甲基紫分光光度法测定羟基自由基含量
NR光度法测定Fenton试剂所生成的羟基自由基

福建分析测试 Fujian Analysis &Testing 2006,15(3)收稿日期:2006-2-22作者简介:朱琳娜(1981~),女,在读硕士研究生,主要研究方向为水污染控制理论与技术。
E -mail:lina .a manda@NR 光度法测定Fent on 试剂所生成的羟基自由基朱琳娜 何争光 吴超(1、郑州大学环境与水利学院,郑州 450002;2、河南神火集团,永城 476613)摘 要:要提高Fent on 试剂在废水处理中的效率,关键就是要提高羟自由基的生成率和利用率。
本文提出了检测Fent on 试剂反应产生羟自由基的新方法,羟自由基氧化中性红使其褪色,用分光光度法测定其△A 值的变化,可间接测定羟自由基的产生量。
并考查了FeS O 4投加量、H 2O 2投加量、酸度、反应时间等影响羟自由基生成量的主要因素,为Fent on 试剂在废水处理中的应用提供了参数依据。
另外,该法稳定性好,操作简单,测定快速。
关键词:光度法;中性红(NR );羟自由基;Fent on 试剂;废水处理中图分类号:O657.32 文献标识码:A 文章编号:1009-8143(2006)03-0010-03Photom etr i c D eterm i n a ti on of Hydroxyl Free Rad i ca l Produced i n Fen ton ’s Reagen t Reacti on System by Toluylene Red D ecoloura ti onZhu L i n na He Zhengguang W u Chao(1.School of Envir on ment and W ater Conservancy,Zhengzhou University,Zhengzhou,450002,China;2.Shenhuo Gr oup,Henan,Yongcheng,476613,China )Abstract:The key t o enhance the efficiency of Fent on’s reagent in waste water treat m ent is t o enhance the p r oductivity and utilizati on rati o of hydr oxyl radicals in the syste m.I n this paper,for the deter m inati on of the hydr oxyl free radical p r oduced by Fent on reacti on,a ne w phot ometric method based on its oxidati on reacti on with t oluylene red is put f or ward .The col or intensity of t oluylene red will be changed after the oxidati on reacti on,the change of △A is measured phot ometrically,and the a mount of the hydr oxyl free radical can be deter m ined indirectly .The leading fact ors influencing the p r oductivity of the hydr oxyl free radical in the system such as the a mounts of FeS O 4and H 2O 2,reacti on ti m e and reacti on temperature were tested .The useful para meters for Fent on’s reagent in waste water treat m ent were offered .I n additi on,the stability of thismethod is good,its operati on is convenient,and its deter m inati on is fast .Key words:phot ometry;t oluylene red;hydr oxyl free radical;Fent on’s reagent;waste water treat m ent Fent on 试剂在废水处理中的应用主要是利用H 2O 2在Fe 2+的催化作用下所生成的具有强氧化性的・OH 的作用,通过其强氧化性对废水进行预处理以提高废水可生化性,利于其后续处理。
