人抗肺炎链球菌抗体(SP Ab)说明书
儿童社区获得性肺炎的临床诊疗介绍
二、社区获得性肺炎的治疗
经验性治疗-怀疑支原体肺炎
➢口服或静脉应用大环内酯类抗菌药物。 ➢8岁以上患儿可选择多西环素或米诺环素。 ➢重症难治性支原体肺炎不建议联合糖肽类、 利奈唑胺及碳青霉烯类抗生素，可酌情联合 或不联合第2、3代头孢菌素。
经验性治疗-怀疑病毒性肺炎
➢怀疑流感病毒性肺炎，尽可能在48h内抗 病毒治疗，不必等待流感检测结果阳性。 ➢怀疑其他病毒性肺炎可根据病情、病程、 有无混合感染等确定是否应用抗菌药物。
前言/PREFACE
病毒：呼吸道合胞病毒、流
感病毒、腺病毒、鼻病毒、博卡 病毒、新型冠状病毒、人禽流感 病毒等。
非典型病原体：肺炎支原
体、肺炎衣原体、沙眼衣原体、 嗜肺军团菌。
1
2
CAP 病原谱
4
3
细菌：肺炎链球菌、金葡菌、
A群链球菌、流感嗜血杆菌、卡 他莫拉菌、大肠埃希菌、肺炎克 雷伯菌、铜绿假单胞菌等。
前言/PREFACE
各病原体引起CAP的特点
➢卡他莫拉菌（MC）：引起的肺炎多见于婴幼儿，一般不引起重症CAP。 ➢大肠埃希菌（E. coli）和肺炎克雷伯菌（KP）：不是CAP常见病原，但可引起重症肺炎，多见于婴儿。 ➢肺炎支原体（MP）：学龄前期和学龄期儿童CAP的常见病原体，近年来在1-3岁婴幼儿CAP也较多见。 ➢肺炎衣原体（CP）：多见于学龄期和青少年，我国肺炎衣原体独立引起的肺炎较少。 ➢沙眼衣原体：多感染6个月尤其是3个月以内的婴儿。 ➢嗜肺军团菌（LP）：不常见，但可能是重症CAP的病原。
➢MSSA首选苯唑西林或氯唑西林，备选第1，2 代头 孢菌素。 ➢ CA-MRSA首选万古霉素，或替考拉宁、利奈唑胺 或联合夫西地酸。
二、社区获得性肺炎的治疗
肺炎链球菌疫苗的研究进展
白， 也取 得 了满 意 的效 果 Ｊ 。
能激发更强的免疫作用 。类似 的还有关 于 ６ Ｂ型荚 膜． Ｉ 合疫 苗 效 果 的 报 道 ， 疫 苗 对 幼 儿 具 有 潜 ，、 ｒ结 该 在的保护作用 。另外 ， ］ 还可利用 白喉类毒 素作 载 体蛋 白， 其保护作用 不仅 增强 ， 而且对 年仅 １ 个 月 ４ 的幼儿也具有免疫保护作用 ， 并能诱发免疫记忆 ｌ。 ３ Ｊ
合 疫 苗的研 制 、 几种 公 认 的蛋 白疫 苗 因子 的研 究进展 和 新 的蛋 白疫 苗 因子 的 筛选 。 同 时还 介 绍 肺
炎链 球 菌疫 苗研 制过 程 中的一 些 新 思路 （ 联合 疫 苗 、 疫 苗 、 Ｎ 活 Ｄ Ａ疫 苗） 它们 是 对肺 炎链 球 菌疫 苗 ，
研 制 方 法 的丰 富。
种形 式 ：
用 多 肽做 载 体 蛋 白 的 优 点 是 它 对 Ｂ细 胞 和 Ｔ 细胞 的高 适应 性 ， 避免 产 生 过 多 的抗 载 体 蛋 白抗 可
（ ） 一 与类 毒素 （ 毒 力 因子 ） 合 或 结
Ｐｗ０ ｓ Ｊ ａ １ 等报道 ， １ 型和 ２Ｆ型荚 膜与破 ｗ 将 ４ ３
维普资讯
