植物核蛋白和细胞器蛋白提取方法

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植物核蛋白和细胞器蛋白提取方法
产品组成:
产品组成
BBБайду номын сангаас3167-1
BB-3167-2
规格
50 assays
100 assays
提取液 A
25ml
50ml
植物核蛋白提取液 B
10ml
20ml
细胞器蛋白提取液 C
10ml
20ml
蛋白酶抑制剂混合物
250ul
500ul
说明书
一份
一份
注: ● 蛋白提取液: 含多种有效成分,可以充分释放蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。 ● 蛋白酶抑制剂混合物:包含6种独立的蛋白酶抑制剂。
1. 提取液制备:每 500ul 预冷的蛋白提取液 A 中加入 2ul 蛋白酶抑制剂;每 200ul 蛋白提取液 B 和 C 中分别加入 1ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的 200mg 植物组织样本剪碎,采用以下一种方 法处理: i. 加入 500ul 提取液 A 后用匀浆机/匀浆器匀浆。 ii. 置于研钵中用液氮研磨,研磨后加入 500μl 冷的提取液 A。 iii. 加入 500ul 提取液 A 直接置冰上研磨。
注意:
1、 蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。
2、 如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
储存条件: 蛋白提取液 2-8℃保存;蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期: 一年。
注意事项: ● 本试剂盒仅供科学研究使用。 ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管 底,避免开盖时试剂损失。 ● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。 ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清 洗并彻底清除残留清洁剂。 ● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品简介: 贝博植物核蛋白和细胞器蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种植物细胞和各
种实体植物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白和其它细胞器蛋白。提取过程 简单方便,可在 1 小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污 染。提取的蛋白可用于 Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉 淀、酶活性测定等蛋白研究。
产品特点: 1、 使用方便。 2、 将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。 3、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
4、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。 5、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包
含 6 种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。 该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。
产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3105 BB-3702
产品 磷酸化蛋白富集试剂盒 膜蛋白提取试剂盒 BCA 蛋白定量试剂盒 蛋白 Marker 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 磷酸酶抑制剂混合物 SDS-PAGE 上样 Buffer
3. 高速涡旋振荡 5 秒,然后在 4℃,100×g 力条件下离心 1 分钟。 4. 收集上清,弃沉淀。 5. 将上清在 4℃,600×g 力条件下离心 1 分钟。 6. 收集沉淀,将上清移入另一干净的离心管。 7. 在沉淀中加入 100-200μl 冷的提取液 B,高速涡旋振荡 15 秒。 8. 置冰上 40 分钟,每隔 10 分钟高速涡旋振荡 15 秒。 9. 在 4℃,16000×g 条件下离心 10 分钟。 10. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到核蛋白。
注:
① 建议用 BCA 法进行蛋白定量。
② 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
相关产品:
产品 总蛋白提取试剂盒 核蛋白提取试剂盒 Bradford 蛋白定量试剂盒 ECL 化学发光检测试剂盒 细胞蛋白提取试剂盒 组织蛋白提取试剂盒 细菌蛋白提取试剂盒 酵母蛋白提取试剂盒 磷酸化蛋白提取试剂盒 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒
11. 将步骤 6 中的上清在 4℃,12000×g 条件下离心 10 分钟。 12. 弃上清,收集沉淀。 13. 在沉淀中加入 100-200μl 冷的提取液 C,高速涡旋振荡 15 秒。 14. 置冰上 40 分钟,每隔 10 分钟高速涡旋振荡 15 秒。 15. 在 4℃,16000×g 条件下离心 10 分钟。 16. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到细胞器蛋白。 17. 将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验②。
产品号 BB-3108 BB-3103 BB-3401 BB-3721 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3311 BB-3703
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头
● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器
● 冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项: 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
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