200只大鼠内眦取血的操作体会

EDTA 钾抗凝,目前,生化测定采用肝素钠抗凝。

熟练掌握不同采血管的功能和要求,就会杜绝1.3中第二次采血和1.4中第一次采血出现的错误。

1.3中第二次采血由于使用了EDTA 钾抗凝管,血中的Ca 2+、M g 2+被EDTA 钾络合,测出的Ca 2+、M g 2+明显降低。

M g 2+
又是ALT 的必须辅助因子,ALT 的活性受到抑制,所以结果较第一次明显降低。

1.4中第一次采血出现的结果是因为抗凝剂与血的比例高造成。

有文献证明,随着血液和抗凝剂比例的逐步下降,首先表现为TT 检测时间缩短[2]。

笔者曾做过10例30个凝血试验的观察(每例血各与3.2%枸橼酸纳5∶1、7.5∶1、9∶1比例抗凝),发现随着血液与抗凝剂比例的逐步下降(由5∶1※7.5∶1※9∶1),PT 和TT 时间缩短,Fib 值增高。

因此,护士要按要求采集抗凝血,避免由于抗凝剂与血的比例不合格带来的错误结果。

2.3　注意事项　(1)采血要准确,避免溶血,因为溶血可使心肌酶学、TT 、K +、胆红素等项目发生改变或测不出;(2)急诊分析时,一定要用抗凝管采血,因为血样
分离的快才能早出结果,注意血与抗凝剂的比例并混匀;(3)标本要及时送检,避免标本放置时间过长造成血糖、CO 2、Na +
、K +
等的改变。

护理工作的规范采血关系到检验结果的准确可靠,二者要互相配合才能使医院的服务质量不断提高。

【参考文献】
[1]　徐涛,王荣廷.临床检验基础[M ].北京:人民卫生出版
社,1986,150.
[2]　陈俊,王利建,吴健媛,等.抗凝比例对凝血检测项目T T
的影响[J ].江西医学检验,2003,21(1):59.
(收稿日期:2005-09-20)
(护理学栏目编辑:张玉亭)
技术方法
200只大鼠内眦取血的操作体会
周晓春,陈　龙,刘绍晨(承德医学院,河北承德　067000)
【关键词】大鼠;内眦;采血
【中图分类号】R -332 【文献标识码】B 【文章编号】1004-6879(2005)04-0328-02 大鼠是科研常用的实验动物,在实验中要采集大量的血液标本比较困难[1]。

本实验对200只大鼠进行了眼内眦采血,现将采血方法和操作体会介绍如下。

1　材料和方法
1.1　实验动物　清洁级SD 大鼠200只,雌雄各半,10周龄,体重200～300克。

1.2　麻醉　取一只密闭容器,将蘸取适量乙醚的棉花放入其中,然后将大鼠放入,待大鼠麻醉后采血。

1.3　采血　采血者以左手拇指、食指从背部紧握住大鼠颈部,当取血时轻轻压迫大鼠颈部两侧,使眶后静脉丛充血。

以酒精擦拭大鼠眼内眦后,取长约2～3cm 、内径0.5～1.0mm 消毒备用的毛细吸管,使毛细吸管与鼠面成45℃的夹角,由内眦刺入,刺入深度约4～5mm [2]。

当感到有阻力时停止推进,轻轻旋转毛细吸管,血液便能自然流入毛细管中。

通常弃去第一滴血,从第二滴血开始收集,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将毛细吸管拔出,用消毒棉球按压穿刺处止血。

体重200～300g 大鼠每次可采血2～3ml ,如有需要可每周一次,左右两眼轮换更好。

此种采血方法尤其适用于需观测血液中各项指标的动态变化。

2　注意事项
(1)采血场所要有充足的光线,温度以室温20℃为宜。

(2)麻醉深浅要适度,且宜浅不宜深,麻醉太深对顺利采血不利;可以多只间隔麻醉,几个人相互配合操作更加迅速。

(3)采血用具及大鼠采血部位要求消毒,否则易致大鼠眼部感染。

(4)若需抗凝全血,在收集血的试管内需预先加入抗凝剂。

(5)正确掌握操作要领,严格按上述的要求操作,手法一定要娴熟,否则会导致大鼠致盲,不利于后续实
验。

(6)正确选用采血器,可以选用注射器,但是通过实际操作,选用毛细吸管更为合适。

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328·　承 德 医 学 院 学 报　
JO U RNA L OF CHENG DE M EDICAL CO LL EGE
V o1.22No .42005
DOI :10.15921/j .cn ki .cyxb .2005.04.027
3　讨论
大鼠的采血方法有很多种,如割(剪)尾采血、鼠尾刺血法、断头取血、心脏采血、颈动静脉采血、腹主动脉采血、股动(静)脉采血等。

