荧光法测定羟基自由基及中草药抗氧化性
褪色光度法测定羟自由基及常见食物的抗氧化活性
理化检验-化学分册P TCA(PAR T B:C H EM.ANAL.)2007年第43卷10工作简报褪色光度法测定羟自由基及常见食物的抗氧化活性张 东,刘志江,高俊杰,余 萍(沈阳理工大学环境与化学工程学院,沈阳110168)摘 要:在用稀硫酸调节至p H4的溶液中,生物染色剂玫瑰桃红R能被由Fento n反应产生的羟自由基(・O H)氧化而褪色。
根据在520nm波长处所测得的吸光度的消褪的程度(ΔA=A0-A1),实现了羟自由基存在量的光度测定,应用此方法还测定了自由基消除率,作为选择清除剂的判据;还测定了几种常见食品的抗氧化活性。
从方法的操作和所测得的结果证明该方法具有操作简单、方便且稳定而经济。
关键词:褪色光度法;羟自由基;抗氧化活性;食品中图分类号:O657.3 文献标识码:A 文章编号:100124020(2007)1020852203Color2F ading Photometric Determination of H ydroxyl Free R adical and Anti2Oxidation Activity of Some Common Foodstuff sZHANG Dong,L IU Zhi2jiang,G AO Jun2jie,YU Ping(College of Envi ronmental and Chemical Engineering,S heny ang Universit y of S cience andEngineering,S heny ang110168,China)Abstract:In a solution of p H4adjusted with dil.H2SO4,bordeaux red was oxidized and decolorized by hydroxyl free radical(・O H)produced by the Fenton reaction.By measuring the magnitude of intensity of color2 fading(ΔA=A0-A1)at the wavelength of520nm,the amount of・O H present was determined photometrically.The proposed method was also used to determined the anti2oxidation activity and used as a method to choose scavenging agents according to thair scavenging rates.The scavenging rates or the anti2oxidation activity of some common foodstuff s were determined by this method,which was proved to be quite simple,stable,convenient and economic.K eyw ords:Color2fading photometry;Hydroxyl f ree radical;Anti2oxidation activity;Foodstuff 羟自由基是一种氧化能力很强的自由基,生物体内的羟自由基可使糖类、氨基酸、蛋白质、核酸和脂肪类发生氧化[123]。
5种中药提取物清除自由基的体外抗氧化活性研究
084） 作者简介：郭新颖（1986-），女，工程师，主要从事理化检验工作。 通信作者：陆 娟。
单、试剂便宜，可为开拓现代食药用途、开发功能性 保健1.1 仪器与试剂