分光光度法测定茶叶对羟基自由基的清除率

分光光度法测定茶叶对羟基自由基的清除率发布时间:2021-07-06T09:34:10.120Z 来源:《教育学》2021年5月总第249期作者:薛云尹俊泉[导读] 生物化和生物医学等领域中的重要研究课题。
与此同时,·OH测定方法的研究也备受关注。
甘肃省陇南市武都区莲湖小学746000摘要:邻二氮菲在紫外光区有强烈吸收,加入H2O2产生羟基自由基,茶叶提取液会使其中的羟基自由基减少,此时,溶液的吸光度值也随之减小,据此原理可以计算茶叶提取液对羟基自由基的清除率。
体系最佳实验条件为pH=7.00,缓冲溶液体积用量1.00mL,邻二氮菲浓度3×10-4mol/L,Fe2+浓度5×10-3mol/L,1%H2O2用量1.00mL,茶叶提取液用量20.00mL,按照邻二氮菲-Fe2+-H2O2顺序加入反应4min。
在以上实验条件下,测得羟基自由基的清除率为44.1%。
关键词:分光光度法邻二氮菲羟基自由基茶叶提取液机体的疾病与衰老是一个复杂的生物过程。
对此,学者们有各种解释,如自由基学说、传学说、交联学说、免疫学说等,其中自由基学说是目前国内外较普遍认同的一种。
自由基是一类外层轨道含有未配对电子的原子团或特殊状态分子,与人体关系最为密切的是氧自由基,如超氧自由基(·O2-)、羟基自由基(·OH)、脂自由基(ROO·)等,其中以·OH作用最强。
它可以通过电子转移、加成以及脱氢等方式与生物体内的多种分子作用,造成糖类、氨基酸、蛋白质、核酸和脂类等物质的氧化性损伤,使细胞坏死或突变。
·OH还与衰老、肿瘤、辐射损伤和细胞吞噬等有关,羟自由基清除率是反映药物抗氧化作用的重要指标。
因此,·OH参与的各种研究已成为生物学、生物化和生物医学等领域中的重要研究课题。
与此同时,·OH测定方法的研究也备受关注。
近年来,国内外文献报道了检测羟自由基的主要方法有:电子自旋共振法、高效液相色谱法、化学发光法、光度法等。
羟基自由基检测技术方法概述

( ES R ). Hi g h er P er f o r ma n c e L i qu i d Ch r oma t o g r a p h y (HL P C) , Sp e c t r o p h o t o me t r y, F l u o r e s c e n c e Sp e c t op r h o — t o me t r y( F D)an d S O on . Th e s e me t h o d s wi l l p r o v i d e a t e c h n o l o g y a s s i s t a n t f o r d e t e c t i n g h y d r o x y l r a di c a l s a n d
技术 是 F e n t o n法 J 。 目前 , 科 研 工 作 者认 定 羟 基 自
自旋捕集 法 ( E S R) 、 高效 液 相 色 谱法 ( H P L C ) 、 分 光
光度法 、 荧光光度法 ( F D ) 、 化学发光法 ( C L ) 、 电化 学 检测 法 ( E C D) 等。
究。列举 了羟基 自由基的检测方法 , 包括 : 电子 自旋捕 集法 ( E S R) 、 高效 液相 色谱 法 ( HP L C) 、 分光光度 法、 荧光光 度 法( F D) 等 方法 , 这些方法对科研 工作 者检 测羟基 自由基提供 了一定 的技 术支持 , 并对今后 的研 究方 向起 到一定
2 检 测 方 法
2 . 1 电子 自旋捕 集 法 ( E S R) 电子 自旋共 振法 ( E l e c t r o n S p i n R e s o n a n c e ) 是从
1 9 4 5年发展 起来 的 , 主要 研究 对 象 为具 有 未 成对 电
混合均匀度——精选推荐

混合均匀度1、背景饲料工业是用变异系数来衡量饲料混合机混合物料的均匀程度。
根据国家标准,生产配合饲料、浓缩饲料的变异系数应控制在10%以下。
若变异系数过高,成品饲料中各种营养成份分布均匀性较差,可导致饲喂动物生长不一,饲料报酬下降,严重时可造成重大损失,给企业带来信誉危机,因此,混合均匀度是饲料加工的重要指标。
