热激后冰浴时间与复苏时间对化学转化法转化效率的影响
物理化学第六版侯新朴人民卫生出版社课后答案
思考题 1. 【答】 1 不一定正确。
绝热条件可以保证系统和环境之间没有热交换 封闭条件可以保证系统和环境之间没有物质交换。
但是单单这两个条件不能保证系统和环境之间有其他能量交换方式 如作功。
当绝热封闭的系统在重力场中高度发生大幅度变化时 系统和地球间的作功不能忽略 系统的状态将发生变化。
2 正确。
3 不正确。
系统和环境间发生物质交换时 可以作功又吸热 但显然不是封闭系统。
为了防止混淆 一般在讨论功和热的时候 都指定为封闭系统 但这并不意味着发生物质交换时没有功和热的发生。
但至少在这种情况下功和热的意义是含混的。
4 正确。
当发生化学作用 即系统和环境间物质交换 时 将同时有热和功发生 而且还有物质转移 因此是敞开系统。
3.【答】 1 对一个物理化学过程的完整描述 包括过程的始态、终态和过程所经历的具体途径 因此仅仅给定过程的始、终态不能完 整 地说明该过程。
Q、W都是途径依赖量 其数值依赖于过程的始态、终态和具体途径 只要过程不完全确定 Q、W的数值就可 能 不确定。
因为Q W △U 只要过程始、终态确定 则△U确定 因此Q W也确定。
2 在已经给定始、终态的情况下 又限定过程为绝热过程 Q 0 Q 确定 W △U W和△U也确定。
5. 【答】 1 正确。
状态是各种状态性质的综合表现 状态性质改变 状态一定改变。
2 不正确。
比如理想气体的等温过程中 状态改变但是热力学能不变。
3 不正确。
温度是热运动的―强度‖ 热是热运动的―数量‖ 两者没有必然练习。
4 不正确。
绝热和刚性只意味着内有热交换和体积功 不能排除其他作功方式的存在。
5 不正确。
理想气体可逆等温压缩时 向外放热 热力学能不减少。
6 正确。
7 不正确。
H是状态函数 但是△H却是依赖于过程的物理量 因此热 Qp 不是状态函数 他依赖于过程。
8 不正确。
理想气体的焓仅与温度有关。
9 不正确。
10 正确。
Q―W △U --。
11 不正确。
感受态细胞制作和转化效率的研究
天津农学院毕业论文中文题目:感受态细胞制作和转化效率的研究英文题目:Establishment of Competent Cells and Analysis of Transformation Efficiency学生姓名于晓猛系别动物科学系专业班级2010 级动物医学专升本班指导教师李吉霞成绩评定2012年6月目录1 前言 (1)2 材料与方法 (2)2.1 材料与仪器 (2)2.1.1 菌种及质粒 (2)2.1.2 培养基 (2)2.1.3 仪器设备 (2)2.2方法 (2)2.2.1制备感受态细菌 (2)2.2.2 DNA重组子的转化感受态大肠杆菌 (3)2.2.3质粒DNA提取 (5)3结果 (8)3.1 感受态细菌转化效率观察 (8)3.2 质粒提取结果观察 (10)4 讨论 (11)4.1 DNA 重组受体系统 (11)4.2感受态细胞的制备 (11)4.3 质粒转化效率 (12)参考文献 (13)致谢 (14)附录1：外文文献原文 (15)附录2：外文文献原文译文 (20)摘要质粒转化进入大肠杆菌感受态细胞是分子克隆的关键步骤，是基因克隆以及DNA文库构建等研究中频繁使用的一项重要的常规操作。
本研究通过复苏和扩增DH5α细菌，每50ml菌液用10ml预冷的0.1mol/L的CaCl2重悬，冰浴30min。
于4℃，离心回收。
每50ml初始培养物用2ml用冰浴的0.1mol/L的CaCl2重悬，100ul/份，-4℃放置24 h。
转化流程为：100ul感受态DH-5α+ 5ul PCI-Neo-hTERT冰上放置30min，42 ℃,热激90s，冰浴2min，加入400ul LB培养基，于37℃,50r/min振摇45min，之后取200ul涂布于含Amp琼脂板，37℃倒置培养12~16h。
次日观察，并随机选择阳性克隆，用LB液体培养基进行扩增，然后按照质粒提取试剂盒操作说明提取质粒，检测转化效率。
高效JM109感受态细胞制备及转化条件的优化
高效JM109感受态细胞制备及转化条件的优化摘要：采用不同的转化液制备大肠杆菌（Escherichia coli）JM109感受态细胞，并进行pUC18质粒的转化，考察细菌生长状态、转化液、转化的热激时间和转化后所用培养基对转化率的影响。