GUO Xin-ying，SHI Yu-kun，CHEN Feng，LU Juan （Nantong Center for Disease Control and Prevention, Nantong 226007, China） Abstract :Objective A new fluorescence detection method was established for the indirect determination of
抗氧化活性，其中以五倍子最佳。
关键词：羟自由基；荧光强度；抗氧化；中药
中图分类号：R284.1
文献标识码：A
Study on scavenging free radicals and antioxidant activity in vitro for 5 kinds of traditional Chinese medicine extracts*
F96 型荧光分光光度计 （上海棱光技术有限公 司）；930 型荧光光度计 （上海第三分析仪器厂）； FA2004 型电子天平（上海良平仪器仪表有限公司）。
5.0×10-5mol·L-1 曙红 B 溶液（上海新中化学试 剂厂）；5.0×10-4mo·l L-1 FeSO4 溶液（批号 20140630 国 药集团化学试剂有限公司）；2.0×10-3mol·L-1 硫脲溶 液（批号 96-12-02 上海试剂一厂）；2.0×10-3mol·L-1 抗坏血酸溶液 （批号 L-8754-50 Sigma 试剂公司）； 0.002% H2O2 溶液 （批号 10011218 国药集团化学试 剂 有 限 公 司）；1.0 ×10-4mol·L-1 H2SO4 溶 液 （批 号 20061204 上海试剂四厂昆山分厂）。
羟自由基清除能力测定原理
羟自由基清除能力测定原理一、引言羟自由基是一种高活性的化学物质，具有很强的清除能力。
羟自由基清除能力测定是一种常用的方法，用于评估化合物对自由基的抗氧化能力。
本文将介绍羟自由基清除能力测定的原理和相关实验方法。
二、羟自由基的产生羟自由基是一种带有羟基（OH）的自由基，具有很强的氧化能力。
羟自由基可以通过多种途径产生，例如光解水、氧化还原反应以及生物代谢过程中的产生等。
在实验室中，常用的产生羟自由基的方法是通过添加氢过氧化物和过氧化氢催化剂来进行。
三、羟自由基清除能力的评估方法1. 直接测定法直接测定法是最常用的羟自由基清除能力评估方法之一。
该方法利用特定的化学试剂（如5,5-二甲基-1-吡咯烷酮）与羟自由基发生反应，生成稳定的产物，通过测定产物的浓度变化来评估清除能力的强弱。
该方法操作简单、结果可靠。
2. 电子自旋共振法电子自旋共振法是一种基于电子自旋共振谱仪的测定方法。
该方法利用特定的探针与羟自由基反应生成稳定的产物，通过测定产物的电子自旋共振信号强度来评估清除能力的大小。
该方法对样品要求较高，需要配备专业的设备。
3. 化学计量法化学计量法是一种通过测定特定试剂的消耗量来评估羟自由基清除能力的方法。
该方法常用的试剂有抗坏血酸、谷胱甘肽等，通过与羟自由基反应生成稳定的产物，进而测定试剂的消耗量来评估清除能力的强弱。
该方法操作简单，适用于大批量样品的测定。
四、影响羟自由基清除能力的因素羟自由基清除能力受多种因素的影响，包括温度、pH值、浓度、反应时间等。
一般来说，较高的温度、适宜的pH值和较长的反应时间有助于提高羟自由基清除能力。
此外，样品的浓度也是影响清除能力的重要因素，适宜的浓度可以使清除能力得到准确的评估。
五、应用领域羟自由基清除能力测定在抗氧化剂的筛选和评估中具有广泛的应用。
抗氧化剂可以通过清除羟自由基来减轻氧化应激引起的损伤，具有重要的保护作用。
因此，羟自由基清除能力测定可以帮助筛选出具有较强抗氧化能力的化合物，并为新药开发和保健品研究提供依据。
用荧光分光光度法测定中药配方颗粒对自由基的清除作用
用荧光分光光度法测定中药配方颗粒对自由基的清除作用Measure the Ability of Eliminating the Free Radical by the Prescription Granule of Chinese Traditional Medicine Usingthe Fluorometry张承蔡继文 *（中山大学化学与化学工程学院有机化学研究所。