前两种方法采血量较少,只适用于仅做白细胞计数或血红蛋白检查。

后几种方法虽然采血量相对较多,但其中断头取血对血液标本有污染,大多混有组织液和被毛,可能影响到实验检测结果,且大鼠不能存活,不利于后续实验。

余下几种采血方法对大鼠的创伤较严重,也不利于后续实验[2]。

在采血时,麻醉药品的选择也是很重要的。

文献报道乌拉坦宜用于鼠类,作用温和持久[3]。

但我们在实验中发现用乌拉坦麻醉后取血比较困难,血液粘稠发黑,不易取到要求血量。

戊巴比妥钠是较常用的动物麻醉剂,可腹腔注射,也可静脉注射,特点为安全范围大、毒性小、麻醉潜伏期短、维持时间较长;不足之处是大鼠常因呼吸道不畅或麻醉过量而死亡,同时也抑制末梢循环导致血压降低,并影响基础代谢,体温降低。

氯胺酮是一种镇痛麻醉剂,但对鼠类则常有严重呼吸抑制,大鼠常因麻醉不当而死亡。

通过实验我们发现乙醚麻醉效果较好,麻醉潜伏期短,安全范围大,取血顺利,维持时间短,取血后大鼠易于苏醒。

通过对200只大鼠进行内眦取血的探索,发现此种方法具有较多优点:①血液标本不易被污染;②较易采到所需血量,一次采血量可达2～3ml;③对大鼠的创伤小;④可分次取血,便于实验研究。

我们认为,大鼠内眦取血适用于大多数实验,是大鼠采血的首选方法,只要掌握好正确的操作要领,就能成功地完成内眦取血。

【参考文献】
[1]　吴晓晴,郝晨霞.160只小鼠心脏采血的操作体会[J].实
验动物科学与管理,2004,21(1):53-54.
[2]　施新猷,主编.现代医学实验动物学[M].人民军医出版
社,1999.101.
[3]　刘俊杰,赵俊.现代麻醉学[M].第二版.北京:人民卫生
出版社,1997.1510-1511.
(收稿日期:2005-06-26)
黄芩茎叶总黄酮对急性小鼠耳廓肿胀的影响
杨鹤松,邓淑华,赵铁华
(承德医学院中药研究所,河北承德　067000)
【关键词】黄芩茎叶总黄酮;小鼠;耳廓;急性肿胀
【中图分类号】R285.5 【文献标识码】B 【文章编号】1004-6879(2005)04-0329-02
黄芩茎叶总黄酮是从黄芩茎叶中提取的有效成分,通过系统的实验研究发现,黄芩茎叶总黄酮具有抗炎、解热、镇痛、抗菌、抗病毒、免役调节、抗肿瘤以及对心、脑血管等多方面的药理活性,这里仅就其对急性炎症的药理作用进行实验性研究。

1　实验材料
1.1　实验动物　昆明种小鼠,26-30g,雄性。

由北京中国医学科学院实验动物研究所繁育场提供。

1.2　受试药品　黄芩茎叶总黄酮:由本所植化研究室提供,室温干燥保存,用前以pH7.4的PBS溶解使用。

阿斯匹林:承德市普宁制药厂提供(纯品原料药),室温干燥保存,用前以pH7.4的PBS溶解新鲜使用。

二甲苯:分析纯,天津市佳兴化工玻璃仪器工贸有限公司产品,批号:20040708。

2　方法和结果
2.1　分组　将26～30g雄性昆明种小鼠,随机分为溶媒对照组、阳性药对照组(阿斯匹林100mg/kg)、黄芩茎叶总黄酮大剂量(180.8mg/kg)组和小剂量(60.3mg/kg)组。

2.2　给药　各组小鼠按0.2ml/10g体重的容积间隔12h腹腔注射给药3次。

2.3　制模　末次给药30min后以二甲苯(50μl)接触右耳5s,15min后小鼠脱颈椎处死,用直径6mm打孔器切下双耳的对等部位。

称量左右耳片的重量,计算致炎耳片增重值、耳廓肿胀率(%)及肿胀抑制率(%),致炎耳片增重值用秩和检验法进行显著性判断。

2.4　数据计算　耳廓肿胀率(%)=(右耳片重量-左耳片重量)/左耳片重量×100%;肿胀抑制率(%)= (对照组肿胀率-实验组肿胀率)/对照组肿胀率×100%。

2.5　实验结果　见下表:
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　承 德 医 学 院 学 报　
JO U RNA L OF CHENG DE M EDICAL CO LL EGE
V o1.22No.42005。