结果表明，菌液A600 nm为0.705时采用TB转化液制备感受态细胞，在42 ℃热激45 s，转化后采用SOC培养基振荡培养，转化效率最高，可达8.59×108 CFU/μg质粒。
关键词：JM109；感受态细胞；转化效率Preparation and Transformation Conditions for Efficient JM109 Competent CellsAbstract：Competent cells of Escherichia coli JM109 were prepared by different transformation liquid，and pUC18 was transformed into the competent cells. The effects of different growth state of bacteria，transformation liquid，heat shock time and culture medium after heat shock on transformation efficiency were studied. The results showed that the highest transformation rate could be obtained by preparing the competent cells by TB transformation liquid when bacteria A600 nm was 0.705，heat shocked at 42 ℃for 45 s and then culturing in SOC medium. The transformation efficiency could reach to 8.59×108 CFU/μg plasmid.Key words：JM109；competent cell；transformation efficiency在自然条件下很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内，而人工构建的质粒载体一般缺乏此种转移所必需的mob基因，因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移；如需将质粒载体转移进受体细胞，需诱导受体细胞产生一种短暂的感受态以摄取外源DNA。
化学平衡中转化率求法和规律总结
例7． 。在密闭容器中按 的比例充入 和 ，反应达到平衡后，若其它条件不变，再按 的比例充入 和 ，反应重新达到平衡后， 和 的平衡转化率都有等同程度的增大。即反应达到平衡后按物质的量的比例增大反应物浓度，达到新的化学平衡时，各反应物的转化率均有等同程度的增大。
若要求某一时刻的转化率只要把平衡时的反应物浓度（或物质的量）改为某一时刻的反应物浓度（或物质的量）即可。
现将有关平衡转化率的问题小结如下：
1.对有多种反应物的可逆反应达到平衡后加其一。这种情况不管状态如何均认为所加物本身转化率减小其它物质转化率增大
例1： ，反应达到平衡后增大 的浓度，则平衡向正反应方向移动， 的转化率增大，而 的转化率降低。
3、充入“惰性气体”增大压强判断各反应物转化率变化
对于可逆反应aA(g)＋bB(g) cC(g)＋dD(g)，（a＋b≠c＋d，）在压强变化导致平衡移动时，学生感到困惑的是充入“惰性气体”化学平衡朝哪个方向移动？转化率如何变化？可归纳为以下两方面：
（1）恒温恒容条件下充入“惰性气体”，化学平衡不移动。因平衡体系的各组分浓度均未发生变化，故各反应物转化率不变。
例8． 。反应达到平衡后按比例增大反应物浓度，达到新的化学平衡时，各反应物的转化率均有等同程度的减小。
总结：其实问题2、3都是等比例扩大或缩小反应物用量的问题，大家只要抓住这类问题的模型特征，便能轻松解决这类问题。
4．等温等压下对于有多种反应物的可逆反应达到平衡时不按比例加入各种反应物。一般先让加入量满足等效平衡，然后把多出来或少的看成是单独再加入减少的物质，利用问题一的办法来解决。（此类问题一般讨论恒温恒压）
分析：该反应可认为后加入NO2与原反应进行叠加，叠加后气体总体积增加，为了使体积维持不变，只能向体系加压从而引起叠加后的平衡向生成N2O4的方向移动。
化学平衡中转化率求法和规律总结
