化物酶（TPX）检测试剂盒（比色法），#KTB1660TPX属于过氧化物酶家族，在体内主要通过还原过氧化氢和一些氢过氧化物来实现抗氧化作用，功能与GPX 类似，也是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。
TPX普遍存在于各种生物体内，如酵母、植物、动物、原生动物、寄生虫、细菌和古细菌，在进化上高度保守。
TPX与细胞增殖、分化、细胞凋亡及肿瘤发生调控密切相关。
TPX的主要功能包括细胞脱毒、抗氧化和调节由过氧化氢介导的信号转导和免疫反应。
CheKine™硫氧还蛋白过氧化物酶（TPX）检测试剂盒，提供了一种简单易用的比色法，用于分析不同生物样品（细胞/组织裂解液，生物液体）中硫氧还蛋白过氧化物酶活性。
TPX催化H2O2氧化二硫苏糖醇（DTT），通过测定240 nm（H2O2的吸收波长）吸光度的下降速率，用对照组减去过氧化氢酶（CAT）催化分解的H2O2，即可计算出TPX活性。
因此，本试剂盒可以同时测定样品TPX和CAT活性。
二、CheKine™丙酮酸激酶（PK）活性检测试剂盒（比色法），#KTB1120PK（EC 2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP的关键酶之一，因此测定PK活性具有重要意义。
CheKine™丙酮酸激酶（PK）活性检测试剂盒，提供了一种简单易用的比色法，用于分析不同生物样品（细胞/组织裂解液，生物液体）中丙酮酸激酶活性。
乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
乙酰辅酶A羧化酶（ACC）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC0410规格:50T/24S产品简介：乙酰辅酶A羧化酶（Acetyl-CoA carboxylase，ACC）在生物体内催化乙酰辅酶A羧化生成丙二酰辅酶A，是脂肪酸和许多次生代谢产物合成的关键酶。
ACC的活性在一定程度上决定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。
ACC能够催化乙酰辅酶A、NaHCO和ATP生成丙二酰辅酶A、ADP和无机磷，钼蓝与磷酸根生成660nm3有特征吸收峰的物质，通过钼酸铵定磷法测定无机磷的增加量来测定ACC活性。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、天平、低温离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、漩涡震荡仪、水浴锅、蒸馏水、冰盒、EP管。
产品内容：提取液一：液体60mL×1瓶，4℃保存；提取液二：液体0.6mL×1支，-20℃避光保存；试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存。
临用前加入12.5mL试剂一，充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存。
临用前加入6mL双蒸水，充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入15mL双蒸水，溶解后4℃保存一周；试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入15mL双蒸水，溶解后4℃保存一周；试剂六：液体15mL×1瓶，室温保存；标准品：10μmol/mL标准磷贮备液1mL×1支，4℃保存；提取液的配制：按提取液一：提取液二=990：10（V：V）的比例配制，根据样本量现配现用，禁止将提取液二一次性全部加入提取液一混匀分装待用。
O：试剂四：试剂五：试剂六=2:1:1:1的比例配制，配好的工作液应为工作液（定磷剂）的配制：按H2浅黄色。
索莱宝 BC0310 辅酶Ⅰ NAD(H)含量检测试剂盒说明书
BC0310 -- 第 1 页，共 4 页辅酶Ⅰ NAD(H)含量检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号: BC0310规格: 50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件酸性提取液液体15 mL×1瓶2-8℃保存碱性提取液液体15 mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体20 mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体6 mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体16mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体3 mL×1瓶-20℃保存试剂五液体40 mL×1瓶2-8℃保存试剂六液体75 mL×1瓶（自备）常温保存NAD 标准品粉剂×1支-20℃保存NADH 标准品粉剂×1支-20℃保存溶液的配制：1、试剂三：需要严格避光；2、试剂六：72 mL乙醇和3 mL 蒸馏水混合，备用；3、NAD 标准品：临用前加入1.5 mL 蒸馏水，即2 µmol/mL ，将其稀释为1.25 nmol/mL 的NAD 标准溶液备用；4、NADH 标准品：临用前加入1.4 mL 蒸馏水，即2 µmol/mL ，将其稀释为1.25 nmol/mL 的NADH 标准溶液备用。
产品说明：辅酶I 包括还原型和氧化型两种形式，在生物氧化中起传递氢的作用。
氧化型辅酶I 又称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD +）是脱氢酶的辅酶，它在糖酵解、糖异生、三羧酸循环和呼吸链中发挥着不可替代的作用。
中间产物会将脱下的氢递给NAD ，使之成为NADH （还原型辅酶I ）。
而NADH 则会作为氢的载体，在呼吸链中通过化学渗透偶联的方式，合成ATP 。
NAD(H)在机体内有重要的生理意义，与物质代谢、能量代谢、抗细胞衰老、抗氧化以及一些疾病的发生密切相关。
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒说明书
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒说明书微量法100管/48样注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循环（TCA）的主要氢受体，生成的NADH经呼吸电子链（ETC）传递把电子交给氧，在合成ATP的同时，形成大量的ROS，同时NADH再生为NAD+。
糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。
NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。
较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高，处于过氧化状态。
此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。