通过成品各组分质量差异性的测定,不仅可以反映饲料成品质量,也是用来评价混合设备加工工艺的重要指标,同时也是确定合理的混合时间的依据,被誉为饲料工业的心脏。
2、技术(1)甲基紫法是以甲基紫色素作为示踪物,将其与添加剂一道加入,预先混合于饲料中,然后以比色法测定样品中甲基紫含量,作为反映饲料混合均匀度的依据。
(2)沉淀法本法是利用比重为1.59以上的四氯化碳处理样品,使沉于底部的矿物质等成分与饲料中的有机组分分开,然后将沉淀的无机物收回、烘干、称重,以各样品中沉淀物含量的差异来反映饲料的混合均匀度。
(3)粗灰分法饲料中的有机物质在高温下(550±20℃)烧灼或,将所剩残渣冷却后称重,根据各个样品含量差异,得出饲料混合均匀度。
(4)钙测定法饲料经高温灰化或浓酸处理后,其有机物被破坏,钙变成溶于水的离子,用草酸铵定量沉淀,用高锰酸钾法间接测定钙的含量,从各个样品中钙含量的差异,求出饲料的变异系数。
(5)磷的测定法磷的测定在钙测定的试样中,用钒钼酸铵处理,生成黄色(NH4)3PO4,NH4VO3 16M0O3,在波长420nm下进行比色测定。
计算出各个样品的含量,根据含量的差异反映饲料的混合均匀度。
(6)粒度法饲料原料经粉碎后,会形成各种不同规格大小的颗粒,数种原料混合后,各颗粒之间通过物理、化学及其他作用,各不同成分规律性地分布在各物料堆中。
因此,用某一规格的筛子,对样品进行测定,把筛上残留物进行称重,根据各样品间残留物的重量,可求出混合均匀度。
(7)粗蛋白分析法饲料在催化剂与浓硫酸作用下,其中的氮生成硫酸铵。
mb检测羟基自由基原理

mb检测羟基自由基原理
羟基自由基是生物体内最常见的自由基之一,它们对细胞膜、DNA和蛋白质等生物大分子的氧化损伤相当严重。
MB(Methylene Blue)是一种常用的羟基自由基捕捉剂,其原理是利用MB的亚甲基(CH2)与羟基自由基发生反应,形成蓝色的还原型MB。
在实验中,使用MB可以测定样品中羟基自由基的水平。
首先,将样品与MB混合,然后加入还原剂(如维生素C),使MB还原为无色的亚甲基蓝(Leucomethylene Blue)。
羟基自由基会与亚甲基蓝发生反应,使其氧化还原为蓝色的还原型MB。
通过测量样品中还原型MB的吸光度,可以计算出羟基自由基的浓度。
MB检测羟基自由基的方法简单、灵敏,不需要昂贵的仪器设备,因此被广泛应用于生物体内羟基自由基的检测。
- 1 -。
mb检测羟基自由基原理

mb检测羟基自由基原理
MB检测羟基自由基原理
MB(甲基蓝)是一种常用的化学试剂,它可以用来检测羟基自由基。
羟基自由基是一种高度反应性的分子,它在生物体内起着重要的作用,但也会对细胞造成损伤。
因此,了解羟基自由基的生成和检测方法对于研究生物体的生理和病理过程具有重要意义。
羟基自由基的生成与氧化还原反应有关。
在生物体内,氧化还原反应是一种常见的化学反应,它可以产生自由基。
羟基自由基是一种含有氢原子和氧原子的自由基,它的化学式为OH。
在氧化还原反应中,羟基自由基可以通过氧化还原反应生成。
例如,当氧分子与水分子反应时,可以生成两个羟基自由基:
O2 + 2H2O → 4OH
MB可以用来检测羟基自由基的生成。
MB是一种有机染料,它的分子中含有两个苯环和一个甲基基团。
当MB与羟基自由基反应时,甲基基团会被羟基自由基氧化,产生一个自由基中间体。
这个自由基中间体可以与另一个MB分子反应,形成一个蓝色的产物。
这个产物可以通过光谱分析来检测。
MB检测羟基自由基的原理是利用MB的氧化还原性质和羟基自由基的高度反应性。
当羟基自由基存在时,它会与MB反应,产生一个蓝色的产物。
这个产物可以通过光谱分析来检测羟基自由基的生
成量。
因此,MB可以用来研究生物体内羟基自由基的生成和消除过程。
MB检测羟基自由基的原理是利用MB的氧化还原性质和羟基自由基的高度反应性。
通过检测羟基自由基的生成量,可以了解生物体内氧化还原反应的过程和羟基自由基的生理和病理作用。
这对于研究生物体的生理和病理过程具有重要意义。
富硒金针菇硒蛋白清除羟自由基的研究

羟自由基是氧化能力极强的自由基,能很容易地氧化各种有机物和无机物。
它可以与活细胞中任何分子(包括糖类、有机酸、核苷等)发生反应造成损害[1]。
为了降低这种损伤,可选择一些抗氧化效果的食品食用,或者使用抗氧化剂[2]。
硒是一种微量元素,对人体的正常代谢是不可缺少的。