对于可逆反应aA(g)＋bB(g) cC(g)＋dD(g)，（a＋b≠c＋d，）在压强变化导致平衡移动时，学生感到困惑的是充入“惰性气体”化学平衡朝哪个方向移动？转化率如何变化？可归纳为以下两方面：
（1）恒温恒容条件下充入“惰性气体”，化学平衡不移动。因平衡体系的各组分浓度均未发生变化，故各反应物转化率不变。
例8． 。反应达到平衡后按比例增大反应物浓度，达到新的化学平衡时，各反应物的转化率均有等同程度的减小。
总结：其实问题2、3都是等比例扩大或缩小反应物用量的问题，大家只要抓住这类问题的模型特征，便能轻松解决这类问题。
4．等温等压下对于有多种反应物的可逆反应达到平衡时不按比例加入各种反应物。一般先让加入量满足等效平衡，然后把多出来或少的看成是单独再加入减少的物质，利用问题一的办法来解决。（此类问题一般讨论恒温恒压）
①若a＝b+c：A的转化率不变；②若a＞b+c：A的转化率增大；
③若a＜b+cA的转化率减小。
（2）若反应物不只一种：aA(g) +bB(g) cC(g) +dD(g)，
①在不改变其他条件时，只增加A的量，平衡向正反应方向移动，但是A的转化率减小，而B的转化率增大。
②若按原比例同倍数地增加A和B，平衡向正反应方向移动，但是反应物的转化率与气体物质的计量数有关：如a+b=c+d，A、B的转化率都不变；如a+b＞c+d，A、B的转化率都增大；如a+b＜c+d，A、B的转化率都减小。
（1）恒温恒压：由于恒温恒压时等比例扩大或缩小反应物的用用量均与原平衡等效故转化率不变，各反应物和生成物的体积分数不变，各反应物和生成物物质量会跟原平衡相比，等比例增加，但浓度不变
实验六 感受态细胞的制备和重组质粒的转化
实验六感受态细胞的制备和重组质粒的转化【实验目的】1.掌握用CaCl2法制备感受态细胞的原理和方法。
2.学习和掌握质粒DNA的转化和重组质粒的筛选方法。
【实验原理】质粒在不同的细菌之间转移是微生物世界中一种普遍的现象，一个细菌品系通过吸收另一个细菌品系的质粒DNA而发生了遗传性状的改变，这种现象叫做转化，获得了外源DNA的细胞称为转化子。
在基因克隆技术中，所谓转化是指质粒或重组质粒被导入受体细胞，表达相应的选择标记基因，并在一定的培养条件下，在选择性培养基上长出转化子的过程。
质粒必须通过转化进入细菌细胞内，才能进行扩增和表达，从而获得大量的克隆基因,使我们能够进行进一步的DNA操作，如亚克隆等；或者获得其表达产物。
转化效率的高低与受体菌的生理状态有关。
细菌吸收外源DNA的能力最高时的状态被称为感受态细胞（competent cell）。
有些种类的细菌在其生长的任一阶段都处于感受态，而另一些细菌只有处于某个生长时期时（一般为对数生长早、中期），才会处于感受态,如本实验所用的大肠杆菌。
用一定浓度的CaCl2 处理对数生长早中期的细菌可以大大提高细菌吸收周围环境中的DNA分子的能力。
对这种现象的一种解释是CaCl2能使细菌细胞壁的通透性增强，从而提高转化率。
这种转化方法称为“化学法”。
目前还可以使用电激的方法，通过瞬间的高压电流，在细胞上形成孔洞，使外源DNA进入胞内，从而实现细胞的转化。
电激转化的效率往往比化学法高出1到2个数量级，达到1 x 108转化子/μg DNA，甚至1 x 109转化子/μg DNA，所以常用于文库构建时的转化或遗传筛选。
微生物转化是基因工程的常用技术，大肠杆菌是基因工程中最常用的受体菌，本实验即是用前面实验获得的重组质粒转化大肠杆菌细胞。
【试剂与器材】〈一〉试剂1．LB液体培养基: 参见附录每组配200mL, 其中100mL分装于500mL三角瓶中，另各取3mL装于2只大试管中，其余装于装于500mL三角瓶中，121℃高压蒸汽灭菌20分钟。
冰浴时间对氯化钙转化法转化效率的影响
安截农业科学．ＪｏｕｒｎａｌｄＡｎｉｍａｌＡ一骊２００７，３５（３０）：９５＂／Ｉ责任编辑孙红忠责任校对幸辨冰浴时间对氯化钙转化法转化效率的影响张卫林，赵晶，李芬’（河南师范大学生命科学学院，河南新乡４５娜）摘要确定大脑杆酋Ｄ｝１５。
氯化钙转化击时感受态细胞与质粒混夸物的最佳木浴时间。
方法：在保证其他鲁件一致的情况下．谩王太肠杆茼感爱态细胞和质粒混合物的冰洛时问梯度并建立限性对照进行研究。
结果：冰洛２０ｍ／ｎ时转化效率最高。
结论：与其他冰浴时间相比．冰落２０吡岫时的转化效率最高，实验重复性好，成本低廉．而且操作简便，值得推广使用。