另外，NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理：分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH，NADH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT）为甲瓒，在570nm下检测吸光值；而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品：酶标仪、台式离心机、移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
NAD+和NADH的提取：1 血清（浆）中NAD+和NADH的提取：NAD+的提取：按照血清（浆）体积（mL）：酸性提取液体积（mL）为1：5~10的比例（建议取约0.1mL血清（浆），加入1mL酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μL上清液，加入500μL碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。
活性氧（ROS）测定试剂盒说明书
②、波长设置：最佳激发波长 500(50015nm)，最佳发射波长 525 (53020 nm)。也可按照 FITC 荧光检
测条件检测。 ③、结果以荧光度值表示。
四、细胞样本操作步骤：（可用激光共聚焦显微镜观察，也可用于流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光分光度 计测定）
二、试剂组成及保存： 1、0.1ml 10mM DCFH-DA in DMSO，20℃保存。 2、1ml 活性氧供氢体，4-8℃保存。
三、组织样本操作步骤：（可用激光共聚焦显微镜观察，也可用于流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光分光度 计测定）
1、单细胞悬液制备： 方法 1、采用单细胞悬液制备仪制备单细胞悬液。 方法 2、酶消化法： 方法 3、机械法（网搓法）：
本试剂盒仅用于科研实验
1、直接将探针加入培养液中： ①、直接将 DCFH-DA 探针加入无血清培养基中：一般按照 1 ：1000 用无血清培养液稀释 CFH-DA。加入的体积以能充分盖住细胞为宜， 通常对于 6 孔板的一个孔加入稀释好的 DCFH-DA 不少于 1ml。 ②、取一份不加探针，只加入培养基的细胞设为阴性对照管。阳性对照管：取一份已加入探针的细胞，同 时加入活性氧供氢体诱导细胞，推荐该试剂的工作浓度为 20～100µM。 ③、37℃孵育细胞 30min～几小时，通常为 30～60min 即可，孵育时间长短与细胞类型、刺激条件、DCFH-DA 浓度有关。一般阳性对照在刺激细胞 30 分钟左右，即可观察到明显的绿色荧光。 ④、吸去培养液，利用无血清培养液或者 0.01MPBS 反复吹打，肉眼观察瓶底由半透明(细胞单层连接成 片)转为透明，细胞层几乎全部吹打到 PBS 中。 ⑤、将细胞悬液全部收集到 1.5ml 离心管中。用无血清培养液或者 PBS 洗涤 2 次，以充分去除未进入细 胞内的 DCFH-DA。1000rpm/min，5min，吸净上清后加入 PBS 重新悬浮细胞进行测定。
苏州科铭试剂盒总清单-5.3
咨询 800 420 2300 1200 1000 520 1100 580 1550 800 1200 620
L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒
L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒
抗坏血酸氧化酶（AAO）测试盒
抗坏血酸氧化酶（AAO）测试盒
抗坏血酸过氧化物酶（APX）测试盒
抗坏血酸过氧化物酶（APX）测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒
微量法
紫外分光光度法
微量法
100管/48样 50管/24样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样
100管/96样
50管/48样
丙酮酸脱羧酶（PDC）测试盒
丙酮酸脱羧酶（PDC）测试盒
醇脱氢酶（ADH）测试盒
醇脱氢酶（ADH）测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒
乙醛脱氢酶（ALDH）测试盒 乙醛脱氢酶（ALDH）测试盒
烟酸含量测试盒
微量法 可见分光光度法 高效液相色谱法
微量法 可见分光光度法
脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）测试盒
脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）测试盒
过氧化物酶(POD)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
过氧化物酶(POD)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC0090规格：50T/48S 产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体0.33mL×2瓶，4℃保存；用时每瓶加入5mL 试剂一；用不完的试剂4℃保存一周；试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：POD（EC 1.11.1.7）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。
POD 催化H 2O 2氧化特定底物，在470nm 有特征光吸收。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水操作步骤：一、粗酶液提取：1、细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至470nm，蒸馏水调零。
2、测定前将试剂一、二和三37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）放置10min。
3、样本测定表试剂名称（µL）测定管样本15蒸馏水270试剂一520试剂二130试剂三135在1mL玻璃比色皿中按顺序加入上述试剂，立即混匀并计时，记录470nm下30s时的吸光值A1和1min30s 后的吸光值A2。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
NADH氧化酶（NOX）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0630
规格：50T/24S
产品内容：
试剂一：液体25mL×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体0.5mL×1瓶，-20℃保存。
试剂四：液体70mL×1瓶，4℃保存。
试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂六：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入9mL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存。
