LC-20AT高效液相色谱仪验证方案

类别：设备验证方案部门：生产部LC-20AT高效液相色谱仪验证方案
方案号：VF-01-U131-2011A01-002
验证时间： 2011年11月XX日2011年11月XX日验证地点：无锡市凯利药业多肽药车间
无锡市凯利药业有限公司
目录
1. 参与验证的相关部门及其职责 (1)
1.1验证小组成员及职责 (1)
1.2验证方案起草 (1)
1.3验证方案批准 (1)
2. 验证目的 (2)
3. 验证依据判断标准： (2)
3.1验证依据 (2)
3.2验证评判标准 (2)
4.验证内容 (3)
4.1安装环境的确认 (3)
4.2运行确认 (3)
4.3性能确认 (4)
4.4 柱温箱温度设定值误差ΔTS和控温稳定性TC的检定 (6)
4.5 紫外检测器 (7)
4.6整机性能 (8)
5.验证结果及分析评价 (9)
6.再验证要求 (10)
6.1再验证周期 (10)
6.2 再验证内容 (10)
本公司所用的LC-20AT高效液相色谱仪是由工作站软件（N2000）、二元泵(LC-20AT)、手动进样器（20微升定量环）、控制器(CBM-20A)、柱温箱(IN-150)、紫外检测器（SPD-20A T）以及相关管路等组成。

主要用于本公司在线氧化和纯化检测。

1. 参与验证的相关部门及其职责
1.1验证小组成员及职责
1.2验证方案起草
1.3验证方案批准
2. 验证目的
确认LC-20AT高效液相色谱仪的运行环境、性能等各项指标符合器所设计的性能指标。

确保使用该仪器的所检测数据真实可靠，为日常检验提供准确的检测结果。

3. 验证依据判断标准：
3.1验证依据
3.1.1《药品GMP指南》2010年版
3.1.2《LC-20A T型高效液相色谱仪标准操作规程》
3.1.3《LC-20A T型高效液相色谱仪安装使用说明》
3.1.4《中国药典》2010年版二部附录
3.2验证评判标准
3.2.1安装环境确认判断标准
确认安装符合《LC-20A T型高效液相色谱仪安装使用说明》说明书要求。

3.2.2运行确认判断标准
安装确认认可后，在不使用试样的条件下，确认该仪器运行正常。

3.2.3性能确认判断标准
使用样品检测符合《中国药典》2010年版二部附录要求和LC-20AT型高效液相色谱仪性能指标。

4.验证内容
4.1安装环境的确认
单项结论：_________________________________________________________
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日4.2运行确认：
严格按《LC-210AT高效液相色谱仪标准操作规程》进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表中。

单项结论：
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日4.3性能确认
4.3.1 泵性能确认
1)流量准确性确认
泵流量设定值误差S S、流量稳定性误差S R
启动仪器，按上表的要求设定流量，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1）、（2）计算S S和S
R，结果记录在下表中；
注：S s=(—F
m
-F s)/F s×100% 式（1）
S R=(F max-F min)/ —F
m
×100% 式（2）
式中：Fm ——Fm=(W2-W1)/(ρ•t)，流量实测值，ml/min；
W2——容量瓶+流动相的质量，g；W1——容量瓶的质量，g；
ρ——试验温度下流动相的密度，g/mL；t——收集流动相的时间，min；
—
F m——同一组测量的算术平均值，mL/min；FS——流量设定值，mL/min；
Fmax ——同一组测量中流量最大值，mL/min；Fmin ——同一组测量中流量最小值，ml/min。

单项结论：
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日2)压力范围
可执行标准：±0.2MPa设定值
测试方法：在进样阀的出口接一个两通，再将两通的另外一端用OD1.6的盲管封住。

启动泵，使压力升至所设定的压力，观察仪器是否自动停泵。

单项结论：
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日4.4 柱温箱温度设定值误差ΔT S和控温稳定性T C的检定
将温度计（已校验，分度值为0.1℃）放置在柱温箱内，选择35℃、40℃和45℃进行检定，按仪器说明书操作，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共计7次，求出平均值，平均值与设定值之差为ΔT S，7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性T C，结果记录在下表，柱温箱温度设定值误差ΔT S≤±3℃，T C≤±1℃；
单项结论：
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日4.5 紫外检测器
4.5.1 基线噪音和基线漂移
选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，二极管阵列检测器的波长设定为254nm，待仪器稳定后，记录基线30min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰—峰高对应的记录仪标度，计算基线噪音，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示，基线噪音应不超过5×10-4；
注：N d=KB
式中：K：衰减倍数；B：测得的基线峰—峰高对应的记录仪标度
基线漂移在1h内偏离原点的值为（AU/h），应不超过5×10-3AU/h。

单项结论：
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日4.5.2最小检测浓度
采用依替巴肽分析色谱条件，进样量20µl ；取适量的依替巴肽，用甲醇稀释制成1×10-6g/ml 的溶液，连续进样6次，记录依替巴肽/甲醇溶液的色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰—峰高，按下式来计算最小检测浓度（C L ），应不超过1×10-6g/ml ，结果记录在下表；
注：C
L =
2N d ×c×V H×20
式中：N d ：基线噪声峰—峰高；c ：标准溶液浓度；H ：标准溶液的色谱峰高；V ：进样体积
单项结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
4.6整机性能
在4.4.2所记录的色谱图中，按下式计算Rsd 值，Rsd ≤2.0%，并将结果记录在下表中；
12n Rsd=
M
n M A
1)
(2
1
--∑
式中：M ：峰面积平均数；A ：峰面积；n ：测量次数
单项结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
5.验证结果及分析评价
结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
6.再验证要求
6.1再验证周期
6.1.1 设备大修后需再校验。

6.1.2 由于检修、调整、迁移或其它原因，可能对设备的安装情况、主要技术参数和功能有影响时，应进行再验证。

6.1.3 高效液相色谱仪的验证周期为一年，更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证。

6.2 再验证内容
进行设备的再校验，可针对设备性能中部分必须的项目进行再验证，而不一定要进行全面的验证。