肺 炎 链 球 菌 疫 苗 的 研 究 进 展
重 庆 医科 大学 医学检 验 系 罗进 勇 综 述 尹 一研 制 对 于肺 炎链 球 菌 感 染的 防治具 有重要 意 义。 常 见 的荚膜 多糖 疫 苗
存在很大缺陷， 需要 更 为 有效 的 疫 苗来 替代 。本 文 综述 肺 炎链 球 菌 疫 苗研 制 中的 一 些进展 ， 包括 结
维普资讯
二 、 ． ｎ蛋 白质 （ Ｓｐ 多肽 ） 苗 的研 究 疫
人肺炎支原体抗体（MP-Ab）酶联免疫分析试剂盒 说明书
人肺炎支原体抗体（MP-Ab）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人MP-Ab，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人组织匀浆、血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中MP-Ab含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗MP-Ab抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗MP-Ab抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的MP-Ab呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
肺炎链球菌肺炎ppt演示课件
片状阴影
多数3～4周后完全 吸收
. 17
定义
治疗
病因及发病机制 病理及病理生 理
诊断及鉴别诊断
辅助检查
临床表现
并发症
.
18
诊断
典型症状与体征 胸部Ｘ线检查
初步诊断
确 诊
病原菌检测 ——
.
19 19
鉴别诊断
不典型病例需与以下疾病鉴别
•⒈
肺结核
• ① 肺结核史，结核中毒症状 • ② X线显示病变多在肺尖或锁骨 上下， • 密度不均，消散缓慢，且可形成 空洞或肺内播散 • ③ 抗感染治疗无效，抗结核治 疗有效 • ④ 确诊：痰中找到结核杆菌
辅助检查
并发症
.
23
治疗（一）-----抗菌药物的治疗
1．诊断后立即开始抗生素治疗 用药前先行细菌培养 2．首选药物： 青霉素G 青霉素过敏者：红霉素或林可霉素； 重症：头孢菌素一、二代，氟喹诺酮类等 3．疗程：通常为5~7天
24 24
.
我国肺炎链球菌耐药情况
对青霉素耐药 耐药率尚低 对大环内酯类 约10% 耐药程度也较低,但在儿童耐药率高，已发现MIC>32mg/L菌株
否？
）是？
• 病理改变分为哪四个时期？
• 临床表现？ • 影像学改变？ • 治疗原则？
. 29
红霉素耐药率为近50%
大部分同时对林可霉素耐药 单用大环内酯类治疗社区肺炎不妥当
.
25
耐青霉素肺炎链球菌 中度耐药：头孢丙烯、头孢噻肟 、头孢曲 松、氟喹诺酮类； 高度耐药：万古霉素、替考拉宁。
.
