试论水中粪大肠菌群检测方法及其研究进展

受污染的情况 ， 从 而 为 疾病 预 防提 供 有 效 的 依 据 。 本 文 将 通 过 对 当 前 的 粪 大肠 菌 群 检 测 方 法 进 行 分 析 比较 ， 最 终得 出通 过 纸 片 法 以及 酶 底 物 法
等 方法 ， 对水中粪大肠菌群检 测结果更具备使用价 值。
【 关键词 】 水体 ； 粪大肠 菌群 ； 检测 方法 【 中图分类号 】 Ｒ １ ２ ３ ． １ 【 文献标识码 】 Ａ 【 文章编号 】 ２ ０ ９ ５ — ２ ０ ６ ６ （ ２ ０ １ ５ ） １ ４ — ０ ０ ０ ３ — ０ ２
１ 粪大肠菌群检 测方法的介绍
ｌ ｌ前 已有 的 粪 大 肠 茵 群 的检 测 方 法 包括 多 管 发 酵 法 、 ｆห้องสมุดไป่ตู้快
１ － ３ 快速 纸 片法
通 过 纸 片 上 呈现 的 红 色菌 落 ． 对粪大肠茵群进行判 断， 如 速 纸 片 法 以及 滤膜 法和 酶 底 物 法 、 荧光 原 位 杂 交技 术 和 Ｒ Ｐ Ｒ 技 术等 ， 因 为 荧 光 原位 杂 交技 术和 Ｒ Ｐ Ｒ技 术 需要 消 耗 大 量 的 果 茵落 的 周 围 出现 黄 圈是 因 为 粪 大 肠 茵 群在 对乳 糖 产 酸进 行 仪 器费用， 且 操 作 不 方便 ． 因此 在 实 际的 检 测 中很 少用 这 两 眼 分 解 时 产 生 的 变 色现 象。 检 测方 案 ： 技术． 本 文 将 通 过 对 多管 发 酵 法 、 滤 膜 法 以及 快 速 纸 片 法 和 酶
该 方 法 是 通 过 大肠 菌群 中产 生 的 Ｂ 一 半乳糖苷酶对 Ｐ Ｇ 进 行分解 ， 使 其 培 养 液 呈现 出黄 色 ， 以及 通 过 大肠 埃 希 氏 茵 中 产
养液； 取容量 为 ｌ ｍＬ的 等量 水样 ， 分 别 添加 到 ５支 试 管 中 ． 该 试 管 中舍 有 容 量 为 １ ０ ｍ Ｌ且 浓 度 一 般 的 乳 糖 蛋 白胨 培 养 液 ：
的 条件 下进行 培 养 ． 在 ｌ ８ ￣ ２ ４ ｈ后 对 其 培 养 结果 进 行 观察 ． 纸片 上 出现 紫红 色菌 落或 者 黄 圈 以及 红 晕 等情 况都 为 阳性 ． 然后 通
过 呈现 出阳性 的 纸 张 ． 查 询 其 ＭＰ Ｎ值 。 得 出相应 的结 果Ｐ ｌ 。
１ ． ４ 酶 底物 法
Ｌ ｏ Ｗ ｃ Ａ Ｒ Ｂ ０ Ｎ Ｗｏ Ｒ Ｌ Ｄ ２ ０ １ ５ ， ５
环境保护
试论水 中粪大肠 菌群检测方法及其研究进展
王菊花 （ 重庆市 渝北区 环境监测站， 重庆 渝北４ ０ １ ４ ２ ０ ）
【 摘 要】 当水体 受到粪便 污染后， 容易使肠道病 毒得到肆意扩散与传播 ， 而采用科学 的手段 对粪大肠 菌群进行检 测， 能有效 的体现 出水 体中