它可以有效地对体内的自由基起到清除效果,又可以起到抗衰老的作用[3-5]。
硒能与包括多糖、蛋白、核酸等在内的物质结合,形成含硒多糖、含硒蛋白、含硒核酸等,构成了生物体内主要的含硒生物大分子物质[6]。
笔者利用甲基紫-Fe 2+-H 2O 2体系研究了富硒金针菇中硒蛋白对羟自由基的清除作用。
1材料与方法1.1仪器与试剂HZQ-Q 全温震荡器;冷冻离心机;7500c 型ICP-MS ;Cary 50紫外—可见分光光度计;考马斯亮蓝G250;硫酸铵;甲基紫溶液(2×10-3mol/L );过氧化氢溶液(0.12%);Fe 2+溶液(1×10-3mol/L );缓冲溶液Tris-HCl :pH 值3.5~7.5。
1.2试验方法1.2.1富硒金针菇硒蛋白的制备。
称富硒金针菇干样1.0g ,加20mL 二次水,在全温振荡器搅拌提取2.0h ,抽滤至干。
重复1次,合并滤液。
根据结合溶液的体积准确量取一定体积的硫酸铵,要一边搅拌,一边慢慢向烧杯内部加入,直到硫酸铵的饱和度达到95%,经过透析后,进行硒含量C 硒以及蛋白浓度C 蛋白的测定,方法分别选择ICP-MS 法和考马斯亮蓝染色法。
1.2.2羟自由基的测定。
在比色管(10mL )中分别加入浓度为2×10-4mol/L 的甲基紫溶液1.4mL 、浓度为0.1mol/L 的pH 值为3.5的Tris-HCl 0.1mL 、浓度为1×10-3mol/L 的Fe2+溶液1.2mL ,浓度为0.12%的H 2O 2溶液1mL ,最终体积定容到10.0mL ,不足部分用离子水补足,并混合均匀。
羟基和超氧自由基的检测研究进展

第29卷,第4期 光谱学与光谱分析Vol 129,No 14,pp1093-10992009年4月 Spectro sco py and Spectr al AnalysisA pril,2009羟基和超氧自由基的检测研究进展张 昊,任发政*中国农业大学食品科学与营养工程学院,教育部-北京市功能乳品实验室,北京 100083摘 要 活细胞在必需的新陈代谢过程中会产生自由基,越来越多的研究证据表明,这些自由基涉及到许多体内调控系统,然而一旦有过多的自由基生成便会氧化细胞脂膜、蛋白质、DN A 和酶,进而对细胞造成致命性的损伤。
此外,研究还表明许多疾病与自由基密切相关,例如,有研究报道海氏默症病人脑中生物分子的氧化损伤程度明显高于正常值,另外癌症可能也是DN A 受到氧化损伤的结果。
因此,测定自由基的方法就显得十分必需和重要。
文章重点对羟基和超氧自由基检测技术的发展情况进行了讨论,涉及的自由基检测技术主要有分光光度法、荧光法、化学发光法和电子自旋共振技术,并评价了各种方法的优缺点。
关键词 羟基自由基;超氧自由基;检测技术;评述中图分类号:O 65713 文献标识码:A DOI :1013964/j 1issn 11000-0593(2009)04-1093-07收稿日期:2007-11-28,修订日期:2008-03-06基金项目:国家/十一五0科技支撑项目(2006BAD05A16)资助作者简介:张 昊,1984年生,中国农业大学食品科学与营养工程学院硕士研究生 e -mail:david1hao@sina 1com*通讯联系人 e -mail:r enfaz heng@2631n et引 言羟基自由基(O H #)和超氧自由基(O 2-#)是生物体内活性氧代谢产生的物质,其中O 2-#经一系列反应最终会生成OH #,而OH #是一种氧化性很强的自由基,可以引发不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应,使糖类、蛋白质、核酸及脂类等发生氧化损伤。
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在 p =3 ,室温 2 ,每 隔 1 n取样 测 H . 5 0 0mi
定 ・ H 表 观生 成量 。见 表 4 O 。
表4 ・ OH生 成 量 与 时 间 的关 系
Ta e4 Ther l ions p be e ・ H or a on a bl eat hi t en o w f m t nd i e i tm
( 辽 宁石油 化工 大学 , 辽 宁 抚顺 I 3 0 ) 10 1
摘
要 :羟 自由基・ 是 氧化能力极强 的 自由基 ,其氧化能力仅次于氟 ,能很 容易地氧化各 种有机物和 OH
无机 物。在众 多测 定羟 自由基・ H 的方法 中 , O 本文选择采用 甲基紫分光光度法测 ・ H,从实验结果看 ,实验方 O