广州510275）摘要Fe2+－EDTA在弱碱性介质中可以还原溶解氧，最终生成羟自由基。
本实验用荧光分光光度法测定了山茱萸等9种市售的中药配方颗粒对Fe2+－EDTA体系产生的羟基自由基(·OH)的抑制程度，测定了不同浓度的半支莲等三种中药的清除率，并得到了其清除率与其浓度得线性耦合曲线，比较了山茱萸和半支莲对自由基的清除的能力。
关键词中药；羟基自由基；荧光分光光度Abstract: Fe2+-EDTA system in basic condition can reduce O2 that resolved in water to ·OH. We use the Fluorometry to evaluate the extent that the prescription granule of Chinese traditional medicine such as Fructus Corni eliminate the ·OH. We measure the eliminating rate of different concentration., and obtain the linear fit curve to the concentration.We also compare the eliminating ability between Fructus Corni and Herba Scutellariae Barbatae.Key words: Chinese traditional medicine, hydroxy free radical, Fluorometry1 前言自由基是在分子氧、多不饱和链脂肪酸巯基化合物、醌类化合物等的反应和代谢过程中产生或衍生出来的, 是一种外层轨道上含有未配对电子的原子、原子团或呈特殊状态的分子。
一种荧光定量检测羟基自由基的方法[发明专利]
![一种荧光定量检测羟基自由基的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/9e28732d640e52ea551810a6f524ccbff121cacd.png)
(10)申请公布号 (43)申请公布日 2013.06.12C N 103149188 A (21)申请号 201310069048.3(22)申请日 2013.03.05G01N 21/64(2006.01)(71)申请人东华大学地址201620 上海市松江区松江新城区人民北路2999号(72)发明人张煊 司芳 阎克路(74)专利代理机构上海天翔知识产权代理有限公司 31224代理人吕伴(54)发明名称一种荧光定量检测羟基自由基的方法(57)摘要本发明涉及一种荧光定量检测羟基自由基的方法，特别是涉及一种以苯五甲酸为荧光探针的荧光定量检测羟基自由基的方法，具体步骤为：将捕捉剂苯五甲酸加入待测体系中，使其摩尔浓度为羟基自由基产生物摩尔浓度的1倍及1倍以上；检测待测体系荧光强度，由荧光强度计算此时待测体系中羟基自由基的产生量。
苯五甲酸苯环结构仅含一个反应位点，与羟基自由基加成后生成唯一荧光性产物—羟基苯五甲酸，使定量检测更准确。
本发明可在20～98℃对产生羟基自由基的体系(pH ≥5)进行定量检测。
本发明操作简单快速、专一性强、灵敏度高。
有助于探究纺织化学、环境化学、制浆造纸等产生羟基自由基工艺体系的机理，从而更好地指导生态生产工艺。