26
治疗（二）-----其他治疗
1．营养支持、休息
2．监测神智、生命征及尿量等，注意防止休克 3．保持呼吸道通畅 4、镇痛，祛痰，降温
肺炎链球菌检测讲解
国外感染情况
在美国，每年侵袭性SP感染的发生率为72103/10万儿童，而欧洲为10-24/10万儿童/年。 每年约有600多万例中耳炎由SP引起，占急性 中耳炎30-50％；在发展中国家，每年约有 500万5岁以下儿童死于SP引起的肺炎，10-50 万儿童死于SP引起的脑膜炎。（2005年）
2 配制PBS溶液，并分装小试管，每管约 0.5mL，用亚甲蓝粉配制0.1％的亚甲蓝试剂。
SP血清学分型步骤：
3 用接种环挑取经次代培养后的肺炎链球菌菌 落，放入小试管中，制成菌悬液约0.5麦氏单 位浓度。
4 用接种环挑取约10μL菌悬液放入载玻片上， 再挑取同量的诊断血清（10μl）放入载玻片上， 并与菌悬液搅拌混匀。
本地区耐药情况
对红霉素、四环素、复方新诺明、 克林霉素和氯霉素的多重耐药情况较为 严重，多重耐药发生率为75%，高于北 京、上海、杭州地区。
SP培养呼吸道标本的运输和保存
尽快送检，要求2h内送到；
肺炎链球菌延迟送检极有可能死亡，而且不适合4℃ 保存；
标本处理前检测是否合格。
痰标本合格的标准：
痰标本 鳞状上皮细胞 白血球 细菌种类
合格
<=10/低倍 >=10
1-3种
不合格 >=25/低倍 <=10
>3种
培养特性
初次分离需要CO2，采用CO2培养箱较好； 18-24h形成细小、圆形、湿润、自溶的菌落，
保存 挑选新鲜培养物置于保存管中，-76℃ 保存。
复活 取出保存管自然平衡至室温，接种适合 平板。
SP血清学分型：
肺炎链球菌的血清分型可以为肺炎链球菌疫苗 研究提供可靠依据，也是一种流行病学调查手 段。
肺炎链球菌的临床分布及药敏结果
肺炎链球菌的临床分布及药敏结果王春光目的：了解昆明市儿童医院肺炎链球菌临床分布及药敏情况，为结合临床用药提供依据。
方法：对2013年7月—10月进行微生物病原学培养分离的肺炎链球菌药敏结果进行统计分析。
结果 该院分离的肺炎链球菌主要来自儿童（100%），标本主要来源是痰液（72.72%），其次是血液（22.72%），其他（4.56%）。
肺炎链球菌的耐药率：青霉素86.4%，氨苄西林0%，头孢曲松40.9%，美罗培南54.5%，庆大霉素0%，环丙沙星0%，左旋氧氟沙星0%，氧氟沙星4.5%，克林霉素95.5%，红霉素95.5%，万古霉素0%，氯霉素27.3%，四环素90.9%。
结论 应该积极对儿童预防接种肺炎链球菌疫苗，青霉素对该菌耐药性较高。
肺炎链球菌（Streptococcus Pneumoniae, SP）是儿科社区获得性感染的主要病原菌之一，主要寄生在人类上呼吸道，为条件致病菌，约40% ～ 70% 正常人鼻咽部有本菌存在。
可通过飞沫、分泌物传播,对人的健康构成了一定的威胁,WHO估计，每年大约有160万人死于SP感染，其中5岁以下儿童占43.8％～62.5％，且大多数分布在发展中国家。
更为严重的是,在过去青霉素等抗菌药物是治疗肺炎链球菌感染的有效手段，但随着抗菌药物的大量使用或使用不合理，耐青霉素菌株和多重耐药菌株持续增加，已成为临床抗感染治疗的新难题。
肺炎链球菌疫苗是预防其感染、延缓耐药菌株产生和传播的有效措施。
SP感染严重威胁着儿童的健康，避免抗生素滥用是目前公认的较好的控制SP耐药发生和发展的主要途径。
为了解近年来肺炎链球菌的耐药情况，为临床合理使用抗生素提供依据，特对昆明市儿童医院2013年7月～10月临床分离的非重复的22株肺炎链球菌的耐药性进行回顾性分析，现将结果报道如下。
一、资料与方法（一）一般资料2013年7月—10月分离自昆明市儿童医院患儿的肺炎链球菌感染菌株22株。
其中16株来自痰液，5株来自血培养，1株来自其他。
儿童社区获得性肺炎管理指南(2013年修订)
腺病毒 EB病毒 新型冠状病毒 人禽流感病毒
临床特征
• CAP患儿可有发热、咳嗽、喘呜、呼吸 增快、呼吸困难、胸壁吸气性凹陷、屏 发热 2．呼吸频率(respiratory rate，RR)增快 3．胸壁吸气性凹陷 4．呼吸困难：呼吸困难对肺炎的提示意
实验室检查
• 3. 拟诊细菌性CAP，病情严重，或有并 发症的住院患儿应常规进行血培养，阳 性者经治疗后应复查，但SP菌血症患儿 经治疗临床改善明显者可不复查
• 4. 拟诊病毒性CAP应常规检测流感病毒 和其他呼吸道病毒。
实验室检查
• 5.临床怀疑MP感染者应进行MP检测， 急性期和恢复期双份血清特异性IgG抗 体比较有4倍以上的升高或下降到原来的 1／4是MP感染的确诊依据
理盐水(比例为4—5：1)，总量按基础代 谢正常量的80%计算，补液速度应24 h 匀速，控制在5 ml／(kg·h)以下。 4.拍背、头低位等不必常规采用，定时更 换体位是必要的。
治疗
• 糖皮质激素治疗。 CAP患儿无常规使用糖皮质激素的指征
治疗
• 糖皮质激素治疗。 下列情况可以短疗程(3—5 d)使用糖皮质激素： 喘憋明显伴呼吸道分泌物增多者；中毒症状明 显的重症肺炎，例如合并缺氧中毒性脑病、休 克、脓毒症者，有急性呼吸窘迫综合征者；胸 腔短期有大量渗出者；肺炎高热持续不退伴过 强炎性反应者。
3.呼吸道合胞病毒（RSV）是引起CAP的 首位病毒病原，其次是副流感病毒Ⅰ型、 Ⅱ型、Ⅲ型和流感病毒A型、B型。
病原学
4.肺炎链球菌（SP）是儿童CAP最常见的 细菌病原体，流感嗜血杆菌（HI）、卡 他拉莫菌（MC）仍是儿童CAP常见的病 原，社区相关性耐甲氧西林金黄色葡萄 球菌（CA-MRSA）是CAP的重要病原菌 之一，多发生在年幼儿。
人抗肺炎链球菌抗体(SP AB)说明书