产品说明：
NOX（EC1.6.99.3）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可在氧气存在下，直接将NADH氧化为NAD。
该酶不仅参与NAD的再生，而且与免疫反应密切相关。
NOX能够将NADH氧化为NAD，NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝（DCPIP）的还原相偶联，蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP，在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
操作步骤：
一、样品测定的准备：
1、组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：
2、准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10µL试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
3、将匀浆600g，4℃离心5min。
4、将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。
5、将上清液转移至另一EP管中，用于线粒体中泄露NOX活性测定。
6、沉淀即为线粒体，加入200µL试剂二和2µL试剂三，用于NOX活性测定。
7、NOX总酶活即为上清中NOX活性与沉淀中NOX活性之和。
二、测定步骤和加样表：
1、可见分光光度计预热30min以上，调节波长至600nm，蒸馏水调零。
2、试剂四37℃保温放置。
试剂名称（µL）测定管对照管
试剂四700700
试剂五100100
样本4040
蒸馏水160
试剂六160-
将上述试剂按顺序在1mL玻璃比色皿中操作，加入试剂六后立即混匀，同时开始计时，在600nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1，迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃水浴中，准确反应1分钟。
迅速取出比色皿并擦干，记录1分20秒时的吸光度A2。
计算ΔA=A1-A2，记录A测定、A对照，ΔA1=ΔA上清测定-ΔA上清对照，ΔA2=ΔA沉淀测定-ΔA沉淀对照。
三、NOX活力单位的计算：
A、上清中NOX活力的计算:
1、组织中NOX活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg蛋白在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/mg prot）=ΔA1÷0.01×V反总÷(Cpr上清×V样本)÷T=2500×ΔA1÷Cpr上清
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/g鲜重）=ΔA1÷0.01×V反总÷(W÷V提取×V样本)÷T=2525×ΔA1÷W
2、细菌或培养细胞中NOX活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg蛋白在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/mg prot）=ΔA1÷0.01×V反总÷(Cpr上清×V样本)÷T=2500×ΔA1÷Cpr上清
（2）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/104cell）=ΔA1÷0.01×V反总÷(500÷V提取×V样本)÷T=5.05×ΔA1
V反总：反应总体积，1mL；V样本：加入样本体积，0.04mL；V提取：加入提取液体积，1.01mL；Cpr 上清：上清中蛋白浓度，mg/mL；W，样本鲜重，g；500，细菌或细胞总数，500万；T，反应时间，1min。
B、沉淀中NOX活力的计算:
1、组织中NOX活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg蛋白在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/mg prot）=ΔA2÷0.01×V反总÷(Cpr沉淀×V样本)÷T=2500×ΔA2÷Cpr沉淀
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/g鲜重）=ΔA2÷0.01×V反总÷(W÷V样总×V样本)÷T=505×ΔA2÷W
2、细菌或培养细胞中NOX活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg蛋白在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/mg prot）=ΔA2÷0.01×V反总÷(Cpr沉淀×V样本)÷T=2500×ΔA2÷Cpr沉淀
（2）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/104cell）=ΔA2÷0.01×V反总÷(500÷V样总×V样本)÷T=1.01×ΔA2
V反总：反应总体积，1mL；V样本：加入样本体积，0.04mL；
V样总：沉淀重悬体积，0.202mL；Cpr沉淀：沉淀重悬后蛋白浓度，mg/mL；
W，样本鲜重，g；500，细菌或细胞总数，500万；
T，反应时间，1min。
C、样本NOX总活力的计算:
样本NOX总活力即为上清中NOX活力与沉淀中NOX活力之和。
1、组织中NOX活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg蛋白在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/mg prot）=2500×ΔA1÷Cpr上清+2500×ΔA2÷Cpr沉淀
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/g鲜重）=2525×ΔA1÷W+505×ΔA2÷W
2、细菌或培养细胞中NOX活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg蛋白在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/mg prot）=2500×ΔA1÷Cpr上清+2500×ΔA2÷Cpr沉淀
（2）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。
NOX（U/104cell）=5.05×ΔA1+1.01×ΔA2
注意事项：
1、粗酶液的提取必须在0℃-4℃中操做完成，以防止酶变性失活。
2、比色皿中反应液的温度最好保持37℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃水浴锅中。
在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
3、最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。
4、实验时，试剂六样本在冰上放置，以免变性和失活。