『 3] E Sma eai, A rs t 1 D u l b n x ai l v g f . a c sr M. mboi e a. o b o doi t e e aeo a o e d vca mo one at c a s ] aa s o a . 0 (9: 9 6 . n e i ft i [ . t yi T d y2 3 )5 — 5 y h n JC l s 0 7
—
基 团发 生亲电加成反应 , 而使 甲基紫褪色 。通过 从
子 自旋共振 (s ) 、 E R法 高效液相色谱(P C法 荧 H L) 、 光 法 . ,上述 这些 方法 操作 复 杂 ,难 以在本 体 系 ’ 8 等
中使用。而 甲基紫分光光度法测 ・ H,方法简单 , O
试 剂 易得 ,适 合本 实验 采用 。
s tm ys e
臭 氧浓 度对 ・ 自由基的 生成量 的影 响 OH
在p H=35 温度 为 2 ℃ , 间 3 mi, ., 0 时 0 n 取样
测 定 ・ H 表观 生成 量 。见 表 6 O 。
由表 6 知 :在 3% H0+ 钨酸体 系中通人臭 可 0 z 磷 氧有利于 ・H 的生成 , O 比原体 系生成 的・ H 自由基 的 O 量 多 , ・ H生成 量随着臭 氧浓 度 的增大 而增大 , 且 O 臭
成量 △ 可用 △A间接表示 ・ H 的生成量 ,△ 越 O
00 3 2 gmL的磷 钨 酸溶 液 ;5 .1 / %、1 %、3 % 5 0
H22 O 溶液 ;2m lL的 甲基 紫溶 液 ; 1 o/ 2O mo/ l HS 4 m L
溶 液 。见 表 1 。
表 1 仪器 与试 剂
24 温 度 对 ・ . OH 自由基的 生成 量的影 响
表 3 ・ 生 成 量 与 Hz 2 量分 数 的 关 系 OH 0质
Ta l er l t n h p b t e ・ b e3Th ea o s i e we n OH o m a i n a d 82 i f r to n 02
m as r e i n sf a to
测定 甲基 紫吸光度值 的变化可测定 出・H 的生成量 。 O
2 实验结果与讨论
21 磷钨 酸 与 ・ . OH生成 量的关 系
分别取 3 烧杯 , 个 加入适量蒸馏水 , 分别加入 再
1 m l . mL mo/ 0 2 L的甲基紫溶液 ,调 p H为 3 . ,在 5后
定 以苄 基 三 乙基 氯化 铵 为 相 转 移试 剂 下 ・ H 表 观 O
生成 量 。见表 7 。
表 7 ・ 生 成 量 与 相 转 移 试 剂 的 关 系 OH
Ta l 7Th e a o s i e e n・ b e e r l t n h p b t e 0H o ma i n a d p a e i w f r t n h s o t a se e g n s r n f rr a e t
Tabl e 1Appar t a usand r a nt e ge s
大 ,O 的生 成量越 多。见表 2 由表 2可知 :有磷 ・H 。
钨酸的 H0体系生成的・ H 自由基的量 比没有磷钨 zz O 酸的 H0体系产生的・ H 自由 的量多 2 zz O 基 倍,可见 磷钨 酸的加人有利 于 ・H 自由基 的生成 。 O
H O G a N Y n, S u — i HI Ch n we
( Lio igS iu iest, io igF s u 1 0 1 Chn ) a nn hh aUnv ri L a nn u h n 1 3 0 , y ia
Ab ta tHy rx la ia OH )i akn f rer dcl t xr mesrn xdzn bl ,t o iaiecp ct sr c : do y dc l( r s ido e a ia he t f wi e to go iiiga it i xd t a a i i s y v y
i e o d o l o fu r e S e h d o y a ia a a i x d z a o so g n ca d i o g i u s n e . n t i ss c n n y t o d , O t y r x l d c l n e sl o i ie v r u r a i n r a cs b t c s I s l i h r c y i n n a h p p r s e to h t merc d tr ia i n o a e , p c p o o ti e em n to f r OH t ty i lt s a e u . h e u t h w a eme h d i wi meh l o e  ̄i d o t T er s l s o t t h t o h v wa c s h t s smp e i e p n i ea d g o e u t . i l, n x e sv o d r s l n s