关键词冰浴；感受态细胞；转化效率中围分类号０６４文献标识码Ａ文章编号０５１７—６６１１（ａ∞７）３０一唧１—０１啪硝Ｆｒｅｅ血ｇ啦岫ｔｈｅ＿Ⅱ如幽ｌ啦Ｆ，ｍｃ缸－＇ｙｏｆ∞Ｍ删刀ｉ＾懈懈Ｉ如矗ｍ（Ｃｏｌｌｅｇｅｏｆ陆蹦唧曙，Ｈ唧№训Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ⅺ瓜血ｇ，Ｈｅｒｅｎ４５３００７）ＡｂｓｔｒａｃｔＴｈｅａｉｍｏｆｔｈｅｒｅｓｅａｍｈｗａｓｔｏｃｏ如岫ｂｅｓｔ缸商瞩ｔｉｍｅｏｆｔｈｅＩＩｌｉ蛳ｏｆ咖ｎ呦词ｃｅｌｌａｎｄｐｌａｓ面ｄｉｎｔｈｅＥ．ｃｏ／ｉＤ｝＆∞，ｔｒｍａｓ．ｆｏｎｍｎｇｍｅｔｈｏｄＴｈｅｍｅｔｈｏｄ懈协ｆ，ｅ４叩ａ晰唔虹腿ｌａｄｄｅｒｄｔｈｅｌ玎ｉｘ咖ｏｆｃ。
呷ｅｈ蛐ｅｄｃｅｌｌ“ｐｌａｃｉｄａｌｏｎｇｗｉｔｈｎｅｇａｔｉｖｅｓａｍｐｌｅｂｒｅｓｅａｒｃｈｔ加ｄｅｒｔｈｅｃ蚺ｄｌｔｉｏｎｏｆｏｔｈｅｒａｓｐｅｃｔｓ；田℃Ｉ蒯ｂｌｅｘｅａｌｅｄｔｈａｔｔｈｅⅡⅢｄｍｍｉｌｌｇ棚ｃｉ何町ｗａｓｔｈｅ址舾ａｔｔｈｅ伍咖ｔｉｍｅｏｆ２０ｍｉｒｍｌｅｓ；Ｃ／ａｎ－ｐ捌ｗｉｔｈｔｈｅ出ｃ呻０ｆｏ岫牖２ｊｎｇｔｉｍｅｓ，妊２０ｍｉｎｕｔｅｓ嘁ｅ缸ｉ唧Ⅷｔｈｅｈｉ扣ａｎｄ恤日ｑ㈣ｂｅ洲％ｉｌｙ，∞ｉｔｄｅ—ｅｄ＊ｉ１唱ｗｉｄｅｌｙＫ盯佩—ｓＦ阳癌ｒＩｇ；ｃ（州删删ｏｅｌｌＢ；缶印击商喂ｅｆＲｅｉｅｎｃｙ在大肠杆菌这一传统表达系统被频繁用作研究各种基因表达时，氯化钙转化法困其简单高效性而尤为分子生物学工作者所广泛采用。
一种优化的大肠杆菌感受态细胞制备及转化方法
一种优化的大肠杆菌感受态细胞制备及转化方法一、本文概述随着生物技术的快速发展，大肠杆菌作为常用的基因工程受体菌，其感受态细胞的制备及转化方法对于基因克隆、表达以及基因功能研究等领域具有至关重要的意义。
传统的感受态细胞制备及转化方法往往存在转化效率低、细胞活性不稳定等问题，优化大肠杆菌感受态细胞的制备及转化方法成为当前研究的热点。
本文旨在介绍一种经过优化的大肠杆菌感受态细胞制备及转化方法，旨在提高转化效率，保证细胞活性，并简化操作步骤，为相关领域的研究提供更为可靠、高效的实验手段。
二、材料与方法1 大肠杆菌菌株：选用的大肠杆菌菌株应具备易于转化、生长迅速且遗传背景清晰的特性。
（1）从LB平板上挑取单菌落，接种至5ml LB液体培养基中，37℃、200rpm摇床培养过夜。
（2）次日，按1:100的比例将菌液转接至新鲜的LB液体培养基中，继续培养至OD600达到4-6。
（3）将菌液冰浴10分钟，然后4℃、4000rpm离心10分钟，收集菌体。
（4）弃去上清液，用预冷的1M CaCl₂溶液重悬菌体，冰浴30分钟。
（5）再次4℃、4000rpm离心10分钟，收集菌体，并用预冷的含15%甘油的1M CaCl₂溶液重悬菌体。
（6）将感受态细胞分装至无菌的EP管中，每管50μl，液氮速冻后存于-80℃冰箱备用。
（2）向感受态细胞中加入适量的质粒DNA（或连接产物），轻轻混匀，冰浴30分钟。
（4）向EP管中加入500μl LB液体培养基，37℃、200rpm摇床复苏45分钟。
（5）将复苏后的菌液涂布于含有相应抗生素的LB平板上，37℃培养箱倒置培养过夜。
为了提高转化效率，我们在传统的大肠杆菌感受态细胞制备及转化方法上进行了以下优化：（1）在菌液OD600达到4-6时进行感受态细胞的制备，此时菌体处于对数生长期，活性较高，有利于后续的转化。
（2）在制备感受态细胞时，使用预冷的1M CaCl₂溶液进行重悬，并在其中加入15%的甘油，以提高细胞的稳定性并防止冰晶形成。
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安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39( 9) : 5041 － 5042
责任编辑 陈秀晨 责任校对 李岩
热激后冰浴时间与复苏时间对化学转化法转化效率的影响
郭姣洁1，2 ，薛永常1 ，徐书景2 ，马书娜2 ，鞠建松2*
( 1． 大连工业大学生物工程学院，辽宁大连 116034; 2． 河北师范大学生命科学学院，河北石家庄 050016)
3 结论与讨论 化学转化试验的常规步骤为冰浴 30 ～ 120 min，热激 90