人抗肺炎链球菌抗体（SPAb）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：3ng/L-100ng/L96T使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗肺炎链球菌抗体（SPAb）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗肺炎链球菌抗体（SPAb）水平。
用纯化的人肺炎链球菌抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入抗肺炎链球菌抗体（SPAb），再与HRP标记的肺炎链球菌抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的抗肺炎链球菌抗体（SPAb）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人抗肺炎链球菌抗体（SPAb）浓度。
试剂盒组成12345630倍浓缩洗涤液酶标试剂酶标包被板样品稀释液显色剂A液显色剂B 液20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8条6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1/瓶789101112终止液标准品（160ng/L）标准品稀释液说明书封板膜密封袋6ml×1瓶0.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1份2张1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
80ng/L40ng/L20ng/L10ng/L5ng/L5号标准品4号标准品3号标准品2号标准品1号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、。
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10ng/L
2 号标准品
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
5ng/L
1 号标准品
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl， 然后再加待测样品 10µl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。 7. 温育：操作同 3。 8. 洗涤：操作同 5。 9. 显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 10 分钟. 10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。 操作程序总结：
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照80ng/L
5 号标准品
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
40ng/L
4 号标准品
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
20ng/L
3 号标准品
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人抗肺炎链球菌抗体（SP Ab）
浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液
20ml×1 瓶
7 终止液
6ml×1 瓶
2 酶标试剂
6ml×1 瓶
8 标准品（160ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板
12 孔×8 条
9 标准品稀释液
1.5ml×1 瓶
用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值
人抗肺炎链球菌抗体（SP Ab）酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 3ng/L - 100ng/L
96T
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗肺炎链球菌抗体（SP Ab）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗肺炎链球菌抗体（SP Ab）水平。用纯化的
计算 以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数， 即为样品的实际浓度。 注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
人肺炎链球菌抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入抗肺炎链球菌抗体
（SP Ab），再与 HRP 标记的肺炎链球菌抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过 彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化 成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗肺炎链球菌抗体（SP Ab）呈正相关。用酶标仪在
4 样品稀释液
6ml×1 瓶
10 说明书
1份
5 显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11 封板膜
2张
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。