(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书6页 附图5页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书6页 附图5页(10)申请公布号CN 103149188 A*CN103149188A*1/1页1.一种荧光定量检测羟基自由基的方法，其特征是：所述方法的荧光探针为苯五甲酸，其分子结构式为2.根据权利要求1所述的一种荧光定量检测羟基自由基的方法，其特征在于，具体步骤为：将捕捉剂苯五甲酸加入待测体系中，使其摩尔浓度为羟基自由基产生物摩尔浓度的1倍及1倍以上；捕捉反应结束后调节待测体系pH 为9～10；检测待测体系的荧光强度，根据荧光强度与羟基苯五甲酸浓度的线性关系及羟基自由基与羟基苯五甲酸的一一对应关系，由荧光强度计算出此时待测体系中羟基自由基的产生量。
对苯二甲酸荧光检测羟基自由基原理
对苯二甲酸荧光检测羟基自由基原理苯二甲酸荧光检测羟基自由基原理是一种常用的生物化学实验方法，用于研究羟基自由基活性。
该原理是基于苯二甲酸自由基被氟化铈(Ce3+)氧化生成激发态氧化铈离子(Ce4+)，从而产生荧光信号的原理。
首先，苯二甲酸荧光检测羟基自由基的实验中，加入苯二甲酸(1mM)和氟化铈(Ce3+)(0.1mM)在提取样品体系中，制备苯二甲酸自由基(C_6H_4(COO^·)–COO^·)。
接下来，将苯二甲酸自由基与羟基自由基反应，生成荧光产物。
羟基自由基是一种高活性的自由基，具有氧化还原能力。
羟基自由基与苯二甲酸自由基反应时，会将苯二甲酸自由基还原为苯二甲酸。
反应过程如下:C_6H_4(COO^·)–COO^·+·OH-->C_6H_4(COOH)_2反应进行到一定程度时，苯二甲酸的量同时减少，氟化铈(Ce3+)则被氧化为激发态氧化铈离子(Ce4+)。
激发态氧化铈离子(Ce4+)具有发光性质。
当它返回基态时，会发出蓝色荧光。
最后，通过荧光光谱仪检测样品溶液中的荧光信号，荧光信号的强度与羟基自由基的浓度成正比。
苯二甲酸荧光检测羟基自由基的原理可总结为两个部分：首先，苯二甲酸和氟化铈的反应生成苯二甲酸自由基；其次，苯二甲酸自由基与羟基自由基反应生成荧光产物。
该方法有以下优点及应用领域：1.灵敏度高：荧光检测方法可以灵敏地检测到低浓度的羟基自由基。
2.反应选择性强：该方法可以选择性地检测羟基自由基，与其他自由基和化合物不发生反应。
3.操作简单：实验步骤简单，并且不需要复杂的仪器设备。
4.广泛应用：该方法可用于测定生物体内羟基自由基的浓度，研究羟基自由基在生物体内的生成和消除过程等。
综上所述，苯二甲酸荧光检测羟基自由基通过利用苯二甲酸自由基在与羟基自由基反应时产生蓝色荧光的特性，实现了对羟基自由基活性的检测。
该方法在生物化学研究中具有广泛的应用前景。
罗丹明6G_Fenton体系荧光法测定中草药抗氧化活性_岳保旺
第２ ９卷
以实验确定的最大激发波长和发射波长为测定波 １． ２． ２ 羟自由基的测定 按 １． ２． １ 项的方法加入试剂 ， ， 长， 分别测定加与不加 Ｆ 计算其差 △Ｆ（ 由此间接求得 ｅ ｎ ｔ ｏ ｎ 试剂体系的荧光强度为 Ｆ、 Ｆ０ ， △Ｆ＝Ｆ ０ －Ｆ） Ｆ ｅ ｎ ｔ ｏ ｎ 体系所产生羟自由基的量 。 １． ２． ３ 抗氧化剂对羟自由基清除率的测定 在 １． ２． １ 项的实验溶液体系中加入 一 定 量 的 羟 自 由 基 清 除 按 １． 未加羟自由基清除剂体系的荧光强度为 Ｆ， 剂抗坏血酸溶液 ， ２． ２ 项中的方法测定其荧光强度为 Ｆ ｓ，
图 １ 荧光光谱 Ｆ ｉ ． １ Ｆ ｌ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｅ ｃ ｔ ｒ ａ ｇ ｐ
； １． Ｒ ｈ ｏ ｄ ａ ｍ ｉ ｎ ｅ ６ Ｇ（ Ｒ ｈ ６ Ｇ） ＋ｂ ｕ ｆ ｆ ｅ ｒ ２． Ｒ ｈ ６ Ｇ＋ｂ ｕ ｆ ｆ ｅ ｒ＋ ２＋ ２＋ ； Ｆ ｅ ＋Ｈ２Ｏ ｎ ｔ ｉ ｏ ｘ ｉ ｄ ａ ｎ ｔ ３． Ｒ ｈ ６ Ｇ＋ｂ ｕ ｆ ｆ ｅ ｒ ＋Ｆ ｅ ＋Ｈ２ ２＋ａ ２＋ ］ ［ ］ ／ ［ ／ Ｏ Ｃ Ｃ Ｉ ＝０． ０ １ｍ Ｌ， Ｆ ｅ ＝１． ０ ｍｍ ｏ ｌ ｇ ２， ２ ８Ｈ ３ １Ｎ ２Ｏ ３ ［ Ｌ， Ｈ２Ｏ ＝０． ０ ３％ ， Ｈ＝４． ８． ｐ ２］
第２ ９ 卷第 ５ 期 Ｖ ｏ ｌ ． ２ ９ Ｎ ｏ ． ５