Ke r s M eh l iltse to h tmercmeh d Az li cd M e h im ywo d : ty o e p crp oo t to ; eaca i; c a s v i n
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
羟 自由基 ・H 是氧化能力极强的 自由基 , O 其氧
化 能力 仅 次于 氟 ,能很 容易 地氧 化各 种有 机 物和无 机物 。 由于 ・ H 反应 活性 大 , O 寿命 短 , 在浓 度低 , 存 所 以在有关 ・ H 的研 究 中 , O 选择 分 析测试 方 法特别
26 相转移 催 化剂对 ・ 自由基 的 生成量 的 影响 . OH 在 p H=35 .,时问 3 i , 度 2 ℃ ,取样 测 0m n 温 0
由表 3可知 :在磷 钨 酸与 H0 体 系 中 ,H0 zz
的质量 分数 越高 ,O 自由基 的量 越多 。 ・H
23 时 间与 ・ . OH生成 量的关 系
法简单 ,试剂 易得 ,效 果 良好。 关 键 词 :甲基 紫分 光光 度法 ;壬二酸 ;机理
文献标识码 : A 文章编号 : 17 — 4 0( 0 2) 3 0 1— 2 6 10 6 2 1 0 — 3 7 0 中图分类 号 :x 8 3
S cr pho o e r cDe e m i ton o y o y pe to t m t i t r na i fH dr x l Ra c lCo t n ih M e h l o e di a n e tW t t y l t Vi
化。
[ ] 任永 利 ,王 莅 . 1 苯直 接羟 基化 制苯 酚研 究进 展[ . 学进展 , 0 , J化 J 2 31 0
55: 0 4 6 ( 4 - 2. )2
[ 2] 于 剑锋 ,杨 宇.a sn结 构钼 钒磷 杂多 化合 物及 其在 苯酚 过氧 化 Dwo
氢 羟化 中 的活性 『l 化学 报 , 9,8 ) 3— 3. J催 _ 1 71( : 2 4 5 9 54
第4 1卷 第 3期
21 0 2年 3月
当
代
化
工
C n e o a y C e ia n u t y o t mp r r h m c lI d s r
V 141.N . o. O3 M r h 2 12 ac, 0
甲基紫分光光度法测定羟基 自由基含量
洪 滟 ,史春薇
氧发生器为自制, 浓度最高可达 4 0 m / 因此当 00 g , m 臭氧浓度 为 400mg ,O / 时 ・ H生成 量最大 。 0 m
表 6 ・ 生 成 量 与 臭 氧 的 浓 度 的 关 系 OH
Ta l e r l to s i e e n・ b e 6Th e a n h p b t e oH o m a i n a d o o e i w f r t n z n o c n e ta in o cn r t o
重要 。 定 羟 自由基 ・ H 的方 法 有很 多种 , 电 测 O 如
12 甲基 紫 分光 光度 法测 ・ . OH的原 理 甲基 紫分 光光度法测 ・H的基本原理是 :甲基紫 O 在 p /3 H > . 0的酸 I溶 液中呈 紫色。O 生 ・ H容易进攻高 电 子 云密度 点 ,会与 甲基紫 中具有 高 电子 云密 的— c C =
.
代
化
2. 5
工
21 0 2年 3月
度 的情 况 。p 35 H= .,温度 为 2 ℃。见 表 3 0 。
表 2 不 同体 系处理后溶液吸光度变化值
Ta e2A bs ba eva ue fs l ion t e t d y fe e bl or nc l so o ut r a e b di r nt
由表 7可知 :在 体 系 中加 入苄 基三 乙基 氯化 铵 不有利 于 ・ H 的生 成 ,比原 体系生 成 的 ・ H 自由基 O O 的量少 ,因此 以苄基 三 乙基氯 化铵 为相 转移 试剂 不