强， 是 革 兰 氏 阴性 无 芽胞 杆 菌 中的 一种 。 这 类 茵群 是 当前 国 内 面朝 上 ， 禁止 滤膜 和 培 养 基 之 间 出现 气 泡 ， 通 过 将 倒 置 的 平 板 外 环 境 监 测 部 门对 水 体 污 染程 度 进 行 检 测 的相 关之 一 ．在 卫 放 入 恒 温箱 的 方 式进 行 培 养 ， 此 时 恒 温 箱 的 温度 为 ３ ７ ℃， 培 养 生 学方 面有 一 定 的 意 义 。 通过 对 水 中的 粪 大肠 茵群 及 时进 行 时 间为 半 小 时 ，然后 再 将 其 移 动 到 温 度 为 ４ ４ ℃的 恒 温 箱 内进 检测 ， 能使 相 关人 员能 尽 快 了解 监 测 水 域 的 水 体 的 污 染 状 况 ． 并 对 其 采取 相 应 预 防和 控 制 措施 有 着 重要 影 响［ ” 。 行 培养 ， 培养 的时 间为 １ ８ ～ ２ ４ ｈ ． 在 Ｍ— Ｆ Ｃ 培 养 基 中选 择 生 长 颜 色为 蓝 色或 者 蓝绿 色的 茵 落 开展 计数 工作 ，并 通过 该数 量 对 样 品 中含 粪 大 肠 茵数 进 行 计 算 。
底 物 法 进 行 具 体 介 绍
１ ． １ 多管 发酵 法介 绍
样 品接 种 量 和 多 管发 酵 法 中一 样 。 选 择规 格 为 １ ５ ｅ ｍ ｘ ｌ ０ ｅ ｍ 的 ５张 大纸 片 ，并在 每 张纸 片 中接 种 容 量 为 １ ０ ｍＬ的样 品 ， 然
ｃ ｍｘ ６ ｃ ｍ的 １ ０张 小纸 片进 行 接 种操 作 ．其 中 ５ 该 方法 主 要 是 通 过 观 察 大肠 杆 菌 群 在 繁 殖 过 程 中让 乳 糖 后 选择 规格 为 ５ 张 接种 容 量 为 ｌ ｍ Ｌ的 样 品 ． 其 余 ５张 均接 受稀 释 后 的样 品 ， 稀 发 酵 的 同 时使 乳 糖 蛋 白胨 的 营养 液 变黄 且 产 生 气 泡 的 现 象 为 释 的 比为 １ ： １ ０ ， 容量为 ｌ ｍ Ｌ 。将 这部 分 纸 片放 置在 温度 为 ４ ５ ℃ 依 据。
检测方案 ：
（ １ ） 初 发 酵 试 验 步骤 ： 通 过 无 菌操 作 汲取 容 量 为 １ ０ ｍ Ｌ的 水样 ． 确保 该样 品属 于混 合 摇 匀转 态 ． 将 水 样 分 别 装 入 到 ５支 试 管 中， 该 试 管 中 均含 有 容 量 为 ５ ｍ Ｌ三 倍 浓缩 乳 糖 蛋 白胨 培
粪 大肠 菌 群 属 于 能在 温 度 为 ４ ４ ． ５ ｏ Ｃ ± ０ ． ５ ￣ Ｃ 的 条 件 下 存 活 保 持 干 净 ， 通过 这样 的方 式使 样 品 中的细 菌都 集 中在 滤 膜 上 。 的 大肠 茵群 ，该 类 茵 群 主要 由 埃 希 氏 菌属 和 产 气杆 菌属 以及 （ ２ ） 细 茵 的 培 养 步骤 ： 利 用 镊 子 将 滤 膜 移 动 到 Ｍ— Ｔ Ｅ Ｃ培 枸 缘 酸 菌 属 和 副 大 肠 茵属 构 成 ．具 备 耐 热性 ．水 中存 活 力较 养 基 上 ， 使 用镊 子 时 ， 应 注 意 夹 住 滤 膜 的 边 缘 。 将 滤 膜 的 拦 截