分 析 科 学 学 报 Ｊ ＯＵＲ ＮＡ Ｌ Ｏ Ｆ ＡＮＡ Ｌ Ｙ Ｔ Ｉ Ｃ Ａ Ｌ Ｓ Ｃ Ｉ Ｅ Ｎ Ｃ Ｅ
２ ０ １ ３年１ ０月 Ｏ ｃ ｔ ． ２ ０ １ ３
（ ） 文章编号 ： １ ０ ０ ６ ６ １ ４ ４ ２ ０ １ ３ ０ ５ ０ ７ ２ ３ ０ ３ － － －
光度法检测适用于环境背景的羟基自由基的研究进展
2009年6月三门峡职业技术学院学报Jun．,2009竺!堂篁!塑!竺竺翌璺!堕量璺璺翌呈璺兰!皇￡竺!!!塑塾望堡!!!：!!堕2圣技术与应用光度法检测适用于环境背景的羟基A由基的研究进展靳慧征(河南建筑职业技术学院，郑州450007)摘要：适用于环境背景中的羟基自由基的检测是研究高级氧化技术在环境治理中应用的关键。
采用光度法检测羟基自由基具有快速、便捷等优点。
通过对比整理羟基自由基的光度法检测方法，介绍了氧化荆显色法、比色法及荧光光度法在近年来的应用。
并指出了各种方法的优点及局限性。
关键词：环境；羟基自由基；光度法：检测中图分类号：X703文献标识码：A文章编号：1671—9123(2009)02-0093—03收稿日期：2009—03—12作者简介：靳慧征(1973一)．女。
河南郑州人，河南建筑职业技术学院讲师。
O引言近年来．高级氧化技术的开发与应用．为环境中高浓度难降解废水的治理及有机废气的处理提供了新的思路。
高级氧化技术最显著的特点是通过不同途径产生羟基自由基．以羟基自由基为主要氧化剂与有机物发生反应。
在各种活性氧自由基中．羟基自由基的反应活性最强．与大多数有机污染物反应的速率常数在106—1010mol一1…L S1．是一种非选择性的氧化剂。
在已知的氧化剂中．．O H的能力仅次于F2，能很容易氧化各种有机物和无机物，氧化效率高。
反应速率快．可诱发一系列的自由基链反应．几乎无可选择地l互接攻击水体和大气中的各种污染物，直至将污染物降解为C O：、H：O和其它矿物盐。
因此．在大气污染治理和废水深度化处理中得到广泛应用。
随着羟基自由基在环境治理中应用研究的深入．人们越来越重视自由基的检测．但是由于自由基是化学反应的中间体．反应活性强、存在浓度低。
大部分自由基寿命极短．所以准确确定O H的绝对浓度是十分困难的。
目前。
检测羟基自由基的方法主要有电子自旋共振法(ESR)、高效液相色谱法(H PL C)、电化学分析法111(P123--128)以及化学发光分析法【21(n阱埘)等。
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万方数据
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荧光法测定羟基自由基及中草药抗氧化性
作者：王崔平， WANG Cui-ping
作者单位：首都师范大学化学系,北京,100037
刊名：
德州学院学报
英文刊名：JOURNAL OF DEZHOU UNIVERSITY
年，卷(期)：2007,23(4)
被引用次数：3次
1.邰超;邹洪;谷学新电化学方法简便测定芬顿反应产生的羟基自由基[期刊论文]-分析化学 2003(01)
2.张江峰;任凤莲;王磊水杨基荧光酮荧光法测定羟自由基的探讨[期刊论文]-湖南有色金属 2001(03)
3.余以刚;陈海光;曾庆孝荷叶水提物清除自由基的ESR研究[期刊论文]-中草药 2001(08)
4.于怀东;方茹;陈士明锰离子参与的类Fenton反应的HPLC和ESR波谱研究[期刊论文]-化学学报 2005(14)
1.肖怀秋.李玉珍羟基自由基定量检测技术的研究进展[期刊论文]-食品与药品 2010(1)
2.韩雅慧.陶宁萍甘草黄酮提取及其抗氧化能力测定方法研究进展[期刊论文]-山西农业科学 2010(11)
3.文镜.刘璇.赵建荧光法及化学发光法在保健食品抗氧化体外实验中的应用[期刊论文]-中国酿造 2009(11)本文链接：/Periodical_dzxyxb200704012.aspx。