大肠杆菌感受态细胞的制备与转化试验不仅是分子生 物学实验中的一项基本操作，也是分子克隆的重要环节之 一。要使体外构建的 DNA 重组子或与外源目的基因构成的 重组载体顺利导入合适的受体细胞，进而得以复制、增殖和 表达，除了需要制备具有高转化率的感受态细胞之外，转化 试验中的各种因素，如冰浴时间、热激时间、复苏时所用培养 液的成分等均对基因异源细胞的表达效率有影响。
基金项目 作者简介 收稿日期
河北省留学回国人员项目( 2010 年) ; 河北师范大学博士启 动基金项目( L2009Bቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ3) 。 郭姣洁( 1984 － ) ，女，河北石家庄人，硕士研究生，研究方 向: 酶工程。* 通讯作者，E-mail: jujiansong@ 126． com。 2010-11-25
图 1 热激后冰浴时间对转化效率的影响 Fig． 1 Effect of ice bath time after hot shock on the transforma-
tion efficacy
2． 2 不同复苏时间对转化效率的影响 由图 2 可知，采用 CaCl2 -MgCl2 缓冲溶液制备的感受态在复苏摇晃培养 30 min 达到最佳转化效率，而用 CaCl2 -甘油-PIPES 溶液制备的感受 态在 40 min 时达到最佳转化效率; 随着复苏时间的延长，转 化效率均呈下降趋势，因此如果按照常规方法复苏培养 60
5042
安徽农业科学
2011 年
37 ℃ 过夜培养; 统计每个培养皿的菌落数。 1． 3． 3 复苏时间对转化率的影响。感受态热激后立即冰浴 2 min，加入 LB 液体培养基 900 μl，37 ℃ 振荡复苏，时间分别 为 0、10、20、30、40、50、60 min，移取 200 μl 培养液均匀涂布在 氨苄抗性 的 LB 固 体 培 养 基 上，37 ℃ 过 夜 培 养 后 对 菌 落 计数。 1． 3． 4 转化效率计算。试验经多次重复，选取结果稳定且 重现率较高的多组结果进行分析，计算转化效率。1 μg DNA 转化感受态细胞所产生的转化子总数即为转化效率。计算 公式为:
pUC18 均由河北师范大学微生物学实验室提供。 1． 1． 2 试剂。NaCl，酵母粉，胰蛋白胨，琼脂粉，氨苄青霉 素，CaCl2 ，MgCl2 ，甘油均为国产分析纯。PIPES 购自 Sigma。 质粒提取试剂盒购自威格拉斯生物技术( 北京) 有限公司。 1． 2 培养基与缓冲溶液配制 1． 2． 1 培养基。①LB 液体培养基: 1. 0% 胰蛋白胨，0． 5% 酵母粉，1. 0% NaCl，蒸馏水配制; ②LB 固体培养基: LB 液体 培养基添加 1． 5% 琼脂粉; 121 ℃ 高温高压灭菌 20 min。氨苄 青霉素为 100 mg / ml。 1． 2． 2 缓冲溶液。①CaCl2 -MgCl2 溶液，0. 8 mol / L MgCl2 ， 0. 2 mol / L CaCl2 ; ② CaCl2 -甘 油-PIPES 溶 液，0． 1 mol / L CaCl2 ，15% 甘油，0． 1 mol / L PIPES( pH = 7． 0) ，PIPES［哌嗪N，N-双 ( 2-乙 磺 酸 ) ，Piperazine-N，N'-bis ( 2-ethanesulfonic acid) ］; ③ CaCl2 -甘油溶液，0． 1 mol / L CaCl2 ，15% 甘油。 1． 3 方法 1． 3． 1 大肠杆菌感受态细胞的制备。将大肠杆菌 E． coli DH5α 划线培养于 LB 固体培养基上，37 ℃ 下倒置培养 16 ～ 18 h; 挑取单个菌落接种于 5 ml LB 液体培养基中，37 ℃ 、180 r / min 振荡培养过夜; 向 100 ml 新鲜的 LB 液体培养基中加 入 1 ml 菌液( 接菌量为 1% ) ，37 ℃ 振荡培养至 OD600 达到 0. 4 ～ 0． 5，将 菌 液 冰 浴 30 min，离 心 收 集 菌 体 ( 4 ℃ 、8 000 r / min，10 min) ; 弃去上清，加入 50 ml( 1 /2) 预冷的缓冲溶液 ①或②，重新悬浮细菌，冰浴 30 min，离心收集细胞( 4 ℃ 、 8 000 r / min，10 min) ; 用 5 ml( 1 /20) 预冷的缓冲溶液③重新 悬浮细胞，分装并保存于 － 80 ℃ 备用。 1． 3． 2 热激后冰浴时间对转化率的影响。向 100 μl 感受态 细胞中加入 1 μl 质粒 DNA( pUC18，26 ng / μl) ，以无菌水代 替 DNA 作为阴性对照，冰浴 30 ～ 120 min; 随后 42 ℃ 水浴热 激 2 min，迅速取出并冰浴( 时间为 0、1、2 、4、6、8、10 min) ，加 入 900 μl LB 液体培养基，37 ℃ 振荡( 100 r / min) 复苏 1 h，吸 取 200 μl 培养液均匀涂布在氨苄抗性的 LB 固体培养基上，
Effects of the Ice Bath Time after Heat Shock and the Recovery Time on the Transformation Efficiency of Chemical Transformation GUO Jiao-jie et al ( College of Bio-engineering，Dalian Polytechnic University，Dalian，Liaoning 116034) Abstract ［Objective］ The aim of the research was to study the effect of the ice bath time after heat shock and the recovery time on the transformation efficacy，and to confirm the simple and quick transformation method． ［Method］The competence was prepared with two buffer solutions; with the ice bath time after heat shock and the recovery time as the variables，the relationship between these two factors and transformation efficacy was studied． ［Result］The transformation efficacy was the best when the ice bath time was 2 min and the recovery time was 30 or 40 min; when the ice bath time and the recovery time was 0 min，certain amount of transformants still could be obtained． ［Conclusion］ The ice bath time after heat shock and the recovery time had certain impact on transformation efficacy，but they were not the decisive factors． Therefore，in the general transformation experiment，these two steps could be omitted to save time． Key words Competent cell; Transformation efficiency; Ice bath time; Recovery time
摘要 ［目的］研究化学转化过程中热激后冰浴时间和复苏时间对转化效率的影响，确定简便快速的转化方法。［方法］ 采用 2 种缓冲 溶液制备感受态，以热激后冰浴时间或复苏时间为变量，研究这 2 个因素与转化效率的关系。［结果］冰浴 2 min，复苏 30 或 40 min 达到 最佳转化效率; 冰浴和复苏时间为 0 min 时仍能获得相当数量的转化子。［结论］ 热激后冰浴和复苏时间对转化效率有一定影响，但不 是决定性因素。因此，在一般性转化试验中可以省略这 2 个步骤以节省时间。 关键词 感受态细胞; 转化效率; 冰浴时间; 复苏时间 中图分类号 S 182 文献标识码 A 文章编号 0517 － 6611( 2011) 09 － 05041 － 02